Professional Documents
Culture Documents
Populaiile limfocitare i markerii lor de suprafa din totalul celulelor seriei albe, limfocitele reprezint cam 25-40%, ceea ce corespunde unei valori absolute de 1500-4000 de limfocite pe mm 3 din punct de vedere morfologic, se mpart n: 1. Limfocite mici aproximativ 80-85% din totalul limfocitelor periferice diametru 6-9 m raport nucleu/citoplasma supraunitar subvarieti: a. limfocite T b. limfocite B 2. Limfocite mari 10-15% din totalul limfocitelor periferice diametru 10-16m prezint ciplasm foarte abundent ce nconjoar de jur mprejur nucleul n citoplasm sunt prezente din abunden granulaii azurofile uor de evideniat n microscopia optic se numesc LGL (Large Granular Limphocytes) ea include celulele NK implicate n imunitatea natural i RIC 1. Limfocitele mici difereneierea LT/LB NU poate fi fcut niciodat pe baza unor criterii morfologice diferene din punct de vedere electronomicroscopic diferenierea se face rapid i eficient pe baza unui test funcional: testul Rozetrii (foarte vechi, const n punerea n contact a limfocitelor raportate anterior prin tehnici de gradient cu eritrocite de oaie; singurele care angajeaz legturi cu acestea i formeaz conglomerate celulare sunt LT) LB NU sunt celule rozetante LT prezint pe suprafa lor un receptor tipic de adeziune intercelular (CD2). El NU exist pe suprafaa LB LT NU reprezint o populaie celular omogen, ci este foarte heterogen din punct de vedere funcional avem 4 subvarieti de LT: a. TH b. TC c. TS d. TCS (contrasupresoare) diferenierea dintre ele NU poate fi fcut pe baza criteriilor morfologice i nici pe baza testului rozetrii pentru c toate rozeteaz la fel diferenierea dintre ele se face prin evidenierea markerilor de suprafa pe TH se afl un marker diferit de TC, TS, TCS markerii pot fi identificai cu ajutorul unei tehnici flaucitometrie (citometrie n flux). Ea se bazeaz pe utilizarea Ac monoclonali (artificiali, cu nalt specificitate, marcai fluorescent i recunosc tipic NUMAI 1 marker) conteaz de fapt merkerii de suprafa, NU forma limfocitelor
Limfocitele T
Caractere generale
reprezint populaia limfocitar majoritar prezent n sngele periferic (68-80% din totalul limfocitelor periferice) sunt celule cu durat de via lung sau foarte lung (ani, yeci de ani, ct o via de om) celule intens recirculante (ele patruleaz continuu n ntreg organismul n cutarea Ag pentru care sunt programate genetic) I. Receptorii de suprafa ai LT expun pe suprafaa lor 3 categorii de receptori: 1. Receptori de recunoatere Ag a. Complexul TCR-CD3 rol n recunoaterea Ag (epitopilor) b. Coreceptori: CD4 sau CD8 (recunoaterea moleculelor prezentatoare ale epitopilor CD4 MHC II CD8 MHC I Din a. i b. => recunosc simultan att Ag prezentat ct i moleculele prezentatoare ale acestora = recunoaterea Ag asociativ (reprezint i principala cale de activare metabolic a LT) 2. Receptori cu rol accesor n activarea LT: o CD28 o CD45 3. Receptori de adeziune intercelular permite stabilirea de contacte LT alte tipuri de celule o CD2 o LFA1 (CD11A/CD18) CD = titulatura de catalog a receptorilor prezeni la suprafaa limfocitelor. CD urmat de un numr = un singur receptor prezent la suprafaa LT. s-a recurs la aceast titulatur, pentru a se nlocui titulaturile mai vechi, descriptive. Unele se mai pstreaz (LFA1 antigen asociat funciei leucocitare; VLA antigen cu apariie foarte trzie, el apare dupa ce LT au fost activate, deci apar foarte trziu; ICAM molecule de adeziune intercelulara) CD = cluster of designation = class du differention = clas de difereniere 1. Receptori de recunoatere Ag Caracteristicile recunoaterii Ag realizat de LT i. LT recunosc Ag NUMAI dup structura lor primar (secvena de aa). Recunosc n mod tipic doar Ag hidrofili ii. LT recunosc NUMAI Ag prezentat pe suprafaa APC n complex cu molec MHC (LT, spre deosebire de LB NU recunosc niciodat Ag solubile) iii. Recunoaterea realizat de LT e prin definiie o recunoatere asociativ a. Complexul TCR-CD3 pe suprafaa LT aflate n repaus exist n jur de 60000 de asemenea complexe TCR (receptorul celulei T pentru Ag) heterodimer constituit din 2 lanuri transmembranare ( i ) orientate cu capetele N-terminale afar i cele C-terminale n interiorul LT lanurile sunt elaborate dup codul unor gene diferite: Cz 14, Cz 7 n segmentul extracelular i se asociaz ntre ele prin puni disulfurice membrana LT strbtut de lanuri separ 3 segmente n cele 2 lanuri a. segmentul extracelular lanurile NU sunt liniare, ci adopt o configuraie imunoglobin-like (sunt organizate n bucle sau domenii situate simetric) pe cele 2 lanuri exist cte 2 domenii, fiind de principiu formate din 100-110 aa domeniile N-terminale sunt constituite din secvene de aa variabile/hipervariabile. Ele se noteaz cu V i V V i V se asociaz ntre ele i constituie o cavitate de dimensiuni mici = situs combinativ pentru Ag (SCAg) celelalte 2 domenii sunt constituite din secvene de aa constante ca structur pe majoritatea limfocitelor. Se noteaz cu C i C dintre cele 2 perechi de domenii, cele mai importante din punct de vedere funcional sunt cele variabile. Ele formeaz SCAg i pentru aceasta ele sunt responsabile de recunoaterea Ag dei V i V sunt implicate n recunoaterea Ag, ele NU angajeaz niciodat contacte cu Ag prin ntreaga lor secven de aa, ci realizeaz contacte cu Ag care sunt punctiforme, realizate prin intermediul unor mici secvene de aa (8-15) rezultate n urma plicaturrii V i V. Aceste segmente sunt situate n vrful plicaturilor i protruzioneaz adnc n cavitate, realiznd legturi cu Ag prin potrivire de form sau complementaritate => ele se numesc CDR (regiuni determinante ale complementaritii) domeniile variabile V, V circular prin plicaturare plicaturile exist prin intermediul celor 3 puni disulfurice intradomeniu secvenele din vrful plicaturilor sunt doar ele responsabile de contactul cu Ag (8-15 aa). Ele se numesc CDR pe fiecare domeniu exist 3 CDR. Ele constituie paratopul restul secvenelor = zona scheletal (FR framework regions) recunoaterea Ag se face prin stabilirea de contacte difereniate ntre CDR i complexul MHC epitop LT recunosc doar Ag care sunt prezentate pe suprafaa APC APC expun prin moleculele MHC un epitop CDR1 CDR2 angajeaz legturi NUMAI cu moleculele MHC, recunoscnd din acestea doar domeniile polimorfe (MHC I 1,2, MHC II 1, 1) CDR3 sunt singurele care asigur legturi cu epitopul prezentat
Cei 4 receptori (TCR, CD3, CD4, CD8) realizeaz recunoaterea Ag asociativ. recunoaterea e dublu asociativ: o recunoatere Ag asociativ intrareceptorial (realizat de TCR) o recunoatere Ag asociativ interreceptorial (recunosc moleculele prezentatoare) stabilirea unui numr mare de contacte intre moleculele prezentatoare i cele prezentate LT leg. cu MHC (5) prin TCR i CD4/CD8 cu Epi (2) prin TCR DAR ele se realizeaz DOAR cnd e recunoscut epitopul moleculele MHC de regul sunt molecule prezentate NUMAI pe membranele celulare => LT recunosc NUMAI Ag membranare Ag membranare pot fi de 3 tipuri: 1) Ag prezentate 2) Ag constitutive 3) Ag ataate LT NU recunosc niciodat Ag ataate (Ac) i Ag constitutive (Ac/NK) LT recunosc DOAR Ag prezentate n complex cu MHC recunoaterea Ag de LT este o recunoatere MHC restrictiv
2.
-
Receptori cu rol accesor n activarea LT CD28 glicoprotein transmembranar homodimeric GM 45kda distribuie: prezent NUMAI pe suprafaa TH/TC i niciodat pe TS segmentul extracelular: cte o bucl pe domeniu segmentul intracitoplasmatic: lung sau foarte lung funcie: favorizeaz net cooperarea dintre TH/TC i APC n timpul cooperrii se stabilesc legturi ntre CD28 i un contraligand (CD80) prezent NUMAI pe suprafaa APC profesionale => semnale activatoare care se trimit ctre profunzime, ele contnd enorm pentru maturarea funcional a TH/TC TH produce diverse tipuri de IL TC produce CK CD45 glicoprotein transmembranar GM 100-200kda pe suprafaa tuturor celulelor de origine hematogen (excepie eritrocitele i trombocitele) pe suprafaa LT e extrem de bine reprezentat (ocup 10% din suprafaa lor membranar) NU exist ca receptor izolat El se ataeaz prin puni disulfurice la lanul al CD3 => CD45 e activat ntotdeauna ca urmare a stimulrii Ag Funcie enzimatic, e o fosfataz (PTP) care mpreun cu PTK formeaz un cuplu funcional extrem de important
3. Receptorii de adeziune intercelular foarte importani printre altele n cooperarea prin contact ntre LT i APC = cooperare cognitiv CD2 receptor panT (pe toate LT) i pe suprafaa celulelor NK
LT TH TC TS
CD3 + + +
CD4 + -
CD8 + +
CD28 + + -