El documento proporciona información sobre la bacteria Shigella, incluyendo sus cuatro especies principales (S. dysenteriae, S. flexneri, S. boydii, S. sonnei). Describe las características, clasificación, estructura, virulencia, cuadro clínico, diagnóstico, epidemiología, tratamiento y prevención de Shigella. En particular, se enfoca en dar detalles sobre S. sonnei, incluyendo su clasificación, descripción, genoma, metabolismo, ecología y aplicaciones biotecnol
El documento proporciona información sobre la bacteria Shigella, incluyendo sus cuatro especies principales (S. dysenteriae, S. flexneri, S. boydii, S. sonnei). Describe las características, clasificación, estructura, virulencia, cuadro clínico, diagnóstico, epidemiología, tratamiento y prevención de Shigella. En particular, se enfoca en dar detalles sobre S. sonnei, incluyendo su clasificación, descripción, genoma, metabolismo, ecología y aplicaciones biotecnol
El documento proporciona información sobre la bacteria Shigella, incluyendo sus cuatro especies principales (S. dysenteriae, S. flexneri, S. boydii, S. sonnei). Describe las características, clasificación, estructura, virulencia, cuadro clínico, diagnóstico, epidemiología, tratamiento y prevención de Shigella. En particular, se enfoca en dar detalles sobre S. sonnei, incluyendo su clasificación, descripción, genoma, metabolismo, ecología y aplicaciones biotecnol
ENSAYO SOBRE LA BACTERIA SHIGELLA PPA PRODUCTO PARCIAL DE APRENDIZAJE DE LA MATERIA ECOLOGA Y BIODIVERSIDAD POR ROMARIO GARCIA PONCE
CD. UNIVERSITARIA JUNIO 2014
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RESUMEN
La informacin recapitulada en este ensayo trata sobre la familia Shigella sus caractersticas, clasificacin, diferentes tipos de cepas, su estructura, la accin de virulencia, cuadro clnico, diagnostico, epidemiologia, tratamiento y prevencin. Ms que nada esta familia de microorganismos se caracteriza por causar shigelosis o disentera bacilar en su husped causando diferentes sntomas (nauseas, vmitos y diarreas) incluso pudiendo provocar hasta la muerte. La importancia de este ensayo de anteproyecto es dar a conocer la prevencin de esta bacteria, su tratamiento, asimismo asimilar la informacin sobre esta familia bacteriana de gran importancia ya que sta nos puede causar varios problemas en el rea epidemiolgica al trasmitirse mediante aguas contaminadas con heces fecales que entren en contacto con alimentos y estos sean consumidos por las personas en el mismo estado de contaminacin.
3 NDICE
RESUMEN2 NDICE..3 SHIGELLA....5 DESCRIPCIN GENERAL...5 CLASIFICACIN CIENTFICA..5 CLASIFICACIN.6 CARACTERSTICAS MICROBIANAS.6 FISIOLOGA Y METABOLISMO...6 ESTRUCTURA ANTIGNICA...7 ESPECIES REPRESENTATIVAS7 Shigella sonnei.8 Descripcin y significado Estructura del genoma Estructura celular y metabolismo Ecologa Aplicaciones biotecnolgicas Shigella flexneri13 Descripcin y significado Estructura del genoma Estructura celular y metabolismo
4 Ecologa Aplicaciones biotecnolgicas Shigella dysenteriae.15 Descripcin Estructura celular y metabolismo Ecologa Aplicaciones biotecnolgicas Shigella boydii...16 Descripcin y significado Estructura del genoma Estructura celular y metabolismo Ecologa/patologa Aplicaciones biotecnolgicas ATRIBUTOS DE VIRULENCIA...19 CUADRO CLNICO...21 DIAGNOSTICO EN EL LABORATORIO...21 AISLAMIENTO DE Shigella.......22 EPIDEMIOLOGIA..24 SENSIBILIDAD A ANTIMICROBIANOS. TRATAMIENTO.24 CONTROL Y PREVENCIN..25 REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS..27
5 Shigella Shigella es un gnero de bacterias con forma de bacilo Gram negativas, no mviles, no formadoras de esporas e incapaces de fermentar la lactosa, que pueden ocasionar diarrea en los seres humanos. Fue descubierto hace 115 aos por el cientfico japons Kiyoshi Shiga, de quien tom su nombre.
DESCRIPCIN GENERAL Bacilos Gram negativos, no esporulantes e inmviles, fermentador, Oxidasa negativo, tienen forma de barra. Son Aerobios facultativos. Las especies de este gnero tienen un patrn antignico complejo y su clasificacin se basa en sus antgenos O somticos, muchos de los cuales son comunes a otros bacilos entricos, como E. coli. La membrana externa hace al microorganismo sensible a la desecacin. CLASIFICACIN CIENTFICA Dominio: Bacteria Filo: Proteobacteria Clase: Gammaproteobacteria Orden: Enterobacteriales Familia: Enterobacteriaceae Gnero: Shigella (Shiga) Especies Shigella boydii Shigella dysenteriae Shigella flexneri Shigella sonnei
Tincin de Gram de Shigella flexneri. Shigella. Morfologa. CDC.
6 CLASIFICACIN Hay varias especies diferentes de bacterias Shigella, clasificados en cuatro subgrupos: Serogrupo A: S. dysenteriae (12 serotipos), es un tipo que se encuentra en los pases del mundo en desarrollo donde ocasiona epidemias mortferas. Serogrupo B: S. flexneri (6 serotipos), causante de cerca de una tercera parte de los casos de shigelosis en los Estados Unidos. Serogrupo C: S. boydii (23 serotipos). Serogrupo D: S. sonnei (1 serotipo), conocida tambin como Shigella del grupo D, que ocasiona shigelosis en pases desarrollados y se est aislando en pases en vas de desarrollo por factores como el turismo etc. Los grupos AC son fisiolgicamente similares, S. sonnei (grupo D) puede ser distinguida del resto en base de pruebas de metabolismo bioqumico.
CARACTERSTICAS MICROBIOLGICAS.
Shigella es un bacilo Gram negativo perteneciente a la familia Enterobacteriaceae, que se encuentra estrechamente relacionada con el gnero Escherichia, por sus propiedades bioqumicas, serolgicas y por similitudes genticas. Se caracteriza por no fermentar la lactosa, ser inmvil, no produce lisina decarboxilasa y raramente produce gas a partir de hidratos de carbono. Su identificacin se basa en caractersticas bioqumicas y antignicas. En base a ello se describen cuatro especies (cuadro 1), todas ellas pueden causar disentera, aunque con diferente gravedad.
FISIOLOGA Y METABOLISMO.
En los medios de cultivo diferenciales, empleados habitualmente para cultivo de bacilos Gram negativos entricos, aparecen como colonia no fermentan la lactosa
7 en medios de cultivo diferenciales (agar Mac Conkey lactosa, agar Salmonella, Shigella, etc.) Todas son inmviles, no producen H2S y la produccin de gas a partir de la glucosa slo se observa en algunas cepas de S. flexneri, lo que las diferencia de Salmonella. A diferencia de E.coli, no producen lisina decarboxilasa, utilizan acetato como fuente de carbono y no fermentan la lactosa, con excepcin de algunas cepas de S.sonnei, que lo hacen en forma lenta. Son ms lbiles a condiciones desfavorables que Salmonella, su viabilidad se ve comprometida frente a cidos, sales biliares, desecacin y muchos desinfectantes. Aun as pueden sobrevivir a temperatura ambiente durante meses.
ESTRUCTURA ANTIGNICA.
Todas las especies presentan antgeno O, termoestable y pueden o no poseer antgeno K, termolbil. Este ltimo no interviene en la serotipificacin, pero puede interferir en la determinacin antgeno O; lo cual se evita mediante la ebullicin de la cepa. Los cuatro serogrupos se corresponden con las especies, tal como se observa en el cuadro 1. A su vez, cada serogrupo puede subdividirse en tipos, en base a variantes del antgeno O, estos serotipos se designan mediante nmeros arbigos. Pueden diferenciarse adems serovares, en algunas especies. El conocimiento detallado de la estructura antignica resulta de utilidad para estudios epidemiolgicos y en la formulacin de vacunas.
ESPECIES REPRESENTATIVAS
Cuando Shigella fue descubierto por primera vez por un microbilogo japons, Kiyoshi Shiga, en 1896, se llam inicialmente Bacillos disenteras. El nombre describe la produccin de factores txicos por el organismo.
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Shigella sonnei
Clasificacin Hay 4 especies de Shigella clasificadas sobre la base de las diferencias serolgicas bioqumicos. Shigella sonnei est en la categora D serogrupo que consiste en 1 serotipo.
Especies de Shigella clasificacin subdivisin: El serogrupo A: S. dysenteriae (12 serotipos) El serogrupo B: S. flexneri (6 serotipos) El serogrupo C: S. boydii (23 serotipos) Sergoroup D: S. sonnei (1 serotipo)
Esta clasificacin se basa en el componente de antgeno O del lipopolisacrido (LSP) presente en la membrana externa de las bacterias. Los serogrupos A, B, C son fisiolgicamente muy similar, mientras que la Shigella sonnei es diferente debido a su beta-D-galactosidasa positivo y ornitina descarboxilasa reacciones bioqumicas de ensayo
Descripcin y significado Sonnei Shigella es unos no mviles, no formadores, anaerobios facultativos Gram- negativos bacteria. Su caracterstica no mvil significa que esta especie no tiene flagelos para facilitar su movimiento como muchas otras enterobacterias humano. Shigella sonnei es una bacteria con forma de vara y es la bacteria que causa la disentera fermentan la lactosa. Shigella sonnei es extremadamente frgil en parmetros experimentales. Su hbitat natural es en un entorno de pH bajo tal como el tracto gastrointestinal humano. Su temperatura ambiental ptima es 37 grados Celsius, similar a la temperatura en el cuerpo humano. Por lo tanto, el tracto gastrointestinal de humanos parece ser el nico husped natural que se encuentra de Shigella sonnei que sabemos hasta ahora.
9 Shigella sonnei fue aislado por primera vez con xito a un paciente de 5 aos en Japn. Es una bacteria que est estrechamente relacionada con E. coli. Se conoce desde el principio que la Shigella sonnei est relacionada con E. coli , sin embargo, Shigella ha evolucionado a partir de muchas cepas diferentes de E. coli . Desde la ruta evolutiva de distancia de la semejanza de la E. coli genoma, Shigella ha sido clasificada como otra especie. Genoma altamente evolucionado Debido de Shigella, se ha convertido en un patgeno humano altamente especfico debido a su gran progreso evolutivo que implica su ganancia y prdida de funcin comparativa continua a E. coli. Tanto en los pases desarrollados y en desarrollo, la shigelosis entrica enfermedad infecciosa, causada por Shigella sonnei infeccin, ha sido la causa ms comn de enfermedades endmicas en esas reas. S. sonnei sigue siendo una gran amenaza transmitida por los alimentos para la salud pblica en muchos pases desarrollados, donde las cuestiones de saneamiento son monitoreados de cerca. Esta enterobacterias se transmite generalmente por los alimentos crudos o agua contaminados. En los EE.UU., el 70% de los casos de shigelosis son causadas por Shigella sonnei.
Estructura del genoma. Shigella sonnei tiene un genoma de ADN circular. Se utiliza tanto cromosmico y gnico codificado plsmido para su virulencia. Esta especie ha sido objeto de completar la secuenciacin del genoma. Tiene un tamao de genoma ~ 4Mb. Shigella sonnei ' cromosoma s tiene el mismo origen de replicacin y la terminal como las de E. coli ; Esto no slo significa que son evolutivamente relacionados, pero sugieren que lo ms probable utilizan el mismo mecanismo celular para replicar. Hay muy pocas propiedades bioqumicas que pueden distinguir sonnei Shigella a partir de E. coli . En todos los genomas de Shigella, los operones rRNA, una secuencia que est altamente conservada entre los procariotas, se asignan a aproximadamente las mismas posiciones relativas que en E. coli lo que indica que la Shigella sonnei y E. coli no pas por la recombinacin de ADN entre los operones rRNA.
10 La caracterstica ms fascinante de las cepas de Shigella sonnei y todas las otras especies de Shigella es que sus genomas son muy dinmicos. Agotan el uso del elemento de la secuencia de insercin (IS-elemento) en la caracterizacin de su genoma dinmico en trminos de causar reordenacin del ADN constante tal como deleciones, translocacin, y las inversiones. Es a travs del uso de IS- elementos que E. bobina difiere de otras especies de Shigella. Es evidente que Shigella cromosoma tiene sitios Inversiones en su origen de los sitios de replicacin y terminales que pueden ser posibles "puntos calientes" de recombinacin para la insercin de elementos de otras bacterias genoma mvil. Tambin es a travs del uso de IS-elemento que Shigella sonnei y otras especies de Shigella pueden caracterizarse como altamente virulenta. Al igual que todas las otras especies de Shigella, Shigella sonnei tiene plsmidos que aumentan la toxicidad del microbio a su anfitrin o de otros organismos que les rodean. Ellos producen una toxina llamada la "toxina de Shiga". Se trata de un tipo nico de toxina que trabaja su toxicidad en el cuerpo de muchas maneras que traer dao potencial a las neuronas, citoplasma de las clulas y las clulas epiteliales intestinales.
Estructura celular y metabolismo Shigella sonnei es una forma de varilla, bacteria Gram-negativa. Su membrana externa se llena con lipopolyscharride (LPS), una caracterstica comn de las bacterias Gram-negativas. El componente de antgeno O de LPS en Shigella sonnei se caracteriza de manera diferente entre las otras especies de Shigella. Adems, LPS de esta bacteria juegan un papel importante en la virulencia bacteriana. Hasta el momento slo se sabe que Shigella sonnei puede sobrevivir en el cuerpo humano, por lo tanto, su mecanismo de infeccin define S. sonnei capacidad 's para vivir. S. sonnei , como la mayora de las especies de Shigella, pasa la mayor parte de las veces intracelularmente durante la infeccin y es muy mvil dentro de las clulas mediante la polimerizacin de actina.
11 A diferencia de muchas otras bacterias patgenas, S. sonnei no utiliza flagelos para su quimiotoxicidad y la invasin de tejidos. Sin flagelos, S. sonnei menudo puede escapar del sistema inmune humano del TLR-5 (Toll-like receptor) que usualmente median la inmunidad innata y adaptativa mediante la deteccin del dominio conservado en muchas bacterias que utilizan flagelina para la motilidad. Aunque S. sonnei no puede ser considerado como una bacteria mviles ya que carece de flagelina para el movimiento, sin embargo, que facilita el movimiento mediante el uso de un mecanismo atpico de la motilidad, por polimerizacin de actina. Tal mecanismo no es reconocible para el sistema inmunitario humano y tambin es un tipo de mecanismo de mviles que ahorra energa. Metabolismo: Fermentacin la lactosa es una propiedad bioqumica utilizada para distinguir Shigella de la bacteria estrechamente relacionada con E. coli . Sin embargo, S. sonnei asla lactosa fermento en proceso mucho ms lento que otras especies de Shigella. La propiedad bioqumica nica de S. sonnei se puede explicar genticamente. En genoma SD197 y Ss046 el gen lacZ clave, la codificacin de beta-D-galactosidasa, se adjunta a gen que codifica para la funcin de transporte Lacy galactosa. Muchos de los genes en S. sonnei se clasifican como pseudogenes. Los pseudogenes son secuencias genticas espordicamente situados en el S. sonnei genoma. Estn sujetos a la caries en un momento dado. La naturaleza y el propsito de pseudogn todava sigue siendo difcil de alcanzar. El resultado de este gen funcional espordica perdidas de transporte galactosidasa en S. sonnei explica el proceso de fermentacin de la lactosa lento debido al hecho de que pseudogen es sujeto a la decadencia constante de su sitio original de la regin codificada inicial. Gran parte de la S. sonnei mecanismo metablico 's sigue siendo difcil de alcanzar, ya que se considera que es una especie ms evolucionada que otros serogrupos de Shigella. S. sonnei se sabe que es menos virulenta que otras especies de Shigella, ya que no mata a su husped inmediatamente. Tal vez esto explica tambin por qu S. sonnei es ahora la shigelosis ms comn que causa especies que impregna la mayora de los pases desarrollados.
12 Ecologa El husped primario y reservorio natural conocido en este punto para Shigella sonnei y entre todas las otras especies de Shigella es el tracto gastrointestinal humano. Shigella puede sobrevivir en el material contaminado fecal, pero tiene una baja tasa de supervivencia sin el ambiente cido ptimo en el tracto intestinal como su entorno. La bacteria se sabe que es capaz de sobrevivir en la ropa sucia para un mximo de siete semanas. En ambientes de agua dulce, puede vivir hasta 5 das y en agua salada durante 12 a 30 horas. Se ha registrado que Shigella sonnei no puede sobrevivir en las superficies lisas de los tomates. No hay casos conocidos de otro reservorio natural han demostrado ser el husped natural Shigella sonnei que no sea el tracto intestinal humano. Algunas investigaciones han investigado la posibilidad de que las amebas de vida libre que envuelve la bacteria Shigella como un modo de recoleccin de Shigella sonnei en un entorno fuera del husped humano. Las amebas son formas de vida microscpicas unicelulares que tienen la capacidad de vivir en el medio ambiente sin un anfitrin. Pueden cambiar las formas y engullir otras clulas. Mucho an no se sabe sobre el origen y la formacin de estas clulas fenomenales. Se ha demostrado experimentalmente que las especies de amebas de vida libre de Acanthamoeba tienen la capacidad de absorcin virulentas y no virulentas de S. sonnei. Estas amebas pueden promover el crecimiento de muchas diferentes bacterias patgenas dentro de sus quistes en los entornos experimentales, lo que da a la bacteria patgena como Shigella sonnei un microhbitat que los protege del ambiente exterior. Sin embargo, la conclusin natural de amebas recoleccin de honorarios viviendo Shigella sonnei no se ha encontrado; Por lo tanto, la posible anfitrin para Shigella sonnei que no sea el tracto GI humano todava sigue siendo un factor difcil de alcanzar.
Aplicaciones en la biotecnologa Shigella sonnei es la causa de una enfermedad infecciosa humana entrica, la shigelosis. Su reservorio natural es en el tracto intestinal humano, por lo tanto, S. sonnei slo es conocida por su enfermedad que causa la capacidad. S. sonnei no
13 se utilice para ningn biotecnologa conocida beneficiar a la sociedad. Mucho an se necesita investigar el desarrollo evolutivo de E. coli a las especies de Shigella, con el fin de responder a las preguntas sobre la naturaleza de la eleccin Shigella de depsito en el tracto intestinal humano.
Shigella flexneri
Clasificacin Entero-invasivo bacteria Gram-negativa Descripcin y significado Shigella flexneri es una formacin de, bacteria no mvil, no de esporas en forma de varilla que es fisiolgicamente similar a Shigella dysenteriae, Shigella boydii, y Escherichia coli . Es importante debido a que causa la shigelosis, una diarrea sanguinolenta aguda. Shigella flexneri es la causa ms comn de la forma endmica de la shigelosis, y la forma endmica es la causa de la mayora de muertes relacionadas con el shigelosis. Aunque no es un gran problema en los pases desarrollados, Shigella flexneri (especficamente Shigella flexneri 2a) es un importante problema de salud pblica en los pases en desarrollo. Shigella fue reconocido como la causa de la disentera bacilar en la dcada de 1890 por Shiga, de ah el nombre del gnero (OTAN et al.). Shigella flexneri 2a cepa 301 se aisl y se secuenci por Jin et al. Ellos aislaron la bacteria de un paciente shigelosis en China en 1984. Estructura del Genoma Shigella flexneri 2a cepa 301 tiene un genoma secuenciado completamente. Se compone de un nico cromosoma circular 4.607.203 pb dsDNA y un plsmido de virulencia 221618 pb. El cromosoma tiene un 45,8% de contenido de GC y 272 genes. El plsmido de virulencia codifica determinantes de virulencia, incluyendo antgenos plsmido invasin (IPA) y el aparato de secrecin MXI-Spa de tipo III, pero el cromosoma tambin contribuye a la virulencia. Virulencia implica una compleja interaccin de regulacin entre el cromosoma y el plsmido de virulencia. Shigella flexneri ' similitud fisiolgica s de Escherichia coli podra muy bien tener una base evolutiva. Un anlisis gentico reciente sugiere que la Shigella puede no ser un gnero debido a sus especies pueden tener orgenes independientes de Escherichia coli hace algn lugar entre 35.000 y 270.000 aos.
14 Estructura celular y el metabolismo El lipopolisacrido (LPS) se encuentra en la superficie de Shigella flexneri . Es la porcin de azcar que se repiten (O-antgeno) de LPS que define cada serotipo (OTAN et al.). Esta especificidad polisacrido se puede utilizar para apuntar a serotipos especficos de Shigella. Flexneri Shigella causa la infeccin a travs de un sistema de secrecin de tipo III. El sistema de secrecin acta como una "jeringa biolgica" que inyecta una protena llamada Ipa en las clulas epiteliales. Ipa induce la endocitosis de la bacteria y la posterior lisis de la membrana vacuolar que libera la bacteria en el citoplasma, donde los prolifera bacteria. Shigella flexneri es un anaerobio facultativo. Se hace de ATP a travs de la respiracin aerbica en presencia de oxgeno y a travs de la fermentacin en ausencia de oxgeno. A pesar de que est muy relacionada con Escherichia coli, Shigella flexneri puede diferenciar porque no fermenta la lactosa o lisina decarboxylate. Ecologa Algunas cepas de Escherichia coli pueden ejercer un efecto antagonista sobre Shigella flexneri. Si Shigella flexneri se cultiva en el tracto digestivo de un ratn libre de grmenes durante 1 da antes de la introduccin de Escherichia coli , Shigella flexneri desaparece dentro de 8 das. Sin embargo, lo que permite Shigella flexneri a crecer en los ratones sin Escherichia coli permite el desarrollo de Shigella flexneri resistente a los efectos antagonistas de Escherichia coli , pero la resistencia slo se produjo in vivo y no in vitro. La Escherichia coli poblacin resistente emerge sin exposicin a la Escherichia coli , por lo que la Escherichia coli -resistencia no parece ser una influencia selectiva en la aparicin de la poblacin resistente (Ducluzeau y Raibaud). Shigella flexneri es frecuente en los pases en desarrollo, porque el saneamiento es deficiente. La bacteria se encuentra en las heces de los individuos infectados, por lo que el agua contaminada con heces puede actuar como una va de infeccin (Huang y Zhou).
Aplicacin a la Biotecnologa Shigella flexneri es un patgeno bacteriano que no se utiliza para la biotecnologa.
15 shigella dysenteriae
Descripcin Shigella dysenteriae tiene el genoma ms pequeo del gnero Shigella, que contiene otras tres especies. Su genoma consta de un nico cromosoma circular y 4.369.232 pares de bases. Se lleva un plsmido asociada a la invasin que contiene los genes que codifican para la invasin de las clulas epiteliales y la produccin de la toxina de Shiga. La toxina Shiga es una potente toxina tipo AB con 1-A y 5-B subunidades. Subunidades B se unen a la clula y se inyecta la subunidad A. Por la escisin de un residuo de adenina especfica del ARN ribosmico 28S en los ribosomas 60S, la toxina inhibe la sntesis de protenas, causando la muerte celular. Estructura celular y el metabolismo Dysenteriae Shigella fermenta la glucosa a travs de la fermentacin cido mixta; sin embargo, no produce ningn gas. No produce H 2 S, phenylalaninedeaminase o ureasa y no utiliza citrato como nica fuente de carbono. Toxina Shiga Shigella dysenteriae, produce la toxina de Shiga, que se utiliza para infectar clulas husped. Toxina de Shiga tiene un efecto citotxico sobre las clulas epiteliales intestinales. Tiene un peso molecular de 68.000 daltons. La estructura de la toxina se compone de dos tipos de subunidades, las subunidades alfa y beta subunidades. Subunidades beta son responsables de la unin a la clula husped, mientras que las subunidades alfa son responsable del envenenamiento de la clula husped. Toxina Shiga mecanismo Toxina de Shiga ataca la superficie de los vasos sanguneos en el interior del tracto gastro-intestinal. Las subunidades beta de la toxina de Shiga se unen a la clula husped. Las subunidades alfa se inyectan entonces en la clula, y estas subunidades trabajan inhibir la sntesis de protenas mediante la desactivacin de los ribosomas. Esto lleva finalmente a la muerte de la clula, y hemmorrhage de la
16 superficie whcich se une a. Esto da cuenta de la sangre se ve en la diarrea. La toxina no slo afectan el tracto digestivo, sino que ataca a las estructuras principales asociados con la funcin de los riones. El ataque a estas estructuras lleva a la insuficiencia renal y el desarrollo de Sndrome Urmico Hemoltico. [1] Ecologa Dysenteriae Shigella interacta con los seres humanos, otros primates, y las moscas. Los seres humanos actan como huspedes para la infeccin, lo que conduce a la disentera bacilar. Las moscas pueden actuar como medio de transporte para las bacterias, el contagio a otros hosts. Dysenteriae Shigella puede sobrevivir en materiales contaminados con heces que pueden incluir agua, alimentos, y otros materiales. Se puede transmitir por contacto de persona a persona. Se transmite generalmente con la ingestin de agua y alimentos contaminados con la bacteria. Puede causar transmitidas por los alimentos o el agua epidemias. El agua puede contaminarse si alguien que tiene shigelosis nada en l. Los cultivos pueden estar contaminados con la bacteria si se riegan con agua contaminada. Esto causar grandes problemas si estos cultivos contaminados se distribuyen a travs de una gran regin, la exposicin de cualquier persona que come los cultivos a la infeccin. Las epidemias son ms probables en los pases ms pobres que carecen de sistemas de tratamiento de agua y saneamiento adecuado. Aplicacin a la Biotecnologa Shigella dysenteriae es un patgeno bacteriano que no se utiliza para la biotecnologa.
Shigella boydii
Descripcin y significado En el 1950 de Shigella fue aceptado como un gnero y dividi en subgrupos en cuatro especies: S. dysenteriae , S. fexneri , S. boydii y S. sonnei (tambin referido como subgrupos de AD).
17 Apariencia: Shigella boydii. Es un bacilar (en forma de varilla) bacteria gram- negativa que no forma esporas y es generalmente inmviles Hbitat: S. boydii habita en el intestino grueso y el recto de los humanos y otros primates. Puede sobrevivir en las heces y el suelo y / o la comida / agua contaminada con materia fecal. Por ejemplo, en Guadalajara, Mxico, Salmonella y Shigella especies se encuentran en el jugo recin exprimido de naranja, naranjas, y los trapos de limpieza que se encuentra en los mercados pblicos y puestos callejeros. S. boydii fue encontrado especficamente en las naranjas y los trapos de limpieza. Esto puede indicar mtodos sanitarias deficientes de procesamiento de alimentos que dio lugar a la exposicin de aguas residuales crudas. Importancia: patgeno humano que causa la disentera bacilar Los serotipos: Hay 20 S. boydii serotipos. Gentica: bacteria Shigella se cree que son derivados de diferentes cepas de Escherichia coli. S. boydii es las ms divergentes genticamente y algunos serotipos parecen estar ms estrechamente relacionadas con otras especies. S. boydii tipo 13, por ejemplo, secuencia comparte similitudes con el Vibrio cholerae para los genes que codifican el antgeno O, la parte de polisacrido del lipopolisacrido (LPS), y por lo tanto stos pueden estar ms estrechamente relacionado. LPS es una endotoxina y parte de la membrana externa de bacterias Gram-negativo. Estructura del Genoma Tamao del genoma: boydii Shigella (Sb227) serotipo 4 - cromosoma ADN circular con 4.519.823 nt (446 genes); El plsmido (pSB4_227) - 126 697 nt (149 genes). Ambos fueron completados 2005/11/18. Realizar patgenos: El plsmido, pSb4_227, ha post-segregacin matando sistemas AFMV / mvpT, que se encuentra en los plsmidos todas las especies de Shigella y de CCDA / ccdB no se encuentra en alguna. Estructura Celular y Metabolismo Estructura de la clula: caractersticas estructurales de Shigella que siguen de las bacterias Gram-negativas. Mayora de las investigaciones de acuerdo en que Shigella son inmviles, pero algunas evidencias sugieren que ellos de hecho tienen flagelos, aunque la movilidad no es necesaria para la infeccin del intestino. Los flagelos tienden a estar en uno de los polos de la clula y aproximadamente 10 micras de longitud y 12-14nm de dimetro. Los genes que codifican para los
18 flagelos en S. dysenteriae , S. flexneri , S. boydii y S. sonnei se encontr que era diferente y atribuir a la diversidad gentica entre las especies. Metabolismo: S. boydii, cuando se encuentran en el intestino, ir aunque vas metablicas anaerbicas pero puede sobrevivir fuera del cuerpo debido a su capacidad de utilizar vas aerobias. [14] Ms especficamente, S. boydii, por lo general no tiene la capacidad enzimas oxidasas sino catalasa enzimas (cataliza la reduccin de H2O2-> H20). Metil prueba roja es positiva, lo que significa que la bacteria utiliza una va de fermentacin de cido mixto. Voges-Proskauer y Simmons reacciones citrato son negativos, lo que significa que este organismo no utiliza la va butilenglicol o producir acetona. De la lisina descarboxilasa, arginina dihidrolasa y ornitina descarboxilasa no estn presentes. S. boydii no produce H2S, no hidroliza la urea y no crece en caldo KCN. Los hidratos de carbono son generalmente fermentan y stos incluyen glucosa (en ausencia de la produccin de gas), D-manitol, arabinosa, trehalosa y manosa. Ecologa / Patologa La bacteria Shigella causan diarrea y la shigelosis (disentera bacilar) a travs de la transmisin oral-fecal. Shigella es un agente altamente infeccioso capaz de infectar a un husped con menos de 20 clulas con un inicio de alrededor de 12- 48 horas, en condiciones favorables. Una vez ingerida, la Shigella hace su camino a travs del tracto gastrointestinal hasta que llega a las clulas epiteliales de la mucosa intestinal, no infecta, causando irritacin, inflamacin y necrosis (hinchazn y rotura de las clulas infectadas, que se propaga la infeccin). Los sntomas generales incluyen calambres estomacales, fiebre alta, moco en las heces, y diarrea con sangre debido a la ulceracin de la mucosa intestinal y el recto. En la mayora de los casos estos sntomas son leves y se resuelven en aproximadamente una semana, pero otros casos pueden llegar a ser lo suficientemente grave como para causar la muerte sin la atencin mdica adecuada. Los ancianos, los muy jvenes y las personas debilitadas por la enfermedad son mucho ms sensibles a las bacterias. En nios muy pequeos fiebre muy alta tambin puede ir acompaada de convulsiones. [4] Por lo general, las bacterias Shigella se encuentran en reas con mala higiene. Alimentos lavados con agua contaminada o no se limpian adecuadamente tambin puede ser un objetivo. En 1998 un brote de shigelosis se produjo en Chicago debido a Shigella boydii tipo 18 se encuentra en el cilantro y el perejil en la ensalada de frijoles. [6] Especies de Shigella representan menos del 10% de todas las enfermedades transmitidas por los alimentos reportados en los Estados Unidos. Con un estimado
19 de 300.000 casos anuales de shigelosis en los EE.UU., el porcentaje exacto debido a la contaminacin de los alimentos es desconocida, debido a la dificultad de aislar las bacterias de los alimentos, pero teniendo en cuenta su capacidad de infeccin que el nmero es indudablemente alto. Aplicacin a la Biotecnologa Shigella boydii es un patgeno bacteriano que no se utiliza para la biotecnologa.
ATRIBUTOS DE VIRULENCIA. La disentera bacilar resulta de la adherencia, e invasin de clulas epiteliales de la mucosa del leon terminal y colon, con inflamacin y ulceracin de la misma. Modelos experimentales: Dado que se trata de un patgeno exclusivamente humano, no existen buenos modelos experimentales animales, con la excepcin de primates. La querato - conjuntivitis lograda al inocular Shigella en la conjuntiva de cobayos (test de Srny) ha sido usada para demostrar la adherencia y capacidad invasiva de 40 las cepas. El modelo de asa ligada de conejo se ha empleado para estudiar acumulacin de lquido en la luz del segmento. La mayora de nuestro conocimiento en la patogenia de la infeccin por Shigella se ha logrado mediante cultivos celulares, en especial la lnea celular HeLa. Invasividad: La invasin es la penetracin activa de la bacteria en la clula husped. Las lesiones inflamatorias en la mucosa colnica afectada por Shigella se hallan fundamentalmente a nivel de las placas de Peyer, lo que sugiere que la bacteria podra ingresar inicialmente por las clulas M, naturalmente fagocticas, encargadas de captar antgenos de la luz intestinal y presentarla al tejido linfoide de la placa de Peyer subyacente. Pero tambin se observa el ingreso a travs de clulas no fagocticas. En cultivos celulares, la bacteria inicialmente se adhiere a la clula, provoca la reorganizacin de la actina del citoesqueleto celular en las inmediaciones y la formacin de pseudpodos. La clula husped, normalmente no fagoctica engloba e ingiere a la bacteria adherida, la cual a su vez escapa del fagosoma y se multiplica en el citoplasma de la clula HeLa. Continan producindose reordenamientos de actina en la vecindad de la bacteria que le permiten moverse a travs de la clula y luego pasar otra contigua. Una vez en libre en el citoplasma, la bacteria exhibe dos tipos de movimiento, por un lado, la
20 polimerizacin de actina en un extremo de la bacteria crea una estructura tipo "cola de cometa", que propulsa a la bacteria a travs del citoplasma, por otro lado, tambin se ha observado movimiento unidireccional de la bacteria lo largo de filamentos de actina. Muchos genes involucrados en la invasin han sido identificados (ipa invasin plasmid antigens) y se localizan en plsmidos de peso molecular 120 -140 MD. Algunas protenas codificadas por esos plsmidos, intervienen por ejemplo en la ruptura de la pared del fagosoma, o bien son exportados a la superficie de la bacteria. Las integrinas, protenas de superficie celular podran ser los receptores de las protenas Ipa. Las protenas Ipa slo parecen actuar luego de que las bacterias han ingresado a travs de las clulas M. Muerte celular: El crecimiento bacteriano intracelular causa cesacin de la sntesis proteica. Inicialmente se atribuy la muerte celular a la toxina de Shiga, pero luego se demostr que mutantes que no la poseen, tambin son capaces de determinan la muerte celular. Ms recientemente se ha sealado a la induccin de apoptosis o muerte celular programada como responsable de la muerte celular. Toxinas: La llamada toxina de Shiga, es potente neurotxica, que determina convulsiones. Clsicamente se crea era producida exclusivamente por S.dysenteriae tipo 1. Tambin se han encontrado toxinas similares en otras especies de Shigella y en ciertas cepas de E.coli. Es una toxina de tipo A-B, que se libera al medio durante la lisis bacteriana. Esta toxina se une a 41 las clulas de mamferos, es internalizada por endocitosis y finalmente detiene la sntesis proteica a nivel ribosomal. Tiene mltiples actividades txicas: induce la acumulacin de lquido en el modelo de asa ileal ligada de conejo, acta como neurotoxina, e induce la apoptosis, aunque como se dijo, esta ocurre an con mutantes no productoras de toxina. Su papel ms relevante es en el Sndrome hemoltico urmico, donde el efecto principal es el dao a nivel de vasos sanguneos. Al menos dos toxinas ms, con actividad de endotoxina han sido descritas y que pueden hallarse en especies distintas de S. dysenteriae. Se denominan ShET1 y ShET2 y seran responsables de la acumulacin de lquidos en el asa intestinal y de la diarrea acuosa que puede observarse en la fase inicial de la Shigelosis. Lipopolisacrido: Su efecto principal es contribuir al dao celular, y no parece intervenir ni la invasin, replicacin intracelular ni en la diseminacin entre clulas. Cepas rugosas de Shigella, que no poseen antgeno O conservan su capacidad de invadir y replicarse en cultivos celulares, pero son incapaces de causar inflamacin en el test de Srny.
21 CUADRO CLNICO. La enfermedad puede ocurrir a cualquier edad pero es ms frecuente entre el segundo y tercer ao de vida, es rara antes de los 6 meses y disminuyendo su incidencia luego de los 5 aos de edad. Habitualmente se presenta con sntomas que evidencian colitis inflamatoria severa: diarrea con sangre, mucus o pus, fiebre elevada, aspecto txico, dolor abdominal, pujos, tensemo y/o prolapso rectal., Tambin puede observarse diarrea acuosa, sobre todo a principio del cuadro clnico. En adultos sanos, ocurren cuadros no tan severos. Se presume que en nios pequeos se observan las formas ms graves debido a la falta de inmunidad preexistente. La mayora de los episodios de Shigelosis en pacientes previamente sanos son autolimitados y se resuelven en 5 a 7 das sin secuelas. Las complicaciones ms severas, que pueden incluso comprometer la vida se ven en inmunodeprimidos, desnutridos y nios pequeos. Estas son fundamentalmente alteraciones hidro- metablicas (deshidratacin, hiponatremia, hipoglicemia) y complicaciones intestinales como megacolon txico o perforacin intestinal. La bacteriemia por Shigella es mucho ms rara y se observa casi exclusivamente en inmunodeprimidos. Ms frecuente es la bacteriemia por grmenes de la flora intestinal. Las convulsiones y otras manifestaciones neurolgicas, descritas originalmente en infecciones por S.dysenteriae serotipo 1, se observan casi exclusivamente en menores de 5 aos y se atribuyen a la toxina de Shiga, pero tambin se observan en infecciones por otras especies y serotipos y han sido atribuidas a disturbios metablicos (hiponatremia, hipoglicemia, etc.) La edad pequea, el cuadro clnico severo y la presencia de sepsis conllevan adems mayor mortalidad.
DIAGNSTICO DE LABORATORIO.
Para certificar el diagnstico etiolgico se requiere la demostracin de su presencia en materias fecales, ya sea por tcnicas de cultivo clsicas o bien por la demostracin de su material gentico mediante biologa molecular.
Una muestra de materias fecales del paciente debe ser obtenida, en lo posible al inicio de la enfermedad y previo al suministro de antimicrobianos. Una dificultad habitual es la conservacin de la muestra hasta su procesamiento, ya que retardos en el mismo pueden afectar la viabilidad de germen, Se dispone para ello de
22 medios de transporte (p. Ej. Cary Blair y otros) para conservar la muestra a temperatura ambiente y de esa manera aumentar las posibilidades de aislamiento.
El examen microscpico con tincin de azul de metileno o Gram permite detectar la presencia de leucocitos polimorfonucleares que sugieren infeccin por Shigella aunque no es exclusivo de este germen. En la shigelosis usualmente se observan abundantes polimorfonucleares.
Para el cultivo se utilizan diversos medios de cultivo incluyen medios selectivos y diferenciales (agar Salmonella, Shigella, agar Mac Conkey Lactosa, agar Hektoen)
Las colonias lactosa negativas son estudiadas mediante pruebas bioqumicas y aglutinadas con antisueros para completar su caracterizacin.
Se han utilizado diversas tcnicas de biologa molecular: sondas de ADN para detectar genes de virulencia, localizados plsmido de 120 MD, sin amplificacin y PCR. Esta ltima tcnica puede detectar cantidades muy pequeas de bacterias, sus desventajas radican en su complejidad y costos.
AISLAMIENTO DE Shigella. Salmonella Shigella Agar. Medio de cultivo utilizado para el aislamiento de Salmonella spp. y de algunas especies de Shigella spp. a partir de heces, alimentos y otros materiales en los cuales se sospeche su presencia.
Fundamento Es un medio de cultivo selectivo y diferencial. La selectividad, est dada por la sales biliares y el verde brillante, que inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas, de la mayora de los coliformes y el desarrollo invasor del Proteus spp. Es diferencial debido a la fermentacin de la lactosa, y a la formacin de cido sulfhdrico a partir del tiosulfato de sodio. Los pocos microorganismos fermentadores de lactosa capaces de desarrollar, acidifican el medio haciendo virar al rojo el indicador de pH, obtenindose colonias rosadas o rojas sobre un fondo rojizo. Salmonella, Shigella y otros microorganismos no fermentadores de lactosa, crecen bien en el medio de cultivo, y producen colonias transparentes. La produccin de cido sulfhdrico se evidencia como colonias con centro negro debido a la formacin de sulfuro de hierro. Para aumentar la selectividad, se recomienda incubar previamente la muestra en Selenito caldo (B02-120-05).
23 Frmula (en gramos por litro) Instrucciones Pluripeptona 5.0 Suspender 60 g del polvo por litro de agua destilada. Reposar 5 minutos y mezclar hasta homogeneizar. Calentar a ebullicin durante 2 o 3 minutos. NO ESTERILIZAR EN AUTOCLAVE. Enfriar a 45-50C y distribuir unos 20 ml por placa. Secar la superficie del medio unos minutos en la estufa. Extracto de carne 5.0 Lactosa 10.0 Mezcla de sales biliares 8.5 Citrato de sodio 8.5 Tiosulfato de sodio 8.5 Citrato frrico 1.0 Agar 13.5 Verde brillante 0.00033 Rojo neutro 0.025 pH final: 7.0 0.2 Siembra Sembrar por estriado la superficie del medio de cultivo. Recomendaciones, se aconseja sembrar en forma conjunta una placa de agar E.M.B. (B02-101-05) o de agar Mac Conkey (B02-114-05). Incubacin Durante24-48 horas a 35-37 C, en aerobiosis.
Resultados Microorganismos Colonias Salmonella typhimurium ATCC 14028 Transparentes, centro negro Shigella flexneri Incoloras Shigella sonnei Incoloras Proteus mirabilis ATCC 43071 Transparentes, centro negro Escherichia coli ATCC 25922 Rosadas a rojas Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Rosadas cremosas y mucosas Enterococcus faecalis ATCC 29212 Incoloras, de muy escaso crecimiento Caractersticas del medio Medio preparado: rojo naranja. Almacenamiento: Medio deshidratado: a 10-35 C. Presentacin x 100g :Cdigo: B02-138- 05 X 500g :Cdigo: B02-138- 06
24 EPIDEMIOLOGA.
La infeccin es altamente contagiosa; se transmite predominantemente de persona a persona, a travs de los alimentos, manos, heces fecales y las moscas. La dosis infectante oscila entre 10 - 100 organismos viables. Aunque se presenta de manera endmica y epidmica, la baja dosis infectante es relevante ya que incide en el potencial de brotes epidmicos de importancia, sobre todo en condiciones de hacinamiento, mala higiene y manipulacin de alimentos por personas infectadas. (Iwamoto et al., 2010). En Mxico, los estados de la Repblica que reportan un mayor nmero de casos son: Oaxaca, Guerrero, Chiapas y Veracruz. Incuestionablemente, dado que el humano representa el hospedero y transmisor natural del microorganismo, es necesaria la observancia de medidas que eviten la diseminacin del agente causal, tales como: - El control sanitario de agua, alimentos y leche; el tratamiento de las aguas negras y el control de la proliferacin de las moscas. - La supervisin de los enfermos, as como la desinfeccin de los materiales con los que entran en contacto y la adecuada disposicin de los desechos biolgicos que se generan dentro de los hospitales. - La deteccin de los casos subclnicos y de portadores, especialmente entre quienes manejan alimentos o bebidas. Por otra parte, es importante establecer que an no existen vacunas anti- shigelosis autorizadas. Sin embargo, en las ltimas dcadas se han venido efectuando importantes intentos por desarrollar alguna con altos niveles de proteccin en nios y ancianos. De hecho, se ha experimentado con cepas inactivadas y atenuadas, incluidas mutantes viables no invasivas o que pueden internalizarse en las clulas eucariontes pero sin desarrollo intracelular. SENSIBILIDAD A ANTIMICROBIANOS. TRATAMIENTO.
La resistencia antimicrobiana fue descrita inicialmente en Shigella, en Japn en 1955; actualmente cepas resistentes a uno o varios antibiticos han sido aisladas prcticamente en todo el mundo.
Este problema es especialmente dramtico en pases subdesarrollados o en vas de desarrollo, donde las tasas de resistencia son mayores y el acceso a antimicrobianos de segunda y tercera lnea es ms dificultoso.
La resistencia suele deberse a la adquisicin de plsmidos a partir de cepas la misma especie o gnero pero tambin de bacterias de gneros diferentes. Estos
25 plsmidos de resistencia pueden albergar genes que codifican ms de un mecanismo de resistencia y pueden a su vez ser transferidos a otras bacterias.
En nuestro medio, en la serie ya descrita se evidencia una evolucin rpida de la resistencia antibitica en los ltimos aos. Si se analiza por separado el perodo entre 1990 - 1995 y el comprendido entre 1996 - 2000 se evidencia un importante aumento en el porcentaje de cepas resistentes.
CONTROL Y PREVENCIN. Sin duda las medidas de higiene personal en especial lavado de manos, son las ms tiles para evitar la trasmisin de persona a persona y la contaminacin de alimentos por parte de individuos infectados. Especial atencin debern prestar manipuladores de alimentos as como personal de guarderas, asilos y casas de salud. La coccin adecuada, refrigeracin de los alimentos preparados y exclusin de personal con diarrea de la preparacin de los alimentos son otras medidas tiles.
26 Obviamente, la disponibilidad de agua potable y saneamiento disminuyen la diseminacin del agente en una determinada comunidad. Al igual que en otras infecciones intestinales, se reconoce el papel protector de la alimentacin a pecho directo materno durante los primeros meses de vida, ya que sta contiene anticuerpos de tipo IgA secretoria especficos y otros factores no especficos. Como se dijo, el tratamiento con antibiticos ha demostrado ser de utilidad en la Shigelosis, ya que acorta el perodo de excrecin, y por ende la transmisin intrafamiliar de la bacteria. Las infecciones previas por Shigella suelen conferir resistencia tipo especfica a futuros encuentros con el agente; es por ello que se han ensayado vacunas serotipo - especficas, basadas en el antgeno O. Si bien an no existen vacunas licenciadas para evitar la enfermedad se investigan algunas, por ejemplo, con mutantes atenuadas, que carecen de genes de virulencia, para ser administradas por va oral.
27 REFERENCIA BIBLIOGRFICA
LIBROS: Tratado de microbiologa B. D. Davis, R. Dulbecco, HN. Elsen H.S. Ginsberg 3era edicin. Salvat editores S. A. pag 544-546. Microbiologa y patologa Sommermeyer Goodale. 5ta Edicin editorial interamericana. Bacteriologa y micologa medica Myrvik. Pearsall. Weiser. Primera edicin 1977 pag. 257-258 Tratados de microbiologa William Burrows Editorial interamericana tercera edicin 1974. Microbiologa Joklik, Willett/Amos/Wilfert Zinsser. 20 Edicin. Editorial Panamericana 1997 pag: 759-771 Handbook of microbiological media third edition By Ronald M. atlas. CRC. Press 1946. Alimentos seguros-Microbiologa. Stephen J. Forsythe Editorial pag: 151 Acribia SA. Microbiologa mdica, Patrck R. Murray, PhD (2006) Versin en espaol de la 5.a edicin de la obra en ingls Medical Microbiology
Jawetz, Melnick y Adelberg Microbiologa mdica 25a. edicin
Ciencia, tecnologa e industria de alimentos. Grupo latino editores. (2008) Dr. Nidia Alba Cuellar
Ecologa microbiana y microbiologa ambiental ATLAS. R. M. Y BARTHA, R. Pearson educacin. S. A. Madrid. 2002
PGINAS DE INTERNET:
http://www.bvsops.org.uy/pdf/shigella.pdf INPPAZ / OPS-OMS Informes peridicos de INFOPANALIMENTOS http://www.infopanalimentos.org http://intranet.inppaz.org.ar/
EFICACIA DE LA MEZCLA DE DOS CEPAS DE Metarhizium Anisopliae (Deuteromycotina: Hyphomycetes) PARA EL CONTROL DE Rhipicephalus Microplus EN INFESTACIONES NATURALES EN BOVINOS