CURSO DE INMUNOLOGA GENERAL 6.

Interacciones entre antgeno y anticuerpo

Enrique Iez Pareja Departamento de Microbiologa Universidad de Granada Espaa

6. 1. INTRODUCCIN Antes de tratar sobre los detalles de las reacciones antgenoanticuerpo, se recomienda el repaso de los siguientes conceptos:
antgeno epitopo (determinante antignico) hapteno y conjugados hapteno-portador experimentos de Landsteiner, que demuestran el papel clave de la configuracin global del hapteno: lo que reconoce el Ac es la nube tridimensional de la capa externa de electrones del hapteno anticuerpos: el sitio de unin con el antgeno est formado por el conjunto de las seis CDR. Este conjunto interacciona con el epitopo, y es lo que se denomina paratopo la cristalografa de rayos X demuestra la complementariedad (de tipo llave-cerradura) entre el paratopo y el epitopo flexibilidad en la unin: puede darse un ajuste inducido en una CDR al unirse al correspondiente grupo qumico del epitopo, permitiendo

un mejor encaje molecular entre ambos.

6.2 CARACTERSTICAS FSICOQUMICAS DE LA UNIN Ag-Ac La unin Ag-Ac es una interaccin reversible en la que slo intervienen enlaces no-covalentes entre el epitopo del Ag y las CDRs de la pareja VH-VLdel Ac. 6.2.1 Fuerzas implicadas en la unin Ag-Ac Los enlaces no covalentes son dependientes de la inversa de la distancia entre los grupos qumicos implicados.
Puentes de hidrgeno Fuerzas electrostticas (enlaces inicos) Fuerzas de van der Waals Enlaces hidrfobos

La clave de la unin est en la complementariedad entre Ag y Ac: si sta es buena, se produce la exclusin de agua, lo que permite un acercamiento estrecho entre epitopo y paratopo, lo que determina altas fuerzas de unin. 6.2.2 Afinidad La afinidad de un anticuerpo(Ac) concreto (p. ej., cuando usamos un anticuerpo monoclonal) por un epitopo (H) es la suma de todas las fuerzas atractivas y repulsivas entre un sitio de unin de ese anticuerpo y el correspondiente epitopo. Ello se puede definir a travs de la correspondiente constante de equilibrio (K), segn la ley de accin de masas:

siendo [Ac] la concentracin de sitios libres de Ac y [Ac-H] la concentracin de sitios ocupados del Ac. La determinacin de la constante de afinidad K se realiza en experimentos de dilisis, que conducen a la determinacin de la ecuacin de Scatchard:

6.2.3 Avidez Es la fuerza con la que el Ac multivalente se une a un Ag multivalente. Aunque depende de las afinidades individuales de cada uno de los determinantes individuales de ese antgeno, su valor es mucho mayor que la suma de afinidades. Pero por otro lado, hay que considerar que los Ag naturales suelen tener ms de un tipo de determinante antignico. Cuando un antgeno de este tipo entra en un individuo, ste produce un antisuero, que presenta varios tipos de anticuerpos, cada uno de ellos dirigidos a un tipo diferente de determinante antignico del Ag original. En esta caso se habla de avidez del antisuero, que es la fuerza conjunta de los distintos anticuerpos de ese antisuero que reconocen al antgeno multivalente complejo: n Ac + mAg {Acn Agm}, donde n representa la heterogeneidad del anticuerpo, y m los distintos tipos de epitopos del antgeno. Los factores que contribuyen a la avidez del antisuero son complejos, pero uno muy interesante es el derivado de la multivalencia del antgeno. La fuerza de unin de un antgeno complejo multivalente a varios tipos de Ac es mucho mayor que la suma aritmtica de las fuerzas de unin de cada anticuerpo: La avidez refleja mejor la situacin fisiolgica, pero la afinidad nos caracteriza lo que ocurre con cada tipo de anticuerpo concreto en su interaccin con el epitopo.

6.3 CINTICA DE LAS REACCIONES Ag-Ac Parece que existen indicios de que durante la maduracin de la respuesta humoral de produccin de anticuerpos se produce no slo una seleccin de anticuerpos con mayor

afinidad (seleccin termodinmica), sino con mayor rapidez (seleccin cintica).

6.4 SITIOS DE UNIN POLIFUNCIONALES Puede darse el caso de que una misma molcula de anticuerpo pueda ser complementaria de varios determinantes antignicos distintos. En este caso, la unin de cada epitopo al anticuerpo es competitiva, aunque existen lugares distintos para cada epitopo dentro del paratopo del anticuerpo. Cuando inducimos una respuesta humoral frente al Ag "A", se produce una poblacin de Ac polifuncionales, que tienen en comn el tener un sitio para "A" (aunque en dicha poblacin se dan subpoblaciones, que, adems podran reconocer parte de otros Ag). La reactividad neta del antisuero es alta frente a "A" (el Ag inductor), pero baja frente a los dems Ag.
Los anticuerpos heterfilos pueden ser definidos como un grupo de autoanticuerpos que reaccionan con mltiples antgenos, con baja afinidad; estas reacciones son inespecficas y estn presentes en pacientes con enfermedades autoinmunes como lupus, diabetes tipo 1, artritis reumatoidea etc., pueden reaccionar contra sus propias inmunoglobulinas; un ejemplo de este tipo de anticuerpos es el factor reumatoideo (IgM humana que tiene afinidad por IgG humana).3,4 Estos anticuerpos heterfilos tambin pueden unirse por reaccin cruzada, con anticuerpos de origen animal, que son utilizados en los radioinmunoensayos; esto no es sorprendente, ya que diferentes especies tienen similares fracciones Fc. La interferencia ocurre con mayor frecuencia en los ensayos inmunomtricos, tipo sndwich, no competitivos, ya que estos Ac pueden unirse simultneamente a los Ac de captura y de deteccin, generando una seal en ausencia del antgeno. Y como en estos sistemas, la seal es directamente proporcional a la concentracin del antgeno, se est en presencia de un resultado falsamente elevado.5,6 Otro tipo de interferencia puede ser causada por anticuerpos dirigidos contra protenas de animales, especialmente anti anticuerpos de ratn (HAMA). Estos anticuerpos son altamente especficos, producidos como resultado de exposicin de personas a protenas animales en determinadas terapias o en tcnicas por imagen, donde inmunoglobulinas animales son introducidas en el paciente como parte del tratamiento.