Cromatografa de Capa Fina

(Thin Layer Chromatography)

Historia
Proceso de adsorcin

Adsorbentes

Preparacin de la placa cromatogrfica

Aplicacin de la muestra

Volmen de muestra aplicada

Desarrollo de la placa

Eleccin del solvente

Cmaras para desarrollo

Deteccin visualizacin

Evaluacin de un cromatograma de capa fina

Anlisis cualitativo

Anlisis cuantitativo

Referencias bibliogrficas

Historia
El botnico ruso Mikhail Tswett estableci las ventajas de la cromatografa y fu
el primero en utilizar este trmino. Es recordado como el Padre de la
Cromatografa.
Ismailov y Scraiber utilizaron lminas de vidrio para colocar capas muy
delgadas de almina y luego aplicaron extractos vegetales, dando as la primera
forma de Cromatografa de Capa Fina. Egon Stahl (1956) di el nombre de
Cromatografa de Capa Fina. Estandariz los procedimientos, equipos y
adsorbentes dando un auge a la tcnica simple, a bajo costo y eficiente.
Proceso de Adsorcin
La muestra aplicada en la capa es adsorbida en la superficie del material por la
accin de fuerzas electrostticas (fuerzas de Van der Waals, puentes de
Hidrgeno, efectos inductivos, etc). Luego, cuando la capa es expuesta a un flujo
por accin capilar, se inicia una competencia de enlaces entre los sitios activos
del adsorbente y la substancia con el solvente.
Adsorbentes

Los adsorbentes ms utilizados en la Cromatografa de Capa Fina son:

Silica gel (se utiliza en el 80% de las separaciones)

xido de Aluminio Almina (cida, neutra bsica)

Tierra Silcea Kieselguhr

Celulosa (Nativa o micro-cristalina)

Poliamidas

Estos adsorbentes deber tener las siguientes caractersticas:

Tamao de Partcula
o Volmen de Poro
o

Dimetro de Poro

rea Superficial

Homogeneidad

Pureza

Preparacin de la Placa Cromatogrfica

Se usan como soporte del adsorbente lminas de: Vidrio, Plstico Metlicos
(ej: Aluminio)
Los tamaos de la placa para TLC convencional son : 20 cm x 20 cm; 10 cm x
20 cm y 5 cm x 2 cm
Hay placas que contienen un indicadorr de Fluorescencia : F254 F366. El nmero
que apararece como subndice nos indica la longitud de onda de excitacin del
indicador utilizado.
Aplicacin de la muestra
La muestra se aplica en la placa segn el objetivo: Analtico Preparativa en:

Banda
Punto Mancha

Desarrollo de la Placa
Es un proceso mediante el cual son tranportados a travs de la fase estacionaria
por la fase mvil.
Eleccin del Solvente
Cmaras para Desarrollo
Existen varios tipos de cmaras:

Normal
Doble Compartimiento

Sandwich

Horizontal

Vario KS

Deteccin Visualizacin
Si la muestra (mancha) no es coloreada se requiere de mtodos que nos permitan
visualizar el(los) componente(s) presentes. Tambin se conoce este
procedimiento como Revelado.
Estos mtodos son:

Qumicos (por inmersin o rociado). Se obtienen derivados coloreados o

fluorescentes
Fsicos (pticos). Generalmente se utiliza radiacin UV

Evaluacin de un Cromatograma de Capa Fina

Anlisis Cualitativo

Medida de Rf
Comparacin Visual de Color/Intensidad

Propiedades UV/IR/MS/NMR

Anlisis Cuantitativo

Semi-cuantitativo
o Comparacin visual del dimetro y la intensidad del color de la
mancha contra una serie de manchas patrones de concentracin
conocida

Cuantitativo
o

Indirecta

Directa

Densitometra

Medida de Transmisin. Medida de luz

transmitida a travs de la substancia.

Medida de Emisin. Medida de luz reflejada desde

la substancia

Espectrofotometra

Fluorescencia

Fluorescencia con "quenching"

Referencias Bibliogrficas Recomendadas

1. ABBOTT, David y ANDREWS, R. S. Introduccin a la Cromatografa.
3ra. Edicin. Coleccin Exedra. Editorial Alhambra. Espaa. 1973.
2. BAUER, Karin ; GROS, Leo and SAUER, Werner. Thin Layer
Chromatography: An Introduction. Hthig Verlag. Germany. 1991
3. BROWNING, D. R. Cromatografa-Toray-Masson. Espaa. 1971.
4. DOMINGUEZ, Xorge Alejandro. Cromatografa en Papel y en Capa
Delgada. Serie de Qumica. Organizacin de los Estados Americanos. N
16. U.S.A. 1975
5. GTZ, Wolfgang; SACHS, Albert and WIMMER, Hans. Thin-Layer
Chromatography. Gustav Fisher. Verlag. Germany. 1980.
6. JORK, H and WIMMER H. TLC Report: A Collection of Quantitative
Papers. GIT Verlag. Germany. 1986.
7. Reactivos de Coloracin para Cromatografa en Capa Fina y en Papel.
Merck. Alemania. 1980.
8. PACHALY, Peter. Dnnschicht-Chromatographie in der Apotheke.
Wissenshaftliche Verlagsgesellschaft. Germany. 1982.
9. TOUCHSTONE, Joseph and DOBBINS, Murrell F. Practice of Thin
Layer Chromatography. 2nd Edition. Willey Interscience. U.S.A. 1983.
10. ZLATKIS, A. and KAISER, R.E. HPTLC. High Performance ThinLayer Chromatography. Vol. 9. Journal of Chromatography Library.
Elsevier. 1977.

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