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AUTNOMA DE MXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA
Revis:
Aprob:
Aprob:
Antecedentes:
ESPECTOFOTOMETRA
ESPECTRO ELECTROMAGNETICO
LUZ VISIBLE
La luz visible es una de las formas como se desplaza la energa. Las ondas de luz son el
resultado de vibraciones de campos elctricos y magnticos, y es por esto que son una forma
de radiacin electromagntica (EM). La luz visible es tan slo uno de los muchos tipos de
radiacin EM, y ocupa un pequeo rango de la totalidad del espectro electromagntico
Las ondas de luz tienen longitudes de onda entre 400 y 700 nanmetros (4 000 y 7 000 ). A
medida que el arcoiris se llena de matices, nuestros ojos perciben diferentes longitudes de
ondas de luz. La luz roja tiene longitudes de onda relativamente largas, aproximadamente 700
nm (10-9 metros) de largo. La luz azul y la luz morada tienen ondas cortas, aproximadamente
400 nm. Las ondas ms cortas vibran a mayores frecuencias, y tienen energas ms
elevadas. Las luz roja tiene una frecuencia aproximada de 430 terahertz, mientras que la
frecuencia de la luz azul es de aproximadamente 750 terahertz. Los fotones rojos tienen
aproximadamente 1.8 electrn-Volt(eV) de energa, mientras que cada fotn azul transmite
aproximadamente 3.1 eV.
LEY DE LAMBERT-BEER
La ley de BOUGUER-LAMBERT-BEER tambin se conoce como ley de Beer-LambertBouguer y fue descubierta de formas diferentes e independientes en primer lugar por el
matemtico y astrnomo francs Pierre Bouguer en 1729 Luego por el filsofo y matemtico
alemn, Johann Heinrich Lambert en 1760 y por ltimo el fsico y matemtico tambin alemn,
August Beer en el ao 1852.
Se puede decir que esta ley se trata de un medio o mtodo matemtico, el cual es utilizado
para expresar de que modo la materia absorbe la luz. En ptica (Rama de la fsica que se
encarga del estudio de la luz) La ley de Beer afirma que la totalidad de luz que emana de una
muestra puede disminuir debido a tres fenmenos de la fsica, que seran los siguientes:
reales,
ser
y
absorbancia y la
estudiar.
No se secan por dentro, solo por el exterior (y se hace con un papel
suave)
ESPECTOFOTMETRO:
El espectrofotmetro es un instrumento que permite comparar la radiacin absorbida o
transmitida por una solucin que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que
contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.
Todas las sustancias pueden absorber energa radiante. El vidrio,
que parece ser completamente transparente, absorbe longitudes
de onda que pertenecen al espectro visible; el agua absorbe
fuertemente en la regin del IR. La absorcin de las radiaciones
UV, visibles e IR depende de la estructura de las molculas, y es
caracterstica para cada sustancia qumica. El color de las sustancias se debe a que absorben
ciertas longitudes de onda de la luz blanca que incide sobre ellas y slo dejan pasar a
nuestros ojos aquellas longitudes de onda no absorbida. Los componentes de un
espectofotmetro son:
Fuente de luz
La fuente de luz ilumina la muestra qumica o
biolgica, pero para que realice su funcin debe
cumplir con las siguientes condiciones: estabilidad,
direccionabilidad, distribucin de energa espectral
continua y larga vida.
Las fuentes de luz
espectrofotmetro son:
que
puede
tener
un
TIPOS DE ESPECTOFOTMETROS:
Espectrofotmetro de haz simple: cuenta con un nico compartimiento de celda con lo cual
se debe realizar la medida de absorcin del blanco para poder registrar un cero (o
referencia) y luego medir la absorcin de la muestra.
Espectrofotmetro de doble haz: es aquel que cuenta con dos compartimientos para celdas
de muestra que le permite medir simultneamente la cantidad de energa radiante absorbida
por una matriz (blanco) y la energa absorbida por la muestra compuesta por la matriz y la
especie de inters.
CURVA DE CALIBRACIN.
Uno de los mtodos ms utilizados para determinar la concentracin de una muestra
problema, es el mtodo de la curva de calibracin. Esta curva de calibracin es una grfica
que relaciona la concentracin de al menos cinco soluciones de estndar de concentraciones
conocidas, con la absorbancia de cada uno de ellos a la longitud de onda mxima ( max)
Una vez obtenida la grfica se determina la funcin matemtica que presenta dicha recta a
travs del tratamiento estadstico de regresin de los mnimos cuadrados, la cual relaciona la
absorbancia y la concentracin de un analito. La siguiente ecuacin matemtica corresponde
a dicha funcin:
A=mc+n
A : Absorbancia.
n : Intercepto de la recta
m : Pendiente de la recta y que corresponde al producto entre absortividad a de la muestra y
el espesor b de la cubeta.
Luego se mide la absorbancia de la solucin problema y se interpola su valor en la grfica o
se reemplaza en la ecuacin (1), para obtener el valor de concentracin del analito. La
concentracin de la solucin problema debe estar comprendida en el rango de concentracin
que comprende la curva de calibracin. Si la concentracin de la solucin problema es menor
que la concentracin del estndar ms diluido, debe usarse el mtodo de adicin estndar,
que consiste en adicionar un volumen determinado de un estndar concentrado a la solucin
problema, antes de realizar la lectura y que permite que esta lectura este dentro de las
obtenidas para la curva de calibracin. En el caso contrario, si la concentracin del analito es
mayor que la concentracin del estndar ms concentrado la solucin problema deber ser
diluida.
Objetivo:
Determinar el por ciento de contenido de clorhidrato de fenazopiridina en tabletas por curva
estndar, espectrofotometra visible.
Hiptesis:
Contiene no menos del 95.0% y no ms del 105.0% de la cantidad de clorhidrato de
fenazopiridina indicada en el marbete. Segn FEUM 5 ed pp: 1208
Procedimiento Experimental:
Preparacin de disoluciones
Calculos:
0.8
C=
( 1 cm ) 0.12863541
A= 0.8 6.2192
A=0.2
mL
g cm
=6.2192
g
mL
g
mL
x=1.5548
g
mL
C P=
mg 1000 g 2 mL 1 mL
g
=4
( 100
100 mL )( 1mg )( 50 mL )( 10 mL )
mL
67%
X= 12.663 mg
CE (g/ml) Abs 426 nm
2.5326
0.288
12.663 mg 1mL
5.0652
0.569 C E= 1000 mL 50 mL
7.5978
0.822
12.663 mg 2mL
Problema
C E=
1000 mL 50 mL
2.5263
0.292
2.6116
0.301
12.663 mg 3 mL
2.1848
0.256 C E=
1000 mL 50 mL
(
(
(
)(
)(
)(
g
=2.5326 g /mL
)( 1000
1mg )
g
=5.0652 g/mL
)( 1000
1mg )
g
=7.5978 g/mL
)( 1000
1mg )
g 2 mL 1 mL
( 100xmL )( 1000
1mg )( 50 mL )( 10 mL )
x=Cp (100 mL )
1 mg
( 502 mLmL )( 101 mLml )( 1000
g )
g
50 mL 10 ml
1 mg
( 100 mL ) (
=63.1575 mg
( 2.5263
mL )
2mL )( 1 mL )( 1000 g )
X 2=
g
50 mL 10 ml
1 mg
( 100 mL ) (
=65.29 mg
( 2.6116
)
)(
)(
mL
2 mL 1mL 1000 g )
X 3=
gg
1 mg
=54.62 mg
( 2.1848
) (100 mL ) ( 502 mLmL )( 101 mLml )( 1000
mL
g )
mg
=62.2803125mg
( 63.1575
201.6 mg )
X 2=198.8 mg
mg
=64.60752613mg
( 65.29
200.9 mg )
X 1=198.8 mg
mg
=54.40108216 mg
( 54.62
199.6 mg )
( 100100mg )=62.2803125
X 2=64.60752613mg
( 100100mg )=64.60752613
X 3=54.40108216mg
( 100100mg )=54.40108216
Para los siguientes calculos se descart el ensayo del problema 3 puesto a que al ser
conciderado, se obtena un CV>3% el cual no es aceptable
X promedio =
X1+ X2
=63.44391930
2
( X 1X promedio )2 +( X 2 X promedio )2
DS=
=1.163606816
2
( X DS ) ( 100 )=1.83
CV =
promedioi
Resultados:
b = 0.02566666667
m = 0.1054252547
0.999572086
CE (g/ml) r2=Abs)
426 nm
r = 0.9990843817
2.5326
0.288
Curva estndar
0.292 x^ =2.5263
0.301x^ =2.6116
0.256x^ = 2.1848
5.0652
0.569
7.5978
0.822
Problema
2.5263
0.292
2.6116
0.301
2.1848
0.256
Grafica de la Curva Estandar (Absorbancia vs Concentracin)
Curva estndar
f(x) = 0.11x + 0.03
R = 1
Se emple balanza analtica xB220A con nmero de inventario 0802662 y registro de Bello
Flores Mauricio con fecha 10/02/2016
Muestra
Masa de polvo
de tabletas
Abs 426 nm
CP (g/ml)
% contenido
1
2
201.6
200.9
0.292
0.301
2.5663
2.6116
62.2803125%
64.60752613%
Anlisis de Resultados:
Conclusiones:
Referencias Bibliogrficas:
Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos 5a ed. Mxico: Secretaria de Salud; pp.1208
Anexos:
Fotos de absorbancia, tomadas del espectrofotmetro Thermo Scientific de 1 haz con
nmero de inventario: 02416870 con registro de Lpez Vera Carlos Ernesto y fecha de
10/02/2016
Estandar
2.3.-
Problema
1.-
2.-
3.-