Practica No- 1

INFORME

LAVADO, SECADO, ESTERILIZCION DE MATERIAL DE

VIDRIO.

MATERIALES: REACTIVOS:
 Detergente - Solución sulfocromica.
 Lejía
 Bandeja plástica
 Escobilla para tubos
 Agua corriente
 Papel graff
 Regla
 Tijera
 Guantes
 Cocina corriente
 Campo limpio
 Hilo pabilo
 Gasa
 Mascarilla n 95

PREPARACION DE SOLUCION SOLFUCROMICA:

Base 1000 ml.
♦ Bicarbonato de potasio --------------------100gr.
♦ Agua corriente-------------------------------250ml.
♦ Acido sulfúrico-------------------------------250ml.
♦ Agua corriente-------------------------------250ml

Base 100ml.
♦ Bicarbonato de potasio------------------------10gr.
♦ Acido sulfúrico----------------------------------2.5ml.
♦ Agua corriente----------------------------------47.5ml.
♦ Agua corriente--------------------------CSP 100ml.
 PROCEDIMIENTO:

1.-Nos ubicamos en nuestra mesa de trabajo con todos los

materiales puesto el guardapolvo, guantes, mascarilla.

2.- calibramos la balanza llevando acero, pesamos el papel que

peso luego el reactivo que es un gramo.

3.-medimos en la probeta 500ml de agua corriente y hecahmos al

matraz, y luego calentamos el agua.

4.-agregar los 1gr de potasio mezclar hasta que se disuelva por

completo, luego agregar el acido sulfúrico 2.5ml midiendo con la
pipeta cero lógica y agregar el agua corriente calentado faltante.
Hasta que quede medido los 100ml.
PROCEDIMIENTO PARA LIMPIAR MATERIAL SUCIO.

1. Colocar en un recipiente que contenga lejía al 10% con

detergente los materiales sucios y dejar en reposo por 2-3
horas.

2. Lar con cepillo todos los materiales y luego enjuagar con

agua de caño hasta que no quede nada de espuma.

3. Escurra los materiales (tubos, matraces, probetas, placas

petris etc.)

4. Enseguida se seca con un campo limpio para luego

empaquetarlo con papel kraff para guardarlo en un almacén
que le proteja del polvo.
PROCEDIMIENTO PARA LAVAR LÁMINAS
PORTAOBJETOS NUEVAS.

♦ Los materiales de vidrio nuevos que nunca se

utilizaron son ligeramente alcalinos. Para neutralizarse
debe hacerse lo siguiente.

1. poner en un recipiente adecuado 3 litros de agua con

60ml de acido clorhídrico (solución al 2%).

2. sumergir los materiales de vidrio sin usar en esta

solución por 24 hras.

3. enjuagar dos veces con agua corriente.Por ultimo

secarlo para empaquetarlo.
 PRACTICA: N.- 2
DOSAJE DE HEMOGLOBINA.

Sirve para de terminar el tipo de anemia puede tener el

paciente
(Ferropenica, meloblastica, analítica).

METODO FOTOCOLORIMETRO:

PRINCIPIOS GENERALES:

♦ La hemoglobina es el pigmento rojo que se encuentra

en los electrolitos se componen de hierro transporta
oxigeno a las células de los tejidos del organismo.

♦ Su valor se expresa en gramos 100/ml.

♦ La sangre se diluye en liquido de Drakin, que destruye

los eritrocitos y convierte la hemoglobina en
cianometahemoglobina.Este resultados se examina
por medio de un espectrofotómetro.

♦ El método fotométrico de la cianometahemoglobina

permite hacer cálculos mas precisas de la cantidad de
hemoglobina.

MATERIALES GENERALES: EQUIPOS: REACTIVOS:

• Tubos de ensayo - Espectofotómetro. - Drabkin.

• Gradilla - Estabilizador de corriente.
• Micro pipeta - foto colorímetro.
• Porta cubetas - Refrigeradora.
• Pro pipetas
• Pipeta cero lógica
• Pipeta de salí.
• Ligadura
• Aguja * 21
 • Campo estéril
TECNICA CON LA MICRO PIPETA.

MATERIALES: EQUIPOS:

 Tubo de ensayo 13*100 - Espectrofotómetro

 Tips amarillo – 10ul - Estabilizador de corriente
 Gradilla - Foto colorímetro
 Cubeta y porta cubeta - Refrigeradora
 Micro pipeta – rango 10-50ul
 Pipeta cero lógica
 Pro pipeta – bombilla

PROCEDIMIENTO:

1. Se coloca en la mesa de trabajo todos los materiales para

realizar la extracción de sangre.teniendo en cuenta que
tengamos puestos el guardapolvo, guantes, etc.

2. Una ya calzados los guantes se realiza la extracción de

sangre 3 ml con E.D.T.A.
 3. Una vez obtenida la sangre se deja que coagule por 10min.

4. preparamos 3 tubos B ,S ,D.

B S D
Muestra 10ul
Standar 10ul
Rvo de 2.5 ml 2.5ml 2.5m.l
trabajo

TECNICA CON LA PIPETA DE SALI.

Materiales:
 pipeta de Salí
 ligadura
 boquilla

PROCEDIMIENTO

1. Se rotula 3 tubos B.S.D. luego se hecha 10ul de reactivo

estándar en el tubo S.
 2. luego se hecha 10ul de muestra en el tubo D.

3. por último se echa 5ml de reactivo en todos los tubos B.S.D

B S D
Muestra 10ul
Standar 10ul
Rvo de 5 ml 5 ml 5 m.l
trabajo

VALORES NORMALES:

Varones = 14-16
Mujeres = 13- 15

Resultados: Hb= DxF

Hallando. Fx = CS = 15.6
CL 0.35
Hb = 0.40x 44.5 = 17
Resultado =17
PRACTICA Nº- 3
DOSAJE DE UREA

MATERIALES:
 Tubo de ensayo 13*100
 Tubo sistema al vacío
 Guantes
 Tips celestes, amarillo
 Gradillas
 Campo estéril
 Agujas *21
 Guardapolvo
 Agua destilada
 Bacuteiner
 Campana

EQUIPOS:
 Centrifuga
 Espectrofotómetro
 Refrigeradora
 Estabilizador

REACTIVOS:
 Urea

PROCEDIMIENTO.

1. Se coloca todos los materiales en la mesa de trabajo

2. Se realiza la extracción sin E.D.T.A luego se deja que

coagule por 5 min. Y se vaquetea.
3. Se hace la calibración y se lleva a la centrifuga por 5 min.
por 3500rvm.

PREPARACION DE REACTIVO DE TRABAJO.

-Vierte 4 componentes:
1. Reactivo salicilato
2. Reactivo hipoclorito
3. Suspensión de ureasa
4. Estándar urea.

MATERIALES PARA PREPARAR REACTIVO.

 Matraz
 Pipeta cerio lógica.
 Pro pipetas

PREPARACION DE REACTIVO

Para 10 muestras mas 3 muestras ( B .S .D ) = 13

 Se mide 13 ml solicelato con pro pipeta y se hecha matraz.
  se añade 13 gotas ureasa y luego se homogeniza.

MATERIALES PARA PROCEDIMIENTO DE GLUCOSA

 Tips
 Pro pipeta

PROCEDIMIENTO.

1. Medir 1ml de reactivo de trabajo en los tubos B.S.D.

2. luego se echa 10ul de estándar en el tubo S.

3. se mide 10ul de suero y se hecha en el tubo D.

4. se deja reposar por 5 min. A temperatura ambiente en
caso que usáramos el baño maría se tempera a 3 min.

5. pasado los 5 min., se hecha 1ml de reactivo hipoclorito

con el tips celeste a cada tubo B.S.D.
CALIBRACION DEL ESPECTOFOTOMETRO:

1. se prende esperamos que caliente 15minutos.

2. se lleva el set a cero.

3. poner la longitud de honda

4. insertar el blanco

5. llevar el set a full en la escala (con el agua destilada)

6. insertar el blanco rvo, y se lleva a 100

7. retiramos el B y ponemos el S que midió 0.54 de

absorbancia.

8. y por final hacemos la lectura del D.

Ambicho = 0.17

Valores normales: 10-50ml/dl

Formula:

Fx = CS
LS

Fx = 66 = 122
0.54

Fx = DXF
 Fx = 0.17 * 122 =20.74

Resultado: 20.74

PRACTICA N.- 4

RECUENTO DEL NUMERO DE LEUCOCITOS O

GLOBULOS BLANCOS.

 El recuento de números de leucocitos o glóbulos

blancos se expresan mm3.

 La sangre se deposita en un liquido para diluir

leucocitos dejando intactos en cambio los eritrocitos
son destruidos por este liquido.

 Luego se cuentan los leucocitos en una cámara de

recuento por medio del microscopio y se calcula el
N.- que existe por mm3 de sangre.

 Es importante conocer el número de leucocitos, pues

este se altera en caso de enfermedades infecciosas.

REALIZACION DE 2 TECNICAS.

Pipeta de thoma. Micro pipeta

 Cámara de neubauer
Materiales:  Gradilla
 Ligadura  Cronometro
 Capuchón
 Tubos de 13*100
75*100
 Pipeta de thoma
 75*100
Materiales:  Gradilla.
 Tips amarillo y celeste
 Micro pipeta de 10-50ul
200- 1000 ul.
 Cámara de neubauer.
 Tubos 13*100
PREPARACION DE REACTIVO:

Solución de turk.

Materiales:
 Pro pipeta
 Viales
 Micro pipeta
 Pipeta cero lógica.

INSUMOS

Base 200ml.
 Azul de metileno --------------2ml
 Acido acético-------------------4ml
 agua destilada----------------200ml

Base 2ml.
 Azul de metileno--------------20ul
 Acido acético-------------------40ul
 Agua destilada------------------2ml

PROCEDIMIENTO PARA PREPARAR REACTIVO.

I. Se carga con la pro pipeta 2ml de agua destilada y se hecha

en un vial.
 II. Luego se hecha con la micro pipeta 20ul de Aceite Acético
con el tips amarillo.

III. Añadimos con la micro pipeta 20ul de Azul de Metileno.

PROCEDIMIENTO:

Pipeta de toma.

1. Realizamos la extracción de sangre de una manera usual con

E.D.T.A de 1-3ml ya sea en vial o en tubo.

2. Cargamos 0.05 ml de sangre con la pipeta de toma.

3. La parte posterior se limpia con una torunda hasta que quede a
0.05ml.

4. Se carga el reactivo turk hasta la línea 11sin presencia de

burbujas.

5. luego se homogeniza y se deja en reposo 3-5 min.

6. luego se descarta las 3 primeras gotas y la 4 gota se carga en la

cámara.

7. Se coloca una laminilla y se pone una pequeña gota y esa gota

se va jalar por capilaridad
 Micro pipeta:

1. Realizamos la extracción de sangre de una manera usual con

E.D.T.A de 1-3ml ya sea en vial o en tubo.

2. Cargamos 380ul de reactivo turk en un tubo de 13*100 más

20ul de sangre. Se homogeniza.

3. Se calibra la micro pipeta y con el tips se carga 20ul y se

carga en la cámara de neubauer.
 MICROSCOPIO.
E microscopio debe estar:
o Objetivo 10x
o Condensador abajo
o Diafragma cerrado.

- para dar resultados de los leucocitos tenemos que contar los 4

cuadrantes. Y se enfoca en el microscopio.

VN: 500-1000 LC3

     
Así se observa en cada cuadrante.