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Dacie y Lewis

HEMATOLOGA
PRCTICA
10.a edicin
S. Mitchell Lewis, BSc, MD, FRCPath, DCP, FIBMS
Emeritus Reader in Haematology,
University of London;
Senior Research Fellow in Haematology, Imperial College School of Medicine,
Hammersmith Hospital, Londres, Reino Unido

Barbara J. Bain, FRACP, FRCPath

Professor of Diagnostic Haematology,
St. Marys Hospital Campus of Imperial College
Faculty of Medicine, Londres, Reino Unido

Imelda Bates, MD, FRCP, FRCPath

Senior Lecturer in Tropical Haematology,
Liverpool School of Tropical Medicine,
University of Liverpool, Liverpool, Reino Unido

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ndice de captulos

Autores

vii

9. Mtodos de laboratorio utilizados para la

investigacin de las anemias hemolticas 161

Prefacio

ix

S. M. Lewis y D. Roper

Abreviaturas
Nota

10. Investigacin de las anemias hemolticas

hereditarias: anomalas enzimticas
y de la membrana 177

xi

xiii

D. Roper y M. Layton
1. Recogida y manipulacin de la sangre

1
11. Anemias hemolticas adquiridas

S. M. Lewis y N. Tatsumi

205

B. J. Bain y N. Win

2. Intervalos de referencia y valores normales

11
12. Investigacin de las hemoglobinas anmalas
y de las talasemias 233

S. M. Lewis
3. Tcnicas hematolgicas bsicas

B. Wild y B. J. Bain

23

B. J. Bain, S. M. Lewis e I. Bates

13. Citoqumica eritrocitaria y leucocitaria

267

D. Swirsky y B. J. Bain

4. Mtodos de preparacin y tincin de las

extensiones sanguneas y de la mdula sea

51
14. Inmunofenotipado

B. J. Bain y S. M. Lewis

287

E. Matutes, R. Morilla y D. Catovsky

5. Morfologa de las clulas sanguneas normales
y patolgicas 69

15. Radioistopos en el diagnstico hematolgico

B. J. Bain

I. Dokal y S. M. Lewis

6. Biopsia de la mdula sea

16. Exploracin de la hemostasia

99

325

M. Laffan y R. Manning

I. Bates
7. Anemia ferropnica y sobrecarga de hierro

305

113

17. Investigacin de la tendencia trombtica

379

M. Worwood

M. Laffan y R. Manning

8. Investigacin del estado de la cobalamina, el folato

y los metabolitos en la anemia megaloblstica 139

18. Control de laboratorio de la terapia anticoagulante,

tromboltica y antiplaquetaria 399

M. Hamilton y S. Blackmore

M. Laffan y R. Manning

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HEMATOLOGA PRCTICA

19. Antgenos y anticuerpos de las clulas sanguneas:

eritrocitos, plaquetas y granulocitos 413

24. Organizacin y gestin del laboratorio

S. M. Lewis y A. Bradshaw

S. Knowles y F. Regan
25. Seguridad en el laboratorio
20. Aspectos de laboratorio de las transfusiones
sanguneas 449
M. Rowley y C. Milkins
21. Anlisis molecular y citogentico
T. Vulliamy y J. Kaeda
Con la contribucin de B. J. Bain
22. Miscelnea

S. M. Lewis
26. Control de calidad

477

511

553

561

S. M. Lewis y B. De la Salle
27. Hematologa en laboratorios de recursos
escasos 573
I. Bates y B. Mendelow

S. M. Lewis
28. Apndices

587

23. Aproximacin al diagnstico y clasificacin

de los trastornos hemotolgicos 521

S. M. Lewis

I. Bates y B. J. Bain

ndice alfabtico

603

535

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Prefacio

Esta 10. edicin celebra el 55 aniversario de Hematologa

Prctica. Tanto la primera edicin de J.V. Dacie de 1950
como las sucesivas ediciones con Mitchell Lewis como
coautor se basaron en el curso de hematologa para el London University Diploma of Clinical Pathology (DCP) y posteriormente en la licenciatura en Hematologa en la entonces llamada Royal Postgraduate Medical School.
La ciencia mdica ha crecido de forma exponencial en el
ltimo medio siglo; sin embargo, ninguna disciplina se ha
expandido ms que la hematologa, tanto en sus aspectos clnicos como de laboratorio. Inicialmente, la hematologa de
laboratorio se restringa casi al recuento sanguneo con
una cmara de recuento y un microscopio. El recuento sanguneo sigue siendo una prueba esencial porque proporciona
un componente importante para el diagnstico y el tratamiento del paciente; sin embargo, los instrumentos automticos actuales analizan las propiedades fisicoqumicas de las
clulas sanguneas individuales y ofrecen datos metrolgicos
precisos sobre los eritrocitos, los leucocitos y las plaquetas
a una velocidad inimaginable en aquellos primeros tiempos.
La sofisticada tecnologa permite que los anlisis ms complejos sean realizados de forma rutinaria en muchos laboratorios; entre ellos se incluyen los estudios de ADN, el inmunofenotipado para la clasificacin de las leucemias, el
diagnstico de las anemias megaloblsticas y las mediciones
con radioistopos. No obstante, tenemos que admitir que no
todos los laboratorios disponen de las pruebas ms sofisticadas y dedicamos un captulo a las pruebas esenciales en los
laboratorios con pocos recursos y en los centros de salud.
Tambin tenemos en cuenta el uso creciente de los dispositivos listos para su uso, comercialmente disponibles, para muchas pruebas de laboratorio, y la tendencia a la realizacin
de algunas de estas pruebas en el punto de asistencia; aportamos sugerencias sobre el papel de soporte del laboratorio
para garantizar la fiabilidad de esta ltima prctica.
Otro avance de enorme impacto es Internet, mediante
el cual se puede localizar cualquier tema, a menudo con
una abrumadora cantidad de informacin, a partir de una
sola palabra clave. Indicamos unos cuantos sitios de In-

ternet que son importantes para la hematologa, incluyendo los de los fabricantes de dispositivos y reactivos
especializados.
Los cientficos biomdicos son, cada vez ms, los responsables del trabajo de laboratorio, de la misma forma
que los hematlogos, mdicamente cualificados, estn ms
implicados en la asistencia clnica a los pacientes. Sin embargo, ambos grupos deben ser conscientes de la importancia de la organizacin y la direccin eficaz de un laboratorio, de la necesidad de mantener unos estndares tcnicos elevados con controles de calidad bien establecidos y
del conocimiento de la importancia clnica de las investigaciones hematolgicas. Los principios de buena prctica
de laboratorio los estableci Dacie en su 1. edicin, cuando escribi: Todos aquellos implicados en el trabajo de laboratorio deben comprender cul es la importancia de las
pruebas que realizan, el valor relativo de las investigaciones hematolgicas y el orden en que deben emprenderse.
Hemos intentado mantener su enfoque por lo que hace al
contexto y al estilo, si bien actualizado para satisfacer la
prctica actual.
Deseamos expresar nuestro agradecimiento a todos nuestros colaboradores, y tambin a otros colegas que nos facilitaron consejo experto en temas especficos; entre ellos
debemos mencionar especialmente a Michel Deenmamode
(Radioistopos), Mark Griffin (Salud y seguridad), Julia
Howard (Citogentica), John Meek (Qumica clnica), Andrew Osei-Bimpong (Hematologa general).
Como especial homenaje con ocasin del 55 aniversario,
esta edicin est dedicada a Sir John Dacie, a sus estudiantes de diversos pases, cuyas posteriores y distinguidas carreras se inspiraron en l, y al centro que l mismo fund
en la antigua Royal Postgraduate Medical School de la
Universidad de Londres, actualmente Faculty of Medicine
of Imperial College at Hammersmith Hospital.
S. Mitchell Lewis
Barbara J. Bain
Imelda Bates

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Abreviaturas

ACD
cido citrato dextrosa
AcMc,
anticuerpo monoclonal
AcMo
ACRES
sitio de amplificacin creado por enzimas de
restriccin (del ingls, amplification created
restriction enzyme site)
ADA
adenosindesaminasa
ADE
amplitud de la distribucin eritrocitaria
ADH
amplitud de distribucin de la hemoglobina
ADN
cido desoxirribonucleico
ADP
adenosindifosfato
AET
2-aminoetil-iso-tiouronio
AHA
anemia hemoltica autoinmunitaria
ANAE
alfa naftil acetato esterasa
ANB
alfa naftil butirato
AP
activador del plasmingeno
APAAP fosfatasa alcalina anti-fosfatasa alcalina (del
ingls, alkaline phosphatase anti-alkaline
phosphatase)
ARN
cido ribonucleico
ASB
albmina de suero bovino
ASOH
hibridacin de oligonucletidos especficos
de alelos (del ingls, allele-specific
oligonucleotide hybridization)
AT
antitrombina
ATP
adenosintrifosfato
BCSH
Comit britnico de normalizacin en
hematologa (del ingls, British Committee
for Standards in Haematology)
C
complemento
C3, C3d, componentes del complemento
C3sg
CAE
naftol AS-D cloroacetato esterasa
CD
cmulo de diferenciacin
CFA
capacidad de fijacin del anticuerpo
CHAD
enfermedad por hemoaglutinina fra (del ingls,
cold haemagglutinin disease)
CHCM
concentracin de hemoglobina corpuscular
media
Cp
citoplasmtico
CPD
citrato-fosfato-dextrosa
CTP
citosintrifosfato
CV
coeficiente de variacin

DAB
DE
DMSO
2,3 DPG
DTT
EDTA
EGIL

diaminobenzidina
desviacin estndar
dimetilsulfxido
2,3-difosfoglicerato
ditiotreitol
cido etilendiaminotetraactico
Grupo europeo para la clasificacin
inmunolgica de las leucemias (del ingls,
European Group for the Immunological
Classification of Leukaemias)
ELISA
anlisis de inmunoabsorcin ligada a enzimas
EN
eritrocito nucleado
ENE
esterasa no especfica
ER
enzima de restriccin
FAB
francs-americano-britnico (clasificacin)
FAG
fosfatasa alcalina granuloctica
FE
ficoeritrina
FSc
dispersin de la luz hacia delante (del ingls,
forward light scatter)
FVL
factor V de Leiden
g
gramos o fuerza centrfuga relativa, segn
contexto
G6PD
glucosa-6-fosfato deshidrogenasa
GPI
glucosilfosfatidilinositol
Hb
hemoglobina o concentracin de hemoglobina
HbCO
carboxihemoglobina
HCM
hemoglobina corpuscular media
HEMPAS multinuclearidad eritroblstica hereditaria con
prueba del suero acidificado positiva (del
ingls, hereditary erythroblastic multinuclearity
with positive acidified-serum test)
Hi
metahemoglobina
HiCN
cianometahemoglobina
HPF
hemoglobinuria paroxstica por fro
HPLC
cromatografa en fase lquida de alta resolucin
(del ingls, high performance liquid
chromatography)
HPN
hemoglobinuria paroxstica nocturna
Hto
hematocrito
ICSH
Comit internacional para la normalizacin en
hematologa (del ingls, International Council
for Standardization in Haematology)
IDR
inmunodifusin radial

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HEMATOLOGA PRCTICA

IEF

enfoque isoelctrico (del ingls, isoelectric

focusing)
Ig
inmunoglobulina
IgA
inmunoglobulina A
IgD
immunoglobulina D
IgE
immunoglobulina E
IgG
immunoglobulina G
IgM
immunoglobulina M
IP
immunoperoxidasa
ITCF
isotiocianato de fluorescena
kb
kilobase
LCP
leucemia de clulas peludas
LELV
linfoma esplnico con linfocitos vellosos
LISS
medio salino de baja fuerza inica (del ingls,
low ionic strength saline)
LLA
leucemia linfoblstica aguda
LLC
leucemia linftica crnica
LLC/PL leucemia linftica crnica con aumento
de prolinfocitos
LLTA
leucemia/linfoma de linfocitos T del adulto
LMA
leucemia mieloide aguda
LMC
leucemia mieloide crnica
LPLB
leucemia prolinfoctica de clulas B
2-ME
2-mercaptoetanol
MESF
molculas de fluorocromo soluble equivalente
MGG
May-Grnwald-Giemsa
MO
mdula sea
MPO
mieloperoxidasa
NEQAS evaluacin externa de la calidad nacional (del
ingls, national external quality assessment)
NISS
medio salino de fuerza inica normal (del ingls,
normal ionic strength saline)
OMS
Organizacin Mundial de la Salud
p/v
peso/volumen
PAI
prueba de antiglobulina indirecta
PAS
cido perydico de Schiff
pb
par de bases
PBS
medio salino tamponado con fosfato (del ingls,
phosphate-buffered saline)
PBSmedio salino tamponado con fosfato que
azidacontiene azida sdica y albmina de suero
BSA
bovino
PCR
reaccin en cadena de la polimerasa
PCR-TR reaccin en cadena de la polimerasa
de la transcriptasa reversa
PDA
prueba directa de antiglobulina
PDF
productos de degradacin de la
fibrina/fibringeno

PHHF
pI
PK
PML
POE
PVP
QSC
RE
RFLP
RL
RTCN
RVH
SDS
SHb
SMD
SmIg
SMRA
SP
SSc
SSCP

TAE
TBE
TBS
TCR
TE
TEB
TP
t-PA
TR
TT
TTPA
UI
UIBC
UV
v/v
VCM
VIH
vol
VPM

persistencia hereditaria de la hemoglobina fetal

punto isoelctrico
piruvatocinasa
protena codificada por el gen PML
procedimiento operativo estndar
polivinil pirrolidina
quantum simply cellular
recuento eritrocitario
polimorfismo de la longitud de fragmentos
de restriccin
recuento leucocitario
recuento total de clulas nucleadas
regin hipervariable
dodecil sulfato de sodio
sulfahemoglobina
sndrome o sndromes mielodisplsicos
immunoglobulina de superficie (del ingls,
surface immunoglobulin)
sistema de mutacin refractario a la
amplificacin
sangre perifrica
dispersin de la luz lateral (del ingls, sideways
light scatter)
polimorfismo de conformacin monocatenario
(del ingls, single-strand conformation
polymorphism)
tris-acetato EDTA (tampn)
tris-borato EDTA (tampn)
salino tamponado con tris
receptor del linfocito T
trisEDTA (tampn)
tris-EDTA-borato (tampn)
tiempo de protrombina
activador del plasmingeno tisular
transcriptasa reversa
tiempo de trombina
Tiempo de tromboplastina parcial activado
unidades internacionales
capacidad no saturada de fijacin del hierro
(del ingls, unsaturated iron-binding capacity)
ultravioleta
volumen/volumen
volumen corpuscular medio
virus de la inmunodeficiencia humana
volumen
volumen plaquetario medio

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xiii

NOTA
Siguiendo las recomendaciones de la Organizacin Internacional de Estandarizacin (ISO), la Organizacin Mundial de la Salud (OMS) y otras autoridades internacionales,
hemos utilizado el sistema internacional (SI) para expresar
las cantidades y las unidades (v. pgs. 592-593). La concentracin de las soluciones se expresa en mol/l (para las
concentraciones de las sustancias) o en g/l (para las concentraciones de la masa). Aunque somos conscientes de
que en algunos pases an se utilizan los g/dl para expre-

sar la concentracin de hemoglobina, hemos empleado g/l

segn la convencin internacional. Para convertir esta
cantidad en g/dl, basta con dividirla por 10.
Hemos indicado la fuente de un reactivo, equipo o dispositivo en caso de que haya un nico fabricante o cuando se recomienda una fabricacin especfica. Si no se indica la fuente, el material o el equipo adecuado estarn
disponibles, por lo general, en diferentes suministradores.
Los catlogos de estos fabricantes y la informacin detallada sobre el uso de sus equipos exclusivos pueden encontrarse en sus pginas web.