5.

Acizi nucleici
5.1. Caracteristici generale
Acizii nucleici sunt biomolecule de importan biologic fundamental, care dein un loc aparte n organizarea i funcionarea materiei vii. Alturi de proteine, acizii nucleici constituie cei mai importani biopolimeri care intr n alctuirea celulei vii. Rolul biologic al acizilor nucleici const n faptul c n ei este codificat informaia genetic i datorit lor, aceast informaie se transmite. rin participarea nemi!locit a acizilor nucleici se realizeaz sinteza tuturor proteinelor, n consecin i a enzimelor e"istente n celula vie. #otodat, multe nucleotide $ elemente structurale ale acizilor nucleici $ au un rol important n metabolismul substanelor i energetic, ndeplinind funcii coenzimatice. Acizii nucleici sunt compui macromoleculari care posed o mas molecular gigantic %milioane de uniti&' se dizolv n soluii alcaline i sunt precipitai prin acidularea acestora' posed proprieti acide puternice i la p( fiziologic poart o nalt sarcin negativ' conin apro"imativ 15) azot i 1*) fosfor. Acizii nucleici se pot mpri n dou clase+ ribonucleici %AR,& care conin riboz i dezo"iribonucleici %A-,&, n compoziia crora intr dezo"iriboza. Ambele tipuri reprezint polimeri liniari ai nucleotidelor care se formeaz cu a!utorul legturilor esterfosforice ntre 5.$fosfatul unui nucleotid i grupa /.01idro"ilic a pentozei nucleotidului vecin.

5.2. Componenii acizilor nucleici

Biochimia produselor alimentare 3olecula unui acid nucleic reprezint un polinucleotid alctuit dintr0un numr mare de mononucleotide. 3ononucleotidele, la r4ndul lor, sunt constituite din trei componente+ o baz azotat %purinic sau pirimidininc& legat de un glucid %riboz sau dezo"iriboz& i fosfat care esterific glucidul la atomii C02., C0/. sau C05.. 5sterificarea la C05. este cea mai rsp4ndit.

5.2.1. Baze azotate

6azele azotate care intr n constituia acizilor nucleici sunt de natur purinic i pirimidinic. Cele mai importante baze purinice sunt adenina (A) i guanina (G) $ derivai ai 1eterociclului purina.
,(2 ,1
8 5 2 / 7

<

, (

, 9 ; :

, , , (

(, (2, , , (

Purina

Adenina (A) (6-aminopurina)

Guanina (G) (2-amino-6-oxipurina)

=n procesele metabolice care au loc n organismele animale i vegetale, bazele azotate purinice formeaz o serie de produi, printre care deosebit de important este acidul uric' la om, acesta este produsul final al metabolismului purinic. =n unele plante se acumuleaz n cantiti mari derivai metilai de natur purinic+ cofeina din cafea i ceai, teobromina $ compusul activ al boabelor de cacao. 6oabele de cafea conin p4n la 1,5) cafein, iar n ceai, coninutul ei este mult mai mare %p4n la 5)&. ,ivelul teobrominei n boabele de cacao a!unge p4n la 1,:).
< (/C , < , C(/ , , C(/
(, < , C(/ , < , C(/

Cofeina

Teobromina

=n organismul animal apar ca produi intermediari de metabolism i alte baze azotate purinice care nu particip la structura acizilor nucleici+
< (, , , ,( (, < ,( < , ,( (, < ,( < ,( ,( <

Hipoxantina

Xantina

Acidul uric

131

Acizi nucleici

6azele azotate pirimidinice coninute n acizi nucleici sunt citozin (C), uracil (U) i timin (T) $ care reprezint derivai de la 1eterociclul pirimidin+
,(2 < (, , ( < , ( (, < , ( < C(/

,1

8 5 2 / 7

, <

Pirimidina

Cito#ina (C) (2-oxi-6-aminopirimidina)

racilul ( ) (2!6-dioxipirimidina)

Timina (T) (2!6-dioxi-"-metilpirimidina)

>neori se nt4lnesc 50metilcitozina i 50o"imetilcitozina sau ali derivai ai pirimidinei+

,(2 , < , ( C(/ < , , ( ,(2 C(2<(

"-metilcito#ina

"-oximetilcito#ina

5.2.2. Nucleozide
Combinarea unei baze azotate purinice sau pirimidinice cu o pentoz conduce la un nucleozid %prin analogie cu glicozidele&. Adenina legat cu riboza se numete adenozin, guaninribonucleozidul $ guanozin i respectiv ribonucleozidele pirimidinice, citidin i uridin. ,ucleozide analoge se formeaz i cu dezo"iriboza+ adenindezo"iribonucleozid %sau dezo"iadenozin&, dezo"icitidin etc.. #rebuie subliniat c dezo"iribonucleozidul timinei, care se gsete cu precdere n A-, se numete timidin i nu dezo"itimidin. #imina se mai nt4lnete n unul din tipurile de AR, i anume AR, de transport. =n acest caz se folosete denumirea de timinribonucleozid sau riboziltimin. ,ucleozidele purinice obinute din AR, au o legtur ?0glicozidic ntre C01 . al ribozei i azotul din poziia ; purinic. ,ucleozidele pirimidinice sunt ,0/0glicozide+
,(2 ,1
2 5@ 5 / 7 8 ; : 9,

,(2 ,1
5@ 8 5 2 / 7

, (
/@

, (
2@

< < (
/@

(< (2C
7@

<
1@

(< (2C
7@

1@

(<

<(

(<

<(

2@

Adeno#ina ($- -%-ribofurano#iladenina)

Citidina (3- -%-ribofurano#ilcito#ina)

132

Biochimia produselor alimentare

,ucleozidele purinice se 1idrolizeaz uor sub aciunea acizilor, n timp ce nucleozidele pirimidinice se 1idrolizeaz numai dup o prelucrare destul de prelungit cu acid concentrat. ,ucleozidele care conin dezo"iriboz posed acelai tip de legturi glicozidice i reprezint ;0?0-02.0dezo"iribofuranozide ale guaninei i adeninei i /0?0-02.0 dezo"iribofuranozide ale citozinei i timinei.

5.2.3. Nucleotide
rin esterificarea nucleozidelor cu o molecul de acid fosforic se obin substane mai comple"e care poart denumirea de nucleotide i care !oac un rol e"trem de important n metabolismul celular. Amportana deosebit a nucleotidelor const nu numai n faptul c din ele sunt construite moleculele gigant ale acizilor nucleici, ci i aceea c ele intr n structura unor enzime, iar unele din ele sunt compui n care se acumuleaz energie necesar pentru desfurarea proceselor vitale. Ca esteri fosforici ai nucleozidelor, nucleotidele reprezint nite acizi puternici. 5i se numesc, corespunztor, acizi adenilic, guanilic, timidilic, citidilic i uridilic. =n AR, ,numai poziiile 1. i 7. nu sunt disponibile pentru esterificare i prin urmare vor e"ista nucleotide cu acidul fosforic n poziiile 2., /. i 5.. An sc1imb,fosforilarea restului de glucid al dezo"iribonucleozidului este posibil numai n poziia C0/. i C05. deoarece atomii C01. i C07. sunt inclui n ciclul furanozic, iar atomul C02. nu are grup 1idro"il. Ambele tipuri de fosfai au fost identificate n dezo"iribonucleotide izolate dup 1idroliza A-,. Btructurile acizilor adenilic i dezo"iadenilic se prezint astfel+

,(2 , (< < (< < (2C ( ( , < ( ( , ,

,(2 , (< < (< < (2C ( ( , < ( ( ( , ,

(<

<(

(<

Acid "&-adenilic (Adeno#in-"&-monofo'fat) "& A(P

Acid "&-de#oxiadenilic (%e#oxiadeno#in-"&-monofo'fat) "&d A(P

133

Acizi nucleici Analog acidului adenilic sunt constituite i celelalte nucleotide ce intr n constituia acizilor nucleici+
6aze azotate urinice Adenina Cuanina irimidinice Citozina >racilul #imina 50metilcitozina ,ucleozide Adenozina Cuanozina Citidina >ridina #imidina 50metilcitidina ,ucleotide Acidul adenilic %A3 & Acidul guanilic %C3 & Acidul citidilic %C3 & Acidul uridilic %>3 & Acidul timidilic %#3 & Acidul 50metilcitidilic

,ucleotidele predominante n celul sub form liber sunt cele care au restul de acid fosforic n poziia 5., adic nucleozid05.0fosfaii' aceste nucleotide ndeplinesc roluri importante n metabolismul celular. Btructura i nomenclatura celorlalte ribonucleotide %ribonucleozide05.0monofosfat& i dezo"iribonucleotide %dezo"iribonucleozide05.0monofosfat& sunt urmtoarele+ Ribonucleotide+
< (, (< < (< (2, < (2C ( ( , < ( ( , < (< ( , (< < (2C ( (, < < ( ( , (< < (< < (2C ( ( < < ( ( < , , ,(2

(<

<(

(<

<(

(<

<(

Acid )uanilic (Guano#inmonofo'fat) G(P

Acid uridilic ( ridinmonofo'fat) (P

-ezo"iribonucleotide+

Acid citidilic (Citdinmonofo'fat) C(P

< (, (< < (< (2, < (2C ( ( , < ( ( ( , < (< ( , (< < (2C ( (, < < ( (

< C(/ , (< (< < < (, < ,

,(2 , ,

(<

(<

< (2C , < , < (<< (2C ( < ( ( ( (< ( ( ( ( ( (< (< Acid de#oxicitidilic (%e#oxicitidinmonofo'fat) Acid ino#inic d C(P (ino#inmonofo'fat) 13* +(P <(

Acid de#oxi)uanilic (de#oxi)uano#inmonofo'fat) d G(P

Acid timidilic (Timidinmonofo'fat) T(P

Biochimia produselor alimentare ,ucleozid05.0fosfaii %sau 5.0nucleotidele& sunt substane care au proprietatea de a intensifica rspunsul organelor senzoriale la stimulii gustativi ai unui aliment, adic sunt poteniatori de arom. 5le acioneaz sinergic cu glutamatul i sunt utilizate pentru aromatizarea supelor pulbere, a sosurilor, a semiconservelor de carne etc.. Nucleotidul 3,5-AMP-ciclic %cA3 & este un nucleotid la care acidul fosforic esterific grupele $<( din poziiile /. i 5. ale aceleiai molecule de riboz, form4ndu0se o legtur di0ester intern %/.D5.&. c0A3 este dotat cu proprieti regulatoare funcion4nd ,(2 n diverse procese bioc1imice ca un regulator al activitilor metabolice i fiziologice. Ea mamifere, , , aciunea c0A3 este corelat cu activitatea unor , , 1ormoni care activeaz enzima adenilatciclaza, responsabil pentru formarea sa n celul din A# . Ea < C(2 < r4ndul sau, c0A3 controleaz activitatea unor enzime ( ( i are un rol important n sinteza proteinelor. c0A3 se ( ( gsete i n esuturile vegetalelor ns funcia sa, n <( < < acest caz, nu este clarificat. Nucleotide difosfat i trifosfat. Acidul adenilic poate lega la restul su de fosfat nc una sau dou resturi de acid fosforic cu formarea adenozindifosfatului %ADP) sau adenozintrifosfatului (ATP). =n molecula de adenozintrifosfat, trei resturi de acid fosforic se leag succesiv una de alta, n urmtoarea structur+
(<

c-A(P

legturi m acroergice N OH OH OH HO P~O P~O P O CH2 O O O H H OH legtur esteric norm al

NH2 N N O H H OH Riboza N Adenina

Adenozina Adenozinm onofosfat (AMP) Adenozindifosfat (A P)

Be observ c Ai A# Adenozintrifosfat (A!P) sunt compui ce conin legturi macroergice, adic posed o cantitate mare de energie pe care o elibereaz la descompunerea lor 1idrolitic. rin 1idroliza unei legturi esterice obinuite se formeaz aproape 20/ Fcal, iar prin 1idroliza unei legturi macroergice din A# 0 apro"imativ 9 Fcal. Aceast eliberare de energie are loc prin defosforilarea A# 0ului cu formare de A- sau A3 , iar energia produs este utilizat n celule pentru diferite procese de sintez sau alte scopuri. Ea r4ndul

13"

Acizi nucleici su, A- se fosforileaz n A# pe seama energiei care se elibereaz prin o"idarea compuilor organici. =n celulele organismelor are loc permanent procesul de defosforilare a A# i de fosforilare a A- sau A3 . Reacia+ A# G A- H
i

reprezint baza bioenergeticii i reflect dinamica flu"ului de energie n cadrul celulei' prin aceast reacie se asigur transferul energiei c1imice utilizat n metabolismul celular al tuturor organismelor. 5nergetica sistemului A# G A- H i implic dou aspecte fundamentale i anume+ - conservarea energiei c1imice rezultat din metabolizarea alimentelor+ A- H i DA#

eliberarea i utilizarea energiei stocate+ A# D A- H i

Bub aciunea unei enzime specifice $ adenilatciclaza, adenozintrifosfatul formeaz c0A3 dup urmtoarea reacie+ A# D c A3 H Analog cu A- i A# , sunt alctuite uridindifosfatul %>- & i uridintrifosfatul %># & care sunt necesari pentru activitatea unor enzime ce catalizeaz transformarea i sinteza multor za1aruri %glucoz, fructoz, galactoz, za1aroz, amidon, celuloz&. Compuii macroergici ai acidului citidilic sunt citidindifosfatul %C- & i citidintrifosfatul %C# &. >ltimul intr n constituia enzimelor ce iau parte la sinteza fosfatidelor. Ca rezultat al legrii unui rest de acid fosforic la acidul guanilic, se formeaz guanozindifosfat %C- &, iar dac la acesta se mai leag nc un rest de ortofosfat se obine guanozintrifosfat %C# &. Be prezint mai !os denumirea complet i prescurtat a celor mai importante nucleotide i derivailor lor fosforilai+ ,ucleotidul Adenozinmonofosfat %acid adenilic& Adenozindifosfat Adenozintrifosfat Cuanozinmonofosfat %acid guanilic& Cuanozindifosfat Cuanozintrifosfat -enumirea prescurtat A3 AA# C3 CC#

136

Biochimia produselor alimentare Citidinmonofosfat %acid citidilic& Citidindifosfat Citidintrifosfat >ridinmonofosfat %acid uridilic& >ridindifosfat >ridintrifosfat #imidinmonofosfat %acid timidilic& C3 CC# >3 >># #3

#oi aceti compui, !oac n organism un rol deosebit de important n metabolismul substanelor i n special, n biosinteza lipidelor i glucidelor. >n rol esenial n procesele metabolice l au, de asemenea, i alte nucleotide i derivaii lor. ,icotinamidadenindinucleotidul %,A-H& i nicotinamidadenindinucleotid fosfatul %,A- H&, flavinmononucleotidul %I3,& i flavinadenindinucleotidul %IA-& sunt transportori de 1idrogen n reaciile de o"idoreducere . Coenzima A %CoA&, alctuit dup principiul nucleotidelor, !oac un rol important n procesele de activare a transferului i metabolismului acizilor grai.

5./. Btructura acizilor nucleici

5.3.1. Structura ri!ar"
Acizii nucleici sunt polimeri ai nucleotidelor. Andiferent de tipul de care aparin %AR, sau A-,&, molecula lor este constituit din lungi lanuri polinucleotidice, n care resturile de acid fosforic formeaz legturi diesterice cu c4te dou molecule de pentoz la atomul C0/. din una i C05. din cealalt. Astfel iau natere catene lungi n care resturile de acid fosforic alterneaz cu resturi pentozice la care, la atomii C01. sunt legate baze azotate. Acest sc1elet este comun tuturor acizilor nucleici, cu deosebire c n A-, pentoza este dezo"iriboza, iar n AR, 0 riboza i a faptului c A-, conine adenin, guanin, citozin i timin, iar n AR, sunt prezente adenina, guanina, citozina i uracilul. =ntr0un polinucleotid liniar e"ist legturi glicozidice care leag bazele azotate de pentoz, legturi esterice ntre pentoz i acidul fosforic i legturi diesterice ntre nucleotide. #oate aceste legturi simple, covalente, alctuiesc structura primar a acizilor nucleici, adic compoziia i secvena resturilor de nucleotide n lanul polinucleotidic al acizilor nucleici.

13,

Acizi nucleici Cu alte cuvinte, nivelul primar de organizare structural a A-, i AR, indic natura, proporia i secvena bazelor azotate ale nucleotidelor care constituie macromolecula lor. entru reprezentarea sc1ematic a structurii primare se procedeaz astfel+ orizontal se redau lanurile atomilor de carbon ai glucidelor cu bazele azotate legate n C01., iar n diagonal $ legturile fosfat diesterice dintre atomul C0/. %n apropierea mi!locului liniei orizontale& i atomul C05. %la captul urmtoarei orizontale&.%Iig. 5.1. &
5@0 /@ 1@ /@ 1@ 1@ # C C 5@0 # C C /@0<(

5@ 5@

Iig. 5.1. Reprezentarea sc1ematic a structurii primare a unui fragment de A-,

/@0<(

p#pCpC

entru polinucleotidele lungi se utilizeaz i o sc1em cu litere. Cu literele A, C, C, > i # se reprezint nucleozidele, iar grupa fosfat se reprezint cu litera p. C4nd aceasta se gsete la dreapta, esterific la C0/., c4nd se gsete la st4nga, la C0 5.. Astfel, n Ap>p $ grupa fosfat esterific n C0/. adenozina i n C05. uridina. #otodat, uridina este fosforilat i n C 0/.. #oate mononucleotidele sunt dispuse n molecula acidului nucleic ntr0o ordine strict determinat, specific polinucleotidului respectiv. ,u e"ist nici o ramificare a lanului. Iragmente ale lanurilor de A-, i AR, au un aspect caracteristic +

13-

Biochimia produselor alimentare

A-,
< (, < < (2C ( ( < < ( ( ( , , < (< < (2C ( ( < < ( ( ( (, < < (< ( < (2C ( < < ( ( ( (, , < ( < < (< ( ( ( , < , < C(/ , ,(2 , , C(/

AR,
< (, < < ( < ( ( ,(2 , , < (< < (2C ( ( < < (< ( , < ( ( (, < < (2C ( < < ( ( (, , < ( < , < ( ( ( (< < (2C ( ( < ( ( , < < ( ( , ,(2 , < , , < , ,

.n lant

.n lant
< (2C (

<( ,

<(

<(

(2, < (< < (2C (

(2, < ,(2 , < (< < (2C (

<(

< (2C ( ( <

<

.n lant

<(

.n lant

5.3.2. Structura secundar"

Alturi de legturile simple, covalente, n moleculele acizilor nucleici e"ist legturi de 1idrogen care !oac un rol important n conformaia lor spaial. Btructura secundar a fost propus iniial pentru A-, de ctre Jatson i CricF n 1;5/, iar mai t4rziu %1;8/& i pentru AR,. Ea baza organizrii acestei structuri secundare stau urmtoarele reguli stabilite pe baza datelor e"perimentale privind compoziia c1imic a A-,+ 1& Coninutul molar de purine este egal cu coninutul molar de pirimidine, coninutul de adenin este egal cu coninutul de timin %AK# L 1&, coninutul de guanin este egal cu cel de citozin %CKC L 1&, iar suma cantitii de adenin i guanin este egal cu suma cantitii de citozin i timin+ %A H C& L %C H #&, sau %A H C& K %C H #& L 1'

13$

Acizi nucleici 2& Cantitatea de grupe 80aminice care intr n compoziia bazelor azotate ale A-, %adenin i citozin& este egal cu cantitatea de grupe 80cetonice ce e"ist n aceste baze %guanin i timin&, prin urmare %C H #& L %A H C&, sau %C H #& K %A H C& L 1. Aceste date, asociate cu studiile efectuate prin analize, au permis elaborarea unui model spaial al structurii secundare a A-,. =n conformitate cu modelul elaborat, macromolecula de A-, este alctuit din dou lanuri polinucleotidice antiparalele sub form de spir, rsucite unul cu altul. Iiecare lan reprezint n sine un polinucleotid n care o legtur diesteric leag mononucleotidele una cu alta. =n lungul a"ei fiecrui lan, la fiecare *,/7 nm se gsete un mononucleotid. >ng1iul dintre nucleotidele alturate n fiecare lan este /8o. =n lan, mononucleotidele sunt astfel dispuse nc4t bazele azotate se gsesc n interior, iar pentoza i acidul fosforic n afar. Cele dou lanuri paralele sunt nfurate n !urul unei a"e comune i sunt legate unul de altul prin bazele lor azotate de0a lungul ntregii molecule de A-,, cu a!utorul legturilor de 1idrogen care menin i stabilizeaz o ar1itectur spaial. Eegturile de 1idrogen sunt ndreptate de la grupa 80,(2 a adeninei ctre grupa 8L< a timinei, de la grupa 2 0,(2 a guaninei la grupa 2 L< a citozinei i de la grupa 80,(2 a citozinei la grupa 8 L< a guaninei. %Iigura 5.2.&

Iig. 5.2. Eegturile de 1idrogen dintre bazele azotate complementare din A-,

1*/

Biochimia produselor alimentare =n acelai timp se formeaz legturi de 1idrogen i cu participarea grupelor $,( e"istente n ; la guanin i / la timin. Ca urmare, adenina unui lan polinucleotidic se va uni ntotdeauna prin dou legturi de 1idrogen cu timina celuilalt lan %A= = = #& iar guanina va forma ntotdeauna trei legturi de 1idrogen cu citozina %C C&. Aceasta nsemn c succesiunea distribuiei %secvena& bazelor azotate n unul din cele dou lanuri poate fi oricare, dar succesiunea distribuiei bazelor azotate n cellalt lan trebuie s se gseasc n str4ns legtur cu succesiunea lor n primul lan. erec1ile adenin0 timin i guanin0citozin sunt complementare una fa de cealalt. Ca urmare, macromolecula de A-, este constituit din dou lanuri complementare ntre ele, adic este vorba de o deplin reflectare a secvenei nucleotidelor unui lan n secvena celuilalt. 5P 3#$ Bc1ematic, un fragment al celor dou lanuri ale A-, se poate reda astfel+

5@% &
/@ %<(&

AC#CAAC#CCCC
#CAC##CACCCC

/@ %<(&
5@ % &

Bensul lanurilor n raport cu legturile dintre nucleotide este diferit, adic lanurile sunt antiparalele. -ac, de e"emplu, n lanul de deasupra, legturile fosfodiesterice ntre A i C, C i #, # i C .a.m.d. sunt de tipul 5.D/., n lanul inferior legturile fosfodiesterice ntre # i C, C i A, A i C .a.m.d., sunt de tipul /.D5.. Ambele lanuri sunt spirale de dreapta, nfurate n !urul aceleiasi a"e %Iigura 5./.& 3#$ 5P -iametrul 1eli"ului este de 2,* nm, iar fiecare spir a acestuia conine 1* perec1i de baze azotate.

Iig. 5./. 3odelul structurii spaiale dublu0elicoidale a moleculei de A-,

<rientarea antiparalel a celor dou catene reflect o polaritate opus datorit neidentitii grupelor terminale de la fiecare capt al dublului 1eli". -eoarece direcionarea unei catene este n sensul /.D5. i a celeilalte n sensul 5.D/., grupele terminale ale celor dou catene vor fi 5.% & i /.%<(& spre un capt al lor i respectiv /.%<(& i 5.% & spre cellalt capt. Btabilitatea structurii spaiale a A-, este asigurat, pe l4ng legturile de 1idrogen intercatenare, i prin caracterul polianionic al macromoleculei, caracter datorat disocierii grupelor $<( ale radicalului acidului fosforic din fiecare mononucleotid.

1*1

Acizi nucleici Ca polianion, A-, poate stabili interaciuni electrostatice cu proteine bazice %1istone& care conin aminoacizi ncrcai electropozitiv %n nucleoproteide&. Bpre deosebire de A-,, ma!oritatea tipurilor de AR, au o structur monocatenar %fac e"cepie AR, al unor microorganisme i virusuri&, ns mperec1erea bazelor azotate poate avea loc i n acest caz. Iirul de AR, se nfoar singur, form4nd legturi de 1idrogen ntre adenin 0 uracil i guanin 0 citozin. 3olecula de AR, este capabil s0i modifice reversibil forma, dimensiunea, numrul legturilor de 1idrogen n funcie de puterea ionic, p(0ul, temperatura soluiei etc.. Denaturarea ADN. =n anumite condiii de temperatur, p( etc., se produce o distrugere a structurii secundare, adic a structurii dublu elicoidale a A-,. Acest fenomen poart denumirea de denaturare. 5ste caracteristic pentru acizii nucleici ca i pentru proteine i este nsoit de modificarea proprietilor lor. -enaturarea polinucleotidelor poate fi un proces reversibil. 5"perimentele au demonstrat c prin denaturarea diferitelor A-, din bacterii urmat de renaturarea lor, pot s ia natere molecule M1ibrideN de A-,, alctuite din fragmente ale moleculelor iniiale de A-,. Acest fenomen poart denumirea de %i&ridare !olecular" i st la baza ingineriei genetice, domeniu care are drept scop construirea n afara organismului a unor molecule recombinate de A-, cu anumite nsuiri biologice %A-, $ recombinat&.

5.7. roprietile, localizarea i funciile acizilor nucleici

Btructura acizilor nucleici determin proprietile lor fizico0c1imice i funcionale. Acizii nucleici sunt substane de culoare alb, cu aspect filiform, care se dizolv greu n ap c4nd sunt n stare liber dar bine $ atunci c4nd sunt sub form de sruri cu metale alcaline. -e asemenea, se dizolv n soluii de sruri+ AR, 0 n diluate, iar A-, 0 n mult mai concentrate. AR, nu este stabil n mediu alcalin. 3asa molecular a A-, variaz de la 5O1*5 p4n la 2O1*9 i mai mult, iar molecula sa este alctuit din mii de mononucleotide. 3asa molecular a AR, este cuprins ntre /O1*7 p4n la 2O1*8, iar mononucleotidele dintr0o molecul sunt p4n la 708 mii. Boluiile acizilor nucleici posed o mare viscozitate. Av4nd un numr mare de sarcini negative, moleculele lor se deplaseaz n c4mpul electric. < caracteristic a acizilor nucleici o constituie capacitatea lor de a absorbi lumina n zona radiaiilor ultraviolete la 28* nm. reparatele de A-, izolate din diferite organisme se caracterizeaz printr0un raport cantitativ diferit ntre bazele azotate purinice i pirimidinice. Compoziia nucleotidic a A-, este caracteristic pentru un anumit organism, pentru o anumit specie biologic. Altfel vorbind, A-, are o specificitate de specie. e aceste proprieti ale acizilor nucleici au fost elaborate principiile genosistemicii organismelor vii.

1*2

Biochimia produselor alimentare =n diferite celule i esuturi ale unuia i aceluiai organism, A-, are o compoziie nucleotidic identic sau ntr0o mare msur foarte apropiat care nu este influenat nici de factorii fiziologici, nici de condiiile de mediu. #otui, la unele organisme coninutul diferitelor baze ce intr n A-, variaz n condiii largi. Andicele de variabilitate pentru o anumit specie se e"prim prin raportul+

adenina + timina )uanina + cito#ina

care a primit denumirea de coeficient de specificitate al acizilor nucleici. =n limitele fiecrui tip de A-, e"ist o infinitate de posibiliti de variaie a gradului de predominare a uneia sau alteia din perec1ile de baze azotate %A H # i C H C&. Aceasta creeaz posibilitatea e"istenei unei mari diversiti a A-, n lumea organismelor vii. Compoziia nucleotidic a AR, variaz cu mult mai puin dec4t cea a A-,. Bpecificitatea de specie a AR, const n diferita succesiune de distribuie a nucleotidelor n moleculele sale. A-, i AR, sunt localizai n diferite organite celulare. A-, se gsete preponderent n nucleul celular %n compoziia cromozomilor&, ns un mic procent din cantitatea total de A-, din celul este concentrat n mitocondrii i cloroplastele vegetalelor. AR, se gsete at4t n nucleu c4t i n citoplasm' deosebit de bogai n AR, sunt nucleolul i fraciunea ribozomal a microzomilor. =n afar de aceasta, AR, se gsete n cromozomi i sub form solubil n lic1idul citoplasmatic. =n constituia virusurilor intr AR, %virusuri vegetale& i A-, %bacteriofagi, virusuri animale&. Coninutul de AR, n celule nu se distinge nici prin uniformitate, nici prin stabilitate. =n celulele acelor organe unde are loc o intens sintez a proteinelor, coninutul de AR, este de c4teva ori mai mare dec4t cel de A-,. articularitile funcionale ale A-, i AR, sunt str4ns legate de localizarea lor. A-, reprezint materialul de baz al genelor n care sub o form codificat, se pstreaz informaia genetic a organismului care se traduce prin biosinteza proteinelor. -ubla elice i complementaritatea structurii bicatenare constituie baza molecular a fenomenului de autoduplicare sau autore licare a A-, n momentul diviziunii celulare i e"plic faptul c A-,, prin structura sa, reprezint unicul substrat al ereditii. rin mecanismul de replicare se asigur constana conservrii i transmiterii caracterelor ereditare, deoarece cele dou molecule fiice ale A-, nou sintetizate sunt perfect identice cu molecula mam de A-,. =n felul acesta se asigur perpetuarea celulei prin procesul A-, A-,. A-, conine o vast cantitate de informaii i constituie baza molecular a conservrii i transmiterii din generaie n generaie a informaiei genetice. AR, are o alt funcie+ de a informa citoplasma asupra caracteristicilor nscrise n codul genetic. Acest lucru se manifest, nainte de toate, n responsabilitatea AR, n sinteza proteinelor i specificitatea moleculelor ce se sintetizeaz. =n celul e"ist trei specii moleculare distincte de AR,+ mesager %m0AR,& sau informaional, ribozomal % AR,& i de transfer % t0AR,&.

1*3

Acizi nucleici Aceste trei tipuri de AR, rezult prin copierea integral sau parial a secvenei A-,, pe baza unui mecanism molecular denumit transcri 'ie i particip la procesul de biosintez a proteinelor, av4nd fiecare o funcie specific. A N mesager reprezint 501*) din AR, celular. 5ste prezent n nucleu %unde se sintetizeaz& i n citoplasm. Reprezint o molecul monocatenar i conine patru baze azotate+ adenin, guanin, citozin i uracil a cror secven este similar cu cea a uneia din cele dou catene ale A-,. Binteza m0AR, are loc n nucleul celular i se efectueaz printr0un proces enzimatic de transcriere a secvenei nucleotidice de pe A-,, cu deosebire c timina din A-, este nlocuit cu uracil n m0AR,. rocesul de sintez a m0AR, poart denumirea de transcripie' prin acest proces, informaia genetic codificat n secvena de nucleotide a A-, este transcris n secvena de nucleotide a m0AR, prin participarea enzimei ARN-polimeraza A-,0dependent. -up terminarea transcripiei, m0AR, trece la ribozomi unde servete cu matrice %tipar& pentru sinteza proteinelor' fiecare protein sintetizat de celul este codificat de un m0AR, specific care transmite la nivelul ribozomilor Mmesa!ulN preluat de la A-,. Acest mesa! se traduce n secvena aminoacizilor din structura proteinelor sintetizate. #ransmiterea informaiei genetice se reprezint prescurtat sub forma urmtoare, numit Mdogma central a biologiei moleculareN+

autoreplicare A-,

transcriptie

AR,

translatie

proteine

A N de transfer reprezint 1* $ 15) din AR, total al celulei, intr n constituia citoplasmei unde se gsete n stare solubil i neasociat cu proteinele. t0AR, conine 950;* mononucleotide i prezint o structur monocatenar de tip ordonat cu conformaie pliat. >nele poriuni ale t0AR,, n care diversele zone ale monocatenei se apropie mai mult ntre ele i iau natere legturi de 1idrogen ntre secvenele de baze azotate complementare %A0>, C0C& a!unse ntr0o !u"tapunere spaial corespunztoare, au o structur dublu spiralat, dar intracatenar. =n fiecare molecul de t0AR, se gsesc i zone ce nu conin legturi de 1idrogen responsabile de legarea cu aminoacizii n timpul transferului acestora pe ribozomi. Alturi de bazele azotate principale, t0AR, conine i o cantitate de aa0numite baze azotate minore %atipice&+ di1idrouracil, tiouracil, metilguanin, timin, care au rolul de a conferi stabilitate conformaiei sale, favoriz4nd interaciunile ntre acele segmente ale catenei poliribonucleotidice care sunt complementare i care apar ca regiuni spiralate.

Iig. 5.7. Btructura secundar a t0AR,

1**

Biochimia produselor alimentare Iuncia t0AR, const n transportul din citoplasm n ribozomi a aminoacizilor ce intr n constituia unei anumite proteine+ prin aceasta t0AR, ndeplinete rol de MadaptorN molecular, care ordoneaz fiecare aminoacid ntr0o secven precis n lanul polipeptidic, pe baza recunoaterii mesa!ului genetic coninut n m0AR, ataat la ribozomi i provenit de la A-,. entru fiecare aminoacid e"ist un t0AR, specific. A N ribozomal se gsete n constituia ribozomilor %p4n la 85) din masa lor& $ organite unde are loc sinteza proteinelor. Acest tip de AR, reprezint 95 $ :*) din totalul AR, celular. =n general, r0AR, reprezint molecule monocatenare liniare, dar se pot prezenta i ntr0o form elicoidal care rezult dintr0o retrospiralare a aceleiai catene polinucleotidice. Aceast spiralare apare numai n regiuni limitate i anume acolo unde este posibil stabilirea de legturi de 1idrogen ntre bazele azotate ale aceleiai catene. r0AR, ndeplinete un rol structural+ n combinaie cu proteinele corespunztoare formeaz structura ribozomilor.

1*"