DETERMINACIN DE AZCARES REDUCTORES POR EL METODO

DEL ACIDO DINITROSALICILICO (DNS)

Principio del mtodo
El mtodo del cido 3,5-dinitrosalicilico (DNS) se basa en la reduccin del DNS
(de color amarillo) por la glucosa al cido 3- amino-5-dinitrosalicilico de color rojo
previo calentamiento.
1.1 Materiales.

Reactivo DNS.
Agua destilada.
Solucin de glucosa al 0.4g/L.
Cubetas.
Tobos de reaccin.
Micropipetas.
Bao mara a 90C.
Bao de hielo a 4C.
Espectrofotmetro (540nm).
1.2 Procedimiento.

a) Realizar curva de calibracin de glucosa.

Preparar solucin de glucosa a 0.4g/L.

Realizar los estndares de glucosa a partir de la solucin anterior y como lo

determina el siguiente esquema:
Esquema de estndares de glucosa.
Volumen Glucosa
Volumen agua
en ml (0.4mg/ml)
destilada
0.0
1.0
0.1
0.9
0.2
0.8
0.3
0.7
0.4
0.6
0.5
0.5
0.6
0.4
0.7
0.3
0.8
0.2
0.9
0.1
1.0
0.0

Concentracin del
estndar (mg/ml)
0.00
0.04
0.08
0.12
0.16
0.20
0.24
0.28
0.32
0.36
0.40

Agregar 1ml de DNS a cada una de los estndares anteriores incluyendo el

blanco.

Mezclar y someter a incubacin a 90C durante 5min.

Parar la reaccin en bao de hielo a 4C durante 5min.

Leer a 540nm.

Calcular ecuacin de la recta y parmetros estadsticos.

Nota: las muestras problemas debern ser ledas sobre la curva anterior utilizando
el mismo mtodo de preparacin empleando para los estndares.

PREPARACIN DEL REACTIVO DE DNS

Compuesto

Cantidad

Acido 3,5-dinitro saliclico (DNS).

1g

Tartrato
de
tetrahidratado.

30g

sodio

potasio

Prepare 20ml de NaOH 2N (pesar 1.6g NaOH) y disuelva en ellos el tartrato, luego
de disuelto lleve a un volumen final de 100ml, y en completa oscuridad disolver el
DNS (reactivo fotosensible).