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Prueba LIA (Lysine Iron Agar Agar Lisina Hierro)

Es un medio utilizado para la diferenciacin de microorganismos entricos en base a su capacidad para desaminar o descarboxilar la lisina y de producir sulfuro de hidrgeno.

Edwards y Fife desarrollaron este medio para diferenciar a Salmonella arizonae. Medio especialmente recomendado para la identificacin de bacilos que fermentan rpidamente la lactosa. Salmonella

Shigella

Esta prueba permite diferenciar los microorganismos que producen descarboxilacin o desaminacin de la lisina y formacin acido sulfhdrico.

COLOR: Lila INHIBIDORES: no tiene INDICADOR: prpura de bromocresol SUSTRATOS PRINCIPALES: Lisina y glucosa SUSTRATOS SECUNDARIOS: peptona, tiosulfato de sodio, extracto de levadura.

FUNDAMENTO: En este medio se permite evidenciar la descarboxilacin del aminocido lisina en la diamina cadaverina, como tambin la desaminacin de la lisina en un alfa cetocido. Estas dos reacciones se ponen de manifiesto por el viraje del indicador prpura de bromocresol. La formacin de H2S se pone de manifiesto por la presencia del tiosulfato sdico, que dar formacin al sulfato frrico. Tambin puede verificarse la formacin de gas a partir de la degradacin de la glucosa .
En este medio la peptona provee la fuente de carbono y nitrgeno.

El extracto de levadura provee vitaminas y cofactores para el crecimiento.


La dextrosa es la fuente de energa. -El hidrocloruro de L-lisina es el sustrato donde actan las enzimas descarboxilasa o desaminasa. -El citrato frrico de amonio y el tiosulfato de sodio actan como indicadores de la produccin de H2S. -El prpura de bromocresol es un indicador de pH. El agar es adicionado como agente solidificante.

Formula en gr/L Peptona de Gelatina 5.0 Extracto de Levadura 3.0 Dextrosa 1.0 Prpura de Bromocresol 0.02 pH 6.7 0.2

L-Lisina 10.0 Tiosulfato de Sodio 0.04 Citrato de Hierro y Amonio 0.5 Agar Bacteriolgico 1305

Mtodo: Suspender 23 g del medio en un litro de agua purificada. Calentar con agitacin suave hasta su completa disolucin y hervir durante un minuto. Dispensar en tubos de vidrio, tapar y esterilizar en autoclave a 121C (15 libras de presin) durante 15 minutos. Dejar enfriar en posicin horizontal.

Procedimiento: 1. A partir de una colonia aislada sembrar el medio por picadura en el fondo y por estra en la superficie. 2. Incubar a 35 2C durante 18 a 48 horas. 3. Examinar los tubos para observar cambios de color y ennegrecimiento

RESULTADOS Prueba Produccin de H2S Reaccin positiva Formacin de un precipitado negro en la superficie Reaccin negativa No hay formacin de precipitado negro

Descarboxilacin de la Lisina

Fondo y superficie del medio de color prpura ( alcalino)

Fondo amarillo (cido), superficie prpura (alcalina)

Desaminacin de la Lisina

Superficie roja

Superficie prpura

Proteus y Providenza producen cultivos con superficie roja sobre fondo amarillo

Lisina descarboxilasa positiva

Descarboxilacin positiva, H2s positiva

Lisina descarboxilasa negativa

Lisina desaminasa positiva

Diagnostico Microbiologico Escrito por Betty A. Forbes

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