Les Entrobactries (4me partie) :

Les Entrobactries lactose - : les genres

Salmonella et Shigella ainsi que les
entrobactries DA +
Objectifs : * Mettre en vidence les caractres morphologiques, culturaux et biochimiques
pour orienter ltude vers la famille des entrobactries.
* Raliser lensemencement dune macrogalerie en vue de la dtermination de
lespce de lentrobactrie lactose - .
* A laide du tableau dichotomique, identifier lespce de lentrobactrie
lactose - .
1er jour
Manipulation : Par personne, vous disposez dune souche pure dune entrobactrie lac prsente sur GNi :

Souche numrote
prsente sur glose nutritive

Raliser une suspension bactrienne faible

( 1 colonie dans 5 mL deau distille strile)

Isolements des bacilles Gram - sur :

Milieux slectifs : Hektoen,
SS
Milieu non slectif : CLED

Etude microscopique :
Raliser une coloration de
Gram

Ralisation du test
dorientation rapide
pour 1 entrobactrie :
Raliser le test de loxydase

Ensemencements
des milieux de la
galerie de famille :

Ensemencements des
milieux de la galerie de
genre et despce :

VF

Kligler-Hajna

Hugh et Leifson
glucoss

Clarks et Lubs
Ure Indole

Bouillon nitrat
Mannitol-Mobilit
Glose Nutritive
Ordinaire
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Citrate de Simmons

Incuber botes et tubes 24 h 37C

Compte-rendu :
Coloration de Gram

Test respiratoire :
Orientation

Observations

Conclusion

Observations

Conclusion

Souche n

2me jour
Manipulation :
Lecture des diffrents milieux ensemencs : botes et tubes.
Raliser le tests complmentaires ncessaires la mise en vidence de :
la nitrate rductase
la galactosidase
la voie fermentaire du glucose
la tryptophane dsaminase et de la tryptophanase

Compte-rendu :
1. Ensemencements
Milieux
VF
Bouillon nitrat
Hugh et Leifson glucos
GN
Kligler
Clark et Lubs

Observations

Interprtations

Conclusion

Citrate de Simmons
Mannitol- Mobilit
Ure-Indole
Milieu ODC

2. Isolements
Observations : aspect des colonies

Conclusion

Glose CLED
Glose Hektoen
Glose SS

3. Conclusion
Proposer une identification de lentrobactrie lactose - numrote et justifier votre dmarche logique danalyse :
Justification de lappartenance la famille des Entrobactries.
Justification de lappartenance au genre et lespce bactrienne.

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