Organismos vivos modificados

Gua para evaluacin y gestin de riesgos

Organismos vivos modificados

Gua para evaluacin y gestin de riesgos
Julia La Rosa Peraza Miguel Lorenzo Hernndez Juan Jos Vilaragut Llanes Leticia Pastor Chirino Orfelina Rodrguez Garca Tania Campos Cuello Leyenis Garca Santos Julia Verdera Hernndez

Centro Nacional de Seguridad Biolgica

La Habana, 2006

Cuidado de la edicin: Silvia Gutirrez Gonzlez Diseo de cubierta e interiores: jvl!o Diagramacin y composicin: Carlos F. Melin Lpez

Centro Nacional de Seguridad Biolgica Calle 28, N 502, entre 5 y 7, Miramar, Playa, Ciudad de La Habana, Cuba. Telfonos: Pizarra: 203-19 35 al 38, extensiones 202 y 205 Directo: 202-3281 Fax: (537) 202-3255 Correo electrnico: csb@orasen.co.cu

ndice ndice

Introduccin / 13 Objetivo y alcance / 18 Trminos y definiciones / 18 Referencias bibliogrficas / 20 Evaluacin de los riesgos de los organismos vivos modificados/ 22 Objetivo / 22 Condiciones para la evaluacin / 22 1. Principios generales de la evaluacin del riesgo / 22 2. Alcance y contexto de la evaluacin del riesgo / 23 3. Informacin disponible / 24 4. Tratamiento de la incertidumbre / 24 Procedimiento para la evaluacin cualitativa de los riesgos / 25 1. Definicin de los efectos adversos relevantes / 26 2. Identificacin de los peligros / 27 3. Evaluacin de posibilidad de ocurrencia de cada peligro identificado / 29 4. Evaluacin de las consecuencias / 29 5. Estimacin general del riesgo por cada peligro identificado / 30 6. Anlisis de la incertidumbre / 32 7. Parmetros de aceptabilidad de los riesgos / 32 Toma de decisiones / 32

Gestin de riesgos / 34 Comunicacin del riesgo / 34 Anexos / 37 Anexo 1. Tcnicas de identificacin de peligros / 39 Tormenta de ideas / 39 Revisin de seguridad / 40 Anlisis preliminar / 43 Lista de chequeo o comprobacin / 44 Anlisis de peligros operacionales (HAZOP) / 46 Qu sucede si? / 48 rbol de fallas / 50 rbol de eventos (sucesos) / 51 Anexo 2. Gua para confeccionar el expediente tcnico de solicitud de autorizacin para actividades con plantas transgnicas / 52 Parte I. Requisitos generales para confeccionar el expediente tcnico de ensayos en instalaciones en las que se hace uso de plantas modificadas genticamente (casa verde u otras instalaciones similares) / 52 A. Receptor / 52 B. Objetivo de la transformacin / 54 C. Mtodo de transformacin / 54 D. Vectores utilizados / 55 E. Elementos genticos incorporados (genes y secuencias) y reexpresin de la protenas / 55 F. Deleciones realizadas / 56 G. Otras modificaciones / 56 H. Caractersticas de la planta modificada / 56 I. Mtodos de deteccin del OVM / 56 J. Caractersticas generales de la instalacin / 57 K. Personal vinculado al ensayo / 57 L. Caractersticas del diseo (segn lo establecido en la resolucin 112/03 del CITMA) / 57 M. Estudios que se harn durante la realizacin del ensayo / 57 N. Cantidad de materiales que se emplearn en el ensayo / 58 . Prcticas y procedimientos / 58
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O. Evaluacin del riesgo / 58 Parte II. Requisitos generales para la confeccin del expediente tcnico de ensayos confinados (en campo) con plantas transgnicas / 59 Parte III: Requisitos generales para confeccionar el expediente tcnico de ensayos no confinados con plantas transgnicas / 61 Parte IV: Requisitos generales para confeccionar el expediente tcnico de comercializacin de plantas modificadas genticamente / 62 Anexo. 3. Lista de chequeo para revisar el expediente tcnico de ensayos en casa verde y liberacin al medio de plantas transgnicas / 64 Receptor / 65 Mtodo de transformacin / 66 Vector / 66 Donantes / 67 Insertos / 67 Organismo vivo modificado / 68 rea de liberacin / 72 Hoja de observaciones / 74 Anexo 4. Documentacin relacionada con la bioseguridad necesaria en el rea de ensayos de campo con plantas transgnicas / 75 Documentacin en el rea de ensayo / 75 Registro de las actividades que se realizarn durante el ensayo / 76 Anexo. 5. Informe de los resultados de los ensayos con plantas transgnicas / 78 Anexo 6. Gua para confeccionar el expediente tcnico de solicitud de autorizacin para actividades con animales transgnicos acuticos / 80 Parte I. Requisitos generales para confeccionar el expediente tcnico de ensayos confinados a pequea escala con animales transgnicos acuticos / 80 A. Receptor / 80 B. Objetivo de la transformacin / 82 C. Mtodo de transformacin / 82 D. Vectores utilizados / 82 E. Datos sobre el donante / 82
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F. Elementos genticos incorporados (genes y secuencias) y expresin / 82 G. Deleciones realizadas / 83 H. Otras modificaciones realizadas / 83 I. Caractersticas del animal resultante / 83 J. Caractersticas generales de la instalacin / 83 K. Personal vinculado al ensayo / 84 L. Desechos / 84 M. Efectos adversos / 84 N. Principales resultados obtenidos en las peceras (etapa de laboratorio) / 84 . Propsito del ensayo / 84 O. Seguimiento o monitoreo / 84 P. Planes de emergencia ante situaciones imprevistas / 84 Parte II: Requisitos generales para confeccionar el expediente tcnico de ensayos confinados a gran escala con animales transgnicos acuticos / 85 Parte III: Requisitos generales para confeccionar el expediente tcnico de comercializacin de animales transgnicos acuticos / 87 Anexo 7. Gua para confeccionar el expediente tcnico de solicitud de autorizacin para actividades con animales transgnicos no acuticos / 89 Parte I. Requisitos generales para confeccionar el expediente tcnico de ensayos confinados a pequea escala con animales transgnicos no acuticos / 89 A. Receptor / 89 B. Objetivo de la transformacin / 92 C. Mtodo de transformacin / 92 D. Vectores utilizados / 92 E. Datos sobre el donante / 92 F. Elementos genticos incorporados (genes y secuencias) y expresin / 93 G. Deleciones realizadas / 93 H. Otras modificaciones / 93 I. Caractersticas del animal resultante / 93 J. Ubicacin y caractersticas generales de la instalacin para los ensayos / 94
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K. Personal vinculado al ensayo / 94 L. Desechos / 95 M. Efectos adversos / 95 N. Informe de los principales resultados obtenidos en el laboratorio / 95 . Propsito del ensayo / 95 O. Seguimiento o monitoreo / 95 P. Planes de emergencia ante situaciones imprevistas / 95 Parte II: Requisitos generales para confeccionar el expediente tcnico de ensayos confinados a gran escala con animales transgnicos no acuticos / 96 Parte III: Requisitos generales para confeccionar el expediente tcnico de comercializacin de animales transgnicos no acuticos / 98 Anexo 8. Lista de chequeo para revisar el expediente tcnico de produccin y ensayos confinados de animales transgnicos acuticos / 100 Receptor / 100 Mtodo de transformacin / 102 Organismo vivo modificado / 102 Instalacin para animales acuticos / 105 Hoja de observaciones / 108 Anexo 9. Lista de chequeo para revisar el expediente tcnico de la produccin y los ensayos confinados con animales transgnicos no acuticos / 109 Receptor / 109 Mtodo de transformacin / 111 Vector / 111 Donantes / 112 Insertos / 113 Organismo vivo modificado / 114 Instalacin para ensayos con animales no acuticos / 118 Hoja de observaciones / 122 Anexo 10. Documentos que deben estar disponibles en la instalacin para ensayos con animales transgnicos acuticos y no acuticos / 123 Contenido de la documentacin / 123
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Registros de las actividades que se realizarn durante el desarrollo del ensayo / 124 Anexo 11. Informe de los resultados de los ensayos con animales transgnicos acuticos y no acuticos / 126 Anexo 12. Medidas de gestin de riesgos de organismos vivos modificados / 128 Plantas. Uso confinado / 128 En instalaciones de investigacin / 128 Durante los ensayos en casa verde / 128 Ensayos de liberacin de plantas al medio / 129 Durante los ensayos de campo / 129 Despus de finalizado el ensayo de campo / 131 Gestin de riesgos para actividades con animales acuticos / 131 Instalaciones de ensayo con animales transgnicos acuticos / 132 Anexo 13. Seguimiento en actividades con organismos vivos modificados / 134 Eventos a los cuales se les dar seguimiento segn la actividad autorizada / 134 Frecuencia y duracin / 135 Muestreo / 135 Mtodos de anlisis estadstico / 135 Tcnicas / 136 Mediante observacin y conteo / 136 Mediante biologa molecular / 136 Informacin sobre seguimiento que debe contener el expediente tcnico para la solicitud de autorizacin / 138 Datos que debe contener el informe final de la entidad solicitante al rgano regulatorio / 139 Informacin sobre seguimiento que deben aportar las entidades encargadas de su ejecucin / 139 Anexo 14. Aplicacin de la gua para la evaluacin y el control de riesgo de actividades con organismos vivos modificados a un caso de estudio. Obtencin de plantas de boniato transgnico resistentes a insectos / 141
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1. Definicin del alcance de la evaluacin de riesgos / 142 2. Descripcin de etapas en l aobtencin del organismo transgnico, tareas en cada una e identificacin de las personas y equipos involucrados en ellas / 142 3. Definicin de los eventos indeseados que se pueden originar / 142 4. Identificacin de las desviaciones en cada una de las tareas / 143 5. Definicin de las causas que originan las desviaciones, eventos indeseados que pueden ocasionar y barreras que permiten detectar e impedir dichos eventos / 143 6. Determinacin del riesgo asociado a cada desviacin / 143 7. Aceptabilidad de los riesgos / 147

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Introduccin troducc Introduccin

La utilizacin de la ingeniera gentica, que comenz a desarrollarse en la dcada de los aos 70, ha permitido el surgimiento de microorganismos, animales y plantas con nuevas caractersticas y un gran nmero de aplicaciones en la industria, la salud y la agricultura. Entre ellas, resultan muy importantes, por su amplia utilizacin, las plantas y los animales modificados genticamente. Aunque stos y sus productos aportan numerosos beneficios, se reconoce internacionalmente que pueden tener efectos adversos sobre la salud humana y la biodiversidad. Por estas razones, a diferencia de otros mtodos de modificacin de plantas y animales, la tecnologa de ADN recombinante se encuentra ampliamente regulada en el mundo. En el ao 2000 los firmantes del Convenio sobre la Diversidad Biolgica adoptaron el Protocolo de Cartagena sobre Seguridad de la Biotecnologa, conocido como Protocolo de Cartagena ratificado hasta el momento por ms de ciento treinta pases, entre los cuales se encuentra Cuba, cuyo objetivo es contribuir a garantizar un nivel adecuado de proteccin en las esferas de la transferencia, la manipulacin y la utilizacin seguras de los organismos vivos modificados (OVMs), resultantes de la biotecnologa moderna, que puedan tener efectos adversos para la conservacin y la utilizacin sostenible de la diversidad biolgica, as como que constituyan riesgos para la salud humana. El Protocolo de Cartagena, al igual que las legislaciones nacionales adoptadas por los pases que desarrollan o importan OVMs, reconoce la

necesidad de que todos los OVMs sean sometidos a una evaluacin de riesgos antes de adoptar una decisin sobre la realizacin de cualquier actividad relacionada con ellos. Aunque el Protocolo de Cartagena contiene disposiciones sobre la evaluacin del riesgo (Artculo 15 y Anexo III) donde se esbozan los principios generales bajo los cuales se llevar a cabo la evaluacin, no establece un procedimiento detallado para su realizacin y, por consiguiente, es necesario continuar desarrollando este aspecto del Protocolo. El Protocolo, por ejemplo, reconoce que la evaluacin del riesgo tendr en cuenta tcnicas reconocidas para identificar los peligros, pero no especifica cules ni cmo aplicarlas. Tampoco detalla cmo medir la probabilidad y las consecuencias de los efectos adversos que pudieran provocar los OVMs ni discute las tcnicas de seguimiento. Aunque el Anexo III hace mencin a la incertidumbre acerca del nivel de los riesgos planteados por un OVM, no explica cmo medir esa incertidumbre. En la actualidad se reconoce que, si bien se cuenta con una gran cantidad de documentos de orientacin sobre evaluacin del riesgo, stos presentan considerables variaciones en cuanto a los pasos para realizarla, los componentes e incluso la terminologa empleada. Tal es el caso de la identificacin de los peligros y la gestin de los riesgos. En algunas metodologas vigentes la identificacin de los peligros puede aparecer como un paso inicial independiente de la evaluacin o como parte de sta. Aunque en la generalidad de los documentos la gestin de riesgos se aborda por separado de la evaluacin de riesgos, por su importancia, en esta gua expondremos sus aspectos ms relevantes. Los mtodos empleados para la evaluacin del riesgo de los OVMs han evolucionado notablemente desde la dcada de los aos 80, cuando para estos fines se comenz a utilizar la experiencia acumulada en las industrias de alto riesgo (nuclear y qumica). Entre los documentos ms importantes que han abordado el tema de la evaluacin del riesgo de los OVMs caben destacarse: las Directrices Tcnicas Internacionales del PNUMA sobre Seguridad de la Biotecnologa que se publicaron en 1995 cinco aos antes de acordar el Protocolo de Cartagena con el objetivo de ofrecer un marco comn para la seguridad de la biotecnologa; dos directivas regulatorias de la Canadian Food Inspection Agency (CFIA), la 2000-07, que contiene una gua para la evaluacin ambiental de plantas modificadas genticamente en experimentos
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confinados y la 94-08, referida a liberaciones no confinadas; la Directiva 2001/18/EC de la Comunidad Europea (y sus disposiciones complementarias), que proporciona una metodologa para la evaluacin del riesgo ambiental de los OVMs en concordancia con el Anexo III del Protocolo de Cartagena, y establece los objetivos del seguimiento; y el Marco para el Anlisis del Riesgo de la Oficina del Regulador de la Tecnologa Gentica de Australia en el ao 2005, que describe los principios para el anlisis del riesgo de los OVMs con el objetivo de proteger la salud humana y el medio ambiente. En cuanto a su alcance y aplicacin, la gama de enfoques de los materiales de orientacin existentes sobre evaluacin del riesgo y gestin de riesgos para actividades con OVMs incluye: 1. Orientacin genrica aplicable a todos los tipos de organismos vivos modificados y vas de riesgo, similar al Anexo III del Protocolo de Cartagena. 2. Orientacin especfica para un OVM en particular (por ejemplo, frijol de soya genticamente modificado) o para un rasgo particular (la tolerancia al glifosato). 3. Orientacin especfica para una categora de OVM o un rasgo (plantas genticamente modificadas, plantas resistentes a los herbicidas, animales y/o peces genticamente modificados, microorganismos genticamente modificados, entre otros). 4. Orientacin especfica para una o ms vas o mecanismos de riesgo (invasin de malas hierbas, efectos en organismos no blancos, desarrollo de resistencia en los insectos, entre otros). 5. Orientacin enfocada hacia un tema particular en la prctica de la evaluacin del riesgo o la gestin de riesgos para actividades con OVMs como elementos especficos de la metodologa (identificacin de peligros potenciales, vigilancia) o temas metodolgicos (incertidumbre en la caracterizacin). 6. Estudios de caso en la aplicacin de evaluacin y gestin de riesgos. Pese a la gran variedad de documentos de orientacin sobre evaluacin del riesgo existentes, incluidas las disposiciones del Protocolo de Cartagena, a los solicitantes de autorizacin para una actividad con OVMs les resulta dif cil realizar una evaluacin del riesgo ambiental y para la salud humana a partir de esos documentos con terminologas, alcances y enfoques
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diferentes, as como tomar decisiones, porque aunque posean amplios conocimientos de gentica, toxicologa, ecologa, microbiologa y otros temas afines a la esfera biolgica, no son expertos en evaluacin de riesgos. Tambin algunos trminos como el de seguimiento no slo aparecen con diferentes significados en los documentos, sino que su importancia y realizacin prctica es an muy discutida en los diferentes sistemas regulatorios de pases que sealan pautas para los OVMs, como los que son miembros de la Unin Europea, y Estados Unidos y Canad. En el caso particular de Cuba, el Centro Nacional de Seguridad Biolgica (CSB), creado en 1996, es el rgano regulador de la seguridad biolgica que concede las autorizaciones o licencias para el uso confinado y las liberaciones al medio ambiente de los organismos vivos modificados. La resolucin 67/96 del CITMA establece en su apartado Tercero que el Centro Nacional de Seguridad Biolgica tiene entre sus funciones: 1. Realizar, en coordinacin con los rganos, organismos, entidades e instituciones que corresponda, las evaluaciones de riesgos para la salud humana y el medio ambiente y proponer las medidas convenientes. 2. Organizar y ejecutar los procedimientos de autorizacin de instalaciones con riesgo biolgico y reas donde se liberen organismos (incluidos los OVMs). 3. Organizar y dirigir las inspecciones a instalaciones y reas de liberacin con riesgo biolgico y reas de liberacin de organismos. En nuestro pas, las actividades que requieren licencias previas a su realizacin, segn el Reglamento para el Otorgamiento de las Autorizaciones de Seguridad Biolgica de la resolucin 76/00 del CITMA, son: 1. Emplazamiento, diseo, proyecto, construccin, remodelacin, puesta en marcha, explotacin y proceso de cierre de instalaciones donde se haga uso de OVMs. 2. Investigacin, produccin y ensayos sobre el terreno que involucren OVMs. 3. Liberacin al medio ambiente de OVMs. 4. Importacin y exportacin de OVMs. 5. Transportacin de OVMs en el territorio nacional. 6. Otras relacionadas con el cumplimiento de los compromisos contrados por la Repblica de Cuba en instrumentos jurdicos internacionales.
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El otorgamiento de las autorizaciones de seguridad biolgica se basa en la evaluacin de riesgos presentada por el propio solicitante y los datos tcnicos y cientficos reglamentados por el Centro Nacional de Seguridad Biolgica en la Resolucin 76/00, as como las medidas de gestin de riesgos que sern puestas en prctica, incluyendo el seguimiento de los organismos, durante el desarrollo de la actividad. Las condiciones de seguridad para las instalaciones donde se manipulan OVMs aparecen en las resoluciones 130/02 y 112/03. En el caso de las reas de liberacin, el Centro de Seguridad Biolgica es el que establece las condiciones para cada una en particular. Aunque hasta el momento nuestro pas no ha comercializado ningn OVM, desde los inicios de la dcada de los 90 viene realizando ensayos con plantas y animales transgnicos, lo cual ha requerido que se realicen evaluaciones de los riesgos y se tomen las medidas necesarias para minimizar aquellos que suponen esas actividades. Hasta 1996, ao en que fue creado el Centro de Seguridad Biolgica, este procedimiento fue llevado a cabo por las instituciones que desarrollaban la tecnologa. En la actualidad, los solicitantes de autorizacin para actividades con OVMs presentan un expediente tcnico, segn lo establecido en los anexos 1 y 2 de la Resolucin 76/00, el cual es analizado en el departamento de Autorizaciones en cuanto a los riesgos potenciales para el hombre y el medio ambiente de la actividad solicitada. Dado el carcter general de la resolucin 76/00, que no especifica la forma en que debe ser realizada la evaluacin, as como las limitaciones actuales del Protocolo de Cartagena y la gran variedad de documentos existentes sobre el tema, hemos elaborado la presente gua dirigida a los solicitantes de autorizacin para trabajar con OVMs y al personal del rgano regulador, con vistas a que la presentacin de la evaluacin de riesgos se corresponda con el nivel actual de conocimientos sobre seguridad de la biotecnologa. La gua estar sujeta a modificaciones a medida que el Protocolo de Cartagena avance en su implementacin y se desarrolle el nivel de conocimientos sobre los posibles efectos adversos de los organismos vivos modificados. Adems de esta gua, el Centro Nacional de Seguridad Biolgica elaborar otras para la evaluacin y la gestin de riesgos de plantas transgnicas utilizadas para la obtencin de frmacos u otras sustancias empleadas con
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fines industriales, el trabajo con invertebrados modificados genticamente y el uso confinado y la liberacin al medio de los microorganismos tambin modificados genticamente. bje alcance Objetivo y alcance El objetivo del presente documento es proveer de una gua a los solicitantes de actividades con OVMs y a los evaluadores del rgano regulador que les facilite: 1. Realizar la evaluacin del riesgo para la salud humana y el medio ambiente que supone la actividad. 2. Adoptar las medidas de gestin que se seguirn durante la realizacin de la actividad, incluido el programa de seguimiento de los efectos adversos. 3. Preparar los datos cientficos y tcnicos para conformar el expediente que se presentar ante el rgano regulador para los casos de plantas y animales transgnicos. 4. Conformar la documentacin que ser objeto de control por parte del rgano regulador durante las inspecciones de las actividades con OVMs. 5. Redactar los informes que se suministrarn al rgano regulador una vez concluido el perodo de vigencia de la autorizacin. La presente gua es aplicable a la evaluacin del riesgo cuando se requiera solicitar autorizacin para el uso confinado y la liberacin al medio de plantas y animales acuticos y no acuticos, obtenidos por tcnicas de la moderna biotecnologa (OVMs), as como en la preparacin del expediente tcnico para esas solicitudes y la elaboracin de la documentacin que permita el control y la recogida de informacin para que el rgano regulador conceda autorizaciones y realice el seguimiento de stas. rminos definicione mino iones Trminos y definiciones Alcance: Parmetros dentro del cual el riesgo ser tratado, incluyendo el enfoque del proceso. Anlisis del riesgo: Proceso de identificar los peligros, sus causas y posibles consecuencias; evaluar, controlar y comunicar los riesgos.
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Beneficio: Valor del efecto adverso que se previene al aplicar una medida de gestin del riesgo. Consecuencia: Resultado o efecto adverso medible de un peligro. Evaluacin del riesgo: Proceso general que consiste en estimar la magnitud del riesgo y decidir si ste es tolerable o no. Evala la frecuencia y las consecuencias de los sucesos que podran resultar de manifestarse los peligros previamente identificados. Gestin de riesgos: Proceso de toma de decisiones para tratar y /o reducir los riesgos, a partir de la informacin obtenida en la evaluacin de riesgos, implantar las acciones correctivas, exigir su cumplimiento y la evaluacin peridica de su eficacia. Identificacin de peligros: Proceso de determinacin de cules son los peligros que pueden ocurrir, por qu y cmo. Incertidumbre: Trmino estadstico referido a la falta de certeza en las conclusiones, ocasionada por la utilizacin slo de una parte de la informacin para inferir conclusiones sobre el todo. En el caso de que la probabilidad no pueda ser calculada, la certeza de la ocurrencia de un evento se determina subjetivamente y depende de la interpretacin de los datos que haga el observador. Liberacin a gran escala: Desarrollo de un OVM con fines de comercializacin y sin la aplicacin de medidas de confinamiento. Organismo vivo modificado: Cualquier organismo vivo que posea una combinacin nueva de material gentico obtenida mediante la aplicacin de la biotecnologa moderna. Peligro: Fuente potencial de un dao en trminos de lesin o causar enfermedad a personas, dao a la propiedad, al medio ambiente o una combinacin de stos. Posibilidad: Es la probabilidad de que se produzca un efecto adverso. El trmino se usa fundamentalmente en las evaluaciones cualitativas. Riesgo: Combinacin de la magnitud de un efecto adverso en la salud humana o el medio ambiente cuando se realiza una actividad con OVMs y la posibilidad de su ocurrencia. Riesgo tolerable o aceptable: Riesgo que es aceptado en un contexto dado, segn criterios establecidos o predeterminados. Riesgo no tolerable o inaceptable: Aquel que despus de tomar en consideracin el alcance de la gestin de riesgos, independientemente de
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cualquier beneficio, supone efectos adversos sobre la salud humana y el medio ambiente. Seguimiento o monitoreo: Conjunto de procedimientos para comprobar la existencia y la magnitud de efectos adversos sobre el medio ambiente provocados por los OVMs liberados. Uso confinado: Cualquier actividad llevada a cabo dentro de un local, instalacin u otra estructura f sica, que entrae la manipulacin de OVMs controlados por medidas especficas que limiten de forma efectiva su contacto con el medio exterior o sus efectos sobre dicho medio. Referenci biblio fic iog ica Referencias bibliogrficas Auer, Carol A. 2003. Tracking Genes from Seed to Supermarket: Techniques and Trends. Trends in Plant Science. Vol. 8, no. 12. CAC/GL. 2003. Proyectos de principios para el anlisis de riesgos de alimentos obtenidos por medios biotecnolgicos modernos. Codex Alimentarius. Diario Oficial de la Unin Europea. Reglamento CE no. 1829/2003 del Parlamento Europeo. EPSA. 2004. Guidance Document of the Scientific Panel on Genetically Modified Organisms for the Risk Assessment of Genetically Modified Plants and Derived Food and Feed. EPSA Journal 99: 1-94. ERMA. 2002. Approach to Risk. ER-OP-03-02 12/02. ERMA. 2004. Decision Making. A Technical Guide to Identifying, Assessing and Evaluating Risks, Costs and Benefits. ER-TG-05-1 03/05. European Food Safety Authority. 2004. Draft Guidance Document for the Risk Assessment of Genetically Modified Plants and Derived Food and Feed. FAO. 2003. Animal Biotechnologies: States of Arts, Risk and Perspectives. FAO/OMS. 2003. Comisin del Codex Alimentarius. Programa sobre Normas Alimentarias del Codex Alimentarius C/GP /03/3. Gene Technology Regulator. 2005. Risk Analysis Framework. Commonwealth of Australia. Gosta, Kjellsson and Morten Strandberg. 2001. Monitoring and Surveillance of Genetically Modified Higher Plants: Guidelines for Procedures and Analysis of Environmental Effects. Berlin: Birkhauser Verlag.
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aluac acin los riesgos los iesgo Evaluacin de los riesgos de los organismo vivo mod icado smos ivos ados organismos vivos modificados

bje Objetivo El objetivo de la evaluacin del riesgo es identificar y valorar, caso por caso, los posibles efectos adversos para la salud y el medio ambiente, directos e indirectos, inmediatos o a largo plazo, que se pueden producir durante el desarrollo de una actividad con OVMs, de manera que se puedan determinar las medidas o estrategias que se deben aplicar para que la gestin de esos riesgos permita obtener un nivel aceptable de seguridad. Condiciones par la evaluac icione ara acin Condiciones para la evaluacin Antes de iniciar cualquier proceso de evaluacin del riesgo de los OVMs es necesario tener en cuenta las condiciones bajo las cuales se desarrollar el proceso: 1. Principios generales de la evaluacin del riesgo. 2. Alcance y contexto de la evaluacin del riesgo. 3. Informacin disponible. 4. Tratamiento de la incertidumbre. 1. Principios generales de la evaluacin del riesgo Segn los principios establecidos en el Anexo III del Protocolo de Cartagena: a) La evaluacin del riesgo deber realizarse con transparencia y de manera cientficamente competente, teniendo en cuenta el asesoramiento de

los expertos y las directrices elaboradas por las organizaciones internacionales pertinentes. b) Las faltas de conocimientos cientficos o de consenso cientfico no necesariamente sern interpretadas como indicadoras de un determinado nivel de riesgo, de la ausencia de ste o de la existencia de uno aceptable. c) Cuando se evalen los riesgos relacionados con los OVMs o sus productos, tambin se debern tener presentes los riesgos inherentes a los organismos no modificados en el medio receptor. d) La evaluacin del riesgo deber realizarse caso por caso, porque la naturaleza y el nivel de detalle de la informacin requerida puede variar de uno a otro, dependiendo del OVM de que se trate, la utilizacin prevista y el medio receptor. 2. Alcance y contexto de la evaluacin del riesgo La determinacin del alcance de la evaluacin del riesgo es un importante paso para la realizacin del proceso. En este momento se define qu tipos de riesgos sern considerados y los criterios que se tendrn en cuenta para determinar si los riesgos identificados son aceptables o no. En la evaluacin del riesgo de actividades con los OVMs se pueden considerar diferentes niveles: etapa de investigacin, casa verde, ensayo confinado y comercializacin. En cada nivel pueden diferir los objetivos de la evaluacin, as como los sucesos iniciadores y los efectos adversos. Es posible que los efectos adversos de un nivel constituyan los sucesos iniciadores del nivel siguiente. Los riesgos de los OVMs para la salud humana se tratan tanto en el uso confinado como durante los ensayos de campo, por los posibles efectos txicos y alergnicos en el personal relacionado con los ensayos y por la posibilidad de que el OVM posteriormente se utilice como alimento. Otro aspecto que se ha de considerar antes de iniciar la evaluacin del riesgo es el contexto dentro del cual se realiza la evaluacin: definicin de la actividad que se realizar, lugar y tiempo de realizacin, recursos requeridos, estudios relacionados con la bioseguridad que pudieran ser necesarios, ambiente institucional de quien realiza la actividad (recursos disponibles y reconocimiento cientfico de la institucin) y propsito de la aplicacin.
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Tambin en el contexto de la aplicacin posterior de las medidas de gestin de riesgos es importante considerar el tipo de organismo y el propsito de la aplicacin (actividad en contencin, ensayo de campo, importacin). Las particularidades de cada pas en cuanto a las prcticas agrcolas y la forma de almacenaje y procesamiento de los productos del campo constituyen un importante aspecto que se ha de considerar antes de iniciar una evaluacin del riesgo, sobre todo, en la etapa de liberacin a gran escala. 3. Informacin disponible Para la realizacin de la evaluacin de los riesgos es necesario basarse en la informacin solicitada por el rgano regulador. La fuente de esta informacin puede variar. En algunos casos son datos provenientes de ensayos o pruebas moleculares, publicaciones o informacin cientfica de agencias internacionales reconocidas. Tambin puede ser suministrada por expertos en la materia, pero en todos los casos lo ms importante es la calidad de la fuente de informacin. 4. Tratamiento de la incertidumbre La evaluacin de riesgos en la esfera de los efectos ambientales a menudo trae como resultado un alto grado de incertidumbre, entre otras causas, por la dificultad para identificar los efectos adversos y la interrelacin, la complejidad de los ecosistemas, la variabilidad natural de las poblaciones y las fuentes de informacin disponibles. El tratamiento de la incertidumbre en el contexto de esta gua est de acuerdo con lo establecido en el Anexo III. Evaluacin de Riesgos, del Protocolo de Cartagena, donde se seala que cuando haya incertidumbre acerca del nivel de riesgos de un OVM se podr subsanar solicitando informacin adicional sobre las cuestiones concretas que son motivo de preocupacin o poniendo en prctica estrategias de gestin de riesgos apropiadas y/o vigilando el OVM en el medio receptor. No obstante, es necesario realizar un anlisis de la incertidumbre que permita conocer los errores o imprecisiones cometidas, para estimar el margen de validez del estudio. Se pueden identificar incertidumbres en: a) Los valores de los parmetros. Surgen de las inexactitudes correspondientes al proceso de estimacin de stos.
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b) Los modelos. Proceden de las deficiencias de los modelos para interpretar la realidad. c) Las relacionadas con el grado de profundidad del estudio. Algunas medidas de la incertidumbre pueden ser: Media Varianza

= Xf ( x)dx
R

x=
i =1

xi n

2 = f ( x)( x ) dx
R 2 1/ 2

v2 =

_ 1 n ( x x) 2 n 1 i =1

Desviacin estndar s = ( )

Proce miento par la evaluac ced ara acin cualit tiva ita los riesgos iesgo Procedimiento para la evaluacin cualitativa de los riesgos La evaluacin cualitativa se utiliza cuando el nivel de riesgo no justifica el tiempo y los recursos necesarios para un anlisis numrico o cuando los datos disponibles son inadecuados para este anlisis. En este tipo de evaluacin se emplean palabras para describir la probabilidad de ocurrencia de los efectos adversos y la magnitud, medida o severidad de stos. Cada caso en particular o grupo de casos puede requerir descriptores nicos, diseados para reducir la ambigedad de la terminologa utilizada en la evaluacin cualitativa. En esta gua la posibilidad y la magnitud de los efectos estimados (consecuencias) de una actividad con OVMs son cualitativas. Para cumplir sus objetivos, la evaluacin cualitativa del riesgo debe contemplar los siguientes pasos: 1. Definicin de los efectos adversos relevantes. 2. Identificacin de peligros (sucesos iniciadores), mediante una tcnica que permita reconocer cualquier caracterstica genotpica y fenotpica nueva relacionada con el OVM, que pueda tener efectos adversos en la diversidad biolgica, en el probable medio receptor o represente un riesgo para la salud humana. 3. Evaluacin de la posibilidad de ocurrencia de cada peligro identificado, teniendo en cuenta el nivel y el tipo de exposicin del probable medio receptor del OVM.
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4. Evaluacin de las consecuencias, si los efectos adversos ocurrieran realmente. 5. Estimacin general del riesgo por cada peligro identificado, basada en la evaluacin de la probabilidad de que los efectos adversos determinados ocurran y sus consecuencias en cada caso. 6. Anlisis de la incertidumbre que permita estimar el margen de validez del estudio. 7. Parmetros de aceptabilidad de los riesgos. El formato de la documentacin del proceso de identificacin de peligros y evaluacin de los riesgos de los OVMs debe tener la estructura que se muestra en la tabla 1. 1. Definicin de los efectos adversos relevantes Los efectos adversos de los OVM son expresin de qu se est tratando de proteger a travs de la evaluacin del riesgo. Para poder realizar la evaluacin los riesgos deben ser factibles de predecir y medir, y se identifican segn el rea de inters de que se trate: a) Individuos. b) Poblacin. c) Especie. d) Comunidades. e) Ecosistemas. f ) Paisajes.
Tabla 1. Identificacin de peligros y evaluacin de riesgos
Frecuencia del suceso iniciador Efecto adverso Posibilidad real de peligro Consecuencia

Suceso iniciador*

Barrera

Comentario

Causa

* O desviacin del proceso (peligro potencial).

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Riesgo

Etapa

Tarea

Tambin se debe tener en cuenta el nivel en el cual se est realizando la evaluacin del riesgo: proceso de obtencin del OVM, ensayo en casa verde, ensayo de campo o comercializacin. En el caso de las plantas transgnicas los efectos adversos ms citados son: a) Toxicidad para seres humanos y animales. b) Alergenicidad para seres humanos y animales. c) Efectos no deseados en el organismo blanco. d) Cambios en el manejo del cultivo. e) Cambios en la susceptibilidad a plagas y enfermedades. f ) Efectos en los procesos bioqumicos. g) Invasividad. h) Otros no esperados de acuerdo con los genes insertados. 2. Identificacin de los peligros Durante esta etapa se identificarn todas las caractersticas de los OVMs, asociadas con la modificacin gentica, que puedan conducir a efectos adversos en la salud humana o el medio ambiente, determinando sus causas. Algo importante en esta etapa es distinguir entre lo que significa peligro, efecto adverso y riesgo, pues en muchos documentos aparecen citados indistintamente, lo cual provoca una gran confusin al conducir una evaluacin de riesgos. No se deber descartar ningn peligro aunque se considere muy baja su posibilidad de ocurrencia. Todos deben ser considerados y gestionados en los prximos pasos de la evaluacin del riesgo. Es por eso que esta etapa se considera la ms importante del proceso de evaluacin. La identificacin de peligros se puede realizar aplicando tcnicas muy variadas de acuerdo con la complejidad y el tipo de proceso de que se trate, los objetivos que se persiguen, la disponibilidad de datos, entre otros factores. Cada equipo evaluador deber seleccionar la o las tcnicas que mejor se adecuen a sus posibilidades y propsitos. Sin embargo, es importante destacar que con independencia del mtodo utilizado, hay que asegurarse de que el anlisis satisfaga los siguientes requisitos generales: a) Carcter sistemtico, estructurado y exhaustivo. Es muy importante que la tcnica seleccionada asegure una realizacin exitosa y uniforme, con independencia del especialista que la aplique, siempre que se encuentre
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debidamente calificado. Para ello debe existir una homogeneidad, preferiblemente en forma de procedimiento, que describa los diferentes pasos, etapas y forma de ejecucin. La tcnica, adems, debe asegurar al mximo que sea dif cil pasar por alto aspectos que pudieran resultar significativos para la seguridad. b) Documentacin de los resultados. Los resultados deben formar parte de un informe para que se puedan revisar por personas diferentes a sus ejecutores. Esto implica la utilizacin de un formato estndar de aspectos, tablas, etc., as como de una nomenclatura uniforme y bien especificada. En caso de que se requieran clculos y anlisis que fundamenten las conclusiones y medidas propuestas, stos deben aparecer con suficientes detalles. c) Validacin mediante prcticas de garanta de calidad. Se recomienda implementar revisiones cruzadas parciales del informe entre especialistas a cargo de reas diferentes del estudio y una revisin integral del informe final por expertos independientes a quienes realizaron el estudio. Las tcnicas aplicables pueden ser muy diversas y de complejidad variable, segn lo requieran el grado de riesgo de la actividad, los datos disponibles y la experiencia de quien las ejecuta. Se pueden dividir de la forma siguiente: a) Basadas en la experiencia (lista de comprobacin o chequeo, tormentas de ideas). b) Tabulares (HAZOP, FMEA,1 Qu sucede si...?). c) Grficas (rbol de eventos, rbol de fallas). d) Inductivas (rbol de eventos, HAZOP, FMEA, Qu sucede si...?). e) Deductivas (rbol de fallas). f ) Cualitativas (HAZOP, lista de comprobacin o chequeo, FMEA, Qu sucede si...?). g) Cuantitativas (rbol de eventos, rbol de fallas). h) Semicuantitativas (William Fine). En el anexo 1 se relacionan algunas de las tcnicas que se pueden utilizar para la determinacin de los peligros de una actividad con OVMs, ya sea confinada o con liberacin al medio.
HAZOP: Hazard and Operability Analysis (anlisis de peligros operacionales); FMEA: Failure Mode and Effects Analysis (modo de falla y anilis de los efectos). 28
1

3. Evaluacin de posibilidad de ocurrencia de cada peligro identificado Durante esta etapa se debe evaluar la posibilidad de ocurrencia de un peligro, teniendo en cuenta el nivel y el tipo de exposicin del probable medio receptor, a partir de los datos y las evidencias obtenidos mediante diferentes fuentes (bases de datos, publicaciones, estudios previos) o el juicio de los expertos. Se pueden identificar peligros con mediciones cualitativas, como se muestra en el ejemplo de la tabla 2.
Tabla 2. Mediciones cualitativas de posible ocurrencia de un peligro Descriptor Altamente posible Descripcin Se espera que ocurra bajo cualquier condicin en la que se realiza la actividad. Posible Puede ocurrir durante el desarrollo normal de la actividad. Poco posible Ocurre slo en condiciones inusuales. Excepcionalmente posible Ocurre slo en condiciones excepcionales.

Si se desea obtener una valoracin semicuantitativa de la posibilidad de ocurrencia de un peligro, se pueden asignar los valores reflejados en la tabla 3.
Tabla 3. Medicin semicuantitativa de posible ocurrencia de un peligro Descriptor Altamente posible Posible Poco posible Excepcionalmente posible Valor 0,9 0,1 0,0001 0,000001

4. Evaluacin de las consecuencias Se debe evaluar la magnitud de las consecuencias de cada efecto adverso potencial. Al igual que en la etapa anterior, en el caso de la liberacin de los OVMs es dif cil estimar las consecuencias ambientales y, sobre todo para la salud humana, a largo plazo, pero los resultados de los estudios experimentales realizados en animales, la comparacin con bases de datos de
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alergenos existentes y las investigaciones de campo y laboratorio acerca de flujo de genes y las afectaciones a organismos no blancos pueden proveer suficiente informacin para llegar a conclusiones con determinado grado de confiabilidad. Las consecuencias tambin se pueden estimar por modelacin de los posibles resultados de un evento, como en el ejemplo que se muestra en la tabla 4.
Tabla 4. Medidas cualitativas de las consecuencias de un efecto adverso o impacto Descriptor Mnimas Descripcin No hay afectaciones al medio ambiente o stas son mnimas. No ocurren lesiones o son mnimas y en pocos individuos, que pudieran requerir primeros auxilios. Menores Alteraciones en comunidades biolgicas limitadas en espacio y tiempo. Lesiones ligeras en personas, que pudieran requerir tratamiento mdico. Intermedias Alteraciones generalizadas en comunidades biolgicas, pero de severidad limitada. Lesiones en personas, que requieren tratamiento mdico. Graves Amplia alteracin biolgica y f sica en ecosistemas, comunidades o especies, que persisten en el tiempo. Lesiones severas en algunas personas que pudieran requerir hospitalizacin o provocar la muerte.

5. Estimacin general del riesgo por cada peligro identificado De acuerdo con el nivel de conocimientos actuales, se debe realizar una estimacin del riesgo para la salud humana y el medio ambiente de cada una de las caractersticas identificadas en el OVM que potencialmente causen efectos adversos, partiendo de suponer que se produzca el efecto adverso y la magnitud de sus consecuencias. De las etapas de la evaluacin cualitativa del riesgo, sta es donde se introduce un mayor grado de incertidumbre, ya que en muchos casos se carece de experiencias y evidencias que permitan realizar la evaluacin. Tambin se puede introducir un alto grado de incertidumbre al extrapolar datos obtenidos en el laboratorio a condiciones no confinadas o a aquellas en que se producen los OVMs para su comercializacin.
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Para la estimacin se utilizan matrices de riesgo, que constituyen un mtodo simple de categorizacin de ste a partir del anlisis combinado de la posibilidad de ocurrencia del evento indeseado y sus consecuencias. Las matrices se construyen en dos ejes, donde uno representa el incremento de la posibilidad de ocurrencia (Y) y el otro, la severidad de las consecuencias (X), como en el ejemplo que se muestra en la tabla 5. El grado de urgencia se establece interceptando ambos ejes.
Tabla 5. Evaluacin cualitativa mediante matriz de caracterizacin del riesgo Riesgo estimado Altamente posible
Posibilidad

Bajo

Moderado

Alto Alto Moderado

Alto Alto Alto Moderado Graves

Posible Poco posible Excepcionalmente posible

Insignificante Bajo Insignificante Bajo

Insignificante Insignificante Bajo Mnimas Menores Intermedias

Consecuencias

Las matrices permiten establecer prioridades para gestionar el riesgo y realizar las acciones correctivas, de manera sencilla, pero estructurada, porque los altos riesgos demandan una accin rpida, los medios indican que hay que implementar estrategias de reduccin del riesgo selectivamente y los bajos se deben revisar peridicamente. Aunque las matrices no constituyen un mtodo que permita cuantificar el riesgo con exactitud, en muchos casos resultan suficientes para establecer prioridades sin que sea necesario un anlisis cuantitativo de los riesgos. Conclusin de la determinacin del riesgo. Se deber realizar una evaluacin global del OVM, que tenga en cuenta las medidas de gestin de los riesgos o barreras. En esta etapa se llega a conclusiones del impacto que tendr la actividad propuesta sobre la salud humana y el medio.
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6. Anlisis de la incertidumbre En la tabla 6 aparece reflejado un modelo de formato para un anlisis cualitativo de la incertidumbre.
Tabla 6. Anlisis cualitativo de incertidumbre de los riesgos No. Tarea rea de anali- anlisis zada Profundi1 dad del estudio Suposiciones principales Impacto Alto MedioBajo

Falta informacin o est por precisar? Se han tratado todos los procesos importantes? Se han considerado todas las secuencias accidentales importantes? Etctera. El modelo es el adecuado? Modelos Si el modelo es vlido sobre cierto rango, se est usando fuera de rango? Etctera. Parmetros Aspectos que hay que tener en cuenta: Los datos son completos o parciales? Se han considerado todas las fallas relevantes? Los datos disponibles son aplicables a casos particulares? Etctera.

7. Parmetros de aceptabilidad de los riesgos La mayor dificultad para determinar las condiciones de seguridad de una actividad radica en definir los parmetros de aceptabilidad de los riesgos. Cuando a nivel estatal existen regulaciones y normas que fijan requisitos de seguridad, la aceptabilidad de los riesgos viene dada por el cumplimiento de esos requisitos, pero cuando no existen estos documentos o el anlisis se hace en entidades, la gravedad de los efectos adversos se cuantifica a travs de las consecuencias. dec siones Toma de decisiones Se pueden tomar decisiones aplicando el criterio ALARP (As Low As Reasonably Practicable), o sea tan bajo como sea razonablemente factible.
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El criterio ALARP se aplica con un esquema triangular que consta de tres zonas: 1. Lmite superior o zona intolerable, donde necesariamente se debe reducir el riesgo. 2. Zona intermedia o ALARP, donde se debe reducir el riesgo a partir de criterios de costo-beneficio. 3. Lmite inferior, a partir del cual el riesgo es despreciable y no se requieren medidas de reduccin adicionales. La mayora de las decisiones se basan en un balance implcito entre el costo y el beneficio, donde se concluye si vale la pena realizar la actividad objeto de evaluacin. Aunque de manera menos general, tambin se reconoce que la actividad evaluada debe maximizar los beneficios para los individuos y la sociedad. El proceso de toma de decisiones para determinar si una mejora de seguridad es razonablemente practicable o no, se convierte entonces en un anlisis costo-beneficio, es decir, se deben adoptar las medidas de reduccin del riesgo, excepto si su costo es ampliamente desproporcionado respecto al del efecto que previene. Los anlisis costo-beneficio se utilizan para evaluar las medidas de seguridad adicionales sobre un proyecto, a travs de la comparacin de: 1. Costo de implementacin de la medida. 2. Beneficio de la medida en trminos de disminucin de los costos implcitos en el efecto que se quiere evitar. El anlisis costo-beneficio por s slo no permite determinar la aceptabilidad tcnica de la solucin propuesta, a menos que se realice a partir de un mtodo que lleve implcito el impacto de la medida en la reduccin del riesgo. Entre los mtodos para efectuar un anlisis costo-beneficio se encuentran: 1. Mtodos de las unidades comunes. 2. Comparacin de variantes. 3. Criterios cuantitativos de justificacin de la accin correctiva.

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Gestin de riesgos riesgos iesgo Una vez que se conoce el riesgo y se han tomado decisiones sobre su aceptabilidad se puede: 1. Aceptar el riesgo evaluado y no desarrollar ninguna accin para controlarlo. Ocurre cuando la posibilidad del efecto adverso o sus consecuencias no son significativas, no se tienen recursos, no existen alternativas en la tecnologa para su intervencin o de antemano se decide aceptar las consecuencias. 2. Financiar el riesgo. Se establecen los mecanismos para el financiamiento total o parcial de las prdidas (retener o transferir el riesgo). 3. Proteger contra el riesgo. Se limitan las consecuencias mediante medidas organizativas, como los planes de emergencia. 4. Prevenir el riesgo. Se acta sobre las condiciones que generan el riesgo, tanto materiales como humanas. La gestin de riesgos est relacionada con el tipo y la utilizacin del OVM previstos, por lo cual vara enormemente segn sea el caso. Aunque existen diferentes estrategias en cuanto al manejo de los riesgos de los OVMs algunas medidas resultan comunes a un gran nmero de casos antes de que sean liberados para la comercializacin, stas son: 1. Control de acceso a reas de ensayos. 2. Aislamiento reproductivo durante ensayos confinados o en contencin mediante: a) Aislamiento espacial (distancias de aislamiento) en los experimentos confinados. b) Aislamiento temporal. 3. Tratamiento de los desechos. 4. Control e inspeccin de las actividades por el solicitante y el Centro Nacional de Seguridad Biolgica. 5. Capacitacin del personal que participa en los ensayos. 6. Seguimiento de los efectos adversos. Comunicac acin rie iesgo Comunicacin del riesgo La comunicacin de riesgos es el intercambio de informacin y opiniones a lo largo de todo el proceso de anlisis de riesgos de los OVMs entre las
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personas que tienen a su cargo la evaluacin y la gestin de los riesgos y los consumidores, la industria, la comunidad acadmica u otros interesados. Su propsito es lograr el compromiso y la participacin de todas las personas que de alguna manera estn relacionadas con la actividad que se realizar con los organismos vivos modificados. El intercambio de informacin incluye todos los factores relacionados con los riesgos, la percepcin de stos, la explicacin de los resultados de la evaluacin y los fundamentos de las decisiones relacionadas con la gestin de riesgos. Es imprescindible que la comunicacin con el pblico sobre este tema proceda de fuentes crebles y confiables.

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ANEXOS

ANEXO 1 nica identi icac tif acin peligro eligros Tcnicas de identificacin de peligros

Entre las tcnicas de identificacin de peligros reconocidas que se pueden aplicar a las actividades con OVMs se encuentran: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Tormenta de ideas. Revisin de seguridad. Anlisis preliminar de riesgos. Lista de chequeo o comprobacin. Anlisis de peligros operacionales (HAZOP) Qu sucede s...? rbol de fallas. rbol de eventos (sucesos).

Tormenta de ideas ormen ment idea La tormenta de ideas es una tcnica muy utilizada en la toma de decisiones pero que tambin se puede emplear para la identificacin de peligros. Se trata bsicamente de reunir a un grupo de personas para que generen ideas alrededor de un tema especfico de inters. Puede estar ms o menos estructurada de acuerdo con el propsito, pero ya sea formal o informal los resultados del proceso deben ser documentados. Durante una tormenta de ideas se deben tener en cuenta todas las opiniones y slo se comenzarn a evaluar cuando en la sesin se hayan agotado stas.

Revisin de seguridad Rev seg idad egu La revisin de seguridad es una tcnica de anlisis de riesgo de carcter cualitativo, consistente en una inspeccin detallada para identificar las caractersticas peligrosas del diseo, las condiciones generales de seguridad de una instalacin y la existente en las prcticas que se realizan. Se puede utilizar como parte de un sistema de gestin de la seguridad orientado a la mejora continua, o cuando existan indicios de un debilitamiento de la seguridad. Su conduccin requiere la participacin cooperativa del personal de la instalacin, tanto de los directivos como de los trabajadores, en las reas de operacin, mantenimiento, seguridad, capacitacin, proteccin f sica, proteccin contra incendios, etc., pues se realiza mediante entrevistas al personal por parte de los miembros del equipo que conduce la revisin de seguridad. De manera general, la revisin de seguridad se orienta a identificar las modificaciones y ajustes en los procedimientos operacionales y de emergencia que puedan ser necesarios, as como los peligros que requieren contramedidas ms efectivas, incluidos los nuevos derivados de la introduccin de cambios tecnolgicos y que no haban sido previstos o considerados suficientemente con anterioridad. Se trata, por tanto, de un diagnstico detallado sobre la seguridad de la instalacin, las dificultades e insuficiencias ms significativas y la proposicin de las contramedidas que se requieren. Esta tcnica precisa de una gua bien detallada y exhaustiva que se pueda seguir paso a paso para asegurar la efectividad de la revisin con un enfoque sistmico. Para ello se recomienda seguir una gua general acerca del cumplimiento de los principios bsicos de seguridad, as como de todos los aspectos especficos de la tecnologa de que se trate, los cuales se deben extraer de los documentos regulatorios y normativos nacionales sobre la seguridad de esas instalaciones, as como de las mejores prcticas internacionales. La realizacin de una revisin de seguridad consta de tres etapas fundamentales: preparacin, realizacin y documentacin de los resultados. Preparacin Se definen los objetivos y el alcance de la revisin en cuanto a los sistemas y procedimientos que sern objeto de anlisis. Se adopta una gua suficientemente abarcadora y exhaustiva de los aspectos que se evaluarn. Se conforma un equipo de trabajo para conducir la revisin, integrado por
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especialistas altamente calificados en las disciplinas contempladas, segn el alcance de la revisin, y se selecciona el lder del equipo. Los revisores no deben pertenecer a las reas que les corresponde inspeccionar. Se establece un plan calendario de las actividades que abarca la revisin, que incluye los nombres de los responsables y las fechas de cumplimiento de cada actividad. El plan calendario puede establecer los horarios de las entrevistas ms importantes, particularmente las se que deban realizar al personal de direccin. Como parte de la preparacin, se dispondr de toda la documentacin necesaria, la cual ser revisada con antelacin a la inspeccin. Esta documentacin incluye las descripciones de la instalacin y sus procedimientos de trabajo, los esquemas tecnolgicos, los planos, los registros histricos sobre condiciones peligrosas y accidentes, toda la base regulatoria y normativa aplicable, incluidos los documentos internos de la propia entidad y su casa matriz, as como los resultados de las auditoras e inspecciones anteriores en el campo de la seguridad. Realizacin El proceso se basa tanto en el diagnstico visual de la instalacin y la informacin obtenida de las entrevistas al personal, como en el examen detallado de los registros de trabajo (operacin, mantenimiento, seguridad, capacitacin, etc.) y la documentacin con que trabaja el personal. La revisin se centra en los equipos ms crticos, sin olvidar aquellos que constituyen soportes indispensables para el funcionamiento de los primeros. El objetivo principal es determinar si todos los peligros estn identificados y considerados de manera correcta, si se cumplen las exigencias regulatorias y normativas vigentes y si el personal cumple cabalmente los procedimientos establecidos. De forma habitual, primero se realiza un recorrido general para familiarizarse con la instalacin y en los das subsiguientes se efectan los recorridos y entrevistas especficos por reas, de acuerdo con lo establecido en el plan calendario. En los recorridos se observa cmo el personal desempea las actividades a su cargo. Como parte del plan calendario se pueden prever sesiones de trabajo para comprobar la actuacin del personal ante determinadas situaciones de emergencia. La comprobacin se puede realizar mediante respuestas verbales o a travs de algn simulacro que no afecte el trabajo ni la seguridad del proceso.
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Al final de cada jornada los miembros del equipo rinden un parte diario escrito sobre la marcha de la revisin y se renen para debatirlo, con el lder del equipo como moderador. El parte escrito refleja los aspectos positivos relevantes y los problemas de seguridad identificados como candidatos a formar parte del informe final de la revisin. Estos hallazgos se debaten en la reunin del equipo para sacar ventaja de la sinergia que se logra mediante el intercambio de ideas entre un grupo de expertos de alta calificacin. Como resultado de las reuniones tambin se van identificando por consenso los aspectos que se considerarn en el informe final. Seguidamente, se presenta una pequea lista de chequeo tipo sobre algunos aspectos importantes que se deben considerar en la revisin: 1. Si existe algn sistema que permita mantener actualizados los planos y la documentacin de los procesos importantes. 2. Si el equipamiento tcnico se mantiene en buenas condiciones. 3. Si los registros de la instalacin muestran un historial de inspecciones y pruebas de los equipos y dispositivos de seguridad. 4. Si la entidad cuenta con inspectores entrenados disponibles, cuyas recomendaciones sobre reparacin o reemplazo son aceptadas por la alta gerencia. 5. Si se siguen prcticas de seguridad del trabajo y se solicitan permisos para la realizacin de actividades con riesgo. La revisin debe examinar con detalle los planes de emergencia, su viabilidad y grado de coordinacin con las entidades externas que participan, as como los resultados de los simulacros realizados. Documentacin de los resultados Una vez concluida la inspeccin, se prepara el reporte final con los hallazgos y recomendaciones fundamentales. El informe puede contener la fundamentacin de algunas de las medidas propuestas. Recoge, adems, las consideraciones generales sobre el estado de la seguridad en la instalacin. El lder del equipo presenta el informe a la alta direccin de la entidad, con la participacin de todos los miembros del equipo de revisin. A partir de este momento el personal directivo de la entidad debe adoptar un programa de medidas para elevar los niveles de seguridad de la
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instalacin o proceso, as como las actividades de seguimiento que considere necesarias. Anlisis preliminar Anlisis preliminar Como su nombre lo indica, se trata de una tcnica preliminar para el examen sistemtico de una instalacin o proceso y la identificacin de la naturaleza y el posible impacto de los peligros existentes. La aplicacin de esta tcnica, por tanto, se considera una fase inicial, que debe tener una continuidad posterior con estudios de riesgo ms detallados sobre los peligros identificados. Se aplica fundamentalmente en las etapas tempranas de concepcin y diseo de una instalacin o proceso peligroso. De esta forma es posible identificar los peligros en el momento en que se puede realizar su correccin con el menor costo, as como tambin establecer guas de seguridad para su posterior aplicacin durante la operacin. As los peligros principales se pueden eliminar, minimizar o controlar desde el inicio. Tambin esta tcnica se puede aplicar para realizar una revisin de seguridad gruesa en una instalacin en operacin. El objetivo de la tcnica es examinar, de la forma ms sistemtica y exhaustiva posible, todos los componentes, operaciones y aspectos de importancia para la seguridad, de modo que se puedan identificar los peligros existentes y las contramedidas necesarias. Para ello se debe partir de una lista de todos los elementos del sistema que sern objeto de anlisis y de los peligros de inters que se han de considerar. La realizacin del anlisis preliminar de peligros tambin se desarrolla en tres etapas: preparacin, realizacin y documentacin de los resultados. Preparacin Se requiere la conformacin de un equipo de revisin y seleccionar un lder. Se definen inicialmente los objetivos y el alcance del anlisis, as como la lista de los equipos y peligros que se examinarn. Para la confeccin de la lista resulta muy conveniente revisar los estudios de peligros que se hayan hecho con anterioridad en instalaciones o procesos similares. Se debe disponer, adems, de toda la documentacin tcnica del proceso o instalacin objeto de estudio. Finalmente, es importante una clara definicin previa de los criterios que se seguirn para la clasificacin de
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los peligros en cuatro categoras principales, como por ejemplo: despreciable, marginal, crtico y catastrfico. Realizacin El anlisis se realiza de forma sistemtica y exhaustiva, siguiendo la lista previamente establecida. De esta forma se van identificando los peligros y las situaciones accidentales que podran conducir a consecuencias no deseadas. Conjuntamente con la identificacin de cada peligro es necesario determinar las causas principales que lo originan, de modo que se justifique la necesidad de darle crdito. Cada peligro se clasifica en uno de los cuatro niveles de la escala antes sealada. Adicionalmente se determinan los efectos que podran derivarse del peligro identificado y se sugieren las medidas correctoras necesarias. El proceso descrito se debe realizar aplicando tcnicas de trabajo en grupo para el debate y la adopcin de acuerdos por consenso acerca del contenido del reporte final. Documentacin de los resultados Los resultados se documentan en forma de tabla, con las siguientes columnas: peligro, causas principales, efectos ms importantes, categora del peligro y medidas correctivas o preventivas sugeridas. El informe sirve de base para orientar la toma de decisiones en cuanto a la adopcin de medidas en materia de diseo que permitan eliminar o contrarrestar los peligros identificados desde una etapa temprana, a un costo relativamente bajo. sta cheque queo comprobacin probac Lista de chequeo o comprobacin La lista de chequeo es una tcnica de anlisis de riesgo basada en la experiencia de quien la confecciona. Consiste en aplicar un cuestionario que cubra los aspectos de seguridad relativos a los materiales, equipos y procedimientos de trabajo de la instalacin o proceso peligroso. De esta forma es posible identificar tipos de peligros, deficiencias de diseo y situaciones accidentales que podran presentarse en los procesos y en las operaciones que se realizan. Se puede aplicar con variados objetivos, como por ejemplo: evaluar la seguridad del diseo en una tecnologa donde la entidad ha acumulado gran experiencia, evaluar la presencia de peligros sobre los cuales se cuenta
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con una vasta experiencia a travs de aos de operacin de sistemas similares, determinar el cumplimiento de requisitos regulatorios y normativos en materia de seguridad, as como en el cumplimiento de requisitos de cultura de seguridad o la realizacin de inspecciones para comprobar sta. En algunos casos, como podra ser el de la cultura de seguridad, es posible establecer una puntuacin por aspecto, la cual permita dar una calificacin final que refleje el grado de cumplimiento existente. La dificultad fundamental es la necesidad de preparar una lista de chequeo que cubra adecuadamente todos los aspectos importantes de seguridad de lo que se pretende evaluar. Por ello, aunque la lista de chequeo puede ser aplicada por personal con un mnimo de experiencia, su elaboracin requiere de expertos de alta calificacin y amplio dominio del proceso y sus eventuales problemas de seguridad. Para conformarlas se pueden utilizar listas genricas aplicadas en tecnologas similares y adecuarlas a las condiciones especficas. Tambin resulta sumamente importante un conocimiento profundo de los aspectos regulatorios y normativos aplicables al objeto en materia de seguridad, para que ellos queden incluidos en el contenido de la lista. El proceso de aplicacin de una lista de chequeo consta de cuatro etapas: elaboracin de la lista, preparacin, revisin y documentacin de los resultados. Elaboracin de la lista En esta etapa se prepara la lista de chequeo sobre la base de las fuentes de informacin disponibles, que pueden ser guas de seguridad, documentos normativos y regulatorios, listas de chequeo para procesos similares, etc. El experto o grupo de expertos que prepara la lista deber volcar toda su experiencia en el completamiento y adecuacin de sta para que refleje de manera satisfactoria y lo ms exhaustivamente posible las caractersticas y los eventuales problemas de seguridad que resulta necesario abarcar. Por eso, los especialistas que preparan la lista deben conocer muy bien el proceso, su explotacin y la base normativa de seguridad aplicable a ste. Preparacin En este caso, los objetivos y el alcance ya vienen determinados por la lista de chequeo que se aplicar, pero eso no basta, es necesario definir otros aspectos organizativos previos al desarrollo de la revisin, como
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son: conformacin del equipo de trabajo que aplicar la lista y su divisin por reas de competencia, y el plan calendario para la realizacin de las actividades de revisin. La lista podra ser aplicada por una nica persona, pero si se trata de un equipo es necesario seleccionar su lder. Como parte de la preparacin tambin es necesario disponer de toda la documentacin tcnica relacionada con la instalacin o proceso (descripciones, procedimientos de trabajo, esquemas tecnolgicos, planos, etc.), la cual debe ser revisada con antelacin a la revisin. Realizacin Cuando se trata de un expediente tcnico, la lista se va llenando sobre la base de la informacin disponible en el expediente y el examen de la documentacin tcnica y la informacin aportada por los expertos consultados. Cuando las caractersticas apreciadas no se corresponden con algn aspecto de la lista, se toma nota de la insuficiencia y se argumenta su incumplimiento, incluyendo, en lo posible, proposiciones de las medidas correctoras. Si se trata de un equipo de revisin, estas insuficiencias deben ser analizadas colectivamente y enriquecidas mediante la sinergia del trabajo en grupo. Documentacin de los resultados El reporte final contiene una relacin de aquellos aspectos de la lista de chequeo donde se presentaron problemas, los incumplimientos apreciados, la argumentacin tcnica necesaria y, eventualmente, las posibles medidas correctoras que se deben aplicar en cada caso. Adems, debe anexarse la lista de chequeo aplicada. Anlisis peligro operacionale (HA eligros eracionales Anlisis de peligros operacionales (HAZOP) Se trata de una tcnica de anlisis diseada para potenciar la capacidad de detectar peligros por parte de un grupo de expertos multidisciplinario, sobre la base de su interaccin creativa. Por ello para que un estudio de este tipo pueda ser denominado HAZOP tiene que haber sido realizado por un colectivo de expertos aplicando tcnicas de trabajo en grupo. Se orienta a la deteccin de los peligros derivados de las posibles desviaciones en los parmetros, procesos y acciones que se ejecutan, siguiendo una gua que asegure el carcter exhaustivo del anlisis. Se ha aplicado en
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instalaciones donde se manipula ADN recombinante y para liberacin al medio de los organismos vivos modificados. Es una tcnica sistemtica y estructurada, que tiene en cuenta las experiencias de los analistas, sirve para analizar un amplio espectro de riesgos y se aplica durante cualquier fase de vida de la instalacin o proceso. Para la ejecucin de esta tcnica la instalacin o proceso se subdivide en nodos de estudio, secciones del proceso o pasos operativos. En cada uno el equipo de analistas se plantea todas las posibles desviaciones del proceso y analiza sus posibles consecuencias y las contramedidas necesarias. El carcter exhaustivo de las desviaciones posibles se asegura utilizando combinaciones de palabras claves que se aplican a una lista de parmetros tpicos. Es por ello que HAZOP depende de una gua y de las palabras claves que sirven de base a su realizacin. Existen diferentes guas de acuerdo con las preferencias y especificidad de determinadas entidades y sectores. Como ejemplo de palabras claves se pueden utilizar: no, ms, menos, adems de, parte de, inverso, etc. Estas palabras se aplican a una lista de parmetros comunes del proceso. Lo ms complejo del mtodo es establecer todas las posibles desviaciones del proceso respecto a su operacin normal. Lo que sigue es lo habitual en otras tcnicas descritas con anterioridad, es decir, la determinacin de las posibles consecuencias o peligros de cada desviacin y, cuando proceda, las medidas necesarias para contrarrestar dicho peligro. El procedimiento de anlisis tambin se divide en las etapas de preparacin, realizacin y documentacin. Preparacin La preparacin abarca la definicin de los objetivos y el alcance del estudio, la seleccin del equipo y su lder, la obtencin de la informacin tcnica necesaria y la conversin de los datos en una forma adecuada para el estudio. Esta actividad requiere un trabajo previo para seleccionar los nodos en que se dividir el proceso y el establecimiento de un plan que refleje las etapas y la secuencia en que se llevar a cabo. El lder del equipo tambin podr realizar un trabajo previo de adecuacin de las listas de palabras claves y parmetros que se utilizarn para la formulacin de las desviaciones, estimar los tiempos que podr demorar la evaluacin de cada uno de los nodos y establecer un calendario
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de reuniones para la realizacin del estudio, tratando de que no resulten demasiado extensas. Realizacin El desarrollo del estudio sigue un algoritmo mediante el cual se van estableciendo una a una todas las combinaciones posibles de palabras claves y parmetros para cada seccin o nodo del proceso, con el fin de determinar todas las desviaciones posibles y examinar las consecuencias asociadas a ellas, considerando las fallas de todas las protecciones que actan ante dicha desviacin. Se listan las posibles causas de la desviacin para darle credibilidad, se identifican las protecciones existentes que permiten prever dicha desviacin y se juzga si el riesgo resulta aceptable tomando en cuenta, las consecuencias, causas y protecciones existentes. Finalmente, si procede, se plantean las acciones adicionales necesarias para contrarrestar la desviacin. Documentacin de los resultados La documentacin de los resultados consta de: breve descripcin del proceso, relacin de los esquemas tecnolgicos y procedimientos cubiertos por el alcance del estudio, composicin del equipo de estudio, breve descripcin de la forma en que se us la tcnica HAZOP y lista de las posibles mejoras a la seguridad para que sea considerada por la alta direccin. Adems, se anexa una tabla que contenga el planteamiento de cada una de las desviaciones posibles y el anlisis realizado. La tabla consta de las columnas siguientes: desviacin, causas, consecuencias, protecciones, acciones. Como en los casos anteriores, el proceso contina con posterioridad al estudio, mediante la ejecucin de un plan de medidas y el seguimiento de su ejecucin real. Qu sucede Qu sucede si? Se trata de un mtodo de anlisis de riesgo creativo, basado en tormentas de ideas y tcnicas de trabajo en grupo. Consiste en recorrer el proceso o instalacin de acuerdo con su flujo productivo y plantearse en cada paso de ste todas las preguntas sobre la seguridad que puedan inquietar al equipo.
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Tiene la gran desventaja de que esta aproximacin no asegura el carcter exhaustivo del anlisis y si se realiza por un equipo de trabajo de poca experiencia en la tecnologa y/o el mtodo de anlisis, los resultados pueden ser muy incompletos. El mtodo permite identificar escenarios de potenciales accidentes, derivados de las respuestas a las preguntas. Un ejemplo de pregunta puede ser: Qu sucede si no se han identificado debidamente las semillas transgnicas en un almacn del rea experimental? El equipo de anlisis tratar de dar respuesta a la pregunta, de donde se derivarn las posibles consecuencias y las contramedidas necesarias. Como en casos anteriores, el proceso de anlisis consta de tres etapas: preparacin, realizacin y documentacin de los resultados. Preparacin Resulta muy importante disponer de la documentacin necesaria y que los miembros del equipo la estudien antes de las sesiones de discusin. Tambin puede ser til emplear un tiempo para la familiarizacin con el proceso antes de dar inicio a las sesiones de trabajo colectivo. Realizacin El estudio debe comenzar con una presentacin sobre las caractersticas del proceso y los aspectos de seguridad por parte de personal de experiencia. A partir de aqu, el lder del equipo hace su proposicin de los objetivos y el alcance del estudio, lo cuales se debaten hasta lograr consenso. Despus se realizan las sesiones de trabajo moderadas por el lder. La variante ms recomendada es avanzar de un segmento o parte del proceso al siguiente y plantearse en cada etapa una tormenta de ideas que recoja todas las preguntas concernientes para despus comenzar a responderlas una a una. Se recomienda que este proceso no se extienda durante muchas horas ni por muchos das consecutivos, aunque el equipo no se debe apurar, sino tomarse su tiempo en cada paso para asegurar que todos los posibles problemas de seguridad han sido agotados. Documentacin de los resultados Los resultados se documentan en forma de tabla, cuyas columnas deben contener la siguiente informacin: Qu sucede si...?, consecuencia o peligro, medidas de seguridad disponibles y recomendaciones. Adems de la
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tabla, se presenta una relacin con todas las sugerencias para elevar la seguridad, derivadas del anlisis de riesgo realizado. Al igual que en otras tcnicas, este proceso debe conducir a un plan de medidas para la solucin de las insuficiencias de seguridad, incluido el seguimiento de su real ejecucin. rbol fall alla rbol de fallas Los rboles de fallas constituyen una tcnica utilizada ampliamente en los anlisis de riesgos debido a que proporcionan resultados tanto cualitativos como cuantitativos. Esta tcnica consiste en un proceso deductivo basado en las leyes del lgebra de Boole, que permite determinar la expresin de sucesos complejos estudiados en funcin de las fallas bsicas de los elementos que intervienen en ellos y calcular su probabilidad. Tambin permite apreciar en forma cualitativa, qu sucesos son menos probables porque requieren la ocurrencia simultnea de numerosas causas. En la tcnica del rbol de fallas caben destacarse dos fases bien diferenciadas: elaboracin del rbol y anlisis de los resultados. La elaboracin del rbol se realiza grficamente descomponiendo de manera sistemtica un suceso complejo, denominado suceso tope, en sucesos intermedios hasta llegar a sucesos bsicos. El suceso tope tiene que estar bien definido, ocupa la parte superior de la estructura lgica que representa el rbol de fallas y se representa mediante un rectngulo. Los sucesos intermedios tambin se representan como rectngulos y a ellos se llega como parte del proceso de descomposicin del suceso tope o de los propios sucesos intermedios. Los sucesos bsicos son los que terminan la descomposicin y constituyen cualquier tipo de falla, error humano o evento probable. Se representan como crculos en la estructura del rbol. Existen tambin los denominados sucesos no desarrollados que son aquellos que no se siguen descomponiendo, bien por falta de informacin o porque no se considera necesario. Se representan mediante un rombo y se tratan como sucesos bsicos. En el proceso de descomposicin del rbol se recurre a una serie de puertas lgicas que representan los operadores del lgebra de sucesos. Los dos tipos ms elementales corresponden a las puertas Y y O. La puerta O significa que siempre ocurrir una salida lgica cuando por lo menos se produzca una de sus entradas lgicas. La puerta Y se utiliza para indicar
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que para que ocurra la salida lgica es necesario que conjuntamente se produzcan todas sus entradas lgicas. Los resultados de los rboles de falla se obtienen aplicando el lgebra de Boole (habitualmente mediante software) para hallar las combinaciones mnimas de sucesos primarios cuya ocurrencia simultnea garantiza que ocurra el propio suceso tope. Cada una de estas combinaciones tambin llamadas conjunto mnimo de fallas, corresponde a la interseccin lgica de varios sucesos elementales. Si se dispone de los datos probabilsticos de los sucesos bsicos, tambin es factible cuantificar la probabilidad de ocurrencia del suceso tope y la de los sucesos intermedios. En los anlisis mediante rboles de fallas se suele recurrir a otros estudios para precisar mejor los resultados. Entre ellos se destacan los anlisis de sensibilidad, de importancia y de incertidumbre. rbol eventos (suces vento rbol de eventos (sucesos) El anlisis mediante rboles de eventos permite evaluar las consecuencias que pueden tener lugar a partir de un suceso determinado o suceso iniciador de accidente. En este caso no interesa tanto estudiar cmo puede originarse el suceso iniciador, sino cules son sus posibles resultados. Por tanto, se hace nfasis en un suceso inicial que se supone ya ha ocurrido, y se construye un rbol lgico que conecta dicho suceso inicial con los efectos finales, donde cada rama del rbol representa una lnea de evolucin que conduce a un efecto final, o la ausencia de ste, si una secuencia de circunstancias favorables es capaz de anular sus consecuencias. El anlisis con rboles de eventos es especialmente adecuado para estudiar posibles secuencias de evolucin de acontecimientos tras un suceso iniciador, lo cual permite analizar los escenarios posibles y establecer entre ellos una jerarqua en cuanto a su gravedad y verosimilitud. Se desarrolla de acuerdo con el siguiente esquema: 1. Identificacin de los sucesos iniciadores relevantes. 2. Identificacin de las barreras de seguridad requeridas para responder al suceso iniciador. 3. Construccin del rbol de eventos y determinacin de las secuencias accidentales. 4. Cuantificacin de probabilidades y anlisis de los resultados.
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ANEXO 2 Gua para confeccionar el expediente tcnico de solicitud de autorizacin para actividades con plantas transgnicas

arte Requ sitos generale par confecc qui ales ara ccionar ex iente tc Parte I. Requisitos generales para confeccionar el expediente tcnico nstalacione se us plan ant ensayos instalaciones la de ensayos en instalaciones en las que se hace uso de plantas mod icad genticamente (c ada ticamen otra instalaciones similares) nstalacione milare modificadas genticamente (casa verde u otras instalaciones similares) Cuando se trate de ensayos preliminares con plantas modificadas genticamente, que se realizan en las casas verdes u otras instalaciones similares, no se requerir autorizacin individual para cada evento de transformacin, sino que se pueden autorizar grupos de eventos que correspondan a iguales construcciones genticas, con un mismo mtodo de transformacin y en una misma variedad receptora. Los datos que debe llenar el solicitante de la autorizacin son los siguientes: A. Receptor 1. Taxonoma de la especie transformada. Diga: a) Nombre cientfico. b) Nombre comn. c) Variedad/lnea. d) Familia. e) Sinonimia. En el caso de que el OVM haya sido obtenido por el cruce de dos variedades transgnicas, seale las variedades de que se trata.

2. Denominacin del evento de transformacin. Describa la forma de denominar los eventos de transformacin (se puede utilizar la empleada en los registros de la instalacin donde se obtuvo la planta transgnica. 3. Origen de la variedad o lnea (institucin donde se obtuvo la variedad). Seale la fuente de donde proviene la o las variedades. 4. Mtodos o documentos utilizados para confirmar la identidad del receptor, incluyendo los descriptores de la variedad. Detalle si existe alguna documentacin que demuestre la identidad de la variedad o si fue donada por alguna autoridad reconocida para estos fines. 5. Importancia econmica de la variedad empleada. Informacin de su utilizacin como cultivo. Demuestre, mediante la presentacin de datos que lo avalen, la importancia de la o las variedades que dan origen al OVM. 6. Centro de origen y diversidad de la especie. Seale: a) Centro de origen. b) Diversidad de la especie transformada. c) Datos sobre la diversidad de germoplasma presente en el pas y la necesidad de su conservacin. 7. Biologa de la especie o variedad. Describa: a) Gentica (ploida, composicin del genoma). b) Morfologa de la especie (brevemente), si no se han presentado los descriptores de la variedad. c) Ciclo de vida (anual, bianual, perenne) y fenologa del cultivo. d) Formas de reproduccin. e) Factores que afectan la reproduccin. f ) Compatibilidad sexual con otras especies cultivadas o silvestres. g) Posibilidad de supervivencia o dormancia de las estructuras reproductivas por perodos prolongados de tiempo. h) Factores que afectan la supervivencia de la variedad. i) Posibles formas de diseminacin del polen y las semillas. j) Condiciones ecolgicas en las cuales se desarrolla la especie, detallando si se conoce que puede desarrollarse en ecosistemas naturales.
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8. Principales prcticas culturales y fitosanitarias del cultivo en Cuba. Refleje las prcticas culturales y fitosanitarias establecidas para el cultivo en Cuba y mencione la fuente. 9. Informacin sobre las plagas y enfermedades que afectan el cultivo y sobre otros organismos asociados. Relacione las principales plagas y enfermedades que causan daos al cultivo en Cuba. 10. Posible toxicidad para animales, seres humanos u otros organismos. Detalle si se conoce que la especie provoque efectos txicos en animales, seres humanos o otros organismos. Descrbalos. 11. Datos sobre modificaciones similares. Diga si existen antecedentes de modificaciones similares realizadas en la especie receptora, fundamentalmente si existen eventos autorizados para la comercializacin. B. Objetivo de la transformacin 1. Objetivo de la transformacin realizada. a) Describa el objetivo de la transformacin realizada detallando los mecanismos o rutas a travs de los cuales se lograr. b) Detalle la utilizacin prevista de la planta modificada genticamente. C. Mtodo de transformacin 1. Mtodo de transformacin empleado. a) Describa y provea referencias acerca del mtodo de transformacin empleado para la insercin o delecin del cido nucleico o para cualquier otra modificacin realizada. b) En el caso de inserciones de cidos nucleicos mediante mtodo de transformacin directa, describa la naturaleza y la fuente de cualquier ADN transportador utilizado. c) En el caso de la transformacin mediante Agrobacterium, provea informacin de la cepa empleada, su diseo, forma en que el plsmido Ti fue desarmado y cmo se inactiv la bacteria de los tejidos vegetales transformados. d) Si se trata de otros sistemas diferentes a Agrobacterium, detalle si se utilizan organismos o secuencias patgenas y cmo fueron removidas.
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e) Si el proceso de transformacin implica el uso de plsmidos, ayudantes o mezclas de plsmidos, descrbalos en forma detallada. 2. Mtodo de transformacin para plantas transgnicas obtenidas por cruzamiento entre dos plantas transgnicas (genes combinados). Detalle todo el proceso a partir del cual fue obtenida la lnea transgnica. D. Vectores utilizados a) Describa los plsmidos utilizados. b) Seale la naturaleza y la fuente (nombre cientfico o comercial del organismo donante) del vector. c) Incluya mapa f sico y gentico de los cidos nucleicos utilizados en la transformacin. d) Proporcione informacin del lugar donde se describieron, aislaron y caracterizaron las secuencias funcionales de cada componente gentico. e) Seale las regiones codificantes y secuencias no codificantes. f ) Indique sitios de restriccin de inters para la identificacin del OVM. g) Seale las regiones usadas como sondas y/o primers para pruebas de PCR. E. Elementos genticos incorporados (genes y secuencias) y reexpresin de la protenas a) Describa los elementos genticos (incluyendo reguladores, marcadores de seleccin, genes de inters, potenciadores de la transcripcin, otras secuencias importantes) presentes en el o los plsmidos, tamao, funcin y origen de cada uno (donantes), sealando cualquier secuencia proveniente de agentes biolgicos de grupos de riesgos 2-4. b) Seale las pruebas que demuestran la estabilidad del inserto. c) Diga cul es la localizacin del inserto (cromosoma, mitocondrias, cloroplastos o forma no integrada). d) Mencione la funcin de las protenas expresadas. e) Diga el historial de uso seguro de las protenas expresadas segn la utilizacin prevista.
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f ) Describa todos los cambios previstos en el funcionamiento de las vas bioqumicas en que intervienen esas protenas. g) Provea datos sobre la homologa de las secuencias de aminocidos de las nuevas protenas con otras que son conocidas como txicas o alergnicas. h) Presente evidencias de los resultados de anlisis realizados para demostrar la integracin de los elementos genticos introducidos. i) Si la expresin no es constitutiva, detalle los tejidos donde se expresan las protenas. j) Si la expresin del gen es inducida, describa los mecanismos de activacin. F. Deleciones realizadas Describa los elementos genticos eliminados, tamao y funcin. G. Otras modificaciones En el caso de mtodos de modificaciones que no impliquen la insercin de cidos nucleicos ni su delecin, indique los cambios realizados en las rutas metablicas o en otras caractersticas de las plantas. H. Caractersticas de la planta modificada a) Indique si se han realizado estudios para conocer si existen caractersticas fenotpicas diferenciales con la variedad no transgnica. b) Diga si se han estudiado en laboratorio los niveles de expresin de la protena de inters y los mtodos empleados para este estudio. c) Informe los resultados obtenidos en ensayos en el laboratorio sobre otras propiedades del OVM. I. Mtodos de deteccin del OVM a) Indique los mtodos y las tcnicas propuestos para la deteccin del OVM en caso de escape u otras situaciones donde fuera necesario. b) Seale la sensibilidad y la especificidad del mtodo.

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J. Caractersticas generales de la instalacin Seale: a) Ubicacin de la instalacin segn las coordenadas geogrficas. b) Ubicacin de la instalacin en relacin con la entidad. c) Croquis de la instalacin detallando la cercana a reas pobladas, caminos, ros o arroyos. d) Nombre del titular del rea donde se encuentra la instalacin. K. Personal vinculado al ensayo a) Diga el nombre del responsable del ensayo. b) Relacione el personal vinculado al ensayo, su calificacin y si se encuentra capacitado en bioseguridad. L. Caractersticas del diseo (segn lo establecido en la resolucin 112/03 del CITMA) Describa: a) Materiales de construccin de las estructuras de soporte y de las paredes. b) Tipo de piso. c) Facilidades para prevenir la entrada de roedores e invertebrados. d) Ubicacin respecto a la entidad a la cual pertenece. e) Antecmara en la entrada de los locales. f ) Dispositivos para el lavado de las manos. g) Sistemas de proteccin especial contra intrusos, reas con custodios, cercas perimetrales con puertas que tengan cierres para restringir el acceso de personal, entre otros. h) Si la instalacin cuenta con aceras perimetrales o de qu forma se mantienen libres de malezas los alrededores de las casas verdes. i) Dispositivos para prevenir el escape de invertebrados o de esporas, cuando se trabaje con ellos. M. Estudios que se harn durante la realizacin del ensayo a) Detalle los estudios que se realizarn con el OVM (pruebas con plagas, organismos patgenos u otros).
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b) Indique los objetivos propuestos. c) Seale las fechas en que se realizarn los ensayos. N. Cantidad de materiales que se emplearn en el ensayo a) Seale las cantidades de plantas transgnicas que se utilizarn en el ensayo, as como las de cualquier otro organismo que se haya de emplear. b) Si el objetivo de la autorizacin es la importacin, la exportacin, o el traslado en el pas, provea datos desde dnde o hacia dnde se importa o exporta el material, qu medios de transporte sern empleados y las medidas tomadas para evitar prdidas del material durante el proceso. . Prcticas y procedimientos Detalle: a) Registros de los experimentos que se realizarn en la casa verde y del movimiento de materiales y personal (entrada y salida), as como documentos sobre procedimientos de trabajo y descontaminacin. b) Forma empleada para la identificacin de las variantes de los ensayos. c) Forma de recogida, transportacin y eliminacin de desechos y material vegetal. d) Dnde y cmo sern conservados los materiales necesarios, como las semillas, despus de concluido el ensayo. e) Procedimientos para evitar la mezcla con otros materiales. f ) Tratamientos que se aplicarn para que las plantas involucradas en los ensayos se mantengan libres de insectos, caros y otras especies patgenas que no guarden relacin con el experimento. g) Mecanismos que se emplearn para la desinfeccin de manos y pies del personal que labora en las casas verdes. h) Destino final de los aguas de riego y del sustrato en que se desarrollan las plantas. i) Registros de accidentes e incidentes. O. Evaluacin del riesgo Presente un informe sobre la evaluacin del riesgo realizada para esta etapa.
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Parte II. Requisitos generales para la confeccin del expediente arte Requ sitos generale par la confecc qui ales ara ccin ex iente tc ensayos confinados (en cam amp plan transgnic ant ansgnica tcnico de ensayos confinados (en campo) con plantas transgnicas Adems de los datos solicitados en la etapa anterior, se debern presentar los siguientes: 1. Informe de los principales resultados de la etapa anterior. Describa los resultados obtenidos en la etapa precedente que justifican la realizacin de este ensayo. 2. Propsito de la liberacin.. Describa el objetivo de este ensayo y los estudios que sern realizados durante esta etapa. 3. Descripcin de las caractersticas del rea donde se realizar el ensayo. Indique: a) Coordenadas geogrficas del rea de liberacin. b) Seguridad relativa al rea. c) Direccin principal en que soplan los vientos. Barreras contra el viento. d) Topograf a del lugar, detallando posibles inundaciones en caso de intensas lluvias. e) Cercana de ros u otros espejos de agua. f ) Distancia de reas donde se cultiva comercialmente la especie no transformada. g) Cercana de reas protegidas. 4. Datos de la entidad donde se realizar el ensayo. a) Nombre del director. b) Relacione el personal vinculado al ensayo, su calificacin y si se encuentra capacitado en bioseguridad. 5. Prcticas culturales y fitosanitarias. Seale las prcticas culturales y fitosanitarias que se emplearn en el cultivo. 6. rea de ensayo. Indique la superficie que ocupar el ensayo y la cantidad de material transgnico que se utilizar. 7. Localizacin de las parcelas. Elabore un croquis del lugar del ensayo en relacin con el de otros cultivos. 8. Fecha posible de siembra del material del ensayo y duracin de la liberacin. a) Diga las fechas dentro de las cuales se enmarca el ensayo.
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9.

10.

11.

12.

13.

14.

b) En el caso de que se deban realizar varias siembras, incluya el calendario. Distancia respecto a reas donde se cultivan plantas no modificadas. a) Dentro de la entidad, detalle la cercana de cultivos no transgnicos. b) Si cerca existen reas de otros productores, selelas. Presencia en el rea de especies sexualmente compatibles. a) Relacione las especies sexualmente compatibles que se encuentran en el rea. b) Indique los muestreos realizados para verificar su presencia. Polinizacin cruzada. a) Indique la frecuencia de ocurrencia de polinizacin cruzada con las especies cercanas y los mecanismos a travs de los cuales ocurre. b) Describa la fuente de obtencin de los datos. Procedimientos de bioseguridad que sern puestos en prctica para prevenir el flujo de genes. Indique: a) Prevencin de la floracin. b) Ensacado de las flores. c) Distancias de aislamiento propuestas. d) Mtodos para evitar la entrada de insectos y otros vectores. e) Barreras de plantas no modificadas genticamente. f ) Medidas contra el hurto de materiales o el consumo por aves u otros animales. g) Prohibicin del uso del rea con posterioridad al ensayo. h) Verificacin del sitio del ensayo despus de la cosecha. i) Otros aspectos de inters para la bioseguridad. Mtodos de seguimiento propuestos durante y despus del ensayo. Diga: a) Objetivo del seguimiento b) Frecuencia del muestreo. c) Forma en que se tomarn las muestras. d) Tamao de la muestra. e) Instituciones encargadas del monitoreo. Planes de emergencia ante situaciones imprevistas. Describa los planes de emergencia ante inundaciones, ciclones u otras catstrofes naturales o aparicin de enfermedades no previstas.

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15. Evaluacin del riesgo. a) Describa el estudio de evaluacin del riesgo realizado. b) Presente el informe de los resultados. 16. Comunicacin del riesgo. Diga cmo se realizar la comunicacin del riesgo a los interesados en la liberacin: trabajadores, poblacin de las comunidades cercanas u otros. arte Requ sitos generale par confecc qui ales ara ccionar ex iente tc Parte III: Requisitos generales para confeccionar el expediente t cnico ant ansgnic ensayos confinados plan transgnica de ensayos no confinados con plantas transgnicas Adems de los datos solicitados en las etapas anteriores, se debern presentar los siguientes: 1. Eventos. a) Denominacin de los eventos. b) Cantidad de plantas que se liberarn por cada evento. 2. Lugares para la liberacin. Detalle las coordenadas geogrficas de los lugares donde se realizar la liberacin. 3. Ensayos anteriores con estos eventos. Presente un informe de los ensayos anteriores realizados con estos eventos. 4. Caracterizacin molecular del OVM (por eventos). a) Diga el nmero de copias insertadas. b) Enumere las pruebas realizadas para evaluar la estabilidad de las modificaciones y en cuntas generaciones fueron hechas. c) Indique la forma de segregacin de los caracteres introducidos. d) Mencione otras caracterizaciones moleculares realizadas. 5. Caractersticas fenotpicas del OVM. a) Seale cules fueron los rendimientos. b) Indique si en el OVM se produjeron cambios en la susceptibilidad a plagas y enfermedades respecto a los organismos no modificados. 6. Niveles de expresin. Indique los niveles de expresin en los tejidos diana y otros tejidos con inters para la seguridad de la planta (polen, frutas, hojas, raz). 7. Estudios que se realizarn. Describa los estudios que se realizarn durante la etapa cuyos resultados se presentarn como base para la comercializacin.
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8. Estudios o seguimientos durante el ensayo. Indique los estudios o seguimientos que se realizarn durante el ensayo para conocer: a) Fenologa del OVM. b) Afectaciones a organismos no blanco. c) Mtodos de seguimiento del OVM. d) Susceptibilidad a enfermedades. e) Cambios en el suelo. 9. Destino final de la cosecha. a) Argumente cul ser el destino de la cosecha: eliminacin, anlisis de laboratorio, almacenamiento u otros. b) Seale las medidas de bioseguridad para evitar cualquier accidente (mezclas, consumo humano, etc.) 10. Planes de emergencia. Documente los planes de emergencia existentes. 11. Controles en el rea con posterioridad a la cosecha del OVM. a) Detalle si considera necesario establecer restricciones al uso del suelo despus de realizada la cosecha del OVM. b) Diga cul ser el tiempo de restriccin. c) Enumere las observaciones que se llevarn a cabo. 12. Comunicacin del riesgo. Diga cmo se realizar la comunicacin del riesgo a los interesados en la liberacin: trabajadores, poblacin de las comunidades cercanas u otros. arte IV Requ sitos generale par confecc qui ales ara ccionar ex iente tc Parte IV: Requisitos generales para confeccionar el expediente tcnico in plan mod icad genticamente ant comerciali aci ada ticamen de comercializacin de plantas modificadas genticamente 1. Coordinaciones con otras autoridades reguladoras. a) Describa qu otras coordinaciones se han hecho para obtener autorizaciones que correspondan al caso presentado (Ministerio de la Agricultura, Ministerio de Salud Pblica). b) Detalle el grado de aprobacin por estas autoridades. 2. Caracterizacin fenotpica de la planta modificada genticamente (en relacin con la variedad no modificada. Seale: a) Morfologa b) Alteracin del ciclo de vida.
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3.

4.

5.

6.

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8.

9.

10.

c) Vigor vegetativo. d) Duracin de las etapas fenolgicas. e) Produccin de semillas y caractersticas de stas en cuanto a germinacin y dispersin. f ) Adaptacin a factores biticos y abiticos. Expresin de la protena de inters insertada. Presente pruebas que demuestren que la expresin de la protena ha sido estable durante los ensayos anteriores. Pruebas ecotoxicolgicas realizadas al OVM. a) Informe los resultados de las pruebas ecotoxicolgicas realizadas. b) Diga qu institucin las realiz. c) Indique bajo qu protocolo se realizaron. Evaluacin de riesgos. Informe los estudios de evaluacin de riesgos realizados acerca de los posibles efectos ecolgicos o sobre la salud humana (segn tcnicas reconocidas de evaluacin de riesgos: HAZOP, anlisis preliminar de riesgos, Qu sucede si...?, etc.) u otras debidamente validadas. Cambios en el manejo del cultivo. a) Describa los cambios que supone la nueva tecnologa respecto a las prcticas habituales del cultivo. b) En el caso de plantas resistentes a herbicidas y resistentes a insectos, describa las estrategias destinadas a disminuir la aparicin de resistencias. reas de liberacin propuestas. Justifique las restricciones a plantaciones del cultivo en determinadas zonas del pas. Programas de manejo integrado de plagas del cultivo. Explique si existe alguna propuesta de integracin de las plantas modificadas genticamente a los programas de manejo integrado de plagas del cultivo. Seguimiento poscomercializacin o vigilancia. a) Detalle el plan de seguimiento poscomercializacin propuesto para casos especficos y su justificacin. b) En caso de que se proponga vigilancia general, detalle las coordinaciones que se realizarn para su ejecucin. Comunicacin del riesgo. Diga cmo se realizar la comunicacin del riesgo a los interesados en la liberacin: trabajadores, poblacin u otros.
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ANEXO 3 Lista de chequeo para revisar el expediente tcnico de ensayos en casa verde y liberacin al medio de plantas transgnicas

Elaborada segn las resoluciones 76/00 y 112/03 del CITMA Lista No.: Entidad: Direccin: Telfono: Autor del expediente: Plazo entre dos evaluaciones: Expediente No.: Revisin No.: Titular: Responsable de bioseguridad: Fecha: Evaluador: Fecha de ltima revisin: Cultivo:

Caractersticas generales del cultivo: Especie: Nombre comn: Transformacin realizada: Denominacin del evento de transformacin: Variedad:

No. Aspectos que se comprueban Receptor Rece ceptor 1. El cultivo y la variedad transformados tienen importancia econmica? 2. La transformacin realizada responde a un objetivo de importancia para el pas? 3. La especie y la variedad transformadas estn bien caracterizadas y confirmadas? 4. Se conoce el punto de coleccin o adquisicin del receptor? 5. El cultivo tiene una historia amplia de uso seguro en la alimentacin humana y en la animal? 6. La especie transformada carece de propiedades txicas o alergnicas conocidas? 7. Se puede afirmar que no existen riesgos relacionados con el centro de origen del cultivo? 8. Se puede afirmar que no existen riesgos relacionados con los centros de diversidad gentica de la especie cultivada? 9. El cultivo es de ciclo anual? 10. La variedad se reproduce comercialmente por va agmica? 11. Si la planta puede reproducirse sexualmente, es autgama? 12. Si ocurre polinizacin cruzada, el polen es trasladado por vectores especficos? 13. Est determinada la frecuencia de la polinizacin cruzada? 14. Est documentado, por fuentes confiables, que el polen no puede ser transportado por ningn mecanismo a grandes distancias fuera de las reas del cultivo?
1 2

No NP1 Obs.2

NP: No procede. La columna se llenar colocando un nmero en orden consecutivo, independiente del que tiene la pregunta, el cual se tomar como referencia para describir la observacin, segn el modelo colocado al final de este anexo.

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No. Aspectos que se comprueban S 15. Se conoce que no existen plantas sexualmente compatibles en las reas de liberacin? 16. Si ocurre la polinizacin cruzada con especies compatibles sexualmente, se puede afirmar que los hbridos resultantes no son capaces de sobrevivir ni de competir? 17. Permanecen las semillas maduras dentro de una cpsula u otra estructura, de forma tal que se puedan cosechar fcilmente sin que se diseminen por las reas aledaas? 18. Las caractersticas de la planta indican que no es maleza? 19. Existe una descripcin de los hbitats donde el receptor puede persistir y proliferar? 20. Se dispone de datos que aseguren que el cultivo slo puede desarrollarse en las condiciones suministradas por el hombre a los agroecosistemas? 21. Estn descritos todos los organismos y microorganismos asociados al cultivo que constituyan plagas o sean causantes de enfermedades? 22. Se incluye informacin de los depredadores, parasitoides, vectores de enfermedades y simbiontes asociados al cultivo? todo transformacin ansformac Mtodo de transformacin 23. Est detallado el mtodo de transformacin? 24. Existe familiarizacin con el mtodo de transformacin? 25. En el caso de Agrobacterium, existen evidencias de la eliminacin de la bacteria y del mtodo empleado? 26. El nmero de copias insertadas est determinado? Vector 27. La naturaleza y la fuente del vector estn caracterizadas?
66

No NP1 Obs.2

No. Aspectos que se comprueban 28. Los sitios de restriccin de los elementos transferidos estn mapificados? 29. Existe una descripcin de los elementos genticos presentes en el o los plsmidos, el tamao y la funcin de cada uno? 30. Se describe cmo se construy el vector? 31. Se describe el mtodo de clonacin? 32. Se ha demostrado que el vector fue desarmado? onante tes Donantes 33. El origen (fuente) de cada uno de los elementos insertados est descrito? 34. Se conoce el punto de adquisicin y coleccin de los donantes? 35. Estos organismos estn clasificados en grupos de riesgos, segn establece la resolucin 42/99, del CITMA? 36. Se conoce que las secuencias insertadas provenientes de organismos patgenos no causan enfermedades o cualquier otro dao a la planta o la salud humana? Insertos erto Insertos 37. Alguna de las secuencias de inters insertadas es sinttica? 38. Est determinado molecularmente que todas las partes del casete de integracin estn en el OVM? 39. Estn descritas las secuencias de los elementos que se consideran novedosos o relevantes y que han sido integradas al OVM? 40. Se han utilizado estrategias alternativas para la eliminacin de los marcadores de seleccin en el OVM? 41. Existe familiarizacin con el uso de estos elementos genticos en la transformacin de plantas?

No NP1 Obs.2

67

No. Aspectos que se comprueban 42. El inserto est localizado en los cloroplastos? 43. Se describe el mtodo para determinar la ubicacin de los transgenes? 44. Los marcadores de seleccin de resistencia a antibiticos se han sustituido por otros marcadores? 45. S existieran marcadores de seleccin de resistencia a antibiticos, est documentado el uso de stos en la salud humana y en la animal? 46. Se ha demostrado que las secuencias insertadas se encuentran integradas establemente? 47. Existen datos que demuestren que la caracterstica introducida se segrega segn las leyes de Mendel? 48. Se han realizado pruebas serolgicas (ELISA u otras) que demuestren el nivel de las protenas expresadas? 49. Se conoce que no existen homologas entre las secuencias insertadas y secuencias del receptor? anismo vivo mod icado Organismo vivo modificado 50. Est definido el evento de transformacin? 51. Existe familiarizacin con este cultivo transgnico? 52. Est documentada la utilizacin del cultivo transgnico? 53. Se podr utilizar el OVM para ser procesado industrialmente? 54. Se ha modificado la planta para que presente esterilidad masculina? 55. Se describen las caractersticas fenotpicas y genotpicas del organismo resultante? 56. Existe equivalencia sustancial entre las caractersticas fenotpicas del OVM y las del receptor? 57. Tiene el OVM igual susceptibilidad a los factores biticos y abiticos que el receptor?

No NP1 Obs.2

No. Aspectos que se comprueban S 58. Estn descritas las actividades de las protenas expresadas y sus especificidades? 59. Se han logrado expresar las protenas de inters en tejidos especficos? 60. Se han logrado expresar las protenas de inters en una fase fenolgica especfica? 61. La expresin gnica es inducida? 62. Estn descritos los agentes inductores de la expresin gnica? 63. Est documentada la metodologa de deteccin e identificacin del OVM? 64. En el expediente aparecen datos experimentales que demuestren la especificidad y sensibilidad de esta metodologa? 65. Las semillas del OVM presentan igual rango de germinacin que las del receptor? 66. Existen diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a la produccin de semillas? 67. Despus de la cosecha, es menor la proporcin de plantas espontneas en la variedad no transgnica que en la transgnica? 68. En el expediente aparecen datos que avalen que no se afectan las poblaciones de los enemigos naturales asociados al cultivo? 69. En el expediente aparecen datos que avalen que no se afectan otras formas de vida? 70. Se ha demostrado que las protenas expresadas no son txicas ni alergnicas para los seres humanos? 71. Se conoce la actividad biolgica de las protenas en el suelo? 72. La protena insertada est funcional y estructuralmente relacionada con protenas de historia de uso seguro? 73. El alimento derivado de la planta transgnica presenta igual digestibilidad que su contraparte tradicional?

No NP1 Obs.2

69

No. Aspectos que se comprueban S 74. El alimento derivado de la planta transgnica presenta iguales o mejores propiedades nutricionales que su similar no transformado? 75. El cultivo transgnico tiene iguales prcticas de cultivo (preparacin de tierras, control de plagas y malezas, cosecha y poscosecha) excepto en aquellas que derivan de la transformacin? 76. Se ha comprado que los cambios en la prctica del cultivo, especialmente por: uso de plaguicidas, preparacin de tierras, erosin del suelo o modificaciones en su conservacin, ciclos de nutrientes y energa, no afectan la sostenibilidad? 77. La caracterstica introducida redunda en un menor empleo de sustancias plaguicidas en el cultivo? 78. La caracterstica introducida favorece la extraccin de sustancias txicas del suelo? 79. Las plantas voluntarias que se desarrollan despus de la cosecha no alteran las prcticas de los cultivos siguientes? 80. Estn previstas las estrategias para disminuir las tasas de insectorresistencia de las plantas Bt? 81. En el caso de las plantas resistentes a virus, existe la posibilidad de desarrollo de nuevos organismos patgenos? 82. En el caso de las plantas resistentes a plagas y enfermedades (no Bt), se contempla el posible desarrollo de resistencia del organismo blanco? 83. Se han realizado ensayos en casa verde o laboratorio con el OVM? 84. Estn documentados los resultados de los ensayos en casa verde o laboratorio con el OVM?
70

No NP1 Obs.2

No. Aspectos que se comprueban Casa verde Ca Nivel 1 85. La construccin garantiza la integridad durante el perodo de trabajo? 86. Est diseada para prevenir la entrada de roedores e invertebrados? 87. Es funcional y fcil de limpiar? 88. Est cercada o protegida dentro de otra instalacin que lo est? 89. El material del piso garantiza la seguridad y la higiene? 90. Permanece cerrada cuando no se est laborando en ella? 91. Existe seguridad contra intrusos? 92. Dispone de antecmara? 93. Las reas perimetrales estn libres de malezas? 94. Se pueden realizar de manera segura varios experimentos simultneamente? 95. Existe registro de los experimentos que se realizan? 96. Estn disponibles las ropas necesarias y las bolsas para el traslado de muestras? 97. Estn disponibles los procedimientos de trabajo, descontaminacin, traslado de muestras y entrada de personal? 98. Se demuestra que se cumplen las actividades que aparecen en los procedimientos? Nivel 2 99. Est diseada para evitar el escape de microorganismos e invertebrados? 100. Existe autoclave? 101. Se descontaminan los desechos lquidos? Nivel 3 102. Los sistemas de ventilacin y climatizacin garantizan la hermeticidad de la instalacin?

S No NP1 Obs.2

71

No. Aspectos que se comprueban 103. Existe presin negativa? 104. Existe paso sanitario? 105. La autoclave es de doble puerta? 106. Los contornos de hermetizacin estn a prueba de golpes? 107. El cambio de ropa y el bao (a la salida) son obligatorios? 108. Cuenta con gabinete de seguridad biolgica? 109. Se registran e informan los accidentes ocurridos? rea liberac iberacin rea de liberacin 110. Si el material es importado, se ha cumplido con los requisitos establecidos por Sanidad Vegetal para su introduccin en el pas? 111. En el expediente existe informacin acerca de resultados anteriores de liberacin del OVM? 112. Estn determinadas el rea de liberacin y su ubicacin geogrfica? 113. Est determinado que aledaas al rea de liberacin no existan zonas protegidas que pudieran ser afectadas? 114. Las caractersticas del terreno y del rea geogrfica impiden que ocurran inundaciones? 115. Se ha determinado la direccin en que soplan los vientos regularmente? 116. El rea de liberacin est ubicada en un lugar exento de robos? 117. El sitio del experimento est protegido contra la entrada de animales de pastoreo? 118. El rea de liberacin pertenece a una estacin experimental con experiencia en el mejoramiento del cultivo? 119. El director de la instalacin tiene conocimiento de los riesgos potenciales que entraa la liberacin?
72

No NP1 Obs.2

No. Aspectos que se comprueban S 120. El mximo responsable del ensayo conoce que el material en experimentacin no puede ser usado para otros fines que no sean los previstos en la investigacin y que se prohbe su uso como alimento? 121. Est documentado el nmero de organismos que se liberarn? 122. Est prevista la fecha en que se liberarn los organismos? 123. Se detallan las labores culturales que se aplicarn al cultivo? 124. Las aplicaciones fitosanitarias son las establecidas para el cultivo? 125. Existe un diseo experimental para el ensayo? 126. Se han previsto medidas para evitar la dispersin de las aguas de riego? 127. Se han previsto barreras contra la dispersin del polen? 128. Se han previsto medidas para evitar o minimizar la dispersin de las estructuras reproductivas? 129. El personal vinculado con la liberacin est capacitado en bioseguridad? 130. Una vez finalizada su evaluacin, est documentada la utilizacin o disposicin del material cosechado? 131. Existe un registro de las actividades que se realizan en el cultivo, incluyendo las medidas de gestin tales como desbotonamiento, ensacado de las flores quemas de desechos, etc.? 132. Las actividades con el cultivo se pueden realizar manualmente? 133. En el rea de liberacin se encuentran los procedimientos de trabajo? 134. Se previ la forma en que sern eliminados los desechos?

No NP1 Obs.2

73

No. Aspectos que se comprueban S 135. Existe un programa de seguimiento del OVM antes, durante y despus de la liberacin? 136. Existe informacin sobre mtodos no moleculares para detectar e identificar el OVM? 137. Est documentado si debe existir alguna restriccin para el uso del rea de experimentacin despus de la cosecha? 138. Estn descritos los planes de emergencia ante situaciones imprevistas? 139. Estn disponibles los materiales y equipos para la ejecucin de los planes de emergencias? 140. Si las semillas o propgalos van a ser conservados en el lugar o trasladados hacia otra institucin para su posterior utilizacin, estn documentadas las medidas de seguridad para su conservacin o traslado? 141. Se puede afirmarse que no existe posibilidad de contaminacin de cultivos no transgnicos aledaos al rea del ensayo? observacione iones Hoja de obser vaciones Obs. No. Descripcin

No NP1 Obs.2

74

ANEXO 4 mentacin relacionada acionad la biosegu idad Documentacin relacionada con la bioseguridad nece ari ces rea ensayos cam amp necesaria en el rea de ensayos de campo plan transgnic ant ansgnica con plantas transgnicas

El solicitante de autorizacin para liberar plantas transgnicas al medio es responsable de que en el rea de liberacin exista la documentacin necesaria para el seguimiento de las actividades culturales y fitosanitarias realizadas durante esta etapa, el cumplimiento de las medidas de bioseguridad establecidas en el expediente tcnico y de las condiciones de vigencia impuestas por el rgano regulador, y el registro de los incidentes y accidentes en relacin con la seguridad del ensayo. Esta documentacin debe estar disponible en el rea de ensayo y ser mostrada a los inspectores de seguridad biolgica cuando les sea solicitada como parte de la realizacin de la inspeccin para el otorgamiento de la autorizacin, as como en la inspeccin de verificacin de las condiciones de vigencia. mentacin rea ensa Documentacin en el rea de ensayo 1. Copia de la autorizacin concedida por el rgano regulador para la realizacin del ensayo. 2. Relacin de personal que labora o tiene vnculo con el ensayo. 3. Evidencias de la capacitacin en bioseguridad del personal relacionado con el ensayo. 4. Registro de las actividades que se realizarn en el ensayo. 5. Planos de la ubicacin del rea de ensayo, las instalaciones, los cultivos colindantes y las fuentes de agua.

6. Croquis del diseo experimental utilizado, detallando la ubicacin de las diferentes variantes. 7. Planes de emergencia ante desastres naturales, efectos adversos detectados y accidentes ocurridos en el rea de ensayo. Se incluye el personal que debe ser contactado, sus formas de localizacin y los responsables de las medidas que se tomarn, as como los recursos necesarios para implementarlas. Regi la actividade tividades se real arn durante ensa ali Registro de las actividades que se realizarn durante el ensayo 1. Fecha en la que se inicia y termina el ensayo. 2. De acuerdo con el objetivo del ensayo, descripcin detallada de las actividades culturales y fitosanitarias realizadas y las fechas en que se realizaron. a) Riegos. b) Fechas de aplicacin de herbicida u otros plaguicidas y productos utilizados. c) Labores culturales realizadas (resiembra, fertilizacin, limpiezas del rea, cosecha). d) Fecha en que se realizan las medidas de gestin de riesgos del ensayo. e) Eliminacin de las inflorescencias. f ) Ensacado de las flores. g) Colocacin de jaulas sobre las plantas. 3. Eliminacin de desechos vegetales durante el ensayo, la cosecha y con posterioridad a sta. 4. Observaciones respecto a posibles variaciones fenotpicas de las plantas transgnicas en relacin con los descriptores de la variedad utilizada. 5. Observaciones (segn proceda) de las variaciones de la fauna relacionada con las plantas transgnicas (herbvoros, parsitos, depredadores, hiperparsitos). 6. Accidentes ocurridos: hurtos de material transgnico, entrada de animales de pastoreo, destruccin intencional o daos provocados por herbvoros en el rea, ocurrencia de inundacin, tornado, huracn, fuego u otro desastre natural. 7. Salida de muestras del rea de ensayo y objetivos de sta, as como el destino.
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8. Destino final del material cosechado indicando la cantidad exacta de material que se cosecha, cmo se transporta, la direccin a la que se expide, la forma de envasado y etiquetado, y la documentacin que justifica la entrega. 9. Tratamiento de los residuos: a) Fechas en las que se realiza el tratamiento de los residuos del ensayo. b) En caso de que en la solicitud del ensayo se hubieran propuesto ms de un sistema de tratamiento de los residuos, se deber concretar el mtodo de tratamiento utilizado. c) En caso de que el tratamiento de los residuos se realice mediante incineracin en una instalacin incineradora de residuos autorizada, se deber acreditar documentalmente la destruccin de stos. 10. Observaciones posteriores a la finalizacin de las actividades de liberacin voluntaria. 11. Cumplimiento de las limitaciones establecidas en cuanto a cultivar sucesivamente en el mismo campo la planta transgnica, en el caso de que se hubiera requerido entre las condiciones de autorizacin. 12. Fechas en las cuales se realizan los controles de rebrotes de las plantas. 13. Nmero de plantas, forma en que stas aparecen, distancias en el campo de cultivo y forma en que se trataron los rebrotes.

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ANEXO 5 Informe los resultados los ensayos sultado Informe de los resultados de los ensayos plan transgnic ant ansgnica con plantas transgnicas

El solicitante de autorizacin para realizar un ensayo con plantas transgnicas deber informar al rgano regulador los resultados obtenidos durante el ensayo, que guarden relacin con la bioseguridad del cultivo transgnico. En el caso de cultivos anuales, este informe final del ensayo se deber entregar despus de efectuada la cosecha. Cuando los cultivos duren ms de un ao, se entregar bianualmente. Los resultados del seguimiento de las reas se entregarn despus del perodo fijado para efectuar ste. El formato del informe puede variar segn el tipo de cultivo o el objetivo del ensayo, pero en general debe aportar los datos siguientes: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Fecha de confeccin del informe. Nombre y cargo de quien realiza el informe. Aprobacin de la comisin o del inspector de bioseguridad. Nmero de la licencia concedida por el rgano regulador. Tipo de cultivo. Tipo de transformacin realizada al cultivo. Lugar de realizacin del ensayo. Cantidad de plantas empleadas en el ensayo, de acuerdo con el nmero de lneas empleadas. 9. Conclusiones del ensayo respecto a los objetivos planteados (incluir informes estadsticos realizados).

10. Medidas de gestin de riesgos empleadas, destacando aquellas que no fueron informadas en el expediente y las que tuvieron que ser utilizadas como complemento para el desarrollo del experimento. 11. Plan de seguimiento realizado. Detallar los cambios en los mtodos de seguimiento en relacin con los planificados en el expediente. 12. Efectos adversos potenciales previstos. Confirmacin de cualquier hiptesis en relacin con los efectos adversos previstos. 13. Ocurrencia de efectos adversos que no se previeron. 14. Medidas que se adoptaron de acuerdo con los resultados obtenidos, incluyendo la realizacin de nuevos ensayos, nuevas transformaciones o caracterizaciones moleculares. 15. Planes de emergencia que tuvieron que ser activados y medidas tomadas.

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ANEXO 6 par confecc ara ccionar ex iente tc Gua para confeccionar el expediente tcnico solicitud autor acin par actividade olic utori ara tividades de solicitud de autorizacin para actividades animale transgnico acu ticos males ansgnicos con animales transgnicos acuticos

arte Requ sitos generale par confecc qui ales ara ccionar ex iente Parte I. Requisitos generales para confeccionar el expediente ensayos confinados pe es ala animale males tc tcnico de ensayos confinados a pequea escala con animales ansgnicos transgnico acu ticos transgnicos acuticos Para la realizacin de ensayos confinados con animales transgnicos, se requerir que los expedientes contengan la informacin siguiente: A. Receptor 1. Taxonoma. Diga: a) Nombre cientfico. b) Nombre comn. c) Grupo. d) Clase. e) Orden. f ) Familia. g) Sinonimia. h) Mtodos o documentos utilizados para confirmar la identidad de la especie. 2. Otras especificaciones acerca de la taxonoma. a) Si es un hbrido, incluir el tipo de cruzamiento. b) Diga en qu institucin se obtuvo la raza o variedad.

3.

4.

5. 6.

7.

8.

9. 10.

11.

c) En caso de tratarse de un animal extico o poco conocido, aclare cules fueron las instituciones y los especialistas que realizaron la determinacin. Centro de origen y de distribucin. Indique: a) Centro de origen del animal. b) rea geogrfica de distribucin. c) Condiciones climticas de su rea de origen (ejemplo, tropical, subtropical). Hbitat de la especie. Describa el hbitat principal, como puede ser: estuarino de agua dulce, clida o fra, manglar, ro, lago, laguna artificial. Importancia econmica de la especie, la raza o el hbrido empleados. Diga cul es la importancia para Cuba de la especie receptora. Organismos sexualmente compatibles. Describa si en el pas existen especies sexualmente compatibles y la posibilidad de que se produzca el cruce. Posibilidad de trasmisin de enfermedades. a) Describa si la especie es vector de enfermedades animales o zoonticas. b) Relacione las enfermedades que pueden ser trasmitidas. Posible toxicidad o alergenicidad para otros animales o para los seres humanos. Relacione los posibles efectos txicos o alergnicos de la especie (ciguatera u otros). Depredadores y competidores. Relacione los depredadores y competidores que existen en Cuba. Datos sobre especies exticas. a) Diga la fecha de introduccin de la especie en Cuba. b) Haga un breve recuento de los motivos de la introduccin. c) Seale qu institucin la introdujo. d) Especifique en qu lugares se encuentra en la actualidad. e) Describa los efectos adversos provocados por la especie en Cuba y en otras latitudes. Datos sobre especies nativas. Explique si la especie est catalogada como amenazada o en peligro de extincin.
81

12. Datos sobre especies cultivadas. Detalle si la especie puede colonizar acuatorios naturales en caso de que se escape. B. Objetivo de la transformacin a) Describa cul es el objetivo de la transformacin realizada. b) Antecedentes de la transformacin (datos sobre modificaciones similares y etapas hasta las cuales se ha llegado. C. Mtodo de transformacin Describa el mtodo de transformacin. D. Vectores utilizados Describa los vectores utilizados. E. Datos sobre el donante Si se trata de un microorganismo, detalle: a) Taxonoma. b) Ubicacin en grupo de riesgo. c) Propiedades biolgicas. d) Datos sobre su patogenicidad. e) Estudios clnicos que avalan su inocuidad para los seres humanos, los animales y las plantas. F. Elementos genticos incorporados (genes y secuencias) y expresin a) Describa los elementos genticos (incluyendo elementos regulatorios, marcadores de seleccin, genes de inters, potenciadores de trascripcin u otras secuencias de inters) presentes en el o los plsmidos, tamao, funcin y origen de cada uno. b) Estudios sobre la estabilidad del inserto. c) Localizacin del inserto. d) Funcin de las protenas expresadas.
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e) Historial de uso seguro de las protenas expresadas y descripcin de todos los cambios previstos en el funcionamiento de las vas bioqumicas en que intervienen estas protenas f ) Homologa de las secuencias de aminocidos de las nuevas protenas con otras que son conocidas como txicas o alergnicas. g) Demostracin de la integracin de los elementos genticos introducidos (anlisis realizados). h) Tejidos donde se expresan. G. Deleciones realizadas Diga cules son los elementos genticos eliminados, su tamao y funcin. H. Otras modificaciones En el caso de otras modificaciones que no impliquen la insercin de cidos nucleicos ni su delecin, indique los cambios realizados en el fenotipo y en qu rutas metablicas se produjeron; por ejemplo, si se hicieron para obtener lneas ms productivas. I. Caractersticas del animal resultante a) Diga las caractersticas fenotpicas observadas hasta el momento. b) Describa si se han estudiado en laboratorio los niveles de expresin de la protena de inters y los mtodos empleados para ese estudio. c) Si la expresin del gen es inducida, describa los mecanismos por los cuales se produce. J. Caractersticas generales de la instalacin Seale: a) Ubicacin de la instalacin segn las coordenadas geogrficas. b) Ubicacin de la instalacin en relacin con la entidad. c) Croquis de la instalacin detallando la cercana a reas pobladas, caminos, ros o arroyos. d) Nombre del titular del rea donde se encuentra la instalacin.
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K. Personal vinculado al ensayo a) Diga el nombre del responsable del ensayo. b) Relacione las personas que se involucrarn en las diferentes etapas y procesos, especificando las tareas que realizarn. L. Desechos Describa todos los desechos que se generan en el proceso y en las diferentes etapas, su clasificacin y el mtodo empleado para su eliminacin. M. Efectos adversos a) Presente un informe o registro de la identificacin y caracterizacin de los riesgos. b) Seale las medidas de gestin para los riesgos identificados. N. Principales resultados obtenidos en las peceras (etapa de laboratorio) Si los informes de estudios realizados anteriormente no se han enviado al rgano regulador, detalle los resultados. . Propsito del ensayo Describa el objetivo del ensayo. O. Seguimiento o monitoreo De los mtodos de monitoreo propuestos diga: a) Frecuencia del muestreo. b) Forma en que se tomarn las muestras. c) Tamao de la muestra. d) Instituciones encargadas del seguimiento. P. Planes de emergencia ante situaciones imprevistas Seale: a) Todas las situaciones que pudieran provocar emergencias.
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b) Condiciones de vulnerabilidad. c) Medidas que se tomarn en cada caso. d) Recursos necesarios. e) Quienes son los responsables del cumplimiento de cada medida y las formas de comunicacin con ellos. iente ccionar ex arte Requ sitos generale par confecc qui ales ara Par te II: Re quisitos generales par a confeccionar el expediente t cnico de ensayos conf inados a g ran escala con animales tc ensayos confinados gr es ala animale males transgnico acu ticos ansgnicos transgnicos acuticos 1. Informe de los ensayos anteriores realizados con estas modificaciones. Si los informes de estudios realizados anteriormente no han sido enviados al rgano regulador, detalle los resultados. 2. Entidad que asumir su comercializacin despus de estos ensayos. Describa si se han realizado coordinaciones con algn organismo de la administracin central del Estado para la futura comercializacin de la especie. 3. Caracterizacin molecular del animal transgnico. Explique los estudios realizados para comprobar los elementos insertados. 4. Niveles de expresin en los tejidos diana y otros con inters para la seguridad de los animales. Detalle los estudios que demuestran los niveles de expresin de los genes introducidos. 5. Caractersticas de la instalacin donde se realizarn los ensayos y sus condiciones ambientales dentro del medio acutico. Describa la instalacin donde se realizarn los ensayos y sus condiciones de seguridad segn la resolucin 112/03 del CITMA, as como las condiciones ambientales de dicha rea. 6. Proximidad del lugar a seres humanos, flora y fauna. Describa los asentamientos poblacionales en la cercana de la instalacin y la flora y la fauna que habita en la zona. 7. Disponibilidad de condiciones adecuadas para el organismo que ser sometido a ensayo. Segn los objetivos del ensayo: a) Detalle si existen las condiciones adecuadas para permitir el desarrollo de los animales hasta el final del ensayo.
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b) Diga si hay posibilidad de incremento excesivo de la poblacin del organismo sometido al ensayo y que pueda llegar al medio ambiente. 8. Resultados de la evaluacin de riesgos del ensayo para la salud humana. Detalle: a) Produccin de sustancias txicas o alergnicas. b) Desarrollo de enfermedades zoonticas. 9. Resultados de la evaluacin de riesgos del ensayo para el medio ambiente. Especifique: a) Si la especie puede ser considerada como invasora. b) Si desplaza a otras especies. c) Cules son los niveles de degradacin gentica y extincin de la especie. d) En el caso de que los organismos acuticos en ensayo escaparan y pudieran llegar al medio ambiente natural, describa las ventajas competitivas en relacin con los animales que cohabitan en el ecosistema. 10. Estudio riesgo-beneficio de la modificacin realizada. Detalle los resultados del estudio donde se identifiquen los riesgos y los beneficios de dicho animal transformado. 11. Descripcin de las tcnicas de seguimiento. Detalle las tcnicas para el seguimiento de los organismos acuticos en el medio ambiente, entre ellas, la proposicin de captura de peces, la entidad encargada de realizarla, los equipos que se utilizarn y las mediciones que se harn. 12. Tratamiento de desechos. a) Describa todos los desechos que se generan en el proceso durante las diferentes etapas, su clasificacin y el mtodo de eliminacin. b) Destino de los organismos una vez concluido el ensayo. c) Si se van a conservar los organismos acuticos o sus productos, especificar la forma de almacenamiento y de identificacin para evitar que se mezclen con otros materiales. 13. Transportacin. Describa las condiciones de transportacin de los organismos acuticos o sus productos, en los casos necesarios. 14. Pruebas toxicolgicas. Describa los ensayos toxicolgicos que se realizarn, en qu laboratorios y con qu mtodos y tcnicas.
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Parte III: Requisitos generales para confeccionar el expediente arte Requ sitos generale par confecc qui ales ara ccionar ex iente tc comerciali acin animale transgnico acu ticos males ansgnicos tcnico de comercializacin de animales transgnicos acuticos 1. Certificados del Registro Sanitario Veterinario y del Registro de Alimentos de Salud Pblica. Diga si se ha obtenido el certificado sanitario o certificacin similar por parte del Instituto de Medicina Veterinaria y el Ministerio de Salud Pblica. 2. Caracterizacin fenotpica del OVM en relacin con los no modificados. a) Morfologa. b) Ciclo de vida. c) Capacidad reproductiva. d) Adaptacin a factores biticos y abiticos. 3. Organismo acutico como alimento humano o para otros animales. Si el propsito del organismo acutico es servir como alimento al hombre o a otros animales, diga: a) Existencia o no de la protena derivada de la caracterstica introducida en el alimento (si el producto final es utilizado con estos fines); si el alimento es procesado, posible exclusin de la protena durante el proceso. b) Pruebas bioqumicas realizadas en animales. c) Pruebas de digestibilidad de la protena o el producto. d) Acreditacin de las pruebas toxicolgicas realizadas: toxicidad, mutagenicidad, teratogenicidad y carcinogenicidad de las nuevas protenas en animales de laboratorio. e) Determinacin de la inocuidad del alimento. f ) Determinacin de la alergenicidad del alimento. g) Composicin nutricional del OVM y comparacin con la contraparte no modificada. 4. Datos de otras utilizaciones previstas diferentes a las la utilizacin del OVM como alimento. Detalle la utilizacin prevista para el organismo acutico modificado (biomodelo, biorreactor). 5. Estudios de evaluacin de riesgos sobre posibles efectos ecolgicos y sobre la salud humana y la animal. Describa la tcnica de anlisis de riesgo que se utiliz, los pasos que se dieron y los resultados a que se arrib.
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6. Anlisis riesgo-beneficio. Detalle el resultado tanto de los riesgos como de los beneficios que se obtendrn con la modificacin. 7. Seguimiento y vigilancia poscomercializacin. Describa las tcnicas de seguimiento y de vigilancia poscomercializacin. 8. Para el caso de animales transgnicos importados: Adems de la informacin anterior que proceda diga: a) Pas de origen. b) Exmenes y certificados veterinarios y sanitarios del pas de origen. c) Datos de la instalacin donde se realizar la cuarentena, indicando si tiene la autorizacin del rgano regulatorio para la seguridad biolgica y la de otros organismos regulatorios en el pas. d) Investigaciones que se realizarn en el perodo de cuarentena.

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ANEXO 7 par confecc ara ccionar ex iente tc Gua para confeccionar el expediente tcnico solicitud autor acin par actividade olic utori ara tividades de solicitud de autorizacin para actividades animale transgnico males ansgnicos acu ticos con animales transgnicos no acuticos

arte Requ sitos generale par confecc qui ales ara ccionar ex iente Parte I. Requisitos generales para confeccionar el expediente ensayos confinados pe es ala animale males tc tcnico de ensayos confinados a pequea escala con animales ansgnicos acu ticos transgnico transgnicos no acuticos Para la realizacin de ensayos confinados con animales transgnicos no acuticos, se requerir que los expedientes contengan la informacin siguiente: A. Receptor 1. Taxonoma. Diga: a) Nombre cientfico. b) Nombre comn. c) Grupo. d) Clase. e) Orden. f ) Familia. g) Sinonimia. h) Mtodos o documentos utilizados para confirmar de la identidad la especie. i) En caso de tratarse de un animal extico o poco conocido, aclare instituciones y especialistas que realizaron la determinacin.

2. Ciclo productivo. a) Ubique la especie dentro de los diferentes grupos productivos siguientes: Bovinos, caprinos: sistema lechero, de ceba. Aves: ponedoras, de ceba. Porcinos: ceba y otros. Cuncolas: ceba. Animales de laboratorio. b) Describa el ciclo productivo para la especie dada. 3. Grado de domesticacin. Documente si el animal: a) No se reproduce sin la accin del hombre. b) Es un animal semidomesticado. c) Es un animal de vida libre. 4. Manipulacin por otras tcnicas. a) Si es un animal clonado, especifique el mtodo, las clulas de origen y todos los datos relacionados con esa manipulacin. b) Indique el mtodo de desarrollo de estirpes que se utiliz (seleccin, hibridizacin, cruzamiento, manipulacin de cromosomas). c) Detalle las progenies, nmero de generaciones, consanguinidad. 5. Centro de origen y de distribucin. Diga: a) Centro de origen del animal. b) rea geogrfica de distribucin. c) Condiciones climticas de su rea de origen (tropical, subtropical) 6. Hbitat de la especie. Describa: a) Hbitat del animal (de granjas, de vida libre, etc.). b) Sistema agroecolgico. c) Sistema productivo. d) Indicadores de reproduccin, crecimiento y nutricin. e) Cmo se adapta a las condiciones medioambientales, especificando los ecosistemas. 7. Importancia econmica de la especie, raza o hbrido empleados. Diga cul es la importancia econmica de la especie receptora para Cuba. 8. Posibilidad de trasmisin de enfermedades. a) Seale si la especie es vector de enfermedades animales o zoonticas.
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b) Relacione las enfermedases que pueden ser trasmitidas. 9. Posibilidad de intercambiar material gentico. a) Indique la capacidad de transferencia de material gentico a otros organismos. b) Especifique si existen en Cuba especies sexualmente compatibles en el medio ambiente y la posibilidad de cruzamiento entre ellas. c) Seale los efectos adversos conocidos de estos cruzamientos. 10. Depredadores y competidores. Relacione los depredadores y competidores que existen en Cuba. 11. Susceptibilidad a enfermedades. a) Describa la susceptibilidad a enfermedades por las categoras siguientes: edad, sexo, reproduccin, productividad u otras. b) Clasifique la enfermedad de acuerdo con los agentes etiolgicos por grupo de riesgo. c) Enuncie los ndices y parmetros de morbilidad y mortalidad. d) Mencione si las enfermedades estn presentes en el lugar de origen o en el de destino. e) Diga si aparecen en la relacin de la Organizacin Internacional de Enfermedades. f ) Diga el diagnstico de esas enfermedades, qu laboratorios los realizan en Cuba y si existen los recursos para realizarlos. g) Mencione los mtodos de diagnstico, su especificidad y su sensibilidad. 12. Posible toxicidad y alergenicidad para otros animales o para los seres humanos. Si la especie es reconocida como txica para otros animales o a los humanos, describa por qu. 13. Otras caractersticas de la especie. Documente el crecimiento, la talla y la longevidad. 14. Datos sobre especies exticas. a) Diga la fecha de introduccin de la especie en Cuba. b) Haga un breve recuento de los motivos de la introduccin. c) Seale qu institucin la introdujo. d) Especifique en qu lugares se encuentran en la actualidad. e) Describa los efectos adversos provocados por la especie en Cuba y en otras latitudes.
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15. Datos sobre especies nativas. Explique si la especie est catalogada como amenazada o en peligro de extincin. 16. Datos sobre especies cultivadas. Detalle si la especie puede colonizar ecosistemas naturales naturales en caso de que se escape. B. Objetivo de la transformacin Describa cul es el objetivo de la transformacin realizada. C. Mtodo de transformacin a) Describa y provea referencias acerca del mtodo de transformacin empleado para la insercin o delecin del cido nucleico o para cualquier otra modificacin realizada. b) En el caso de inserciones de cidos nucleicos mediante mtodo de transformacin directa, describa la naturaleza y la fuente de cualquier ADN transportador utilizado. c) Si se trata de transformacin mediante virus, provea informacin de la cepa empleada, su diseo, forma en que los casetes de virulencia fueron desarmados y cmo se elimin el agente de los tejidos animales transformados. d) En caso de cultivos celulares primarios, seale los componentes de los medios nutritivos y el medio de mantenimiento, las fuentes de antimicrobianos y las sustancias marcadoras utilizadas. e) Si se trata de lneas celulares, describa el mapa gentico de la lnea, la coleccin de procedencia y la susceptibilidad a los contaminantes ambientales y a la mayora de los virus presentes en el pas. D. Vectores utilizados Describa los vectores utilizados. E. Datos sobre el donante Si se trata de un microorganismo, detalle: a) Taxonoma. b) Ubicacin en grupo de riesgo.
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c) Propiedades biolgicas. d) Datos sobre su patogenicidad. e) Estudios clnicos que avalan su inocuidad para los seres humanos, los animales y las plantas. F. Elementos genticos incorporados (genes y secuencias) y expresin a) Describa los elementos genticos (incluyendo los regulatorios, marcadores de seleccin, genes de inters, potenciadores de trascripcin u otras secuencias de inters) presentes en el o los plsmidos, tamao, funcin y origen de cada uno. b) Estudios sobre la estabilidad del inserto. c) Localizacin del inserto. d) Funcin de las protenas expresadas. e) Historial de uso seguro de las protenas expresadas y descripcin de todos los cambios previstos en el funcionamiento de las vas bioqumicas en que intervienen estas protenas f ) Homologa de las secuencias de aminocidos de las nuevas protenas con otras que son conocidas como txicas o alergnicas. g) Demostracin de la integracin de los elementos genticos introducidos (anlisis realizados). h) Tejidos donde se expresan. G. Deleciones realizadas Diga cules son los elementos genticos eliminados, su tamao y funcin. H. Otras modificaciones a) Detalle otras modificaciones que se realizarn en el ensayo o con posterioridad a ste. b) En el caso de mtodos de modificaciones que no impliquen la insercin de cidos nucleicos ni su delecin, indique los cambios realizados en las rutas metablicas o en otras caractersticas de los animales. I. Caractersticas del animal resultante a) Aporte datos sobre modificaciones similares que se hayan realizado en la especie y hasta qu etapa han llegado.
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b) Seale las caractersticas fenotpicas que hayan sido observadas hasta el momento. c) Describa si se han estudiado en el laboratorio los niveles de expresin de la protena de inters y los mtodos empleados para ese estudio. d) Si la expresin del gen es inducida, describa los mecanismos por los cules se produce. J. Ubicacin y caractersticas generales de la instalacin para los ensayos a) Describa la ubicacin de asentamientos humanos o reas con animales en los alrededores de la instalacin del ensayo. b) Especifique cmo es la topograf a del lugar, detallando posibles inundaciones. c) Indique la distancia de reas donde se cra comercialmente la especie no transformada. d) Seale la cercana de reas protegidas u otros sitios de inters cercanos al lugar como: reas de recale, zonas de nidacin o trnsito de aves migratorias, mataderos, instalaciones para cra de insectos (lucha biolgica), puertos, aeropuertos, reas de turismo internacional, etc., con riesgo biolgico para la salud animal y la humana. e) Diga cul es la situacin epizootiolgica de la regin o el rea, segn la clasificacin del Instituto de Medicina Veterinaria. f ) Seale las caractersticas constructivas de las instalaciones segn la resolucin 112/03 del CITMA, donde se deben describir pisos, paredes, techos, puertas, ventanas, accesos a la instalacin y al local donde estn los animales, presencia de paso sanitario, locales para necropsias y para el procesamiento de muestras. g) Describa los sistemas de tratamiento de residuales lquidos, slidos y gaseosos, tipo y forma de controlarlos. K. Personal vinculado al ensayo a) Diga el nombre del responsable del ensayo. b) Relacione el personal vinculado al ensayo, su calificacin y si se encuentra capacitado en bioseguridad.
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L. Desechos Describa todos los desechos que se generan en el proceso y en las diferentes etapas, su clasificacin y el mtodo empleado para su eliminacin. M. Efectos adversos a) Presente un informe o registro de la identificacin y caracterizacin de los riesgos. b) Seale las medidas de gestin para los riesgos identificados. N. Informe de los principales resultados obtenidos en el laboratorio Informe los principales resultados obtenidos hasta el momento y que justifican un nuevo ensayo. . Propsito del ensayo Describa el objetivo del ensayo. O. Seguimiento o monitoreo De los mtodos de seguimiento propuestos diga: a) Frecuencia del seguimiento. b) Forma en que se tomarn las muestras. c) Tamao de la muestra. d) Instituciones encargadas del seguimiento. P. Planes de emergencia ante situaciones imprevistas Seale: a) Todas las situaciones que pudieran provocar emergencias. b) Condiciones de vulnerasbilidad. c) Medidas que se tomarn en cada caso. d) Recursos necesarios. e) Quines son los responsables del cumplimiento de cada medida y las formas de comunicacin con ellos.
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Parte II: Requisitos generales para confeccionar el expediente arte Requ sitos generale par confecc qui ales ara ccionar ex iente tc ensayos confinados gr es ala animale males tcnico de ensayos confinados a gran escala con animales transgnico ansgnicos acu tico cos transgnicos no acuticos 1. Informe de los ensayos anteriores realizados con estas modificaciones. Si los informes de estudios realizados anteriormente no se han enviado al rgano regulatorio, detalle los resultados. 2. Entidad que asumir su comercializacin despus de estos ensayos. Describa si se han realizado coordinaciones con algn organismo de la administracin central del Estado para la futura comercializacin de la especie. 3. Caracterizacin molecular del animal transgnico. Explique los estudios realizados para comprobar los elementos insertados. 4. Niveles de expresin en los tejidos diana y otros con inters para la seguridad de los animales. Detalle los estudios que demuestran los niveles de expresin de los genes introducidos. 5. Caractersticas de la instalacin donde se realizarn los ensayos y sus condiciones dentro de los ambientes acuticos. Describa la instalacin donde se realizarn los ensayos y sus condiciones de seguridad segn la resolucin 112/03 del CITMA, as como las condiciones ambientales de dicha rea. 6. Proximidad del lugar a seres humanos, flora y fauna. Describa los asentamientos poblacionales en la cercana de la instalacin y la flora y la fauna que habita en la zona. 7. Disponibilidad de condiciones adecuadas para el organismo que ser sometido a ensayo. Segn los objetivos del ensayo: a) Detalle si existen las condiciones adecuadas para permitir el desarrollo de los animales hasta el final del ensayo. b) Diga si hay posibilidad de incremento excesivo de la poblacin del organismo sometido al ensayo y si puede llegar al medio ambiente. 8. Resultados de la evaluacin de riesgos del ensayo para la salud humana. Diga:
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a) Produccin de sustancias txicas o alergnicas. b) Desarrollo de enfermedades zoonticas. 9. Resultados de la evaluacin de riesgos del ensayo para el medio ambiente. Diga: a) Si la especie puede ser considerada como invasora. b) Si desplaza a otras especies. c) Cules son los niveles de degradacin gentica y extincin de la especie. d) En caso de que los organismos en ensayo escaparan y pudieran llegar al medio ambiente natural, describa las ventajas competitivas en relacin con los animales que cohabitan en el ecosistema. 10. Estudio riesgo-beneficio de la modificacin realizada. Detalle los resultados del estudio donde se identifiquen los riesgos y los beneficios de dicho animal transformado. 11. Descripcin de las tcnicas de seguimiento Detalle las tcnicas para el seguimiento de los organismos en el medio ambiente, entre ellas, la proposicin de captura, la entidad encargada de realizarla, los equipos que se utilizarn y las mediciones que se harn. 12. Tratamiento de desechos. a) Describa todos los desechos que se generan en el proceso durante las diferentes etapas, su clasificacin y el mtodo de eliminacin. b) Destino de los organismos una vez concluido el ensayo. c) Si se van a conservar los organismos o sus productos, especificar la forma de almacenamiento y de identificacin para evitar que se mezclen con otros materiales. 13. Transportacin. Describa las condiciones de transportacin de los OVMs acuticos o sus productos, en los casos necesarios. 14. Pruebas toxicolgicas. Describa los ensayos toxicolgicos que se realizarn, en qu laboratorios y con qu mtodos y tcnicas.

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Parte III: Requisitos generales para confeccionar el expediente arte Requ sitos generale par confecc qui ales ara ccionar ex iente tc comerciali aci in animale transgnico males ansgnicos acu ticos tcnico de comercializacin de animales transgnicos no acuticos 1. Certificados del Registro Sanitario Veterinario y del Registro de Alimentos de Salud Pblica. Diga si se ha obtenido el certificado sanitario o certificacin similar por parte del Instituto de Medicina Veterinaria y el Ministerio de Salud Pblica. 2. Caracterizacin fenotpica del OVM en relacin con los no modificados. a) Morfologa. b) Ciclo de vida. c) Capacidad reproductiva. d) Adaptacin a factores biticos y abiticos. 3. Organismo como alimento humano o para otros animales. Si el propsito del organismo es servir como alimento al hombre o a otros animales, diga: a) Existencia o no de la protena derivada de la caracterstica introducida en el alimento (si el producto final es utilizado con estos fines); si el alimento es procesado, posible exclusin de la protena durante el proceso. b) Pruebas bioqumicas realizadas en animales. c) Pruebas de digestibilidad de la protena o el producto. d) Acreditacin de las pruebas toxicolgicas realizadas: toxicidad, mutagenicidad, teratogenicidad y carcinogenicidad de las nuevas protenas en animales de laboratorio. e) Determinacin de la inocuidad del alimento. f ) Determinacin de la alergenicidad del alimento. g) Composicin nutricional del OVM y comparacin con la contraparte no modificada. 4. Datos de otras utilizaciones previstas diferentes a las la utilizacin del OVM como alimento. Detallar la utilizacin prevista para el organismo modificado (biomodelo, biorreactor). 5. Estudios de evaluacin de riesgos sobre posibles efectos ecolgicos y sobre la salud humana y la animal (segn tcnicas reconocidas u otras debidamente validadas. Describir la tcnica de anlisis de riesgo que se utiliz, los pasos que se dieron y los resultados a que se arrib.
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6. Anlisis riesgo-beneficio. Detalle el resultado tanto de los riesgos como de los beneficios que se obtendrn con la modificacin. 7. Seguimiento y vigilancia poscomercializacin. Describa las tcnicas de seguimiento y de vigilancia poscomercializacin. 8. Para el caso de animales transgnicos importados. Adems de la informacin anterior que preceda diga: a) Pas de origen. b) Exmenes y certificados veterinarios y sanitarios del pas de origen que se exigen en las importaciones. c) Datos de la instalacin donde se realizar la cuarentena, indicando si tiene autorizacin del rgano regulatorio de la seguridad biolgica y de otros que son regulatorios en el pas. d) Investigaciones que se realizarn en el perodo de cuarentena.

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ANEXO 8 sta cheque par rev queo ara ex iente tc Lista de chequeo para revisar el expediente tcnico producc duccin ensayos confinados de produccin y ensayos confinados animale transgnico acu ticos males ansgnicos de animales transgnicos acuticos

No. Aspectos que se comprueban Rece ceptor Receptor 1. La especie de animal acutico transformada es de importancia econmica? 2. Se transform una lnea pura? 3. La transformacin realizada responde a un objetivo de importancia para el pas en la acuicultura o el maricultivo? 4. La especie transformada est bien caracterizada y confirmada? 5. Se conoce el origen o adquisicin del receptor? 6. El animal acutico tiene una historia amplia de uso seguro en la alimentacin humana o en la produccin de suplemento de origen animal? 7. La especie transformada carece de propiedades txicas o alergnicas conocidas? 8. Se puede afirmar que no existen riesgos relacionados con el centro de origen del animal acutico?
1 2

No NP1 Obs.2

NP: No procede. La columna se llenar colocando un nmero en orden consecutivo, independiente del que tiene la pregunta, el cual se tomar como referencia para describir la observacin, segn el modelo colocado al final de este anexo.

No. Aspectos que se comprueban S 9. Se puede afirmar que no existen riesgos relacionados con los centros de diversidad gentica de la especie? 10. El animal acutico se reproduce comercialmente mediante huevos y larvas certificadas, excluyendo la exportacin? 11. Es imposible el intercambio de genes con especies sexualmente compatibles? 12. Est documentado, por fuentes confiables, que las formas reproductivas (huevos o larvas) no pueden ser transportadas por ningn medio a grandes distancias fuera de las reas del estanque? 13. Si ocurriera el cruzamiento con especies compatibles sexualmente, es imposible que los hbridos resultantes sean capaces de reproducirse, sobrevivir o competir? 14. Se garantiza que los animales reproductores no lleven los huevos en la boca para que no se diseminen? 15. Las caractersticas del animal acutico indican que no es una especie extica invasiva? 16. Existe descripcin de los hbitats donde el receptor puede persistir y proliferar? 17. Se dispone de datos que aseguren que el animal acutico slo puede desarrollarse en las condiciones suministradas por el hombre en los estanques? 18. Estn descritos todos los organismos y microorganismos asociados al animal acutico que puedan ser depredadores o causantes de enfermedades? 19. Estn desarrollados los kits diagnsticos para detectar las principales enfermedades de la especie en estudio?

No NP1 Obs.2

101

No. Aspectos que se comprueban 20. Se conoce la composicin bioqumica del receptor? Mtodo transformacin ansformac Mtodo de transformacin 21. Est detallado el mtodo de transformacin? 22. Existe familiarizacin con el mtodo de transformacin? 23. Est determinado el nmero de copias insertadas? Or anismo vivo mod icado Organismo vivo modificado 24. Est definido el evento de transformacin? 25. Existe familiarizacin con este animal acutico transgnico? 26. Est documentado el uso de este animal? 27. Se podr procesar industrialmente el OVM? 28. Se ha modificado el animal acutico para que sea estril? 29. Se describen las caractersticas fenotpicas y genotpicas del animal acutico resultante? 30. Son idnticas las caractersticas fenotpicas del OVM y las del receptor? 31 El OVM tiene igual susceptibilidad a los factores biticos y abiticos que el receptor? 32. Estn descritas las actividades de las protenas expresadas y sus especificidades? 33. Se ha logrado expresar las protenas de inters en tejidos especficos? 34. Se ha logrado expresar las protenas de inters en una fase fenolgica especfica? 35. La expresin gnica es inducida? 36. Estn descritos los agentes inductores de la expresin gnica? 37. Est documentada la metodologa de deteccin e identificacin del OVM?
102

No NP1 Obs.2

No. Aspectos que se comprueban S 38. En el expediente aparecen datos experimentales que demuestren la especificidad y la sensibilidad de esta metodologa? 39. Los OVM presentan los mismos parmetros de apareamiento que los animales acuticos no modificados? 40. Se puede afirmar que no se evidencian diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a la evasin de depredadores? 41. Se puede afirmar que no se evidencian diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a la resistencia a enfermedades? 42. Se puede afirmar que no hay diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a la eficiencia de su alimentacin, aunque sta no fuera motivo de la modificacin? 43. Se puede afirmar que no se evidencian diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a la velocidad de nado? 44. Se puede afirmar que no se evidencian diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a la dominancia social? 45. Se puede afirmar que no se evidencian diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a la atraccin sexual? 46. Se puede afirmar que no se evidencian diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a la marcacin de su territorio o adquisicin de sitio? 47. Se puede afirmar que no se evidencian diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a la proteccin de los nidos? 48. Se puede afirmar que no se evidencian diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a la competencia?

No NP1 Obs.2

103

No. Aspectos que se comprueban S 49. En el expediente aparecen datos que avalen la viabilidad de los animales juveniles modificados y de los no modificados? 50. En el expediente aparecen datos que avalen la viabilidad de los animales adultos modificados y los no modificados? 51. En el expediente aparecen datos que avalen la edad de primera maduracin de los OVMs y de los no modificados? 52. En el expediente aparecen datos que avalen la fecundidad de la hembra de los OVMs y la de los no modificados? 53. En el expediente aparecen datos que avalen la fertilidad del macho de los OVMs y la de los no modificados? 54. En el expediente aparecen datos que avalen la ventaja de apareamiento entre los OVMs y los no modificados? 55. Se ha demostrado que las protenas expresadas no son txicas ni alergnicas para los seres humanos? 56. Se conoce la actividad biolgica de las protenas en el ecosistema acutico? 57. La protena insertada se encuentra funcional y estructuralmente relacionada con protenas de historia de uso seguro? 58. Si existen cambios en la produccin de animales acuticos por las mejoras introducidas, esa produccin tiene igual sostenibilidad que la tradicional en la obtencin de alimentos con destino a la poblacin? 59. Si existen cambios en la produccin de animales acuticos por las mejoras introducidas, la sostenibilidad es igual que en la forma tradicional para considerar su utilizacin en la elaboracin de medicamentos, desinfectantes, nutrientes o energa?
104

No NP1 Obs.2

No. Aspectos que se comprueban S 60. En el caso de animales acuticos resistentes a enfermedades, se puede asegurar que no existe la posibilidad de desarrollo de nuevos organismos patgenos? 61. Se han realizado ensayos en instalaciones para organismos acuticos (segn la resolucin 112/03 del CITMA) o en laboratorios con el animal acutico modificado genticamente? 62. Estn documentados los resultados? 63. Se puede afirmar que no se evidencian diferencias entre el OVM y la especie no modificada en cuanto a la composicin bioqumica? Instalacin par animale acu ticos alac ara males Instalacin para animales acuticos Nivel 1 64. La construccin garantiza la integridad durante el perodo de trabajo? 65. Est diseada para prevenir la entrada de roedores e invertebrados? 66. Es funcional, fcil de limpiar y desinfectar? 67. Est cercada o protegida dentro de otra instalacin que lo est? 68. El material del piso garantiza la seguridad y la higiene? 69. Permanece cerrada cuando no se est laborando en ella? 70. Existe seguridad contra intrusos? 71. Dispone de antecmara y paso sanitario? 72. Las reas perimetrales estn libres de malezas? 73. Se pueden realizar de manera segura varios experimentos simultneamente sin entrecruzamiento de los animales? 74. Existe registro de los experimentos que se realizan? 75. Estn disponibles las condiciones para el cambio de ropa y calzado que garantice la seguridad de los trabajadores y del experimento?

No NP1 Obs.2

105

No. Aspectos que se comprueban S 76. Estn disponibles los contenedores y las bolsas para el traslado de muestras? 77. Estn disponibles los procedimientos de trabajo, descontaminacin, traslado de muestras y entrada de personal? 78. Se demuestra que se cumplen las actividades que aparece en los procedimientos? 79. Existen planes de emergencia? 80. Se realizan simulacros con los planes de emergencia? 81. Est determinado que no existan zonas protegidas aledaas a la instalacin que pudieran ser afectadas? 82. Las caractersticas del terreno y del rea geogrfica impiden que ocurran inundaciones? 83. El director de la instalacin tiene conocimiento de los riesgos potenciales que entraan los ensayos? 84. El mximo responsable del ensayo conoce que los animales en experimento no pueden ser utilizados para otros fines que no sean los previstos en la investigacin y que se prohbe su uso como alimento? 85. Existe un diseo experimental para el ensayo? 86. Se han previsto medidas para evitar o minimizar la dispersin de las estructuras reproductivas? 87. El personal vinculado al ensayo est capacitado en bioseguridad? 88. Est documentada la disposicin de los animales del experimento, cuando concluya su evaluacin? 89. Los procedimientos de trabajo se encuentran en las reas de la instalacin? 90. Existe un programa de seguimiento del OVM?
106

No NP1 Obs.2

No. Aspectos que se comprueban S 91. Existe informacin sobre mtodos no moleculares para detectar e identificar el OVM? 92. Se clasifican y son tratados todos los desechos generados en los ensayos con OVMs? 93. Los mtodos de tratamiento de residuales estn validados o certificados como seguros? Nivel 2 94. La instalacin est diseada para evitar el escape de microorganismos e invertebrados asociados al ensayo? 95. En la instalacin existe autoclave? 96. Se descontaminan los desechos lquidos? 97. Se descontaminan los desechos slidos? 98. En la instalacin existen incineradores? 99. Se han previsto medidas para evitar o minimizar la dispersin de las estructuras reproductivas? 100. El cambio de ropa y el bao (a la salida) son obligatorios? Nivel 3 101. Los sistemas de ventilacin y climatizacin garantizan la hermeticidad de la instalacin? 102. Se comprueba la diferencia de presiones? 103. La instalacin cuenta con paso sanitario? 104. Se cuenta con un sistema de ventilacin en caso de ser necesario por el tipo de ensayo que se realiza? 105. Se cuenta con sistema de climatizacin para evitar el estrs en los trabajadores y en los animales? 106. La autoclave es de doble puerta? 107. Los contornos de la hermetizacin se encuentran a prueba de golpes? 108. El cambio de ropa y el bao (a la salida) son obligatorios?

No NP1 Obs.2

107

No. Aspectos que se comprueban S 109. La instalacin cuenta con gabinete de seguridad biolgica? 110. Se registran e informan los accidentes ocurridos?

No NP1 Obs.2

observacione iones Hoja de obser vaciones Obs. No. Descripcin

108

ANEXO 9 sta cheque par rev queo ara ex iente tc Lista de chequeo para revisar el expediente tcnico la producc duccin los ensayos confinados de la produccin y los ensayos confinados animale transgnico males ansgnicos acu ticos con animales transgnicos no acuticos

No. Aspectos que se comprueban Rece ceptor Receptor 1. La especie animal transformada es de importancia econmica? 2. Se transform una raza pura? 3. El animal transformado presenta un historial similar de domesticacin en Cuba o en otros pases? 4. La transformacin realizada responde a un objetivo de importancia para los planes de desarrollo pecuario del pas? 5. La transformacin realizada responde a un objetivo de importancia para el pas en los planes de desarrollo sostenible de las comunidades agrarias? 6. La especie transformada est bien caracterizada y confirmada?
1 2

No NP1 Obs.2

NP: No procede. La columna se llenar colocando un nmero en orden consecutivo, independiente del que tiene la pregunta, el cual se tomar como referencia para describir la observacin, segn el modelo colocado al final de este anexo.

No. Aspectos que se comprueban S 7. Se conoce el origen o adquisicin del receptor? 8. El animal tiene una historia amplia de utilizacin segura en la alimentacin humana y la produccin de suplementos de origen animal? 9. La especie transformada carece de propiedades txicas o alergnicas conocidas? 10. Se conoce que el lugar donde se realizan los ensayos o la liberacin no es centro de origen de la especie transformada? 11. Se conoce que el lugar donde se realizan los ensayos o la liberacin no es centro de diversidad gentica de la especie transformada? 12. La especie se reproduce comercialmente mediante inseminacin artificial? 13. La especie se reproduce comercialmente por monta directa con sementales certificados por un laboratorio que utiliza tcnicas validadas? 14. Se puede afirmar que es imposible el intercambio de genes con especies sexualmente compatibles? 15. Se conoce que la especie no es capaz de convertirse en amenaza para la salud animal y humana por ser trasmisora de enfermedades graves para el hombre y los animales? 16. Est documentado, por fuentes confiables, que las formas reproductivas (vulos, espermatozoides, huevos) o los subproductos (como la leche) no pueden ser transportados por ningn medio a grandes distancias fuera de las reas de la instalacin del ensayo? 17. Si ocurre el cruzamiento con especies compatibles sexualmente, se puede asegurar que los hbridos resultantes son incapaces de reproducirse, sobrevivir o competir? 18. Se puede afirmar que es imposible aplicar al OVM los criterios de especie extica invasiva?
110

No NP1 Obs.2

No. Aspectos que se comprueban S 19. Existe una descripcin de los hbitats donde el receptor puede persistir y proliferar? 20. Se dispone de datos que aseguren que la especie slo puede desarrollarse en las condiciones suministradas por el hombre en las instalaciones para ensayos? 21. Se dispone de datos que aseguren la imposibilidad de que la especie se convierta en especie extica invasora si llegara el medio ambiente por escape o liberacin intencional? 22. Se dispone de datos que aseguren la imposibilidad de que la especie se convierta en especie introducida si llegara al medio ambiente por escape de las instalaciones para ensayos? 23. Estn descritos todos los organismos y microorganismos asociados a la especie que puedan ser sus depredadores o causantes de enfermedades? 24. Estn desarrollados los kits diagnsticos para detectar las enfermedades de estos animales? 25. En caso de tratarse de un animal importado, se dispone de los certificados veterinarios del pas emisor y de la autorizacin del Instituto de Medicina Veterinaria? 26 Estn realizadas las caracterizaciones qumicas (composicin) del receptor y del OVM resultante? Mtodo transformacin ansformac Mtodo de transformacin 27. Est detallado el mtodo de transformacin? 28. Existe familiarizacin con el mtodo de transformacin? 29. Est determinado el nmero de copias insertadas? Ve Vector 30. La naturaleza y la fuente del vector estn caracterizadas?

No NP1 Obs.2

111

No. Aspectos que se comprueban S 31. Los sitios de restriccin de los elementos transferidos estn mapificados? 32. Existe una descripcin de los elementos genticos presentes en el o los plsmidos, el tamao y la funcin de cada uno? 33. Se describe cmo se construy el vector y el mtodo de clonacin? 34. Se ha demostrado que el vector fue desarmado? 35. Si se usan vectores virales, se han eliminados los casetes que pudieran resultar infectivos? 36. Se garantiza que no se utilizan retrovirus ni adenovirus como vectores? 37. Se han utilizado vectores virales en otras transformaciones de manera segura? 38. Si se usaron vectores comerciales, stos se encuentran debidamente certificados? 39. Se puede asegurar que no existen posibilidades de que los animales o el hombre adquieran agentes biolgicos patgenos mediante la recombinacin del vector del transgn y los provirus no patognicos del animal transgnico? Donantes onante Donantes 40. Estn descritos los orgenes (fuente) de cada uno de los elementos insertados? 41. Se conoce el punto de adquisicin y coleccin de los donantes? 42. Si se trata de microorganismos, estn clasificados en grupos de riesgo, segn establece la resolucin 42/99, del CITMA? 43. Se conoce que las secuencias insertadas provenientes de microorganismos no causan enfermedades o cualquier otro dao a los animales o a la salud humana?
112

No NP1 Obs.2

No. Aspectos que se comprueban 44. Se conoce que las secuencias insertadas provenientes de otros animales no pueden causar daos a otros animales o al hombre? Insertos erto Insertos 45. Se utilizan otros marcadores que no sean los de resistencia a los antibiticos? 46. Est determinado molecularmente que todas las partes del casete de integracin estn en el OVM? 47. Estn descritas las secuencias de los elementos que se consideran novedosos o relevantes y que han sido integradas al OVM? 48. Se han utilizado estrategias alternativas para la eliminacin de los marcadores de seleccin en el OVM? 49. Existe familiarizacin con el uso de estos elementos genticos en la transformacin de animales acuticos? 50. El inserto est localizado en el genoma? 51. La localizacin en el genoma de los mamferos se encuentra en la zona donde las secuencias no codifican para ninguna protena? 52. Se describe el mtodo para la determinacin de la ubicacin de los transgenes? 53. Si existieran marcadores de seleccin de resistencia a antibiticos, est documentado que no tienen repercusiones negativas en la salud animal ni en la humana? 54. Se ha demostrado que las secuencias insertadas se hallan establemente integradas? 55. Existen datos que demuestren que la caracterstica introducida es segregada segn las leyes mendelianas? 56. Se han realizado ensayos inmunolgicos (ELISA u otros) que demuestren el nivel de las protenas expresadas?

No NP1 Obs.2

113

No. Aspectos que se comprueban 57. Se demuestra que no existen homologas entre las secuencias insertadas y las secuencias del receptor? Or anismo vivo mod icado Organismo vivo modificado 58. Est definido el evento de transformacin? 59. Existe familiarizacin con el animal transgnico? 60. Est documentada su utilizacin? 61. Est demostrado que no se incrementa el riesgo con el OVM si se procesa industrialmente? 62. Se ha modificado el animal para que sea estril? 63. Se describen las caractersticas fenotpicas y genotpicas del animal resultante? 64. Se puede afirmar que el OVM no posee la capacidad de convertirse en introducido? 65. Se puede afirmar que el OVM tiene pocas probabilidades de escapar de los sitios de cautiverio? 66. Se puede afirmar que entre las propiedades del OVM est la baja movilidad? 67. Son idnticas las caractersticas fenotpicas entre el OVM y el receptor? 68. Se puede afirmar que el OVM tiene igual susceptibilidad a los factores biticos y abiticos que el receptor? 69. Estn descritas las actividades de las protenas expresadas y sus especificidades? 70. Se han logrado expresar las protenas de inters en tejidos especficos? 71. Se puede afirmar que las sustancias de inters que se expresan por las secuencias insertadas no pueden cambiar el tropismo tisular en el OVM obtenido?
114

No NP1 Obs.2

No. Aspectos que se comprueban S 72. Se han logrado expresar las protenas de inters en una fase fenolgica especfica? 73. La expresin gnica es inducida? 74. Estn descritos los agentes inductores de la expresin gnica? 75. Est documentada la metodologa de deteccin e identificacin del OVM? 76. En el expediente aparecen datos experimentales que demuestren la especificidad y sensibilidad de esta metodologa? 77. Los OVM presentan los mismos parmetros de atraccin sexual o apareamiento que los no modificados? 78. Se puede afirmar que no existen diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto al rgimen de explotacin zootcnica en el ensayo bajo condiciones de confinamiento? 79. Se puede afirmar que no existen diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a la resistencia a enfermedades? 80. Se puede afirmar que no existen diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a la eficiencia de su alimentacin? 81. Se puede afirmar que no existen diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a los ndices reproductivos? 82. Se puede afirmar que no existen diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a la dominancia social? 83. Se puede afirmar que no existen diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a los ndices de abortos? 84. Se puede afirmar que no existen diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a las cras nacidas muertas?

No NP1 Obs.2

115

No. Aspectos que se comprueban 85. Se puede afirmar que no existen diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a las malformaciones congnitas que pudieran aparecer? 86. Se puede afirmar que no existen diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a la mortalidad de las cras? 87. Se puede afirmar que no existen diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a la mortalidad de los animales jvenes? 88. Se puede afirmar que no existen diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a la mortalidad de los adultos? 89. Se puede afirmar que no existen diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a la morbilidad y la mortalidad por enfermedades carenciales? 90. Se puede afirmar que no existen diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a la morbilidad y la mortalidad por enfermedades infectocontagiosas? 91. Se puede afirmar que no existen diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a la morbilidad y la mortalidad por enfermedades parasitarias? 92. Se puede afirmar que no existen diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a la morbilidad y la mortalidad por enfermedades de infestacin por ectoparsitos? 93. Se puede afirmar que no existen diferencias entre el OVM y el receptor en cuanto a la morbilidad y la mortalidad por enfermedades hemoparasitarias? 94. En el expediente aparecen datos que avalen que no existen diferencias entre los OVMs y los no modificados en cuanto a la edad de maduracin sexual?
116

No NP1 Obs.2

No. Aspectos que se comprueban S 95. En el expediente aparecen datos que avalen que no existen diferencias entre los OVMs y los no modificados en cuanto a la fecundidad de la hembra? 96. En el expediente aparecen datos que avalen que no existen diferencias entre los OVMs y los no modificados en cuanto a la fertilidad del macho? 97. Se ha demostrado que las protenas expresadas no son txicas ni alergnicas para los animales y los humanos? 98. Se conoce la actividad biolgica de las protenas en el ecosistema ganadero y zootcnico? 99. La protena insertada se halla funcional y estructuralmente relacionada con protenas de historia de uso seguro? 100. Si existen cambios en la produccin de animales no acuticos por las mejoras introducidas, esa produccin tiene igual sostenibilidad que la tradicional en la obtencin de alimentos con destino a la poblacin? 101. Si existen cambios en la produccin de animales no acuticos por las mejoras introducidas, la sostenibilidad es igual que la tradicional para considerar su utilizacin en la elaboracin de medicamentos, desinfectantes, nutrientes y energa? 102. Se puede afirmar que en el caso de los animales resistentes a enfermedades, no existe la posibilidad de desarrollo de nuevos organismos patgenos? 103. Se puede afirmar que no existen posibilidades de adquirir agentes biolgicos patgenos en el transgn y que stos puedan afectar a otros animales o al hombre?

No NP1 Obs.2

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No. Aspectos que se comprueban S 104. Se han efectuado investigaciones de resilencia entre las poblaciones de los ecosistemas que pudieran ser afectados? 105. Los resultados de los estudios de resilencia avalan que en las poblaciones adonde han llegado los animales transgnicos el impacto de sta es menor que otros impactos? 106. Se puede afirmar que no existen posibilidades de que los animales y el hombre adquieran agentes biolgicos patgenos a travs de la recombinacin del vector del transgn y los provirus no patognicos del animal transgnico? 107. Se puede afirmar que no existen posibilidades de que los animales transgnicos utilizados como birreactores se integren a la cadena alimentaria de los animales y el hombre? 108. Se puede afirmar que no existen posibilidades de que los retrovirus endgenos de los cerdos transgnicos pasen a los hombres a travs de los xenotransplantes? 109. Se puede afirmar que no existen problemas ticos para la utilizacin de esos animales modificados genticamente como birreactores o en xenotransplantes? 110. Los ensayos con el OVM en instalaciones para animales o laboratorios, se han realizado segn la resolucin 112/03 del CITMA? 111. Estn documentados los resultados de estos ensayos? Instalacin par animale alac ara males acu ticos Instalacin para animales no acuticos Nivel 1 112. La construccin garantiza la integridad durante el perodo de trabajo? 113. Est diseada para prevenir la entrada de vectores y otros animales ajenos?
118

No NP1 Obs.2

No. Aspectos que se comprueban 114. Es funcional, fcil de limpiar y desinfectar? 115. Est cercada o protegida dentro de otra instalacin que lo est? 116. El material del piso garantiza la seguridad y la higiene? 117. Est restringida la entrada de personas no vinculadas con el ensayo? 118. Permanece cerrada cuando no se est laborando en ella? 119. Existe seguridad contra intrusos? 120. Dispone de antecmara y paso sanitario? 121. Las reas perimetrales estn libres de escombros y suciedades? 122. Se pueden realizar de manera segura varios experimentos simultneamente sin entrecruzamiento de los animales? 123. Existe registro de los experimentos que se realizan? 124. Todos los animales del experimento estn identificados de manera indeleble? 125. Se dispone de las ropas y el calzado para la seguridad de los trabajadores y del experimento? 126. Estn disponibles los contenedores y las bolsas para el traslado de muestras? 127. Se cuenta con los procedimientos de trabajo, descontaminacin, traslado de muestras, entrada de personal y de disposicin de los desechos? 128. Se demuestra que se cumplen las actividades que aparecen en los procedimientos? 129. Existen planes de emergencia? 130. Se realizan simulacros con los planes de emergencia? 131. Est determinado que aledaas a la instalacin no existan zonas protegidas que pudieran ser afectadas?

No NP1 Obs.2

119

No. Aspectos que se comprueban S 132. Las caractersticas del terreno y del rea geogrfica impiden que ocurran inundaciones? 133. El director de la instalacin tiene conocimiento de los riesgos potenciales que entraan los ensayos? 134. El mximo responsable del ensayo conoce que los animales en experimento no pueden ser utilizados para otros fines que no sean los previstos en la investigacin y que se prohbe su uso como alimento? 135. Existe un diseo experimental para el ensayo? 136. Se han previsto medidas para evitar o minimizar la dispersin de las estructuras reproductivas? 137. El personal vinculado al ensayo est capacitado en bioseguridad? 138. Est documentada la disposicin de los animales del experimento, cuando concluya su evaluacin? 139. Los procedimientos de trabajo se encuentran en las reas de la instalacin? 140. Existe un programa de seguimiento del OVM? 141. Existe informacin sobre mtodos no moleculares para detectar e identificar el OVM? Nivel 2 142. Existe paso sanitario? 143. La instalacin est diseada para evitar el escape de microorganismos e invertebrados asociados al ensayo? 144. En la instalacin existe autoclave? 145. Se descontaminan los desechos lquidos? 146. Se descontaminan los desechos slidos? 147. En la instalacin existen incineradores? 148. Se han previsto medidas para evitar o minimizar la dispersin de las estructuras reproductivas?
120

No NP1 Obs.2

No. Aspectos que se comprueban 149. Se disponen los resultados de las pruebas toxicolgicas de distintos tipos? 150. Se disponen los resultados de las pruebas ecotoxicolgicas? Nivel 3 151. Los sistemas de ventilacin y climatizacin garantizan la hermeticidad de la instalacin? 152. Existe presin negativa? 153. La autoclave es de doble puerta? 154. Los contornos de la hermetizacin se encuentran a prueba de golpes? 155. El cambio de ropa y el bao (a la salida) son obligatorios? 156. La instalacin cuenta con gabinete de seguridad biolgica? 157. Los gabinetes de seguridad biolgica se encuentran certificados y validados? 158. Se registran e informan los accidentes ocurridos? 159. Todas las autoclaves se encuentran certificadas y validadas? 160. Todos los sistemas de tratamiento de residuales lquidos, slidos y gaseosos se encuentran certificados y validados? 161. Los sistemas de ventilacin se encuentran certificados y validados? 162. Los sistemas de hermetizacin se encuentran certificados y validados? Nivel 4 163. Existen los trajes de presin positiva? 164. Existen procedimientos para descontaminacin de los trajes de presin positiva?

No NP1 Obs.2

121

Hoja de obser vaciones observacione iones Obs. No. Descripcin

122

ANEXO 10 mento tos deb est disponible star onibles Documentos que deben estar disponibles la instalac nstalacin par ensayos ara animale males en la instalacin para ensayos con animales transgnico acu ticos ansgnicos acu ticos transgnicos acuticos y no acuticos

El solicitante de autorizacin para un ensayo con animales transgnicos es responsable de que en la instalacin exista la documentacin necesaria para el seguimiento de las actividades zootcnicas y sanitarias realizadas durante los ensayos, el cumplimiento de las medidas de bioseguridad establecidas en el expediente tcnico y de las condiciones de vigencia impuestas por el rgano regulador y el registro de los incidentes y accidentes en relacin con la seguridad del ensayo. Esta documentacin debe estar disponible en el rea de ensayo y se mostrar a los inspectores de seguridad biolgica cuando les sea solicitada como parte de la realizacin de la inspeccin para el otorgamiento de la autorizacin, as como en la inspeccin de verificacin de las condiciones de vigencia. Contenido la doc mentacin Contenido de la documentacin Informacin general: 1. Copia de la autorizacin concedida por el rgano regulador para la realizacin del ensayo. 2. Copia de la autorizacin sanitaria por parte de las autoridades competentes. 3. Relacin de personal vinculado con el ensayo 4. Evidencias de la capacitacin en bioseguridad del personal relacionado con el ensayo.

5. Descripcin de las actividades que se realizarn, incluyendo las fechas de inicio y terminacin del ensayo. 6. Planos de la ubicacin del rea de ensayo, las instalaciones de animales colindantes, as como de fuentes y espejos de agua, en el caso de animales acuticos. 7. Croquis del diseo experimental utilizado, detallando la ubicacin de las diferentes variantes. 8. Planes de emergencia ante desastres naturales, efectos adversos detectados o accidentes ocurridos en el rea de ensayo. Se incluye el personal que debe ser contactado, sus formas de localizacin y los responsables de las medidas que se tomarn as como los recursos necesarios para implementarlas. Registros la actividade tividades se real arn ali Registros de las actividades que se realizarn durante desarrollo ensa durante el desarrollo del ensayo 1. Fecha en la que se inicia y termina el ensayo. 2. De acuerdo con el objetivo del ensayo, descripcin detallada de las actividades zootcnicas y sanitarias realizadas y las fechas en que se realizaron: a) Desoves (en el caso de los animales acuticos). b) Pesaje de las larvas, los animales juveniles y los reproductores (en el caso de los animales acuticos). c) Sexado. d) Separacin. e) Apareamiento. f ) Fechas de aplicacin de hormonas u otros frmacos. Detallar los productos utilizados. g) Saneamiento: fecha, producto utilizado, vas, concentraciones y personal que lo realiz. 3. Fecha en que se realizan las medidas de gestin de riesgos del ensayo: a) Obtencin de animales infrtiles. b) Aplicacin de desinfectante y concentracin en las trampas para evitar las salidas de formas reproductivas. c) Colocacin de dispositivos para evitar la entrada de aves pescadoras, si fuera necesario segn el caso. d) Eliminacin de los desechos slidos.
124

4. 5.

6. 7.

8.

e) Validacin de los sistemas de tratamiento de residuales lquidos en las instalaciones que lo requieran. Variaciones fenotpicas y de comportamiento de los animales transformados en el ensayo en relacin con los no transformados. Registro de accidentes ocurridos: hurtos de material transgnico, entrada de animales ajenos, destruccin intencional o daos provocados por otros animales en el rea, ocurrencia de inundacin, tornado, huracn, fuego u otro desastre natural. Salida de muestras del rea de ensayo, objetivos de sta y destino. Destino final de los animales sometidos a experimentacin indicando la cantidad exacta de animales, cmo se transportan, matrcula del vehculo, plan de transportacin, direccin a la cual se expiden, forma de envasado y etiquetado y documentacin que justifica la entrega. Tratamiento de los residuos. a) Fechas en las cuales se realiza el tratamiento de los residuos del ensayo. b) Descripcin de los mtodos de tratamiento empleados, controles que se realizan y efectividad de dichos mtodos, debidamente documentados. c) En el caso de que el tratamiento de los residuos se realice mediante incineracin en una instalacin incineradora de residuos autorizada, se deber acreditar la destruccin de stos mediante documentacin justificante entregada por el titular de la instalacin.

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ANEXO 11 Informe de los resultados de los ensayos con animales transgnicos acuticos y no acuticos

El solicitante de autorizacin para un ensayo con animales transgnicos acuticos y no acuticos deber incluir en el informe dirigido al rgano regulador los resultados obtenidos durante el ensayo, teniendo en cuenta los aspectos de bioseguridad relacionados en los anexos de esta gua. El informe final se deber entregar en un perodo que no exceda los treinta das despus de realizado el ensayo. El formato general para el informe puede variar segn el tipo de animal o el objetivo del ensayo, pero los elementos generales son: 1. 2. 3. 4. 5. 6. Nmero de la licencia concedida por el rgano regulador. Especie ensayada. Tipo de transformacin realizada. Lugar de realizacin del ensayo. Cantidad de animales empleados en el ensayo. Conclusiones del ensayo respecto a los objetivos planteados (incluir anlisis estadsticos realizados). 7. Efectos adversos potenciales previstos. Confirmacin y validacin de cualquier hiptesis en relacin con los efectos adversos previstos. 8. Medidas de gestin de riesgos empleadas. Destacar aquellas que no fueron informadas en el expediente y las que tuvieron que ser utilizadas como complemento durante el desarrollo del experimento.

9. Plan de seguimiento programado. En el caso de que hubiera sido necesario realizar cambios en los mtodos de seguimiento respecto a los planificados en el expediente, detallar: a) Transferencia de genes. b) Dinmica de poblaciones en especies no blanco. c) Observaciones de efectos no esperados. 10. Ocurrencia de efectos adversos no previstos. 11. Medidas que se adoptarn de acuerdo con los resultados obtenidos, incluyendo la realizacin de nuevos ensayos, nuevas transformaciones o caracterizaciones moleculares. 12. Planes de emergencia que tuvieron que ser activados y qu los motiv.

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ANEXO 12 ida gestin riesgos iesgo Medidas de gestin de riesgos organismo vivo mod icado smos ivos ados de organismos vivos modificados

Plan ant Us confi Plantas. Uso confinado Cumplir con lo establecido en las resoluciones 8/00 y 103/02 del CITMA. Por su importancia se destacan los siguientes aspectos: En instalaciones de investigacin 1. Evitar las mezclas de material transgnico con material no transgnico, si el rea de micropropagacin se encuentra en la misma instalacin donde se manipulan ambos materiales. 2. Tratar todo el material vegetal transgnico pare evitar que alguna parte de ste pueda desarrollarse fuera de la instalacin. Durante los ensayos en casa verde 1. Prevenir el escape de material viable fuera de la instalacin. 2. Evitar el uso del material en ensayo con cualquier fin diferente al previsto. 3. Descontaminar los sustratos utilizados para los ensayos. 4. Evitar la salida del agua de riego fuera de la instalacin.

Ensayos de liberacin de plantas al medio Ensayos liberac iberacin plan ant med Segn la experiencia nacional e internacional pueden citarse las siguientes medidas: Durante los ensayos de campo 1. Seleccin del sitio adecuado para la realizacin del ensayo tomando en consideracin la presencia de especies compatibles sexualmente y que cumpla con las siguientes condiciones: a) El sitio debe estar ubicado en una estacin experimental del cultivo, un instituto de investigacin, un rea de mejoramiento gentico o en otra donde se garantice su proteccin ante intrusos, robos, entrada de animales que pastan, aves, etctera. b) Tener establecidas las coordenadas geogrficas del rea de liberacin y un croquis de las reas aledaas en las cuales aparecen ncleos poblacionales, otras instalaciones, cultivos pertenecientes a empresas estatales o particulares, etctera. c) No debe estar ubicado cerca de ros, arroyos o en reas que puedan inundarse fcilmente. d) Contar con sistemas de regado que impidan la salida del agua de riego fuera del rea de ensayos. e) Estar atendido por personal agrcola capacitado en temas de bioseguridad de plantas transgnicas. f ) El responsable del ensayo en el rea experimental debe contar con toda la documentacin necesaria para la realizacin del ensayo y llevar un registro de todas las actividades realizadas. g) Estar situado en lugares donde se puedan aplicar las distancias de aislamiento propuestas. h) Estar ubicado en zonas donde los planes de emergencia ante desastres naturales puedan ser aplicados con tiempo. i) Estar libres de malezas y otras plagas que no guarden relacin con el ensayo. j) Disponer de condiciones para eliminar los desechos vegetales generados en el ensayo: crematorio, pozos, hoyos. k) Mantener tres metros de reas perimetrales limpias de malezas.
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2. Medidas para lograr el aislamiento reproductivo de plantas de la misma especie no modificadas y de otras especies compatibles sexualmente y que no forman parte del ensayo: a) Mantener la distancia de aislamiento (segn lo establecido para garantizar la pureza de las semillas certificadas). b) Enjaular las plantas. c) Embolsar las estructuras reproductivas antes de la floracin. d) Colocar hileras de otras plantas alrededor de las del ensayo para la retencin del polen. e) Remover las estructuras reproductivas. f ) Concluir el ensayo antes de la floracin. g) Utilizar reguladores de crecimiento que impidan la floracin. h) Revisar y remover las especies silvestres compatibles sexualmente. i) Tener en cuenta los momentos de floracin de las plantas transgnicas para que no coincidan con los de las especies compatibles sexualmente. 3. Mantener debidamente identificas, ya sea en el terreno o en los planos, cada una de las variantes del ensayo. 4. Mantener distancias entre variantes y rplicas que impidan la mezcla de stas durante el desarrollo del cultivo. 5. Tomar medidas para prevenir el contacto y la diseminacin de material viable por animales que pueden pastar en las reas del ensayo, las aves u otros. 6. Limpiar adecuadamente las maquinarias u otros instrumentos utilizados en los ensayos antes de transferirlos a otras reas, para evitar la salida de material viable. 7. Capacitar en bioseguridad al personal auxiliar (de campo) que realiza las labores agrcolas y las observaciones para que cumpla las medidas establecidas y sea capaz de informar ante cualquier efecto adverso no previsto que pudiera ser obvio (crecimiento inusual, mortalidad de abejas). 8. Establecer un sistema de marcaje del material reproductivo que ser utilizado en el ensayo (semillas, cormos, vitroplantas, esquejes), que permita identificarlo fcilmente como transgnico para evitar que se pueda mezclar con cualquier material no transgnico. 9. Registrar cualquier movimiento de material que se realice fuera del rea durante el ensayo.
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10. Destruir todo el material reproductivo excedente del ensayo y dejar constancia de la destruccin. Si se requiere conservar algn material, se deber contar previamente con la autorizacin del rgano regulatorio. Adems, se deber identificar con claridad, transportar de manera segura y almacenar separado de otros con los cuales se pudiera mezclar. 11. Disponer de un plan de seguimiento (monitoreo). 12. Disponer de un plan de emergencia para desastres naturales u otros efectos adversos, que incluya, adems, las medidas que se adoptarn en caso de liberacin accidental del material de ensayo y la notificacin a las autoridades implicadas (forma de localizacin). Despus de finalizado el ensayo de campo 1. Observar el sitio donde se realiz el ensayo para eliminar plantas voluntarias antes de su floracin. 2. No cultivar en el rea especies compatibles o la misma especie hasta que transcurra un perodo mayor que el de un ciclo del cultivo transgnico. Gestin de riesgos para actividades con animales acuticos riesgos par actividade iesgo ara tividades animale acu ticos males En las actividades con animales acuticos se deben cumplir las siguientes medidas de gestin de riesgos: 1. Antes de iniciar los ensayos, todo el personal debe ser capacitado en materia de seguridad biolgica 2. Conteo f sico de los animales. 3. Efectuar el marcaje de manera permanente y fcil lectura, mediante la utilizacin de mtodos confiables que lo hagan imborrable. 4. Siempre que sea factible, se deben utilizar animales estriles previendo que pudieran escapar al medio ambiente. 5. Identificacin y marcaje de las jaulas. 6. Utilizar contenedores sealizados para transportar las muestras que se generen durante el ensayo. 7. Cuando los ensayos requieran estudios anatomopatolgicos stos se realizarn en salas de necropsias con los requisitos exigidos por la legislacin de seguridad biolgica vigente aprobada por el rgano regulatorio.
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8. Desinfectar, con mtodos documentados y validados, todos los instrumentos que se utilizaron en el experimento y aquellos que se requiera sacar del rea para su reparacin. 9. Tratar, mediante mtodos validados y aprobados por el rgano regulatorio, todos los residuales lquidos antes de ser vertidos. 10. Eliminar los animales que se enfermen durante el ensayo e investigar la causa de la enfermedad. 11. En caso de brote de enfermedades infecciosas, se debe suspender el ensayo, eliminar todos los animales e informar a las autoridades competentes. 12. Para trasladar los animales es necesaria una autorizacin del rgano regulatorio. 13. El traslado de los animales se realizar mediante transporte equipado con dispositivos que eviten su fuga. 14. Las condiciones de temperatura y humedad deben estar en correspondencia con el tipo de organismo y la especie de que se trate. 15. Los animales utilizados en el ensayo no podrn ser consumidos por los seres humanos ni por otros animales. 16. Una vez terminado el ensayo, se deben eliminar todos los animales que se utilizaron en l. 17. Como conclusin y cierre del ensayo se debe elaborar un acta, firmada y acuada, donde conste la completa eliminacin de todos los animales, la disposicin final de los desechos del ensayo, las desinfecciones en la instalacin y que todo esto ha sido comprobado. 18. Confeccionar un expediente tcnico que contenga toda la informacin sobre el animal transgnico acutico modificado. Instalacione alaciones ensa animale transgnico acu ticos males ansgnicos Instalaciones de ensayo con animales transgnicos acuticos 1. Debern estar ubicadas en rea donde no se produzcan inundaciones y en la cual se cumplan los requisitos exigidos en la resolucin 112/03 del CITMA. Los materiales deben ser resistentes a los cambios bruscos de las condiciones climticas. Adems, la instalacin debe garantizar la proteccin contra intrusos, robos, entrada de animales ajenos al ensayo, etctera. 2. Tener establecidas las coordenadas geogrficas de la instalacin y un plano o croquis de las reas aledaas en el cual aparezcan ncleos
132

3. 4. 5.

6. 7. 8. 9. 10. 11.

12. 13.

14.

poblacionales, instalaciones, animales por especie y pertenencia, poblaciones de animales silvestres, reas con riesgos biolgicos (mataderos, losas sanitarias, zonas de recale, trnsito de aves migratorias, cafileras, laboratorios de diagnstico, investigacin o produccin, empresas estatales, privadas o mixtas). Deben estar ubicadas lejos de ros, arroyos o en reas que se puedan inundar fcilmente. Disponer de sistemas de suministro seguro de agua, gas y electricidad. El responsable del ensayo en el rea experimental debe contar con la documentacin necesaria para la realizacin del ensayo y llevar un registro de todas las actividades realizadas, as como de los procedimientos de operacin. Estar ubicadas en zonas donde los planes de emergencia ante desastres naturales puedan ser aplicados con tiempo. Disponer de proteccin contra insectos y otros vectores. Disponer de condiciones para eliminar los desechos generados en el ensayo (incineradores, autoclaves u otros medios). Mantener la restriccin de acceso a las reas de experimentacin. Disponer de un rea para observaciones clnicas de los animales. Las reas debern estar sealizadas con el smbolo de riesgo biolgico, el nombre del ensayo, el tipo de organismo y las personas autorizadas para entrar en la instalacin. No se permitir la presencia de animales o plantas ajenas al ensayo. La instalacin se someter a desinfecciones completas en el momento y mediante los mtodos validados y aprobados por el rgano regulatorio. Tener disponibles los documentos emitidos por los diferentes rganos regulatorios, plasmados en la legislacin vigente, para las diferentes actividades que se realicen (tanto sanitarias como ambientales).

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ANEXO 13 egu miento actividade tividades organismo smos Seguimiento en actividades con organismos ivos mod icado ados vivos modificados

vento los cuales se les dar seg miento tos ar egu Eventos a los cuales se les dar seguimiento tivid utori eg la actividad autor ada segn la actividad autorizada
Actividad Evento que se vigilar Ensayos confinados a pequea y 1. Escape de las condiciones de gran escala. confinamiento. 2. Transferencia de genes. 3. Desplazamiento de especies. 4. Efectos sobre especies no blanco. 5. Cambios en las caractersticas fenotpicas (crecimiento, reproduccin, mayor resistencia a enfermedades y cambios en el medio ambiente), lo cual facilita su conversin en malezas o plagas. 1. Transferencia de genes. Ensayos no confinados. 2. Desplazamiento de especies. 3. Efectos sobre especies no blanco. 4. Cambios en las caractersticas fenotpicas, (crecimiento, reproduccin, mayor resistencia a enfermedades) y cambios en el medio ambiente, lo cual facilita su conversin en malezas o plagas. Importacin y/o 1. Efectos adversos sobre el medio ambiente. comercializacin.

Frecuencia y duracin La frecuencia y la duracin de la vigilancia se establecern teniendo en cuenta las tcnicas que se aplicarn al caso en cuestin y al OVM en s. Por ejemplo, la frecuencia de la observacin alrededor de un rea de liberacin para detectar posibles escapes de una planta transgnica se establecer de acuerdo con el ciclo de reproduccin de la planta y slo se proceder a aplicar tcnicas ms complejas de deteccin e identificacin del transgn si con stas se obtienen resultados positivos. Otro ejemplo puede ser el seguimiento de los cambios en las caractersticas conductuales en lo que a crecimiento y reproduccin se refiere, donde la observacin sistemtica se convierte en la tcnica ms til, y se toman como referencia las caractersticas reconocidas de ese organismo en su forma natural y/o estableciendo patrones de comparacin entre el OVM y otros de la misma especie. La duracin de los planes de seguimiento, as como la frecuencia de la aplicacin de una u otra tcnica, no se deben fijar de manera indefinida, sino que se debern revisar y modificar cuando as lo indiquen los resultados obtenidos durante la ejecucin del programa. Asimismo, el programa de seguimiento variar en correspondencia con cada una de las actividades que se pretenda realizar con el organismo vivo modificado. Muestreo El muestreo y la deteccin se deben llevar a cabo siguiendo protocolos cientficos y estadsticos rigurosos para conseguir un nivel adecuado de seguridad en la vigilancia y/o seguimiento de los efectos adversos por la liberacin de los OVMs. Para la definicin de los procedimientos de muestreo se debe partir de que las muestras tomadas y analizadas sean representativas de los distintos tipos de organismos sometidos a investigacin. Mtodos de anlisis estadstico Los mtodos estadsticos se aplicarn tanto para el anlisis de los resultados obtenidos como para la seleccin de un tamao de muestra que sea representativa y para establecer la frecuencia del seguimiento que garantice un nivel estadstico de deteccin de efectos ms adecuado.
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Tcnicas Tanto la vigilancia como el seguimiento podrn hacer uso, si procede, de prcticas rutinarias de vigilancia ya establecidas, tales como la supervisin de cultivos agrcolas, la proteccin fitosanitaria, los sistemas de vigilancia veterinarios y mdicos. Dado los diversos objetivos del seguimiento, las tcnicas empleadas varan de rango, desde las tradicionales, como son las utilizadas para el censo de poblaciones (observacin y conteo, captura, etc.) hasta las moleculares, que permiten detectar secuencias gnicas especficas y son altamente complejas y sensibles. Mediante observacin y conteo Son tcnicas que se utilizan para la deteccin rpida de OVMs, as como para vigilar la supervivencia y la dispersin de stos. Se emplean fundamentalmente en el caso de macroorganismos y/o en aquellos donde la modificacin implique cambios fenotpicos (caractersticas externas) como el color de los ojos, del plumaje, el color de la flor, la resistencia a herbicidas, etc. Estas tcnicas, aunque de aplicacin limitada para la deteccin de OVMs, sirven de soporte para la ejecucin de pruebas ms complejas. Los programas de observacin existentes se pueden adaptar a las necesidades de seguimiento del OVM. Hay que incluir entre ellos los de observacin del medio ambiente en los mbitos agrcola, alimentario, los de conservacin de la naturaleza, de seguimiento ecolgico a largo plazo, de cambios en el suelo, as como los veterinarios y mdicos. La observacin de manera sistemtica y la interpretacin del resultado de esas observaciones pueden ayudar a detectar e impedir tempranamente la ocurrencia de posibles efectos adversos. Mediante biologa molecular Aunque se pueden utilizar muchas de las tcnicas tradicionales de investigacin y diagnstico, como el cultivo, la microscopia, los estudios serolgicos, etc., los rpidos avances tecnolgicos en la biologa molecular permiten desarrollar otros mtodos que incluyen la ampliacin y deteccin de organismos vivos modificados.
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Estos nuevos mtodos se basan fundamentalmente en la deteccin del ADN y/o de las protenas especficas. A continuacin relacionamos algunos de los ms utilizados: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Reaccin en cadena de la polimerasa. Hibridizacin de sondas. Tiras de flujo lateral. ELISA. Western blot. Deteccin e identificacin de ADN. Genes marcadores. Deteccin de protenas especficas.

Describiremos seguidamente las principales caractersticas de algunas de las tcnicas que ms se han utilizado en la deteccin y seguimiento de los organismos vivos modificados. Reaccin en cadena de la polimerasa Esta tcnica, ms conocida por su sigla en ingls PCR, fue desarrollada en 1985 y automatizada a partir de 1988. Consiste en la reproduccin (amplificacin) en ciclos consecutivos de un fragmento de ADN, cuya longitud est definida por la ubicacin de cebadores. La tcnica no slo permite la deteccin del OVM sino la identificacin de ste y su cuantificacin. A nivel mundial hoy se utiliza para dictar polticas en cuanto al manejo de productos modificados genticamente. El anlisis y la presentacin de los resultados se realizan por medio de computadoras, utilizando para ello programas que tienen como sustento medidas de resumen y dispersin para variables cualitativas y cuantitativas. Hibridizacin de sondas Tambin es conocida como Souther Blot o Dot/Slot Blot. Se desarroll a partir de la introduccin de la tcnica de reaccin en cadena de la polimerasa y se utiliza para la deteccin de una especie de inters. Se obtiene un fragmento bien seleccionado, que despus permite su empleo en la caracterizacin mediante sondas especficas. El mtodo ha sido utilizado ampliamente en el estudio de microorganismos porque permite inmovilizar en un soporte slido el ADN y mediante la hibridizacin de cada
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una de los tipos conocidos del microorganismo se puede definir el tipo correspondiente. Las tcnicas de cidos nucleicos empleando sondas se han aplicado para la deteccin, identificacin y cuantificacin de organismos vivos modificados. Tiras de flujo lateral Se desarrolla y utiliza para la deteccin de OVMs en granos. Su aplicacin resulta muy simple y se emplea con bastante frecuencia por parte de los campesinos para detectar contaminacin de las semillas. Sigue el principio de la reaccin antgeno-anticuerpo con cambio calorimtrico. ELISA Es una tcnica inmunoenzimtica que se fundamenta en el uso de antgenos o anticuerpos marcados con una enzima (peroxidasa, fosfatasa alcalina, etc.) de manera que los conjugados resultantes tengan actividad tanto inmunolgica como enzimtica. Los ensayos inmunoenzimticos se caracterizan por su alta sensibilidad, especificidad, rapidez y economa, lo cual resulta muy til para estudios epidemiolgicos. Western Blot Se fundamenta en el mismo principio que ELISA, pero el soporte slido es una membrana de nitrocelulosa. Las protenas se separan por electroforesis y posteriormente son transferidas al soporte slido. Este mtodo se utiliza fundamentalmente para el diagnstico confirmatorio de algunas enfermedades como el SIDA. Informac macin sobre seg miento egu deb contener ex iente Informacin sobre seguimiento que debe contener el expediente tcnico para la solicitud de autorizacin tc par la solicitud ara olic autor acin utori Estructura del programa de seguimiento: 1. Efectos adversos identificados en el proceso de evaluacin de riesgos. 2. Efectos adversos a los que se les realizar seguimiento y justificacin del programa para ello. 3. Duracin del seguimiento. 4. Responsable.
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5. rea bajo seguimiento. 6. Procedimiento para el seguimiento. Adems: 1. Cuando la entidad solicitante no sea la encargada de realizar el seguimiento, se debe adjuntar la carta de consentimiento de las entidades encargadas de realizarlo, debidamente acuada y firmada. 2. Presentar licencia de autorizacin de seguridad biolgica de la instalacin donde se procesar la muestra. 3. Se adjuntar croquis o mapa con el rea bajo vigilancia y sitios de seguimiento. tos deb contener infor nforme fi la entid solicitante tidad olicitan Datos que debe contener el informe final de la entidad solicitante rg regul torio ula al rgano regulatorio 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. Nmero de autorizacin otorgado por el rgano regulatorio. Nombre del OVM. Modificaciones realizadas. Riesgos bajo vigilancia. Entidades que realizan seguimiento. Especificar riesgos bajo vigilancia. Mtodo de muestreo aplicado. Tcnica que se aplic. Fecha de inicio de la liberacin. Fecha de conclusin de la liberacin. Fecha de inicio del seguimiento. Fecha de conclusin del seguimiento. rea bajo vigilancia. Deteccin de efectos adversos (en caso de ser detectado alguno, se adjuntar un informe sobre todo lo relacionado con el procesamiento estadstico de los datos).

Informac macin sobre seg miento egu deb aport la entidades tidade Informacin sobre seguimiento que deben aportar las entidades ej ucin encar ada arg encargadas de su ejecucin 1. Entidad que ejecuta y organismo al que pertenece. 2. Laboratorio que ejecuta y organismo al que pertenece.
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3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15.

Modificaciones realizadas. Nombre del organismo vivo modificado. Riesgo que se vigila. rea bajo vigilancia. Fecha de la toma de muestra. Tcnica aplicada. Tipo de muestra. Tipo de muestreo. Tamao de la muestra y/o extensin del rea. Resultados obtenidos. Nombre del que ejecuta. Firma. Fecha.

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ANEXO 14 plicacin la gu par evaluac icac ara acin Aplicacin de la gua para evaluacin control riesgos actividade iesgo tividades y control de riesgos de actividades organismo vivo mod icado smos ivos ados con organismos vivos modificados un ca estud studio a un caso de estudio

btencin plan ant boni onia transgnico resistente ins tos sistentes nse Obtencin de plantas de boniato transgnico resistentes a insectos Con el objetivo de aplicar la presente gua a un caso especfico y poder comprobar su eficacia, se realiz un taller del 18 al 19 julio de 2006 en el Centro Nacional de Seguridad Biolgica con especialistas en biotecnologa, evaluacin de riesgos y proteccin de plantas, pertenecientes al Centro de Ingeniera Gentica y Biotecnologa (CIGB), el Centro Nacional de Seguridad Biolgica (CSB), el Instituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal (INISAV) y el Centro Nacional de Seguridad Nuclear (CNSN). Los analistas y las instituciones participantes fueron: Rolando Morn, ngela Sosa Espinosa, Elaine Santana Rodrguez y Kenia Tiel Gonzlez, CIGB; Miguel Lorenzo Hernndez, Julia La Rosa Peraza, Orfelina Rodrguez Garca, Leyenis Garca Santos y Tania Campos Cuello, CSB; Santiago Jimnez Jimnez, INISAV; y Jos Vilaragut Llanes, CNSN. El caso de estudio seleccionado fue la obtencin y el desarrollo de plantas transgnicas de boniato (Ipomoea batatas), variedad CEMSA 78354, que portan una versin sinttica del gen cry3A de Bacillus thuringiensis, subespecie tenebrionis para la resistencia al ataque del tetun. La evaluacin del riesgo comprendi las siguientes etapas: 1. Definicin del alcance de la evaluacin de riesgos. 2. Descripcin de etapas en la obtencin del organismo transgnico, tareas en cada una e identificacin de las personas y equipos involucrados en ellas.

3. Definicin de los eventos indeseados que se pueden originar. 4. Identificacin de las desviaciones en cada una de las tareas. 5. Definicin de las causas que originan las desviaciones, eventos indeseados que pueden ocasionar y barreras que permiten detectar e impedir dichos eventos. 6. Determinacin del riesgo asociado a cada desviacin. 7. Aceptabilidad de los riesgos. 1. Definicin del alcance de la evaluacin de riesgos En este aspecto, se lleg al consenso de limitar el anlisis a la etapa de obtencin del OVM (laboratorio), teniendo en cuenta la complejidad del estudio y el tiempo de que se dispona. 2. Descripcin de etapas en la obtencin del organismo transgnico, tareas en cada una e identificacin de las personas y equipos involucrados en ellas Para desarrollar este paso se confeccion inicialmente la tabla 1.
Tabla 1. Tareas para la obtencin del OVM Tareas Desviaciones Causas Eventos indeseados Barreras Tarea 1 Desviacin 1 Causa 1 EI 1 Barrera 1 Barrera 2 Causa 2 EI 2, EI 5 Barrera 3 Desviacin 2 Desviacin 3 Tarea 2 Desviacin 1 Comentarios

A partir del formato de la tabla anterior y mediante una tormenta de ideas se arrib al resultado que se muestra en la tabla 2 (p. 144). 3. Definicin de los eventos indeseados que se pueden originar En este caso se consider no incluir otros riesgos laborables como los qumicos, f sicos y radiolgicos. Los eventos indeseados que se tuvieron en cuenta fueron los siguientes:
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 EI 1: Transferencia del gen de resistencia a antibiticos contra E. coli a la flora intestinal del trabajador. EI 2: Infeccin con E. coli en trabajadores inmunodeprimidos. EI 3: Escape de E. coli resistente a antibiticos, al medio ambiente. EI 4: Infeccin con Bacillus thuringensis en el trabajador. EI 5: Escape del Agrobacterium por su potencial afectacin a plantas. EI 6: Creacin de un OVM txico (al ser ingerido por personas y animales). EI 7: Creacin de un OVM alergnico (para seres humanos y animales). EI 8: Creacin de un OVM con potencial afectacin a organismos beneficiosos no blancos. EI 9: Dispersin del transgn (escape del gen). EI 10: Insectorresistencia. EI 11: Creacin de tolerancia en seres humanos y animales a un antibitico de amplio uso. 4. Identificacin de las desviaciones en cada una de las tareas Una vez identificadas las desviaciones de cada una de las tareas, se procedi al anlisis de stas, como se refleja ms adelante en la tabla 3. 5. Definicin de las causas que originan las desviaciones, eventos indeseados que puede ocasionar y barreras que permiten detectar e impedir dichos eventos A modo de ejemplo, en la tabla 3 (incluida al final de este anexo) aparecen reflejados las desviaciones, causas, efectos indeseados y barreras identificados en las tareas 2.1 y 2.2. 6. Determinacin del riesgo asociado a cada desviacin La frmula empleada para el clculo del riesgo fue la siguiente: riesgo = f P C Donde: f : frecuencia del suceso iniciador (evento/tiempo). P: Probabilidad de falla de las barreras (adimensional, 0<P<1). C: Consecuencias (consecuencias/evento).
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Tabla 2. Etapas, tareas, personal y equipos para la obtencin del OVM Etapas del Tareas proceso 1. Propuesta 1.1. Propuesta del de proyecto proyecto Personas que participan Consejo cientfico Investigador principal Dpto. de Seguridad y Ambiente Investigador principal Investigador auxiliar Investigador principal Investigador auxiliar Tcnicos Investigador principal Investigador auxiliar Tcnicos Investigador principal Investigadores Decisores del MINAGRI Investigador Tcnico Equipos

2. Obtencin 2.1. Seleccin o de la construccin del consvector de transtruccin formacin 2.2. Obtencin del inserto y caracterizacin del inserto 2.3. Clonacin del inserto y caracterizacin de la construccin 3. Transformacin 3.1. Seleccin y certificacin de la variedad

Equipamiento de laboratorio de biologa molecular.

Equipamiento de laboratorio de biologa molecular

Equipamiento de laboratorio de biologa molecular

3.2. Introduccin in vitro

3.3. Establecimiento Investigador de metodologa Tcnico de regeneracin de la variedad 3.4. Establecimiento Investigador de metodologa de Tcnico transformacin de plantas con Agrobacterium 144

Equipamiento de laboratorio de cultivo de tejido y transformacin de plantas Equipamiento de laboratorio de cultivo de tejido y transformacin de plantas Equipamiento de laboratorio de cultivo de tejido y transformacin de plantas

Etapas del proceso

Tareas

4. Caracterizacin

3.5. Eliminacin de Agrobacterium Tcnico 3.6. Individualizar y propagar presuntos transformados 4.1. Seleccin primaria Tcnico y propagacin

Personas que Equipos participan Tcnico Contenedores de desecho Equipamiento de laboratorio de cultivo de tejido y transformacin de plantas Equipamiento de laboratorio de cultivo de tejido y transformacin de plantas Investigador Equipamiento de laboratoTcnico rio de biologa molecular

4.2. Deteccin de los transgenes por PCR Investigador Equipamiento de laborato4.3 Deteccin de rio de biologa molecular expresin 5. Reto en 5.1 Seleccin de clones Investigador Equipamiento de casa condiciones principal verde controladas Investigador auxiliar Tcnicos 6. Caracteri- 6.1 Patrn de integra- Investigador Equipamiento de laboratozacin rio de biologa molecular cin del transgn Tcnico molecular 6.2 Deteccin de Investigador Equipamiento de laboratosecundaria Tcnico rio de biologa molecular niveles de expresin en rganos fundamentales y en el tiempo.

Para la determinacin del riesgo se estableci la frecuencia de ocurrencia de cada una de las desviaciones a partir de fijar parmetros para la frecuencia (f), las consecuencias (C) y la probabilidad (P), los cuales se muestran a continuacin. Para la valoracin semicuantitativa de la posibilidad de ocurrencia, se emplearon los criterios que se muestran en la tabla 4. Para estimar la probabilidad de falla de las barreras (P) contra el riesgo, se sigui el criterio mostrado en la tabla 5. La valoracin de consecuencias en las matrices de riesgo se bas en los criterios resumidos en la tabla 6.
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Tabla 4. Parmetros para determinar la frecuencia Frecuencia Altamente posible Estimacin semi- Definicin cuantitativa 1-9/10 Se espera que ocurra en cualquier condicin bajo la cual se realiza la actividad. 1/100 Puede ocurrir bajo condiciones normales de desarrollo de la actividad. 1/1000 Ocurre slo bajo condiciones inusuales. 1/10 Slo ocurre bajo condiciones excepcionales.

Posible Poco posible Excepcionalmente posible

Tabla 5. Parmetros de probabilidad de falla de las barreras Probabilidad de falla de la barrera (P) Alta Media Baja Muy baja Barreras No existen barreras. Se cuenta con 1-2 barreras. Existen 3-4 barreras. Hay ms de 4 barreras.

Tabla 6. Parmetros para determinar las consecuencias Consecuencias Definicin Mnimas No ocurren lesiones o son mnimas y en pocos individuos que pueden requerir primeros auxilios. No hay degradacin del ambiente o sta es mnima. Menores Lesiones ligeras en personas que pueden requerir tratamiento mdico. Alteracin de comunidades biolgicas (reversible y limitada en espacio y tiempo). Intermedias Lesiones en algunas personas que requieren tratamiento mdico. Alteracin generalizada de comunidades biolgicas pero reversibles o de severidad limitada. Lesiones severas en algunas personas que pueden requerir hosGraves pitalizacin o producir la muerte. Amplia alteracin biolgica y f sica de ecosistemas completos, comunidades o especies que persiste en el tiempo o no es fcilmente reversible. 146

Y se emple la siguiente matriz de riesgo:

Riesgo estimado
Posibilidad

Altamente posible Posible Poco posible Excepcionalmente posible

Bajo

Moderado

Alto Alto Moderado

Alto Alto Alto Moderado Graves

Insignificante Bajo Insignificante Bajo

Insignificante Insignificante Bajo Mnimas Menores Intermedias Consecuencias

Despus de analizar la frecuencia, las consecuencias y la posibilidad de los riesgos, se determinaron los niveles de stos. En la tabla 7 se presenta un ejemplo de anlisis de las tareas 2.1 y 2.2.
Tabla 7. Ejemplo de niveles de riesgo de las tareas 2.1 y 2.2 Tarea Desviacin 2.1 Seleccin errnea del vector de transformacin de planta Seleccin errnea del vector de transformacin de planta Uso de cepas de E. coli K12 no autorizadas Derrames del cultivo Liberacin al residual 2.2 Eventos moleculares indeseados que alteran la secuencia Frecuencia Consecuencias Probabilidad Riesgos Alta Bajo Poco Menores probable Probable Menores Muy baja Bajo

Probable Probable Probable Probable

Intermedias Intermedias Intermedias Media

Muy baja Baja Muy baja Baja

Bajo Bajo Bajo Insignificante

Aceptabilidad ceptabilid los riesgos iesgo 7. Aceptabilidad de los riesgos Si los riesgos son altos, no se aceptan; si son insignificantes, se eliminan del anlisis; si son medios, entonces se deben analizar las barreras y la posibilidad de fortalecerlas, as como los sucesos iniciadores (causas).
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Tabla 3. Descripcin de las tareas 2.1 y 2.2. Causas Comentarios Puede provocar que el marcador de seleccin no sea el apropiado. Puede provocar que el marcador de seleccin no sea el apropiado.

No. Tareas

Efec- Barreras previstas tos 2.1 Seleccin o Seleccin errnea Desconocimiento del EI 11 estado del arte. construccin del vector de del vector de transformacin Desarrollo prematuro transforma- de planta de la investigacin. cin. Seleccin errnea Desviaciones inhe- EI 10 PCR para determinar la integridad del promotor. rentes a la metodolodel vector de Secuencia para determinar la transformacin ga. integridad del promotor. de planta. ELISA para determinar los niveles de expresin del transgn. Reto en condiciones controladas. Uso de cepas de Prcticas inadecua- El 1 Procedimiento de seleccin de E. coli K12 no das El 2 la cepa que garantiza su seguridad. autorizadas. No incluido dentro Autorizacin por rea compedel programa de Biotente del uso de la cepa. seguridad. Licencia de la autoridad Falta de capacitacin. regulatoria para el uso de la cepa. Certificacin de la cepa. Establecimiento de buenas prcticas.

Desviacin

No. Tareas Comentarios

Desviacin

Efectos Derrames del Ruptura de frascos El 1 cultivo Rotura de los equi- El 2 pos (zaranda u otro) El 3 Mal funcionamiento de los equipos (autoclave) Liberacin hacia Mal procedimiento aguas residuales de descontaminacin o no implementado Mal funcionamiento de los equipos (autoclave)

Causas

Barreras previstas

2.2 Obtencin y caracterizacin del inserto

Equipos en buen estado Programa de mantenimiento y comprobacin de equipos Establecimiento de buenas prcticas Uso de contenedores Procedimiento de emergencia Procedimiento de tratamiento de residuales Criterio de diseo de instalacin Sistema de tratamiento de los residuales Caracterizacin y seguimiento Eventos molecu- Desviaciones inhe- El 10 PCR para determinar la lares indeseados rentes a la metodolointegridad del promotor que alteran la ga Secuencia para determinar la secuencia integridad del promotor ELISA para determinar los niveles de expresin del transgn Reto en condiciones controladas

Si se producen dosis subletales el insecto se adapta