Estableciendo límites de aceptación en la validación de

limpieza de formulaciones tópicas

Hay una necesidad de usar los métodos de validación de limpieza actuales en las
formulaciones tópicas. Los autores resaltan los problemas y retos encontrados.

Jan 2, 2008
By: M. Ovais, Lai Yeo Lian
Pharmaceutical Technology
Volume 32, Issue 1

Los fabricantes farmacéuticos requieren la selección de niveles de aceptación

de residuos para residuos potenciales tales como ingredientes farmacéuticos
activos (APIs), excipientes, productos de degradación, agentes de limpieza,
sustancias de carga biológica y endotoxinas cuando se realizan estudios de
validación de limpieza. Estos niveles se determinan de acuerdo al potencial
farmacológico, seguridad, toxicidad, estabilidad y efectos de contaminación
sobre el siguiente producto fabricado con la misma superficie o equipo. La guía
de la Administración de drogas y alimentos de los Estados Unidos de Ámerica
para determinar los límites de residuos declara que los límites de residuos
deben ser lógicos, prácticos, realizables y verificables (1). Los límites se
establecen típicamente para residuos visuales, químicos y mirobiológicos
tomando en cuenta el tamaño de lote, dosis, toxicología, y área de superficie
del equipo.
En contrate con las formulaciones de sólidos y líquidos, las formulaciones de
semi-sólidos tópicos tales como cremas y ungüentos suponen mucha más
dificultad para la limpieza debido a que contienen ingredientes grasosos tales
como ceras y aceites. Estos ingredientes pueden inhibir la humetación de los
agentes de limpieza, limitando así la habilidad de limpiar – enjuagar el producto
residual.
Las formulaciones tópicas (TFs) generalmente se consideran seguras y
menos potentes que las formulaciones orales e inyectables. No obstante, los
APIs y excipientes usados comúnmente en las TFs pueden producir efectos
adversos significativos en formas irritación de la piel, sensibilización de la piel,
hipersensibilidad y reacciones de fotosensibilidad. Por lo tanto, uno debe
determinar el remanente de los residuos de un producto a otro de una manera
cientificamente justificada para limitar las posibilidades de reacciones adversas
y la posibilidad de la sinergia de los efectos farmacológicos entre los productos
y sus ingredientes.

Las guías y la literatura disponible sobre validación de limpieza

proporcionan posibles enfoques para establecer los niveles aceptables de
residuos para APIs y productos terminados pero contienen poca o ninguna
orientación sobre la manera de usar estos enfoques para TFs (2-5). Aunque
los enfoques existentes son más lógicos y apropiados para generar niveles de
aceptaciónde residuos para formulaciones de sólidos y líquidos, también
pueden aplicarse a las TFs con modificaciones lógicas. Este artículo discute las
maneras posibles de establecer los niveles de aceptación de residuos para

1
APIs presentes en las TFs como un prerrequisito para realizar estudios de
validación de limpieza.

Antecedentes
El método ampliamente usado dentro de la industria farmacéutica para
establecer niveles de aceptación es el provisto por Fourman y Mullen, cuyo
trabajo es listado en la sección de referencias en el documento guía de
validación de limpieza de la FDA (2). El método se basa en los siguientes
criterios:
• El criterio de dosis se basa en el principio de que un API debe estar
presente en el siguiente producto fabricado en niveles no más altos que
una milésima (1/1000) de la dosis mínima diaria del API en la dosis
máxima diaria del siguiente producto.
• El criterio de 10 ppm se basa en el principio de que cualquier API debe
estar presente en el siguiente producto fabricado en niveles no más altos
que 10 ppm.
• El criterio de visualmente limpio declara que el equipo debe tener un
valor fijo no más alto de 100 µg por 2 x 2 in. de área hisopada.
Este artículo usa los mismos principios para generar niveles de aceptación de
residuos para TFs para la validación de limpieza.

Criterio basado en la potencia del producto

Una base para establecer los límites es un cálculo matemático que permita una
cierta fracción de la dosis terapéutica sea transportada a la dosis máxima diaria
del siguiente producto. La fracción de dosis permitida para ser transferidad se
refiere como remanente máximo permisible (MACO por maximun allowable
carryover) y se basa en la ingesta diaria aceptable (ADI por aceptable daily
intake) del API que está siendo limpiado. La industria usa varios enfoques para
determinar los valores de ADI para ingredientes activos e involucra usando
valores de la dosis terapéutica mínima diaria recomendada, la dosis más baja
del mercado, o niveles de efectos no observables (NOEL por no observable
effect level)/LD50 (dosis letal al 50%), divididos por un factor de seguridad (5).
Algunos fabricantes usan un valor límite de exposición ocupacional (OEL
por occupational exposure limit) para calcular la ADI.
Si A se refiere al producto que está siendo limpiado, A1 al API presente en el
producto A, y el producto B a la siguiente formulación fabricada, entonces el
cálculo del MACO basado en los valores de ADI se puede expresar como:

ADI × BS × SA
MACO =
MDD × ESA
En donde:
ADI: es la ingesta diaria aceptada del activo A1 (%) y es igual a la dosis
terapéutica diaria mínima x factor de seguridad;
MDD: es la dosis máxima diaria para el producto B (mg);

2
BS: es el tamaño de lote del producto B (mg); SA es el área hisopada; y
ESA: es el área de la superficie del equipo compartida entre el producto A y B
(cm²)
Para el cálculo de MACO usando el enfoque de unidad de dosis terapéutica y
factor de seguridad, se han sugerido diferentes factores de seguridad para
varias formulaciones (ver la tabla I). Sin embargo, un factor de seguridad de
1000 se usa ampliamente debido a que puede considerarse como compuesto
por un factor de 10 para el ajuste de una dosis terapéuticamente eficaz a una
dosis no efectiva terapéuticamente. Un factor de 10 para acomodar la
variabilidad individual en la respuesta y un factor de 10 para hace un estudio de
validación de limpieza robusto. La fracción de reducción de dosis es una
medida de riesgo involucrada y está evaluada por los fabricantes dependiendo
de la situación de fabricación actual.

Tabla I: Factores de seguridad para la determinación de límites de

aceptación en la validación de limpieza
Factor de seguridad Tipo de formulación
10 – 100 Producto tópicos
100 - 1000 Productos orales
1000 - 10000 Inyecciones, preparaciones para ojos y oídos
10000 -100000 Productos de investigación y desarrollo

Cuando se trata de TFs, el enfoque para la aplicación de ADI o factor de

seguridad de dosis terapéuticas para el cálculo del MACO es difícil por varias
razones, incluyendo:
• Las TFs no están divididas en unidades individuales de dosificación, a
diferencia de las formulaciones de sólidos y líquidos.
• El tamaño de dosis por aplicación varía dependiendo del área total de la
lesión. Por lo tanto, se hace difícil establecer una dosis mínima o
máxima diaria.
• No existe un criterio uniforme para determinar el tamaño de la dosis. Es
decir, la cantidad de producto recomendado para ser aplicado por la
zona de la piel por tratamiento varía de un fabricante a otro.
• Los efectos farmacológicos producidos por una absorción sistémica del
API a través de la ingestión oral se toma en consideración cuando se
determinan los valores ADI. En el caso de las TFs, ocasionalmente se
absorbe suficiente API
para causar efectos sistémicos. Las TFs producen toxicidad local aún a
dosis bajas.

Por lo tanto, surge la necesidad de establecer un método racional para

determinar los límites de aceptación para TFs en las validaciones de
3
limpieza. Este artículo establece un método para el cálculo de MACO para el
API de un TF fabricado posteriormente, teniendo en cuenta los psibles peores
casos.

Peor caso I
Asumiendo que el activo A1 se vende en concentraciones de 2%, 3% y 5%, y
que el producto B puede aplicarse en todo el cuerpo dos veces al día. El criterio
esblecido por Long y Finley puede usarse para determinar la cantidad total de
la TF (por ejemplo, crema y ungüento) aplicado en todo el cuerpo en una
aplicación (6). El criterio describe la dosis de las TFs en términos de unidades
de la punta del dedo (FTUs por Fingertip units). Una FTU de adulto es la
cantidad de ungüento o crema expresada desde un tubo con un diámetro
estándar de boquilla de 5 mm de diámetro, aplicado desde el pliegue distal a
la punta del dedo índice. Una FTU contiene aproximadamente 0.5 g de crema,
y se asume que aproximadamente 20.25 g (~40.5 FTUs) de crema se
necesitan para cubrir un cuerpo de adulto. Sobre la base de estos supuestos, la
cantidad máxima del producto B que puede aplicarse diariamente será:
20.25 g/aplicación x 4 aplicaciones/día = 81 g/día
Para determinar la cantidad máxima de producto aplicado por tratamiento para
otros TFs tales como shampoos medicinales, lociones, pasta de dientes y
enjuague bucal, uno puede consultar la Guía para las pruebas de ingredientes
cosméticos y su evaluación de seguridad de la comisión Europea o los criterios
de los fabricantes (7). Para estas formulaciones, la cantidad de producto
aplicado por tratamiento es fijo; Por lo tanto, la máxima cantidad de producto
aplicado por día depende del número máximo de veces que el producto se
utiliza a diario.

La concentración más baja del activo A1 en la TF es 2%. Esto significa que

aproximadamente 1.62 g (2% de 81 g) de activo A1 si está presente en 81 g del
producto B producirá sus efectos farmacológicos. Tomando en cuenta un factor
de seguridad de 1000, el activo A1 no debe exceder 0.00162g (1.62 g divididos
entre 1000) en 81 g del producto B.

Asumiendo que el tamaño del lote del producto B es de 300 kg, el MACO del
activo A1 para el producto B puede calcularse como:

0.00162 g × 300 kg × 106 mg/kg

MACO = = 6000 mg
81 g

En otras palabras, el MACO del activo A1 para un lote del producto B no debe
ser más de 0.1% de la concentración más baja del mercado para el activo A1.
Para el ejemplo de arriba, el MACO también puede calcularse como:

4
 MACO = 0.1% × 2% × 300 kg × 106 mg/kg = 6000 mg

Del ejemplo anterior, es claro que para calcular el MACO del API en cualquier
TF fabricado posteriormente, la única información necesaria es la
concentración más baja del mercado del API en la TF que se está limpiando y
el tamaño del lote del siguiente producto fabricado. El cálculo del MACO es
independiente de la dosis mínima y máxima diaria del producto A y el producto
B, respectivamente.
El MACO en términos de cantidad de API por área de superficie del equipo
(para muestreo por hisopo), se puede determinar mediante el uso de la
siguiente ecuación:
0.1% × C × BS × SA
MACO =
ESA

En donde:
C: Es la concentración más baja disponible del API en el producto A (%),
BS: Es el tamaño de lote del producto B (mg);
SA: Es el área de hisopado (cm²);
ESA: Es el área de superficie del equipo compartida entre el producto A y el
producto B (cm²).
Esta ecuación se puede modificar para calcular los límites de residuos (mg / ml)
en la muestra de enjuague mediante el uso del volumen total (TV) de la porción
del solvente de enjuague o lavado (mL) y el volumen (V) de la muestra de
enjaugue colectada (mL) en lugar de ESA y SA, respectivamente.

Peor caso II
Siguiendo los mismos supuestos y ejemplos descritos en el peor caso I, las
dosis terapéuticas para las TFs se pueden establecer en términos de mg / kg
peso corporal / día o mg/cm2 / unidades al día. Según Long y Finley, 1 FTU
abarca alrededor de 286 cm2 de área de la superficie de la piel. Esto implica
que aproximadamente 1,75 mg de la TF se aplica por cada centímetro
cuadrado de área de la superficie de la piel. El tamaño de la dosis de la TF se
puede calcular mediante la siguiente ecuación,
Dosis diaria (mg/cm²/día) = A x C x F
En donde:
A: Es la cantidad de la TF aplicada en una aplicación por unidad de área de la
piel (mg/cm²),
C: es la concentración del API en la TF (%), y
F: Es la frecuencia de aplicación por día (día-1)

Para calcular la dosis mínima diaria para el producto A,

A = 1.75 mg/cm²,

5
C = La concentración más baja disponible del API en el producto A = 2%, y
F =1 (día-1)
Por lo tanto, la dosis diaria mínima para el producto A = 0,04 mg/cm2 / día, y la
dosis diaria máxima para el producto B = 6,99 mg/cm2 / día (usando A = 1.75
mg/cm², C = 100% y F = Número máximo de veces que el producto B se aplica
por día = 4). Un punto a recordar es que el cálculo para la dosis máxima diaria
para el producto B es independiente de la concentración del API presente. Por
lo tanto, para un tamaño de lote de 300 kg (producto B) el valor MACO puede
calcularse como
dosis mínima diaria para el producto A x tamaño de lote para el producto B
MACO =
factor de seguridad x dosis máxima diaria del producto B

0.04 mg/cm² / día x 300 kg x 106 mg/kg

MACO = = 1500 mg
1000 x 6.99 mg/cm²/día

Comparando los casos anteriores, uno puede observar que el valor MACO
obtenido del escenario del segundo peor caso es cuatro veces menos que el
valor obtenido del primer peor caso. Después de un análisis exhaustivo de los
cálculos, sin embargo, se puede concluir que el valor obtenido de MACO del
peor caso II es igual al valor MACO del peor caso I dividió por el número
máximo de aplicaiones por día del producto B. Por lo tanto, si MF es el número
máximo de veces que el producto B puede aplicarse diariamente, el valor
MACO del peor caso II puede expresarse matemáticamente como:

0.1% × C × BS × SA
MACO =
MF × ESA

Por lo tanto, es la concentración (es decir, el porcentaje) del activo A1 y el

número de dosis por día para el producto B lo que hace la diferencia en lo que
respecta al cálculo de los valores de MACO.

Criterio basado en la exposición diaria permitida

Otro enfoque para la determinación del MACO usa los datos de toxicidad. Esta
estrategia es usada generalmente en la industria cuando cuando se trata de
contaminantes para los que las dosis terapéuticas no son conocidos (por
ejemplo, productos intermedios, los precursores, y productos de limpieza).

Para muchos fármacos, el usar un factor de seguridad de 0.1% de la dosis

terapéutica recomendada más baja puede ser razonable y producirá valores
MACO en un nivel seguro. Sin embargo, este enfoque no puede usarse
indiscriminadamente, por varias razones. Primero para los productos tópicos,

6
las dosis no están bien definidas, como se discutió anteriormente. Un segundo
problema es el mecanismo mediante el cual los efectos tóxicos se producen
por el fármaco. Para muchos fármacos, el mecanismo por el cual se producen
los efectos tóxicos podría estar relacionado con el mecanismo de acción
farmacológica. Por ejemplo, un fármaco pued causar toxicidad para el
desarrollo (por ejemplo, defectos de nacimiento) o cáncer mediante un
mecanismo relacionado con sus efectos farmacológicos. En estos caso, el uso
del factor de seguridad de 0.1% sobre la dosis terapéutica puede ser aún
apropiada pero tendría que usarse con mayor precaución debido a que sus
efectos tóxicos pueden producirse por debajo de los niveles terapéuticos de
seguridad.
Por estas razones, muchos fabricantes también incluyen un enfoque basado en
los datos de toxicidad para calcular los valores de MACO. Para muchos
fármacos, este enfoque puede ser razonable y ha producido valores MACO
similares a los enfoques tradicionales de dosis terapéutic/factor de seguridad.
El valor básico de este enfoque es que un límite puede calcularse para
propósitos de la validación de limpieza, basándose solamente en la toxicidad
del API presente en la TF.
El método usa valores de exposición diaria permitida (PDE, por Permitted
daily exposure), el criterio comúnmente usado para la determinación de riesgos
para la salud ocupacional y ambiental. Hay dos maneras de establecer los
valores de la PDE. Uno de los enfoques se basa en el “nivel sin efecto
observado/factor de seguridad” (NOEL/SF). En este enfoque, todos los
estudios realizados en animales y humanos son revisados y se identifica la
dosis más alta que no causa un efecto en el extremo más sensible de la salud
(NOEL). Una vez que el NOEL ha sido identificado, se aplica una serie de
factores de incertidumbre (o seguridad) a este valor para compensar las
limitaciones en los datos y asegurar que se obtiene un valor MACO seguro. Si
no se obtiene un NOEL, entonces se puede usar un nivel de efecto más bajo
observado (LOEL, por Lowest Observed Effect level). El valor LOEL es la
dosis más baja que causa un efecto en el extremo más sensible de la salud. Un
factor de seguridad de 1 a 10 se puede considerar para extrapolar un LOEL a
un NOEL.
El nivel sin efecto adverso observado (NOAEL, por No observed adverse
effect level) o más bajo nivel sin efecto adverso observado (LOAEL, por Lowest
Observed adverse Effect Level), se usan indistintamente con el NOEL o LOEL,
respectivamente. Para las TFs, utilizando los valores NOAEL y LOAEL es más
lógico cuando se trata con efectos locales tóxicos causados por el ingrediente
activo.
Una ecuación para determinar el valor PDE para un farmacéutico pueden
representarse como sigue:

PDE =NOEL × HBW × SF

En donde NOEL está típicamente en unidades de miligramos de ingrediente
activo administrado por kilogramo del peso del cuerpo del animal por día
(mg/kg-bw/día). Los valores NOEL obtenidos de los datos de toxicidad de
humanos y reportados en miligramos por día no necesitan multiplicarse por el
peso del cuerpo humano (HBW, por Human Body Weigth), y un factor de
seguridad de 0,1 se utiliza para dar cuenta de la variabilidad humana en la

7
respuesta. Normalmente se supone que HBW es de 60 kg para un hombre
adulto. SF, que es el factor de seguridad para el alojamiento de las limitaciones
en los datos, suele ser 0,01 para la conversión de NOEL a un PDE para los
productos tópicos.

El segundo método para calcular PDE es convertir el valor LD50 a un valor

NOEL aplicando un factor empírico. Este factor empírico se deriva de modelos
de animales desarrollados por Layton et al. y puede variar desde 0.0005 hasta
0.001 (8). El NOEL así obtenido se convierte a valor PDE mediante el uso de la
ecuación anterior.
Es importante que los valores NOEL y LD50 sean obtenidos de estudios de
toxicidad dérmica. Los valores NOEL/LD50 reportados en mg/cm²/día, el PDE
(mg/kg) puede calcularse usando la siguiente ecuación:
PDE (mg/día) = NOEL (mg/m2 /día) × HSA (m2) × SF
En donde, HSA es la superficie promedio del cuerpo humano, típicamente se
asume que es 1.62 m²
Además, algunos fármacos tienen valores NOEL/LD50 reportadas en partes
por millón (ppm), que pueden ser convertidos a mg / kg / día de peso corporal
sobre la base de que 1000 ppm es igual a 25 mg / kg peso corporal / día en
promedio de 60 kg por adulto.
Los valores MACO (mg/área hisopada) basados en los datos de toxicidad
pueden calcularse como
MACO = (PDE × BS × SA) / (MA × ESA)
En donde:
PDE: Es la exposición diaria permitida par el activo A1 (mg/día).
BS: Es en número de unidades de fingertip por lote de la mezcla final del
producto B (FTUs).
SA: Es el área hisopada (cm²).
MA: Es el número máximo de FTUs del producto B aplicada sobre la piel por
día (FTUs/día) como se describe en el criterio basado en la concentración
del producto, y
ESA: es el área de la superficie compartida por el producto A y el producto B
(cm²)
Para este ejemplo, si el valor PDE para el activo A1 = 0.35 mg/día, y
asumiendo
BS = 200000 FTUs,
MA = 162 FTUs/día,
SA = 25 cm² y
ESA = 6000 cm²,
Entonces el valor MACO (mg/área hisopada) es
0.35 mg/día × 200,000 FTUs × 25.0 cm2 /swab
MACO = = 1.80 mg/swab
162.0 FTUs/día × 6000 cm2

8
Otros criterios
Otros criterios usados típicamente en la industria incluyen el criterio de 10 ppm
y el criterio de visualmente limpio. El primero se basa en el supuesto de que no
más de 10 ppm de cualquier ingrediente farmacéutico debe aparecer en
cualquier otro producto, el segundo no es una suposición, más bien un valor fijo
de 0.1 mg/25cm² de área después de realizar los estudios de adición. El valor
más bajo obtenido de todos los cálculos del MACO basados sobre los
diferentes criterios se selecciona entonces como el límite de aceptación para el
activo A1.

Conclusión
La determinación del MACO para un agente farmacéutico para el siguiente
producto fabricado es una ciencia inexacta. Cada enfoque tiene su propio
conjunto de supuestos y limitaciones.Toda empresa que se basa en los valores
MACO para sus estudios de validación de limpieza debe comprender los
supuestos usados en la obtención de los valores MACO. Es responsabilidad de
los fabricantes farmacéuticos y los científicos encargados de la validación de
limpieza la tarea de establecer los valores MAO para estimar un valor que sea
seguro para los consumidores sin ser tan exigentes para que los recursos no
se gasten innecesariamente.

M. Ovais* is a pharmaceutical scientist, Xepa-Soul Pattinson (M) Sdn Bhd, 1-5,

Cheng Industrial Estate, 75250 Melaka, Malaysia, tel. 006063351515, fax
006063355829, mohammad@xepasp.com
Lai Yeo Lian is the innovation and development manager at Xepa-Soul
Pattinson (M), Laiyl@xepasp.com
*To whom all correspondence should be addressed.
Submitted: June 5, 2007. Accepted:July 26, 2007

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