AISLAMIENTO DE LAS

PROTENAS
TcTASV EN Tripomastigotes de
Trypanosoma cruzi

INTRODUCCIN
Trypanosoma cruzi:
Enfermedad de Chagas
En el mundo hay entre 7 y 8
millones de personas infectadas por
Trypanosoma cruzi (OMS, 2014)

Tx:
Benznidazol y Nifurtimox
Fase crnica
Efectos secundarios graves (Berna,
2011).

NO EXISTE VACUNA PARA TRATAMIENTO Y/O

PREVENCIN

ANTECEDENTES
Garca, et al., (2010) TcTASV: A Novel Protein Family in Trypanosoma cruzi Identified from a
Subtractive Trypomastigote cDNA Library.

Enriquecidas por Ala, Ser y Val.

TcTASV
Tres subfamilias (A, B y C)
18 kDa, 27 kDa y 36 kDa.
Pptido seal de 57 al 72 aminocidos
Genes ortlogos

ANTECEDENTES
Bernab G, et al. (2013) TcTASV-C, a Protein Family in Trypanosoma cruzi that Is
Predominantly Trypomastigote-Stage Specific and Secreted to the Medium.

~ 60 kDa en tripomastigotes.
Potencial de anclaje por glicosilfosfatidilinositol (Ser y Trh).
TcTASV-C sobrenadante en medio de cultivo

JUSTIFICACIN

La enfermedad de Chagas es curable cuando es detectada dentro de los

primeros meses de infeccin.

TcTASV es una familia de protenas recientemente descritas en cepas de

tripomastigotos que puede estar implicada en las estrategias de
supervivencia y/o la evasin del sistema inmune.

JUSTIFICACIN
Las protenas TcTASV pueden ser un blanco especfico para el desarrollo
de nuevas tcnicas de diagnstico en los primeros meses de infeccin del
parsito o de posibles vacunas de DNA que induzcan la sntesis de
anticuerpos especficos de tripomastigotos.

OBJETIVOS
GENERAL
Aislar las protenas TcTASV en tripomastigotos de
Trypanosoma cruzi

ESPECFICO
Aislar la subfamilia TcTASV-A
Aislar la subfamilia TcTASV-B
Aislar la subfamilia TcTASV-C

ESTRATEGIA EXPERIMENTAL
Detergente no inico (Tritn x-100)

Tripomastigotos

Antiproteasas citoslicas

Sonicacin

Cromatografa por
Inmunoafinidad

1. Protena quinasa A (PKA)

2. Anticuerpo monoclonales:
Anti-fosfoserina [7F12, 1C8(IgM)].
Anti-fosfotreonina (1E11).
Alexis Biochemicals (San Diego, CA)

Inmunoprecipitacin
Lavar con tampn de lisis fro.
Eluir por ebullicin 6-8 min en tampn de
muestra (Mads G. et al.,2002)

Cromatografa por
Inmunoafinidad
Subfamilia A18 kDa
Subfamilia B27 kDa
Subfamilia C36 kDa

Espectrometra de masas