MORFOLOGIA CELULAR

INDICE
Introduccin-------------------------------------------------------------------------------------------------- 3 Objetivos------------------------------------------------------------------------------------------------------ 4 Esterilizacin------------------------------------------------------------------------------------------------- 5 Uso del microscopio---------------------------------------------------------------------------------------- 6 Preparacin del medio de cultivo------------------------------------------------------------------------ 7 Proceso de siembra----------------------------------------------------------------------------------------- 7 Preparacin del frotis bacteriano------------------------------------------------------------------------ 8 Resultados de las muestras------------------------------------------------------------------------------ 8 Conclusin---------------------------------------------------------------------------------------------------- 10 Bibliografa-----------------------------------------------------------------------------------------------------11

INTRODUCCION

Al iniciar esta introduccin, del primer laboratorio debemos mencionar que es un lugar fsico con instalaciones y materiales especiales. Que nos permite experimentar acerca de conocimientos tericos, que facilitan el estudio de la biologa, aplicando tcnicas de uso comn en la materia para descartar o ratificar hiptesis a travs del mtodo cientfico. Por su minsculo tamao, los

microorganismos no pueden estudiarse como individuos, sino que es necesario manejarlos como poblaciones. Para ello es necesario cultivarlos, es decir, multiplicarlos, en ambientes especiales que proporcionen las condiciones semejantes a las de su hbitat natural. El desarrollo de los microorganismos una vez que ha sido preparado el medio de cultivo o siembra, debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios, los que deben estar exentos de cualquier

microorganismo contaminante. Para ello es necesaria la esterilizacin total de los materiales. Los medios de cultivo contienen como mnimo: carbono, nitrgeno, azufre, fsforo y sales inorgnicas, inductoras del crecimiento. En este caso puntual, el agar que utilizaremos es (plate Count) principal agente solidificante uno de los ms utilizados en medios de siembra

bacteriolgicos, que contiene todo lo necesario para obtener la proliferacin y desarrollo de los diferentes microorganismos presentes en muestras de pelo, manos y la tos.

OBJETIVOS
Conocer el material que se emplea habitualmente en un laboratorio de microbiologa. Conocer los procedimientos de esterilizacin y desinfeccin utilizados en el laboratorio de microbiologa. Preparar adecuadamente el material de vidrio a utilizar en el laboratorio de microbiologa, previo al proceso de esterilizacin. Identificar todo el material que se va a necesitar en una frotis Efetuar preparaciones microscpicas de microorganismos. Utilizar tcnicas de observacin microbiana Visualizar la morfologa de un frotis en fresco Observar la disposicin y agrupacin de un frotis en fresco Determinar la movilidad de un frotis en fresco si la presenta

Esterilizacin Significa la eliminacin de toda forma de vida de un medio o material, lo que se lleva a cabo generalmente por medios fsicos, por ejemplo, filtracin, o por muerte de los organismos por calor, productos qumicos u otra va. Esta definicin excluye por lo tanto cualquier tcnica que resulte solamente en un dao a los microorganismos o atenuacin de la actividad de cualquier tipo. Los mtodos de esterilizacin pueden ser de 3 tipos: a. Por destruccin total de microorganismos; b. Por muerte o inactivacin; y c. Por eliminacin con medios fsicos. Por destruccin total se entiende un proceso muy violento, que casi siempre implica calentamiento apreciable del material, como ocurre con la aplicacin de una llama, que es lo que hacemos en el laboratorio cuando flameamos un ansa de platino o las bocas de tubo de ensayo o erlenmeyers. Otra manera de destruir contaminantes es con el uso de poderosos agentes oxidantes. Por supuesto sta metodologa, aunque es efectiva, est muy restringida en su empleo. La muerte o inactivacin significa la eliminacin de microorganismos sin que exista necesariamente desintegracin de las clulas. Se puede efectuar por calentamiento, seco o hmedo, por radiaciones o por agentes qumicos. El calor hmedo, generalmente en forma de vapor bajo presin, es muy til y de gran valor en la esterilizacin en el laboratorio, que se efecta en autoclave, o en la industria cuando se esterilizan los medios de cultivo y los equipos de fermentacin La eliminacin fsica est restringida a la esterilizacin de gases lquidos, y es fundamentalmente llevada a cabo por filtracin mediante filtros absolutos o filtros fibrosos. Los filtros absolutos son de materiales cermicos, de vidrio o de metal sinterizado con poros tan pequeos que la penetracin de los microorganismos no es posible. Los filtros fibrosos no son absolutos y el material filtrante puede ser lana de vidrio, amianto y esteres de celulosa, siendo las fibras de un dimetro variable.

La esterilizacin consiste en elevar la temperatura de la preparacin por encima de los 65 C (temperatura donde los bacterias se desnaturalizan), se mantiene esa temperatura durante 10 minutos, para proceder a bajar rpidamente la temperatura hasta por debajo de los 5 C; para enfriar con rapidez se usa el abatidor de fro o bien de forma casera se recurre a un bao de agua fra con cantidad de hielo. Si el proceso de bajada de temperatura no se hace correctamente, la descomposicin seguir su curso normal, como si no hubiese esterilizado. Especialmente viable para la conservacin de salsas, fondos y bases, permite su conservacin por 3 o 4 meses.

Uso del microscopio

Sistema ptico: OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador. Ampla la imagen del objetivo. OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparacin. Ampla la imagen de sta. CONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparacin. DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador. FOCO: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador. Sistema mecnico: SOPORTE: Mantiene la parte ptica. Tiene dos partes: el pie o base y el brazo. PLATINA: Lugar donde se deposita la preparacin. CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular, binocular ,.. REVLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar los objetivos. TORNILLOS DE ENFOQUE: Macromtrico que aproxima el enfoque y micromtrico que consigue el enfoque correcto.

Colocar el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y bajar la platina completamente. Colocar la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas metlicas. Comenzar la observacin con el objetivo de 4x o colocar el de 10 aumentos (10x) si la preparacin es de bacterias. Para realizar el enfoque: Acercar al mximo la lente del objetivo a la preparacin, empleando el tornillo macromtrico. Mirando a travs de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparacin con el macromtrico y, cuando se observe algo ntida la muestra, girar el micromtrico hasta obtener un enfoque fino. Pasar al siguiente objetivo. La imagen debera estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el micromtrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdi por completo la imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior y

repetir la operacin desde el paso 3. El objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de la preparacin y por ello es fcil que ocurran percances.

Preparacin del medio de cultivo

Materiales: Autoclave Incubadora Mechero Alusa fail

Placas de petri Matraz Probeta Esptula Papel kraf

Pesar 2,25g de Plate Count y depositarlo en un matraz, agregar 100ml de agua, medidos previamente con un probeta, disolver a bao mara por 15 a 20 min dependiendo de los factores que influyan en la temperatura constante, posteriormente se retira y se dispone a tapar con alusa fail y papel kraf,rotular y esterilizar a 121c por 15min.

Proceso de siembra Antes de usar las placas petri se debe esterilizar a 121c por 15min. Una vez terminada la esterilizacin de las placas petri y el medio de cultivo, proceder a preparar la siembra Separar tres placas petri y agregar el medio de cultivo a cada una, lo suficiente para tapar el fondo, posteriormente se deja enfriar. sembrar en las placas petri junto con el medio de cultivo ya enfriado mano, tos y pelo e identificarlas cada una con su debida rotulacin incubar por 48 hrs. a 37 C en estufa de cultivo.

Pasado el tiempo requerido de incubacin tomar las muestras y proceder a la preparacin de los frotis.

Preparacin de un Frotis bacteriano

Materiales: - Mechero - Portaobjetos - Algodn -Placas o tubos con microorganismos - Cubreobjetos - Microscopio - alcohol - Asas de loop

Procedimiento: 1.- Limpiar el porta objeto con alcohol y pasarlo rpidamente por la llama del mechero. 2.- Colocar una gota de agua estril, en el centro de la lmina. 3.- Tomar una asa de platino, esterilizarla a la llama, dejarla enfriar y con ella recoger una partcula del material que se desea examinar, dispersar en la gota (1cm2) 4.-Esterilizar el asa a la llama del mechero. 5.- Observar al microscopio

Resultados: Muestra De Cabello: Una vez que est listo el frotis de esta muestra se dispone a observar en el microscopio los tipos de bacterias que se pueden encontrar en el cabello son de tipo esfricas, como el ESTAFILOCOCO

Muestra De Manos:

En esta muestra se puede observar a travs del microscopio bacterias de tipo esfricas como es el coco y estafilococos.

Muestra De Tos A simple vista en la placa petri no es posible observar nada, pero en el frotis realizado con esta muestra se visualizan bacterias de tipo esfricas en las que se distinguen los cocos y estreptococos

CONCLUSION
En el primer laboratorio se logra apreciar los diversos instrumentos que se ocuparan a lo largo de todos los prcticos de microbiologa, tales como el microscopio, funcionamiento de la autoclave, utilidades del mechero bunsen, balanza de precisin, incubadora, etc. En cuanto al medio de cultivo es posible llevarlo a cabo mediante un proceso ms menos extenso y con mucha precaucin debido a su posterior utilizacin que ser dar origen a una siembra. Como todos los organismos vivos, los microorganismos requieren ciertos nutrientes bsicos y factores fsicos para el mantenimiento de su vida, estas necesidades varan segn el tipo de microorganismo y es necesario conocerlas para cultivarlas en el laboratorio. Una vez llevado a cabo el proceso de incubacin se puede realizar una observacin minuciosa de cada muestra, mediante un frotis utilizando un microscopio, en el cual se logra identificar diversos tipos de microorganismos.

BIBLIOGRAFA
http://www.ucm.es/info/mfar/pdfs/odonto/GuiaMicrobiologiaOdontologia.pdf http://www.google.com/search?q=clasificacion+de+las+bacterias+tipicas&hl=es&noj=1&sit e=webhp&prmd=imvns&tbm=isch&tbo=u&source=univ&sa=X&ei=Ol5GUJP4OuPX0QGE1 YD4Cw&ved=0CF8QsAQ&biw=1366&bih=632 http://www.bloogie.es/educacion/385-microscopio-optico-uso-mantenimiento-y-precauciones http://www.google.com/url?sa=t&rct=j&q=esterilizacion%20&source=web&cd=12&cad=rja&ved= 0CGQQFjAL&url=http%3A%2F%2Fwww.euroresidentes.com%2FAlimentos%2Fdiccionario_gastron omico%2Festerilizar.htm&ei=_oRHULawOJSG9gSqwoCYCw&usg=AFQjCNGOEsTAyGFmQxwEdOpq CMz4jhF5uw