INTRODUCCION ANALISIS INSTRUMENTAL

CLASIFICACION DE LOS METODOS ANALITICOS TIPOS DE METODOS INSTRUMENTALES E INSTRUMENTOS SELECCION DE UN METODO ANALITICO: CRITERIOS

Prof. Margarita Rodrguez Lpez Departamento de Qumica Q420

Clasificacin de los Mtodos Analticos

Tipos de Mtodos Instrumentales

Mtodos Clsicos
Separacin de los componentes de una muestra.
Precipitacin Extraccin Destilacin

Mtodos instrumentales
Son mtodos modernos de separacin, cuantificacin e identificacin de especies qumicas Se basan en fenmenos qumico-fsicos conocidos, su aplicacin ha ido en paralelo al desarrollo de la electrnica.

Se basan en propiedades fsicas que pueden utilizarse como seales analticas en el anlisis cualitativo y cuantitativos.( tabla 1 pag. 2)

Anlisis Cuantitativo.
Medidas Gravimtricas (masa) Medidas volumtricas (volumen o masa)

Seales Utilizadas en los Mtodos Instrumentales

Seal Mtodos Instrumentales Emisin de radiacin Espectroscopia de emisin ( rayos X, visible, de electrones, Auger); fluorescencia, fosforescencia y luminiscencia (rayos X, UV y visible) Adsorcin de Espectrofotometra y fotometra ( rayos X, UV, visible, IR); radiacin espectroscopia foto acstica; resonancia magntica nuclear y espectroscopia de resonancia de espn electrnico Dispersin de la Turbidimetra; nefelometra; espectroscopia Raman. radiacin Refraccin de la Refractometra; Interferometra radiacin Difraccin de la Mtodos de difraccin de rayos X y de electrones. radiacin Rotacin de la Polarimetra; Dispersin rotatoria ptica; dicrosmo circular. radiacin Potencial Elctrico Potenciometra; Cronopotenciometra Carga Elctrica Coulombimetra Corriente Elctrica Polarografa; Amperometra Resistencia Elctrica Conductimetra Masa Gravimetra ( Microbalanza de cristal de cuarzo) Razn masa a carga Espectrometra de masas Velocidad de Mtodos cinticos reaccin Propiedades Conductividad Trmica ; gravimetra y titulometra termal; Trmicas Anlisis trmico diferencial y mtodos de entalpa Radiactividad Mtodos de activacin y dilucin isotpica

Instrumentos para el Anlisis

Un instrumento para anlisis qumico debe:

convertir la informacin almacenada en las caractersticas fsicas o qumicas del analito en informacin que puede ser manipulada e interpretada por el ser humano.

El instrumento es un dispositivo de comunicacin entre el sistema bajo estudio y el investigador.

Instrumentos para el Anlisis

Instrumentos para el Anlisis

Para obtener informacin del analito es necesario proveerle un estmulo, generalmente en forma de energa electromagntica, elctrica, mecnica o nuclear. El estmulo sobre el sistema bajo estudio genera una respuesta que aportar informacin analtica.(Ej.)

Estimulo

Respuesta

Fuente de energa

Sistema bajo estudio

Informacin analtica

Instrumentos para el Anlisis

Un instrumento para un anlisis qumico suele estar constituido como mximo por cuatro componentes fundamentales:
Generador de seales Transductor de entrada o detector Procesador de seales Transductor de salida o dispositivo de lectura

Seleccin de un mtodo analtico

Es esencial definir con claridad la naturaleza del problema analtico:

1. Que exactitud y precisin se requieren? 2. De cuanta muestra se dispone? 3. Cual es el intervalo de concentracin del analito? 4. Que componentes de la muestra interferirn? 5. Cuales son las propiedades fsicas y qumicas de la matriz de la muestra? 6. Cuantas muestras deben analizarse?

Parmetros de calidad

Criterios numricos para seleccionar mtodos analticos

En la tabla 1-3 se enumeran los criterios cuantitativos de funcionamiento de los instrumentos necesarios para decidir la eleccin del mtodo analtico Los parmetros de calidad son las caractersticas numricas del instrumento y permiten al qumico reducir el nivel de eleccin del mtodo

1. Precisin Desviacin estndar absoluta, desviacin estndar relativa, coeficiente de variacin, varianza. 2. Exactitud Error absoluto sistemtico, error relativo sistemtico. 3. Sensibilidad Sensibilidad de calibracin, sensibilidad analtica. 4. Limite de deteccin Blanco mas de tres veces la desviacin estndar de blanco 5. Intervalos de concentracin Concentracin entre el lmite de cuantificacin (LOQ) y el lmite de linealidad (LOL) 6. Selectividad Coeficiente de selectividad

Precisin: concordancia de datos realizados de Seleccin de un mtodo analtico

la misma forma

Otras caractersticas a tener en cuenta en la eleccin del mtodo

1. Velocidad 2. Facilidad y comodidad 3. Habilidad del operador 4. Coste y disponibilidad de equipo 5. Coste por muestra

Criterios numricos para seleccionar un mtodo analtico

Precisin y exactitud
Ilustrando la diferencia entre exactitud y precisin

Exactitud

Low accuracy, low precision

Low accuracy, high precision

Mide el error sistemtico, o determinado de un mtodo analtico Exactitud = - xt es la medida de la concentracin de analito de una muestra cuya concentracin verdadera es xt Requiere analizar estndares de referencia

High accuracy, low precision

High accuracy, high precision

Sensitividad

Sensitividad

Definicin cuantitativa:
Sensitividad de calibracin (IUPAC):
Pendiente de la curva de calibracin del analito de inters S = mC + Sbl

Definicin general:
Es la capacidad de un mtodo o instrumento de discriminar entre pequeas diferencias en la concentracin del analito.

Depende de:
La pendiente de la curva de calibracin Reproducibilidad o precisin del sistema de medida.

Sensitividad analtica (Mandel & Stiehler):

= m/ss

70

Limite de Deteccin

Mtodo A

60

50

Definicin:
Concentracin o peso mnimo de analito que puede detectarse para un nivel de confianza dado.

40

30

20

Mtodo B

Depende de:
Relacin entre la magnitud de la seal analtica con el valor de la fluctuaciones estadsticas de la seal del blanco.

10

0 0 2 4 6 8 10 12

Concentration (mM)

Limite de Deteccin

La mnima seal analtica distinguible Sm se toma como la suma de la seal media del blanco Sbl mas un mltiplo k de la desviacin estndar del mismo:
Sm = Sbl + ksbl

Relacin seal/ruido (S/N): Ruido: variacin al azar en la seal Seal: respuesta neta de una muestra para un metodo dado. (Nota: Un valor de S/N=2 es el mnimo necesario para detectar con fiabilidad una seal analtica de la muestra con respecto al ruido de fondo.
seal

Segn Kaiser, estadsticamente se considera que para k=3, el nivel de confidencia de deteccin es del 95%.

ruido

Limite de Deteccin

Intervalo de Concentracin Aplicable

Intervalo til de un mtodo analtico: intervalo entre la concentracin mas pequea con la que pueden realizarse medidas cuantitativas (LOQ) hasta la concentracin a la que la curva de calibrado se desva de la linealidad. El limite inferior se estima como diez veces la desviacin estndar cuando la concentracin del analito es cero Para aplicacin de un mtodo analtico debe tener un intervalo de al menos dos ordenes de magnitud.

Sm = Sbl + ksbl

Experimentalmente, Sm puede determinarse mediante 20 o 30 medidas del blanco en un extenso periodo de tiempo El limite de deteccin es dado como: Cm= (Sm - Sbl)/m

Rango dinamico: parte lineal de la recta de calibrado donde el limite inferior es 10 veces la desviacion estandar del blanco. LOQ - limit of quantitation LOL - limit of linearity

Selectividad

Es el grado de ausencia de interferencias debidas a otras especies contenidas en la matriz de la muestra. Consideremos una muestra que contiene un analito A y dos interferentes potenciales B, C.

Selectividad

La seal observada ser una combinacin de la seal correspondiente a la presencia del compuesto A ( nuestro analito) y a la presencia del compuesto B
70

60

S= mAcA + mBcB + mCcC + Sbl Definimos el coeficiente de selectividad de A con respecto a B como:
KB,A = m B/m A o KC,A =mc/m A S=m A( C A + KB,A C B + KC, A C C) + Sbl

50

Compuesto A
40

30

20

CompuestoB

10

0 0 2 4 6 8 10 12

Concentration (mM)

Calibracin de los mtodos instrumentales

Curva de calibracin

Curvas de calibracin Mtodo de las adiciones estndar Mtodo del estndar interno.

Se requieren varios estndares de concentraciones conocidas del analito de inters. Se requiere un blanco que contenga los componentes de la muestra original excepto el analito Se representa una grfica de respuesta del instrumento vs concentracin del analito.( mtodo de mnimos cuadrados)

Curva de calibrado: representacin grfica de la seal vs la cantidad conocida de un compuesto ( estndar ) o propiedad medida
sulfate calibration curve 1400000 1200000 1000000 y = 14427x - 12024 R2 = 0.999

peak area

800000 600000 400000 200000 0 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 concentration (ppm ) by area Linear (by area)

Curva de calibrado

Mtodo de las adiciones estndar

Parmetros utilizados para describir la curva de calibrado : S = mc + Sbl S seal medida c concentracin del analito Sbl seal del instrumento para el blanco m-pendiente de la recta de calibrado

Se utiliza en muestras complejas donde los efectos de matriz son importantes. Implica aadir uno o mas incrementos de una solucin estndar a una alcuota de muestra El valor del volumen en la interseccin de la lnea recta con el eje-x es el volumen del reactivo estndar equivalente a la cantidad de analito en la muestra.

Mtodo de las adiciones estndar

Mtodo del estndar interno

Un estndar interno es una sustancia que se aade a todas las muestras en una cantidad constante. La calibracin supone representar la razn entre la seal del analito y la del estndar interno como una funcin de la concentracin del analito

Mtodo del estndar interno

El estndar interno (IS) puede compensar distintos tipos de errores indeterminados y sistemticos. Si el IS y el analito responden proporcionalmente a los errores instrumentales y fluctuaciones del mtodo, la razn entre las seales es independiente de las fluctuaciones La mayor dificultad es encontrar un IS adecuado, con seal reproducible y que genere una seal similar a la del analito(Ej.)