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Metabolismoquimitrofo de la energa:respiracinaerobia

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-n el captuloanterior hemosaprendidoque algunas clulas satisfacen requisitosenergticos sus mediantela fermentacin aerbica, bien porquesean anaerobias estrictas porque seanclulas o bien anaerobias facultativas, capaces de funcionar en situaciones ausencia escasez oxlgede o de no. Sin embargo, tambinhemosvisto quela fermentacin produce nicamentecantidades limitadas de energa. En ausencia un aceptorde electrones de externo-uno que no forma parte por s mismo de la ruta glucoltica- los que electrones seliberan de un compuesto orgnicode tres carbonos(gliceraldehdo-3-fosfato) transfieren final a se al (piruvato), la diferencia y otro compuesto trescarbonos de de energa tal que slo segeneran molculas ATP es dos de por cadamolcula glucosa. de En resumen, fermentacin la puedesatisfacer requilos sitosenergticos una clula, pero el rendimientodeAIP de esbajo,porquela clulaslo tiene acceso una partelimia tada de la energalibre potencialmente disponible de las molculasoxidables, que usa como sustratos. Adems,la fermentacintiene a menudo como consecuencia, acula mulacin de productosde desecho como el etanolo el lactato,quesi seacumulan,sontxicosparala clula,a no ser, claro est,que seanexcretados la clulay metabolizapor dosposteriormente otro lugar del organismo. en

Respiracin celular: maximizando el rendimiento del ATP


Todo esto cambia dramticamente cuando se trata de la respiracin celular, o para abreviar, respiracin.Cuando se dispone de un aceptor de electrones externo, se puede dar la oxidacin completa del sustrato, obtenindose ms ATP.

Seentiendecomorespiracin celular, flujo deelectrones el en o a travs una membrana, de desde coenzimas reducidas hasta un aceptor electrones, de normalmente acompaado la de produccin ATP.Posteriormente de abordaremos signifiel y cado de <membrana> de <produccin ATP>de esta de definicin.Por ahora,centrmonos las coenzimas en rey ductoras los aceptores electrones. hemosvisto que de Ya por la coenzima reducidaque segenera el catabolismo glucoltico de los azcares compuestos o relacionados el es NADH. Como veremos continuacin, a otrasdos coenziy mas,EAD (dinucletido adenina flavina) y coenzima de Q (o ubiquinona), tambinrecogen electrones, selilos que ylos transfieberandesde compuestos orgnicos oxidables ren al aceptorfinal de electrones, travsde una seriede a transportadores electrnicos. Paramuchosorganismos, incluyendoal autor y los lectoresde estelibro, el aceptorfinal de electrones el oxgees no,laforma reducida este de aceptor el agua,yseconoes ce al procesoen su conjunto como respiracin aerobia. Mientras que la gran mayora de los quimitrofos en la Tierra llevan a cabo la respiracinaerobia,existenvarios aceptores finalesde electrones son usados que por otros organismos, especialmentepor las bacterias. Algunos ejemplos estos aceptores y de alternativos de susformasreducidas son el azufre(S/H2S), protones(H+/Hr) y los los ionesde hierro (Fe3+/Fe2*). procesos Los respiratorios que incluyenaceptores electrones de como stos, necesitan no el ogeno moleculary son,por tanto,ejemplos respirade cin anaerobia.La respiracinanaerobiadesempea un papel importante en los ciclos ambientales elementos de como el azufre,el hidrgenoy el hierro,y contribuyensignificativamentea la economaenergtica la biosfera. de Nosotros,sin embargo, centraremos nos aquen la respiraRespiracin celular: maximizando el rendimiento ATP del

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porquerepresenta fuenteprincipaldel mecin aerobia la tabolismo energtico el mundo aerbico quesomos en del partenosotros otrosorganismos y superiores.

Pondremos especialatencin en la mitocondria (Figura 10.1) porque la mayor parte de la produccin aerbica de AIP tiene lugar dentro de esteorgnulo.

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(b) Localizacion la resprracion de aeroba dentro la mitocondria de Figura10.1 Papelde la mitocondria la tespitacin (a) en aerobia. La mitocondria desempea papel centralen la respiracin un aerobia; la mayor parte de la produccinde AIP de la respiracin las clulas en eucariotas ocurre en esteorgnulo.(b) La oxidacinde la glucosa de y otros azcares comienzaen el citosolcon 1aglucolisis(etapa1), producindose piruvato.El piruvato setransportaa travsde la membrana mitocondrial interna y seoxida dentro de 1amatriz a Acetil CoA, el primer sustratodel ciclo del cido tricarboxlico(TCA) (etapa2). El Acetil CoA sepuedeformar tambin por la p-oxidacinde los cidosgrasos. transportede electrones (etapa3a) estacopladoa un El bombeo de protones(etapa3b), conservndose energa transportede electrones la del como un gradienteelectroqumico protonesa di travsde la membranainterna de la mitocondria (o de Ia membranaplasmtica, el casode los procariotas). energa gradientede en La del protonesseusa,en parte,para la sntesis ATP a partir de ADP y fosfatoinorgnico(etapa4). de

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quimitrofo laener$a: Captulo Metaboljsmo 10 de respiracin aerobia

a,
como en la fermentacin, piruel de aceptorde electrones vato esoxidadoposteriormentea un compuestodenomiA nadoacetilcoenzima (acetilCoA),queentra enla efapa2, podede Con el ogenocomo ltimo aceptor electrones, (TCA). Estaruta cclicaoxiel ciclodel cidotricarboxlico por desde piruvatogenerado la glucolisis da completamente carbonos el mos empezar los entrantes COry consera y preguntarnos cmo secataboliza piruvatoy cmo se va la energa forma de coenzimas el reducidas, son,en en llue median- s mismos, la libre producidaen el proceso, conserva energa ricosen energa. compuestos por te la produccindeATP.Comoya sabemos el Captude La etapa3 consiste el transporte electrones, deen es aerobia cir, la transferencia electrones lo 9, los productosterminalesde la respiracin de desde coenzimas reducisonel dixido de carbonoy el agua(vaseReaccin9.12). das hasta el oxgeno,acopladoa un transporteactivo,o la con las que comienza stas son las mismasmolculas de a de La bombeo, protones travs una membrana. transfotosntesis, exigencia flujo cclico de materia entre el del desde coenzimas las hastael ogeno ferenciade electrones mundo quimiotrpicoy el fototrpico.Por otra parte,el y esun procesoexergnico aporta la energaque dirige el aerobia consi- bombeode electrones travsde la membranaen la que es de rendimientoenergtico la respiracin a En mayorque el de la fermentacin. vezde derablemente los generando graun estnembebidos transportadores, la dos molculas ATP por cadamolculade glucosa, de de a dienteelectroqumico protones ambosIadosde la mempuedeproducir potencialmente hasta brana.En la etapa respiracin aerobia 4,la energia este de gradiente protode en de 38 molculas ATP por molculade glucosa procade Este modelode nesseusaparaimpulsarla sntesis ATP. de riotas,y entre 36 y 38 molculas ATP por cadamolde de sntesis ATPdependiente oigeno sedenomina/osfodel tipo dependiendo cula de glucosaen eurocariotas, rilacinoxidativa. celular. Nuestro objetivo en este captulo es comprenderlos El oxgenohace posible todo esto sirviendo como el procesos 2,3 sealados comoetapas y 4 en la Figura10.lb. y aceptor terminal de electrones, proporcionandoun ( queremos examinar 1) quocurreconel piEn particular, modo de reoxidacincontinuadel NADH y de otrascoenruvato (y otros sustratosoxidablescomo los lpidos y los duEstasmolculas aceptanelectrones zimasreducidas. (2) en aerbicas; cmo median aminocidos) situaciones orgnicos las coenzimas otros transportadores electrones rante la oxidacinposteriorde intermediarios y de la Transoxidables. derivadosdel piruvato u otros sustratos desde exergnica electrones de sustratos oxitransferencia al fieren despus estoselectrones oxgenopor medio de (3) del dables oxgeno; cmo seusala energa transporal de unidos a de una secuencia transportadores electrones paramantenerel gradiente electroqumico te de electrones aerobia incluye, de protones; (4) cmo la energla este la membrana. esta De manera) respiracin gradiente de y dirige tanto rutasde oxidacinen lasqueseliberanlos electrones la sntesis el del deATP. Comenzaremos estudio metabolistransde sustratosorgnicosy transferidosa coenzimas centrndonos Ia mitocondria, en mo energtico aerbico, en portadores, concomitantes los que las como procesos que este debidoal papeldeterminante desempea orgnu(portadoras electrones) reoxide son reducidas coenzimas energtico eucariota. lo en el metabolismo al dadaspor el transporte de electrones oxgeno,con la produccinindirectade ATP. la el La respiracin incluye glucolisis, ciclodelTCA, y de el transporte electrones la sintess ATP de la aerobiaen cuatro etapas, Consideraremos respiracin por oxidativosmediados dos que serefierena los procesos y coenzimas otros dos,que incluyenla reoxidacinde las y coenzimas la produccin de AIP. Estasetapasse muespor todosestran enla Figura10.lb.En la clula, supuesto, y ocurrencontinuamente al mismo tiempo. tos procesos arbitrariaspuedesertil para Su divisin en cuatro etapas su discusin,pero tenga en cuentaque ninguna de estas cadauna esuna parte inteetapas funciona aisladamente; general. gral del proceso respiratorio que hemostratado en el La etapaI esla ruta glucoltica Captulo 9. La glucolisistiene el mismo resultadoen cony la dicionesaerbicas anaerbicas: oxidacinde la glucosa a piruvato. Pero el destino del piruvato es diferenteen (vaseFigura En lugarde servir presencia oxgeno de 9.8).

ptoduce mucha enet$a ms aerobia Larespiracin quela fermentacin

La mitocondria: donde tiene lugar todo el proceso


aerobiacomenzar de con Nuestroanlisis la respiracin de una descripcin la mitocondria,ya quela mayorparte aerbicoocurre dentro de del metabolismoenergtico Debidoa esto, mitocondriaesfrecuenteIa esteorgnulo. la energtica> la clulaeucariode mentellamada <central RudolphKlliker,descriel ta.Yaen 1850, bilogoalemn de de bi la presencia lo que l llam <unaserieordenada queestas partculas> lasclulas musculares. observ Se en lo partculas aisladas hinchaban el agua, que llev a se en partculas de estaban roKllikera la conclusin queestas Actualmente de semipermeable. se deadas una membrana partculas y comomitocondrias secreeque conoce estas a que por provienende bacterias fueron englobadas clulas y peroquesobrevivieron quedaron msgrandes, comorepermanentes el citoplasma la clulahospeen de sidentes Teora Endosimbitica, Anexo 11A). dadora(vasela
donde lugar el proceso 275 todo Lamitocondria: tiene

Hacecasi100aosque empezaron acumularse a pruebasque sugeran participacinde esteorgnuloen prola cesosoxidativos. En 1913,por ejemplo,Otto Warburg mostr que estos orgnulospodan consumirogeno.Sin embargo,la mayor parte de nuestro conocimientoacerca de la funcin de la mitocondria en el metabolismoenergtico provienedel desarrollode la centrifugacindiferencial, desarrollado Albert Claude(vaseFigura por I2A.2). En 1948se consiguiaislarmedianteestatcnica, mitocondriasintactasy funcionalmente activas. Posteriormente, EugeneKenned Albert Lehningery otros, mosrraron que estosorgnuloseran capaces llevar a cabotodaslas de reacciones ciclo del TCA, el transportede electrones del y la fosforilacinoxidativa. Lasmitocondras encuenttan ftecuenca se con en los lugatesen los que la necesidad ATPes mayol de Las mitocondriasestnpresentes prcticamente en todas las clulasaerbicas los organismos de y eucariotas son elementos destacados la mayorade los tipos celulares de cuando se examinan al microscopio electrnico (Figura I0.2).Lasmitocondrias encuentran, se tanto en lasclulas quimitrofascomo en las fottrofasy por lo tanto son elementos comunesno slo en los animales, sino tambin

en las plantas.Su presenciaen clulasfottrofas nos recuerdaque tambin los organismos fotosintticos pueden llevar a cabola respiracin, la que dependen de para satisfacersusnecesidades energticas de carbonodurantelos y periodosde oscuridad, en todo momentoen los tejidos y no fotosintticos, como lasraces lasplantas. de La importanciade la mitocondria para cubrir lasnecesidades celulares ATR sereflejafrecuentemente la 1ode en calizacin lasmitocondriasdentro de la clula.Muchas de veces, mitocondrias encuentran las se agrupadas lasreen giones celularescon mayor actividad metablica,donde los requerimientos AIP son mayores. clulasmusde Las culares son un buen ejemplode esto(taseFigwa4.13). En estas clulas, mitocondriasseencuentranorganizalas dasen columnasa lo largo delasfibrillas responsables la de contraccin. Otros ejemplos estas de localizaciones estratgicas lasmitocondrias observan los ciliosy flagede se en (vaseFigura los o en la colade los espermatozoides 4.I2). fedesintetconectadas vez en Sonlas mitocondrias de orgnulos independientes? Cuandoseobservan mitocondrias micrografas en electrnicascomo las de las FigurasI0.2 y 4.13,suelen aparecer como estructuras ovaladas, forma de salchicha. con con

Retculo endoplsmico rugoso

Grnulos
de glucgeno

\.1

Mitocondrias

Peroxisomas

0,5pm Fi$uta10.2 La impottanciade las mitocondlias, Las mitocondrias son elementosdestacados estafotograffa de microscopio electrnico en de una clula heptica de rata. Semuestran tambin otros componentescelulares,como el retculo endoplsmico rugoso,los grnulos de (TEM). glucgeno ylos peroxisomas

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quimitrofo la energa: Captulo Metabolismo 10 de respiracin aerobia

una longitud de variosmicrmetrosy con un dimetrode 0,5-1,0lm, si bien puedentener formasy tamaosdiferentesdependiendo tipo celular.Estaapariencia fodel ha mentadola ampliamenteaceptada visin de que las mitocondrias son entidadesseparadas que son orginulos y grandes muy numerosos. hecho,una mitocondria de y De esas dimensiones tiene un tamao similar a una bacteriay representa orgnu1o grandedespus ncleoen la el ms del (vaseFigura mayoa lasclulas de animales 1A.1).(Enlas clulasvegetales, cloroplastosy algunasvacuolasson los normalmentems grandes incluso que las mitocondrias). Sehan hechoclculos basados micrografas en electrnicasde cortestransversales, indican que el nmero de que mitocondriaspor clulaesmuy variable,en un rango que va desde una o muy pocaspor clulaen muchosprotistas, hongos y algas(y en muchasclulasde mamferostambin) hastamilespor clulaen algunostejidosde vegetales superiores de animales. ejemplo,seestimaque cada y Por hepatocitode mamfero contienealrededorde 500-1.000 mitocondrias, pesarde que slounaspocasde ellasseven a en una seccin fina tlpica preparadapara microscopa electrnica, comosemuestra la Figura10.2. en El conceptode que las formas mitocondrialesque se observanen las micrograflaselectrnicas representan orgnulosindependientes tamaoy abundancia de conocido cambi a partir del trabajo de Hans-PeterHoffrnan y CharlotteAvers.Despus examinarseriescompletas de de

cortesfinos a 1olargo de toda la clulade una levadura, dichos investigadores concluyeronque las formas ovaladas que seobservaban micrograffasindividualesrepresenen taban porcionesde una nica mitocondria grandey muy ramificada(Figura10.3). Estosresultados que el sugieren nmero de mitocondriaspresentes una clulapuedeser en considerablemente menor quelo que sesuele pensar, que y el tamaode una mitocondria puedesermucho mayor del que se puede calculara partir de las formas individuales observadas cortestransversales micrograflas en de electrnicasde cortesdelgados. Losestudios clulas de vivasintactas, examinadas el con microscopiode contraste fases mediantemicroscopa de o de fluorescencia, utilizandocolorantes fluorescentes especficos de las mitocondrias,suponenun apoyo aadido al conceptode que la mitocondriasforman una red interconectada msque un conjunto de numerosos orgnulosseparados. Estas investigaciones ponen de manifiestoque las clulas vivascontienenmitocondriasgrandes ramificadas y en un estado flujo dinmico,con segmentos de separndoy sepor gemacin fusionndose otra mitocondria. con y Gran partedel anlisis lasiiustraciones estecaptude Io sebasarn la visin convencional lasmitocondrias en de pero recuerdeque lo que como unidadesindependientes, entendemoscomo mitocondrias individuales, bien podran se$ al menos en algunostipos celulares, partes de una gran red dinmica.

Figuta10.3 El modelode las redesmitoconddalesintelconectadas. Estemodelo sepropuso tras examinar seriescompletasde cortes finos a lo'largo de una clula epidrmica. Semuestra que los perfiles mitocondriales indiduales, observadosen micrograftas de secciones finas, pueden representarpartes de una red ms grande de mitocondrias interconectadas. Algunos estudiosde microscopa de contrastede fasesen clulasvivas apoyan estemodelo.

l mitocondria: tiene donde lugar el proceso 277 todo

Las membranas extelna e internadefinendos compaimientos separados En la Figura 10.4serepresenta mitocondriatpica-o una puedeque un pequeofragmentode una red mucho ms grande--;.De cualquiermanera,la presencia dos memde branas,llamadasmembranaexternae interna, es una caracterstica distintiva.La membranaexternano representa una barrerade permeabilidad significativa para el pasode ionesy molculas pequeas, que disponede unos canaya les proteicos transmembranosos denominadosporinas, que permiten el pasode solutosde un pesomolecularde hasta5.000.Estas protenasson similares las que encona tramosen lasmembranas externas los cloroplastos las de de plantaso en la membranaexternad9 las bacterias Gramnegativas. Debidoa quelasporinaspermitenel libre trasiego de pequeas molculas ionesa travsde la membrana e externa,el espaciointermembrana entre la membranaexterna y la interna de la mitocondria o del cloroplasto,es esencialmente continuocon el citosol,con relacina los solutos importantespara la funcin de estosorgnulos. Sin embargo,las enzimaslocalizadasen el espaciointermembrana se encuentran precisamenteconfinadasall porque lasenzimas, igualqueotrasprotenas al solubles, demason parapasara travsde lasporinas. siadograndes A diferenciade la membranaexterna, membranainla terna de la mitocondria s representa una barrerapara la permeabilidad la mayorlade los solutos, de separando, por tanto, los espacios intermembranay del interior del orgnlo, en dos compartimientos separados.

La membranainterna de la mayora de las mitoconllamadas driaspresenta unasinvaginaciones caractersticas crestas,que aumentan enormementesu superficie.Por ejemplo,en una mitocondriaheptica normal, el reade la membranainternaesaproximadamente cincoveces mayor que la de la membranaexterna. Gracias estagran supera ficie, la membranainterna puedealojar un gran nmero de complejosproteicosnecesarios para el transporte de y la sntesis ATR aumentandode estamaneelectrones de ra la capacidadde la mitocondria para producir ATP.La Figura 10.5muestralos detalles estructurales las memde branasmitocondriales internay externamediantela tcnicade criofracturadescritaen elApndice. Pngase especial atencinen la gran densidad protenas de asociadas las con dos carasde fractura de la membranainterna.Lasprotenasrepresentan hastael75o/o pesode la membranaindel terna,una proporcin mayor que en cualquierotra membrana celular. Entre estas protenas se encuentran las partestransmembranosas lasprotenas de implicadasen el transportede solutos, el transportede electrones en la en y sntesis AIP. de La relativaimportanciade lascrestas la mitocondria en reflejanormalmentela actividadmetablicarelativade la clulao el tejido en el que seencuentra orgnulo.Lascel lulasdel corazn,el rin o los mrlsculos presentan actividadesrespiratorias y elevadas, en correspondencia eleun vado nmero de crestas. msculosdelwelo de lasaves Los tienen una actividadrespiratoriaespecialmente elevada y susmitocondriasestnparticularmente dotadas crestas. de

y Membranas interna externa

Membrana externa
Fcneni

intermembrana Membrana interna

Crestas

(a) Diagramaesquemtico

(b) Micrografa electrnica

1pm

Fitun 10.4 Estructuramitoconddal, (a) La estructura mitocondrial serepresentaesquemticamente estavisin tridimensional en (b) seccionada, Imagen de una mitocondria del pncreasde un murcilago vista con microscpa electrnica de transmisin (TEM). Las crestasson invaginacionesde Ia membrana interna.

quimitrofo la energa: Captulo 10 Metabolismo de respiracin aerobia

Tabla 10.1 Localizacin lasfunciones de metablicas dentro la mitocondria de


Memblana o compartimiento
N/embrana mitocondrial Caras de fractura de la membrana mitocondrial externa
Membrana externa

Funciones metablicas
Sntesis fosfolpidos de Insaturacinde cidosgrasos Elongacinde cidosgrasos Tiansportede electrones Fosforilacinoxidativa Tiansportemetablico Oxidacindel piruvato Ciclo del TCA de B-oxidacin lpidos Replicacin DNA del Sntesis RNA (transcripcin) de (traduccin) Sntesis protenas de

Membrana interna

Matriz
a^"^^ uota A^ +"^^+,,"^ uE il aututa

de la membrana mitocondnal interna

Espacio

Membrana mitocondrial interna

nlermemDrana y Figura 10,5 Estructura lasmembranas de mitocondriales interna extetna. Cuando somete lasmembranas se a mitocondriales interna externa criofractura, unadelasmembranas y a cada se por escinde suinteriorhidrofbico doscaras fractura. esta en de En figurasehansuperpuesto partes micrograffas de electrnicas las de doscaras fractura de tantoparala membrana interna comola externa, un diagrama a esquemtico lasmembranas de fracturadas, proteicas cada la densidad partculas de en f.r;il;il*

En contraste,las clulasvegetales, tienen tasasde respiracin menores que la mayoria de las clulasanimalesy tienen, por lo tanto, menos crestas sus mitocondrias. en El interior de la mitocondria estrelleno de una matriz semifluida. En la matriz se encuentran muchas de las enzimas involucradas en la funcin mitocondrial, al igual que molculas de DNA y ribosomas. En la mayor parte de los mamferos,el genoma mitocondrial consisteen una molcula circular de DNA de entre 15.000 y 20.000 pares de basesque codifican RNAs ribosomales,RNAs de transferencia y alrededor de una docena de subunidadespolipeptdicas de protenasde la membrana interna. Adems de las protenas que estn codificadas en el genoma mitocondrial, la mitocondria contiene numerosasprotenascodificadasen el ncleo, que se sintetizan en los ribosomas citoplasmticosy que son importadas posterioimente por la mitocondria (v ase Capitulo 22).

Las funciones mitocondriales lugar membranas tenen en especficas o dentro loscompartimientos de ylas Las funciones rutas especficas localizado la sehan en mitocondria mediante ruptura orgnulo la separala y del
cin de susdistintos componentes.La Thbla 10.1recogeal-

gunasde las funciones principales que tienen lugar en cada uno de los compartimientos de la mitocondria. La mayor parte de las enzimas mitocondriales que participan en Ia oxidacin del piruvato, en el ciclo del TCA, y en el catabolismo de cidos grasosy de aminocidos, son enzimas de lamafriz.De hecho, cuando serompe la mitocondria en condiciones muy suaves, liberan 6 de las 8 enzimas del se ciclo del TCA como un nico complejo multiproteico, lo que sugiere que el producto de una enzima pasa directamente a la enzima siguiente sin tener que difundir por la matriz. Por otro lado, la mayora de los intermediarios en Ia cadena de transporte de electronesson componentes integralesde Ia membrana interna, donde se encuentran organizados formando grandes complejos. Sobresaliendo desdela membrana interna hacia la matriz se encuentran unas esferascon forma de puo que se llaman complejos F, (Figura 10.6).Cada complejo consisteen seispolipptidos ensamblados.En la Figura 10.6a se puede observan uno de los complejos Fr, una micrografa electrnica tomada a gran aumento usando una tcnica denominada tincin negativa, que tiene como resultadouna imagen clara sobre un fondo oscuro.Los complejos F, tienen un dimetro aproximado de 9 nm y son especialmente abundantes en las crestas(Figura 10.6b). Cada complejo F, estunido mediante un pequeo tallo proteico a un complejo Fo*, conjunto ensamblado de protenas hidrofbicas que se encuentra insertado en Ia membrana interna (Figura 10.6c). La asociacin de un complejo F, y otro Fo,se conoce como complejo FoF,y se consideracomo una AIP sintasa,porque saes su funcin habitual en el metabolismo energtico. complejo FoF, es El de hecho el responsable la mayor parte de la produccin de de ATP que tiene lugar en la mitocondria -as como tambin en las clulasprocariotas y en los cloroplastos-. En
* Obsrvese que el subndice de Fo es la letra (o) y no e1nmero 0. Esto es debido a que, en su da, se demostr que el complejo Fo confera resistenciaal antibitico olisomicina.

Lamitocondria: tiene donde lugar el proceso todo

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ja) Membrana mitocondrial interna Crestas

Membranaexterna Espaciointermembrana

Membrana interna

Matriz(con ribosomas)

DNA transversal esquemtico unamitocondria de ib) Corte


(c) Cortetransversal esquemtico una parte de una de cresta que muestralos complejosFoF,

Figuta10.6 los complejosF y Fode la membrana mitocondrialinterna. (a) Esta micrograffa electrnicaseprepar mediante tincin negativapara mostrar los complejos Ft esfricosalineadosen la cara de la membrana interna que da a la matriz de una mitocondria del corazn de una oveja (TEM). (b) Corte transversalde una mitocondria, mostrando sus principales caractersticas estructurales.(c) Detalle de un pequeo fragmento de una cresta,que muestra cmo los complejos F, seproyectan desdela cara que da a la matriz de la membrana interna, y a los complejos Fo insertadosen la membrana interna. Cada complejo F, estunido a un complejo Fo mediante un tallo proteico. La pareja FoF,constituye una AIP sintasafuncional.

todos los casos, produccin de ATP por los complejos Fo la F, estdirigida por un gradiente electroqumico de protones a ambos lados de la membrana en la que dichos complejos Fo F, estn anclados, asunto que trataremos ms adelante en este captulo.

Enlosprocafotas, funciones las resptatorias se plasmticaenel citoplasma y localizan la membrana en Losprocariotas tienenmitocondrias sin embargo, no la
mayoria de las clulas procariotas son capacesde realizarla respiracin aerobia. Dnde se encuentran los distintos componentes del metabolismo respiratorio en la clula procariota? Bsicamente, el citoplasma y la membrana plasmtica de una clula procariota realizan las mismas funciones, respectivamente, que la matriz mitocondrial y

la membrana interna. En las clulas procariotas, por tanto, lamayoria de las enzimas de la glucolisis, del ciclo del TCA y del catabolismo de cidos grasos y aminocidos, se encuentran en el citoplasma, mientras que las protenas del transporte de electrones,selocalizan en la membrana plasmtica. El complejo FoF, est tambin en la membrana plasmtica de los procariotas, con el componente Fo incrustado en la membrana y el componente F, sobresaliendo desde la membrana hacia el citoolasma.

El ciclo del cido tricarboxflico: a vueltas con la oxidacin


Habiendoconsiderado lalocalzacinde lasfuncionesrespiratorias en la mitocondria y en las clulasprocariotas,

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quimiofo laenerga: Captulo Metabolismo 10 de respiracin aerobia

ahora al contextoeucariotay seguiremos una volveremos molculade piruvato a travsde la membranainterna de all una mitocondria paraver qu destinole espera dentro. En presencia oxgeno, piruvato seoxida completael de liberadaen el promentea dixido de carbonoy la energa de cesose usa para promover la sntesis AIP. La primera que esla piedra es etapaen esteproceso una ruta cclica, de angulardel metabolismoenergtico casitodaslos quiimportanteen estas mitrofosaerbicos. intermediario Un cclicas el citrato,que tienetres grues series reacciones de pos carboxilo por lo tanto,esun cidotricarboxlico.Por estarazn,estaruta sedenominaciclo del cido tricarboxlico (TCA). Esteciclo tambin seconocehabitualmente comociclodeKrebs honor a HansKrebs,cuyolaboratoen de rio desempe papelcentralen el descubrimiento un de esta ruta metablica la dcada 1930. en El ciclo del TCA metabolizaacetil coenzimaA (acetil CoA),queconsiste un acetato en unido a un transportador por llamadocoenzima (La coenzima fue descubierta A. A Fritz Lipmann,que compartiel PremioNobelcon Krebs El aerobia.) en 1953por su trabajo sobrela respiracin oxidativa del acetil CoA proviene de la descarboxilacin piruvato o de la ruptura oxidativa de los cidos grasos (vaseFigura de 10.1b). Independientemente su origen,el su grupo acetato un aceptorde cuaa acetilCoA transfiere de tro carbonos llamadoe&l4lg]l4[g,formndose estamaposteriomente nera citrato.El citrato es sometidoa dos oxidativasy a varias oxidaciones, dedescarboxilaciones jando al final un compuesto cuatro carbonos partir a de el inicial. del cual seregenera oxalacetato Cadavueltadel ciclo de Krebsimplica la entradade dos (el carbonos acetato acetilCoA), la liberacinde dos del y carbonos forma de dixido de carbono, la regeneraen La cin de oxalacetato. oxidacintiene lugar en cinco etaque pas: cuatrodentrodel mismocicloy una en la reaccin los convierteel piruvato en acetilCoA. En todoslos casos, por Los del electrones captados coenzimas. sustratos son ciclo de Krebsson por tanto, el acetil CoA, las coenzimas oxidadas, ADR y el Pu y los productosson dixido de el y de coenzimas reducidas, una molcula AIP (o carbono, GTR un nucletidontimamenterelacionado). general, el Teniendopresente esteesquema analizemos centrndonos lo que en ciclo del TCA msdetalladamente, les sucede las molculas carbonoque entran como a de la liberadaen cada acetilCoA y cmo seconserva energa en reducidas. una de las oxidaciones forma de coenzimas A El piruvato convefte acetlcoenzma mediante se en oxidativa la descarboxilacin la Como hemossealado, entradade carbonoen el ciclo del TCA esen forma de acetil CoA, pero en el Captulo 9 hemosvisto que la ruta de la glucolisistermina en piruvato, y no en acetilCoA. El pasode piruvato a acetilCoA re(PDH quierela actividadde la piruvato deshidrogenasa ), an

complejo multiproteico enorme, con peso molecular de 4.6 x 10o,que consta de tres enzimas,cinco coenzimas,y dos protenas reguladoras.Todos estos componentes trabajan juntos para catalizar Ia descarboxilacinoxidativa del piruvato:

. ,l' " coA-SH+'cu.-l-oCoenzima A Piruvato

NTAnr

NranH

r',

CoA-SiC-CH3 AcetilCoA

o ,ll)

+ CO2

(10.1)

Estareaccin una descarboxilacinporque delos es uno carbonos piruvato (el tqmo de carbono 1) se libera del como dixido de carbono.El resultadoesque,los tomos de carbono 2 y 3 del piruvato se convierten,respectivaI Adems, reacesta mente, loscarbonos y 2 del acetato. en porquesetransfieren electrones dos cin esuna oxidacin (adems un protn) desdeel sustratoa la coenzima de por transportados el NADH repreNAD+. Los electrones potencialque seutiliza cuandoel NADH es sentanenerga posteriormente el sistema transporte por de reoxidado de electrones. La oxidacin del piruvato tiene lugar en el tomo de carbono2, que esoxidadode un a-cetoa un grupo carboa lico. Estaoxidacines posiblegracias la eliminacin concominante tomo de carbono 1 en forma de dixidel do de carbono. La oxidacin es altamente exergnica (AGo': -7,5 kcallmol),y la energa libre se lutilizapara mediantesu unin al grupo activarla molculade acetato sulfhidrilodela coenzimaA(CoA),formandoacetilCoA. en Como semuestra la FiguraI0.7,la CoA esuna mopantoque contiene la vitaminaB cido a lculacompleja igual que la nicotinamidadel NAD+, el cido tnico. N pantotnico se clasificacomo una vitamina porque los Ia hombresy otros vertebrados necesitan como parte de que por esencial no pueden sintetizar smisunacoenzima mos. El grupo sulfhidrilo, o tiol en eI extremode la molcula de CoA puede formar un enlacetioster con cidos El orgnicoscomo el acetato. grupo tiol es lo suficientela menteimportantepara que cuandoabreviemos coenzima A no lo hagamos como CoA slo, sino como con ster, enlace el CoA-SH. Si lo comparamos un enlace porqueseliberasignimsenergtico tioster un enlace es ficativamente ms energatras su hidrlisis. De la misma para el transporte maneraque el NAD* estdiseado de la A electrones, coenzima Io estpara el transportedel aceel tato o de otrosgruposacilo.(De hecho, <A>de su nombre viene de su funcin transportadorade grupos acilos.) Por lo tanto, el grupo acetiloque setransfierea la coenzima A medianteuna de las enzimasdel complejoPDH (representado la Figura 10.7como E-SH), esten una en forma activada, de alta energa. o
Elciclo cido del tricarboxlico: a vueltas la oxidacin con

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Figura10.7 Estructura la coenzima y de A fotmacinde acetil CoA. La parte de la coenzima recuadradaen rojo es el cido pantotnico, pertenecienteal complejo vitamnico B. La formacin del enlace tioster entre la CoA y un grupo acetilo generala acetil coenzimaA. El grupo acetilo se forma por la descarboxilacin oxidativa del piruvato (reaccinPDH en la Figura 10.8)y estransferidoa la CoA por una de las enzimasdel complejo piruvato deshidrogenasa, la que est a unido como un tioster tras la oxidacin del piruvato.

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Elciclo comienza la entrada acetato delTCA con de enfoma deacetilGoA El ciclodelTCA(Figura 10.8) comienzacon entrada la de
acetato en forma de acetil CoA. En cada melta del ciclo del TCA, entran dos tomos de carbono en la forma orgnica (como acetato) y salen dos tomos de carbono en forma inorgnica (como dixido de carbono). En la primera reaccin(TCA-1), el grupo acetatode dos carbonos del acetil CoA, se une al compuesto de cuatro carbonos oxalacetato,para formar citrato, una molcula que contiene seis carbonos. Esta condensacin est dirigida por la energalibre de hidrlisis del enlacetioster y estcatalizada por la enzima citrato sintasa. Obsrvese que el citrato es un cido tricarboxlico -el tipo de compuesto que da al ciclo del TCA su nombre-. (Los dos tomos de carbono entrantes se muestran en color rosa en la Figura 10.8, con el fin de facilitar su bsqueda en las reacciones subsiguientes.)

Endosleaccones oxidacin ciclodelTCA de del se y se libera forma NADH C02


que A continuacin veremos cuatrode lasochoetapas del TCA son oxidaciones. Estehecho es patenteen la Figu(TCA-3,TCA-4, ra 10.8ya que en cuatrode lasreacciones TCA-6y TCA-8)intervienen que coenzimas entranen forma oxidaday salenen forma reducida.Cadauna de estas por reacciones estcatahzada una deshidrogenasa, es que especfica un sustratoen particular.Lasdosprimerasde de estas reacciones, TCA-3y TCA- , son tambinetapas descarboxilativas: elimina una molcula de CO, en cada se una)y sereduceel nmero de carbonos seisa cincoy de despus cincoa cuatro. de Previamente, embargo, reaccin sin la TCA-2 convierte al citrato en un compuestorelacionado, isocitrato,meel diantela aconitasa.A diferencia citrato,el isocitratotiedel ne un grupo hidroxilo que puedeser fcilmenteoxidable. Estegrupo hidroxilo del isocitratoseconvierteen la diana

282

quimitrofo laenerga: 10 Capitulo Metabollsmo respiracin de aerobia

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Enzimas que cataizanestas reacciones PDH: Piruvatodeshidrogenasa TCA-1: Citratosintasa TCA-2: Aconitasa TCA-3: lsocitratodeshidrogenasa TCA-4: a-cetoglutarato deshidrogenasa TCA-S: SuccinilCoA sintetasa TCA-6: Succinatodeshidrogenasa TCA-7: Fumaratohidratasa TCA-8: Malatodeshidrogenasa

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Figura10.8 El ciclo del cido tricarboxlico. Los dos tomos de carbono del piruvato que entran en el ciclo va Acetil CoA se sealanen rosa en el citrato y las siguientesmolculas,hasta que sedesordenanpor la simetra de la molcula del fumarato. El tomo de carbono que sepierde en forma de CO, se muestra en gris, ya que son los dos grupos carboxilos del oxalacetatolos que generanCO, en las reacciones cinco son oxidaciones,con el NAD- como aceptor de electronesen cuatro de ellas (PDH, TCA-3, TCA-3 y TCA-4. De todas las reacciones, TCA-4 y TCA-S) y FAD en un caso (TCA-6). La forma reducida de la coenzima semuestra en violeta en cada caso.Ntese que cuando se libera CO2, no se desprendeningn H+ durante la reduccin del NAD+, mantenindosede estamanera el equilibrio de cargade estas reacciones. produccin de GTP que se indica en la reaccin TCA-5 escaractersticode las mitocondrias de los animales.En las La y mitocondrias de los vegetales de las bacterias,se forma AIP directamente,pero las reaccionesson equivalentesdesdeun punto de vista energticoya que le GTP y el ATP poseenla misma energade hidrlisis y son fcilmente interconvertibles,como semuestra en TCA-5.

Elciclo cido del tricarboxlico: a vueltas laoxidacin 283 con

de la primera oxidacin, o deshidrogenacin, del ciclo (TCA-3). El isocitrato es oxidado por la enzima isocitrato deshidrogenasaa un compuesto de seis carbonos llamado oxalosuccinafo (que no se muestra en la figura), con el NAD+ como aceptor de electrones.EI oxalosuccinato es inestable e inmediatamente sufre una descarboxilacin y se convierte en a-cetoglutarato. Esta reaccin es la primera de las dos reacciones de descarboxilacin oxidativa del ciclo. La segunda descarboxilacin oxidativa tiene lugar en el siguiente paso, la reaccin TCA-4, y tambin utiliza al NAD* como aceptor de electrones.Esta reaccin es parecida a la descarboxilacinoxidativa del piruvato mostrada anteriormente. Thnto el a-cetoglutarato, como el piruvato son a-cetocidos,por lo que no debe sorprender que el mecanismo de oxidacin sea el mismo en los dos, finalizando con una descarboxilacin y la unin del producto de la oxidacin a la coenzima A, en forma de tioster. De esta manera, el a-cetoglutarato se oxida a succinil CoA, en una reaccin catalizadapor la enzim a a-cetoglutaratodeshidrogenasa.

(o Laptoduccin directa GTP ATP) de tienelugar una en etapa ciclodelTCA del


En estos momentos, balance carbono cicloest el de del satisfecho: han entradodos tomosde carbonoen forma de acetilCoA,y sehan liberadodostomos carbonocomo de COr. (Peroobserve atencin la Figura10.8quelos con en dos tomosde carbonoque son liberados un ciclo ro en son los mismosdos tomosque entraron en la reaccin TCA-1 del ciclo).Yanoshemosencontrado dosde las con cuatro reacciones oxidacindel ciclo del TCA por lo de tanto,sehan generado molculas NADH. Adems, dos de hemosvisto que el succinil CoA es un compuestoque, al igual que el acetil CoA, tiene un enlacetioster,cuya hidrlisisesaltamente exergnica. La energa este de enlace tiosterseusaparagenerar una molculade AIP (en lasmitocondriasde bacterias de cy lulas vegetales) GTP (en las mitocondriasde las clulas o animales). hecho,esla formacin de succinilCoA ms De (TCA-4),el que el succinato libre de la reaccin precedente que conserva energa la oxidacindel a-cetoglutarato Ia de en forma de un enlace tioster, cual,una vezhidrolizado, el escapazde generar ATP o GTP posteriormente Ia reacen que cin TCA-5.Obsrvese el GTP y el AIP sonenergticaya menteequivalentes que susunionesfosfoanhdridas terminalestienenla misma energa libre de hidrlisis.De esta manera, resultado el neto dela hidrlisisdel succinilCoA es la produccinde una molculade AIR ya seadirectamente o a travs GTR como serecoge la Figura10.8. del en Lasreacciones oxdativas finalesdel ciclo del TGA generan y FADH2 NADH De las tres etapas restantes ciclo del TCA, dos son oxidel daciones. la reaccin En TCA-6,el succinato formado en el
284

pasoanterior seoxida a fumarato.Estareaccinesnica, provienende tomosde en el sentidode que los electrones carbono adyacentes se forma de estamanera un doble y enlaceC:C. (Hastaahora,todaslas oxidaciones que nos hemosencontrado implicaban prdidade electrones la de un carbonoy un oxgenoadyacentes, generndose doun ble enlace C:O). La oxidacin un enlace de carbono-carbono libera menosenergaque Ia oxidacinde un enlace carbono-ogeno, hechono essuficiente de paratransferir los electrones exergnicamenteNAD+. Por esto, acepal el paraestadeshidrogenacin esNAD+ tor de electrones no sino una coenzimade menor energa, dinucletido de el flavinayadenina(FAD).Al igualqueel NAD* yla coenzima A, el FAD posee una vitamina del complejoB como parte de su estructura, riboflavina,en estecaso (Figura 10.9). FAD acepta protones doselectrones, El dos y por lo quela forma reducida indicacomoFADHT. se Comoveremosms adelante, rendimiento miximo de ATP de la el oxidacinde lascoenzimas de aproxidamente para es tres el NADH y sloalrededor dosparael FADHT. de pasodel ciclo,el dobleenlace fumaEn el siguiente del rato es hidratado,formndose malato (reaccinTCA-7, por catalizada la enzimafumarato hidratasa). Dado que el fumaratoesuna molculasimtrica,el grupo hidroxilo del agua tienela mismaprobabilidad unirsea cualquiera de de los tomosde carbonointernos. Como resultado, tolos mos de carbono la Figura10.8queestaban de marcados en rosaparaseguir pistaal grupo acetato ha entradoen la que el ciclo ms recientemente, distribuyenal azaren este se pasoy por lo tantono semarcarn ningncolora parcon tir de ahora.En la reaccin TCA-8,el grupo hidroxilo del malatoseconvierteen la dianade la oxidacinfinal del ciclo.De nuevo,el NAD* actacomo aceptor electrones, de y el productolo constituye correspondiente el a-cetocido, el oxalacetato. En tesumen: productos ciclo del TCAson C02, los del y ATB NADH FADH2 Con la regeneracin oxalacetato, completauna vueldel se ta del ciclo.Podemos resumirel proceso sealando silas guientes propiedades ciclo del TCA: del 1. El acetato entraen el ciclocomoacetilCoA y seune a una molculaaceptora cuatrotomosde carbono de para formar citrato,un compuesto seiscarbonos. de 2. La descarboxilacin ocurre en dos etapasdel ciclo por lo que la entradade dos carbonos forma de en acetato compensa la prdidade doscarbonos se por en forma de dixido de carbono. 3. La oxidacin tiene lugar en cuatro etapas,con el NAD- comoaceptor electrones trescasos el de en y FAD en uno de ellos. 4, EI ATP segenera un solomomento,con el GTP en como intermediarioen las clulas animales.

quimitrofo laenerga: Gapitulo Metabolismo 10 de respiracin aerobia

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Figura y 10.9 Estructufa FADy su oxidacin leduccin. La parte de la coenzimarecuadrada rojo esla riboflavina,una vitamina B. de en Lasflechas sealan dos tomosde nitrgeno de la riboflavina que toman cadauno un protn y un electrncuando el FAD sereducea los FADH2. La mitad de la molcula que incluye a la riboflavina y a un grupo fosfato representala estructura del mononucletido de flavina (FMN), una coenzimarelacionada.

5. Secompleta vueltadel cicloconla regeneracin una Hay dos aspectoschocantesen estareaccin de resumen: del oxoalacetato, aceptororiginal de cuatrocarque el rendimiento de AIP despus de todo, es bastante el bonos. modesto y que son muchaslas molculasde coenzimasque Reuniendo ocho reacciones componen ciclo las que el del TCA quesemuestra la Figura10.8, en obtenemos una a y reaccin global(en sta en lasreacciones posteriores, los protones lasmolculas aguano semuestran y de explcitamentesi estn slopresentes la compensacin para elctrica o qumica). Estareaccin tienela siguiente forma: Acetil coA + 3 NAD* + FAD + ADP t P,---> 2CO2+ 3NADH + FADH2* CoA-SH + ATP (10.2) Comoel ciclotienequeverificarse veces parametados bolizar lasdosmolculas acetilCoA que derivande una de nicamolcula glucosa, produccin de la por molcula de glucosa puedeobtenermultiplicandopor dos la Reacse cin 10.2. aadimos Si despus stael conjuntode reaca cionesde la glucolisis hastapiruvato (Reaccin 9.16)y la descarboxilacinoxidativa del piruvato a acetil CoA (Reaccin 10.2, multiplicada tambinpor 2), obtenemos la globalqueresume secuencia siguiente reaccin la completa de Ia glucosa lo largo del ciclo del TCA: a + glucosa 10NAD+ + 2FAD + 4ADP f 4P,--> (10.3) 6CO2+ 1ONADH+ 2FADH2+ 4ATP
se reducen durante la oxidacin de la glucosa.No obstante, debemostener tambin en cuenta que las coenzimasNADH y FADH, son compuestos de alta energa. Como veremos ms adelante en estecaptulo, la transferencia de electrones desdeestascoenzimas hasta el oigeno esaltamente exergnica. De esta manera, la reoxidacin de 12 coenzimasreducidas que se muestran en la parte derecha de la Reaccin 10.3,proporciona Ia energanecesariapara dirigir la sntesis de la mayor parte de las molculas de AIP que se producen durante la oxidacin completa de la glucosa. Paralaliberacin de esaenerga,debemos tratar las etapas restantesdel metabolismo respirateyi6 -fsporte de electronesy la fosforilacin oxidativa-. No obstante, antes de hacerlo, trataremos algunos aspectosadicionales del ciclo del TCA; su regulacin, su papel central en el metabolismo energtico y su funcin en otras rutas metablicas.

Varias enzimas cclo TCA del del estn sujetas una a regulacin alostrica
Como todas las rutas metablicas,el ciclo del TCA debeestar cuidadosamente regulado para asegurar que su activiElciclo cido del tricarboxlico: a vueltas laoxidacin 285 con

dad est acoplada lasnecesidades la clula. princia de Los pales lugares regulacin muestran la Figura10.10. de se en La mayor parte del control consiste la regulacinalosen trica de cuatro enzimasclave,por medio de molculas

que se unen a ellas de forma reversible. efectorasespecficas Como podemos recordar del Captulo 6, las molculas efectoraspueden ser tanto inhibidoras como activadoras, y son indicadas, respectivamente, como un signo menos de

Enzmasque catalizan estas reacciones E1: PDH fosfatasa E2:PDH quinasa Todaslas dems enzimascomo se muestran la Figura10-8 en

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Figuta10.10 Regulacin ciclo del TCA. EI ciclo del TCA y la reaccin deshidrogenasa del precedentedel piruvato semuestran aqu en formato resaltado,con las enzimasreguladorasen azul. Los efectosreguladoresprincipales seindican como activacin (+) o inhibicin (-). Los reguladoresalostricosincluyen CoA, NAD+, AMP yADP como activadoresy acetil CoA, NADH, AIP y succinil CoA como inhibidores. Aparte de su efecto alostrico sobrela actividad de la piruvato deshidrogenasa, AIP activa la PDH quinasa (Er), la enzima que fosforila el uno de los componentesdel complejo PDH, haciendo que se inactive.La enzimaPDH fosfatasa(8,), elimina el grupo fosfato,volviendo a activar al complejo PDH.

quimitrofo laenerga: Captulo Metabolsmo 10 de respiracin aerobia

color rojo y un signo ms de color verde, en la Figupiel alostrica, complejo Apartede la regulacin ra 10.10. (PDH) seactivae inactivamedianruvato deshidrogenasa de reversible uno de te una fosforilaciny desfosforilacin proteicos. suscomponentes del de el Paraapreciar significado la regulacin ciclo del que TCA,recuerde usaacetilCoA,NAD*, FADyADP como y sustratos que generacomo productosNADH, FADH2, productos 10.3). Tiesde estos Reaccin CO, yATP (vasela -NADH, AIR y acetilCoA- sonimportantes de efectores como se muestraen la Figura 10.10. una o ms enzimas, NAD+, ADP y AMP activancadauno al menosa Adems, Desde punto devista,el este reguladoras. lasenzimas una de de redoxy energtico sensible losestados a cicloesaltamente la relacinNADH/NAD* y las la clula,valoradoscomo relativas ATRADP yAMP. de concentraciones generadoras NADH que de Lascuatrodeshidrogenasas en semuestran la Figura10.10son inhibidaspor NADH. de El aumentode la concentracin NADH en la mitocondeshidrogepor dria disminuye, tanto,la actividadde estas lo nasas, que conducea una reduccinen la actividaddel el ciclo del TCA.Adems, complejoPDH esinhibido por el y cuandohay muchaenerga), ATP (que esmsabundante son tanto la PDH como la isocitratodeshidrogenasa acticuandoserepor el ADP y AMP (msabundantes vadas quiereenergla). de La disponibilidadgeneral acetilCoA estdeterminada principalmente por la actividad del complejo PDH (taseReaccin que esinhibido alostricamente 10.1), Por NADH, ATP y acetilCoA y esactivadopor NAD+, AMP y este CoA libre (Figura10.10).Asimismo, complejoenzimpor tico esinactivado la fosforilacinde uno de suscompoproteicos cuandola relacin[ATP]/[ADP] esbaja. nentes estn de Estasreacciones fosforilaciny desfosforilacin respectiporla PDH quinasaylaPDH fosfatas4 catalizadas por No vamente. essorprendente lo tanto, que el AIP sea y un inactivadorde la quinasa un inhibidor de la fosfatasa. Como resultado de estos mltiples mecanismosde a control, la produccin de acetil CoA essensible las relaciones[acetilCoA]/[CoA] y [NADH]/[NAD] en la mitocondria y tambin al contenido mitocondrial de ATP. del reguladores sobrelasreacciones efectos Apartede estos del ciclo del TCA, existeun control por retroalimentacin sobrela ruta glucoltica,graciasa los efectosinhibiciclo doresdel citrato y de la acetilCoA sobrela fosfofructoqui(vanseFigts' respectivamente nasay la piruvatoquinasa, y 10.10). ras9.I2 central un El ciclo del TCAdesempea pape de en el catabolismo grasasy proteinas Es imprescindibleentenderel papel central del ciclo del TCA en todo el metabolismoenergticoaerbico.Hasta ahora, hemos consideradoa la glucosacomo el sustrato A principal de la respiracincelular. pesarde que la mayor

para el metabogenerales descritas parte de las reacciones lismo energtico quimitrofo consideran a Ia glucosa como el compuestode partida, debemossealarel papel alternativas como carburanteen el mede otrasmolculas celular y en el ciclo del TCA, espetabolismo energtico Lejosde ser una ruta cialmentelos lpidos y las protenas. de menor para el catabolismo un nico azicar,el ciclo del la TCA representa principal opcin del metabolismoenerdesde gtico aerobio en un gran abanicode organismos, y superiores los animales. los microbioshastalos vegetales La Efasa comounafuentede energfa, Cuando nos enconen tramospor primeraveza lasgrasas el Captulo3, analiy de zamossu papelen el almacenamiento energa observamos que son compuestosaltamente reducidos que Iiberan ms energapor gramo tras su oxidacin que los razn, grasas un almacn las son de Por carbohidratos. esta Las de energa largo plazoparamuchosorganismos. reseren importantes los animason vasde grasa especialmente tambin una les hibernantesy migratorios y representan energay carbono por las forma comn de almacenar parasu funLas son plantas sussemillas. grasas ideales en porque permiten el miximo almacenacin de almacn con el mlnimo pesoy volumen. miento de caloras en La mayorade la grasasealmacena forma de triacil(tambin llamados triacilgJicridos), que son gliceroles grasos cadena larga de neutrosde glicerolycidos tristeres (vaseFignra de El 3.27b). catabolismo los triacilgliceroles licon su hidrlisisen gliceroly cidosgrasos comienza bres.El glicerol se desvaa la ruta glucollticapor su confosfato,como seinversinoxidativaen dihidroxiacetona estnunidos a la dica en la Figura9.9.Los cidosgrasos que A coenzima para formar acil CoA grasos, son postepor mediante proceso un riormentedegradados oxidacin y que secuencial implica la oxidacinsucesiva la eliminagenerndose acetilCoA de cin de unidades doscarbonos, reducidas NADH y FADHT. ylas coenzimas de secuencial catabolismo cidosgrasos de Esteproceso a acetilCoA sedenominaB oxidacin porqueel acontecitienelugaren miento oxidativoinicial en cadaciclosucesivo en el tomo de carbonoque seencuentra la posicinB del carbonodesde grupo carel cidograso(esdecir,el segundo derivados las de boxilo). De estamanera,los cidosgrasos grasas, igual que el piruvato derivadode los carbohidraal pospor tos,seconvierten oxidacinen acetilCoA,queser por teriormentecatabolizado el ciclo del TCA. Es ms,las estnlocalizade enzimas la oxidacinde los cidosgrasos dasen la mitocondriaen muchas(si no en todas)lasclulas por eucariotas, lo que el acetilCoA que provienede lasgradentro del misse sasnormalmente producey secataboliza e celular(vas Figura I 0.1b ). mo compartimiento y comounafuentede enefgla de aminocidos. Las protenas normalmentecomo fuente Lasprotenasno seconsideran papelesms importantes de energaya que desempean
a vueltas laoxidacin 287 con tricarboxlico: Elciclo cido del

dentro de la clula -como enzimas, protenas transportadoras,hormonas y receptores, por ejemplo-. pero lasprotenas,tambin pueden ser catabolizadas para generarATp si es necesario, especialmente cuando los depsitosde grasasy de azwcarcs estn vacos o no estn disponibles. En los animales,el catabolismoproteico es importante en condicionesde ayuno o de inanicin, o cuando la ingestade protenas en la dieta supera las necesidades aminocidos. de En los vegetales, catabolismo de protenas proporciona el la materia prima para la sntesisde protenas durante la germinacin o durante el almacenamientode protelnas en las semillas.Asimismo, todas las clulasllevan a cabo una renovacin de las protenasy de las estructurasque contienen protenas.Los aminocidos en los que una protena se degrada, puedenser reciclados proteinaso serdegradaen dos oxidativamentepara obtener energa. El catabolismo de las protenas comienza con la hidrIisis del enlacepeptdico que mantiene a los aminocidos unidos en una cadenapolipeptdica.El procesose denomina proteolisis, y las enzimasque lo llevan a cabo,proteasas.

Los productos de la digestin proteoltica son pequeos pptidos y aminocidos libres. Las digestionesposteriores de los pptidos estn catalizadas por las peptidasas,que hidrolizan, tanto enlacespeptdicos internos (endopiptidasas),como externos (exopeptidasas). Los aminocidos libres, ya seaningeridos o provengan de la digestin de las protenas, pueden ser catabolizaos para la obtencin de energa. Normalmente, estossustratos alternativosse convierten en intermediarios de rutas metablicas ms importantes en el menor nmero de pasosposible.A pesar de su diversidad numrica y qumica, todas estas rutas desembocan finalmente en unos pocos intermediarios del ciclo del TCA, principalmente acetil CoA, a-cetoglutarato,oxoalacetato, fumarato y succinil CoA. De los 20 aminocidos que se pueden encontrar en las protenas,tres dan lugar a intermediarios del ciclo del TCA de una manera directa. Estos aminocidos son la alanina, el aspartatoy el glutamato, que pueden ser convertidos en piruvato, oxoalacetato a-cetoglutarato, y respectivamente (Figura 10.11).Los dems aminocidos requieren rutas

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Figura 10,11 Interconversin varios de y aminocidos sus conespondientes cetocidos el ciclo del TCA. Los en aminocidos(a) alanina,(b) aspartato v (c) glutamato puedenserconvelrtidos eversiblemente suscorrespondientes en z-cetocidos: piruvato,oxalacetato y r-cetogl utarato, respectivamente. Cada uno de estos cetocidos un es intermediario del ciclo dei TCA, del que se representa una parte para situar el contextometablicopara estas reacciones. En cadacaso, grupo amino semuestra el en azul y el grupo ceto en amarillo. Estas reacciones rpidamentereversibles son y desempean funcincatabolica la de convertirlos aminocidos en intermediariosdel ciclo del TCA para la oxidacinaCOry HrO y la funcin anablica de convertir ios intermediarios del ciclo del TCA en aminocidos para usarlos la snlesis proteinas. rutas en de Las catablicas anablicas y para otros aminocidos pero son menosdirectas, tambien finalizan y parten de intermed iariosdel metabolismo respiratorio.

288

Captulo 10

Metabolismo quimitrofo la energa: de respracin aerobta

con muchos intermefrecuentemente ms complicadas, estasrutas en el futuro' diarios. Encontrarseguramente probablemente un cursodebioqumica.Cuandoassea, en de asegrese distinguir cuntosde ellos tienen productos finalesque son intermediariosdel ciclo del TCA' porque esto reforzarms an el papel central del ciclo del TCA celular. para todo el metabolismoenergtico una El ciclo del TCAconsttuye fuentede preculsores pafatutas anablicas el La funcin principal del ciclo del TCA es,claramente, habidacuentade su papelen la oxidacindel catabolismo, conacetilCoA a dixido de carbono,con la consiguiente reducilibre en forma de coenzimas de energa servacin la das.En prcticamente mayorade las clulasexisteun dentro y fuera del ciclo de intermediaflujo considerable Estas reacrios de cuatro,cincoy seistomosde carbono' de suministro intermediarios reponen el colaterales ciones a en el ciclo, segnlas necesidades, \a vez que se utilizan de derivados algunode los de parala sntesis compuestos intermediariosdel ciclo.Debido a que el ciclo del TCA rea y presentaun nexo entre rutas catablicas anablicas, (del menudo se le denomina como una ruta anfiblica <ambos>). significa griegoamphi-,que el Ademsde su papel central en el catabolismo, ciclo anablicos. del TCA estinvolucradoen variosprocesos en que las Por ejemplo, tresreacciones semuestran la Fia-cetodel ciclo los gura 10.11convierten intermediarios y aspartato glutamaalanina, del TCA en los aminocidos de son to. Estosaminocidos constituyentes lasprotenas, en asque el ciclo del TCA estimplicado indirectamente proteica, aportandovariosde los aminocidos la sntesis El en que senecesitan el proceso. citratoy el succinilCoA que metablicos proveeel ciclo del son otros precursores TCA.El succinilCoA esel punto de partidaparala sntesis del grupo hemo,mientrasque el citrato puedeser transportado a la mitocondria y usado como fuente de acetil grasos el citosol. en posterior cidos de CoA parala slntesis

que estaruta puedensintetizar Los organismos poseen como el de -ompuestosde dos carbonos, azicaresipartir glioxilatoposibilitatambinla converEl acetato. ciclo del en almacenadas carbohidratos. sin de las grasas

Transporte de electrones: flrrjo d electrones desde las coenzimas al oxgeno

etapas la resde las ya Habiendo considerado dosprimeras piracin aerobia-la glucolisisy el ciclo del TCA- hagaqu parapreguntarnos hemosconsepausa mosuna breve 10.3, el en guido hastaahora.Como seseala Ia Reaccin metabolismoquimitrofo de la energaa travsdel ciclo de del TCA, tiene como resultadola sntesis cuatro moly dos culasde ATP por cadaglucosa, de la glucolisis otras dos del ciclo del TCA. La oxidacincompletade la glucosa hea CO, puedeproducir 686kcal/mol,peronicamente de mos obtenidomenosdel l0o/o esacantidad(slo4 AIP 10 con aproximadamente kcal/molcadauno, basndonos de en el valor de AG' parala sntesis ATP en una clula estel se normal) Dnde, podra uno podrapreguntar, el de la energa? cundoobtendremos rendimienresto Y de mayor de AIP caracterstico la to significativamente respiracin? La est es La respuesta muy sencilla. energa justo ah en por de representada lasmolculas coenzi10.3, la Reaccin a y FADHT. Como veremos contiNADH mas reducidas cuando gran cantidadde energa nuacin,se libera una por la transfereducidasson reoxidadas estascoenzimas al rencia de sus electrones ogeno molecular.De hecho, potenciallibre que estpresende cercadel 90o/o la energa en se de te en una molcula glucosa conserva las l0 moleque seforde culasde NADH y en las2 molculas FADHT, man cuando se oxida una molculade glucosaa COt son, por tanto, (vase 10.3).Dichascoenzimas Reaccin que puedenser usadospara de compuestos alta energa en de de impulsarIa sntesis AIP despus serconvertidos la transmemelectroqumico potencial gradiente del energa elacetil CoA convierte El ciclodelglioxilato branade protones. en carbohdratos mediantela de El proceso reoxidacinde lascoenzimas transferenciade electronesal oxgeno se conoce como con el ciclo del TCA, pero que estrelacionada Una ruta es El transporte de electrones. transportede electrones la es una que desempea funcin anablica el ciclo del glioFigutercera etapa del metabolismo respiratorio (vase que sedescribe el Anexo 10A.Estareaccintiene en xilato de de El llamadoglioxiso- ra 10.1b). proceso sntesis ATP que lo acompaa de lugar en un tipo especial peroxisoma (etapa 4), se analizarposteriormenteen este captulo. .ma.Elciclo glioxilato reacciones el con varias comparte del que de no en de ciclo del TCA pero le faltanlasdosreacciones descarbo- Tenga cuenta, obstante, el transporte electroindependientes. de de molculas ace- nesy la sntesis ATP no son procesos En xilacin de ste. su lugar,seusandos Los dos son parte integrantede la respiracincelulary estato (queentranen la ruta como acetilCoA) paraproducir el tn vinculados,funcionalmente, uno al otro por el gra(vase Figuun succinato, compuestode cuatro carbonos que esal mismo tiemde fosfoenol- dienteelectroqumico protones' en despus se ra I0A.2).El succinato convierte y po el resultado transportede electrones el origende la del por glucoazcares piruvato del que puedensintetizarse que impulsala sntesis AIP. de energa neognesis.
al oxigeno 289 desde flujo de Transportelectrones: deelectrones lascoenzimas

Er crcro DEL GLIoxILATo, Los clroxrsoMAs y LA GERMINACTN sEMTLLAS oE


Las especies vegetales que almacenanreservas sustanciales de carbono y energlaen sus semillasen forma de grasa,seenfrentan a un particular reto metablico cuando sussemillasgerminan: deben convertir la grasaalmacenada sacarosa, en que eslifuente inmediata de carbono y energapara la mayora de las clulasdurante la germinacin. Muchas plantas pertenecena estacategora, incluyendo especies oleaginosas conocidascomo Ia soja,el tan cacahuete, girasol,el ricino y el m alz.La grasaestformada el principalmente en triacilgliceroles(triglicridos) y sealmacena como cuerpos lpidicos,yaseaen los cotiledonesdel embrin de la planta o en el endospermo,el tejido nutritivo que rodea y nutre al embrin durante su desarrollo.La micrografia electrnicade la Figura 10A.1muestra la prominencia de los cuerposlipdicos en el cotiledn de una semilla de pepino. La ventaja de almacenargrasaen vez de carbohidratos, sehace patente si consideramosque un gramo de triacilglicerol contiene ms del doble de energaque un gramo de carbohidratos. Esta diferencia permite a las especies que almacenangrasas, empaquetar Ia mayor cantidad de carbono y calorasen el mnimo esp"tio posible. Sin embargo,esto implica que dichas especies tienen que ser capaces convertir la grasaalmacenadaenazicar cuando las de semillasgerminen. La transformacin de grasasen azcar no esposible para la mayora de los organismos.Muchos organismosconvierten rpidamente azcary otros carbohidratos en grasasque se almacenan.Pero la mayora de los organismos eucariotasno pueden llevar a cabo el proceso inverso.Paralas semillasde las especies vegetales que almacenangrasa,sin embargo,la conversin de los triacilglicerolesalmacenadosen sacarosa esencial,porque es la sacarosa la forma en la que setransporta carbono y energal es brote en crecimiento y a los picesde las racesde la semilla en desarrollo. Las rutas metablicasque hacen esto posible son la B-oxidacin y el ciclo del glioxilato. La funcin de la B-oxidacin esdegradarla grasaalmacenadaa acetil CoA. El acetil CoA entra despusen el ciclo del glioxilato (Figura 10A.2),una ruta cclica de cinco pasos, que recibe su nombre de uno de sus intermediarios, el cetoiido de dos carbonos denominado glioxilato. El ciclo del glioxilato est relacionado con el ciclo del TCA, con quien tiene tres reaccionesen comn. Sin embargo,hay una diferencia crucial: la presenciade dos enzimasespecficas los glioxisomas,la isocitratoliasayla malato de sintasa.Atravs del uso de estasdos enzimas,el ciclo del glioxilato sesaltalas dos reaccionesde descarboxilacindel ciclo del TCA. Adems,el ciclo del glioxilato introduce no una, sino dos molculas de acetil CoA por luelta del ciclo, generndose succinato,una molcula de cuatro tomos de carbono. As, el ciclo del glioxilato es anablico (el carbono entra como molcula de dos tomos de carbono y 1oabandona en forma de molcula de cuatro carbonos), mientras que el ciclo del TCA es catablico (el carbono entra como una molcula de dos carbonosy lo abandonacomo 2 molculasde

Co')'

En las semillasde las especies oleosas, enzimasde la las B-oxidacin y del ciclo del glioxilato selocalizan en orgnulos denominados glioxisomas. Los glioxisomasse encueniran en las semiasde las especies que almacenangrasay algunasvecesen las hojas ejas. En la micrografia electrnica de la Figura 10A.1 se pueden observar los glioxisomas.La ntima asociacinde los glioxisomascon los cuerpos lipdicos, presumiblemente facilita el transporte de cidos grasosdesdeestosultimos a aqullos. La Figura 104.2 recogetodo el metabolismo relivante dentro del contexto intracelular. Los triacilglicerolesalmacenadosse hidrolizan en los cuerposlipldicos, Iiberando cidos grasos.Estosse transportan dentro del glioxisoma y son degradadosmediante la oxidacin a acetil CoA, que estransformado en succinato por las enzimasdel ciclo del glioxilato. El succinato pasaa la mitocondria, donde se convierte en malato pasandopor fumarato en una reaccin que forma parte del ciclo del TCA. (Desecuenta de que existentambin mitocondrias en el cotiledn del pepino de l Figura 10A.1.) El malato estransportado posteriormente al citosol y oxidado a oxalacetato, cual es descarboxiladopara formar el

Proplastidos Glioxisomas lpdicos

Mtocondria

5 rm

Fi$uta10A.1 La asociacinentre los glioxisomasy los cuerposlipidicosen las semillasoleaginosas. Aqu semuestra Ia clula de un cotiledn de una semilla de pepino durante las primeras etapasdel desarrollo germinativo.los glioxisomasy las mitocondrias implicadas en la movilizacin de grasas en la gluconeognesis y estnlntimamente asociadas-con cuerpos pdicos en ls que se almacenala grasa.La los grasaesr,presente principalmente-en forma de triacilgliceroles (tambin llamados triglicridos). Sepuede obseivar la presenciad! proplastid-ios vez de plastosmaduros, lo que pone en evidencia que el cotiledn no es an fotosiniticamente activo y por en es lo tanto, heterotrfico en su modo de nutrirse (TEM).

290

quimifofo laenerga: Captulo Metabolismo 10 de respiracin aerobia

fosfoenolpiruvato (PEP).EI PEP sirve como punto de partida de la en gluconeognesis el citosol, dando como producto final sacarosa, que setransporta a los tejidos en ' el carbohidrato por excelencia, crecimientode la planta. es La ruta desdelos triacilgliceroleshastala sacarosa obviamente bastantecompleja,e implica a enzimasde los cuerposlipdicos, de los

el glioxisomas,de la mitocondria y del citosol. Perorepresenta cordn umbilical metablico del que dependenlas semillasde todas Y de las especies plantasque almacenangrasa. complementagran parte del metabolismo que hemos estadoviendo en los Captulos 9 y el 10,incluyendo la gluconeognesis, ciclo del TCA, Ia B-oxidacin, y ahora tambin el ciclo del glioxilato.

Acidos grasos

F+Pl-l
lJ I F-6-P

tr , lf+F"*,."*l Gluconeognesis

+
| |

tlr'.sa fosf"t"l

t t

t F".f"".l"Iri--rt"i. l- O

I I Oxalacetato Gii,qdl'ts

_1_
lvatato I

clrosol

GLIOXISOMA

que Enzimas catalizan estas reacciones sintasa GC-1:Citrato GC-2:Aconitasa liasa GC-3: lsocitrato sintasa GC-4: Malato GC-5:Malatodeshdrogenasa

MITOCONDRIA

en Figura10A.2 El ciclo del glioxilato y la gluconeognesis las semillasoleaginosas. Las semillasde las plantas que almacenangrasapueden se transformar staen azicar. Los cidosgrasosderivadosde la hidrlisis de los triacilglicerolesalmacenados, oxidan a acetil CoA mediante el anablicade cinco en procesode la B-oxidacin. El acetil CoA setransforma despus succinatomediante el ciclo del glioxilato, una secuencia Todas GC-3 y GC-4, respectivamente. que recibe su nombre del glioxilato, la molcula que seconsumey segeneraen las reacciones ieacciones, las enzimase Ia B-oxidacin y del ciclo del glioxilato seencuentran en el glioxisoma.La transformacin de succinatoen malato tiene lugar en tiene y la mitocondria, mientras que el metabolismo posterior del malato pasandopor el fosfoenolpiruvato,a hexosas por tanto, a sacarosa, el como la soja,el cacahuete, maz y el ricino, el acetil CoA proviene de lugar en el citosol. En las semillasde las plantas que almacenangrasas, de h y'-oxidacin de cidosgrasos.En las bacteriasy el los microorganismos eucariotascapaces crecersobresustratosde dos carbonoscomo el enol o el actafo, el a,rtil CoA se genera a parfir del acetato lilre en una fosfurilac'n dependienged9,ATP

al oxgeno 291 desde flujo de Transportelectrones: deelectrones lascoenzimas

El sistemade transporte electlones de conduce los electrones desdelas coenzimas reducidas oxgeno al Evidentemente, buena parte de la energaliberadapor el catabolismooxidativo de los carbohidratos, grasao protenasse almacena las coenzimas en reducidasde elevada que energa seproducen este proceso. ms,estos en Es procesos oxidativospuedencontinuar nicamentesi hay molculas coenzimas de oxidadas disponibles como aceptores de electrones. Esto, a su vez, dependede la reoxidacin continua de coenzimas reducidasmediantela transferen-Or, ciade electrones un aceptor a terminalde electrones en el casode la respiracinaerobia.

coenzimas reducidasal oxgeno,estacopladoal bombeo de protones a travsde la membrana,producindose de estamanera el gradienteelectroqumicode protones del quedepende sntesis AIP? la de El sistemade transporte electrones de consisteen cnco tipos diferentes transportadores de

Los transportadores que constituyenel sistemasonflavoprotenas,ferrosulfoprotenas, citocromos, citocromos que contienen cobrey una quinonadenominada coenzima Q. Excepto coenzima todoslostransportadores prola son Q, tenascon grupos prostticos especficos capaces ser de oxidados reducidos y reversiblemente. todaslastransCasi y la oxidacin las coenzimas. El transporte electrones de de ferencias electrones de ocurrenen las membranas, lo por El transportede electrones implica la oxidacinaltamente que no essorprendente la mayorpartede estos que transexergnica NADH y de FADH, con el oxgenocomo del portadores sean molculas hidrfobas. hecho, mayoDe la aceptorterminal de electrones, pudiendo escribirlas reacra de estos intermediarios aparecen la membrana en como cionesglobales la manerasiguiente: de partede grandes complejos protenas de llamados compleNADH+H++iOr-NAD++H2O jos respiratorlos. Echaremos vistazoa la qumica de esun AGo' : -52,4kcallmol (10.4) tostransportadores electrones despus de y veremos cmo se organizan complejos en respiratorios se ordenanen y FADH2+ )Or--+ FAD + H2O una cadena transportadores, transfieren electrode que los AGo' : -45,9 kcalimol (10.5) nesdesde coenzimas las reducidas oxgeno. al El transporte electrones, lo tanto,no sloconllede por va Ia reoxidacinde las coenzimas el consumode oigey Flavoplotenas. el transportede electrones En participan no, sinotambinla liberacin agua, de que esla forma revariasflavoprotenas unidas a membrana,que usancomo ducidadel oigeno y uno de los dos productos finales grupo prosttico, del bien al dinucletido flavina adenina de metabolismo (El energtico aerobio. otro productofinal es (FAD),bien al mononucletido flavina (FMN). El FMN de el dixido de carbonoproducido en el ciclo delTCA;van- es,en esencia, mediamolculade FAD,como semuestra sela Figura10.8 la Reaccin y 10.19.) en la Figura10.9. ejemplode flavoprotena la NADH Un es deshidrogenasa, forma parte del complejo proteico que Elsistema transporte electrones.El aspecto de de que aceptalos pares de electrones msimque provienen del portantede las Reacciones y 10.5esla gran cantidad NADH. Otro ejemplo, conocidopor nosotros ciclo 10.4 ya del de energa libre desprendidadurante la oxidacin del del TCA,esla enzimasuccinato deshidrogenasa, tiene que NADH y del FADH, por la transferencia electrones de al FAD como grupo prostticoy forma parte de un comal oxgeno. valores AG'' de estas Los de reacciones dejanclaplejorespiratorio unido a membrana,queacepta pares los ro que la oxidacinde una coenzima un proceso es altade electrones succinatoa travsdel FAD.Una caractedel menteexergnico. transferencia electrones lleva a La de se rsticaimportante de las flavoprotenas de la coenzima (y caboen un proceso muchospasos, implicauna se- NADH tambin)esquetransfieren, de que tanto protones, como rie de transportadores electrones de oxidablesreversible- electrones medidaqueson oxidados reducidos a y reversimente que funcionan conjuntamenteen lo que se ha llablemente. mado cadenade transporte de electrones(ETS).De esta manera, gran diferenciade energa la libre entrelascoenziFenosulfoplotenas. ferrosulfolrotenas,tambin llaLas mas reducidas el oxgenoestrepartidaen una seriede y (protenas madas ferredoxinas frricassingrupohemo),fortransferencias electrones seliberade maneragradual, man parte de una familia de protenas, de y cadauna con un llevando al mximolas oportunidadespara la sntesis (Fe-S), consiste tomos hiede centro que en de ferrosulfuroso AIP y minimizando la prdida de energaen forma de rroy antfreasociados los gruposcistena la protecon de calor. na.Seconocen, menos, al una docena centros de Fe-Scue Nuestroanlisis sistema transportede electrones participan en el sistemamitocondrial de transportede del de se centraren tres cuestiones: Cules los prin(1) son electrones. tomosde hierro de estos Los centrosson los cipales transportadores electrones la ETS?(2) Cal verdaderos de en transportadores. Cadatomo de hierro alterna es Ia secuencia estostransportadores la cadena? entrela forma oxidada de (Fe3*) la reducida en (Fe2+) y durante (3) Cmo organizan se estos transportadores la memen el transportede electrones, en estecasoafectaa un que brana,para garantizarqrreel flujo de electrones desdelas nico electrn.Es ms, las protenas ferrosulfurosas no 292
quimitrofola energa: Captulo Metabolismo 10 de respiracin aerobia

toman o cedenprotonesmientrascambianentre los estay dosoxidados los reducidos, aspecto un cuyaimportancia seharpatentemsadelante. Gitocromos, igual que las ferrosulfoprotenas, citoA1 los cromostambincontienen hierro,pero formandopartedel grupo prosttico una porfirina llamadohemo, queprode d, bablemente ustereconozca como componente la hemode globina(vanseFiguras3.4y 10.12). Existen, menos, al cinco tiposdiferentes citocromos el sistema transporte de en de de electrones, designados comocitocromosh c,cp ay ar.El tomo de hierro del grupo prosttico hemo,al igual que el del centroferrosulfuroso, sirvecomotransportador elecde tronesen los citocromos. fu, Ios citocromosson tambin transportadores un nico electrn,sin transferirprotode nes.Mientrasque los citocromosb, cr, Ay a3son protenas integrales membrana, citocromoc esuna protenapede el rifricade membrana, asociada indirectamente la caraexa terna de sta.Es ms,el citocromo c no forma partede un grancomplejoy puedepor tanto difundir muchomsrpidamente, propiedadclave una paradesempear papelen su proteicos. la transferencia electrones de entrecomplejos que Citocromos contienen cobre. Ademsde sustomosde hierro, los citocromosay a3tambin contienenun tomo de cobreunido al grupo hemo del citocromo,dondeseen-

cuentraasociado con un tomo de hierro para formar un centro bimetilico hierro-cobre (Fe-Cu).De la mismamanera que los tomos de hierro, el cobre tambin puede convertirse reversiblemente la forma oxidada(Cu2*) a de (Cu+)aceptando donandoelectrones. cenla reducida o El tro hierro-cobredesempea papelcrucialmanteniendo un una molculade O, unida al complejocitocromo oxidasa hastaque hayatomado los cuatro electrones los cuatro y protones requeridos,momento en el que el O, se libera como dosmolculas agua.(Un dato nutricional: si algude na vez se ha preguntadopara qu necesita elementos los cobrey hierro en la dieta,el transportede electrones un es buen ejemplo.) Coenzima La coenzimaQ (CoQ), el nico componente Q. no proteico de la ETS,es una quinona cuya estructurase muestra la Figura10.13. en Debidoa su carcter ubicuoen Ianaturaleza, conocea la coenzimaQ como ubiquinona. se La Figura 10.13ilustra tambinla reduccinreversible, en

tl H3c-o\c,,.."roH.

gH. l" i i (cN2- : c - cHr),oH cH , .,-^rc-c',c tl


O CoQ (ubiquinona)

r.**-.lf
\l
+ Grupos vinilo

H^C
OJ -n-n-nu -nl

cH,

I I
/ 7

tl
o i
, , e v

llr'"** |l
l" I - (cH2cH= c - cHr),oH 2c
I

Hac-o\C,,c=..arcH. ,-, _.,rc-c "" l


v

cH"

CH:CH,

OH

(semiquinona) CoQH

r.**-.ll
cH^ cH^ o
l'

\l

9H, I
I oHEIVO Figwa LQ.L2 La estructuta del gtupo hemo. El grupo hemo, tambin llamado ferroprotoporfirina IX, es el grupo prosttico en los citocromos b, c,y c Una molcula parecida,llamada hemo A, estpresenteen los citocromos ay a3.El hemo de los citocromos c, y c, esfunido covalentementea la protena mediante enlaces tioster entre los grupos sulfhidrilo de dos cistenasde la protena y grupos vinilo (-CH:CHr) del hemo (destacados amarillo). en En los otros citocromos, el grupo prosttico hemo estunido de forma no covalentea la protena.

ll

llr '-*n tf

CH. llll" (CH2-cH :c - CH2) loH , .. -^rC-c 2c "l OH CoQHr(dihidroquinona)


Figura10.13 Las formas oxidadasy reducidasde la coenzimaQ. La coenzima Q (tambin llamada ubiquinona) aceptatanto electrones como protones segnva siendo reversiblementereducido en dos pasossucesivos un electrn cada uno, formndose primero de CoQH (la forma semiquinona) y posteriormente CoQH, (la forma dihidroquinona).

OH I - O..".C*,rCHs H.C

Transporte lectrones: deelectrones de flujo desde coenzimasoxgeno las al

293

la dospasosde un electrn,desde forma quinona (CoQ) a (CoQHr), pasando la forma dihidroquinona antespor la (CoQH). A diferenciade la mayorade forma semiquinona las protenasde la ETS,la coenzimaQ no forma parte de un complejorespiratorio,sino que seencuentraen el interior apolarde la membranamitocondrial interna (o de la membranaplasmtica, el casode procariotas). moen Las lculasde CoQ son los transportadores electrones de ms abundantes la membranay ocupanun lugar centralen en la ETS,sirviendo como un punto de recoleccin elecde tronesdesde gruposprostticos los reducidosde las deshidrogenasas unidasal FMN o al FAD en la membrana. Desecuentade que la coenzima no slo acepta los Q electrones cuandosereduce, sino tambinlos protonesy que libera,tanto los electrones, como los protonescuando seoxida.Estapropiedadescrucialen la funcin de la coenzima en el transporteactivo,o bombeo,de protoQ nesa travsde la membrana mitocondrialinterna.Cuando la CoQ sereducea CoQH2,acepta siemprelos protones desde un lado de la membrana, posteriormente difunde a travsde ella haciala superficieexterna,donde se oxida a CoQ, propulsandolos protoneshaciael otro lado de la membrana.Esto proporcionauna bomba de protonesacoplada transporte electrones, esuno al que de por los que se piensaque las mitode los mecanismos y y condrias,los cloroplastos los procariotasestablecen mantienenun gradiente electroqumico protonesque de la se usa para almacenar energa transportede elecdel trones. Lostranspoltadoles electlones de funcionan una en que secuenca venedeteminadaporsus potenciales de reduccin Ahora que conocemos tipos de transportadores los que conforman la ETS,nuestrasiguientepreguntahace referenciaa la secuencia que estos en transportadores operan. qu significael poParaello, es precisoque entendamos tencial de reduccin estndar, Es', que esuna medida,en por voltios(V), de la afinidadquetieneun compuesto los Describe facilidadde un compuesto la para gaelectrones. y nar electrones reducirse. potenciales reduccin Los de se por determinanexperimentalmente un par redox (reduccin-oxidacin), que consisteen dos molculasque son por interconvertibles la prdida o gananciade electrones. Por ejemplo,el NAD+ y el NADH constituyenun par rey dox,al igualque el Fe2+ el Fe3+, el ]O, y el HrO, como o semuestra lasEcuaciones a 10.8. en 10.6 (10.6) NAD- + H- + 2e- -""'-> NADH
..

presentes un electrones cuandovariosparesredoxestn en mismo sistema, como esel casodel sistemade transporte de electrones. Como seha descritoanteriormente, potencialde reel duccin es una medida de la afinidad por los electrones, quetienela forma oxidadade un par redox.Tenerun valor positivo de Eo' para un par redox significa que la forma oxidadatiene una gran afinidadpor los electrones, consy tituye, por tanto, un buen aceptor electrones. ejemde Por plo, el valor de Eo'paraeI par OrlHrO esaltamente positique significa que el O, es un buen aceptor de vo, 1o electrones. su parte,el par NAD+/NADH tiene un vaPor lor de Eo' muy negativo, que quieredecir que el NAD+ lo esun aceptorde electrones malo. Por otro lado, un valor negativode Eo' puedeservisto como una medidade la capacidadcomo donador de electrones, tiene la forma que reducidade un par redox.De estamanera,el valor de Eo' tan negativodel par NADH significaque el NADH constituyeun buen donadorde electrones. Conocimientoslospotencales leduccin de estndaLPara de estandarizar clculos lascomparaciones los potenlos y de ciales reduccin variospares de de redox,necesitamos valores determinados bajo condicionesespecficas. este Con propsito,usaremos potencialde reduccinestndar el (Eo'),que esel potencial reduccin para un par redox de (25 bajo condiciones estndar "C, I M de concentracin, 1 atmsfera presiny un pH de 7,0).Los potenciales de de reduccinde los paresredox ms relevantes muestran se en la Thbla10.2. Por convencin, usael par redox2H+/H, comorefese rencia,al que se le asigna valor de 0,00V (Tabla10.2, el lnea en negrita).Un par redox que tengaun potencialde reduccin estndarpositivo significa que, bajo condicionesestndar, forma oxidadadel par poseeuna afinidad la que mayorpor los electrones el H- y que aceptar eleclos tronesdel Hr. En cambio,un potencialde reduccinnegativo quieredecir que la forma oxidadadel par tiene menos que afinidadpor loselectrones el H+ y quepor lo tantodonarlos electrones H- paraformar Hr. al Lospares redoxde la Tabla10.2estn colocados oren (es den, con los valoresde Eo' ms negativos deci los y, mejoresdonadores electrones por tanto,los agentes de reductores ms fuertes)en la parte superior.Todoslos pares redoxque semuestranen la Figura10.2puedenllevar a cabouna reaccin redox con cualquierotro par.El sentidode dichareaccin bajo condiciones estndar pueporque,la forma reducida cualquier de predecirse, par de redoxreducirespontneamenteforma oxidadade cualla por quierpar queseencuentre debajo l en Ia tabla.De de estamanera,el NADH puedereducir al piruvato alactato, pero no puedemediarla reduccindel a-cetoglutarato a isocitrato. La tendenciade una forma reducidade un par a reducir la forma oxidadade otro par puedecuantificarse deter-

te-

t+

+e

- )+ ---------)Fe-

(r0.7)
(lo.s)

ior+

2l':'++ 2e- -------->Hro

Losvaloresrelativosde Eo' nos permiten compararpares redox y predeciren qu direccin tenderna fluir los
294

quimitrofo laenerga: Captulo Metabolismo 10 de respiracin aerobia

para redox Tabla 10.2 Potenciales reduccin lospares de de importancia biolgica*


Palesredox * (forma reducida) oxidada forma
Acetato --+ piruvato Succinato --+ d-cetoglutarato Acetato + acetaldehdo 3-fosfoglicerato --+ gliceraldehdo 3-P a-cetoglutarato + NAD- +NADH FMN+FMNH2 + 1,3-difosfoglicee Acetaldehdo + Piruvato + etanol gliceraldehdo 3-P isocitrato

N,e de electrones

lla con un valor negativo AGo'y positivode AEo'.Para de reaccin oxidacin-reduccin, est cualquier de AGo' relala cionadocon AEn'mediante ecuacin:

Eo'(V)
-0,70 -0,67 -0,60 -0,55 -0,38 -0,32 -0,30 -0,29 -0,20 - 0,19 - 0,18

AG' : -nF a,Eo'

(r0.rr)

z
2 2 2 2

y donde n es el nmero de electrones transferido F es la constante Faraday(23.062callmol). Por ejemplo,la de reaccin NADH con el ogeno (Reaccin del 10.4)implide por cala transferencia doselectrones, lo quela AGo'de puedecalcularse la siguiente reaccin esta de manera AGo': -2F LEo': *2(23.062)(+1.136) : 52,400 (10.12) callmol:52,4 kcal/mol El valorde esta reaccin negativo, lo quela transes por ferencia electrones de desde NADH al O, estermodinel micamente espontnea bajo condiciones estndar. de Es, potenciales reduccin hecho,Ia diferencia de de entrelos pares redoxNAD+/NADHy OrlHrO,la quedirigela ETSy mantiene gradiente el electroqumico protones. de

z
2

z
2 2 2 2 2 2 I 2

Iactato

FAD+FADH2 Oxalacetato --+ malato Fumarato + succinato

-0,r7 -0,03
0,00+* +0,04 +0,07 +0,25 +0,29 +0,55 +0,77 +0,816

Reuniendo sistema transporte electrones, este el de de En momento disponemos la informacinnecesaria de para 1 Citocromo c (Fe3++ Fe2t) juntar laspiezas la ETS.Como ya sabemos, de consiste en 1 Lltocromo a (t'e" + te- ) variasdeshidrogenasas unidasal FMN y al FAD,protenas .- + - )+. t Lltocromo4J(te- +te) ferrosulfurosas un totalde 12o mscentros con Fe/S, cinco -. 1+ -- )+ ,. + Fe' (ion inorgnico) Fe'1 citocromos, de elloscon un centroFe/S, un conjunto dos y tlzOr+ 11rg 1 de molculas CoQ queseencuentran una forma oxide en (CoQH) o en la forma dada(CoQ),parcialmente reducida * El valor de AEo' corresponde la siguientehemirreaccin, a donde n esel (CoQHr).En la Figura10.14 muestran prinreducida se los nmero de electrones transferidos: cipales componentes la ETSordenados funcindesus de en + forma reducida Forma oxidada* nH- I ne (los ** Por definicin,estepar redox esel punto de referencia potenciales reduccin de estndar valores AEo'estn de que seusapara que [H]] : 1,0My determinar valores losotrospares los de redox; requiere se calculados segn Thbla10.2), Ia desde NADH libre (Eo': el po tanto,el pH es0,0.A un pH de 7,0,el valordelpar 2H*lH2es -0,42. -0,32V) y el del FADH2 de la succinatodeshidrogenasa (Eo': -0,18V) al ogeno (Eo': +0,816V). En trminos de energa, punto clavede la Figuel ra 10.14 que la posicinde cadatransportador es estdeminando AEo',la diferencia entre los valores de Eo' entre terminado por su potencial de reduccin estndar.En dos pares: palabras, sistema transporte electrones el de de con(lo.e) otras AEo' : Eo'u..pto.- Eo'donudo, siste una serie transportadores difierenqumicaen de que menteentres y cuyo orden de partipacinen Ia transfePor ejemplo, AEo' para la transferencia de electrones (Reaccin10.4) se calcula de la manera renciade electrones determinada suspotenciales por est desdeNADH al O, de reduccinrelativos. su vez,estoquieredecir que la A siguiente,con el NADH como donador y el O, como aceptransferencia electrones de tor: desde NADH o el FADH, en el la partesuperioral O, en la parteinferior esespontnea y - E''do*dor: * 0,816- (-0,32): t1.136V AEo' : Eo'u*ro, exergnica, algunas las transferencias con de entretrans(1o.ro) portadoressucesivos por grandesdiferencaracfeizadas ciasen susvaloresde Eo' y en consecuencia grandes por en libre. cambios la energa La refacin entte AGo'y AF', Como yahabr podido imaCitocromo & (Fe3+--+ Fe2*)

2H+ +Hz CoQ- --+ 66q1,

ginar, AE6' es una medida de Ia esponteanidadde la reaccin redox entre dos pares redox cualquiera en condiciones estndar.La espontaneidadde una reaccin redox en condicionesestndarpuede expresarse como AGo' o AEo'. Por convencin el signo de AEo' es el contrario del de AGo', de tal manera que una reaccin exergnicaes aqu-

La mayora los transportadores de estnorSanizados en cuatrograndes compleos respitatorios Aunque existenmuchostransportadores electrones de implicadosen la ETS,la mayorpartede ellosno seencuentran

de flujo Transportelectrones: deelectrones lascoenzimas desde al oxgeno 295

@*"
-0,2
Gomplejo l: NADH-coenzima Q oxidorreductasa Complejo ll: Succinato-coenzima Q oxidorreductasa
o
X 6 C q)

o
C

o.)

c.) o)
X

o
(J

IJJ

Complejolll: Coenzima c Q-citocromo oxidorreductasa

u,tr '@

b c) oq) c O

c) o q
C) c

o
O

b tu v,a <
\o

(
O Y

(\
lV: Compleo Citocromo c oxidasa

0,0
y Figuta10.14 Pilncipales componentes los complejos de lespitatorios sus energticas, Los intermediarios ms importantesen el transportede electrones desdeel NADH (*0,32 V) secolocanverticalmente funcin de susniveles en energticos, semiden por sus que (Eo', ejeizquierdo).Semuestranlos cuatro complejosrespiratorios potenciales reduccinestndar de como grandesva1os marrones,que contienenlos principalestransportadores electrones de encuadrados otro valo interior. La coenzimaQ y el citocromo cson en intermediariosmvilesy pequeos que transfierenlos electrones entre varios complejos. lneasrosasmarcanel flujo exergnico Las de electrones lo largo del sistema. los ejesde la derecha encuentranlos valoresde AE,' y AG,,' del oxgeno(esdecir,los cambiosen los a En se potenciales reduccinestndar de yla energa libre estndar la transferencia electrones O,). de de al

en la membrana como entidadesindividuales.Al contrario, el comportamiento de estostransportadoresen experimentos de aislamiento mitocondrial indican que estn organizados en complejos mubiproteicos. Por ejemplo, cuando se extraen membranas mitocondriales mediante procedimientos delicados, slo la coenzimaQ y el citocromo c seliberan fcilmente.Los dems transportadorespermanecen unidos a Ia membrana interna y no se liberan, a no ser que setrate a la membrana con detergentes con solucionessao linas concentradas. Dichos tratamientos extraenel resto de los transportadoresde electrones como molculasindino viduales sino como cuatro grandescomplejos. Basndose stosy otros resultadossimilares,sepienen sa que los transportadoresde electronesen la ETS estnor296

ganizadosen la membrana mitocondrial interna en cuatro tipos diferentesde complejos respiratorios. Estoscomplejos se muestranen la Figura 10.14en forma de valosmarrones y con nmeros romanos, que indican no slo el orden de los diferentes transportadores de electrones en funcin de susvaloresde En' sino tambin su orsanizacin en Ia membrana. Propiedades los complejos de respiratorios. Cada complejo respiratorio est formado por la unin de polipptidos y grupos prostticos,y cadauno desempeauna nica funcin en el proceso del transporte de electrones.La Tabla 10.3 recoge algunas de las propiedades de estos complejos.

quimitrofo laenerga: Captulo Metabolismo 10 de respiracin aerobia

Tabla 10.3 Ptopiedades loscomplejos de respiratorios mitocondriales


Complejo respiratorio

Flujode electrones Nmero de polipptidos*


A2

Nmero

Nombre
NADH-coencima Q oxirreductasa (NADH deshidrogenasa) Succinato-coenzima Q oxidorreductasa (succinato deshidrogenasa) Coenzima Q-citocromo c oxidorreductasa (complejo citocromo b-c,) Citocromo coxidasa

Grupos prostticos
I FMN 6-9 centros Fe-S l FAD 3 Fe-S centros 2 citocromo&
f .i+^"nmn.

Aceptado de NADH

Pasadoa
Coenzima Q

Protonestranslocados (por par de electrones)

\7) 4 (0) 11 (t) I3 (3)

Succinato a Coenzima Q travs de enzima unida a FAD) Coenzima Q Citocomo c

1 centro Fe-S 1 citocomo a


l -;+^--^-^ r trLU\rurrru al

Citocromo c

Oigeno (Or)

2 centros Cu (comocentros Fe-Cu con el citocromoa3)


*En cada complejo se indica entre parntesis el nmero de polipptidos codificado por el genoma mitocondrial. **El valor del complejo III incluye 2 protones translocados por la coenzima Q.

El complejo I transfiere los electronesdesdeel NADH a la coenzima Q y se denomina compleio NADH-coenzima Q oxidorreductasa (o coffiplejo NADH deshidrogenasa).EI complejo II transfiere a la CoQ los electronesderivados del succinato de la reaccin TCA-6. Estecomplejo se conoceformalmente como complejo succinato-coenzima Q oxidorreductasa, aunque frecuentementese utiliza el nombre abreviado,succinatodeshidrogena.sc. compleEl jo III se denomina complejo coenzima Q-citocromo oxidorreductasa porque aceptalos electronesde la coenzima se Q y los pasaal citocromo c.A veces, hacereferenciaa este complejo como citocromo b/c, porque son estosdos citocromos sus principales componentes. El complejo IV transfiere los electronesdesdeel citocromo c al oxgeno y se llama citocromo c oxidasa. La Figura 10.15muestra los tres complejosnecesarios para la oxidacin del NADH (complejos I, III y IV) en su apropiado contexto eurocariota, la membrana mitocondrial interna (no se incluye el complejo II en la figura porque steno participa en la oxidacin del NADH). Tambin se muestra en Ia figura el bombeo hacia el exterior de protones a travsde la membrana, que acompaaal transporte de electrones.Cada uno de estos complejos representa un punto de bombeo de protones. El paso de electronesa travsdel complejo II no estasociadoa una translocacin de protones a travsde la membrana. La funcinde la citoclomoc oxidasa. Entre todos los complejos respiratorios que participan en la respiracin aerobia en el hombre, slo la citocromo c oxidasa,al final del sistemade transporte de electrones,es una oxidasa termilnal,capazde transferir directamente los electronesal o-

geno. Este complejo representa,por tanto, el nexo crucial entre la respiracin aerobiay el oxgeno que hacetodo esto posible. Los iones de cianida y azidason extremadamente txicos para casi todas las clulasaerobiasporque se unen fuertemente al centro de hierro-cobre de la citocromo c oxidasa,y bloquean, por lo tanto, el transporte de electrones.

Loscomplejos tespiratotos mueven se liblemente dentro dela membrana ntefna


A diferencia de ciertas protenas integralesde la membrana plasmtica, los complejos proteicos de la membrana mitocondrial interna son mviles y pueden difundir libremente a lo largo del plano de la membrana. Esta difusin puede demostrarseexperimentalmente.En un experimento, por ejemplo, se colocaron las membranas mitocondriales internas en un campo elctrico y se analiz la distribucin posteriormente mediante criofractura. Se observ que Ias partculas que correspondana los complejos proteicos se acumulaban en un extremo de la membrana. Cuando seinterrumpa el campo elctrico,las partculasse distribuan aleatoriamente en cuestin de segundos,demostrando claramentela capacidadde difundir libremente en una bicapa lipdica. Los resultadosde stey de otros experimentosdemuestran que los complejos respiratorios no se estn alineados en una membrana de la manera ordenada que muestran los libros de texto, sino que son complejos mviles en la membrana. De hecho, la membrana mitocondrial interna poseeuna elevadaproporcin de fosfolpidos insaturados con respectoa los saturadosy no tiene casi colesterol,por

Transportelectrones: deelectrones lascoenzjmas de flujo desde al oxgeno 297

10H*
4Ht 2H+ 2H+

ESPACIO INTERMEMBRANA 3H+

4+'

12e-

2e-

2H+

[ochir'lrnnonaccc

'fYft / |

NAD++ H+ \
l

lor+zn

3H+ MATRIZ

Figura10.15 El flujo de electronesa travs de los complejosI, lll y lV con el concomitantebombeodileccionalde plotones, Los electrones derivados de los sustratosoxidablesen la matriz mitocondrial setransportan a la superficie de la membrana interna graciasal NADH, mediante un flujo exergnicodesdeel NADH al ogeno, a travsde los complejos respiratorios I, III y IV. Las transferenciasde electrones entreloscomplejoslyllyentreloslllylV,estnmediadasporlacoenzimaQ(CoQ) yelcitocromoc(citc),respectivamente.Encada complejo se muestran los principales transportadoresde electrones;la mayora de ellos son protenas Fe-So citocromos. Tambin se indica el nmero de protones bombeadosdesdela matriz al espaciointermembrana por cadapar de electronestransferidos por cadacomplejo. Estosnmeros representanlos valoresadmitidos por la mayorla de los investigadores cada caso.El nmero de protones requerido para la en sntesisde una molcula de ATP por la AIP sintasaFoF,seencuentra entre 3 y 4; en estecaptulo, seasumir un valor de 3 a la hora de r ealizarclculosenergticos.

lo que presentauna elevada fluidez y consecuentemente, poseen granmovilidad. los complejos respiratorios una Frecuentemente suelehacerse referenciaal sistemade transporte electrones de como una <cadena>. esuna, Esta acertada Ia entendemos el sentidode que si en descripcin el flujo neto de electrones ocurre desde NADH a la citoel cromo oxidasay que cadatransportador de la secuencia puede interaccionarnicamentecon el componentedel y que recibelos electrones con el componenteal que selos dona.Sinembargo, trmino<cadena, esapropiado el no si sugierealgntipo de localizacinfija o secuencia ordenada de los transportadores dentrode la membrana. conAl trario, cadacomplejodifunde aleatoriamente, igual que al las molculasde coenzimaQ y el citocromo c que transportanlos electrones entreellos. Como seindicaen la Figura10.14, NADH, la coenziel ma Q y el citocromo c son intermediariosclaveen el procesode transferencia electrones. NADH une la ETS de El (oxidacin)del cilasreacciones deshidrogenacin con de y con casicualquierotra reaccin oxidacin clo del TCA de que tengalugar en lamatriz mitocondrial (o en el citoplasma, en el casode lasclulas procariotas), dondela coenzima Q y el citocromo ctransfierenelectrones entrecomplejos respiratorios. coenzimaQ aceptalos electrones La
298

tanto del complejoI como del II, y representa hecho, de el <embudo> recoge electrones casicualquier que los de reaccin de oxidacinde Ia clula.La coenzimaQ y el citocropequeas que pueden mo c son molculasrelativamente difundir rpidamente,ya sea dentro de la membrana (coenzima comopor la superficie sta(citocromo de c). Q) -se ha estimadoque exismuy numerosas Son,adems, de de ten alrededor 10molculas citocromocy 50 molculas de ubiquinonapor cadacomplejoI-. Debido a su y abundancia movilidad, estostransportadores colisionan con los complejosprincipalescon la suficientefrecuencia paraexplicarlastasas transferencia electrones de de observadasen la mitocondria con respiracinactiva.

El gradiente electroqumico de protones: la clave para el acoplamiento de energa


quelascoenzimas reduHastaahora,hemosaprendido se cen durante Ios procesos oxidativosque tienen lugar durante la glucolisisy el ciclo del TCA, la primera y segunda etapasde la respiracinaerobia(etapas1 y 2 de la Figu-

quimitrofo laenergla: Capitulo Metabolismo 10 de respiracin aerobia

que reTmbin hemosaprendido lascoenzimas ra 10.1b). mediantela transfererencia exerducidasson reoxidadas gnicade electrones oigeno, a travsde un sistemade al y reversiblemente que intermediariosque puedenoxidarse estn localizadosen la membrana mitocondrial interna (etapa3a).Ahora consideraremos cmo seusala energa para gelibre liberadadurante el transportede electrones de nerar un gradienteelectroqumico protonesy cmo se parapromoverla sntesis de :ut:/;izala energa gradiente del la la estamos punto de estudiar a AIP. Segn Figura10.1b, etapa3b (bombeo de protones) y la etapa4 (sntesisde aerobia. ATP) de la respiracin de Dado que esuna forma de sntesis AIP que implica al de procesos fosforilacin de asociados transporte elecel del tronesdependiente oxgeno, procesose denomina fosforilacin oxidativa, para diferenciarlade la fosforilaque el cin desde de sustrato, tienelugar comoparteintegral de una reaccinespecfica una ruta metablica(alen gunos ejemplos de estasfosforilacionesen el nivel de Gly-7 y GIy-10de la ruta de la sustratoson las reacciones TCA-5 del ciclo del TCA; vanse glucolisisy las reacciones Figuras y 10.8). 9.6

de concentracin ADP esbaja (cuandola concentracin de AIP esalta). La fosforilacinoxidativaest,por tanto, recelulares ATR de la misma de guladapor las necesidades las queel flujo de electrones desde molculas orgmanera al oigeno estajustadoa los requerinicascombustibles mientosenergticos la clula.Estemecanismo regude de lacin se hace patente durante el ejercicio, cuando la un acumulacindeADP en el tejido muscularcausa increseguidopor mento en la tasade transportede electrones, de un dramticoaumentoen lasexigencias oxgeno. perdidor quimiosmtico: ueslabn el El modelo de es un gradente pfotones

de Dequ manerapuedeestarIa sntesis AIB una reacacoplada transportede electroal cin de deshidratacin, nes,que implica la oxidaciny reduccinsecuencial vade rios complejosproteicos en una bicapa lipdica? Los perola han dadomuchas vueltasa estacuestin, cientficos sus esfuerzos respuesta resistido mejores ha durantedcaconvencidos que en la fosforilade das.La mayoraestaban cin oxidativatendran que estarimplicadossin duda inde de termediarios alta energa, la misma maneraque Io como las que tieestnen Ia fosforilacindesdesustratos y El transporte electrones la sintesisde ATP de productorasde ATP de la ruta nen lugar durantelasetapas asocados son fenmenos Reaccin de la glucolisiso del ciclo del TCA (vanse Gly-6 TCA-4de la Figura10.8). de la Figura9.7 yla reaccin punto de vista mecanstico, fosforilacinoxila Desdeun Peromientrasque otros continuabansu febril bsquedativaesun procesode mayor complejidadque la fosforiel da de intermediariosde altaenerga, bioqumicobritnihecho,ha sido un asuntode De lacin desdesustratos. ideade queesos co PeterMitchell plantela revolucionaria aosde hisy durantesus60 gran controversia confusin pudiesen existir. 1961, En no Mitchellprointermediarios un toria, llevandoa Efraim Racker, cientficode renombre que llam el modelo de puso una explicacinalternativa, que en el campo,a comentaren un determinadomomento acoplamientoquimiosmtico. Segn estemodelo,la tras<Aquelque no estconfundido respecto la fosforilacin a por medio de los comde electrones la no es oxidativa quesimplemente, comprende situacinu. ferenciaexergnica por el bombeo plejos respiratorios estabaacompaada que sabemos el nexocrucialenActualmente, embargo, sin protones travs membrana la que a la en unidireccional de y tre el transportede electrones la produccin de ATP es de el un gradienteelectroqulmicode protones que seestablece selocalizaba sistema transporte.EI gradienteelectroy qumicode protonesque segenera semantienede esta de por el bombeodireccional protones travs la memde a de ocurriendo transporte electrones. forma proporciona la fuerzaimpulsora de la sntesisde el branaenla queest perdido>entreel transel ATP.En otraspalabras, <eslabn son El trmino acoplamiento significa que dos procesos y de uno dependientes del otro. Decir que el transportede elec- porte de electrones la sntesis AIP no era un intermesino un gradienteelectroqumico diario de alta energa de no de tronesy la sntesis AIP estnacoplados slo quiere protones. Este mecanismo ilustraenla Figura10.15, se que del de crticamente flujo decir que la sntesis AIP depende muestra, tanto el bombeo hacia fuera de protones que el es sino de electrones, queadems flujo de electrones nientrelos complejos al de acompaa transporte electrones posiblecuandopuedesintetizarse AIP. el camente de I, III y IV comola sntesis AIR promovidapor los proal tonesgracias complejoFoFr. del de Contlolrespiratodo tmnsporte electrones.Ya que eI la Como podr suponer, teorade Mitchell se encontr de est transportede electrones acopladoa la sntesis AIR inicial y un escepticismo considerables. la disponibilidadde ADP regulala tasade la fosforilacin con una resistencia No slosetratabade una posturaradicalquenadatenaque Estoes oxidativa por lo tanto,el transportede electrones. acerca acoplamiendel ver con el conocimientoconvencional lo que sellama control respiratorio, y su importancia fiMitchell la propusosin ningn dato exel siolgicaesfcilmenteapreciable: transportede electro- to, sino que adems perimental. embargo, el pasode los aos, han ido Sin con se cuandola nesy la produccinde AIP estarnfavorecidos (es y acumulandouna gran cantidadde pruebasque la apoyan, concentracin ADP eselevada decir,cuandola conde con en1978 Mitchellfuegalardonado elpremioNobelporsu centracinde AIP es baja) y estn inhibidos cuando la
para la deenergia electroqumico deprotones:clave el acoplamiento Elgradiente 299

trabajopionero.Hoy en da,el modelode acoplamiento quimiosttico esun conceptobien verificado que proporciona un contexto unificadordel conocimiento lastransformade ciones energticas sloen lasmembranas no mitocondriales, sinotambinen los cloroplastos enlasbacterias. y El aspecto principal del modelo quimiosmticoesque el nexoentreel transporte electrones la produccinde de y ,4TPes un potencialelectroqumico ambosladosde una a membrana. esteaspecto, hecho,el que da al modelo Es de su nombre:la parte de <quimio>hacereferencia los proa qumicos oxidacinyalatransferencia electrocesos de de nesy la parte<osmticoproviene la palabra de griegaosmos, qluesignifica <empujar>-empujar los protones a travsde una membrana, estecaso-. El modelo cuien miosmticoha resultado excepcionalmente no slo ser til porque explicade forma muy plausiblela produccin de ATP acoplada, sino tambin por la influencia dominante quetieneen la manera queentendemos conservacin en la de energa los sistemas en biolgicos. La oxidacin las coenzimas de bombea protones los paragenerar ATPpor cadaNADH 2 ATP suficientes y 3 por cadaFADH2 Antes de considerar pruebasexperimentales han las que confirmadoel modeloquimiosmtico, que la Fiobserve gura 10.15 nos proporciona una estimacin los protode nesbombeados haciafuerapor los trescomplejos respiratorios que participan en la oxidacin del NADH, al igual quedel nmerode protones serequiercparaimpulsar que la sntesis ATP por el complejoFoF,. palabra<estide La macin>aquesimportanteporquelos investigadores todava seponende acuerdo estos no en nmeros. Como ya hemosvisto,la mayora lasdeshidrogenasas de de la matriz mitocondrial transfieren electrones los desde sustratosoxidablesal NAD+, producindose NADH. El NADH, a su vez, transfierelos electrones componente al FMN del complejo y por tanto,seiniciael sistema transI, de porte de electrones. Como muestra Figura10.15, transla la ferencia doselectrones NADH al oigeno, a travs la de del de cadena respiratoria vieneacompaada el bombeotranspor membrana 4 protones el complejoI, 4 protones la de por por CoQ ms el complejoIII, y 2 protonespor el complejoIV, quesumanun total de 10protones cadaNADH. por Se piensaque el nmero de protonesrequeridospara promoverla sntesis una molcula ATPpor la ATPsinde de tasaFoF, esde3 4, tenindose nmerode3 comoel ms al , probable.Si asumimosque se bombean 10 protonespor cadamolculade NADH oxidaday que senecesitan pro3 tonespor cadamolculade AIR podremosentonces concluir que la fosforilacinoxidativatieneun rendimientode 3 molculas ATP por cadamolculade NADH oxidada. de Estoencaja bien con lasevidencias existentes desde1940de quegeneralmente existe relacinfija entreel nmerode una molculas ATPgeneradas el nmero de tomosde ode y 300

genoconsumidos la respiracin, en segn pasan par de se un electrones lo largode la secuencia transportadores a de desde lascoenzimas reducidas oxgeno. al Racker suscolaboy radores, por ejemplo,mostraronen vesculas sintticas de fosfolpidos contenan complejos III o el complejo que los I, IV que sepodagenerar una molculade ATP por cadapar de electrones pasan travsdel complejo. que a Estos resultados estnde acuerdocon nuestroconocimientoactualde que cadauno de estos tres complejos funcionancomo una bomba de protones, contribuyendode estamaneraal gradientede protonesquepromueve sntesis AIP. la de Parafacilitar nuestroanlisis, asumiremos el rendique miento deATP es3 para el NADH y 2 parael FADHT, aunque teniendopresente dichosrendimientos secoque no nocen de una manera precisa. Estos nmeros son razonables, teniendo cuenta en queel valorde AGo'parala oxidacindel NADH por el oxgenomolecularesde -52 kcal/mol.Estosuponeun cambiode energa libre suficiente paraproducir 3 AIP (cadauno de ellosrequiereaproximadamente kcal/mol),aun en el casode quela eficacia 10 seaslodel 50ol0. quimiosmtico sido comprobado un El modelo por ha conjuntoimpresionante evidencias de Desde que seenuncipor primeravezen 1961, modelo el quimiosmtico sido universalmente ha aceptado como el nexo entre el transportede electrones la sntesis AIP. y de Paraentender por qu, consideraremos primero algunas de las llneasde pruebas experimentales importantes ms que apoyanestemodelo.Durante el proceso, aprenderemostambinalgomssobre mecanismo acoplamienel de to quimiosmtico. 1,, El transporte electrones provoca bombeo de el de protones fuerade la matlizmitocondrial Pocodespus proponerel modeloquimiosmtico, de Mitchelly su colaboradora ]ennifer Moyle demostraronexperimentalmenteque el flujo de electrones lo largo del ETS a vieneacompaado movimiento de protonesa travsde del la membrana mitocondrialinterna.En primer lugar,colocaronmitocondrias un medio en el que no podatener en lugar la transferencia electrones de porqueno habaoxgeno. La concentracin protones(es decir,el pH) del de medioseiba midiendoconformeseestimulaba transfela renciade electrones aadiendo ogeno. Bajoestas condiciones, pH del medio descenda el rpidamente fuesela ya fuente de electronesel NADH o el succinato (Figura 10.16). que un descenso el pH reflejaun incremento Ya en en la concentracin protones,Mitchell y Moyle conclude yeron que la transferencia electrones la membrana de en mitocondrial interna est acompaadade un bombeo unidireccional de protones desdela matriz mitocondrial al medio externo.

quimitrofo laenerga: Captulo Metabolismo 10 de respiracin aerobia

Succinato

ilempo

----------->

Figura10.16 Prueba de experimental que el transporte de electlonesgeneraun gtadientede ptotones, Seincubaron mitocondrias aisladascon NADH o succinato como fuente de electronesen un medio sin oxgeno.El pH del medio seiba midiendo conforme se estimulabael transporte de oxgeno rpido del aadiendo una cantidad conocida de ste.El descenso de pH reflejaun incrementode la concentracin protones,lo que indica que sebombeaban hacia fuera de la matriz mitocondrial cuando haba oxgeno disponible. El cambio de pH fue reproduciblementemayor con el NADH que con el succinato,Io que concuerdacon el mayor rendimiento que se obtiene con la oxidacin del NADH.

asimtricamente denconformanla ETSestndispuestos Si as, tro de la membrana. no fuese los protonespodran, en en teora,bombearaleatoriamente lasdosdirecciones. utilizandovariosanticuerclaramente, Seha demostrado para interpos,enzimas agentes y marcadores diseados de accionarcon varios componentes la membrana,que respiratorios de esalgunosconstituyentes los complejos haciala matriz mitocondrial,otros estn tn orientados en expuestos el lado contrario, y otros son protenas Dichos descubrimientos confirman la transmembrana. del suposicin que los componentes ETSestndistride a buidosasimtricamente lo largo de la membranamitointerna,en la maneraque semuestraen la Figucondrial ra 10.15. que los I, 3, Lasvesculas contienen complejos Ill o lV, gradentes protones de establecen proviene Otra pruebaen favordel modeloquimiosmtico que en de de los experimentos consisten la reconstruccin de vesculas partir de la combinacin los componentes a por separado. Dado que cadacomplejorespiratorio I,III y para la sntesis IV presenta sitio de acoplamiento un de Figura10.15), modeloquimiosmtico el supoNIP (yase complejos debera capaz ser de ne que cadauno de estos mitocondrial bombearprotonesa travsde la membrana ha experimentalsuposicin sidoconfirmada interna.Esta vesculas fosfolpidos de artificiales mentereconstruyendo I, que contienen complejos III o IV. Cuandoselesprolos porcionaun estrato oxidable apropiado, cadauno de estos protones travs la es de a de trescomplejos capaz bombear Como sehabaapuntadoantemembranade la vescula. de vesculas tambincapaces sintetison riormente,estas zar NIP. oxidativa requele compartmiento un 4. La fosforilacin por rodeado unamembrana es obviadel modeloquimiosmtico quela Una prediccin oxidativaslo tiene lugar dentro de un comfosforilacin mitocondrialinpartimientocerradopor una membrana no podramantenerse gradiente el tacta.De otra manera, permitela sntesis ATP. que de Estasuposicin deprotones mediante la deha sido confirmada experimentalmente de llevada mostracin que la transferencia electrones de a no aislados puedeacoplarse la sntea cabopor complejos complejos estn incorporados sisdeAIP a no serqueestos que cerrada. en membranas formenuna vescula impiden desacoplantes tanto 5. Lassustancias de la sintesisde ATPcomola generacn un gtadiente de protones Una pruebaadicionalque enfatizael papel desempeado por el gradientede protonesen la sntesisde ATR

El mecanismo por el cual se acopla Ia transferencia de

electronesde un transportador a otro en el transporte direccional de protones, no se conoce muy bien todava. De hecho, esposible que existams de un mecanismo.Uno de los posibleses el comentado anteriormente de la coenzima Q, que translocados protones a travsde la membrana mitocondrial alavez que transporta dos electronedel complejo I al complejo III (Figura 10.15). Los datos experimentalesactualessugieren que, en el casodel bombeo de protones por parte de los complejos I y IV, existeun segundomecanismo de bombeo que puede consistir en cambios alostricosde la conformacin de las protenas. En un estado conformacional, un polipptido del complejo podra unir un protn en la superficie interna de la membrana. La transferenciade uno o ms electrones a travs del complejo, causaraun cambio conformacional del polipptido, que liberara el protn en la cara externa de la membrana. De esta manera, el bombeo de protones puede llevarsea cabo bien por el desplazamiento fsico de una molcula transportadora como en el casode la coenzima Q, o bien mediante un cambio conformacional en un polipptido de un complejo respiratorio.

2. Loscomponentes sstema transpotte del de dentro estn orientados asimtricamente deelectrones mitocondrial intetna de la membrana
El bombeo unidireccional que demostraron Mitchell y Moyle exige que los transportadores de electrones que

para la deenerga 301 deprotones:clave el acoplamiento Elgradiente electroqumico

provienede los estudios los que sehan usadosustanen que el potencial membranaesresponsable Observe de cias como el dinitrofenol (DNP), que se sabeque desde msdel7\o/odel pmf mitocondrial.En el siguientecapiacoplala sntesisde ATP del transporte de electrones. tulo veremos quela mayor parte del pmf del cloroplasto se Por ejemplo,Mitchell demostren 1963que las memdebe,en cambio,a la diferenciaexcesiva pH a amboslade branassevuelvenpermeables los protonesen presencia dosde la membrana. a de DNP.En otraspalabras, dinitrofenol inhibe tanto la el Al igual que el potencial redox, el pmf es una fuerza sntesis ATP como la capacidad una membranade de de elctrica voltiosy puedeutilizarse en paracalcular AGo',el mantenerun gradientede protones.Estedescubrimien- cambio de energalibre estndarpara el movimiento de to encaja perfectamente el conceptode que la snte- protonesa travsde la membrana,siguiendola siguiente con sis de ATP estpromovida por un gradienteelectroqu- ecuacin: mico de protones. : AGo'= -nF(pmf) : -(23.062)(0,22) -5,1kcal/mol 6. El gradiente protones de tiene la suficente energfa parampulsar sntesisde ATP la Paraqueel modeloquimiosmtico posible, gradiensea el te de protonesgenerado por el transportede electrones debealmacenar suficiente Ia energa parapermitir la sntesis de AIP. Podemosabordar estepunto con unos pocos clculostermodinmicos.El gradienteelectroqumicode protonesa ambosladosde la membranainterna de una mitocondria metablicamenteactiva, implica, tanto un potencial membrana componente (el <electro> grade del diente),como un gradiente concentracin compo(el de nente<qumico>). Como podrrecordar Captulo8, la del que seutiliza paracuantificarestegradienteelececuacin troqumicotiene dos trminos,uno para el potencialde membranaVm,y el otro parael gradientede concentraciones,que en el casode los protones, un gradiente pH es de (vaseTabla 8.4). Lasmitocondrias participanactivamente la resque en piracin aerobiaposeennormalmenteun potencialde membranade unos 0,16V (el valor espositivoen el lado queda al espacio intermembrana) un gradiente pH de y de (mayoren el lado de la matriz).Este cerca 1,0unidades de gradiente electroqumico ejerce una fuerzaprotn-motriz (pmF) que tiendea empujara los protonesde !'uelta,se-es decir,de vueltaa la gn su gradiente concentracin de juntando matriz mitocondrial-. La pmf puedecalcularse las contribucionesdel potencial de membranay el gradientede pH segnla siguiente ecuacin: pmf : V^+ 2.303 ApH/F RT (10.1s) De estamanera, una fuerzaprotn-motrizde 0,22Y a travs de la membrana mitocondrial interna correspondea un cambiode energa libre de alrededor -5,1 de kcal por mol de protones.staserla cantidadde energa que serliberadacuando los protonesregresen la a matriz. de Esesto suficientepara impulsar la sntesis AIP? No es sorprendente que la respuesta s, aunquedesea pendede cuntosprotonessenecesitan para impulsarla sntesis una molculade ATP por el complejoF"F,.El de modelo original de Mitchell asume dos protones por ATR lo queproporcionara aproxidamente kcal/mol, I0,2 una cantidadmuy justa para producir la sntesis ATR de si consideramos la AG' parala fosforilacin ADP que del es de cercade 10 kcal/mol, en las condiciones mitocondriales.Todavaexistendiferentesopinionesacercadel nmerode protonespor ATP,pero el nmerorealprobablementeseencuentre ms cercade tres o cuatro,lo que proporcionaraalrededorde l5-20 kcal de energapor ATR una cantidadsuficientepara asegurar que la reaccin estdirigida claramente el sentidode la formaen cin de estamolcula. pueden 7. Gradientes protones de aificiales impulsar la sntesisde ATPen ausenca transporte de de electrones

( 1 0 . 1 3 ) Una prueba directa de que un gradientede de protones puedede hechoimpulsar la sntesis AIP seobtuvo exde dondepmf esla fuerzaprotn-motriz en voltios, V- esel poniendoa lasmitocondrias a vesculas o compuestas por potencialde membranaen voltios,ApH esla diferenciade la membranainterna a gradientes pH artificiales. de CuanpH a ambosladosde membrana (ApH : pH*"t,i, - pH". do las mitocondriasse introducen en una solucin en la (1.987 R de callmol-oK), es T tosol), esla constante los gases que la concentracin externade protonesseve incremenla temperaturaen gradosKelvin,y F esla constante Fade tadarepentinamente la adicinde un cido,segenera por r aday(23,062callmol). AIP en respuesta gradiente protonescreadoartificialal de Parauna mitocondriacon un V- de 0,016Vy un gramente.Dado que estosgradientes pH artificialesindude dientede pH de 1,0,el pmf sepuedecalcular la manera cen la formacin de AIP incluso en ausencia sustratos de de siguiente: oxidablesque, en otra circunstancia, cederan electrolos + zzz)(t,o) \ nesa la ETS,esevidente quela sntesis AIP puedeindude n m f: 0 . 1 6+ (z.to z0 .g a z)Gt 23,062 cirsepor un gradientede protonesaunqueno existatrans\ ) = 0,16 0,06 0,22Y = + (10.14) porte de electrones. 302
quimitrofo laenerga: Gapitulo Metabolismo 10 de respiracln aerobia

Sntesisde ATP: juntando las piezas


preparados para estudiarla cuartay ltima Ya estamos de aerobia: sntesis AIP. Hemos la fasede la respiracin visto cmo parte de la energade un sustratooxidable dureducidas a se como la glucosa, transfiere coenzimas y de rantelasreacciones oxidacinde la glucolisis el ciclo I del cidotricarboxlico(fases y 2 de la Figura 10.lb) y para generarun gradienteeleccmo se utiliza despus troqumico de protonesa travsde la membranamitocondrial interna (fase3). Ahora podemospreguntarnos parala sntela cmo seaprovecha pmf de esegradiente sis de ATP.Para ello, volvamosa los complejosFr que internade lascrespueden verse 1olargode la superficie a son las cules Figura 10.6a)y preguntmonos tas (vase de esferas capaces sintetizar son de que estas evidencias AIP.

ATP Fl actividad sintasa Laspartculas tienen


La evidenciaclavesobreel papel de las partculasFr proviene de los estudiosque condujerona Efraim Rackery a a suscolaboradores probar la hiptesisquimiosmticade puedeacoplarel presente la membrana, queuna ATPasa en de de transportereversible protonesa la sntesis AIP. Emintacta(Figura10.17a) fueron pezando la mitocondria con de de capaces perturbar a sta, forma que seproducanpellamadaspartculassubmitocondriales a queasvesculas, partir de fragmentos de la membrana interna (Figupartculas fueron casubmitocondriales Estas ra 10.17b). y paces llevar a caboel transportede electrones la sntede sis de ATP. Sometiendo a estas partculas a agitacin se con proteasas pudierondesplao mecnica tratamiento (Figumembranosas F, zar lasestructuras de lasvesculas ra 10.17c). por centrifugacinlas partculas Cuandosesepararon la todavapoda F, y las vesculas, fraccinmembranosa

Membrana Membrana mitocondrial mitocondrial externa Esferas interna F,

'^+i*7 -ft-:o:
*Z'="t*Y:#:,","?,:;riJrll*i.1[1rir;
(a) Mitocondria ntacta. de Transporte electrones? de S S.Sntesis ATP? . , t ( -,
?

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t., ,io;
| | + f
r.(

oe i asrntesis Atf.s No ATPasa? zActividad

.! ).

" -.( ).Vb. A

(c) Partculas
disociadas.

'

'.!. .,,^', ft*---l\-'- ' r u>'


(d) Fraccinde membrana.
de Transporte electrones?? e l e c t r o n eS. S . s de Sntesis ATP?No.
| | q, ,oPv, (e ve

r r
Ya

Transportedeelectrones? No. de S.Sntesis ATP? ATPasa? s Actividad

y Figura10.17 Disociacin reconstitucindel sistema de sintesis de ATPmitocondrial. (a) Perturbacin de la mitocondria intacta y formacin de fragmentos de la membrana interna que dan lugar a (b) partculas de submitocondriales capaces transportar electronesy sintetizar ATP (c) Cuando estaspartculas se disocian por agitacin mecnicao tratamiento enzimtico los componentessepueden separaren (d) una fraccinde membranasin capacidadde slntesisde ATP y (e) F, una fraccin soluble con esferas y actividad AIPasa. (f) Mezclando las dos fraccionesse reconstituyela estructura y serecupera la actividad AIP sintasa.

--v-"rt''
I

de te) Fraccin solublecon

No ArPasa? Actividad

^ . .AL . Y lIt

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F1. esferas Transporte de e l e c t r o n eNo.Sn d e electrnes? ? N o . S n t e s i s s de ATP?No.Actividad

?d'shlt t)4,fb
-r\dt - ' -

ArPasa? s

(f) Partculasreconstituidas de Tranporte electrones? de S. Sntesis ATP? S. ATPasa?No Actividad

juntando piezas las Sntesis ATP: de

303

llevar a cabo el transporte de electronespero no poda seguir sintetizandoAIP;las dos funciones se desacoplan(Figura 10.17d).Las partculas F, aisladas, por otra parte, no fueron capaces transportar electronesy no tenan actide vidad AIPasa (Figura I0.l7e), un hecho que concuerda con la actividad ATPasa de tipo F que ahora atribuimos al complejo FoF, (vase Tabla 8.3). La capacidadde sintetizar ATP de la fraccin membranosa,se recuperabaaadiendo de nuevo partculasF, a las membranas,lo que sugeraque las proyeccionesesfricas que veamos en las superficieinterna de la membrana mitocondrial interna eran una Darte importante del complejo de membranacapazde generar ATP. Estaspartculas se denominaron, por lo tanto, factores (la <F> deFr) de acoplamiento ahora son conocidas por y ser las estructuras responsables la actividad de sntesis de de ATP en la membrana mitocondrial interna y en la membrana plasmtica bacteriana.

Elcomplejo el transporte protones travs Fo FoFr: de a de permite Fl sintetice que ATP Como vimos laFigura en 10.15, complejo esslo el F, parte delcomplejo laAIP sintasa. est de F, unidoal complejo Fopor medio de un pequeo complejo con forma de tallo. Fo est embebido en la membrana mitocondrial interna en la base del tallo (vaseFigura 10.6c).Ahora sabemos que el complejo F" funciona como transportador de protones, el canal que facilita el flujo de electrones manteniendo un gradiente electroqumico que permite la actividad de sntesisdel AIP del complejo F,. As, el complejo FoF, es la AIP sintasa funcional. El componente Fo proporciona un canal para el flujo exergnicode protones desdefuera hacia dentro de la membrana, que dispara la pmf o fuerza motriz del gradiente electroqumico de pro-

tones.El componente llevaa cabola sntesis ATp graF, de ciasa la energa generada estegradiente protones. por de La Tabla10.4 presenta composicin la polipeptdica del complejoFoF,de Escherichia coli,yla Figura10.18 ilustra su ensamblaje el complejofuncional.(La mayorparte en delo queseconoce sobre estos complejos hace referencia a E.coli; piensa se que el complejomitocondrialFoF,esbastanteparecido, aunque mscomplejoen cuantoa subunidades.) complejoF, consta trespolipptidos y tres El de n como tres complejos aB que forman un B, organizados hexgono cataltico. sitio catalticode sntesis hidrlisis El e del ATP selocalizaen la subunidadfr; la subunidada sirve comositio de unin ATP/ADP. tallo consta trespoliEl de pptidos: gamma(7), delta(6) y psilon(e).Estas subunidades prolonganhastalasestructuras y Fo,como inse F, dicala Figura10.18. subunidades y e son necesarias Las d parael ensamblaje complejoF.F, y la subunidad padel 7 recerotar a medidaque los electrones muevena travs se del canalen la estructura Este Fo. mecanismo fascinante se describir mejor en la siguiente seccin. El complejoFoconsta los polipptidos by c conI de a, subunidad subunidades de9 a12subunidades a,2 by cen cadacomplejofuncional. creeque lassubunidades se Se c organrzan formade crculo, en generando canaldeproun tonesa travs la membrana. subunidades b apade Las ay rentemente estabilizan canalde protones la subunidad el y b seune al tallo, anclando estructura la F,/tallo a la base
de Fo.

por Lasntesis ATP FoFl de implica rotacin la fsica la de gamma subunidad


Una vez que se estableciel nexo entre el transporte de electroneshacia dentro de la membrana y el bombeo de

Tabfa 10.4 Composicin polipeptdica la FoFr-ATp de sintasa E. coli de Estructura


Pollpeptldo
a

Peso moleculal**
52.000 55.000 31.000 19.000 r 5.000

Nmero de unidades presentes

Funcin
Sitio de unin ATP/ADP; promueve la actividad de la subunidad p

p
Tallo 6

3 I 1
I I 2 l0x**

Sitio cataltico para la hidrlisis y sntesis de AIp Rota para transmitir energa de Fo a F, Componente fundamental del tallo; se requiere para el ensamblajede F.F, Se une a la subunidad 6; se requiere para el ensamblaje de FoF, Estabiliza el canal de protones Estabiliza el canal de protones Forma el canal de protones

30.000 17.000 8.000

b
c *El complejo mitocondrial

FoFr es similar al complejo bacteriano pero con un polipptido adicional en F, y siete polipptidos adicionales en F.. x*El peso molecular de los tres componentes en E coli es, aproximadamente,32l000 para F, (arBr),65000 para el tallo (76) y 144000 para Fo(abrc,o). El peso molecular total para el complejo ensmblado (ararT6eab.cro) es aproximadamente S:OOOO. **x Estimacin del nmero de subunidades c en el complejo funcional F"F, de E coll, en un rango entre 9 y 12, en el que se considera el l0 como nmero ms probable.

304

Captulo Metabolismo quimifofo laenerga: 10 de respiracin aerobia

3ll
(a) Componentes F1:el talloy Fo de (b) Ensamblaje complejoFoF, del (c) ATPsintasafuncional

Figuta10.18 Los componentes y Fode la FoF,sintasa bacteriana. El complejo F, es una proyeccin esfricade la superficie interna de la F1 membrana plasmticade una clula procariota o de la membrana mitocondrial interna de una clula eucariotay es el responsablede la generacinde ATP.El complejo Foestembebido en la membrana y proporciona un canal para el transporte exergnicode protones desdeel exterior hacia el interior. (a) En una clula bacterianala partcula F, es un complejo de 3 unidades ay 3 B que se organizan como un hexgono cataltico.EI complejo Foconsta de una subunidad a"2 subunidades by entre 9 y t2 subunidadesc, estasrlltimas ensambladas circularmente para formar un canal cilndrico a travs de la membrana. (b) Ft y Fo estnunidas a travs de un tallo que consta de subunidades7, 6 y e que se extienden hacia los complejos F, y F.. (c) El complejo FoFrensambladoes capazde usar la energadel flujo de protones a travs del complejo F. permitiendo a las subunidadesB de la partcula F I sintetizar el AIP. El mecanismo que acopla el transporte en con la sntesis AIP implica Ia rotacin de la subunidad7, como serepresenta la Figura 10.19. de electrones de

protones a travsde la membrana,la siguientepieza del puzle debi de ser desalentadora: Cmopuedeel flujo exergnico protonesa travsdel componenteFo de la de permitir la sntesis ATP-de otro modo ende ATPsintasa por medio de los sitioscatalticos las tres de dergnicaBoyersugisubunidades del complejoF,?En 1979Paul B para proponiendo cuestin, el ri una nuevarespuesta esta modelo de cambio por unin mostrado en la Figura proponequeel sitio cataltico de 10.19. modelode Boyer El cadauna de lastressubunidades complejoFr puedeendel diferentes, con distintas contrarseen tres conformaciones afinidadespor los sustratos(ADP y P,) y el producto (ATP).Boyerlasdefinicomo:conformacin (de la paL que significarelajada),que une dbillabra inglesaloose, mentea ADP y P conformacinT (por la palabrainglesa a tight, qte significatensa),que seune fuertemente ADP y Pi , catalizando su condensacin as espontnea ATR al a cual seune tambin con alta afinidad.La conformacinO (del ingls,open,abiefto),presenta una afinidad muy baja como por los productosy se entanto por los sustratos

por la cuentra, tanto,desocupada mayorpartedel tiempo. Boyer propuso que, en cualquiermomento, cadauno de los tres sitiosactivosesten una conformacindiferentey que el anillo hexagonalde las subunidades y a rota rcsd, pecto al tallo central,graciasal flujo exergnico protode nesa travsdel complejoFode la membrana. Aunqueen principiono seacept mayoritariamente, el confirmadoen 1994 modelo de Boyerfue esencialmente por ]ohn Walkery suscolaboradores, mediantecristaque el Iografade rayosX desarrollaron primer modelo atmico detalladodel complejo F,. Estemodelo identific concretamente estructuras en los sitios activos de las a subunidades que correspondanlasconformaciones O, B y confirmaronque cadauno de estos siL y T de Boyer tres tios activosseencontraba una confirmacindistinta en en cadamomento.Esms,sevio que la subunidady del tallo que conecta complejos y Fo (vaseFigura los F, 10.18)se extenda haciael centrode la estructuraF, de forma asimtrica de forma que su interacciny su efectosobrelas subunidades6 esdiferenteen cadamomento.
juntando piezas Sntesis ATP: de las

30s

@.@

Flujode protones a travsde Fo; y rola 12Oo

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Flujode protones a travsde Fo; y rola 12Oo

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F!r-".^9::1lT:\o

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Fi$ura10.19' El modelode cambio pot unlon para la sintesis de AIP por las unidadesp del complejoFoFr, De acuerdo con estemodelo, cada una de las subunidadesB del complejo F, seencuentra una conformacin distinta en cadamomento y cada una experimenta una secuenciade cambiosdesdela conformacin O (abierta)a la conformacinT (tensa),pasandopor la conformacin L (relajada), dirigiendo Ia rotacin de la subunidad 7' cuya asimetra afectade distinta manera a cada subunidad B en los distintos puntos de rotacin. (La subunidad e del tallo tambin rota-as como, probablemente, el anillo de subunidades B del complejo Fo,aunque aqu slo serepresentanlas subunidades y.) Como semuestra en Ia subunidadde la parte superior del diagrama (que seidentifica arbitrariamntecomo r;las tres subunidades son, de hecho,idnticasen secuenciaamino y estructura), el proceso de slntesisde AIP empieza con la subunidad B1 en su conformacin O e implica @ una rotacin de 120ode la subunidad 7 (indicada esquemticamentepor el cambio de orientacin de la flecha proyectada hacia fuera de la subunidad del 7 centro),que a Ia subunidad B, a su conformacin L y causa, tanto, la relajacinde la unin a ADP y Pi; @ generacin AIp por una de las por de (r); @ una segunda otras subunidades rotacin de 120"de la subunidad 7, que induce un cambio a la conformacin ! que haceque los sustratosse unan fuertemente al sitio cataltico, ene como resultado, en @ la condensacin de estossustratospara dar lugar a la molcula de TP; @ una tercera rotacin de 120" de la subunidad 7, que deurelve a la subunidad B, a la conformacin O y produce una liberacin de la nueva molcula de AIP generada;seguidade la @ generacin de AIp por el sitio Br, completando un ciclo de ctlisis. Observe que en los dems sitios, seha dado la misma secuenciade acontecimientos,pero seencuentra inactiva temporalmente, ya que selibera slo I molcula de AIp despusde cada rotacin de 120' de la subunidad 7, con un total de 3 molculas de AIP por cadavuelta completa.

por El modelo cambio unn accn. La secuencia de en de acontecimientos semuestraen la Figura 10.19es un que modelo real de cmo el flujo exergnico protonesa trade vsdel complejoFopermite la sntesis AIP en los sitios de p catalticos lastressubunidades del complejoF,. El flude jo de protones travs un canalde la subunidadadeFo a de dirige la rotacin del anillo de las subunidades en la esc tructura Fo,y por tanto, tambin la rotacin de la subunidad g del tallo, que seencuentra ancladoal anillo de lassubunidadesc.La asimetra la subunidad7no slosupone de interacciones particularmentedistintascon las tres subu306

nidades en un momento dado sino queprovocaque cada b subunidadp pasesucesivamentetravsde las conformaa cionesO, L y T a medidaque la subunidad0 rota 360 grados. La subunidadp, empieza la conformacinO, en la con que los sustratos ADP y P, puedenentrar librementeal sitio cataltico(vaseFigara 10.19). sitio cataltico El tiene poca afinidad por ellos en estaconformacin.A medida que los protonesfluyen a travsde la subunidadFo de la membrana, anillo formado por la subunidadc yla subuel nidad g ancladaa 1,rotan 120" grados(paso la). Esto

Captulo Metabolismo quimiofo laenerg'n: 10 de respiracin aerobia

induce un cambio en el sitio 1,9ue pasa de la conformacin O alaL (y produce, asimismo, un cambio en la conformacin de otras dos subunidades). La conformacin L tiene una afinidad algo mayor por ADP y P lo que permite la unin de estos sustratos al sitio activo. Despusde la produccin de una molcula de AIP por la subunidadpr(paso 1b),la subunidadg rota otros 120o, dirigida de nuevo por el flujo de protones a travs del canal F. (paso 2a). Esto induce un cambio en la subunidad Bt, que pasa a la conformacin T, que incrementa la afinidad del sitio activo por las molculas de sustrato.Ahora estn fuertemente unidas al sitio cataltico en una orientacin que facilita al miximo la interaccin. En estascondiciones las molculas de ADP y Pi se condensanespontneamente para formar ATP (paso 2b). La subunidad g rota ahora otros 120o,devolviendo a B, ala conformacin O y liberando, por tanto, el ATP del sitio cataltico (paso 3a). Tras la produccin de ATP por una de las otras subunidades(la subunidad f z) paso 3b), se completa un ciclo y la subunidad B, estdisponible para otra ronda de sntesisde AIP. Observe que esta misma secuencia de reaccionesse ha As, cadavueldado tambin en las otras dos subunidades. ta completa de la subunidad 7 implica tres rotaciones de 120" que requieren energa.Esto tiene como resultado la sntesisde 3 molculas de AIR una por cada subunidad B. de Stesisespontnea ATP? Un anlisis detallado de la Figura 10.19 revela que cada uno de los pasosen los que se sintetizaAIP a partir de ADP y P1(esdecir,los pasoslb, 2b y 3b) no requieren energa.Ya sabemosque la sntesisde AIP es una reaccin altamenteendergnica.Entonces,podramos preguntarnos, cmo puede darse la sntesisde AIP espontneamenteen el sitio cataltico de la subunidad B en su conformacin T? De hecho, Io que sabemosrealmente es que la sntesisde ATP es una reaccin altamente endergnicaen una solucinacuosa diluida, que es el nico de contexto en que hemos visto la sntesis AIP hastaahora. Sin embargo,la reaccinen el sitio catalticode Ia subunidad B implica intermediarios que seunen a la enzima en un ambiente drsticamentedistinto-tan distinto, de hecho,que la reaccinen estas condicionestiene una AG"' cercanaa cero (Figura 10.20b)y puede, por tanto, darse espontneamente, sin ningn requerimiento energticoinmediato. Esto no significa que la sntesisde ATP tenga lugar, sin embargo, sin un coste termodinmico; esto significa simplemente que se requiere energaen otro punto de1ciclo. De hecho, se requiere energa,tanto antes de la formacin de ATR como despus:se necesita un aporte de energa previo para permitir la transicin del sitio cataltico de la conformacin L a la conformacin T, empaquetando estrechamenteADP y Pt y facilitando su interaccin (como en el paso 2a de \a Figura 10.19). La liberacin del ATP producido, unido con alta afinidad al sitio cataltico, requiere un aporte energtico posterior (como en el paso 3a).

ADP + P, + H++ ATP + HrO AG"' = +7,3 kcal/mol de (a) Sntesis ATPen solucin d acuosa iluida

.@
G" = 0 kcalimol (b) Sntesis ATPa partirde de ADP y P,unidosa protena Figura10.20 Gomparativa energtica la sintesisde ATP. El de para la sntesis AIP esmuy distinto de requerimientoenergtico del diluida, la dependiendo ambiente.(a) En una solucinacuosa de sntesis AIP a partir de ADP y Psolubleesaltamente con endergnica, una AG'' de *7,3 kcal/mol. (b) En el sitio catalticode la subunidadb en su conformacinI sin embargo, el ambienteesdrsticamente distinto y la reaccintiene una AG"' a a cercana 0 (esdecir,la K"oescercana 1) y por tanto, puededarse sin espontneamente ningn requerimientoinmediato de energa.

quimiosmtico implica trfico protones un de Elmodelo de dinmicotravs la membrana a


En la Figura 10.21 se resume la dinmica del modelo quimiosmtico. Los complejos I, III y IV del ETS bombean protones hacia fuera de la membrana mitocondrial interna y el gradiente electromecnicoresultantepromueve la generacin de ATP por medio de los complejos FoF, asociados a la misma membrana. Ha en otras palabras,un trfico dinmico y continuo de protones a travs de la membrana interna (o la membrana plasmtica,en el caso de los procariotas). Suponiendo que el nmero de protones expulsadospor cada uno de los complejos respiratorios, es como se muestra, y que se requieren 3 protones para la sntesisde 1 molcula de ATR entoncestiene sentido que Ia produccin seade 3 ATP por NADH y 2 AIP por FADH2.

La respiracin aerobia: resumen global


Para resumir la respiracin aerobia,volvamos a la Figura 10.1 de nuevo y recordemos el papel de cada uno de sus componentes.A medida que los sustratoscomo los carbohidratos y las grasasse van oxidando para generar energa, se van reduciendo coenzimas.Estas coenzimas reducidas representanuna forma de almacenamientode la energalibre liberada por las molculas de sustrato originales durante la oxidacin. Esta energa puede utilizarse para la sntesisde AIP mientras las coenzimasson reoxidadaspor el ETS. A medida que los electrones se transportan del global resumen Larespiracin aerobia:

307

IDeshidrogenasas]

\t/ @

Succinato Fumarato
z4H+

4H'-*^.-'

H* + NAD+
zn

t2H*
n
-/ fl

2H' CoQpool
\---

2 t)'

(O,) \.:/ 2H"


'22

Citocromo c
H'
Z fl \s--

( o")
2N*

(H,o) \:_,/
-

oTt

.'...._JI-1

@*O
-/ '*-/,5 t1

<ArPa 1,^^{-

JM,7

Jn

IVATRIZ

M e m b r a n an t e r n a i

r::til'iiir :i.lr.-::i Dinmica gtadiente del electtoqumico ptotones. Los complejosrespiratorios II, III y IV son componentes de I, integrales 1a de membranamitocondrial interna.Los complejosI, III y IV (pero no el complejoII) acoplanel flujo exergnico electrones (lneasrosas)a de travsdel complejo con el bombeo de protoneshaciafuera de 1amembrana (azul).La fuerzamotriz resultante gradienteelectroqumico de1 de protonespermite la sntesis ATP por F' a medida que los protonesatraviesan vuelta la membranapor e1cornplejoFn,que es1 de de tambin ancladoa la membranainterna.Observeque la sntesis AIP consumeprotonesen la matriz mitocondrial,una carencia de que contribuyeal gradientede protonesen la membrana,responsable la sntesis AIp. de de

NADH o FADH2 al oxgeno,van pasandoa travsde varios complejos respiratorios,donde el transporte de electrones se acopla al bombeo direccional de protones, a travs de la membrana. El gradiente electroqumicoresultante ejerce unA pmf que sirve como fuerza motriz para la sntesisde ATP. En la mayora de las condiciones se puede mantener una pmf establea travs de la membr ana.La transferencia de electronesdesdelas coenzimasal oxgeno se ajusta cuidadosa y continuamente, de manera que el bombeo de electroneshacia fuera equilibra el flujo de entrada de protones necesariopara que la sntesisde ATP se d a la velocidad adecuada.

Ei maxinlo rendiniento ATPen la respiracion de aerobia es de 36-38 ATPspor molecillacleglucosa Ahora podemos volver a Ia cuestin de cul es el mximo rendimiento deAIP por molcula de glucosaen condiciones aerbicas. Recordemosde Ia Reaccin 10.3 aue la oxidacin completa de la glucosaa dixido de carbno por la glucolisis y el ciclo del TCA tiene como resultado la produccin de 4 molculas de ATP por fosforilacin desde sustratos.La mayor parte de la energalibre restantede Ia oxidacin de la glucosase almacenaen las 12 molculas de coenzima -10 de NADH v 2 de FADH.-. En los nroca-

308

quimitrofo laenerga: Captulo l\4etabolrsmo 10 de respiracin aerobia

riotasy en algunas clulaseucariotas, electrones tolos de daslasmolculas NADH pasana travsde los trescomde plejosresponsables la sntesis ATP del ETS,dandolude de gar a 3 molculasde.AIP por molculade coenzima. Los por del slo electrones FADHT, otra parte,atraviesan 2 de de los complejos, dandolugar a, tan slo,2 molculas AIP por molculade coenzima. mximo rendimientoteriEl co deATP obtenidopor la reoxidacinde las 12 molculas de coenzimaformadasa partir de cadaglucosa, puede se manera: representar la siguiente de lONADH + 10H+ + 50, + 30ADP+30P,-)

i toNAD+ rouro + 3oATi, + *4P, -+ 2FADH" O, + 4ADP


2FAD+2H2O+4NlP

(to.l6)
(lo.l7)

Sumandoestas reacciones, obtenemos reaccinglola y bal del transporteelectrnico de la sntesis ATP: de + 1ONADH 10H++ 2FADH. + 60" + 34ADP* 34P,-+ IONAD+ + 2FAD + :^;jH;o+ 34ATP (rd.l8) globalde la La sumade la reaccin 10.18 la reaccin a glucolisisy el ciclo del TCA (Reaccin10.3)lleva a la siguienteexpresin generalpara el rendimientomximo terico de AIP, obtenido por la respiracincompletade la glucosa otrashexosas: y
38ADP+38Pi C6H12o6+6C,2 \ 38ATP n,

6CO2+ 6H2O

(10.19)

general vilidaparala mayoriadelascEstareaccin es y eucariotas. lulasprocariotas paraalgunostipos de clulas el Dependiendo tipo celular, embargo, miximo rendel sin puedeserde 36 dimiento deAIP parauna clulaeucariota en lugar de 38 debidoal menor rendimientode molculas a de NADH generadas el citosolrespecto la mitocondria en (vase primerade laspreguntas, planteadas abajo). la ms Antesdeabandonar Reaccin 19y el metabolismo la 10. aerbico que esta reaccin resume,consideraremos dos bastante frecuentes le ayudarna entender cuestiones cue la respiracin aerobia. qu t. Por el rendimiento mximo ATP lasclulas de en eupor cariotas variaentre36 y 38 ATPs cadaglucosa? Recuerde que cuando la glucosase cataboliza aerbicamente en una clula eucariota,la glucolisis genera,en el citosol, 2 molculasde NADH por cadaglucosa, mientras que el catabolismodel piruvato generaotras ocho molculasde NADH en la matriz mitocondrial.Estadistincin espacial esimportanteporquela membranainterna de la mitocontransportadorapara NADH o el dria no tieneuna protena el NAD+, de forma que el NADH generado el citosolno en puedeentrar en la mitocondria para liberar suselectrones al complejoI del ETS.En lugar de eso,los electrones ioe nesH+ pasanhaciael interior medianteuno de los distin-

que de de tos sistemas transporte electrones difieren en el nmero de molculasde ATP formadaspor molcula de NADH oxidada. Un sistemade transporte de electronesconstade uno que de o mstransportadores electrones puedenserreduEstasprotenastransportadoras cidos reversiblemente. se puedenencontraren la membranatanto en la forma reducida como oxidada.Para que pueda producirseel movimiento de los electrones hacia la mitocondria, el NADH y del citosol pasasus electrones protonesa una molcula transportadora citosoly seoxidaa NAD*, que sepuede del en usarde nuevocomo aceptorde electrones la glucolisis o citoslicos. Mientrastanto,la forma reen otrosprocesos ducida del transportadorentra en la mitocondria, donde es oxidadapor una enzimamitocondrial, dando lugar a NADH o FADHT.La diferenciaen el rendimiento de AIP eucariotas estribaen el modo de oxidacin entrelasclulas de la molculatransportadoradentro de la mitocondria, que puedeimplicar la transferencia electrones NAD+ de a o FAD,dependiendo tipo celular(2ATPlglucosa del menos por transferencia FAD mitocondrial). al En lasclulas hlgado,el rin y el corazn, elecdel los tronesdel NADH citoslicosetransfierena la mitocondria por medio del sistema transporte de malato-aspartato, an complejo mecanismoque da lugar a NADH a partir de NAD+ en h matriz.Loselectrones derivados NADH cidel toslicopasanasa travsde tres complejosde bombeode y protones sistema transporte son,por lo tanto,cadel de paces generar tres molculas AIP por cadamolcula de de de coenzima. y Por otro lado,en el msculoesqueltico, el cerebro en en otros tejidos,el NADH citoslicolibera electrones hacia por mitocondriales respiratorios medio de los complejos un mecanismode transporte que usa FAD en lugar de NAD+ como aceptorde electrones mitocondrial.En la Figura 10.22 se representaeste mecanismo,denominado Itnzadera del glicerol fosfato. En la lanzadera glicerol del fosfato participan las isoformascitoslicay mitocondrial (G3PDH), deshidrogenasa de la enzimaglicerol-3-fosfato (glicerol-3que oxida reversiblemente glicerol-3-fosfato al fosfato(DHAP).La forma citoslica P) a dihidroxiacetona de la enzimatransfiereelectrones NADH al DHAR redel a ducindolo glicerol-3-P. El glicerol3-P pasaluego a la mitocondria,donde se reoxida a DHAP mediante una G3PDH dependientede en FAD localizada la caraexternade la membranainterna. Dado que estaenzimaunida a la membranauttTiza FAD en lugar de NAD+ como aceptorde electrones, stos transse fieren directamente la coenzimaQ. En consecuencia a los no pasanpor el primer lugar de conservacin electrones de energadel ETS,generndose slo dos molculasde ATP en lugar de tres y reducindose rendimiento miximo el terico en una molcula de AIP por NADH citoslicoy por tanto, en dos molculas ATP por cadamolculade de (de glucosa 38 a 36). global 309 |: respiracin resumen aerobia:

(!Ag"
+H+

/---->.

c H 2- o H l-

cHe-oH l-

cl, -o-@

cnr-o-@
Glicerol-3{osfato deshidrogenesa mitocondrial

Glicerol-3fosfato deshidrogenasa citoslica

H-

C-OH

-o-@ cH,

H-C-OH I

-o-@ cH2
MATRIZ

2H*

"-

2H*.'-

Espacio intermembrana

+o
3H+

Jnref '?^/'f
CITOSOL

J\A^,4

-._/
Membrana mitocondrial externa Membrana mitocondrial interna

Fgur 1.;:Ll La lanzadera glicetolfosfato. La membranamitocondrial interna esimpermeableal NADH de maneraque los electrones del del NADH entran a la mitocondria mediantedos tipos de sistemas transporte.Las clulas msculo esqueltico, de del cerebroy otros tejidos usanel sistema transportedel glicerolfosfato.Laslneasrosasindican la ruta de los electrones de desdeel NADH citoslicohastaei oxigeno. (1) La enzimacitoslicaglicerol-3-fosfato (G3PDH) usa electrones protones)del NADH para reducir dihidroxiacetona (y deshidrogenasa (glicerol-3-P)que (2) puedeatravesar membranamitocondrial externadifundiendo a travsde un fosfato(DHAP) a glicerol-3-fosfato la canalde porinas.(3) El glicerol-3-Pesoxidadodespus DHAP por una FAD-G3PDH de Ia membranainterna,con la reduccin a concomitantede FAD a FADH,. Dado que la NADH esuna coenzimade mayor energa que el FADHT,el transportede entradade electrones, facilitadopor la diferenciade potenciales reduccinde las dos coenzimas, exergnico. costede estaentradade electrones de es El esun menor rendimiento de AIP porque (4) los electrones FADH, generado del por la G3PDH mitocondrial,no pasanpor el complejo I, de maneraque sereduceel nmero de protonesbombeados travsde la membranainterna. a

2. Porqu se considera rendimiento ATPen la respirael de cin aerobia como (el mximorendlmiento telico"? Esta expresin es una forma de recordar que el rendimiento de 36 a 38 molculas de ATP por molcula de glucosaslo es posible asumiendo que la energa del gradiente electroqumico de protones se utiliza nicamente para la sntesis de ATP. Esta suposicin puede ser til para el clculo de posibles rendimientos, pero no es realista,ya que la pmf

del gradiente de protones no sirve slo para la sntesisde AIR sino tambin para otros procesosy reaccionesque requieren energa.Por ejemplo, parte de la energadel gradiente de protones se utiliza para facilitar el transporte de varios metabolitos e iones a travs de la membranay para importar protenas hacia la mitocondria. En la Figura 10.23se representanalgunos de estosprocesosde transporte.

310

quimitrofo laenerga: Captulo Metabolismo 10 de respiracin aerobia

Figura10,23 Pilncipalessistemasde tlansporte de la membrana mitocondrialnterna. Aqu se muestran las principales protenas de transporte localizadasen la membrana mitocondrial interna. (a) El transportador de piruvato cotransporta piruvato y protones hacia el interior, impulsado por la pmf del gradiente electroqumico de protones. (b) Dicarboxilato y (c) tricarboxilato transportan cidos orginicos a travs de la membrana. El sentido del transporte dependede las concentracionesrelativasde cidos di y tricarboxlicos en el interior y en el exterior de la membrana interna (d) respectivamente. El transportador de ATP-ADP sacaAIP y mete ADP y (e) el transportador de fosfato acopla el movimiento de entrada de fosfato con el de salida de iones hidroxilo. que son neutralizadospor protones en el espaciointermembrana. (El mecanismo de entrada de electrones serepresentaen Ia Figura 10.22.)

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Membrana mitocondrial externa

Membranamitocondrial interna

Dependiendo la concentracin de relativade piruvato, grasos, aminocidose intermediariosdel ciclo del cidos TCA en el citosoly en la matriz mitocondrial,puedenneque variables energa de para asegurar cesitarse cantidades la mitocondria tiene los suministrosadecuados sustrade tos oxidables intermediariosdel ciclo del TCA. Esms,la e parala sntesiq ATP entradade ionesfosfatonecesarios de por estacompaada la salidaconcomitantede iones hidroxilo, que son neutralizados los protonesen el espapor cio intermembrana,generandotambin un gradientede protones. La respiracin aerobia un proceso es muyefcaz Paradeterminarla eficaciageneralde la produccinde quepreguntarnos AIP n la respiracin aerobia tenemos

qu proporcin de la energa oxidacinde la glucosa de queda en las 36 38 molculasde ATP generadas por El cadamolculade glucosa. valor de AG"' de la oxidacin completa de la glucosa a CO2 y HzO es -686 kcal/mol.La hidrlisisde ATP tiene un valor de AGo' de alrededorde -7,3 kcal/mol pero el valor real de AG' sueleencontrarse el rango de -10 a -14 kcal/mol. en Asumiendoun valor de 10kcal/mol como hicimosantelos riormenteen estecaptulo, 36-38molesdeAIP generadospor la respiracinaerobiade 1 mol de glucosa en una clula aerbicacorresponden aproximadamente a por 360-380kcal de energaconservada mol de glucosa oxidada.Esto supone un rendimiento en torno al 52que 55%o, esbastante superiora la que podemosobtener que de las mquinasms eficientes somoscapaces fade bricar.
global Larespiracin aerobia: Resumen 311

Comparada con la fermentacin, la respiracin aerobia permite a las clulas acceder a una proporcin mayor de la energa libre que se puede obtener de sustratos orgnicos como azicares, grasasy protenas, El catabolismo completo de los carbohidratos comienza con la ruta glucoltica, pero el piruvato que se forma entra despusen la mitocondria, donde se descarboxila oxidativamente a acetilCoA. El acetilCoA es oxidado despusa CO, por Ias enzimas del ciclo del TCA. Los cidos grasosson sustratosalternativos del metabolismo energtico en muchas clulas. Su catabolismo empieza en la matriz mitocondrial con la d oxidacin a acetilCoA que entra en el ciclo del TCA. Las protenas pueden usarse tambin como fuente de energa, especialmente en condiciones de a1.uno. estos En casos,las protenas se degradan a aminocidos y stos son catabolizadosa uno o ms productos finales que entran en la ruta glucoltica o en el ciclo del TCA. La mayor parte del rendimiento energtico del catabolismo aerbico de Ia glucosa se obtiene de las coenzimas reducidas (NADH y FADH,), que son reoxidadaspor un sistema de transporte de electrones. Estesistemase compone de complejos respiratorios,que son grandes complejos multiproteicos embebidos en la membrana mitocondrial interna (o, en el caso de los procariotas, en la membrana plasmtica). Los complejos respiratorios son libres para moverse lateralmente por la membrana. La coenzima Q y el citocromo c, que transfieren electronesen-

tre los complejos, intermediariosclason ve del sistema transportede electrones. de En los organismos aerobiosel oigeno es el aceptorfinal de electrones el aguaes y el producto final. Tiesde los cuatroprincipalescomplejos respiratorios, complejos III y IV, los I, acoplanla transferencia electrones de al bombeo de protoneshacia fuera de la membrana.Esto establece gradiente un electroqumico protones que es la de fuerzamotriz para la produccinde ATP. Ei sistema sntesis AIP consta un de de de transportador protones, insertado de Fo, en Ia membranay una AIP sintasa, F,, protuberante seproque cuyaestructura yecta desde membrana la internadel lado de la matriz (o en el lado citoslico la de plasmtica lasclulas membrana prode cariotas). sintetizaAlPa medidaqueel F, gradiente de protones facilita el movimientode stos travs Fo. a de As,el gradiente electroqumico protonesy el de AIP son,en efecto, formas interconvertiblesde energa almacenada. La mitocondriaesel lugardondetiene lugar el metabolismo respiratorio en las clulaseucariotas. mitocondrias Las son orgnulos prominentes tanto en tamao como en nmero.Puedenfomar grandes redes interconectadas algunos en pero aqu las describimos tipos celulares como orgnulos independientes. preSe sentanen un nmero de entre una y varios cientoso inclusomilespor clulay suelentener una longitud de variasmicras.Una mitocondriaestrodeada por dos membranas. membranainterna La

tiene muchos plegamientos llamados que crestas, incrementanmucho la superficiede la membrana por lo tanto su cay pacidad de acomodar los numerosos complejos respiratorios, complejos y FoF, las protenas de transporte necesarios para llevar a cabola funcin respiratoria. La membrana mitocondrial externa espermeable los iones pequeas a y molculas debidoa la presencia porinas. de Sin embargo, requieren se transportadores especficos para el transportede entada de piruvato,cidosgrasos otras y molculas orgnicas travsde la mema branainternadel orgnulo. transporte El de salida ATP est de acoplado la entraa da de ADP y el movimientosimultneo de entradade ionesfosfato estacoplado a la salida de iones hidroxilo, facilitado por el gradiente protones. electrode Los nesde las molculas coenzima de que se reducen el citosoldeben en entraral sistema de transportede electrones por un mecanismo transporte de especfico porque la membranainternano espermeable a lascoenzimas. stees,por tanto,el metabolismo aerbicode la energa. transistores, Sin partes mecnicas, ruido, contaminacin, y todo en trminosde organizacin reque quierenun microscopio electrnico para visualizarlos. Todo el procesotiene lugar continuamente Ia clulacon un grado en de integracin, eficiencia, fidelidady control que apenas podemoscomprender lo suficientemente bien para apreciarlo totalmente, parapoderreproducirlo menos en nuestros tubos de ensavo.

Problemas
problemasmayor Los de dificultad marcados un .. estn con 10.1 Localizacinde molculasy funcionesen la mitocondria.Indiquesi esperara encontrar no (NO), cada o una de lassiguientes molculas funcionesen Ia matriz (MA), o (OM), o espacio membrana interna(IM), membrana externa (IS) intermembrana de la mitocondria. (a) Coenzima A (b) Coenzima Q
(c) Fosforilacin de nucletidos (d) Succinatodeshidrogenasa (e) Malato deshidrogenasa (0 Elongacin de cidos grasos (g) Tiansportadordedicarboxilato (h) Conversin de lactato en piruvato (i) (j) AIP sintasa Acumulacin de una concentracin alta de protones

312

quimitrofo laenerga: Capitulo Metabolismo 10 de respiracn aerobia

L0.2 Localizacinde molculasy funciones en la clula procariota.Repitael Problema peroindicandodnde 10.1, esperara encontrarcadauna de lasmolculas funcionesdel o listado,en la clulaprocariota.Lasposibles localizaciones son: (CY),membrana (PM), exteriorcelular plasmtica citoplasma (EX),o no est (NO). presente 10.3 Verdaderoo falso. Sealar cules las siguientes de (V) (F). En lasfalsas, afirmaciones verdaderas o falsas son replantee afirmacinde maneracorrecta. la (a) El flujo ordenado carbonoen el ciclodel TCA esposible de porque cadauna de lasenzimasdel ciclo estenglobada en la membranamitocondrial,de maneraque su disposicin del seajusta la propiasecuencia ciclo. a (b) Termodinmicamente, acetilCoAdebera posibilitar la el fosforilacindel ADP (o del GDP), de la misma forma que Io hacela succinilCoA. asumiendo disoonibilidad la Ia de enzima apropiada. (c) La respiracin un proceso es aerbico todoslos en porqueel oxgeno el nico aceptor organismos, es parala reoxidacin las de electrones conocido de coenzimas. (d) Podemos predecirel flujo de electrones travsdel sistema a porque el par redox de transportede electrones y NAD-/NADH tieneuna AEo'muy negativa el par tiene una OrlHrO AEo'muy positiva. (e) A diferencia NAD+, Ia coenzima del FAD tiendea estar que fuertemente asociada lasdeshidrogenasas lo usan a comoaceptor electrones. de (0 Serequierennueveciclosde B oxidacinpara degradar completamente cidograso 18carbonos un de hasta acetilCoA. L0.4 Transportemitocondrial. Paraque sed la respiracin que aerobia, variassustancias debenencontrarse flujo hay en constante Io largode la membrana a mitocondrial interna.Para una cluladel cerebro, la que la glucosa la nica fuentede en es produciran energa, indiquecules lassiguientes de sustancias un flujo netoen la membrana si esas,cantas molculas se movilizarny en qu sentido,por cadamolculade glucosa catabolizada. (a) Piruvato (b) Oxgeno (c) ATP (d) ADP (e) AcetilCoA (f) Gliceroi-3-fosfato (g) NADH (h) FADH2 (i) (j) Oxalacetato Agua

(a) La conversin citrato en a-cetoglutarato de mediantelas reacciones TCA-2 y TCA-3 implica como intermediarios, no slo al isocitrato,sino tambin a lasmolculas (perono mostradas la Figura10.8), identificadas en como aconitatoy oxalosuccinato. Represente ruta del citrato a la a-cetoglutarato, mostrandolasestructuras el orden de los y tresintermediarios. (b) La sntesis aminocidoglutamatosepuedellevar a cabo del a partir de piruvato y alaninamediantela secuencia metablicaque suponeel papelanfiblicodel ciclo del TCA. Ilustre esaruta, asumiendola disponibilidadde cualquier enzimaadicional necesaria. (c) Si seintroduceel piruvato-2-raC (piruvatocon el carbono centralmarcadoradiactivamente) 1arespiracin en mitocondrial,la mayor parte de la radiactividadse incorporaren el citrato.Tiacela ruta por Ia que los tomosde carbonomarcados radiactivamente, se incorporanal citratoe indiquela molcula citrato. de 10.6 El bilogo celular calculando.Usela Tabla10.2de la pgna comobase paralos clculos 295 necesarios para contestar lassiguientes a cuestiones. (a) Sinhacerclculos iniciales, prediga el isocitrato si puede ceder electrones exergnicamenteNAD- en condiciones al prediccin? estndar. quhaceesa Por (b) Cul 1a parala oxidacin isocitrato NAD+ en es AEo' del a condiciones estndar? este Ia Confirma clculo prediccin que hizo en el apartadoa?Expliquesu respuesta. (c) Calcule AGo' parael proceso oxidacindel la de isocitratopor NAD- en condiciones estndar. Porqu es relevante esteclculoparael metabolismo aerobiode Ia energa? (d) Repitalaspartesa-c parala oxidacindel lactatoa piruvato por NAD-. Por qu esrelevante clculo parael este metabolismo aerobio la energa? de (e) Ahora repitalaspartesa-cpaalaoxidacin succinato del a fumarato, con el NAD- como aceptor electrones. de Debera obtener valor de AGo' muy positivo. un nos Qu indica estevalor sobrela probabilidadde que el NAD* puedaservircomoaceptor electrones la reaccin para de por catalizada la succinatodeshidrogenasa ciclo del del TCA? (0 Por ltimo,repitalaspartes parala oxidacin a-c del succinato fumarato con la coenzimaQ como aceptorde a electrones. qutienesentidoconsiderar la coenzima a Por cuandoserepresenta la Q como el aceptorde electrones succinato deshidrogenasa la Figura10.8, de con el FAD inmediatode electrones? comoaceptor L0.7 Calculandolos rendimientos miximos de AIP. La Tabla10.5esuna forma de resumir el rendimientode AIP durantela oxidacinaerbica la glucosa. de (a) Complete Tabla10.5parauna clula la procariota. es Cul el rendimientomximo de AIP? (b) Indiqueen la Tabla10.5 cambios los necesarios para calcularel mximo rendimientode AIP para una clula eucariotaque usaIalanzadera glicerolfosfatopara transportarIos electrones desde citosolhastala matriz el mitocondrial.

(k) Electrones (l) Protones 10.5 Completandola ruta. En cadauno de los siguientes y casos, completela ruta, indicandolasestructuras el orden de los intermediarios.

Problemas 3t3

Tabla 10.5 Clculo rendimiento del mximo ATP la oxidacin de de aerbica la glucosa de
Etapa de la resplracin
Rendimiento de CO,

Glucolisis (glucosa --+ 2 pruvatos)

Oxidacin del piruvato (2 piruvatos --+2 acetil GoA)

Giclo del TGA (2 vueltas)

Rendimiento de NADH

ATP a partir de NADH

Rendimiento de FADH,

AIP a partir de FADH,

AIP de la fosforilacin desde sustratos

ATP de la fosforilacin oxidativa

Rendimiento mximo deATP

10,8 Regulacindel metabolismo.Expliquela ventajade cada uno de los siguientes mecanismos regulacin de parala clula. (a) La isocitrato (Figura10,8, deshidrogenasa reaccin TCA-3) esactivada alostricamente ADP. por (b) Lasdeshidrogenasas oxidanisocitrato, que d-cetoglutarato y malato(reacciones TCA-3,TCA-4y TCA-8)estn inhibidas alostricamente NADH. por (c) La piruvatodeshidrogenasa (Figura18.0, Reaccin l0.l) est inhibidaalostricamente AIP. por (d) La fosfofructoquinasa (Figura9.6,reaccin Gly-3)est inhibida alostricamente citrato. por (e) La piruvatodeshidrogenasa (Figura10.10, quinasa enzima E,) estactivada alostricamente NADH. por (0 La a-cetoglutarato (Figura10.8, deshidrogenasa reaccin TCA-4)est inhibidaalostricamente succinilCoA. por 10.9 Slntesis letal.Lashojasde Dichapetalum cymosum,va planta surafricana, muy venenosas. animales son Los que ingierensushojastienen com'ulsiones normalmentemueren y en pocotiempo.Uno de los efectos msdestacados su de toxicidadesun notableincrementoen la concentracin de citrato y un bloqueodel ciclo del TCA en la mayorade los rganosdel animal afectado. agente El txico de lashojasde la planta esel fluoroacetato, pero el venenoreal que seencuentra en los tejidosanimales el fluorocitrato.Si seincuba el es fluoroacetato con enzimas purificadasdel ciclo del TCA, no hay un efectoinhibitorio sobrela actividad enzmtica. (a) Porqu esperaras el fluorocitrato tuvieseun efecto que inhibitorio en una o msenzimasdel ciclo del TCA cuando seincuba con lasenzimas purificadasin vitro, a pesarde que el fluoroacetato tieneningn efecto? no

(b) Culde las enzimas del ciclo del TCA sospecha que est afectadapor el fluorocitrato? Exponga dos razonesque argumenten su resPuesta. (c) Cmo se puede convertir el fluoroacetato en fluorocitrato? (d) Porqu se conoce estefenmeno como sntesis leta? 10.10 Oxidacin del NADH citoslico,En algunasclulas eucariotas,el NADH generadopor Ia glucolisis en el citosol es de nuevo reoxidado por la lanzadera del glicerol fosfato que se representaen la Figura 10.22. (a) Escribalas reaccionesajustadasparalareduccin de la dihidroxiacetona fosfato (DHAP) a glicerol-3-fosfato (glicerol-3-P) por el NADH citoslico y parala oxidacin del glicerol-3-P a DHAP por la glicerol-3-P deshidrogenasa unida a FAD en la membrana mitocondrial inrerna. (b) Sume las dos reaccionesdel apartado (a) para obtener una reaccin global de la transferencia de electrones del NADH citoslico al FAD mitocondrial. Calcule la AE ' y AG"' de estareaccin.Estermodinmicamente factible la entrada de electronesen condiciones estndar? (c) Escriba una reaccin ajustadapara la oxidacin del FADH2 por la coenzima Q en la membrana interna, asumiendo que la CoQ se reduce a CoQHr. Calcule AGo' y AG", de estareaccin.Esestatransferenciatermodinmicamente factible en condiciones estndar? (d) Escriba una reaccin ajustada paralatransferencia de electrones del NADH citoslico a la Coe mitocondrial y calcule AEo' y AG"' de esta reaccin. Esesta transferencia termodinmicamente factible en condiciones estndar? (e) Asuma que la relacin [NADH]/[NAD*] es 5,0 y que la relacin [CoQHr]/[CoQ] en la membrana interna es 2,0.

3t4

quimitrofo laenerga: Capitulo N4etabolismo 10 de respiracin aerobia

(d) es del Curl la AG' de la reaccin apartado a25'Cy pH7,0? (0 Se afectadalaLG' de la transferencia electrones ve de del NADH a CoQ por la relacinforma reducidalforma oxidadade la enzimadependiente FAD de la membrana de interna?Expliquepor qu. 'L0.L1, Grasaparda y termogenina.La mayorade los mamferosneonatos, incluyendolos bebs humanos,tienen un parda,en el tipo especial tejido adiposodenominadograsa de que seencuentra, forma natural y anclada la membrana de a mitocondrial interna,una protenadesacopladora denominada termogenina. protenadesacopla procesode sntesis Esta el de AIP del transportede electrones, maneraque la energa de Iiberadapor el flujo de electrones travsde la cadena a de transportesepierdeen forma de calor. (a) Qu pasacon la energa que selibera cuandocontina el perocesa sntesis AIP? Por transporte electrones de la de qupuedeserventajoso paraun bebtenertermogenina en la membranainterna de lasmitocondriasdel tejido pardo? adiposo (b) Algunosmamferosadultospresentan tambin grasaparda. encontrarmstejido adiposopardo y ms Esperara termogeninaen un oso en hibernacinque en un oso fsicamente activo? Expliquesu razonamiento. (c) Dadasu localizacin celular,propongaun modo de accin parala termogenina. Qutipo de experimentopuede sugerirpara probar su hiptesis? (d) Qu pasara un mamferosi todassusmitocondrias le a presentaran protenadesacopladora, una apartede la que seencuentra el tejido adiposo pardo? en .L0.L2 Diseccionandoel sistemade transporte de Paradeterminarqu partesdel sistema electrones. de

(ETS)esresponsable bombeode transporte electrones de del protonesy por lo tanto de la sntesis ATR los investigadores de solanincubarlasmitocondrias condiciones lasque slo en en esfuncionaluna parte del ETS.Una de lasaproximaciones es suministrar a la fraccin mitocondrial un donador y un que sesabeque bloqueanel ETSen aceptorde electrones puntosconcretos. Adems, suelenaadirse inhibidoresde especificidad conocida. uno de estos En experimentos, la mitocondria seincuba con B-hidroxibutirato, citocromo c oxidado, ADR Pi y cianida.(La mitocondriatieneuna deshidrogenasa dependiente NAD* que escapaz oxidar de de ) B-hidroxibutiratoa B-cetobutirato. (a) Culesel donador de electrones estesistema? de es Cul el aceptor? esla ruta de transportede electrones ms Cul probablede estesistema? (b) Basndose 1oqueya sabe ETS,cantos en del molesde que AIP esperara seformaran por cadamol de Escribauna ecuacinajustada B-hidrobutirato oxidado? para la reaccinque seda en estesistema. (c) La cianidaesel nico agente que seaadeal sistema que no esparte de la ecuacinajustada la reaccin. de qu Para se aade cianida sistema? al resultado esperara no se si Qu aadiera cianida? (d) Esperara las enzimas TCA estuvieran que del activas en este sistema? Explique razonamiento. su (e) Por quesimportanteque el B-cetobutirato pueda no seguirmetabolizndose estesistema? lactatoes en El parecidoestructuralmente B-cetobutirato;Qu bastante al efectohabratenido si los investigadores hubieranusado lactatocomo sustratooxidableen luqar de -hidroxibutirato?

Bibliografa recomendada
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Bibliografarecomendada 315

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quimitrofo laenerga: Capitulo Metabolismo 10 de respiracin aerobia

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