CUESTIONARIO DE MICROBIOLOGA 1. De acuerdo a su temperatura ptima de crecimiento y necesidades de oxgeno, Cmo se clasifican las bacterias?

* Por su requerimiento de oxigeno Otro aspecto a tener en cuenta en la clasificacin de bacterias es la necesidad de oxgeno para poder vivir. Dependen en buena medida de la disponibilidad de las enzimas eliminadoras de perxidos y superxidos. Aerobias estrictas: Dependen de O2 para su crecimiento. Anaerobias estrictas: se desarrollan en ausencia total de O2, utilizan aceptores finales distintos del oxgeno: CO2, H2 y N2, o poseen metabolismo estrictamente fermentativo. Anaerobias Facultativas: pueden desarrollarse en presencia o ausencia de O2, aunque predominan en medios anaerbicos. Microaerfilas: slo se pueden desarrollar en presencia de bajas tensiones de O2 (menor del 12% en lugar del 20% que es la atmosfrica) y altas tensiones de CO2. * Por su ptimo de temperatura Segn la temperatura ptima de crecimiento las bacterias se clasifican en: Termfilas: se desarrollan entre 25 y 80C, ptima 50 y60C Mesfilas: se desarrollan entre 10 y 45C, ptima 20 y 40C Psicrfilas: se desarrollan entre -5y 30C, ptima 10 y 20C. 2. Define los siguientes trminos: a) Periodo trmico mortal tiempo trmico mortal: es el tiempo mnimo requerido para que mueran todas las bacterias de una determinada suspensin a una determinada temperatura;

tiempo de reduccin decimal: es el tiempo requerido para reducir al 10% la densidad de la suspensin, a una determinada temperatura (tambin llamado valor D); b) Punto trmico mortal punto trmico mortal: es la temperatura mnima que mata a todas las bacterias en un tiempo determinado (normalmente el tiempo de referencia empleado es de 10 min). c) Psicrfilo Las psicrfilas o crifilas: crecen a partir de entre -5 a 5C. a) Las llamadas psicrfilas obligadas tienen temperatura ptima a 15-18C, como por ejemplo Flavobacterium. La bacteria Polaromonas vacuolata, recientemente aislada en aguas heladas de la Antrtida es lo que pudiramos llamar un psicrfilo extremo: tiene su ptimo de crecimiento en 4C, y es incapaz de crecer a 14C (se muere de calor!). Las psicrfilas facultativas o psicrotolerantes (tambin llamadas psicrotrofas) presentan temperatura ptima en torno a los 20-30C y mximas a los 35C. Las bacterias y hongos psicrotrofos son los responsables de que los alimentos guardados en nevera se estropeen al cabo del tiempo.

b)

d) Mesfilo Los mesfilos presentan temperaturas ptimas a los 25-40C y mximas entre 35 y 47C. La mayor parte de las eubacterias (incluyendo las patgenas) pertenecen a esta categora. La mayor parte de los microorganismos que viven en ambientes templados y tropicales, incluyendo los simbiontes y parsitos, pertenecen a esta categora. e) Termfilo . Los termfilos presentan ptimos a 50-75C y mximos entre 80 y 113C. Dentro de esta categora se suele distinguir las termfilas extremas (=hipertermfilas), que pueden llegar a presentar ptimos cercanos a los 100C, y que taxonmicamente pertenecen al dominio de las Archaea. f) Hipertermfilo

Llamamos termfilos a los organismos cuya temperatura ptima de crecimiento est por encima de 45C e hipertermfilos (estenotermfilos) a aquellos cuya temperatura ptima est por encima de 80C. g) Halfilo Los microorganismos halofilos son aquellos que viven en ambientes con un contenido mayor o igual a 8% w/v de ClNa. Estos microorganismos extremofilos se encuentran generalmente en lagos salinos cuya salinidad es la de saturacin o sobresaturacin. h) Xerfilo microorganismos que viven en ausencia de agua o en presencia de alta sequedad i) Osmfilo microorganismos que viven en presencia de altos valores de azucares 3. Qu efecto tiene el pH sobre el crecimiento de los microorganismos? Los microorganismos pueden crecer en una variada gama de pH que va desde pH = 2 para los acidfilos hasta pH = 11 para alcalfilos. En general los microorganismos que toleran pH cidos no toleran pH alcalinos y viceversa. Independientemente del pH que pueda soportar un microorganismo, es importante conocer cul es el pH ptimo para el crecimiento. En la fig. 11 est representada en forma general la variacin de um con el pH para hongos y bacterias. De la misma surge claramente que en general los hongos tienen un pH ptimo cercano a 5 mientras que para bacterias se da alrededor de pH = 7; adems debido a la forma "achatada" de las curvas, variaciones de 0.5 unidades de pH alrededor del ptimo no tienen mayor influencia. Durante el crecimiento los microorganismos modifican el pH del medio de cultivo, normalmente hacindolo disminuir; por tal motivo es frecuente incluir en el medio substancias que acten como tampon (buffer) a fin de evitar que el pH se aleje del ptimo. El efecto de la temperatura sobre el crecimiento es complejo. Por un lado cada reaccin qumica individual, de todas las que conforman el metabolismo, es afectada por la temperatura, por lo que un incremento de sta resulta en una mayor velocidad de reaccin. Esto se traduce en un aumento de pm con la temperatura

Por otra parte, aumentos posteriores de temperatura inactivan las enzimas que catalizan las reacciones, con lo que el valor de um decrece rpidamente. La temperatura ptima resulta de la interaccin de estos dos efectos. Como regla general, los microorganismos psicrofilos poseen temperatura ptima entre 10 y 20 C, los mesfilos entre 30 y 40 C y, finalmente, los termfilos entre 50 y 60 C. La necesidad de mantener la temperatura de cultivo en el valor ptimo, hace que los biorreactores (fermentadores) cuenten con dispositivos apropiados para tal fin.

4. Cmo afecta la presin osmtica a los microorganismos? Los microorganismos requieren agua para su crecimiento, adems para obtener nutrientes de sta. Una presin osmtica alta causa prdida de agua y plasmlisis de la clula, por lo que se utiliza este fenmeno para conservar los alimentos ya sea aadiendo sal o azcar, lo que previene el crecimiento bacterial. Sin embargo algunas bacterias se han adaptado a altas concentraciones de sal, a stas se les conoce como halfilos extremos. Por otro lado, los halfilos facultativos no requieren una alta concentracin de sal, pero pueden crecer hasta una concentracin de 2%. Otras bacterias pueden tolerar hasta un 15% de sal. 5. Cmo pueden regular este efecto algunos microorganismos?. 6. Qu dao causa la luz ultravioleta a los microorganismos? Esquematiza

La luz ultravioleta causa desarreglos moleculares en el material gentico (cido nucleico, DNA) del microorganismo, esto impide su reproduccin y si no puede reproducirse, entonces se le considera MUERTO.

7. Qu mecanismos utiliza la bacteria para revertir el efecto de la luz UV? 8. Define los siguientes trminos y da un ejemplo de cada uno de ellos a) Antibitico es una sustancia qumica producida por un ser vivo o derivada sinttica de ella que mata o impide el crecimiento de ciertas clases de microorganismos sensibles, generalmente bacterias. b) Biocida Los biocidas pueden ser sustancias qumicas sintticas o de origen natural o microorganismos que estn destinados a destruir, contrarrestar, neutralizar, impedir la accin o ejercer un control de otro tipo sobre cualquier organismo considerado nocivo para el hombre. c) Bioesttico Detienen el crecimiento de microorganismos d) Desinfectante Los desinfectantes reducen los organismos nocivos a un nivel que no daan la salud ni la calidad de los bienes perecederos. Algunos, como los compuestos fenlicos, pueden actuar tambin como antispticos. e) Antisptico

son sustancias antimicrobianas que se aplican a un tejido vivo o sobre la piel para reducir la posibilidad de infeccin, sepsis o putrefaccin. En general, deben distinguirse de los antibiticos que destruyen microorganismos en el cuerpo, y de los desinfectantes, que destruyen microorganismos existentes en objetos no vivos. f) Agente qumioteraputico agente qumico utilizado para el tratamiento de enfermedades en particular en el tratamiento de neoplasias debido a que puede alterar el crecimiento de las clulas cancerosas. 9. Investiga 4 microorganismos productores de antibiticos, mencionando el antibitico que producen y como acta

10. Qu es la resistencia a antibiticos? Y Cmo se transmite? La resistencia antibitica es la capacidad de un microorganismo para resistir los efectos de un antibitico. La resistencia se produce naturalmente por seleccin natural a travs de mutaciones producidas por azar, pero tambin puede inducirse artificialmente mediante la aplicacin de una presin selectiva a una poblacin. Una vez que se genera la informacin gentica, las bacterias pueden

transmitirse los nuevos genes a travs de trasferencia horizontal (entre individuos) por intercambio de plsmidos. Si una bacteria porta varios genes de resistencia, se le denomina multirresistente o, informalmente, superbacteria. 11. Qu es la concentracin mnima inhibitoria? La Concentracin mnima inhibitoria (CMI), en microbiologa, es la concentracin ms baja de un antimicrobiano que inhibe el crecimiento visible de un microorganismo despus de su incubacin. La concentracin mnima inhibitoria es importante en diagnsticos de laboratorio para confirmar la resistencia de microorganismos a un agente antimicrobiano y adems para monitorizar la actividad de los nuevos agentes antimicrobianos. 12. En que consiste la tcnica de difusin en placa? En este mtodo se incuba el microorganismo en una placa Petri con medio de cultivo solidificado sobre la que se aaden discos de papel impregnados con una cantidad conocida de antibitico. Despus de la incubacin se observan en la placa la presencia de zonas claras alrededor de los discos llamadas halos de inhibicin. La ausencia de un halo significa que el microorganismo es resistente al antibitico. Por el contrario y por regla general, cuanto mayor es el halo ms efectivo es el antibitico. Este mtodo se puede utilizar tambin para determinar la CMI al utilizar discos con distintas concentraciones de un mismo antibitico.