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Reduca(Biologa).SerieParasitologa.1(1):2837,2008.

ISSN:19893620

ManualdelaboratoriodeParasitologa 4.Amebasparsitasy/ocomensales

IgnacioGarcaMs.BenitoMuozArajo.AmayaAguirreInchaurbe. IgnacioPoloRoldn.AnaGarcaMoreno.PabloRefoyoRomn.

DepartamentodeZoologayAntropologaFsica.FacultaddeCienciasBiolgicas. UniversidadComplutensedeMadrid.c/JosAntonioNovais,2.28040Madrid. igarmas@bio.ucm.estitomu@bio.ucm.esaaguirre@bio.ucm.es ipolorol@bio.ucm.esagmoreno@bio.ucm.espablorefoyo@teleline.es

Resumen:Enesteartculoserevisanlosconceptosbsicossobrelasamebasparsitaso comensales. Se describen las caractersticas morfolgicas y el ciclo vital, as como los caracteresempleadosparasudiagnosis.Seaportandescripcionesdelastresespeciescon mayor inters biosanitario: Entamoeba histolytica Schaudinn,1903, Entamoeba coli (Grassi,1879)CasagrandiyBarbagallo,1895eIodamoebabutschlii(vonProwazek,1911) Dobell,1911. Palabras clave: Amebas parsitas. Amebas comensales. Sarcomastigforos. Sarcodinos. Rhizopoda.Lobosea.Amoebida.Entamoeba.Iodamoeba. INTRODUCCIN Las amebas son miembros del tronco Sarcomastigophora (Sarcomastigforos), subtronco Sarcodina (Sarcodinos). Todas las formas parsitas se encuentran agrupadas enlasuperclaseRhizopoda,claseLobosea,ordenAmoebida. Elhombrepuedeserinfectadoporlassiguientesespecies:Entamoebagingivalis,E. dispar, E. histolytica, E. coli, E. hartmanni, E. polecki, Endolimax nana e Iodamoeba butschlii. La mayora de las amebas que viven en el tracto digestivo de los humanos se comportancomomeroscomensales;sloE.histolyticapuedeproduciralteracionesms omenosseveras,afeccinconocidaconeltrminodeamebiasis. Algunasespeciesdevidalibre,comoAcanthamoebaculbertsoni(ordenAmoebida) y Naegleria fowleri (orden Schizopyrenida) entre otras, pueden, ocasionalmente, parasitaralhombre(amebasparsitasfacultativasuoportunistas)pudindolecausarla denominadameningoencefalitisamebianaprimaria. 28

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ISSN:19893620 MORFOLOGIAYCICLOVITALDELASAMEBASPARASITASYCOMENSALES Lasamebasparsitasycomensalesvivenenelintestinogruesodesuhospedadory pueden adquirir durante su ciclo vital dos formas bsicas (Fig. 1): trofozoto (forma vegetativa,activaymvil)yquiste(formaderesistencia).Excepcionalmente,E.gingivalis viveenlacavidadbucalysloposeelaformatrofozoto.

Figura1.Fasesdelciclodeunaamebaparsitaocomensal.

Eltrofozotoviveenlaluzdelintestinogruesodelhospedador,dondesealimenta, salvo en el caso particular de las formas patgenas de E. histolytica, de restos de alimentos,bacterias,etc.ysemultiplicacontinuamenteporfisinbinaria.Elcitoplasma del trofozoto est diferenciado en dos partes: una externa e hialina, denominada ectoplasma,yunainternagranularoendoplasma.Lapelculadeltrofozotoselimitaal plasmalema (membrana plasmtica) y el desplazamiento, as como la captura de las partculasdealimento,serealizamediantelaemisindepseudpodos.Elncleo,nicoy enposicinvariable,sloesvisible,porlogeneral,trasunatincinadecuada;cuandose tie con hematoxilina frrica se puede apreciar una delgada pared nuclear. Dentro del ncleo, en posicin central o excntrica, se encuentra una masa, similar al nuclolo, denominadaendosomaocariosoma(trminopreferidoporlosProtozologos).Adosados a la cara interna de la pared nuclear se encuentran pequeas masas o grumos de cromatina (cromatina perifrica), cuyo nmero, forma y dimensiones varan segn las especies. Cuando la humedad del contenido intestinal disminuye en los tramos finales del intestino,eltrofozotoiniciasutransformacinenquiste.Antesdeconvertirseenquiste, el trofozoto expulsa las vacuolas con alimentos y se redondea, llamndose, ahora, prequiste.Posteriormente,elprequisteserodeadeunaenvueltaqustica,recibiendoel nombre de quiste inmaduro; ste suele contener vacuolas de glucgeno (visibles en fresco al ser teidas con solucin de yodo) y elementos en forma de bastn llamados barrascromatoidalesocromatoides. 29

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ISSN:19893620 Tras sucesivas divisiones del ncleo se origina, a los 610 das despus de la infeccin,elllamadoquistemaduroquesuelesermultinucleado;elnmerodencleos delquistedependedelaespeciedelaameba.Losncleosdelquistesonidnticosalos del trofozoto en cuanto a la disposicin del endosoma y cromatina perifrica, pero de menortamao.Enlosquistesmadurosavecesnohaycuerposcromatoidales. Tanto los trofozotos como los quistes salen al exterior con las heces del hospedador. Los trofozotos son muy lbiles en el exterior y mueren rpidamente; los quistes, en cambio, son muy resistentes y constituyen la forma infectante, salvo en el casodeE.gingivalisquesloposeetrofozoto. Cuandounnuevoindividuoingiere,consucomidaobebida,quistesmaduros,enel intestinoseproduceelexquistamiento,surgiendounaamebametaqustica;estanueva ameba,queposeeelmismonmerodencleosqueelquistedelqueprocede,sedivide seguidamente para dar lugar a tantos trofozotos como ncleos tiene la ameba metaqustica,inicindoseunnuevociclo. Identificacindelasamebasparsitasycomensales Cuando se trata de identificar una ameba en frotis fecales teidos, los caracteres morfolgicosatenerencuentasonlossiguientes: Trofozoto dimensiones. ncleos:endosomaycromatinaperifrica(quepuedeonoexistir). vacuolaseinclusiones. quiste dimetroyformadelquiste. ncleos:nmero,endosomaycromatinaperifrica. presenciaoausenciadecuerposcromatoidales. AMEBASDEINTERSBIOSANITARIO EntamoebahistolyticaSchaudinn,1903 Entamoeba histolytica es una ameba cosmopolita que parasita al 10% de la humanidad, en todas las regiones del mundo, incluidas las polares. La prevalencia est relacionadaconlascondicionessanitariasyprovisindeaguapotable. Estaamebaeselagentecausaldelaamebiasis,amebosisodisenteraamebianaen el hombre y otros mamferos, como primates, perros, gatos y cerdos. Los estudios realizados en la ltima dcada sobre la biologa y comportamiento de E. histolytica permiten concluir que existen varias cepas de esta especie, que si bien son morfolgicamenteindistinguiblesentres,difierenensupatogenicidad. 30

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ISSN:19893620 Cada ao mueren decenas de miles de seres humanos a consecuencia de las lesionesintestinalesyextraintestinalesproducidasporlaameba. Entamoebacoli(Grassi,1879)CasagrandiyBarbagallo,1895 Es una ameba comensal, cuya prevalencia puede llegar al 45%. Se trata probablemente del comensal ms comn del intestino grueso humano. Se alimenta de bacterias, levaduras y restos de alimentos que se encuentran en la luz del intestino grueso.DadoquepuedeconfundirseconE.histolytica,debeextremarseelcuidadoenel diagnstico. Iodamoebabutschlii(vonProwazek,1911)Dobell,1911 Es una ameba cosmopolita y comensal de elevada prevalencia. Se trata de un organismodepequeasdimensiones.Elquisteesfcilmenteidentificableenlasmuestras fecalesfrescasteidasconsolucinyodada,debidoalapresenciadeunagranvacuolade glucgeno(deahelnombredeIodamoeba)quesetiedemarrn. TRABAJODELABORATORIO La finalidad de esta prctica es adquirir los conocimientos necesarios para identificar las diferentes fases de las amebas parsitas y/o comensales obligatorias que afectan a los seres humanos y a otros primates, mediante el estudio microscpico de frotisdehecesteidosconhematoxilinafrrica.Latincinconhematoxilinafrricaesla preferida en el diagnstico de las infecciones con amebas, debido a que tie bien las estructurasconcarcterdiagnstico(ncleos,cromatinaperifrica,barrascromatoidales, etc.). Seestudiarnfrotisdeheces,conteniendotrofozotosyquistes,detresespecies: Entamoebahistolytica,Entamoebacoli,Iodamoebabutschlii. Adiferenciadelosfrotissanguneosqueslopuedencontenerclulassanguneas y parsitos, y su estudio es relativamente sencillo, los frotis fecales contienen todo aquello que surge con las heces: restos de alimentos, bacterias, partculas ingeridas no digeribles y parsitos de todo tipo. Por ello, el estudio de un frotis fecal conlleva una ciertadificultad,pueshayquediscernirentrelosparsitosquesebuscanytodotipode partculasyelementos,avecessorprendentementeparecidosalosparsitos(artefactosy pseudoparsitos).Debetenerseencuenta,pues,quelaspreparacionesrotuladasconel nombre de una especie determinada pueden contener tambin otras especies de amebas,inclusoflageladosyhuevosdehelmintos. Talycomo sehaindicadoenladescripcin del ciclo vital,enlas heces diarreicas pueden existir trofozotos y quistes, pero en las heces con forma (secas) slo surgen quistes(lostrofozotosslosobrevivenenheceslquidas).Porestarazn,yparamayor facilidad, el alumno dispondr de dos tipos de preparaciones, unas rotuladas como 31

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ISSN:19893620 trofozotos(quecontienentantotrofozotoscomoquistes)yotrasrotuladascomoquistes (queslocontendrnquistes).Encadapreparacinsetratardelocalizareidentificarlo queseindicaenlaetiqueta. Entamoebahistolytica a)Caractersticasdeltrofozoto(Fig.2) Formaydimensiones:suelemostrarseredondeadouoval;sudimetroolongitudes de2030m. Citoplasma: finamente granular, pudindose diferenciar el ectoplasma del endoplasma; las vacuolas, cuando existen, son por lo general pequeas y pueden contenerbacterias. Ncleos: nmero:uno. cromatinaperifrica:dispuestaengrnulosfinos,porlogeneraluniformemente distribuidosydetamaoregular. endosoma: pequeo y constituido por una sola masa; normalmente central, peroavecesexcntrico.

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Figura 2. Fotografa de un trofozoto de E. histolytica. Vase la Fig .1 para la interpretacin de las imgenes.

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ISSN:19893620 b)Caractersticasdelquiste(Fig.3) Formaydimensiones:generalmenteesfricoyconundimetrode1215m. Citoplasma: cuerpos cromatoidales: generalmente presentes; barras alargadas con extremosromos,redondeadosylisos. glucgeno:enlosquistesmadurosnoesapreciable,peroenlosinmadurosse concentraenvacuolas. Ncleo: nmero:losquistesmaduros poseen 4ncleos,peroenlosinmaduros puede haber1o2. endosoma:pequeoycompacto;generalmentecentral. cromatinaperifrica:dispuestaengrnulosfinosregularmentedistribuidos.

Figura.3.EsquemasyfotografasdequistesdeE.histolytica.VaselaFig.1paralainterpretacindelas imgenes.

Entamoebacoli a)Caractersticasdeltrofozoto(Fig.4) Formaydimensiones:semuestrageneralmenteredondeado,midiendo1550m. Citoplasma: groseramente granular, a menudo vacuolado; apenas se diferencia el endoplasmadelectoplasma. Ncleos: nmero:uno. endosoma:grandeyavecesnocompacto;generalmenteexcntrico. cromatina perifrica: dispuesta en grnulos gruesos, irregulares en talla y distribucin. 33

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Figura4.Fotografa(izquierda)yesquema(derecha)deuntrofozotodeE.coli.VaselaFig.1parala interpretacindelasimgenes.

b)Caractersticasdelquiste(Fig.5) Formaydimensiones:generalmenteesfrico,avecesoval,yconundimetrode15 25m. Citoplasma: cuerposcromatoidales:puedenestarpresentes,peroconmenorfrecuenciaque en E. histolytica. generalmente con aspecto de astillas, con los extremos puntiagudosymuyrefringentes(parecenestarfueradelquiste). glucgeno: en los quistes maduros puede estar difuso o faltar, pero en los inmadurosestincluidoenunagranvacuola. Ncleos: nmero:losquistesmadurosposeen8ncleos;losquistesinmadurostienen1o msncleos. endosoma:grande,compactoygeneralmenteexcntrico. cromatinaperifrica:dispuestaengrnulos,irregularesentallaydisposicin.

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Figura 5. Fotografas de quistes de E. coli con diferente grado de evolucin. Vase la Fig. 1 para la interpretacindelasimgenes.

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ISSN:19893620 Iodamoebabutschlii a)Caractersticasdeltrofozoto(Fig.6) Forma y dimensiones: redondeado u oval en preparaciones fijadas; la longitud habitualesde1215m. Citoplasma: groseramente granular y vacuolado; con inclusiones de bacterias, levadurasyotrosmateriales. Ncleos: nmero:uno. endosoma:grande,generalmentecentralizado. cromatinaperifrica:nohay.

Figura6.Fotografa(izquierda)yesquema(derecha)deuntrofozotodeI.butschlii.

b)Caractersticasdelquiste(Fig.7) Formaydimensiones:generalmenteovoide;mide,habitualmente,1012m. Citoplasma: cuerposcromatoidales:noseobservan. glucgeno:sepresentaenunagranvacuola,muypatente. Ncleos: nmero:uno,tantoenlosquistesmaduroscomoenlosinmaduros. endosoma:grandeygeneralmenteexcntrico. cromatinaperifrica:nohay.

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Figura 7. Fotografa (izquierda) y esquema (derecha) de un quiste de I. butschlii, con la vacuola de glucgenocaracterstica.

BIBLIOGRAFADECONSULTA

Ash,L.R.yOriel,T.C.1980.AtlasofHumanParasitology.ASCPPress,Chicago. Ash, L. R. y Oriel, T. C. 1987. Parasites: A Guide to Laboratory Procedures and Identification.ASCPPress,Chicago. Peters, W. y Gilles, H. M. 1989. A Colour Atlas of Tropical Medicine and Parasitology. WolfeMedicalPublications,London. RECURSOSELECTRNICOS MuseovirtualdeParasitologa.FacultaddeCc.Biolgicas.UCM.Madrid,Espaa. http://www.ucm.es/centros/webs/fbio/index.php?tp=Museo%20Virtual%20de%20P arasitologa&a=servicios&d=16028.php

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