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Red de Revistas Cientficas de Amrica Latina, el Caribe, Espaa y Portugal
Sistema de Informacin Cientfica
Abn, Lutgarda; Coto, Orqudea; Marrero, Bladimir; Marrero, Jeannette
Estudio fisiolgico de la produccin de cido ctrico por Aspergillus niger O-5
Revista CENIC. Ciencias Biolgicas, vol. 35, nm. 1, enero-abril, 2004, pp. 15-18
Centro Nacional de Investigaciones Cientficas
Ciudad de La Habana, Cuba
Cmo citar? Nmero completo Ms informacin del artculo Pgina de la revista
Revista CENIC. Ciencias Biolgicas,
ISSN (Versin impresa): 0253-5688
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Cuba
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IevIsla CNIC CIencIas IoIgIcas, VoI. 85, No. 1, 2004.
15
sludIo IIsIoIgIco de Ia produccIn
de cIdo clrIco por Aspergi||us niger O-5
IecIbIdo: 1 de abrII de 2002. ^ceplado: 18 de oclubre de 2002.
IaIabras cIave: hongos, cIdo clrIco, Aspergi||us niger.
Iey words: IungI, cIlrIc acId, Aspergi||us niger.
RKSMKN. xIsle un gran Inlers en Ia busqueda de lecnoIogas IIm-
pIas que permIlan dIsmInuIr eI Impaclo ambIenlaI que ocasIona Ia In-
duslrI a mI nera. Ia I I xI vI acI n bI oI gI ca con empI eo de hongos
IIIamenlosos puede ser una aIlernalIva para eI lralamIenlo de Ios mIne-
raIes no suIIurosos. Ios cIdos orgnIcos que producen Ios hongos han
sIdo esludIados a nIveI de IaboralorIo para dIsoIver Ios melaIes presenles
en Ios mIneraIes oxIdados. Ias cepas de Aspergi||us niger producloras de
cIdo clrIco son de Ias ms empIeadas para Ia bIoIIxIvIacIn de mInera-
Ies IalerlIcos, por Io que es Imporlanle delermInar Ias condIcIones de
cuIlIvo que garanlIcen mayores produccIones de esle cIdo orgnIco. n
esle lraba]o se esludI Ia InIIuencIa de Ia edad deI IncuIo (?2, 96, 112,
120 y 144 h), deI voIumen de IncuIo (2,5; 5 y ? %), deI voIumen de medIo
(20 y 40 %) y de Ia aIreacIn (cuIlIvo sumergIdo y superIIcIaI), sobre Ia
produccIn de cIdo clrIco por Aspergi||us niger O-5. Ias mayores pro-
duccIones de cIdo clrIco Iueron oblenIdas con un voIumen eIeclIvo de
medIo deI 20 %, un voIumen de IncuIo deI 5 % con una edad de 112 h . I
cuIlIvo sumergIdo IavorecI eI crecImIenlo deI hongo y su produccIn de
cIdo clrIco se Incremenl en casI 5 g/I con reIacIn aI cuIlIvo superII-
cIaI a Ios ? d de IncubacIn. SIn embargo, eI rendImIenlo produclo/
bIomasa en cuIlIvo superIIcIaI super en un 1? % aI oblenIdo en cuIlIvo
sumergIdo. ^dems Ia reIacIn enlre crecImIenlo de A. niger O-5 y su
produccIn de cIdo posIbIIIl cIasIIIcar esla IermenlacIn como lIpo I
(asocIada).
ABSTRACT. Iue lo an IncreasIng demand Ior vaIuabIe melaIs, lhere Is a
greal Inleresl In IooRIng Ior aIlernalIve lechnoIogIes lhal Improve lhe
envIronmenlaI Impacl caused by mInIng Induslry. IoIogIcaI IeachIng
couId be an aIlernalIve Ior processIng nIcReI IalerIle ores. Jhe organIc
acIds Irom IungI are used Ior dIssoIvIng melaIs Irom ore. CIlrIc acId pro-
ducer slraIns oI A. niger are lhe mosl empIoyed bIoIeachIng. JhereIore Il
Is Imporlanl delermInIng lhe besl cuIlure condIlIons Ior hIgher produc-
lIons oI lhIs organIc acId. In lhIs worR lhe InIIuence oI IncubalIng lIme
oI InocuIums (?2, 96, 112, 120 and 140 h), InocuIums voIume (2,5; 5 and ? %),
cuIlure medIa voIume (20 and 40 %) and aeralIon (superIIcIaI and submerged
cuIlure) on cIlrIc acId produclIon oI A. niger O-5, a Cuban slraIn IsoIaled
oI acIdIc medIa was sludIed. Jhe hIghesl produclIon oI cIlrIc acId was
oblaIned wIlh InocuIums oI 112 h, 20 % oI cuIlure medIa voIume and 5 %
oI InocuIums voIume. On lhe olher hand lhe IungaI growlh In submerged
cuIlure was Increased and was oblaIned aImosl 5 g/I oI cIlrIc acId, more
lhan on superIIcIaI cuIlures. NeverlheIess, lhe producl/bIomass yIeId was
hIgher usIng superIIcIaI cuIlures lhan submerged cuIlures. ^ccordIng lo
lhe reIalIon belween producl and bIomass, Il can cIassIIy cIlrIc acId pro-
duclIon by A. niger O-5 as IermenlalIon lype I (assocIaled).
NTRODCCON
Ios procesos de bIoIIxIvIacIn de
mIneraIes IalerlIcos precIsan de Ia
InlervencIn de mIcroorganIsmos
helerlroIos produclores de cIdos
orgnIcos, denlro de Ios que se des-
lacan Ios hongos IIIamenlosos, es-
pecIaImenle Ios gneros Aspergi||us
y Penici||ium.
1,2
Ios cIdos clrIco,
oxIIco, gIucnIco, larlrIco y pIru-
vIco han sIdo Ios ms reIerIdos en
Ia IIleralura con buena capacIdad de
soIubIIIzacIn deI nqueI y eI cobaI-
lo. nlre eIIos, eI cIdo clrIco es eI
me]or agenle IIxIvIanle.
8-5
Iara Ia produccIn InduslrIaI de
cIdo clrIco, melaboIIlo Inlerme-
dIarIo deI cIcIo de Ios cIdos lrIcar-
boxIIcos se empIean IundamenlaI-
menle cepas de Aspergi||us niger.
Iara Iavorecer su acumuIacIn y
una superproduccIn se requIere de
un desbaIance deI melaboIIsmo mI-
crobIano. sle desbaIance se Iogra
aI desvIar eI melaboIIsmo de Ios azu-
cares hacIa Ia acumuIacIn deI cI-
do clrIco en delrImenlo deI crecI-
mIenlo.
6
nlre Ios Iaclores a lener
en cuenla esln Ios Iaclores IsIcos
y qumIcos como pH, lemperalura,
IncuIo, aIreacIn y adems, Ia com-
posIcIn deI medIo de cuIlIvo, enlre
olros.
I ob]elIvo de esle lraba]o Iue es-
ludIar Ia InIIuencIa de Ia edad y eI
voIumen de IncuIo, deI voIumen de
medIo y Ia aIreacIn sobre Ia produc-
cIn de cIdo clrIco por A. niger O-5.
MATKRALKS Y MKTODOS
Microorganismo
Se ulIIIz Ia cepa Aspergi||us
niger O-5 aIsIada como conlamInan-
LuIgarda Abin, Orquidea CoIo, Bladimir Marrero y JeanneIIe Marrero.
Ieparlamenlo de MIcrobIoIoga, IacuIlad de IoIoga, InIversIdad de Ia Habana, CaIIe 25 enlre J e I, I Vedado, IIaza de Ia
IevoIucIn, CIudad de Ia Habana, CdIgo IoslaI 10400, Cuba.
IevIsla CNIC CIencIas IoIgIcas, VoI. 85, No. 1, 2004.
16
le de un medIo cIdo (pH 2,5) que
permIle eI desarroIIo de baclerIas
helerlroIas acIdIIIas.
?
Se conser-
v en cunas de agar Sabouraud gIu-
cosa a lemperalura de 4
o
C .
Medio de produccin
Iara eI cuIlIvo deI hongo se em-
pIe azucar de cana (bIanco dIrec-
lo) 14 %, exlraclo de Ievadura 0,8 %,
IH
2
IO
4
0,05 % y MgSO
4
?H
2
O
0,0125 %, pH 6,0.
8
nculo
Se lraba] con suspensIones de
esporas (10
?
esporas/mI) proceden-
les de cuIlIvos en cunas de agar
Sabouraud gIucosa con lIempos de
IncubacIn de ?2, 88, 96, 112, 120,
144 y 168 h . Ios erIenmeyers con
medIo de produccIn Iueron Inocu-
Iados con 2,5; 5 ?,5 % de suspen-
sIn de esporas.
CulIivo
I esludIo se desarroII en erIen-
meyers de 250 mI con 50 y 100 mI
de medIo de produccIn, con eI ob-
]elIvo de Iograr voIumenes eIec-
lIvos deI 20 y eI 40 %, respeclIva-
menle. Ios cuIlIvos Iueron Incuba-
dos con agIlacIn, en zaranda or-
bIlaI II^-IS 501 a 150 r/mIn, lem-
peralura ambIenle (enlre 25 y 80 C)
duranle ? d .
Iara delermInar Ia cInlIca de Ia
produccIn deI cIdo clrIco y eI cre-
cImIenlo deI mIcroorganIsmo se In-
cub en paraIeIo, ba]o condIcIones
esllIcas y agIladas, para Io cuaI, se
lomaron mueslras a InlervaIos (8, 5,
?, 10 y 1? d).
DeIerminacin de la produccin de
cido ciIrico, crecimienIo y rendi-
mienIos
^I concIuIr eI lIempo de Incu-
bacIn lodos Ios cuIlIvos se IIIlra-
ron por papeI Whalman No. 1. ^
Ios IIIlrados se Ies delermIn Ia
concenlracIn de cIdo clrIco,
medIanle una lcnIca coIorIm-
lrIca que empIea pIrIdIna y anh-
drIdo aclIco
9
y eI conlenIdo de
azucares lolaIes, ulIIIzando Ia lc-
nIca deI IenoI-suIIurIco. Se sIguI
eI crecImIenlo por medIda deI
peso seco de Ia bIomasa relenIda
en eI papeI de IIIlro. Ior uIlImo,
Anlisis esIadisIico
Jodos Ios experImenlos se reaII-
zaron por lrIpIIcado y Ios resuIlados
se anaIIzaron medIanle un anIIsIs
de varIanza de cIasIIIcacIn sImpIe
y una comparacIn de medIas por
Iuncan, (n ~ 8, p < 0,5).
RKSLTADOS Y DSCSN
nIluencia de la edad del inculo
Ia mayor produccIn de cIdo
clrIco por A. niger O-5 correspon-
dI aI IncuIo de esporas con 112 h
de IncubacIn (10 g/I), vaIor que dI-
IIere sIgnIIIcalIvamenle deI reslo de
Ias edades de Ios IncuIos ensaya-
dos (JabIa 1). Ie sIguIeron en orden
decrecIenle Ios IncuIos de 96, 120
y 144 h de IncubacIn, enlre Ios cua-
Ies no se observaron dIIerencIas sIg-
nIIIcalIvas. slos resuIlados IndIcan
que eI eslado IIsIoIgIco de Ios cuI-
lIvos InIIuye en Ia acumuIacIn y
poslerIor excrecIn de esle cIdo
orgnIco.
Volumen eIecIivo/volumen IoIal
Ienlro de Ios Iaclores a lener en
cuenla duranle un cuIlIvo dIsconlI-
nuo (botcn) se encuenlra Ia concen-
lracIn apropIada de oxgeno dI-
sueIlo que permIla eI desarroIIo deI
mIcroorganIsmo y Ia IormacIn deI
produclo de Inlers. Ino de Ios Iac-
lores que InIIuyen en esle senlIdo
es Ia reIacIn enlre eI voIumen de
medIo de cuIlIvo y Ia capacIdad deI
erIenmeyer, ya que a mayor canlI-
dad de medIo nulrIlIvo en Ios Iras-
cos se IImIla Ia superIIcIe expuesla
aI aIre, Io que conduce a una dIsmI-
nucIn deI acceso deI oxgeno hacIa
eI InlerIor deI medIo.
10
Iuranle eI
desarroIIo de ensayos de bIoIIxIvIa-
cIn es usuaI ulIIIzar un voIumen
eIeclIvo de medIo de 40 %,
4,11-18
mIenlras que en Ios procesos Ier-
menlalIvos de produccIn de cIdo
clrIco Ios voIumenes eIeclIvos mas
empIeados son 10 y 20 %.
14-16
Ie ah
Ia necesIdad de delermInar eI com-
porlamIenlo de Ia produccIn de
cIdo clrIco por A. niger O-5 a vo-
Iumenes de 20 y 40 % (IIg. 1). ^ un
menor voIumen eIeclIvo (20 %) se
Iogr una concenlracIn de cIdo
clrIco sIgnIIIcalIvamenle superIor
a Ia oblenIda aI 40 %, para un 10,8?
y ?,?4 g/I, respeclIvamenle. Como
era de esperar Ios mayores vaIores
de Y I/S y Y I/ correspondIeron aI
20 % de voIumen eIeclIvo. slos re-
suIlados corroboran que Ias Iermen-
lacIones aerobIas son ms eIIcIenles
a reIacIones de voIumen de medIo/
voIumen deI Irasco deI 20 %.
1?
Volumen del inculo
Ia canlIdad de IncuIo aIecla eI
crecImIenlo de Ia cepa en eI medIo
de cuIlIvo, por Io que es Imporlanle
conocer Ia InIIuencIa de esle Iaclor
sobre Ia produccIn de cIdo clrIco
por A. niger O-5. Se observ que en
Ia medIda que Incremenl eI voIu-
men de IncuIo, Ia bIomasa, deler-
mInada como peso seco, lambIn
aumenl (IIg. 2). Iero no ocurrI Io
mIsmo con eI Y I/, ya que esle
parmelro depende de Ia reIacIn
enlre eI cIdo clrIco producIdo y eI
crecImIenlo. Con un voIumen de
IncuIo deI 5 % se aIcanz eI mayor ren-
dImIenlo Y I/ (82 %), Ia mayor con-
cenlracIn de cIdo clrIco (12,25 g/I),
pero no Ia mayor bIomasa (88,2 g/I)
slos vaIores dIIIeren sIgnIIIcalIva-
menle de Io aIcanzado con 2,5 y ?,5 %
de IncuIo. sos resuIlados reaIIr-
man Ia ImporlancIa de Iograr un
baIance adecuado enlre produclo y
bIomasa para Iograr una buena pro-
duccIn de cIdo clrIco.
18
KIecIos de la aireacin
I cIdo clrIco se puede oblener
por cuIlIvo sumergIdo (agIlado) o
por cuIlIvo superIIcIaI (esllIco).
SoIo eI 10 % de Ia produccIn mun-
dIaI se reaIIza por cuIlIvo superII-
cIaI,
19
ya que es menos produclIvo,
aunque mucho ms baralo. Se re-
porlan IncIuso cepas muy produc-
Y P/8 ~ 100
Acido citrico
obtenido (g/L)
8ustroto
consumido (g/L)
s a r o p s e s a I e d d a d 2 ? 8 8 6 9 2 1 1 0 2 1 4 4 1 8 6 1
) I / g ( o c I r l c o d I c ^ ? 6 , 8 8 , 9 ? 5 , 9 6 1 , 0 1 8 ? , 9 0 ? , 9 5 8 , 8
o c I l s d a l s e s I s I I n ^ d c b a b b d
Tabla 1. Ieclos de Ia edad deI IncuIo sobre Ia produccIn de cIdo clrIco por A. niger O-5.
VoIumen eIeclIvo de medIo deI 40 %. IncubacIn en agIlacIn (150 r/mIn) y a lemperalura ambIenle, 8 d . ( n ~ 8, p < 0,05).
Y P/8 ~ 100
Acido citrico
obtenido (g/L)
Biomoso
(peso seco) (g/L)
se caIcuIaron Ios rendImIenlos
produclo/suslralo (Y I/S) y pro-
duclo/bIomasa (Y I/):
IevIsla CNIC CIencIas IoIgIcas, VoI. 85, No. 1, 2004.
17
loras en esle lIpo de cuIlIvo.
20
Se
compar Ia produccIn de cIdo c-
lrIco, eI crecImIenlo y eI rendImIen-
lo de Ia cepa O-5 aI cuIlIvarIa duran-
le ? d en ambas condIcIones (IIg. 8).
Ia IermenlacIn en cuIlIvo sumer-
gIdo IavorecI eI crecImIenlo deI
mIcroorganIsmo (42,09 g/I), Io que
permIlI Iograr casI 5 g/I ms de
cIdo clrIco que en cuIlIvo superII-
cIaI. SIn embargo, aI reIacIonar am-
bas varIabIes se aprecIa que ba]o
condIcIones esllIcas eI rendImIen-
lo produclo/bIomasa (Y I/) super
en un ? % aI oblenIdo en cuIlIvo su-
mergIdo, ya que en eI superIIcIaI eI
crecImIenlo deI hongo Iue mucho
menor. n Ios cuIlIvos superIIcIaIes
eI oxgeno se comporla como un Iac-
lor IImIlanle deI crecImIenlo, y es-
las condIcIones Iavorecen Ia pro-
duccIn de una mayor canlIdad de
cIdo clrIco por unIdad de bIoma-
sa.
21
JenIendo en cuenla eslos re-
suIlados se delermIn Ia concen-
lracIn deI cIdo clrIco en eI lIem-
po ba]o condIcIones de cuIlIvo
superIIcIaI y sumergIdas. n cuI-
lIvo superIIcIaI Ia excrecIn deI
cIdo clrIco se Incremenl gra-
duaImenle, con Io que se aIcanz
una concenlracIn de 19 g/I a Ios
10 d de IncubacIn, para un vaIor
mxImo de 21 g/I a Ios 1? d (IIg. 4).
sle vaIor no dIIIere de Io oblenI-
do en cuIlIvo sumergIdo a Ios ? d
de IncubacIn.
Ia lendencIa de Ia curva de pro-
duccIn de cIdo clrIco evIdencIa
que despus de Ios 10 d de Incuba-
cIn Ia cInlIca deI proceso dIsmI-
nuye nolabIemenle, obsrvese que
enlre Ios das 10 y 1?, Ia concenlra-
cIn de esle melaboIIlo en eI medIo
se Incremenl soIo en 2 g/I (IIg. 4).
^I reIacIonar eI crecImIenlo con Ia
concenlracIn de cIdo clrIco se
obluvIeron ba]o condIcIones esllI-
cas un rendImIenlo produclo/bIo-
masa de 109,4 %, mIenlras que eI
mxImo Y I/ aIcanzado en cuIlIvo
sumergIdo Iue de 92 %. slo de-
mueslra que eI cuIlIvo superIIcIaI
Iavorece Ias condIcIones para oble-
ner una mayor canlIdad de produc-
lo por unIdad de bIomasa,
20
ya que
Ia acumuIacIn deI cIdo clrIco se
beneIIcIa ba]o condIcIones que IImI-
len eI crecImIenlo.
21
JambIn es co-
nocIdo que cuando eI crecImIenlo
mIcrobIano se delIene, Ia aclIvIdad
de Ia cIlralo sInlasa, enzIma que
condensa eI acelII Co^ y eI cIdo
oxaIocelIco, aumenla casI dIez ve-
ces, mIenlras que Ia aclIvIdad de Ia
aconIlasa dIsmInuye nolabIemenle,
enzIma responsabIe deI paso deI
cIdo clrIco a IsoclrIco y Iuego, a
olros InlermedIarIos deI cIcIo hasla
IIegar a oxaIacelalo.
Ior olro Iado, eI crecImIenlo de
Aspergi||us niger O-5 y su produc-
cIn de cIdo clrIco ocurrIeron sI-
muIlneamenle (IIg. 4 ) por Io que
se reaIIrma que eI cIdo clrIco es
un melaboIIlo prImarIo,
6,22
y Ia Ier-
menlacIn puede calaIogarse como
lIpo I (asocIada aI crecImIenlo) le-
nIendo en cuenla Ia cIasIIIcacIn de
Crueger y Crueger.
6
Ia reIacIn en-
lre bIomasa y produclo ba]o condI-
cIones de cuIlIvo sumergIdo lam-
bIn se corresponde con una Ier-
menlacIn lIpo I .
Con esle lraba]o se reaIIrma que
Ia snlesIs de cIdo clrIco depende
de Ia cepa, deI medIo de cuIlIvo y
de Ias condIcIones de Incuba-
cIn.
21,28-25
Fig. J. Ejectos de |o oireocion sobre |o produccion de dcido citrico g e| crecimiento de
^. nIger O-5. Vo|umen ejectico de medio de| ?0 %. Inocu|o de 11? n . Incubocion o
temperoturo ombiente, 7 d, en estdtico g ogitodo (150 r/min). Besu|todos de| Duncon.
Fig. 3. Ejectos de| co|umen de inocu|o sobre |o produccion de dcido citrico g e| creci-
miento de ^. nIger O-5. Vo|umen ejectico de medio de| ?0 %. Inocu|o de 11? n de
incubocion. Incubocion en ogitocion (150 r/min), temperoturo ombiente, 7 d . Besu|-
todos de| Duncon.
Fig. 1. Ejectos de| co|umen de medio/co|umen de| er|enmeger sobre |o produccion de
dcido citrico por ^. nIger O-5. Besu|todos de Y P/B g Y P/8. Inocu|o de 11? n . Incubo-
cion o 150 r/min, temperoturo ombiente, 7 d . Besu|todos de| Duncon.
Volumen efectivo
a
b
0
5
10
15
20
25
30
20% 40%
Acido ctrico (g/L) Y P/S (%) Y P/B (%)
a
c
b
a'
b'
c'
0
10
20
30
40
50
2. 50% 5% 7. 50%
Volumen de inculo
Acido ct rico (g/ L) Pes o s eco (g/ L) YP/B (%)
b
a
b
a
0
10
20
30
40
50
Agitado Esttico
Acido ctrico(g/L) Peso seco(g/L) Y P/B(%)
IevIsla CNIC CIencIas IoIgIcas, VoI. 85, No. 1, 2004.
18
CONCLSONKS
Ia produccIn de cIdo clrIco
por A. niger O-5 se ve IavorecIda aI
ulIIIzar un voIumen de IncuIo deI
5 % con esporas de 112 h de Incuba-
cIn, en Irascos con un voIumen
eIeclIvo de medIo deI 20 %.
I cuIlIvo superIIcIaI Iavorece eI
rendImIenlo produclo bIomasa en
comparacIn con eI cuIlIvo sumer-
gIdo.
BBLOGRAFA
1. urgslaIIer W. and SchInner I. Ieach-
Ing oI melaI wIlh IungI. Journal oI
BioIecbnology, 37, 91, 1998.
2. hrIIch H.I. Iasl, presenl and Iulure
oI bIohydromelaIIurgy. Iohydro-
melaIIurgy and lhe envIronmenl lo-
ward lhe mInIng oI lhe 21sl Cenlury.
^mIIs y aIIesler (d.). Iarl ^,
IsevIer, MadrId, spana, 8-12, 1999.
8. ^IIbhaI I., Iudeney ^.W.I. and IeaR
I.J. IoIeachIng and bIoprecIpIlalIon
oI nIcReI and Iron Irom IalerIles.
IohIdromelaIIurgy IX InlernalIonaI
SImposIum. J. Cardoso and I.W.
Iawrence (d.), IorlugaI, 8.2.28-
8.2.29, 1991.
4. Jarasova I.I., IhavsRI N.N., IhaIru-
IIIna I.J., IaravaIRo G.I. and Iu-
deney ^.W.I. Ied mud IeachIng wIlh
IungaI melaboIIles. IohydromelaIIur-
gIcaI processIng. J. Vargas, C. Jerez,
J. WIerlz and H. JoIedo (d.).
InIversIdad de ChIIe, VoI. I, 8?9-884,
1995.
5. osecRer I. IoIeachIng: melaI soIu-
bIIIzalIon by mIcroorganIsms. FKKM
Microbiology Review, 30, IsevIer,
591, 199?.
6. Crueger W. and Crueger ^. Iolech-
noIogy: a JexlbooR oI InduslrIaI MI-
crobIoIogy. ScIence leach IubIIsher.
MadIson, WIsconsIn, 184-142, 1990.
?. ^bn I., Colo O., Gomez Y. and
osecRer I. ScreenIng oI IungI wIlh
capacIly Ior organIc acId produclIon.
RevisIa Biologia, 16, 69, 2002.
8. ^bn I., Colo O., Gomez Y. and
osecRer I. IsoIalon and characler-
IzalIon oI IndIgenous mIcrobIola Irom
IalerIlIc nIcReI ore oI Moa mIne.
RevisIa Biologia, 16, 66, 2002.
9. MarrIer J.I. and ouIel M. IIrecl de-
lermInalIon oI cIlrIc acId In mIIR,
Improved pyrIdIne-acelII anhydrIde
melhod. Journal Dairy Science, 41,
1689, 1958.
10. IemaIn ^.I. and SaIomon N.^.
ManuaI oI InduslrIaI MIcrobIoIogy
and IolechnoIogy. ^merIcan SocIely
MIcrobIoIogy. WashInglon I.C., IS^,
140-142, 1986.
11. osecRer I. IeachIng oI IalerIlIc
nIcReI ores wIlh helerolrophIc mIcro-
organIsms. IroceedIng oI lhe 6 lh In-
lernalIonaI sImposIum oI Iohy-
dromelaIIurgy. W. Iawrence, ^.
ranIon and . bner (d.), OxIord,
86?-882, 1986.
12. Jarasova I.I. and IhavsRI N.N. Jhe
eIIecl oI uIlrasonIc on lhe bIoIeachIng
oI IalerIles. IohydromelaIIurgIcaI
lechnoIogIes. ^. Jorma, J. Wey and V.
IaRshmanan (d.). Jhe MIneraI, Mel-
aIs and MalerIaIs SocIely, 85?-861,
1998.
18. JungavIveshRuI J., JhIravelyan I.
and JanlIchaoren M. MechanIsms Ior
bIoIeachIng oI zInc sIIIcale resIdue by
organIc acId producIng mIcroorgan-
Isms. IohydromelaIIurgIcaI process-
Ing. J. Vargas, C. Jerez, J. WIerlz and
H. JoIedo (d.). InIversIdad de ChIIe.
VoI. I, 885-898, 1995.
14. IugsaseeI S., IIrImura I. and IsamI
S. CIlrIc acId accumuIalIon by
cIcIohexImIde-sensIlIve mulanl
slraIn oI Aspergi||us niger. Applied
Microbiology and BioIecbnology, 45,
28, 1996.
15. IInlado J., Jorrado ^., GonzaIez M.I.
and Murado M.^. OplImIzalIon oI
nulrIenl concenlralIon Ior cIlrIc acId
produclIon by soIId-slale cuIlure oI
Aspergi||us niger on poIyurelhane
Ioams. Knzyme and Microbiology, 33,
149, 1998.
16. JIanIong W. and IIng I. Ihylale as
slImuIalor oI cIlrIc acId produclIon by
Aspergi||us niger. Process Biocbem-
isIry, 33, 818-816, 1998.
1?. CaIam C.H. ShaRe-IIasR Iermenla-
lIon. InduslrIaI MIcrobIoIogy and Io-
lechnoIogy. Chapler 1, IrenlIce Iress,
IS^, 59-61, 1986.
18. IubIceR C.I. and Iohr M. CIlrIc acId
IermenlalIon. CIC. CrIlIcaI revIew.
BioIecbnology, 3, 881, 1986.
19. MadIgan M.J., ManlInRo J.M. and
IarRer J. IoIogy oI MIcroorganIsm-
rocR. 8lh edIlIon. IrenlIce HaII, Inc.
Chapler 12, 481-456, 199?.
20. IugsaseeI S., MorIRawa S., IIrImura
I and IsamI S. SlImuIalIon oI cIlrIc
acId produclIon In Aspergillus niger
addIlIon oI vIscous subslances In
shaRe cuIlure. Applied Microbiology
and BioIecbnology, 43, 889, 1995.
21. Wang J.I. and IIu I. Ihylale as a
slImuIalor oI cIlrIc acId produclIon by
Aspergi||us niger. Process Biocbem-
isIry, 33, 818, 1998.
22. SmIlh J.. IolechnoIogy, lhIrd edI-
lIon, InIversIly Iress, CambrIdge,
IS^, 199-200, 1998.
28. I-Samragy ^., IhorshId M.^., Ioda
M.I. and Shehala ^.. IIecl oI Ier-
menlalIon condIlIons on lhe produc-
lIon oI cIlrIc acId In Aspergi||us niger.
nI. J. Food Microbiol., 39, 411, 1996.
24. Mourya N.V. and JauhrI I S. Iroduc-
lIon oI cIlrIc acId Irom slarch-hy-
droIysale by Aspergi||us niger.
Microbiol. Res., 155, 8?, 2000.
25. IazouRI M., IeIse I.^. and Ianda J.
ComparalIve sludIes on cIlrIc acId
produclIon by A. niger and Condido
|ipo|gtico usIng moIasses and gIu-
cose. Bioprocess Kngineering, 33,
858, 2000.
Fig. 1. Cinetico de |o produccion de dcido citrico g de| crecimiento de ^. nIger O-5.
Vo|umen ejectico de medio de| ?0 %. Inocu|o de 11? n . Incubocion en estdtico, o tem-
peroturo ombiente.
0
5
10
15
20
25
0 5 10 15 20
Tiempo (d)
g/L
Acido ctrico Peso seco
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