ESCUELA SUPERIOR POLITECNICA DE CHIMBORAZO

UNIDAD DE NIVELACION CICLO DE NIVELACIN: SEPTIEMBRE 2012 / FEBRERO 2013 MDULO INTRODUCCIN A LA COMUN ICACON CIENTFICA AISLAMIENTO DE BACTERIAS DEGRADADORAS DE PETROLEO EN HABTAS COSTERAS EN CARTAGENA COLOMBIA

1.- DATOS INFORMATIVOS - NOMBRES Y APELLIDOS: - DIRECCIN DOMICILIARIA: - CELULAR: - FECHA: 0988977453 Maruixi Mayumi Garcia Ramirez Ciudadela Juan Montalvo - MAIL: gatita_hermosa_1993@hotmail.com

Noviembre 8 del 2012

Riobamba Ecuador

INTRODUCCION PERSONAL: Mediante el anlisis de este artculo cientfico puedo conocer ms acerca del tema a profundidad sobre bacterias degradadoras del petrleo ya que en un futuro con mi especialidad me ayudara a estar ms preparada y poder solucionar cualquier tipo de dificultad que se presente. Ganando el saber del artculo ya que es muy interesante conocer acerca del petrleo que es un factor que influye en nuestro ecosistema y del mundo entero. JUSTIFICACIN: Del tema conozco acerca del petrleo que es un hidrocarburo de suma importancia que representa una fuente de ingresos muy considerada para el pas y el mundo, adems ya que del mismo obtenemos derivados para el consumo de las personas y para el funcionamiento de automviles. Desconozco acerca de las bacterias ya que no tena ni idea que existen este tipo que degradan y peor el aislamiento de las mismas en Colombia. Quiero conocer con exactitud sobre el tema y an ms sobre dichas bacterias que se ganara con el estudio de las mismas para ello se debe estudiar el artculo ya que en l se encuentra la informacin exacta para llegar hacia lo que se desea conocer.

Aislamiento de bacterias potencialmente degradadoras de petrleo en hbitats de ecosistemas costeros en la Baha de Cartagena, Colombia Resumen: En esta investigacin se aislaron bacterias de 4 hbitats en el ecosistema marino aledao a una industria petroqumica en la Baha de Cartagena. En el proceso, las muestras se sometieron a pre-enriquecimiento por una semana, a enriquecimiento por tres semanas y a un proceso de seleccin de cepas competitivas, donde se evidenciaron cambios marcados en las propiedades del crudo de petrleo, como en turbidez y agregados blancos por crecimiento bacteriano. Se aislaron diferentes morfotipos que al caracterizar bioqumicamente fueron identificados como Pseudomonas aeruginosa en todas las muestras, corroborando su gran capacidad de adaptacin en ambientes contaminados de este tipo. Estos resultados permitirn la realizacin de pruebas de biodegradacin con esta bacteria y desarrollar ensayos a nivel microcosmos para su uso potencial en procesos de biorremediacin de aguas marinas contaminadas con petrleo. Palabras clave: bacterias, Baha de Cartagena, contaminacin, ecosistemas costeros, biodegradacin, hidrocarburos. Introduccin: El petrleo con sus cuatro fracciones, hidrocarburos saturados, hidrocarburos aromticos, resinas y asfltenos, es un compuesto muy complejo, considerado el contaminante ms extendido en la bisfera y en el ambiente marino, por lo tanto un problema global. Representa la mayor fuente energtica y la base para la obtencin de materias primas para la industria. Su explotacin, transporte y refinacin generan problemas ambientales, especialmente por derrames accidentales y de prcticas inadecuadas de eliminacin de fuentes, como industrias y reneras de petrleo. La persistencia de estos contaminantes en el ambiente se ve inuenciada por varios factores como la naturaleza del contaminante, su concentracin y su capacidad para interactuar con las condiciones qumicas, geolgicas, fsicas y biolgicas del sitio contaminado. La fraccin aromtica del petrleo compuesta por di cclicos, tri cclicos y heterocclicos (naftaleno, antraceno, fenantreno y dibenzotiofeno),conlleva un problema ambiental en aguas y suelos, con gran impacto ecolgico y efectos recalcitrantes y txicos en los seres vivos, siendo los poli aromticos y los heterocclicos los ms remanentes, o persistentes, generando como consecuencia efectos a largo plazo sobre las comunidades bentnicas en sedimentos marinos, debido a que su remocin natural es muy lenta. En Cartagena de Indias, la calidad de las aguas costeras se ha visto alterada por los euentes domsticos, industriales y agrcolas, como por el transporte terrestre, uvial y martimo y por las descargas de la industria del petrleo. El estudio de los problemas asociados con la remocin de petrleo, inici entre los aos 50 y 70 (11-14), y se han incrementado en los ltimos aos (6, 15-22).La biorremediacin de petrleo es considerada una alternativa econmica, verstil, prctica y eciente comparada con los tratamientos fsico y qumicos, debido a que se han aislado bacterias puras y mixtas. Entre los factores biolgicos que constituyen un recurso importante en la eliminacin de contaminantes se encuentran, la diversidad de especies microbianas y sus capacidades metablicas; sin embargo, los ambientes marinos contaminados estn habitados por microorganismos capaces de tolerar los contaminantes, dando lugar al predominio de bacterias tolerantes. . En el caso delos compuestos de hidrocarburos de petrleo, son degradables a diferentes ritmos y en algunos casos son recalcitrantes a la biodegradacin, lo que conllevan a un metabolismo por largos perodos de tiempo. Existen bacterias capaces de utilizar petrleo para su crecimiento y mantenimiento, conocidas como bacterias degradadoras de hidrocarburos, dentro de las cuales se encuentra el gnero Pseudomonas, que por su versatilidad metablica, son capaces de convertir sustratos habitualmente no degradables, en metabolitos fcilmente asimilables o susceptibles de ser catalizados enzimticamente. El xito de la biorremediacin consiste en la seleccin de microorganismos que puedan degradar materiales contaminados a diferentes temperaturas, pH salinidad y concentracin de nutrientes. Muchos tipos de microorganismos han sido aislados para mejorar procesos de biorremediacin de ambientes contaminados con hidrocarburos de petrleo (28-30), por ejemplo Bacillus sp, Rhodococcus, Mycobacterias, levaduras, Micromycetes y Pseudomonas, las cuales utilizan como

fuente de energa compuestos orgnicos simples y complejos y son productoras de enzimas extracelulares, incluyendo la lipasa. ). Por lo tanto, el nmero de comunidades bacterianas en sitios contaminados suele ser menor que en sistemas no contaminados, aproximadamente el 0.1% de la poblacin microbiana total, y pueden variar de acuerdo al momento del muestreo o el grado de contaminacin por hidrocarburos, las condiciones climticas, el tipo de suelo, y la profundidad de las aguas. La identicacin de los principales organismos responsables de la biodegradacin de contaminantes, y su caracterizacin son de importancia para la comprensin, evaluacin y desarrollo de estrategias de biorremediacin os autctonos. Una de las limitaciones de este proceso, es que los hidrocarburos son de difcil acceso para las bacterias debido a su baja solubilidad en medios acuosos. Los microorganismos autctonos de ambientes marinos son capaces de degradar u oxidar petrleo en condiciones ambientales favorables, como presencia de oxgeno disuelto y nutriente; muchos de los factores biolgicos que controlan estos procesos no estn bien entendidos en la actualidad. Materiales y mtodos: Medios de cultivo y reactivos.- Se utilizaron caldo nutritivo, agar nutritivo y agar-agar comerciales marca Merck, y se prepararon segn las instrucciones del fabricante. El caldo de pre enriquecimiento se prepar con (NH4)H2PO4 (0.9mg/L) marca R.A. Chemicals, agregando ACPM al 1% comprado en una estacin de gasolina. El caldo de enriquecimiento fue preparado con sales grado reactivo marca Merck, K2HPO4: 1.5g/L; KH2PO4: 0.5g/L; (NH4)2SO4: 0.5g/L; NaCl: 0.5g/L; MgSO4: 3.0g/L; FeSO4: 0.002g/L; CaCl2: 0.002g/L, todos en 1.000mL de agua destilada, suplementados con crudo de petrleo al 1%, muestra obtenida por donacin de una empresa petroqumica; el medio mineralizado slido se obtuvo agregando agar-agar 15g/L con 1% de crudo de petrleo. Los medios fueron esterilizados en autoclave horizontal por 15 minutos a 20 libras de presin y 121C, para garantizar completa esterilidad. Toma de muestras. El muestreo se hizo en forma radial en las inmediaciones de vertimientos nales de una renera de petrleo y sus alrededores, donde se delimitaron cinco puntos diferentes de muestreo, por medio del sistema de geo posicionamiento. . Sedimento. Las muestras de sedimento fueron tomadas por duplicado utilizando una draga tipo Vanveen para muestreo de sedimento, y pasadas a su vez a frascos estriles de 250 ml. Neuston. Estas muestras fueron tomadas por duplicado, dejando entrar agua de la capa supercial ubicada en la interface agua-aire (Neuston) en una placa de vidrio de forma piramidal, construida por los autores, de 20 cm x 20 cm, cuya capacidad de carga es un volumen entre 11 y 15 ml, que de manera aleatoria se tomaron, hasta llenar los frascos estriles. Agua sub supercial. Se recolectaron muestras por duplicado en frascos estriles de 250 ml, sumergindolos a 30 cm de la supercie, abrindolos y dejando pasar el agua hasta su llenado y tapado nales. Todas las muestras fueron transportadas en condiciones de refrigeracin en nevera porttil con hielo, hasta ser procesadas en el laboratorio de Microbiologa de la Universidad de San Buenaventura, Cartagena.

Resultados: Preenriquecimiento
En esta etapa, se inici una adaptacin de los microorganismos en los diferentes hbitats muestreados con diesel o ACPM como fuente de carbono y energa. La coloracin de Gram permiti apreciar bacilos gram negativos, cocobacilos gram negativos, bacilos gram positivos, cocos gram positivos, algas y protozoos. La tendencia en los cuatro hbitats fue la prevalencia de bacilos y cocobacilos gram negativos, siendo marcada la gran diversidad en el hbitat de biopelcula. El xito de la biorremediacin en derrames de petrleo depende de la disponibilidad de los microorganismos adecuados, los factores ambientales y la composicin del aceite derramado. En relacin con la metodologa empleada en el estudio, varios autores coinciden en que la seleccin de microorganismos a travs de pruebas sucesivas de crecimiento poblacional en cultivos puros enriquecidos con petrleo, es considerada como una estrategia eciente para evaluar la adaptacin y supervivencia de cepas tolerantes a elevadas concentraciones de petrleo. As mismo, los resultados de esta investigacin representan importancia al considerar que se asemejan a lo expuesto por Roberto et al., 2003 y Narvez 2006 quienes as mismo reportaron que el grupo predominante en los aislamientos fueron los bacilos Gram negativos. CONCLUCIONES: Otras investigaciones han demostrado que especies de Acinetobacter involucradas en la biorremediacin de hidrocarburos aromticos, as como en la produccin de heteropolisacridos de alto peso molecular que actan como emulsionantes de gran alcance. RECOMENDACIONES: Se recomienda en el momento de la toma de muestra se la realice con todos los materiales adecuados para que no exista ninguna falla. Todas las muestras no deben olvidarse se ser marcadas e identificada con sus respectivas coordenadas.

AUTORES: 1. Gustavo Eugenio Echeverri Jaramill 2. Ganiveth Manjarrez Paba 3. Melody Cabrera Ospino 1. Bacterilogo, Mster en Tecnologa Qumica. Universidad de San Buenaventura - Cartagena, Bolvar, Colombia, Grupo Microbiologa y Ambiente, GIMA. Programa de Bacteriologa. 2. Bacteriloga, Mster en Microbiloga. Fundacin Universitaria Tecnolgico Comfenalco, Cartagena, Bolvar, Colombia. Grupo de Investigaciones Ambientales, GIA. 3. Bacteriloga, Estudiante de Maestra. Grupo GIMA. Correspondencia: gecheverri@usbctg.edu.co
REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS:

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