DEGRADACIN DE LA GLUCOSA

La glucgeno fosforilasa es una enzima bacteriana fosfato de piridoxal que transforman

Glucgeno en glucosa 1-fosfato, que se transforma a continuacin con la glucosa-6fosfato, un intermedio normal de la gluclisis.
El glucgeno es un polmero ramificado grande de restos de glucosa unidos por mayora
un 1,4-glicosdicos. Sin embargo, se crean ramas en aproximadamente cada 10 residuos
por enlaces -1,6.
Carl y Gerty Cori se muestra en 1947 que el glucgeno es escindida por ortofosfato para
producir un nuevo tipo de azcar fosforilado (el ster de Cori), que se identificaron como
glucosa-1-fosfato. El Coris tambin aisl y se cristaliz la glucgeno fosforilasa, la enzima
que cataliza la reaccin de:

Fosforilasa cataliza la eliminacin secuencial de los residuos de glicosilo de la extremo no

reductor de glucgeno (el extremo con un grupo 4-OH libre).
La reaccin es fcilmente reversible in vitro. Sin embargo, la escisin fosforoltica de
glucgeno es energticamente ventajoso; una escisin hidroltica llevara a glucosa, que
tendra que ser fosforilada para entrar en la gluclisis y podra difundirse fuera de la clula,
mientras que la ionizado de glucosa-1-P no puede.
La gluclisis
La gluclisis o ruta de Embden-Meyerhof es la principal va para anaerbico degradacin
de carbohidratos que se encuentran en la mayora de los grupos de organismos (Fig. 1). Por
cada mol de glucosa consumida, 36 kcal de energa es liberada. Los obtiene organismo un
rendimiento neto de ATP 2 moles por mol de glucosa. El material de partida es el glucgeno
(en bacterias y animales) o almidn (en plantas), que se hidroliza en glucosa-1fosfato de glucosa o monmeros. La gluclisis se puede dividir en cuatro fases:
(A) La formacin de tres molculas de triosa fosfato (gliceraldehdo-3-fosfato y
dihidroxiacetona fosfato) a partir de una molcula de hexosa. Dos molculas de ATP se
consumen en esta fase.
(B) La deshidrogenacin de los fosfatos de triosa a 2-fosfoglicerato. En este proceso, NAD
+ se reduce a NADH. Una molcula de ATP se genera por triosa fosfato, que compensa la
ATP invertido en la primera fase.
(C) La conversin de 2-fosfoglicerato en piruvato a travs de fosfoenolpiruvato. Otra ATP
se genera aqu por cada molcula de piruvato.
(D) La reduccin de piruvato para regenerar NAD +. Mientras que en el msculo, el
piruvato se convierte en lactato, en la levadura se descarboxila reductivamente a etanol.

HEXOQUINASA
En eucariotas, la glucosa entra en las clulas a travs de la mayora de las protenas de
transporte especficas y tiene una suerte principal: que es fosforilada por el ATP para formar
glucosa-6-fosfato. Esta transferencia es catalizada por la hexoquinasa, que transfiere el
grupo fosforilo de ATP a variedad de azcares de seis carbonos (hexosas), tales como
glucosa y manosa o D-glucosamina. Hexoquinasa, como todas las otras quinasas, requiere
Mg ++ para la actividad, reemplazable por Mn ++. El ion de metal divalente forma un
complejo con ATP. Se liga hexoquinasa especficamente a porina, una protena de la
membrana mitocondrial externa, que permite ADP y azcares para penetrar esta membrana.
Por lo tanto, aunque la hexoquinasa es un soluble enzima, por lo tanto, puede estar asociada
con la mitocondria bajo condiciones fisiolgicas condiciones. Esta idea es apoyada por
observaciones que mitocondria-asociado hexoquinasa tiene una Km ms alto para MgATP
y es ms susceptible a producto inhibicin por glucosa-6-fosfato. estudios de rayos X de
cristales cultivados en la hexoquinasa la presencia o ausencia de glucosa indican que
cuando la glucosa est enlazado, un lbulo de la molcula gira a travs de 12% para cerrar
la hendidura de unin del sustrato. En esto conformacin, el agua se excluye de la
hendidura. El cambio de conformacin tambin se produce en solucin acuosa. Se requiere
que el cambio conformacional de la actividad; anlogos de la glucosa que son demasiado
voluminosos para permitir que no son sustratos, aunque pueden ser inhibidores. En E. coli,

la glucosa 6-fosfato no se forma bajo la accin de un hexoquinasa, sino que se genera por el
sistema PTS.
GLUCOSA 6-FOSFATO ISOMERASA
El siguiente paso en la gluclisis es la isomerizacin de la glucosa-6-fosfato a fructosa 6fosfato. El anillo de piranosa de seis miembros se convierte en el de cinco miembros anillo
de la fructosa-6-P (F-6P) convertir una aldosa en una cetosa. IGP mutantes crecen
lentamente en glucosa usando la va de las pentosas-P (Captulo 7) con la formacin
oxidativa de las pentosas-P de la glucosa 6-P y con la no oxidativo reacciones que producen
la fructosa 6-P y gliceraldehdo 3-P. se utiliza glucosa isomerasa industrialmente para la
produccin de fructosa para aumentar el dulzor de bebidas y paraaumentar la plasticidad de
papel. La estructura y la funcin de una enzima a partir de Actinoplanes missouriensis
catalizar la isomerizacin de la glucosa no fosforilada en fructosa tiene sido estudiado por
Cristalografa de rayos X y la mutagnesis dirigida al sitio despus de la clonacin y la
sobreexpresin en E. coli. fosfomanosa isomerasa se utiliza tanto en el catabolismo de
azcar (crecimiento en manosa) y la sntesis de polisacridos. Los mutantes que carecen de
esta isomerasa se bloquean en el crecimiento de manosa y son defectuosos en
mannosecontaining polisacridos.
FOSFOFRUCTOQUINASA
Un segundo fosforilacin sigue a la etapa de isomerizacin
La fructosa 6-P es fosforilada por el ATP en fructosa 1,6-bisfosfato. Esta reaccin es
catalizada por la fosfofructoquinasa (PFK), una enzima alostrica que es la ms elemento
de control importante en la va glucoltica. Hay dos tipos principales de
phosphofructokinases, el alostrico dependiente de ATP phosphofructokinases y el
pirofosfato (PPi) phosphofructokinases dependientes, siendo ambas las enzimas limitantes
de la velocidad de la gluclisis. Dependiente de ATP tpico PFKs homotetramrica se han
descrito en Bacillus stearothermophilus y E. coli, y su estructura tridimensional
determinados. PFKs pirofosfato dependientes se encuentran en las plantas y en los protistas
Giarda lamblia, Toxoplasma gondii, Trichomonas vaginalis y Naegleria fowleri. Su
diferencia con los PFKs dependientes de ATP, especialmente con la enzima humana, ellas
un objetivo importante de drogas hace. La terapia actual para las infecciones causadas por
estos patgenos es inadecuada, especialmente para los nios, mujeres embarazadas y las
personas con trastornos inmunolgicos. A los efectos de diseo de frmacos para el
tratamiento de parsitos infecciones, un modelo de PPi PFK de E. histolytica se ha
construido sobre la base de la estructura tridimensional de la ATP-PFK de B.
stearothermophilus. Los interacciones frmaco-enzima predichos sugiere que dos
bisfosfonatos seran inhibidores competitivos de pirofosfato. A pesar de un bajo nivel de
secuencia global identidad entre estos dos grupos de quinasas, las similitudes en los
residuos del sitio activo permitir una alineacin de aminocidos convincente. El empleo de

secuencia de la protena reciente y los datos de mutagnesis dirigida a lo largo con las
coordenadas tridimensionales conocidas de E. PFK dependiente de ATP coli, un modelo del
sitio activo de PFK PPi dependiente fue propuesto. Adems de proporcionar la colocacin
de los residuos compatible demostrado ser importante por estudios de mutagnesis
anteriores, el modelo predijo un papel importante para dos residuos arginilo que se
conservan en todas las secuencias de PPi-PFK conocidos. Un alineacin de todos los PFK
de los dos tipos muestra un residuo de metionina conservada que se desprende de la
estructura cristalina de E. coli PFK estar interactuando con fructosa-6-P. sustituciones muy
conservadoras de este metionina por leucina o isoleucina por mutagnesis dirigida al sitio
de E. coli ATP-PFK y Entamoeba histolytica PPi-PFK producido profundas disminuciones
ya sea en la afinidad aparente para fructosa 6-P o en velocidad mxima, o ambos. La
metionina proporciona una interaccin altamente especfica con fructosa 6-P para la unin
y para la estabilizacin del estado de transicin.
Regulacin de la fosfofructoquinasa en bacterias
Fosfofructoquinasa (ATP / PFK) a partir de B. stearothermophilus muestra cooperativa
cintica con respecto a la F6P sustrato, la activacin alostrica por ADP y la inhibicin por
fosfoenolpiruvato. Los tres sitios de unin a ligando han sido localizados por cristalografa.
Dos de ellos forman el sitio activo y se unen al sustrato y F6P ATP. La tercera sitio de unin
se une tanto activador alostrico y el inhibidor. Estas estudios estructurales muestran que la
F6-P sustrato se une entre dos subunidades de la tetrmero y efectores alostricos entre otro
par de subunidades. El sustrato cooperatividad y control alostrico son mediadas y
explicados por estos ligandos puentes entre subunidades. El anlisis de la estructura
cristalina similar del complejo de la fosfofructoquinasa de E. coli con sus productos de
reaccin, as como el estudio de mutaciones en la interfaz entre subunidades han permitido
la identificacin de residuos que participan en las interacciones de subunidades. Adems de
la fosfofructoquinasa ms estudiado 1 (codificada por pfkA), Escherichia coli K12 contiene
un fosfofructoquinasa ATP adicional: mientras fosfofructoquinasa 1, el ms estudiado uno,
se comporta como una enzima alostrica, fosfofructoquinasa 2 (codificada por pfkB)
presenta las caractersticas de un Michaelian enzima. De hecho, la fosfofructoquinasa 2
tambin presenta algunas propiedades reguladoras in vitro: a altas concentraciones, el ATP
es un inhibidor de la fosfofructoquinasa 2 y que provoca la tetramerizacin de la enzima
nativa dimrica. La unin de la dos sustratos para la fosfofructoquinasa 2 es secuencial y
ordenada como para fosfofructoquinasa
1, pero en el primer caso la fructosa 6-fosfato es el primer sustrato
obligarse y ADP el primer producto que ser lanzado. Cada dmero de
fosfofructoquinasa 2 se une a dos molculas de fructosa 6-fosfato, pero slo
una molcula del producto fructosa 1,6-bifosfato. Esta protena no alostrico

es un tetrmero de un poco ms grande de peso molecular de la subunidad de la

fosfofructoquinasa
1. No muestra las interacciones de cooperacin con F6-P, la inhibicin de la
fosfoenolpiruvato
o la activacin por ADP. A diferencia de ATP-PFK1, es algo
sensible a la inhibicin por F1,6 -bisphosphate y puede utilizar tagatosa 6-P como una
sustrato. Aunque ambos phosphofructokinases de E. coli K12 presentan algunos
propiedades reguladoras in vitro, el mecanismo de regulacin de la actividad de la
dos enzimas es notablemente diferente. Se puede comprobar si estos mecanismos o no
operar in vivo.
El regulador de FruR de E. coli controla la iniciacin de la transcripcin de varios
operones que codifican una variedad de protenas implicadas en el metabolismo del
carbono y energa.
Se detectaron sitios diana fruR que muestran un alto grado de simetra en 13 genes o
operones: pfkA es uno de ellos y la expresin de la enzima correspondiente se
regulado negativamente por FruR.