FERMENTACION DE AZUCARES 2012

Introduccin Todos los seres vivos requieren un continuo aporte de nutrientes para suplir sus necesidades de materia y energa. El principal nutriente de la clula es la glucosa, la que es catabolizada para producir ATP, la forma ms importante de energa utilizable en la clula. El metabolismo de la glucosa ocurre a travs de una serie de reacciones: Gliclisis: Glucosa Piruvato, ATP CO2 + NADH + H+ + FAD + ATP

Ciclo de Krebs: Acetil CoA

Cadena respiratria: NADH + H+, FADH2 + O2 ATP + H2O En ausencia o deficiencia de oxgeno, ocurre respiracin celular anaerbica o fermentacin, en que el piruvato (producto de la gliclisis) se transforma en etanol (levaduras) o acido lctico (msculo). En presencia de oxgeno suficiente ocurre respiracin celular aerbica, en que el piruvato se incorpora a la mitocondria y se transforma en Acetil CoA, el cual a travs del ciclo de Krebs origina CO2 y coenzimas reducidas. Estas coenzimas reducidas se incorporan a la cadena respiratoria mitocondrial, donde son reoxidados por O2, produciendo ATP y H2O. Esta va aerbica es la principal va de produccin de ATP. Algunas clulas como los glbulos rojos y las bacterias anaerbicas estrictas tienen en la fermentacin la nica va de produccin de ATP, en tanto que otras clulas como las levaduras, que son anaerobios facultativos, en ausencia de O2 realizan fermentacin y en presencia de l, realizan fermentacin y respiracin celular. OBJETIVOS 1. Observar experimentalmente los fenmenos de respiracin celular anaerbica (fermentacin) en levaduras. 2. Comprobar el efecto de inhibidores de la gliclisis y de la respiracin celular. 3. Aplicar los conceptos de sustrato, inhibidores competitivos, inhibidores no competitivos, oxido-reduccin, modificacin de pH e inhibidores en la interpretacin de sus resultados. ACTIVIDADES Fermentacin alcohlica en levaduras (Saccharomyces cerevisiae). La fermentacin alcohlica en levaduras ocurre de acuerdo a la reaccin: C6H12O6 2CO2 + 2 C2H5OH (etanol) El etanol se acumula en el medio y el CO2 es liberado como gas, por lo que se puede medir la fermentacin por la produccin de CO2.

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ACTIVIDAD 1 Complete la siguiente batera de tubos Tubo 1 Levaduras al 7% 1 ml (43C) Glucosa al 2% Sacarosa al 2% Almidn al 1% Fructosa al 1% Agua Destilada 2 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml Solucin Tubo 2 1 ml 1 ml 1ml 1 ml Tubo 3 1 ml Tubo 4 1 ml Tubo 5 1 ml

Agitar suavemente y mida el pH de los tubos 1, 2, 3, 4 y 5 Poner el contenido de cada tubo en una pipeta de 2 ml convenientemente marcada. Selle la punta de la pipeta con parafilm y colquela invertida dentro de su correspondiente tubo. Marque la posicin inicial de la burbuja de aire. Lleve a una estufa a 43C por 30 minutos. Al finalizar este tiempo mida la cantidad de gas producida y el pH en cada uno de los tubos. PREGUNTAS Cul es el objetivo de los procesos de fermentacin? Cules son los pasos de la fermentacin alcohlica? Como se denominan las enzimas que participan en este proceso? Qu enzima oxida el NADH en estas reacciones? Qu efecto tendr el Fluoruro de Sodio, NaF sobre los procesos de obtencin de energa?

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ACTIVIDAD 2 Complete la siguiente batera de tubos Tubo Tubo 1 2 Levaduras al 7% 1 ml 1 ml (43C) Glucosa al 2% 1 ml 1 ml NaOH 0,1 M 1 ml HCL 0,1 M 1 ml Agua Destilada Temperatura 43C 43C Solucin Tubo 3 1 ml 1 ml Tubo Tubo 4 5 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml

1 ml 4C

1 ml 60C

1 ml T amb

Agitar suavemente y medir el pH de los tubos 1, 2 y 3. Poner el contenido de cada tubo en una pipeta de 2 ml convenientemente marcada. Selle la punta de la pipeta con parafilm y colquela invertida dentro de su correspondiente tubo. Marque la posicin inicial de la burbuja de aire. Lleve a una estufa a 43C por 30 minutos. Al finalizar este tiempo mida la cantidad de gas producida y el pH en cada uno de los tubos.

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INFORME Actividad 1 Explique el resultado obtenido en cada uno de los tubos. Tubo 1 pH inicial pH final Observacin

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INFORME Actividad 2 Explique el resultado obtenido en cada uno de los tubos. Tubo 1 pH inicial pH final Observacin