CURS 7 Retrocontrol RIU

Retrocontrol RIU
Definiie: Cuprinde totalitatea influienelor inhibitorii rezultate n urma stimulrii/aciunii limfocitelor TS ce au drept scop inhibiia cooperrii dintre limfoblatii B i limfoblatii TH Ag specifici i limitarea sau frnarea RIU n curs de desfurare. - retrocontrolul RIU se bazeaz pe aciunea TS

Limfocitele Ts - NU se cunosc foarte bine toate categoriile TS (5 6 clase)

a) TS Ag specifice - din punct de vedere fenotipic sunt celule CD8+ i CD28- recunosc NUMAI Ag expuse pe membrane APC n complex cu moleculele MHC I - elaboreaz anumii factori inhibitori a cror prezen e dovedit,dar NU se tie structura lor - au o funcie inhibitorie mai general (pot inhiba fie RIU, fie RIC) b) TS idiotip specifice - fenotipic sunt celule foarte heterogene: aproximativ 35 40% din ele sunt celule CD4+, 60-65% sunt celule CD8+ - se numesc idiotip specifice pentru c ele recunosc prin receptorul lor de suprafa partea Ag a unor receptori Ag (idiotip) - elaboreaz anumii factori inhibitori, numii TSF, ce rezult din solubilizarea/eliberarea receptorilor lor Ag de supraf Structura receptorului Ag de suprafa a TS idiotip specifice - receptorul Ag are structur total difeit de TCR - e un complex format din 3 piese distincte: 1. Receptorul Ag prpriu-zis - are structur Ig-like - NU e un receptor transmembranar 2. E ataat prin puni disulfurice la o molecul MHC II (varietatea E). i ea e plasat n afara membranei celulare 3. Molecula MHC II E e ataat indirect la membran printr-o pies de jonciune (glicoprotein transmembranar) - cnd e stimulat Ag receptorul se activeaz (NU se tie cum) i n urma activrii => eliberarea componentei extramembranare (MHC II E i receptorul Ag, care devine un receptor liber. n aceast calitate el e receptor Ag n continuare i are funcie inhibitorie de TSF => inhib RIU) Clasificarea TS idiotip specifice - 3 categorii de limfocite: 1. TS inductorii - CD4+ - Funcie de a inhiba LB Ag specifice 2. TS transductorii - CD8+ Laura & Daniel

CURS 7 Retrocontrol RIU Funcie de a inhiba cele 2 categorii de limfoblati ce particip la RIU (limfoblast B i TH Ag specific) 3. TS efectorii - CD8+ - Funcie de a inhiba LB Ag specifice Caractere commune: - NU acioneaz NICIODAT independent unele de altele - Ele se stimuleaz reciproc n etape successive: a. primele stimulate sunt TSi b. TSi activate stimuleaz TSt c. TSt activate stimulez TSe ele formeaz cascada T supresoare - ele sunt activate de structuri Ag diferite: TSi sunt activate de partea haptenic a Ag, concurnd cu LB TSt i TSe sunt activate de idiotopii unor TSF => ele sunt singurele idiotop specifice - cascada T supresoare se activeaz n general trziu, mult dup apariia primelor cantiti de Ac - funcia general a cascade T supresoare const n inhibiia secvenei de activare a RIU Cooperarea APC-NON B i LTH (n ariile timodependente) - APC expun pe suprafaa lor n complex cu MHC II (varietatea A) Ag inductor (format dintr-o parte haptenic i una carrier) - Carrierul e recunoscut de TCR de pe TH => cooperarea cognitiv - Rezultat: activarea TH i migrarea lor, trecnd din aria timodependent n aria bursodependent, unde se transform n limfoblati TH - Aici ei ateapt limfoblatii B cu care ar urma s coopereze - Cascada T supresoare e activat ca urmare a elaborrii de ctre aceleai APC de molecule de MHC II E. prin intermediul lor acelai Ag e prezentat ctre limfocitele TS, prin partea sa haptenic. Partea haptenic e recunoscut de TSi. Ca urmare a recunoaterii, se activeaz TSi i pune n libertate recptorul Ag de suprafa (TSF1) TSF1 - aciune inhibitorie: TSF1 difuzeaz larg n ntreg organismul, pn cnd ajunge la focarul Ag. Aici TSF1 recunoate partea haptenic a Ag. n urma recunoaterii se constituie n focarul Ag complexe TSF1 Ag. Constituirea lor echivaleaz cu blocarea Ag = diminuarea cantitii de Ag liber disponibil pentru stimularea LB => de butul inhibiiei RIU - aciune activatoare: TSF1 n SCAg prezint idiotopi, mai ales idiotopi interni => el se comport ca o nou structur Ag care va activa morfologic TS din cascad. Activarea TSt care prezint pe suprafaa lor receptori complementari pentru TSF1. Rezultat: activarea TSt ce pune n libertate receptorii de suprafa (TSF). TSF2 din punct de vedere structural e identic cu partea haptenic a Ag inductor, ns difer n restul moleculei (are alt parte carrier). TSF2 exercit 2 efecte contrare: TSF 2 Laura & Daniel

CURS 7 Retrocontrol RIU aciune inhibitoare: difuzeaz larg n tot organismul, pn ajunge n ariile bursodependente. Aici TSF2 e recunoscut de ctre LB n calitate de Ag (confund Ag cu TSF2). LB preia TSF2 i se activeaz i se transform n limfoblast B. n acest stadiu, prin intermediul MHC II expune TSF2 ctre limfoblatii TH, prezentnd TSF2 prin partea carrier. De data aceasta limfoblastului TH i este prezentat o alt parte carrier dect cea pe care o recunoate => cele 2 categorii de limfoblati NU pot coopera => n final limfoblastul B NU se mai activeaz TOTAL => limfoblastul B NU se mai poate transforma n plasmocit => e sistat complet producerea de Ac - aciune activatoare: ca nou structur Ag activeaz o nou categorie de TS din cascad: TSe, care prezint i ele receptori complementari pentru TSF2. Rezultat: elibereaz recptorul de suprafa TSF3 TSF3 - identic cu TSF1 la partea receptorial (Situsul de recunoatere pentru Ag), ns difer n rest (partea carrier). Difuzeaz i el larg i ajunge n focarul Ag, unde ca i TSF1 blocheaz Ag => LB NU mai pot fi activate Particulariti funcionale ale celor 2 secvene ale RIU 1) cele 2 secvene sunt mult decalate n timp (NICIODAT NU se desfoar simultan). Decalarea ine de faptul c APC NON-B elaboreaz n 2 etape diferite cele 2 categorii de molecule MHC II: prima e MHC II A => RIU, iar dup un interval de timp ndelungat MHC II E => Retrocontruol RIU 2) cele 2 secvene sunt echilibrate funcional: - sunt activate de ctre una i aceeai APC NON-B, care ns prezint cantiti echivalente de Ag n cele 2 secvene - la stimularea realizat de APC NON-B rspunde un numr echivalent de TH i de TSi (ambele sunt CD4+) - ntre cantitatea de Ag utilizat n declanarea RIU i cantitatea de TSF2 rezultat din retrocontrolul RIU exist un raport de echivalen. TSF2 e identic cu Ag inductor la partea haptenic, diferind de Ag la partea carrier => TSF2 = copia intern a Ag cu efect frenator Ag n cadrul RIU e utilizat n 2 ipostaze: 1. original = declanarea RIU 2. copie = frenarea RIU (retrocintrolul RIU)

Sistemul complement
= un sistem multienzimatic format din 25-30 de componente care n cadrul RIU joac rolul unui mecanism efector auxiliar ce ndeplinete 2 funcii majore: a. definitivarea aciunii Ac pe Ag b. realizarea unei recunoateri imunologice nespecifice a structurilor non-self care de regul sunt Ag - cele 2 funcii pot fi exercitate separat sau simultan Laura & Daniel

CURS 7 Retrocontrol RIU A. Definitivarea aciunii Ac pe Ag - unica funcie a Ac const n recunoaterea Ag, fr ns ca acetia s aib efect decisiv asupra Ag - prin efect decisiv nelegem: distrugerea Ag (mecanism obligator necesar pentru Ag corpusculate: bacterii, virusuri, parazii) i ndeprtarea Ag (mecanism eficient n cazul Ag solubile: proteine, glicoproteine, oligozaharide) 1) Distrugerea Ag corpusculate - bacteria prezint pe suprafaa ei determinai Ag conformaionali - ea e recunoscut de ctre Ig prezente n lichidele interstiiale (IgG) - Ac recunosc determinanii de suprafa i se depun pe suprafaa bacteriilor, realiznd opsonizarea acestora - bacteria poate tri foarte bine cu orice cantitate de Ac pe ea - efect decisiv = aciunea complementului. Ac recunosc determinanii Ag de supraf prin catul lor Fab => apar modificri conformaionale n lanurile H de IgG ce conduc la exetriorizarea situsului activator de complement plasat la nivelul domeniului CH2. prin aciunea lui => exetriorizarea unei secvene de aa capabil s activeze subunitatea C1q a complementului. Odat activat, C1q => declanarea cascadei complementului pe calea clasic i n final => formarea MAC (complex de atac al membranelor). Acesta se organizeaz sub forma unor structuri tubuliforme ce se inser multiplu n membrana bacterian i creeaz largi comunicri ntre mediul intracelular i extracelular. Rezultat: alterarea grav, ireversibil a gradientelor ionice de o parte i de alta a membranei bacteriei => hidratarea supracaut a acestei particule => se rupe mebrana cu liza osmotic a acestei particule 2. Ideprtarea Ag - Ag solubile declaneaz RIU traduse prin formarea de Ac - Ac difuzeaz larg n ntreg organismul pn cnd ajung i n focarul Ag. Aici are loc recunoaterea Ag, iar rezultatul recunoaterii e formarea de complexe imune Ag-Ac - La normal acestea au ca particularitate faptul c se organizeaz sub form de reele - Ele se ncarc rapid cu diveri factori solubili, mai ales C3b a complementului. Aceasta provine din funcionarea permanent a cii alterne. Dup activare cu C3b, complexele imune pot fi ndeprtate (endocitate de Mcf rezidente n esuturi ele prezint CR pe suprafa i pot angaja legturi cu C3b). complexele imune sunt n final distruse intramacrofagic, odat cu acestea fiind distruse i Ag prinse n ele. Dac complexele imune se formeaz intracirculator, dup ce au fost saturate cu C3b sunt ataate pe suprafaa eritrocitelor, care i ele prezint receptori pentru complement. Apoi sunt transporatte de acestea pn la SRE (sistemul reticuloendotelial). Aici complexele imune sunt preluate de Mcf rezidente obinuit aici => endocitarea i distrugerea complexelor imune, inclusiv Ag din structura lor B. Recunoaterea imunologic nespecific a structurilor non-self - in de proprietatea C3b a complementului de a se depozita obligatoriu pe membranele celulare - C3b odat generat NU rmne NICIODAT n faz fluid, ci se depoziteaz pe membranele celulalre, dac acestea sunt acceptoare de complement Laura & Daniel

CURS 7 Retrocontrol RIU NU accept depozitarea complementului membranele self pentru c sunt protejate anticomplement - Membranele non-self NU sunt protejate, ele permind depozitarea C3b - Ca urmae a funciei permanente a cii alterne => continuu cantiti mici de C3b - C3b NU rmne n faz fluid, ci se depoziteaz pe mebranele celulalre - Membranele self NU accept complement (au receptori ce mpiedic ataarea C3b) - Membranele non-self accept C3b ( NU au recptori ce mpiedic ataarea C3b) => un strat de molecule de C3b (opsonizarea prin C3b a membranelor non-self) - Structura non-self = structur Ag => recunoatere imunologic nespecific (depozitarea se realizeaz pe orice membran, indiferent de specificitatea Ag propriu-zis) A i B pot fi coroborate - n cadrul aceluiai RIU - complementul intervine n etapa de iniiere i finalizare a RIU - NICIODAT NU particip n etapa de desfurare a. n etapa de iniiere - prin opsonizare favorizeaz net captarea de ctre APC a Ag corpusculare. Odat captate => activarea APC, cooperarea cu TH, cooperarea cu LB, etc. la finele cooperrii => formarea de Ag specifici care recunosc Ag corpusculate dup determinatul Ag de suprafa. n acest moment final intervine din nou complementul b. Ax activeaz C1q => declanarea cascadei complementului pe calea clasic, cu formarea MAC => liza osmotic a bacteriilor Caracterele funcionale ale sistemului complement 1. Funcioneaz pe principiul cascadei - majoritatea factorilor complementului sunt prezeni n circulaie sub form de zimogeni (enzime inactive) - dca un zimogen e activat => generarea enzimei, care la rndul ei activeaz alt zimogen, etc 2. Activarea zimogenului n enzim - activarea se realizeaz prin proteoliz limitat, n urma ei => 2 fragmente cu structur i funcie diferite - zimogenul X e activat => 2 fragmente: unul mic, Xa i unul mare Xb - Xa rmne n faz fluid, n lichidul interstiial. Unde exercit efecte proinflamatorii - De cele mai multe ori, Xb sunt fragmente enzimatice. Ele NU rmn NICIODAT n faz fluid, ci se depun pe mebranele celulare acceptoare de complement (non-self) 3. Reaciile enzimatice ale complementului se desfoar NUMAI pe mebranele celulare i ca urmare a parcurgerii mai multor etape se constiutie n final complexe enzimatice multifactoriale - Xb activeaz pe zimogenul Y, pe care l cliveaz => Ya i Yb care se depune pe membranele celulare (NU la tmplare, ci n contact cu perecedentul) => un complex bimolecular pe membrana celular (XbYb) Laura & Daniel

CURS 7 Retrocontrol RIU

4. Continuitatea reaciilor pe suprafaa membranelor celulare e asigurat i de comutarea specificitii de substrat a unora din enzimele depoziate - n contact cu fragmentele depozitate (Yb), enzima Xb sufer modificri conformaionale care conduc la modificarea specificitii de substrat => Xb NU mai acionez asupra zimogenului Y, ci pe unul nou (Z), pe care l cliveaz n 2 fragmente: Za i Zb care se ataeaz la complex => complexe trimoleculare (XbYbZb) - o enzim si poate modifica specificitatea de substrat o singur dat Organizarea de ansamblu a sistemului complement - asemntoare cu sistemul coagulrii (2 ci cu o parte comun) A. Partea comun - evenimentul central e reprezentat de conversia C3 n C3b - conversia se face sub aciunea C3 converatzelor (4) - C3 convertazele rezult din activarea unor ci diferite: 1. calea clasic a complementului - declanat n urma recunoaterii imunologice specifice - structurile Ag sunt recunoscute prin Ac => activarea C3 convertazei 2. calea altern a complementului - funcionez permanent la un nivel de intensitate sczut - ea se poate amplifica ca urmare a opsonizrii membranelor non-self (nvelirea prin C3b) => o serie de etape ce duc la activarea C3 convertazei => activarea C3 n C3b, care la rdul sa activeaz factorii din faza terminal (C5, C6, C7, C8, C9) => MAC => liza osmotic a membranelor non-self Calea clasic a complementului - implic participarea unor factori notai cu C C1 - complex trimolecular: a. C1q - unitate de recunoatere a complexelor imune (Ag-Ac) - se afl n concentraii mici (70g la ml) - structur: 6 subuniti identice ntre ele, asociate 2 cte 2, cu formarea a 3 uniti tot identice ntre ele Fiecare subunitate are o parte lung i une globuloas Cele 2 subuniti sun asociate ntre ele prin puni disulfurice Fiecare subunitate e format din asamblarea a 3 lanuri: A, B, C Lanurile A, B, C n poriunea N-terminal (liniar) adopt o conformaie colagen-like (formeaz un triplu helix), iar ctre captul C-terminal ele adopt o conformaie globuloas Funcii: Poriunea globuloas e direct rspunztoare de recunoaterea complexelor imune membranare. Recunoaterea se face ca urmare a exteriorizrii secvenelor activatoare de complement (60aa) prezente n structura Ig. Aceste secvene sunt situate la nivelul Laura & Daniel

CURS 7 Retrocontrol RIU CH2 (IgG) sau CH2+CH3 (IgM). Ea e exteriorizat dup ce Ig a recunoscut Ag i atunci apar modificri conformaionale n lanurile H ce se transmit pn la domeniile respective i contribuie la exteriorizarea secvenei activatoare de complement. Secvena e recunoscut prin complementaritate de o secven prezent n poriunea globuloas a C1q => legturi complexe imune C1q. C1q sufer i el modificri conformaionale n fiecare subunitate ce se transmit antidromic (C-terminal Nterminal). Rezultatul modificrilor: exetriorizarea unor secvene de aa prezente n poriunea liniar a fiecrei subuniti de C1q. Ea poate ataa C1r, care se activeaz i fixeaz C1s, care se activeaz => s-a constituit complexul trimolecular C1qC1rC1s b. C1r c. C1s - cliveaz n 2 etape succesive faciunile C4 i C2 => cascada complementului pe calea clasic.

Laura & Daniel