ESCUELA POLITCNICA DEL EJRCITO LABORATORIO DE BIOLOGA CELULAR Nombre: Yendrek Velasquez NRC: 1235 1.

Ttulo: Identificacin microscpica de clulas sanguneas a partir de muestras tomadas de la puncin del dedo pulgar, utilizando tincin de Giemsa y Wright 2. Objetivo: Observar e identificar microscpicamente los elementos que forman la sangre de la sangre (leucocitos, eritrocitos y plaquetas). 3. Hiptesis: se puede observar las clulas formes de la sangre por medio de tincin simple con azul de metileno distinguiendo as las diferentes caractersticas que presentan estos.

4. Introduccin:

SEGN AUDERSIK (1996) La sangre es un tejido vivo, que se presenta a manera de un lquido viscoso que circula por todo el cuerpo humano a travs de un circuito cerrado. Constituye un 7% del peso total del cuerpo y est constituida por dos fases, una lquida y otra slida. La parte lquida se denomina plasma, y est constituida por agua en un 90%y por sales minerales, lpidos y protenas en un 10%. La parte slida se denomina, masa corpuscular o elementos figurados y est constituido por hemates, leucocitos y plaquetas. El plasma constituye aproximadamente un 56% del volumen total de sangre. La sangre contiene pigmentos como la hemoglobina, oxihemoglobina y carboxihemoglobina fundamentalmente. Una persona adulta tiene aproximadamente 5 litros de sangre. Las clulas sanguneas se generan mediante un proceso denominado hematopoyesis, siendo la mdula sea el rgano quien contiene clulas madres que se diferencian en distintos precursores para los distintos elementos figurados. Elementos formes de la sangre: Hemates: Tambin llamados glbulos rojos o eritrocitos. Son clulas anucleadas, de coloracin roja debido a la presencia de hemoglobina, adems presentan una forma de discos circulares bicncavos. Su dimetro horizontal oscila entre 7 y 8 micras. Los eritrocitos tienen la funcin de transportar oxgeno a los tejidos y rganos. Glbulos blancos: tambin denominados leucocitos. Son clulas nucleadas, incoloras, la mayora de los leucocitos que circulan por la sangre perifrica son clulas adultas que han alcanzado un considerable grado de madurez, el cual se evidencia por su menor tamao en relacin a sus precursores albergados en los centros hematopoyticos.

Al formar parte del sistema inmunolgico, tienen la funcin de combatir a los agentes infecciosos. Los leucocitos son de dos tipos principales, los granulosos con ncleo multilobulado y los no granulosos que tienen ncleo redondeado. Los leucocitos granulosos o polimorfonucleares, se distinguen entre s por la diferente apetencia tintrea de sus granulaciones (neutra, cida y basfila) son clulas nucleadas de origen medular, cumplen la funcin de fagocitar los antgenos presentes en el organismo, estos incluyen a los neutrfilos, eosinfilos y basfilos. SEGN PANIAGUA (1997) Los neutrfilos miden de 7 a 9 micras, su protoplasma es de coloracin rosa plida y poseen una granulacin rosa pequea repartida de manera uniforme y generalmente en todo el protoplasma. El ncleo forma dos o ms lobulaciones unidas entre s por un estrangulamiento. El ncleo presenta cromatina densa. Cumplen la funcin de fagocitar bacterias. Los eosinfilos miden de 10 a 15 micras, son de forma redondeada, protoplasma claro ocupando la totalidad del mismo una granulacin gruesa de forma irregular, a manera de esferas y de color anaranjado. El ncleo est opacado debido a la granulacin y es poco segmentado. Estn relacionados con una serie de fenmenos alrgicos como fagocitosis de complejos antgenos-anticuerpo y neutralizacin de histamina, serotonina y bradicinina. Los basfilos, son los menos abundantes en la sangre miden de 8 a 12 micras de dimetro y poseen forma redondeada. El protoplasma es de fondo poco visible, plido, azulado o rosado. La granulacin es muy caracterstica, de color violeta muy oscuro, grande, de tamao irregular, y se dispone por todo el protoplasma. El nmero de grnulos es variable, el ncleo es poco visible. Intervienen en los procesos inflamatorios mediante liberacin de heparina y a partir de sus grnulos. Tambin estn relacionados con el metabolismo lipdico. Los leucocitos no granulosos estn formados por linfocitos y por monocitos. Ambos integran el grupo de leucocitos mononucleares, agranulocitos o extramedulares, pues su origen se halla en los ganglios linfticos, rganos linfoideos y sistema reticuloendotelial. Linfocitos, son de tamao variable de 6 a 12 micras de dimetro, de forma redondeada, protoplasma azul, el cual contiene un nmero limitado de grnulos de color rojo intenso. El ncleo es de forma redondeada y la cromatina es densa. Cumple la funcin de inmunidad, al producir anticuerpos. Monocitos, son clulas que miden de 12 a 20 micras, poseen forma redondeada u ovalada, el protoplasma es claro, el ncleo posee un contorno muy irregular de manera que nuca se forman verdaderos segmentos de ncleos. Cumplen la funcin de fagocitar agentes patgenos. Plaquetas, son clulas anucleadas de origen medular, se presentan en forma de pequeos corpsculos que miden de 2 a 5 micras de dimetro, con variaciones considerables apareciendo en las extensiones de forma redondeada, a veces con unas prolongaciones poco visibles o en forma ms o menos ovalada. Presentan una forma perifrica azulada y una porcin central con granulacin irregular muy fina y rojiza. Intervienen en los fenmenos de hemostasia y coagulacin sangunea. Una gota de sangre tiene aproximadamente 250 mil plaquetas.

5. Metodologa
Toma de muestra y preparacin de frotis 1. Limpiar una placa porta objetos con papel toalla y alcohol antisptico. 2. Limpiar con algodn y alcohol antisptico el dedo pulgar. 3. Con una lanceta estril, pinchar firmemente el dedo pulgar. 4. Depositar una gota de sangre en el extremo de una placa portaobjetos. 5. Limpiar el dedo con alcohol antisptico y desechar la lanceta en el recipiente corto punzante infeccioso. 6. Con otra placa portaobjetos en forma inclinada (ngulo de 45), extender la gota hacia el lado contrario firme y rpidamente. 7. Aadir 1 o 2 gotas de metanol, cubriendo la muestra para fijar la y teniendo cuidado de no inhalarlo. 8. Dejar al aire libre para que se seque, durante 3 a 5 minutos. 9. Rotular la placa si fuese necesario y no confundirla. 10. Proceder con la tincin seleccionada. Tincin Giemsa 1. Teir la muestra, cubrindola totalmente con 1 o 2 gotas de colorante Giemsa, durante 5a 10minutos (mantener la placa sobre la bandeja para depsito de colorantes), o depositarla en un vaso coplin con colorante. 2. Enjuagar con agua destilada (piceta), desde el borde la placa portaobjetos, depositando el exceso de colorante dentro de la bandeja para este fin o depositar la placa en un vaso coplin con agua destilada. 3. Secar la placa al aire libre o con papel toalla. 4. Observar en el microscopio ptico de campo claro con los objetivos: 4, 10 y 40x e identificar las clulas sanguneas.

6. Discusin: -Muestras Las cuales fueron tomadas con la ayuda de una lanceta de un dedo de cada estudiante, de manera que se obtuvo una gota de sangre. -Portaobjetos: Son finas placas de vidrio, en donde se colocaron las muestras, y que posteriormente se situar en la platina del microscopio para proceder con la observacin. - Cubreobjetos: Son delgadas lminas de vidrio, que se emplean para cubrir la muestra o preparacin que posteriormente va a ser observada en el microscopio. -Lanceta: Es un instrumento de acero inoxidable, que se lo emplea para realizar punciones, en este caso ha sido utilizado para obtener la muestra de sangre.

-Observaciones: Se realizaron las siguientes observaciones: Glbulos rojos o Eritrocitos: los cuales se presentaron como clulas anucleadas, de coloracin
roja y con forma de discos circulares bicncavos.

Neutrfilo: es un leucocito granuloso o polimorfonuclear , el cual se present de forma esfrica, con el protoplasma de coloracin rosa plida, el mismo que tena una granulacin pequea repartida de
manera uniforme en todo el protoplasma.

Basfilo: es un leucocito granuloso o polimorfonuclear, el cual se present de forma esfrica, con el

protoplasma poco visible debido a la presencia de mltiples granulaciones de color violeta oscuro.

Linfocito: es un leucocito no granuloso, el cual se present de forma redondeada, con el protoplasma

azul en el mismo que se hall un nmero limitado de grnulos de color rojo intenso.

7. Resultados

Glbulos Rojos, Hemates o eritrocitos Muestra de sangre 40 x

Neutrfilo(Leucocito polimorfonuclear) Muestra de sangre 100x

granuloso

Linfocito(Leucocito no granuloso) Muestra de sangre 40 x

Basfilo(Leucocito polimorfonuclear) Muestras de sangre 40x

granuloso

8. Conclusin: Tras haber realizado los pasos descritos y tiempos establecidos, los resultados fueron sumamente satisfactorios, pues se logr observar e identificar microscpicamente la estructura de los elementos formes de la sangre tales como eritrocitos, neutrfilos, basfilos, linfocitos y plaquetas, presentes en la muestra. 9. Bibliografa: PANIAGUA, Ricardo. Citologa e Histologa Vegetal y Animal: Biologa de las clulas y tejidos animales y vegetales1997. Tercera edicin. Editorial McGraw Hill Interamericana. Madrid Espaa. AUDERSIK, Teresa, AUDERSIK Gerald. Biologa: La Vida en la Tierra1996. Cuarta edicin. Editorial Prentice- Hall Hispanoamericana. Mxico. GONZALEZ, Ana. Morfologa de plantas vasculares (2001). Universidad Nacional del Nordeste. Corrientes Argentina.