Microbiologie (micro = mic; bios = via )  Bacteriologie (bakterion = bastonas)  Virusologie  Parazitologie  Micologie (mykes = ciuperc )  Ramuri: microbiologia

solului, marin ,  industrial , agricol , medical etc.

Microorganismele  includ virusuri, bacterii, protozoare, fungi  sunt ubicuitare

majoritatea nepatogene unele condi ionat patogene un mic procent patogene

Scop: studierea proceselor fizice, chimice,biologice legate de activitatea microorganismelor pentru:

 a p stra si folosi pe cele utile  a anihila pe cele d un toare

Microorganismele rol important pe planet nu ar exista via f r ele

Producere de oxigen:cianobacterii Circulaia biologic a materiei n natur : saprofi i

 descompunerea substanelor organice din sol n

produsi simpli (ciclul oligoelementelor: C, N, S, P,Fe)

Activitate geologic
 formarea de z c minte petroliere, c rbuni,

salpetru, sulf, minereuri de fier etc.

n industrie  fabricarea alcoolului etilic  vinifica ie  industria berii  panifica ie  produse lactate: iaurt, lapte acru,brnzeturi  mur turi Protec ia mediului  descompun deseurile rezultate din  activitatea industrial

n agricultur
 ngr s minte

n industria medicamentelor:
 biosinteza microbian a  vitaminelor B1, B2, B12, C, A, D2  substanelor antibiotice

n medicin
 inginerie genetic

hormoni de crestere Insulin interferoni produse utilizate pentru realizarea de vaccinuri

n medicin
 pe si n organismul uman tr iesc de 10 ori mai multe

microorganisme dect totalul num rului de celule (epiteliale, nervoase, musculare etc.)  pe si n organismul uman tr iesc ntre 500 1000 specii diferite de microorganisme

MICROFLORA INDIGEN (flora normal a organismului)

n medicin MICROFLORA INDIGEN

 rol negativ:

 condi ionat patogeni = oportunisti

o colonizeaz macroorganismul o cauzeaz boal doar n anumite condi ii p trund n zone anatomice unde nu apar in deficien e ale sistemului imun stress oboseal boli grave etc.

pagube economice
   

degradare microbian a documentelor de piatr ac iune coroziv asupra metalelor descompunerea alimentelor biodeteriorarea
cauciucului a maselor plastice a textilelor a hrtiei a operelor de art etc.

boli ale
 plantelor  pestilor  animalelor  omului

Organisme procariote
 nu au membran nuclear proprie  prezint un singur cromozom

Forma bacteriilor
 controlat genetic  important criteriu taxonomic

forma sferic
 coci

forma cilindric
 bacili

forma spiralat (ncurbat )

 vibrioni  spirili  spirochete

Diametre egale Staphylococcus spp. Streptococcus spp. Reniformi Neisseria spp. Lanceolai Streptococcus pneumoniae Ovalari Enterococcus faecalis

Diplo Neisseria spp.

Gr mezi Staphylococcus spp.

Tetrade Micrococcus tetragenus

Lanuri Streptococcus spp.

Cte opt Sarcina spp.

Izolai Micrococi

Diplobacili Klebsiella pneumoniae

Streptobacili Bacillus anthracis

Aspect litere, chibrituri, palisade Corynebacterium diphtheriae

CORP NCURBAT NTR-UN SINGUR PLAN form de virgul vibrioni CORP NCURBAT N MAI MULTE PLANURI spiral cu spire rigide spirili spiral cu spire fine, flexibile Treponema Leptospira Borrelia

Micrometri
 1 mm = 1.000 micrometri (microni) m  1 micron = 1.000 milimicroni (nanometri)

Coci: 0,5 2 m
 Bacili: lungime 0,5 10 m / l ime 0,3 2 m  Vibrioni: lungime 1,5 3 m / grosime 0,5 m  Spirochete: lungime 6 20 m / grosime 0,15

0,5 m

Celula este unitatea structurala i func ional a tuturor organismelor vii celula exprim caracteristicile de baz ale vie ii

 folose te nutrien ii din mediu pt a ob ine energie  poate cre te; se poate reproduce  r spunde la stimulii din mediu lumin c ldur /frig substan e chimice  poate suferi muta ii genetice supravie uire apari ie de noi specii etc.

EU adev rat CARYON nucleu



ADN-ul celular este nconjurat

de membran nuclear Dimensiuni

10-30 m  de 10 ori mai mari dect celula procariot


de 10 ori mai mic fa de celula eucariot structur simpl

 elemente obligatorii Perete celular membrana citoplasmatic citoplasma material nuclear  elemente facultative capsul flageli pili spori

perete bacterian membrana citoplasmatic citoplasma bacterian material nuclear

grosime 15 35 nm alc tuit din proteine, lipide, hidra i de carbon

Structura strat bazal stratul structurilor speciale

n func ie de propor ia celor 2 straturi i de elementele componente ale structurilor speciale, distingem:
Bacterii Gram pozitive  Bacterii Gram negative  Bacterii acido-alcoolo-rezistente  Bacterii cu perete celular alterat


= mucopeptid = mucocomplex = peptidoglican Re ea tridimensional alc tuit din

 macromolecule lungi, polizaharidice paralele:

Acid N-acetil-muramic N-acetil-glucozamin legate prin pun i polipeptidice

gros (15 30nm), rigid, simplu Peptidoglicanul: 80%

 Structur tridimensional

Structurile speciale: 20%

 Acizi teichoici De perete
lega i de peptidoglican

De membran
lega i i de peptidoglican i de membrana citiplasmatic

Acizi teichuronici Lipoglicani (glicolipide)

Sub ire, flexibil, complex

 Peptidoglicanul: 20%  Structur bidimensional  Include peptidoglicanul

Spa iul periplasmatic

Structurile speciale: 80%

 Lipoproteine Unesc membrana extern de peptidoglican

Membrana extern
 2 rnduri de fosfolipide ntre care sunt intercalate proteine (porine)

Lipopolizaharid - LPS
 La suprafa a extern a membranei externe  Rol antigenic (endotoxin )

sus ine mecanic celula bacterian men ine forma bacteriei asigur protec ia celulei bacteriene intervine n procesele de osmoz i difuziune este sediul
 unor antigene somatice  receptorilor specifici pentru bacteriofagi

particip la diviziunea bacteriei imprim caracterele de tinctorialitate ale celulei bacteriene

Alterarea sau absen a peptidoglicanului duce la pierderea rigidit ii peretelui i implicit la liza bacteriei. O bacterie complet lipsit de perete protoplast i este incapabil de a se divide.

nconjoar citoplasma Grosime 5 10 nm Alc tuit dup modelul mozaicului fluid:

 dou straturi de molecule fosfolipidice  ntre moleculele de fosfolipide se g sesc proteine

Regleaz presiunea osmotic Controleaz procesele de difuzie Con ine enzime ale metabolismului respirator Intervine n cre terea i diviziunea bacteriei Este locul de sintez al endotoxinelor

Sistem coloidal complex: proteine, glucide, lipide, ap , minerale Structur granular :

 Ribozomi 15 nm; izola i sau ca reticul endoplasmatic; rol esen ial n

biosinteza proteinelor celulare  Granula ii de volutin (corpusculi Babe -Ernst, granula ii metacromatice) polimetafosfa i  Granula ii (incluzii) de glicogen, amidon, lipide etc.  Vacuole con in diferite substan e n solu ii nvelite de membran lipoproteic = tonoplast

Con ine mari cantit i de ARN citoplasma intens bazofil

Nu este delimitat de o membran diferen iat , deci NU se poate vorbi de nucleu ! Alc tuit dintr-un cromozom unic Format dintr-o unic molecul de ADN dublu helicat , nchis Diviziunea nucleului precede diviziunea citoplasmei i a peretelui

capsula bacterian cilii (flagelii) fimbriile (pilii) sporul

Capsula bacterian
 capsul

substan gelatinoas , mucoid la exteriorul celulei bacteriene, bine delimitat , vizibil la microscop

Protejeaz celula bacterian de usc ciune M re te virulen a bacteriilor patogene prin mpiedicarea fagocitozei. Substan ele chimice din capsul -antigene si formeaz anticorpi Serurile imune reactioneaz sp. cu antigenele capsulare producnd in vitro o m rire n vol. a capsulei. Fenomenul de ,, umflare a capsulei,, e folosit pt. Ident. sp. i tulpinii unor germeni capsula i.

alc tui i din flagelin protein complex similar cu miozina muscular reprezint antigenul flagelar H pornesc din citoplasma bacteriei, din corpusculul bazal

Forma de rezisten i de conservare a speciei Nu se coloreaz cu colora ii obi nuite; eviden iat prin metode obi nuite O bacterie formeaz un singur spor un spor d na tere unei bacterii Difer ca form , dimensiune, pozi ie

Ap Substan e minerale Glucide Proteine Lipide Pigmen i Enzime Substan e cu ac iune antibiotic Vitamine Factori de cre tere

75-85% din greutatea umed a bacteriei

 Ap liber mediu de dispersie  Ap legat fizico-chimic de diferite structuri

Rol
 Mediu de dispersie  Reactiv n reac ii metabolice  Etap final a unor reac ii

2 30% din greutatea uscat a bacteriei P, K,Na, S, Cl, Fe, oligoelemente, Cu, Mg, Zn Variaz cu:
 Specia  Vrsta culturii  Compozi ia chimic a mediului

Rol:
 Intr n compozi ia diferitelor structuri i enzime
rol important n via a celulei

10 25% din greutatea uscat a bacteriei Variaz cu:

 Specia  Vrsta  Condi iile de dezvoltare

Glucide simple (mono i dizaharide)

 Rol n metabolism

Glucide complexe (polizaharide)

n structura
Peretelui bacterian Capsulei

Au rol plastic i energetic

40 80% din greutatea uscat a bacteriei Rol

 Jum tate func ioneaz ca enzime  Restul rol structural

Pot fi:
 Simple

albumine, globuline, etc.  Complexe heteroproteine

1 10% din greutatea uscat a bacteriei

 Excep ie mycobacteriile 20 - 40%

Variaz cu:
 Specia  Vrsta culturii  Compozi ia mediului

Pot fi:
 Libere

n vacuole  Combinate facnd parte din diferite structuri ale celulei  Perete, membran , etc.

Elaborate sub control genetic Clasificare  Dup locul de ac iune:

Intracelulare r mn n celul Ectocelulare n membrana citoplasmatic
Regleaz permeabilitatea selectiv

Extracelulare (exoenzime) eliberate n mediu

 n raport cu reac ia catalizat :

Hidrolaze, transferaze, oxido-reductaze, izomeraze, etc.

 Dup modul de apari ie:

Constitutive exist ntotdeauna n celul Adaptative sintetizate de c tre bacterie numai ca r spuns la anumi i compu i ap ru i n mediu

Bacteriocine
 Cu efect asupra altor bacterii receptive nrudite

Colicinele eleborate de E. Coli

Antibiotice polipeptidice
 Produse de unele specii de Bacillus

Polimixina produs de B. Polymyxa Bacitracina produs de B. licheniformis

Secretate de unele specii:

 Tiamina (vitamina B1)

E. coli, B. Subtilis  Biotina E. coli, B. Anthracis  Vitamine de grup B, K Sintetizate sub influen a florei bacteriane intestinale

Metaboli i esen iali, pe care bacteria nu i poate sintetiza

 Necesari n cantit i mici dezvolt rii unor bacterii

Nu au rol plastic sau energetic Sunt biocatalizatori Exemple:

 Vitamine (B1, B2, B6)  Factorul X, V  Acid folic, etc

Bacteriile desf oar o activitate metabolic n cursul c reia:

 Cresc  Se multiplic  i schimb structura i compozi ia chimic

Metabolismul bacterian = totalitatea reac iilor biochimice care au loc n celul . Metabolismul:

 Anabolismul  Catabolismul

Nutri ie = totalitatea proceselor metabolice care patricip la producerea de substan e energetice sau de materiale cu rol plastic, necesare sintezei constituen ilor celulari. Bacteriile folosesc surse nutritive diverse: azot molecular, dioxid de carbon, sulf, etc. n func e de tipul de nutri ie, bacteriile pot fi: autotrofe (utilizeaz N i C din compu i anorganici) i heterotrofe (utilizeaz N i C din compu i organici)

n raport cu sursa de energie utilizat , bacteriile autotrofe sunt:

 Fototrofe utilizeaz energia radiant luminoas  Chimiotrofe utilizeaz energia rezultat din reac iile

de oxidoreducere.

Bacteriile patogene sunt heterotrofe, datorit parazitismului i-au pierdut capacitatea de a- i sintetiza elementele de care au nevoie. Pentru cultivarea pe medii artificiale este necesar introducerea unor factori de cre tere: vitamine B1, B2, B6, PP, aminoacizi, etc.

Respira ia bacterian = totalitatea proceselor aerobe i anaerobe prin care celula elibereaz energia necesar activit ii vitale. Aceste reac ii au la baz mecanismul oxidoreducerii. Prin oxidoreducere biologic se n elege pierderea atomilor de hidrogen (a electronilor de c tre o substan chimic numit donor i transferul acestora pe molecula unei alte substan e chimice numit accepor.)

Dup natura acceptorului final de hidrogen, sunt trei tipuri de procese metabolice:  Respira ie aerob (oxibiotic ) n care acceptorul de H este oxigen molecular, produsul rezultat este apa.  Respira ia anaerob (anoxibiotic ), n care acceptorul de H poate fi orice substan anorganic exceptnd O.  Fermenta ia, n care acceptorul de electroni este un compus organic.

n func ie de comportarea fa bacteriile pot fi:

de oxigenul molecular,

 Bacterii strict aerobe (b. tuberculozei, b. c rbunos), care folosesc

oxigenul molecular ca acceptor final de H.  Bacterii strict anaerobe: (b. tetanic, b. botulinic), care se dezvolt numai n prezen a oxigenului.  Bacterii aerobe facultativ anaerobe (stafilococul, b. coli) au posibilitatea s - i adapteze metabolismul n func ie de prezen a sau absen a oxigenului.  Bacterii microaerofile (spirochete), care tolereaz cantit i mici de oxigen.

Cunoa terea fiziologiei bacteriilor ofer posibilitatea s le cre m condi ii optime de cultivare i s aplic m unele teste pentru identificarea lor

Se face n mod obi nuit prin diviziune direct . La bacili este transversal , iar la coci se face dup unul sau mai multe planuri perpendicu-lare care duce la gruparea caracteristic n perechi, lan uri sau gr mezi. Pentru a vorbi despre cre tere i multiplicare bacte-rian folosim urm toarele no iuni:

 Timp de genera ie: timpul necesar dubl rii popula iei bacteriene 20-30 de     

minute. Rata de cre tere: nr. de genera ii n unitate de timp. Colonia bacterian : totalitatea bacteriilor rezultate din multiplicarea unei singure celule. Cultura bacterian : totalitatea coloniilor de pe suprafa a mediului solid. Cultura mixt : format din mai multe tipuri de colonii. Cultura pur : format dintr-un singur tip de colonie.

Multiplicarea popula iei bacteriene

 4 faze caracteristice Faza de laten (faza de lag) Faza de cre tere logaritmic (faza exponen ial ) Faza sta ionar (faza de concentra ie M) Faza de declin

Perioada de adaptare a bacteriilor la condi iile de mediu Num rul germenilor r mne nemodificat sau scade Dureaz 2 ore ntre momentul ns mn rii i momentul cnd bacteria incepe s se multiplice

Celulele bacteriene ncep s se divid ritmic Timpul de genera ie -20 30 minute

 Excep ie Mycobacterium

Num rul de na teri > num rul de decese Virulen a este conservat Dureaz 8 12 ore

tuberculosis: 12-27 ore

Consumul substan elor nutritive > acumulare de metaboli i toxici >mediu de via mai pu in favorabil Num rul de bacteriir mne constant Num rul de na teri = num rul de decese Morfologia este caracteristic ncepe sporogeneza 2 3 zile mediu de cultur rennoit permanent cultur continu

Cantitatea de metaboli i toxici este mare Num rul de na teri < num rul de decese Sporogeneza este foarte intens Apar modific ri morfologice, metabolice, de virulen 2 3 zile/2 3 s pt mni/2 3 luni

SCOP: identificarea agentului etiologic al unei infec ii determinarea farmacorezisten ei microorganismelor izolate preparare seruri i vaccinuri

POPULA IA BACTERIAN : multitudinea de indivizi ai unei specii care habiteaz ntr-un biotop CLONA BACTERIAN : popula ia rezultat dintr-o singur celul prin nmul ire vegetativ (colonie bacterian ) TULPINA BACTERIAN : popula ia microbian alc tuit din descenden ii unei singure izol ri n cultur pur INOCULARE: depunerea unui produs biologic n cultura de celule, animale de laborator

NS MN ARE: depunerea unui produs biologic pe / n mediu de cultur MEDIU DE CULTUR : mediu care asigur nutrien ii i condi iile fizico-chimice necesare cre terii i multiplic rii bacteriene CULTURA BACTERIAN : totalitatea bacteriilor acumulate prin multiplicare pe / n mediul de cultur

Coci Gram-pozitivi
 gr mezi neregulate  aerobi, facultativ anaerobi  imobili  nesporula i  catalazo-pozitivi

 Grupe de interes medical:

 Stafilococi coagulazo - pozitivi Staphylococcus aureus  Stafilococi coagulazo - negativi: Staphylococcus epidermidis Staphylococcus saprophyticus

Staphylococcus aureus:
 colonizeaz n rile i colonul

contaminare

tegument  purt tori s n to i: n colectivitate 10-40% ; n spital 40-70%  rezervor principal: mamifere i p s ri contaminare mediu

Staphylococcus aureus: suport material al transmiterii

 sol,  apa de mare i apa dulce,  suprafa a plantelor,  fructe,  alimente,  mbr c minte,  mobilier,  covoare,  praful i aerul din nc peri

colonizeaz n rile i tegumentul constituen i ai florei normale cutanate (barier de ap rare antimicrobian )

Coci gram-pozitivi Frotiu:din cultur pe mediu solid: dispu i n gr mezi neregulate din cultur n mediu lichid sau din produs patologic:
 extracelular (rar intracelular)  lan uri scurte,  perechi  coci izola i

pe medii solide:
 colonii: S;

n medii lichide :
 tulburare uniform cu depozit moderat la fundul

tubului

rezist
 n culturi, la frigider cteva luni;  n puroi uscat 2-3 luni;

relativ rezisten i la
 antiseptice/dezinfectante (30 la alcool 70)

distru i n 60 minute la temperatura de 60C sensibili la bacteriofagi, la UV

DEOSEBIT DE REZISTEN I LA ANTIBIOTICE !!! Peste 95% rezisten i la penicilin Tulpini rezistente la meticilin (oxacilin ) = polirezistente (cefalosporine, eritromicina, clindamicina) MRSA (stafilococ auriu meticilinorezistent) Sensibil la vancomicin

PROCES INFEC IOS DE TIP INVAZIV TOXIINFEC II DE ETIOLOGIE STAFILOCOCIC

Foliculita infec ia foliculului pilos Furuncul abces n jurul foliculului pilos Hidrosadenit infec ia glandei sudoripare Panari iu infec ie peri- sau subunghial Impetigo stafilococic Mastit Infec ii ale pl gilor chirurgicale, mu cate, t iate Angina stafilococic otite, mastoidite, sinusite etc. Infec ii urinare, uretrit , cistit , pielonefrit

Focare septicemice
 pulmonar (pneumonii, pleurezii)  renal  osos, articular  meningo-cerebral  aparat circulator (endocard, pericard, endoteliu

vascular)