UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN CRISTBAL DE HUAMANGA

FACULTAD DE INGENIERA QUMICA Y METALURGIA DEPARTAMENTO ACADMICO DE INGENIERA QUMICA ESCUELA DE FORMACIN PROFESIONAL DE INGENIERA QUMICA LABORATORIO DE QUMCA ORGNICA INFORME 06

SIGLA PROFESOR INTEGRANTES : :

QU-241 Ing. CORDOVA MIRANDA Alcira LIMACO CARPIO, Eleazar

GRUPO
AO Y SEMESTRE AC.

:
: 2009 II

FECHA DE EJECUCION FECHA DE ENTREGA

: :

_ _ _ _ _ _

AYACUCHO - PER 2009

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I.

OBJETIVOS :

Identificar y obtener los aminocidos y protenas mediante reacciones. Conocer las propiedades fsicas y qumicas de los aminocidos y protenas. Conocer algunas propiedades de las protenas.

II.

FUNDAMENTO TERICO:

I.

AMINOCIDOS Y PROTEINAS

LOS AMINOCIDOS: Son sustancias cristalinas, casi siempre de sabor dulce; tienen carcter cido como propiedad bsica y actividad ptica;

qumicamente son cidos carbnicos con, por lo menos, un grupo amino por molcula, 20 aminocidos diferentes son los

componentes esenciales de las protenas. Aparte de stos, se conocen otros que son componentes de las paredes celulares. Las plantas pueden sintetizar todos los aminocidos, nuestro cuerpo solo sintetiza 16, aminocidos, stos, que el cuerpo sintetiza reciclando las clulas muertas a partir del conducto intestinal y catabolizando las protenas dentro del propio cuerpo.

Un aminocido es una molcula que contiene un grupo carboxilo (-COOH) y un grupo amino (NH2) libres. Pueden representarse en general por NH 2-CHR-COOH, siendo R un radical o

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cadena lateral caracterstica de cada aminocido. Estos grupos R son muy variados qumicamente. Desde el punto de vista qumico, los aminocidos (AA) son cidos orgnicos con un grupo amino en posicin alfa. Segn esta definicin, los cuatro sustituyentes del un aminocido son: Un grupo carboxilo Un grupo amino Un tomo de hidrgeno Una cadena lateral R, que es caracterstica de cada AA

Constituye una excepcin el AA prolina, con un anillo pirrolidnico, que puede considerarse como un -aminocido que

est N-sustituido por su propia cadena lateral (Figura de la izquierda). En todos los AA proteicos, excepto en la glicina (Gly), es asimtrico y por lo tanto, son pticamente activos. Esto indica que existen dos enantimeros (ismeros pticos), uno de la serie D y otro de la serie L. Los AA proteicos son invariablemente de la serie L. En algunos casos muy concretos se pueden encontrar AA de la serie D: en los peptidoglicanos de la pared celular, en ciertos pptidos con accin antibitica y en pptidos opioides de anfibios y reptiles. Se sabe que de los 20 aminocidos proteicos conocidos, 8 resultan indispensables (o esenciales) para la vida humana y 2 resultan "semi indispensables". Son estos 10 aminocidos los que requieren ser incorporados al organismo en su cotidiana alimentacin y, con ms razn, en los momentos en que el organismo ms los necesita: en la disfuncin o enfermedad. Los aminocidos esenciales ms problemticos son el triptfano, la lisina y la metionina. Es tpica su carencia en poblaciones en las que los cereales o los tubrculos constituyen la base de la alimentacin. El dficit de aminocidos esenciales afectan mucho ms a los nios que a los adultos. Existen 20 aminocidos diferentes y todos ellos tienen una parte comn en su molcula que consisten en un grupo amino (NH3) y un grupo cido, (COOH) como puede verse en el dibujo de los aminocidos, que aparece a continuacin:

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En este dibujo puede verse la frmula de ellos, en color negro la parte comn, mientras que en color azul puede verse la parte variable, que da a los aminocidos distinto comportamiento, la clave de colores es la siguiente: (a) = aminocidos hidrfobos. (b) = aminocidos polares. Color fucsia aminocidos cidos. (c) aminocidos bsicos. Hay que destacar que, si falta uno solo de ellos (Aminocido esenciales) no ser posible sintetizar ninguna de las protenas en la que sea requerido dicho aminocido. Esto puede dar lugar a diferentes tipos de desnutricin, segn cual sea el aminocido limitante. Lista de Aminocidos (Esenciales y no esenciales) y funcin de cada una de ellos: L - Alanina: Funcin: Interviene en el metabolismo de la glucosa. La glucosa es un carbohidrato simple que el organismo utiliza como fuente de energa. Color turquesa = = Color verde Color marrn

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L - Arginina: Funcin: Est implicada en la conservacin del equilibrio de nitrgeno y de dixido de carbono. Tambin tiene una gran importancia en la produccin de la Hormona del Crecimiento, directamente involucrada en el crecimiento de los tejidos y msculos y en el mantenimiento y reparacin del sistema inmunologico. L - Asparagina: Funcin: Interviene especficamente en los procesos metablicos del Sistema Nervioso Central (SNC). Acido L - Asprtico: Funcin: Es muy importante para la desintoxicacin del Hgado y su correcto funcionamiento. El cido L- Asprtico se combina con otros aminocidos formando molculas capases de absorber toxinas del torrente sanguneo. L - Citrulina: Funcin: Interviene especficamente en la eliminacin del amonaco. L - Cistina: Funcin: Tambin interviene en la desintoxicacin, en combinacin con los aminocidos anteriores. La L - Cistina es muy importante en la sntesis de la insulina y tambin en las reacciones de ciertas molculas a la insulina. L - Cisteina: Funcin: Junto con la L- cistina, la L- Cisteina est implicada en la desintoxicacin, principalmente como antagonista de los radicales libres. Tambin contribuye a mantener la salud de los cabellos por su elevado contenido de azufre. L - Glutamina: Funcin: Nutriente cerebral e interviene especficamente en la utilizacin de la glucosa por el cerebro. Acido L - Glutminico: Funcin: Tiene gran importancia en el funcionamiento del Sistema Nervioso Central y acta como estimulante del sistema inmunologico. L - Glicina: Funcin: En combinacin con muchos otros aminocidos, es un componente de numerosos tejidos del organismo. L - Histidina: Funcin: En combinacin con la hormona de crecimiento (HGH) y algunos aminocidos asociados, contribuyen al crecimiento y reparacin de los tejidos con un papel especficamente relacionado con el sistema cardio-vascular. L - Serina: Funcin: Junto con algunos aminocidos mencionados, interviene en la desintoxicacin del organismo, crecimiento muscular, y metabolismo de grasas y cidos grasos. L - Taurina: Funcin: Estimula la Hormona del Crecimiento (HGH) en asociacin con otros aminocidos, esta implicada en la regulacin de la presin sanguinea, fortalece el msculo cardiaco y vigoriza el sistema nervioso. L - Tirosina: Funcin: Es un neurotransmisor directo y puede ser muy eficaz en el tratamiento de la depresin, en combinacin con otros aminocidos necesarios.

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L - Ornitina: Funcin: Es especfico para la hormona del Crecimiento (HGH) en asociacin con otros aminocidos ya mencionados. Al combinarse con la L-Arginina y con carnitina (que se sintetiza en el organismo, la L-Ornitina tiene una importante funcin en el metabolismo del exceso de grasa corporal. L - Prolina: Funcin: Est involucrada tambin en la produccin de colgeno y tiene gran importancia en la reparacin y mantenimiento del msculo y huesos Los Ocho (8) Esenciales: L - Isoleucina: Funcin: Junto con la L-Leucina y la Hormona del Crecimiento intervienen en la formacin y reparacin del tejido muscular. L - Leucina: Funcin: Junto con la L-Isoleucina y la Hormona del Crecimiento (HGH) interviene con la formacin y reparacin del tejido muscular. L - Lisina: Funcin: Es uno de los ms importantes aminocidos porque, en asociacin con varios aminocidos ms, interviene en diversas funciones, incluyendo el crecimiento, reparacin de tejidos, anticuerpos del sistema inmunolgico y sntesis de hormonas. L - Metionina: Funcin: Colabora en la sntesis de protenas y constituye el principal limitante en las protenas de la dieta. El aminocido limitante determina el porcentaje de alimento que va a utilizarse a nivel celular. L - Fenilalanina: Funcin: Interviene en la produccin del Colgeno, fundamentalmente en la estructura de la piel y el tejido conectivo, y tambin en la formacin de diversas neurohormonas. L - Triptfano: Funcin: Est inplicado en el crecimiento y en la produccin hormonal, especialmente en la funcin de las glndulas de secrecin adrenal. Tambin interviene en la sntesis de la serotonina, neurohormona involucrada en la relajacin y el sueo. L - Treonina: Funcin: Junto con la con la L-Metionina y el cido L- Asprtico ayuda al hgado en sus funciones generales de desintoxicacin. L - Valina: Funcin: Estimula el crecimiento y reparacin de los tejidos, el mantenimiento de diversos sistemas y balance de nitrgeno. Muchos aminocidos forman protenas (aminocidos proteicos), mientras otros nunca se encuentran en ellas. Todos los aminocidos que componen protenas presentan un carbono asimtrico denominado alfa (por ser el carbono adyacente al grupo carboxilo). La unin entre aminocidos se produce mediante un enlace peptdico. Algunos de ellos pueden ser sintetizados por el cuerpo humano. Los que no pueden ser sintetizados por el cuerpo humano deben ser ingeridos en los alimentos. No hacerlo limita el

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desarrollo del cuerpo, ya que ste no es capaz de reponer las clulas de los tejidos que mueren o de crear tejidos nuevos, en el caso del crecimiento. B. CLASIFICACIN:

Se clasifican segn sus radicales R. y hay varios tipos: Neutros polares: serina (Ser), treonina (Thr), cisterna (Cys), Tirosina (Tyr), asparagina (Asn), glutamina (Gln). Neutros no polares ( apolares o hidrfobos): Glicina(Gly), alanina(Ala), valina(Val), leucina(Leu), triptfano(Trp). Con carga negativa (cidos): cido asprtico(Asp), cido glutmico(Glu). Con carga positiva (Base_(qumica)bsicos): lisina(Lys), arginina(Arg), isoleucina(Ile), Metionina(Met), prolina(Pro), fenilalanina(Phe),

histidina(His). En los humanos, algunos aminocidos se consideran esenciales (deben ser ingeridos en la dieta): valina(Val), leucina(Leu), isoleucina(Ile), fenilalanina(Phe), Tyr, Met, Thr, Lys,

arginina(Arg), histidina(His), Triptfano(Trp). Hay aminocidos que no se consideran proteicos y aparecen en algunas protenas. Son derivados de otros aminocidos, es decir, se incorporan a la protena como aminocidos proteicos, y, despus de haber sido formada la protena, se modifican qumicamente, como por ejemplo la hidroxiprolina. Los aminocidos no proteicos se utilizan como neurotransmisores, vitaminas, etc. Por ejemplo la beta-alanina o la biotina. C. PROPIEDADES:

cido-bsicas.

Comportamiento de cualquier aminocido cuando se ioniza. Cualquier aminocido puede comportarse como cido y como base, se denominan sustancias anfteras. Los aminocidos y protenas se comportan como sustancias tampn. Cuando una molcula presenta carga neta cero est en su punto isoelctrico. pticas. Todos los aminocidos presentan un carbono asimtrico (exceptuando la glicina) por lo cual presentan ismeros. Si el amino est a la derecha se denomina D, si est a la izquierda L. Qumicas.

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Las que afectan al grupo carboxilo (descarboxilacin). Las que afectan al grupo amino (desaminacin). Las que afectan al grupo R. D. NOMENCLATURA: Los aminocidos que se obtienen en la hidrlisis de protenas son alfa aminocidos estos compuestos pueden nombrarse de acuerdo con las reglas de la UVIQPA, pero ms frecuentemente se emplean los nombres comunes. Aun cuando estos aminocidos existen como iones dipolares, RCH(NH3 )COO , por razones histricas se nombran en el sistema de la VIQPA como se tuvieran la formula RCH(NH2)COOH3 Ejemplo:
+ -

E. F. AMINOCIDOS BSICOS PARA LA VIDA:

Los aminocidos fundamentales para la vida y que estn codificados en el genoma son 21: alanina, arginina, asparagina, aspartato, cistena, fenilalanina, glicina, glutamato, glutamina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, prolina, serina, tirosina, treonina, selenocistena, triptfano y valina.

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LAS PROTENAS Las protenas son los compuestos nitrogenados ms abundantes del organismo, a la vez que fundamento mismo de la vida. En efecto, debido a la gran variedad de protenas existentes y como consecuencia de su estructura, las protenas cumplen funciones sumamente diversas, participando en todos los procesos biolgicos y constituyendo estructuras fundamentales en los seres vivos. De este modo, actan acelerando reacciones qumicas que de otro modo no podran producirse en los tiempos necesarios para la vida (enzimas), transportando sustancias (como la hemoglobina de la sangre, que transporta oxgeno a los tejidos), cumpliendo funciones estructurales (como la queratina del pelo), sirviendo como reserva (albmina de huevo), etc. Las protenas son biopolmeros de los alfa aminocidos; las propiedades fsicas y orgnicas de una protena estn determinadas por los aminocidos que las constituyen. Las subunidades individuales de aminocido se unen por enlaces amida, llamadas enlaces peptdico la figura que ms adelante se muestra; Muestra la estructura general de un alfa aminocido y de una protena.

Los alimentos que ingerimos nos proveen protenas. Pero tales protenas no se absorben normalmente en tal constitucin sino que, luego de su desdoblamiento ("hidrlisis" o rotura), causado por el proceso de digestin, atraviesan la pared intestinal en forma de aminocidos y cadenas cortas de pptidos, segn lo que se denomina " circulacin entero heptica". Esas sustancias se incorporan inicialmente al torrente sanguneo y, desde all, son distribuidas hacia los tejidos que las necesitan para formar las protenas, consumidas durante el ciclo vital.

ejemplos 1. Clases 2. Funcin del ejemplo de protenas Protenas estructurales Enzimas Protenas de transporte Protenas conductibles Protenas protectoras Hormonas Toxinas Colgeno ADN. polinerasa Hemoglobina Actna, miosina Anticuerpos Insulina Veneno de vbora Tejido conectivo (tendones.etc.) Replicar y reparar ADN Transportar O2 a las clulas Causan la contraccin de los msculos Forman un complejo con protenas extraas Regular el metabolismo de la glucosa Incapacitar a los animales

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Los pptidos son cadenas lineales de aminocidos enlazados por enlaces qumicos de tipo amdico a los que se denomina Enlace Peptdico. As pues, para formar pptidos los aminocidos se van enlazando entre s formando cadenas de longitud y secuencia variable. Para denominar a estas cadenas se utilizan prefijos convencionales como: a) Oligopptidos.- si el n de aminocidos es menor 10. Dipptidos.- si el n de aminocidos es 2. Tripptidos.- si el n de aminocidos es 3. Tetrapptidos.- si el n de aminocidos es 4. etc...

b) Polipptidos o cadenas polipeptdicas.- si el n de aminocidos es mayor 10. Cada pptido o polipptido se suele escribir, convencionalmente, de izquierda a derecha, empezando por el extremo N-terminal que posee un grupo amino libre y finalizando por el extremo C-terminal en el que se encuentra un grupo carboxilo libre, de tal manera que el eje o esqueleto del pptido, formado por una unidad de seis tomos (-NH-CH-CO-), es idntico a todos ellos. Lo que vara de unos pptidos a otros, y por extensin, de unas proteinas a otras, es el nmero, la naturaleza y el orden o secuencia de sus aminocidos. El enlace peptdico es un enlace covalente y se establece entre el grupo carboxilo (-COOH) de un aminocido y el grupo amino (-NH2) del aminocido contiguo inmediato, con el consiguiente desprendimiento de una molcula de agua. Por otra parte, el carcter parcial de doble enlace del enlace peptdico (-C-N-) determina la disposicin espacial de ste en un mismo plano, con distancias y ngulos fijos. Como consecuencia, el enlace peptdico presenta cierta rigidez e inmoviliza en el plano a los tomos que lo forman.

Las protenas son molculas muy complejas en cuya composicin elemental se encuentran siempre presentes carbono, hidrgeno, oxgeno y nitrgeno. La mayora de ellas tambin incluye en su composicin al azufre y en algunas se observa adems la presencia de fsforo, hierro, zinc, molibdeno. Desde el punto de vista estructural, los elementos qumicos que constituyen a las protenas se encuentran distribuidos en bloques o unidades estructurales que son los aminocidos, que unidos entre si integran una estructura polimrica; las protenas son fundamentalmente polmeros de aminocidos. Hay dos tipos principales de protenas: las simples que estn constituidas nicamente por aminocidos, y las protenas conjugadas que son las que tienen en su composicin otras molculas diferentes adems de aminocidos.

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ESTRUCTURA DE LAS PROTENAS: La organizacin de una protena viene definida por cuatro niveles estructurales denominados: estructura primaria, estructura secundaria, estructura terciaria y estructura cuaternaria. Cada una de estas estructuras informa de la disposicin de la anterior en el espacio. El primer nivel estructural que se puede delimitar en una protena, est constituido tanto por el nmero y la variedad de aminocidos que entran en su composicin, como por el orden tambin llamado secuencia en que se disponen stos a lo largo de la cadena polipeptdica, al unirse covalentemente por medio de sus grupos amino y carboxilo alfa. A este primer nivel se le llama estructura primaria. El segundo nivel estructural se refiere a la relacin espacial que guarda un aminocido con respecto al que le sigue y al que le antecede en la cadena polipeptdica; en algunos casos el polipptido entero, o algunas zonas de ste se mantienen extendidas, mientras que en otros casos se enrollan en forma helicoidal como si formaran un resorte. A este segundo nivel se le llama estructura secundaria. Existen dos tipos de estructura secundaria: 1. la a(alfa)-hlice 2. la conformacin beta 1. Esta estructura se forma al enrollarse helicoidalmente sobre s misma la estructura primaria. Se debe a la formacin de enlaces de hidrgeno entre el -C=O de un aminocido y el -NH- del cuarto aminocido que le sigue. 2. En esta disposicin los aa. no forman una hlice sino una cadena en forma de zigzag, denominada disposicin en lmina plegada. Presentan esta estructura secundaria la queratina de la seda o fibrona. El tercer nivel estructural se refiere a la relacin espacial que guardan entre s las diferentes zonas o reas de cada cadena polipeptdica que forman a una protena. A este nivel se le llama estructura terciaria. En una protena compuesta de una sola cadena polipeptdica, el nivel mximo de estructuracin corresponde precisamente a su estructura terciaria. Cuando se trata de una protena oligomrica, que es aquel tipo de protena que esta compuesta de ms de una cadena polipeptdica, se puede considerar un siguiente nivel de organizacin, que se refiere a ala manera en que cada cadena polipeptdica en la protena se arregla en el espacio en relacin con las otras cadenas polipeptdicas que la constituyen. A este nivel estructural se le llama estructura cuaternaria. La estructura terciaria informa sobre la disposicin de la estructura secundaria de un polipptido al plegarse sobre s misma originando una conformacin globular. Esta conformacin globular facilita la solubilidad en agua y as realizar funciones de transporte , enzimticas, hormonales. Esta conformacin globular se mantiene estable gracias a la existencia de enlaces entre los radicales R de los aminocidos. Aparecen varios tipos de enlaces:

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1. 2. 3. 4.

el puente disulfuro entre los radicales de aminocidos que tiene azufre. los puentes de hidrgeno los puentes elctricos las interacciones hifrfobas.

DESNATURALIZACIN: Muchas molculas proteicas slo retienen su actividad biolgica dentro de una fluctuacin muy limitada de temperatura y de pH. La exposicin de protenas solubles o globulares a pH extremos o a temperaturas elevadas, les hace experimentar un cambio conocido como desnaturalizacin, el efecto ms visible del cual, consiste en un descenso de su solubilidad. Puesto que los enlaces qumicos covalentes del esqueleto peptdico de las protenas no se rompen durante este tratamiento relativamente suave, se lha llegado a la conclusin de que la estructura primaria permanece intacta. La mayora de las protenas globulares experimentan el proceso de desnaturalizacin cuando se calientan por encima de 60-70 C. La formacin de un cogulo insoluble blanco cuando se hierve la clara de huevo es un ejemplo comn de desnaturalizacin trmica. La consecuencia ms significativa de la desnaturalizacin es que las protenas pierden su actividad biolgica caracterstica, por ejemplo, al calentar las enzimas se suele perder su capacidad cataltica. La desnaturalizacin consiste en el desplegamiento de la estructura nativa plegada caracterstica de la cadena polipeptdica de las molculas de las protenas globulares. Cuando la agitacin trmica provoca que la estructura nativa plegada se desarrolle o se distienda, originando una cadena libremente ondulada, la protena pierde su actividad biolgica. El estudio de las protenas es una de las principales ramas de la bioqumica, y no hay una divisin clara entre la qumica orgnica y la bioqumica de estas sustancias. En este capitulo se iniciara el estudio de las protenas conociendo sus constituyentes, los aminocidos. Se describir tambin como se unen estos monmeros para formar una protena polmera y como dependen las propiedades de la protena de la de sus aminocidos. Estos fundamentos son necesarios para el estudio de la estructura y funcin de las protenas en un curso de bioqumica.

Los aminocidos estn ampliamente difundidos en la naturaleza. Anlogamente como las molculas de la glucosa representan el material de construccin para los carbohidratos micromoleculares naturales; el almidn y la celulosa las molculas de aminocidos, de la misma manera, son ladrillitos a partir de las cuales estn construidas todas las protenas vegetales y animales. La diferencia consiste solamente en que para el almidn y la celulosa sirve como monmero una sustancia, la glucosa, mientras que en la composicin de cada protena entran distintos aminocidos. Los aminocidos se encuentran en la naturaleza tanto en la forma libre como tanto formando parte de la composicin de otros compuestos.

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Propiedades qumicas; por cuanto en la composicin podemos expresar de las molculas de estas sustancias entran grupos funcionales cuyo comportamiento conocemos, se puede suponer que los aminocidos acusaran tanto las propiedades de los cidos como las bases.

Ahora es el momento de conocer las sustancias macromoleculares naturales que contienen nitrgeno: se trata de las protenas. Las protenas constituyen la parte componente ms importante de los organismos. Estas se contienen en el protoplasma y en el ncleo de todas las clulas vegetales y animales y son principales portadores de la vida. Segn la definicin de F. Engel La vida es la modalidad de existencia de los cuerpos albuminoideos

E.Fiseher y otros cientficos lograron sintetizar polipptidos en cuyas molculas entraban cerca 20 radicales aminocidos unidos por medio de enlaces polipeptidicos. Estos polieptidicos, por algunas de sus propiedades, por ejemplo la capacidad de desintegrarse por las enzimas, recordaban las protenas, aunque, por supuesto, distaban mucho de ser estas.

Las protenas tienen pesos moleculares muy grandes que varan entre diez mil y diez millones. Las protenas, como los polisacridos, son polmeros. Sin embargo, a diferencia de los polisacridos, las protenas no se forman con un solo monmero o con algunos monmeros. Por hidrlisis total de las protenas se forman algunas mezclas de aminocidos, se encuentran formadas por unos 20 aminocidos, aproximadamente.

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III.

MATERIALES Y REACTIVOS:

Materiales:

Mechero de Bunsen. Seis tubos de ensayo. Rejilla. Esptula. Piseta Pinza para tubo de ensayo Bao de Mara

Reactivos:

Etanol. cido clorhdrico cido ntrico Hidrxido de sodio al 20%. Sulfato cprico al 1%.

C2H6O HCl HNO3 NaOH CuSO4

Ninhidrina. Millon. Nitrato de sodio. Albmina. Casena. Glicina. Cistina. Asparagina. Lisina. ----NaNO3 Clara de huevo Leche H2N-CH2COOH 2[ - SCH2CH(NH2)COOH] H2NCOCH2CH (NH2) COOH H2N(CH2)4CH(NH2)COOH

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IV.

PROCEDIMIENTO, DATOS Y RESULTADOS EXPERIMENTAL:

ENSAYO N 01. COAGULACIN:

Se dispuso de 6 tubos de ensayo, a cada uno de ellos se ech 2 mL de la solucin de clara de huevo. El primer tubo se calent y se observ, al segundo tubo se agreg 4 mL de etanol, al tercero se aadi gotas de cido clorhdrico concentrado, al cuarto se agreg cido ntrico concentrado y al quinto una solucin de NaOH al 20%. El sexto tubo se us para comparar. Luego se observ y anot en los casos que se ha formado la coagulacin. Y se repiti el ensayo con la solucin de casena.

ALBUMINA:

REACCIONES:

OBSERVACIN: La albmina en el primer tubo de ensayo reacciona en presencia de calor, formando un coagulo de color BLANCO, en el segundo tubo reacciona con el etanol formando un coagulo de color BLANCO, en el tercer tubo reacciona con acido clorhdrico formando un coagulo de color BLANCO, en el cuarto tubo reacciona con acido ntrico formando un coagulo de color BLANCO, en el quinto tubo no hubo reaccin con el hidrxido de sodio.

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CASENA

REACCIONES:

OBSERVACIN: La casena en el primer tubo de ensayo reacciona en presencia de calor, formando una SOLUCION INCOLORA, en el segundo tubo no reacciona con el etanol, en el tercer tubo reacciona con acido clorhdrico formando un coagulo de color BLANCO, en el cuarto tubo reacciona con acido ntrico formando un coagulo de color BLANCO, en el quinto tubo reacciona con el hidrxido de sodio formando una SOLUCION INCOLORA.

DISCUSINES: La desnaturalizacin de la protena ocurre cuando las atracciones intermoleculares dbiles conservan con delicadeza la estructura terciaria de una protena globular. Con frecuencia un ligero cambio en la temperatura o en el pH altera su estructura terciaria la que es causante de que la protena se desnaturalice. La desnaturalizacin se efecta en condiciones tan suaves que la estructura primaria permanece intacta, pero la estructura terciaria se desdobla de una forma globular especfica a una cadena enrollada al azar.

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ENSAYO N 02. REACCIONES DE BIURET.

En un tubo de ensayo se ech 2 mL de solucin de clara de huevo, agregar 1 mL de NaOH al 40%, luego se aadi gota a gota la solucin de sulfato cprico al 1%, se agit y se continu aadiendo hasta notar cambio. Luego se repiti el ensayo con la solucin de casena y con los aminocidos.

REACCIONES:

Asparagina:

OBSERVACIN:

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La albumina, cistina y esparacina reaccionan con el sulfato de cobre en medio alcalino, dando soluciones en diferentes tonos azules. El resto de las muestras (caseina, glicina y lisina) no reaccionan con el sulfato de cobre quedando soluciones de color en tonos celestes.

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DISCUSIN: El reactivo de Biuret reacciona frente a las protenas y aminocidos dando a la solucin una coloracin azul.

ENSAYO N 03. REACCIN XANTOPROTICA.

Se ech en un tubo de ensayo 2 mL de la solucin de clara de huevo, se aadi 1 mL de cido ntrico concentrado, y se calent en bao mara por 2 3 minutos, luego de enfriar se aadi hidrxido de sodio al 40% hasta que la solucin sea fuertemente calcina. Se observ los cambios de coloracin y otros detalles. Se repiti el ensayo con soluciones de casena y aminocidos.

REACIONES:

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OBSERVACIN: La albmina con cido ntrico en presencia de calor (Bao de Mara) coagula de color amarillo, al enfriar se le agrega NaOH precipitando de color naranja. La casena mas el acido ntrico en presencia de calor no reacciona observndose una solucin incolora, la que se enfra, y con la adicin del NaOH, nos da un precipitado amarillo, concluyendo que la casena solo reacciona en medio alcalino. La glicina con el acido ntrico en presencia de calor no reacciona, esta solucin incolora se enfra, luego se adiciona NaOH, dando una solucin incolora. La cistina no reacciona con el acido ntrico en presencia de calor, esta solucin incolora se enfra, luego se adiciona NaOH dando un precipitado amarillo tenue. La asparagina mas acido ntrico en presencia de calor no reacciona, esta solucin incolora se enfra y al adicionar NaOH reacciona violentamente liberando calor, quedando una solucin incolora y la lisina mas acido ntrico en presencia de calor no reacciona, esta solucin incolora se enfra y al adicionar NaOH reacciona liberando un gas de color blanco, quedando una solucin incolora.

DISCUSIN: De lo observado deducimos que el reactivo xantoprotica solo reacciona con las

protenas. Por lo tanto este reactivo es selectivo y se emplea para la identificacin de protenas

ENSAYO N 04. PRECIPITACIN DE PROTENAS.

Se dispuso de 6 tubos de ensayo, al primero se ech 5 mL de agua, al segundo 5 mL de la solucin de clara de huevo, al tercero 5 mL de agua y 4 gotas de HCl al 10%, al cuarto 5 mL de solucin de clara de huevo y 4 gotas de HCl al 10%, al quinto 5 mL de agua y 4 gotas de solucin de NaOH al 10%, al sexto 5 mL de solucin de clara huevo y 4 gotas de NaOH al 10%. A cada tubo agregar 2 mL de solucin de sulfato de cobre al 10% y se observ los resultados.

ALBUMINA

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REACCIONES:

OBSERVACIN: La reaccin de la albmina frente al CuSO4 (tubo 2) nos dio un precipitado de color celeste, frente al HCl (tubo 4) precipit de color azul claro, y frente al NaOH (tubo 6) precipito de color violeta. De esto deducimos que las protenas precipitan en tono azul - violeta con CuSO4 en medio cido y bsico respectivamente, caracterizando este ensayo para la identificacin. de las protenas.

CASEINA

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REACCIONES:

ENSAYO N 05. REACCIN CON LA NINHIDRINA.

En un tubo de ensayo se ech 1 mL de una solucin de aminocidos, luego se agreg 5 gotas de la solucin de Ninhidrina, se calent a ebullicin por 2 5 minutos. La coloracin azul o violeta nos indicaba la presencia de un aminocido. Se repiti el ensayo con otros aminocidos, con la solucin de albminas y con la solucin de casena.

REACCIONES:

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OBSERVACIN: A los tubos 1, 2, 3, 4, 5 y 6 conteniendo albumina, caseina, glicina, cistina, asparagina y lisina respectivamente, se le aadi el reactivo de ninhidrina y se calent a ebullicin. Todas estas soluciones (enfriadas) reaccionan con el nitrato de sodio dando soluciones en tonalidades violetas, con excepcin de la asparagina que da una un color rojo, no reacciona.

DISCUSIN: La ninhidrina y el NaNO3 son reactivos que emplean calor para reaccionar con las proteinas y los aminocidos formando soluciones de tonalidades violetas.

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ENSAYO N 06. REACCIN DE MILLON.

En un tubo de ensayo se ech 2 mL de la solucin de clara de huevo, se agreg 5 gotas del reactivo de Millon y se calent en un bao de agua hirviendo por 10 minutos, luego de enfriar a temperatura ambiente, se agreg 5 gotas de solucin de nitrato de sodio. La aparicin de un color rojo ladrillo nos indicaba un resultado positivo. Se repiti el ensayo con la solucin de casena y con soluciones de los aminocidos.

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REACCIONES:

OBSERVACIN: La albmina con cido ntrico en presencia de calor (Bao de Mara) coagula de color amarillo, al enfriar se le agrega NaOH precipitando de color naranja. La casena mas el acido ntrico en presencia de calor no reacciona observndose una solucin incolora, la que se enfra, y con la adicin del NaOH, nos da un precipitado amarillo, concluyendo que la casena solo reacciona en medio alcalino.

DISCUSIN: De lo observado deducimos que el reactivo de Milln solo reacciona con las protenas. Por lo tanto este reactivo es selectivo y se emplea para la identificacin de protenas, ya que con stas el reactivo forma precipitados de color rojo ladrillo

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V.

CONCLUSIONES:

Aprendimos a diferenciar y reconocer las protenas y aminocidos distintas reacciones realizadas.

en las

Pudimos observar las diferentes reacciones que se realizaron para el tratamiento especfico de las protenas (albmina). Las protenas constituyen una de las molculas ms importantes en el organismo, ya que cumple muchas funciones. La coagulacin de las protenas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalizacin por los agentes indicados, que al actuar sobre la protena la desordenan por la destruccin de su estructura terciaria y cuaternaria. Las reacciones se utiliza en trabajos analticos, as como en la visualizacin de las bandas de los aminocidos despus de su separacin por electroforesis o por cromatografa. Las protenas estn constituidos por aminocidos, por los cuales los mtodos se basan en el reconocimiento de los aminocidos. Las protenas, debido al gran tamao de sus molculas, forman con el agua soluciones coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formacin de cogulos al ser calentadas a temperaturas superiores a los 70 C o al ser tratadas con soluciones salinas, cidos, alcohol, etc.

VI.

RECOMENDACIONES:

Recomendara la atencin a la hora de la reaccin donde presenta una etapa de coloracin de los reactivos. Tener en cuenta las explicaciones del profesor en las distintas practicas que se realiza en los laboratorios. Tener en cuenta que la temperatura es bastante importante en la coloracin y reaccin Realizar con cuidado los ensayos de la prctica, puede ocasionar quemaduras u otros daos.

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VII.

CUESTIONARIO:

1.- Describa otros dos ensayos para aminocidos.

Reaccin de Ehrlich: La presencia de anillos aromticos fenlicos o nitrogenados en la cadena lateral de los Aminocidos se puede identificar mediante la reaccin con cido sulfanlico y nitrito de Sodio por formacin de sales de Diazonio fuertemente coloreadas permitiendo as detectar la presencia de Tirosina e Histidina libres o formando pptidos y protenas. En 5 tubos de ensayo rotulados como: blanco, triptfano, problema, albmina de huevo, protena de trigo. Agregue a cada tubo en el siguiente orden: 1 mL de cido sulfanilico 0.5% y 1 mL de Nitrito de sodio, mezcle bien y deje en reposo durante 15 minutos. Luego a cada tubo agregue 1 mL de la solucin correspondiente al rtulo. Mezcle y adicione a cada tubo 0.5 mL. de NH4OH 10%. Observe y anote los resultados.

Reaccin de Hopkins Cole El anillo indlico presente en la cadena lateral de los alfa-aminocidos libres o haciendo parte de pptidos y protenas se puede reconocer mediante reaccin con el cido glioxlico a pH cido, puesto que forma complejos de coloracin violeta o amarillo violeta, permitiendo as identificar al triptfano. Rotule 5 tubos de ensayo como: blanco, triptfano, problema, albmina de huevo y harina de trigo. Adicione a cada uno 2 mL. de la solucin correspondiente y 2 mL. del reactivo de Hopkins Cole. Mezcle bien el contenido y adicione a cada tubo por las paredes lenta y cuidadosamente, sin mezclar 1 mL. de cido sulfrico concentrado, la formacin de un anillo violeta en la interfase es prueba positiva para el triptfano.

2.- Cul es la diferencia entre una protena simple y una protena conjugada? protenas simples: formadas exclusivamente por -aminocidos, como es el caso de la ubiquitina, una proteasa intracelular formada por 53 AA.

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protenas conjugadas: que contienen adems de la cadena polipeptdica un componente no aminoacdico llamado grupo prosttico, que puede ser un azcar, un lpido, un cido nucleico o simplemente un in inorgnico. La protena en ausencia de su grupo prosttico no es funcional, y se llama apoprotena. La protena unida a su grupo prosttico es funcional, y se llama holoprotena (holoprotena = apoprotena + grupo prosttico). Son protenas conjugadas la hemoglobina, la mioglobina, los citocromos, etc. En la figura inferior derecha se representa el citocromo c, donde el grupo prosttico (representado en color verde) es el grupo hemo.

3.- Describa la estructura y nombre de 10 aminocidos.

Todas las protenas son cadenas lineales compuestas de algunos de estos veinte aminocidos.

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VIII.

BIBLIOGRAFA :

QUIMICA ORGNICA FUNDAMENTAL, LOUIS F. FISER - Mary Fiser. Edt. Alahambra .s.a. Pgs. 194 207 QUIMICA ORGNICA, Jhon Mac Morry. Edicin 5 . Pgs. 748 698, 545 QUIMICA ORGNICA. L. Finar. Edt. Alahambra. s.a. Pps .587 597 http://www.alimentacion-sana.com.ar/informaciones/novedades/aminoacidos.htm http://www.arrakis.es/~lluengo/proteinas.html http://es.wikipedia.org/wiki/Amino%C3%A1cido http://www.zonadiet.com/nutricion/amacido.htm http://www.ehu.es/biomoleculas/AA/aa1.htm
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