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ENDO PAPERS
La trastienda
de las publicaciones cientificas
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Siglo veintiuno editores Argentina s.a,
TUCUMAN 1621 7" N (C10SOAAG), BUENOS AIRES, REPUBLICA ARGENTINA
Siglo veintiuno editores, s.a. de c.v.
CERRO DEL AGUA 248. DELEGACI6N COYOAcAN. 04310. MEXICO, D. F.
Siglo veintiuno de Espana editores, s.a.
CIMENENDEZ PIDAL, 3 BIS (28036) MADRID
(I)
univer.Sidad
Nacional
de Quilmes
Editorial
Demoliendo papers: la trastienda de las publieaciones
eientifieas /compilado por Diego Golombek; con
prologo de: Pablo Kreimer - I' ed. 2' reimp. - Buenos
Aires: Siglo XXI Editores Argentina, 2006.
160 p. ; I9xI4 em. (Cieneia que ladra... dirigida por
Diego Golombek)
ISBN 987-1220-08-1
J. Cieneias Naturales I. Golombek, Diego, cornp. II.
Kreimer. Pablo. prolog. III. Titulo
COD 500
Portada de Mariana Nemitz
2005, Siglo XXI Editores Argentina S. A.
ISBN-l 0: 987-1220-08-1
ISBN-13: 978-987-1220-08-3
Impreso en 4sobre4 S.R.L.
Jose Marrnol 1660, Buenos Aires,
en el mes de agosto de 2006
Hecho el deposito que marca la ley 11.723
Impreso en Argentina - Made in Argentina
ESTE L1BRO
(y esta colecci6n)
Hace algunos afios comenzamos una aventura con un grupo
de alumnos que, increfblemente, se transformo en una materia he
cha y derecha, de caracteristicas academico-gastronornicas, ya que
cada clase se convirtio en una degustacion de manjares. La idea
era conocer fntimamente al paper, esa carta de presentacion obli
gatoria para los cientfficos. Efectivamente, el paper es la forma de
comunicar la ciencia, de poner en cormin el conocimiento... pe
ro no esta exento de historias humanas, de modas, de celos y de
contradicciones. PUBLICA a PERECE (publish or perish), reza uno
de los lemas de la investigacion; dime que publicas y te dire quien
eres, parece ser la medida de juicio de quienes nos dedicamos a
estas actividades.
Por eso vale la pena conocer de cerca a este amigo-enemigo
de los cientfficos. El paper, casi por definicion, esta escrito en di
ficil, una curiosa lengua tecnica de acceso a unos pocos iniciados.
Esto tiene un claro objetivo: la precision dellenguaje, que es 10
que permite que se cumpla con uno de los preceptos de la cien
cia: la replicabilidad de todo hallazgo. En la ciencia no vale el
principio autoritario de que las cosas son asf porque las dice el je
fe (0 el papa, 0 el Papa), sino que algo vale porque esta dernostra
do experimentalmente, puesto en cormin y replicado por cualquier
cientffico que tenga ganas de hacerlo.
Una de las propuestas finales de esta aventura fue que los
4 DEMOLIENOO PAPERS
alumnos escribieran un paper con todas las reglas, pero con algu
na tematica absurda 0 disparatada. En otras palabras: aprender a
reirnos de nosotros mismos, de nuestros rnetodos y nuestros len
guajes. He aqur, entonces, una primicia: los cientfficos -0 al me
nos los estudiantes de ciencia- ise rfen! iSe divierten! iComen!
Este libro es, entonces, una selecci6n de los demoledores de
papers que aportaron pruebas irrefutables sobre la cafda de las
tostadas, la divinidad del bot6n, la existencia del hombre de la
bolsa 0 el efecto de la rmisica sobre el crecimiento de las plantas.
Despues podremos volver a nuestros ratones, tubos de ensayo y
maquinas de avanzada, con la barriga llena y el coraz6n conten
to. Desarrollar la imaginaci6n es, despues de todo, una de las me
jores formas de acercarse a la ciencia.
Esta colecci6n de divulgaci6n cientffica esta escrita por cien
tfficos que creen que ya es hora de asomar la cabeza por fuera del
laboratorio y contar las maravillas, grandezas y miserias de la pro
fesi6n. Porque de eso se trata: de contar, de compartir un saber
que, si sigue encerrado, puede volverse imitil.
Ciencia que ladra... no muerde, s610 da sefiales de que ca
balga.
Diego Golombek*
* Es doctor en biologfa (UBA), investigador del CONICH y profesor titular en la
Universidad Nacional de Quilmes, donde dirige ellaboratorio de Cronobiologfa.
fndice
Sobre el nacimiento, el desarrollo y la demolici6n de los papers
PABLO KREIMER 7
Los principios flsicos que determinan la caida en pie del gate
prevalecen sobre la Ley de Murphy que determina la calda
de la tostada con la mermelada hacia abajo
JOEL PEREZ PERRI 23
Criterio valido para la c1asificaci6n de los sandwiches de miga
NICOLAs PALOPOLI 29
Hormona pildorina como regulador de las reacciones
preingesta del Sfndrome de Reacci6n Hostil Pastillof6bica Gatuna
PAULA BELUARDI 37
Humorina: adicci6n en los omnibus
GEORGINA COLO 45
La feromona out-odoro y la expresi6n de la proteina
mearumfueradutarrum son necesarias para la perdida
del control direccional del output de orina
LUCIANA FUENTES Y NATALIA MARTiNEZ 53
Los gustos musicales de las plantas afectan su normal desarrollo
VIRGINIA GONzALEZ Y DOLORES VALDEMOROS 61
!)
Una nueva proteina seria la responsable del sindrome
de somnolencia mateiforme
AxEL HOLLMAN 69
Inzombiavirus y otras yerbas:
la historia nunca antes contada sobre la zornbificacion
MELINA LAGuiA BECHER 77
Estudio comparativo de las variaciones de rendimiento
en biomasa S. cerevisiae y E. coli con distintos tipos de nutrientes
yen diferentes condiciones de humor
MATiAS NOBILE 89
EI ADN se autorreplica, gracias aDios
PABLO PELLEGRINI 95
Nuevos tratamientos para reducir el est res celular
NATALIA PERIOLO 103
Capacidad de acci6n de la ojota 0 el insecticida en aerosol
a la hora de matar cucarachas
SANTIAGO PLANO 111
Las tendencias suicidas en caracoles advierten
sobre patologias psiquiatricas en el hombre
MAXIMILIANO PORTAL 119
Detecci6n temprana del sfndrome Homo sapiens sapiens bolsum
MARiACANDELARIA ROGERT Y MARTiN FABANI 125
EI desesperado intento de Culex pipiens por mantenernos despiertos
ROSANA ROTA 133
Analisis de la divinidad del boton
LuciA SPERONI 141
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Pr61ogo
Sobre el nacimiento, el desarrollo
'i y la demolici6n de los papers
PABLO KREIMER*
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plant as anuales y
perennes.
D Perennes
DEMOllENOO PAPERS
Por su parte, plantas perennes como los pinos, el muerdago y
los abetos reaccionaron desfavorablemente retrotrayendo su ere
cimiento al ser sometidos a las canciones navidefias interpretadas
por Chiquititas. Las rosas amarillas demostraron un cornporta
miento similar al de los pinos al ser sometidas a cualquier tipo de
rmisica televisiva. Sin embargo, el comportamiento de los pinos y
las rosas fue revertido al ser crecidos en otra rmisica : por ejem
plo, las plantas perennes crecen mejor si durante su primer afio
son expuestas a canciones infantiles.
En los analisis de la reaccion de las plantas ante los diferen
tes ritmos musicales no se evaluo el habla de las personas ya que
estarfan involucrados otros factores como el tono de voz, humor
de la persona al dirigirse al vegetal (Las plantas que hablan, 2000)
y la simpatfa innata del vegetal hacia el amo.
BACTERIA S!MBIONTE MUSICAL
Los aislamientos bacterianos crecieron a un ritmo de 15 pla
cas /hora en el medio MTV con music a, mientras que no pudie
ron crecer en ATS (datos no mostrados) . Las bacterias crecidas
con otras variedades de la especie presentan un desarrollo supe
rior , con diferencias de hasta un 59 por ciento,
INOCULACI6N DE LUISINIA SP
La inoculacion con una sola cepa de Luisinia zoallestris no
produjo aumento y/o mejoramiento en el crecimiento de las plan
tas y no indujo a la aceptacion de nuevos ritmos musicales. Con
la inoculacion de dos aislamientos por vez el crecimiento de las
plantas aumenta levemente, y tienden a aceptar un nuevo ritmo
musical. Finalmente, con la inoculacion de todos los aislamientos
juntos el crecimiento aumenta notablemente observando una am
plia variedad de ritmos musicales. Por ejemplo, los pinos no re
trotraen su crecimiento ante las canciones navidefias.
Cabe agregar que tambien se ha encontrado que ciertas varie
dades de plantas aceptan desde su nacimiento una gran cantidad
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66 DEMOLJENDO PAPERS DEMOLJENOO PAPERS
de ritmos musicales y esto se deberfa a que presentan asociacio
nes con Luisinia wallestris desde muy temprana edad. El nodule
musical es una estructura que se encuentra esparcida en toda la
superficie vegetal, a diferencia de los hasta hoy conocidos nodu
los radiculares. AI intentar inocularlas en plantas se observe que
funcionan como un grupo, demostrado por el comportamiento
que observamos en la inoculacion con todos los aislamientos
mientras que no hay ningiin cambio cuando se las inocula indivi
dualmente. Esto puede deberse a que no les gusta estar solas. Es
to confirmarfa la hip6tesis de que durante la evoluci6n aprendie
ron a respetarse mutuamente y a necesitar una de la otra, ademas
de a las plantas, para crecer utilizando los vegetales como punto
de reuni6n (Coli, 1492).
Darwin 10 dijo: "Si tuviera que vivir de nuevo mi vida, me im
pondrfa la obligaci6n de escuchar algo de rmisica por 10 menos
una vez por semana. La perdida de esta afici6n supone una mer
rna de felicidad y puede ser perjudicial para el intelecto, y mas pro
bablemente para el caracter moral, pues debilita ellado emotivo
de nuestra naturaleza" (Darwin, 1984). Claro que el asunto no es
tan facil como parece, y se quiere conseguir que los vegetales ino
culados se conviertan en plantas hechas y derechas, capaces de
tener descendencia normalmente y de sobrevivir en el medio am
biente (Folgarait, 1992) con la rmisica de hoy y de siempre.
UTILIDADES BIOTECNOL6GICAS
Dentro de los beneficios de la tecnica cabe citar el posible me
joramiento de las transformaciones geneticas propinandoles un
ambiente adecuado. Asimismo, resulta fundamentalla obtenci6n
de plantas que acepten diversos ritmos musicales. Como eventual
fitoterapia deseamos proponer la producci6n de anticuerpos mu
sicales. Finalmente, la tecnologfa aquf mencionada sin duda re
dundara en un mejoramiento de las condiciones de reproducci6n.
Agradecimientos
A Plantas Faitful, al Palo Borracho (Chorisia speciosa) de la
plaza de Bernal por su incansable sombra y a todas las plantas
que gentilmente cedieron sus semillas.
Bibliografia
Darwin, C., Autobiografia de Darwin, Alianza Cien, 1993.
Coli, E., Lugares de reunion para bacterias solas y solos, Citas Bac
terio16gicas, 1492.
Ferreira, A, En defensa de la vida, Albatros, 1980.
Folgarait, A, Manipulaciones geneticas-qutmeras Ynegocios de la
boratorio, Norma, 1992.
Gras, E, La ingenieria de la vida, Acento, 1993.
Huxley, Sir J. et al., Darwin, Salvat, 1984.
Lechavalier,.M. P. YH. A, Systematics, isolation, and culture of Fran
kia, Schwintzer, New Jersey, 1990.
Mateo Box, J. M., Biotecnologia, agricultura y alimentaci6n, Mundi-
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Sierra, D., El domador de medanos, S.E.L.A., 1969.
Srta. Marisa et al., Mama naturaleza, Sala verde, Pinamar, 1980.
Srta. Marina et al., Las Plantitas, Sala Rosa, Bahia Blanca, 1982.
Valdes La Hens, D. y Wall, L., Aislamiento, cultivo e infectividad de
cepas Frankia nativas obtenidas a partir de nodules radiculares
de Alnus acuminata (en prensa).
Una nueva protei'na seri'a la
responsable del si'ndrome de
somnolencia mateiforme
AxEL HOLLMAN*
Instituto Argentino de Mate y Anexos,
Depto. de Investigaciones Bioqufrnicas, Argentina
Resumen
El mate, popular habito del cono sur, esta directamente rela
cionado con la crisis econ6mica argentina: como muestran varios
trabajos, la ingesta de grandes cantidades de mate es inversamen
te proporcional a las ganas de realizar una labor y /0 generar pro
yectos productivos. Hemos demostrado en este trabajo que la res
ponsable es una protefna de un peso de 83 daltons, presente en
gran des cantidades en las hojas de la planta de yerba mate. Esta
protefna seria un analogo de las endorfinas liberadas por el cuer
po humano, y provocarfa una cascada de senales que producen
en el individuo una sensaci6n de extasis semejante a la produci
da por las endorfinas, 10que conduce a un estado de mansedum
bre y ocio. Este efecto, llevado a la poblaci6n general, provocarfa
en el segmento productivo del pafs (18 a 45 afios) un descenso
abrupto de rendimiento, 10 que desencadena a largo plazo un de
fault econ6mico.
* Axel Hollman es licenciado en biotecnologia y actualmente realiza su tra
bajo doctoral en el desarrollo de liposomas estabilizados con proteinas de capa
S de lactobacilos en el Laboratorio de Microbiologfa Molecular de la Universi
dad Nacional de Quilmes.
70
71
OEMOllENOO PAPERS
Introducci6n
EI mate, entendido como la tecni ca de tomar agua a aproxi
madamente 92 C que previamente pasa a traves hojas de flex pa
raguariensis (yerba mate) secadas, ligeramente tostadas, ra tas 0
pulverizadas, es un habito muy popular en la Republica Argenti
na, pafs situado en el extremo sur del continente americano.
Como ya se ha descrito en otras estudios, este habito culinario
esta relacionado de manera directamente proporcional a su Indice
de estabilidad jurfdico-economica (Riesgo Pafs), e inversamente
praporcional a su Producto Bruto Intemo (PBI ) (Rosamonte et al.,
1970). 'Iambien esta descrito que dosis elevadas de mate (mayores
a un litro de H
20
/dfa ) disminuyen notablemente el rendimiento del
individuo que 10 ingiere, mostrando sfntomas de somnolencia y apa
ciguamiento (Taragui et al., 1992). En este trabajo demostramos la
presencia de una protefna de 83 daltons presente en grandes can
tidades en la planta de yerba mate y resistente a temperaturas su
peri ores a 100C, que posee una estructura similar a la endorfina
pudiendo incluso unirse a sus receptores. Tarnbien demostramos
que esta protefna es la responsable del efecto ya descrito de sorn
nolencia mateiforme, que desencadena en el individuo una somno
lencia y mansedumbre provo cando la necesidad imperiosa de dor
mir 0 al menos descansar (Cruz de Malta et al. , 1995).
Materiales y metodos
1. Obtencion de triturado de yerba mate: EI triturado de yerba
mate se obtuvo de una fusion de las cuatro marcas comercia
les de yerb a mas vendidas en la Argentina.
2. Ensayo in vivo de la respuesta de somnolencia mateiforme: se
sometio a 40 individuos sanos de entre 15 y 35 afios a tomar
4 litros de mate, y luego se observaron los resultados, usando
como control negativo yerba de plastico y como control po-
OEM OLIENOO PAPERS
Figura 1
Imagen de una planta
/lex paraguariensis
(yerba mate). a los tres meses de ser
serm brada.
sitivo agua con sedantes. Todos los individuos se encontraban
en ayuno durante las 24 horas previas a la experiencia y en
abstinencia de mate desde hacfa mas de 90 horas.
3. Analisis del triturado de yerba mate: Se realize un triturado
de 20 g de fusion de yerba mate con mortera, diluido con 10
ml de etanol a 70% hasta obtener una pasta hornogenea, que
fue filtrada con el fin de retener los residuos s6lidos presen
tes. Allfquido obtenido se 10 diluy6 30 veces en Etanol 70%
y se 10 corr i6 en un gel de electraforesis bidimensional duran
te 4 horas, segiin las especificaciones del producto.
4. Electraforesis Bidimensional del Agua del mate: Se hizo pa
sar un litro de H
20
mineral a 92 C por un extracto de yerba
mate tomando cada intervalo de 250 cc 5 ml de muestra. A
estas muestras luego se las analiz6 mediante electroforesis bi
dimensional usando el mismo tipo de gel y especificaciones
que para el ensayo anterior.
5. Aislamiento de la pratefna de peso molecular de 83 daltons:
Del gel de electroforesis del agua de yerba mate se purific6 la
banda correspondiente a la nueva pratefna.
6. Caracterizacion de la pratefna: Luego de obtener la protefna
purificada se realize una cristalizacion con rayos X y una es
pectrafotometrfa, cornparandola con la endorfina humana.
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DEMOl lENDD PAP ERS
7. Ensayo in vivo de la funci6n de somnolencia de la protefna de 83
daltons: Se incorpor6 al alimento de 30 ratones grandes cantida
des de esta protefna, tambien se incluy6 un control negativo (sin
protefna) y uno positivo (adicionando sedante pediatrico en lu
gar de la protefna de 83 daltons). EImonitoreo se realiz6 median
te registro de actividad neuronal y mediante observaci6n visual.
Resultados
Ensayos in vivo del efecto de somnolencia mateiforme: EI en
sayo reve16 que luego de ingerir 1,5 litros de mate comenzaron a
revelarse los primeros sfntomas de mansedumbre, que alcanzaron
su maximo a los 2,23 litros, momento en que el ensayo tuvo que
ser detenido debido a un problema de incontinencia urinaria en
el total de los individuos, fen6meno que se observ6 tambien en
los controles. A las 2 horas de terminado el ensayo, 35/40 indivi
duos se encontraban dormidos, incluido el control positivo que
mostr6 los primeros sfntomas de suefio a los 15 minutos de con
cluido el ensayo, mientras que el control negativo se mostraba
despierto y con lucidez mental normal.
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Figura 2
Geles de electro foresis bidimensional de un ext racto de verba mate (A) V del agua
que paso a t raves de un ext racto Similar (B),
La fl echa seri als en amb os geles la nueva prot efna no caracterizada que. como se ve
por la dimen sion del spot, se encuentra en grandes cant idade s tant o en el ext racto
como en el agua.
DEMOllENDO PAPERS
Electroforesis bidimensional del triturado de yerba mate y del
agua : como se muestra en la Figura 2, ambos geles revelan la pre
sencia de una protefna de 83 daltons, presente en grandes canti
dades tanto en el triturado como en agua que previamente fuese
pasada por este triturado.
Cristalizaci6n y caracterizaci6n de la protefna encontrada:
Luego de aislar y cristalizar la protefna, mediante un software es
pecial para la comparaci6n de estructuras proteicas relacionadas,
se la compar6 con una endorfina del cuerpo humano que se se
grega en grandes cantidades, desencadenando una cascada de se
fializaci6n que culmina produciendo en el individuo una somno
lencia severa. En algunos casos se reportaron efectos mas severos
como la perdida de conocimiento (ver Figura 3).
Figura 3
Nueva prote fna vs. endorf ina hurnan a.
Imagen generada por procesador en funcion de los
datos aportados por la cristalizaci6n con raves X.
La primera es la proteina de 83 dalt ons presente
en las hojas de verba mate V la segunda es una
endorfina humana.
Los ensayos in vivo fueron concluyentes, ya que como se
muestra en la Figura 4 luego de ser agregada la protefna al alimen
to de los ratones, a los 45 minutos aproximadamente se observa
ron los primeros sfntomas de somnolencia que alcanzaron su ma
ximo a los 90 minutos de comenzado el ensayo .
Actividad in vivo
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Minutos
74 DEMOLIENOO PAPEHS 75
DEMOLIENDO PAPEHS
Discusi6n
Los resultados muestran claramente que la nueva protefna ca
racterizada es la responsable de la respuesta neuronal que da lu
gar a una reacci6n de mansedumbre. Por otro lado, el parecido
con las endorfinas es muy significativo, (Valium R. S., et al.).
Los geles que se observan en la Figura 2 demuestran ademas
que la protefna esta presente no s610 en el extracto de yerba ma
te sino que es transferida al agua cuando aquella pasa a traves del
extracto. Los ensayos in vitro confinnan que la protefna involu
crada en la reacci6n de somnolencia mateiforme es la de 83 dal
tons y no otras protefnas que podrfan estar tambien presentes en
el mate. Por otro lado, estudios realizados con extractos de te de
tilo muestran la presencia de una protefna similar con un peso de
80 daltons que describe efectos semejantes en ensayos con rato
nes y polfticos, (Green Hills L. et al., 1998).
Pafses como la Argentina, en donde se ingieren grandes canti
dades diarias de mate, provocan en el individuo que las consume
un decaimiento en su capacidad productiva. Este fen6meno, extra
polado a la poblaci6n en general, da como resultado un decaimien
to productivo, 10que explica el aumento del Riesgo Pals. Esto tam
bien explicarfa por que un pafs como Chile, con condiciones muy
diferentes a las de Argentina, posee una estructura econ6mica mu
cho mas estable (Los Patricios et al., 1996), debido a que en ese pals
el habito del mate no estarfa demasiado instaurado. En cambio, en
pafses como Colombia y Paraguay, donde no s610 se toma mate si
no una variante de este Hamada coloquialmente terere (que s610 di
fiere del mate en que el agua esta fria, 0 a temperatura ambiente),
la economfa es aun mucho mas inestable que la de la Argentina, de
bido a que al estar el agua frfa la protefna posee un plegamiento
mas compacto 10 que devendrfa en una acci6n mas profunda 0
acentuada. Resultados preliminares de nuestro laboratorio indican
que segiin ensayos de actividad y plegamiento a diferentes tempe
raturas muestran que el plegamiento mas activo (que equivale a mas
horas de suefio luego de ingerir un litro de mate) es alcanzado por
la enzima a los 28C, aunque pennanece activa a temperaturas su
periores a los 115C.
Con todo 10expuesto hasta aquf, es bastante claro que para que
los pafses latinoamericanos logren ingresar al Primer Mundo debe
ran interrumpir de manera drastica el consumo de yerba mate e ini
ciar exportaciones de este producto a Europa y los Estados Unidos.
Bibliograffa
Chamigo, T. R; Nobleza Gaucha, S. N. YTaragiif C. G., "Yerba mate,
i.El elixir de los dioses 0 de los vagos?", Annals of Cartel de Ca
li, 1989, pp. 150-176.
Cruz de Malta, T. R; Chamigo, R T. YAdelgamate, L. S., "Mate el
octavo pasajero", El Matero, 1995, pp. 156-158.
Green Hills, LoW. y La Virginia, T. M., "Nueva protefna en extractos
de rs de THo", Annal of te, 1999, pp. 256-260.
Los Patricios, C. A., Las endorjinas y la vagancia, Medicina, 2000,
pp.236-1250.
Sosa, M.; Pastoritti, S. y Chalchalero, J. c., "El consumo de mate en
America Latina", Yerbal Journal, 120, 1997, pp. 1230-1245.
Taragiif, C. G.; La Tranquera, P. D. YCruz de Malta, D. M., "Com
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Yerbal Journal, 78, 1970, pp. 1605-1610.
Union, D. L.; Adelgamante, P. T. YCebece T. M., "La yerba y la iglesia
cat6lica", Journal of yerbal corporation, 16, 1998, pp. 585-590.
Inzombiavirus y otras yerbas:
la historia nunca antes contada
sobre la zombificaci6n
MELINA LAGUIA BECHER*
Laboratorio de Investigaciones Esotericas,
Departamento de Genetica Molecular
Resumen
La zombificaci6n es una de las practicas mas antiguas y enig
mati cas del culto vudii. Provoca en sus vfctimas un estado de de
mencia caracterizado por perdida de facultades cognitivas. He
mos logrado reproducir por primera vez esta patologfa en un
ambiente controlado, estableciendo las causas fisiol6gicas de sus
sfntomas, asf como el origen de la sustancia disparadora. Ademas,
descubrimos la correlaci6n de esta afecci6n con un virus nunca
antes descripto en la bibliograffa, inzombiavirus, IZV, y dos cla
ras caracteristicas en los animales predispuestos a la conversi6n,
su origen etnico y el insomnio.
PALABRAS CLAVE
inzombiavirus, IZV; zombificaci6n; polvo zombi.
Introducci6n
Desde hace cientos de afios el mito "zombi" ha aterrorizado
a los pueblos devotos de la religi6n vudu y desconcertado a la so
* Melina Lagufa Becher es licenciada en biotecnologia y realiza su doctora
do en ellaboratorio de Inmunologfa Molecular y Estruetural del Instituto Leloir,
estudiando las bases moleculares de la maduraci6n de afinidad de anticuerpos
antiprotefnas.
78 DEMOLIENOO PAPERS
DEMOLIENOO PAPERS 79
ciedad occidental, provocando la biisqueda de respuestas racio
nales que permitieran descubrir la verdad oculta tras los muertos
vivientes.
Cuenta la leyenda que los bokors (magos negros) utilizan sus
poderes para robar los dos espfritus que habitan el cuerpo huma
no, el Gro Bonani y el Ti Bonani, capturandolos en una botella
blanca y causando la muerte del individuo; entonces los brujos se
vuelven duefios del cuerpo ffsico, pudiendolo revivir para trans
formarlo en un zombi que sorneteran a su voluntad mientras no
consuma agua 0 alimentos salados, ya que la sal libera al zombi
de la maldici6n y Ie permite recuperar la cordura y regresar a su
tumba. Los fanaticos del vudu afirman que en el rito de zombifi
caci6n intervienen dos brebajes: el polvo zombi 0 poudre (sus
tractor del alma) y el pepino zombi. La primera de estas bebidas
provocarfa la muerte, mientras que la segunda permitirfa al bokor
despertar al zombi y convertirlo en su esclavo [1].
Hace tiempo que los ingredientes "magicos" de estas p6cimas
han sido develados [2]. El polvo zombi -cuyo aditivo mas lIama
tivo es la tetradoxina- es un compuesto elaborado a partir de dis
tintas sustancias de origen vegetal (tcha-tcha y pwa grande), ani
mal (sapos, reptiles, insectos y arafias) y humano, que, mezcladas
en su exacta proporci6n, producen el veneno mas fascinante de
la brujerfa afroamericana, capaz de confundir el diagn6stico de
los mas expertos forenses. El pepino zombi se prepara a partir de
la potente planta alucin6gena Datura extramonium.
La interpretaci6n cientffica actualmente aceptada sobre el
misterio de los zombis afirma que la tetradoxina puede atacar y
suspender en un estado de carencia lfrnite al sistema nervioso au
tonomo y al cerebro, hasta el punto de causar la total ausencia de
sefiales vitales. La Datura extramonium eliminarfa la tetradoxi
na provocando una reanimaci6n ffsica, ademas de una amnesia
permanente y un estado alucinatorio. Esto se suma al panico que
sufre la vfctima al ser enterrada viva, capaz de dafiar el cerebro
irreversiblemente, y a la posible anoxia 0 encefalopatfa Ietargica
hipertensiva debido a los efectos t6xicos de la tetradoxina, 10cual
explicarfa el patetico estado ffsico-psicol6gico de total abandono
y sometimiento en que se ve sumido el zombi. Sin embargo, to
dos los intentos por reconstruir la psicopatologfa en modelos ani
males han fracasado hasta el momento.
En territorio vudu ni la leyenda ni la explicaci6n cientffica pa
recen tener validez; la creencia sobre la zombificaci6n cuenta una
historia muy diferente: existirfan personas protegidas por los loas
(dioses) a quienes ningiin brujo podrfa sustraer el alma. Por otro
lado, los bokors reconocerfan a sus potenciales vfctimas entre
aquellos que vagan de noche, en particular los insomnes [3].
En 1993 un medico norteamericano public6 un artfculo en el
que relacionaba los brotes de sida en Haitf con el culto vudii [4].
Tras analizar los primeros focos de sida localizados en Haitf y
Africa Negra, lIeg6 a la conclusi6n de que el iinico punto en co
rmin era la religi6n vudii, y mas concretamente las practicas de
zombificaci6n:. Segiin esta audaz hip6tesis, el virus del HIV, que
se encontraba en estado latente, era estimulado de alguna forma
a traves de las p6cimas utilizadas por el bokor.
Por otra parte, estudios realizados en los iiltimos veinte afios
en clfnicas psiquiatricas de Haitf sugieren una causa viral para di
ferentes trastomos mentales [5, 6].
Si bien estas investigaciones nunca fueron tomadas en cuen
ta por la comunidad cientffica, creemos que tras elIas podrfa es
conderse la clave para desentrafiar finalmente el misterio: un po
tencial virus capaz de volver a un individuo refractario 0 proclive
de ser convertido en zombi.
Teniendo en cuenta estos hechos, nos propusimos reproducir
en ellaboratorio el proceso de zombificaci6n, tomando como ob
jeto de estudio el utilizado por los bokors, los insomnes, y anali
zar que los vuelve susceptibles y los diferencia del resto, restrin
giendo esta biisqueda a un virus.
81 80
DEMOLIENDO PAPERS
Materiales y metodos
ANIMALES. Un total de 115 humanos machos purgando cadena
perpetua en la Penitenciarfa Popular de Puerto Principe (PPPP) se
ofrecio voluntariamente a intervenir en nuestra investigacion a
cambio de una reduccion de las condenas. Los individuos fueron
sometidos a distintas pruebas biologicas, psicofisiologicas, subjeti
vas y cognitivas [7-11] con el fin de establecer quienes sufrfan de
insomnio. Solo 38 de los 115 postulantes alcanzaron un puntaje sa
tisfactorio; del resto seleccionamos 15 al azar para utilizarlos como
controles negativos regionales. Los otros 36 individuos utilizados
como controles fueron provistos por el gobiemo de Marruecos. El
promedio de edades de los 90 sujetos utilizados fue de 33,3 afios,
con el mfnimo en 16 y el maximo en 38.
Misteriosamente uno de los controles y tres de los insomnes
murieron en una excursion por el rfo Duvallier organizada por es
te equipo en caracter de recreacion. Los cadaveres fueron apro
vechados como material necrotico para inicroscopfa.
ZOMBIS. Cinco zombis de aproximadamente 30 afios fueron
recogidos por nuestro grupo de tres plantaciones de cafia situa
das en distintas locaciones de Haiti. Tras la extraccion de liquido
cefalorraqufdeo, LCR, fueron sacrificados para utilizarlos como
material de las necroscopfas.
POLVO ZOMBI - PEPINO ZOMBI. Ambas bebidas fueron amablemen
te cedidas por la Sociedad Secreta de Brujos Afroamericanos
(SoSBA) bajo amenaza de mutilacion si la naturaleza y propor
cion exacta de sus ingredientes eran publicadas en este trabajo.
MUESTRAS. Se extrajeron 5 ml de LCR por puncion lumbar. EI
material fue sometido a una ultracentrifugacion en gradiente de sa
carosa para recoleccion de la fraccion viral segiin el protocolo in
ternacional de extracciones y procesamiento de liquidos biologicos
[12] y las muestras fueron mantenidas a 4C hasta su utilizacion,
Los extractos cerebrales se prepararon por licuacion de ence
falos, incluido material oseo, a traves de un procesador electrico.
DEMOLIENOO PAPERS
Se utilize un microtome para realizar cortes de distintas partes
del encefalo de los cadaveres tras la fijacion, inclusion y tincion
estandar para microscopfa [13].
peR. Se utilizaron 3 ml de LCR para realizar una multiple nes
ted peR, mnPCR [14]. Se incluyo como control intemo de la reac
cion 10" copias de un plasmido conteniendo al virus dela rabia equi
na, ERV (provisto por ]eckyll et al., 2000). Tanto para la extraccion
del DNA como para la PCR se siguio el protocolo estandarizado del
Instituto de Biotecnologfa "Dr. Sabato" [15]. Se empleo el par de pri
mers universales dpv para la amplificacion de un fragmento de cual
quier DNA polimerasa viral. Como control negativo se utilize H
2
0 .
Solo se dieron como positivos aquellos casos que, al repetirse el en
sayo usando otra alfcuota de la muestra, resultaron positivos.
AISLAMIENTO VIRAL. Se agregaron 500 IJI de LCR positivo para IZV
a monocapas con 80% de confluencia de celulas nigromanticas (li
nea celular NG48 derivada de cerebro de infantes mozambiquenses,
repiques 66 a 99, suministrada por el Dr. Olie de la Universidad de
Zaire). Tras una hora de incubacion a temperatura ambiente se reti
ro la muestra y se afiadieron 2 ml de medio de cultivo. Las placas se
mantuvieron a 37C Yatmosfera de CO
2
al5% hasta visualizacion
de efecto citopatico. Se hicieron 3 pasajes previamente a la recolec
cion de partfculas vfricas por centrifugacion (700 g, 45').
ESTUDIOS IN VIVO. La infeccion con IZV de los controles se
realize por inyeccion intracraneal de 33 IJI del aislado viral.
ZOMBIFICACI6N. Los sujetos fueron mantenidos en aislamien
to durante siete dfas; tras la cuarentena se les suministro en una
dosis iinica (desayuno) la sustancia como prueba de provocar
zombiogenesis, excepto los sujetos sometidos a la zornbificacion
clasica, que recibieron el pepino zombi como cena, el resto ayu
no por 24 horas. En todos los casos fueron monitoreados du
rante las dos semanas subsiguientes para determinar la apari
cion de caracterfsticas zombis medidas de acuerdo con la escala
comparativa de Comportamiento y Manifestaciones Psicopatas
del Dr. Asimov [16].
82 83 DEMOLIENDD PAPERS
Resultados
DETECCI6N DE VIRUS POR peR. La mnPCR del LCR de insomnes,
controles y zombis penniti6 amplificar un total de 8 virus conoci
dos y un virus desconocido, al cual bautizamos como inzombiaui
rus, IZV, por haber sido hallado s6lo en las muestras de insomnes.
En conjunto los insomnes mostraron una mayor carga y tipo viral
que los controles; sin embargo, entre los controles fueron los hai
tianos los positivos para virus, mientras que los controles marro
qufes resultaron no encontrarse infectados. Estos resultados po
drfan deberse a las causas socioecon6micas en las que se encuentra
inmersa Haiti, las cuales favorecerfan la transmisi6n de enfermeda
des. Contrariamente a los resultados esperados para zombis, estes
mostraron no contener IZV en LCR, aunque la incidencia de in
fecci6n con los demas virus fue de un 100% (Tabla 1).
Tabla 1
Virus encontrados en LCR
Virus Insomne Control Zombi
IZV= Inzombiavirus
CMV= Ciclometalovirus
IZV
CMV
I
0,07
o
0,9
o
I
WZ= Virus vampiro zafo
VHH66= Virus de honor humano 66
EBV= Bobovirus
wz 0,7 0,77 I
VHS= Virus de la hiedra simple
HH66 0,69 0,14 I WHV= Virus humano lobo
EBV 0,13 0,02 I
GSHV= virus humano goodson
VHS 0,7 0,01 I
HIV= virus infecto humano
WHY 0,65 0,28 I
GSHV o 0,04 I
HIV 0,24 0,13 I
RESULTADOS DE LA peR
Los productos de PCR fueron observados en gel de agarosa al
4% tefiido con bromuro de etidio utilizando un patr6n de peso mo
lecular preparado con casos positivos para los diferentes virus neu-
DEMOLIENDD PAPERS
rotr6ficos conocidos, 10 que penniti6 detectar distintos tipos de virus
segun el tamaiio de banda: IZV 140 pb, VHS 120 pb, EBV 118 pb,
VVZ 98 pb, HIV 95 pb, CMV 78 pb, VHH66 66 pb y WHY 54 pb,
GSHV 49 pb. Parte superior: calles 1 y 6, patr6n de peso molecular;
calles 2-5, casos positivos IZV; calles 7 y 8, casos positivos VVZ; ca
lle 9, caso negativo. Parte inferior: calle 1, patr6n de peso molecular;
calles 2-4, casos positivos CMV; calle 5, caso positivo VHH66.
ZOMBIFICACI6N. La Tabla 2 resume los resultados obtenidos en los
experimentos de zombificaci6n utilizando distintos preparados. De
be aclararse que tanto los insomnes como los controles tratados iini
camente con polvo zombi murieron en un lapso de 8 a 13 horas, par
10 que el experimento no se repiti6 en los controles infectados con
IZV. Las autopsias de los 10 sujetos demostraron que las muertes se
produjeron por para cardiorrespiratorio causado por la intoxicaci6n
con tetradoxina. Tras la administraci6n de polvo zombi + pepino
zombi y extractos de cerebro zombi s6lo los insomnes fueron con
vertidos en su totalidad. Los 3 controles infectados que se volvieron
zombis pertenecfan al grupo de haitianos y fueron los unicos en los
que se evidenci6 un marcado cambio de caracter tras la infecci6n
con IZV. En todos los casos los controles infectados no mostraron
problemas de insomnio en el momento de los experimentos, que se
realizaron un mes despues de la inoculaci6n con el virus. La infec
ci6n se corrobar6 por mnPCR.
Tabla 2
Zombificaciones
Insomne Control Control infectado
Polvo zombi + pepino zombi 717* 0/3 2110
Polvo zombi 0/7 0/3
Pepino zombi 0/7 0/9 0/3
Cerebro zombi triturado 717* 0/3 1/10
Cerebro humane triturado 0/7 0/3 0/3
* p<O,OOl iguales entre sf pero significativamente diferentes al resto (AOV test).
85
84 DEMOLIENOO PAPERS
Los sujetos zombificados comenzaron a mostrar rasgos dis
tintivos al resto a partir del tercer dfa de ingesta de los prepara
dos. El primer cambio observado fue de caracter fisiol6gico (dis
minuci6n cardfaca) y 10atribuimos al excesivo estado de reposo
en el que se sumieron estos animales. Las paralisis musculares se
presentaron como episodios de no mas de 30 minutos de dura
ci6n y se volvieron mas marcadas a partir del noveno dfa (estos
ataques desaparecieron en todos los casos al dfa 23). Aunque las
facultades mentales fueron declinando progresivamente, el res
to de las caracterfsticas psicopatol6gicas medidas fueron desa
pareciendo hasta un plateau a partir del mes, siendo las prime
ras las iinicas que no se recuperaron. El promedio diario de
horas de suefio de los zombis fue de tres, sin embargo, no esta
mos en condiciones de distinguir si esta caracterfstica es resabio
de viejas costumbres 0 efecto de nuevos problemas.
MICROSCOPIA. Los cerebros de zombis observados por micros
copfa 6ptica mostraron distinto grado de neurodegeneraci6n en
el sistema reticular activador, SRA. Consideramos que estos re
sultados pueden relacionarse con la cantidad de tiempo transcu
rrido desde su conversi6n, la cual desconocemos. Los insomnes,
como el control estudiado, mostraron el aspecto esperado de un
cerebro normal (datos no mostrados).
Discusi6n
Los experimentos realizados en este trabajo nos permitieron
separar a los individuos del estudio en dos poblaciones bien dife
renciadas, acorde con su capacidad de ser zombificados, demos
trando de esta forma que no todos los seres humanos pueden ser
convertidos en zombis. El grupo refractario estuvo constituido por
hombres tanto de origen marroquf como haitiano, rnientras que
aquellos que se volvieron zombis compartfan tres caracterfsticas
DEMOLIENOO PAPERS
por demas destacables: eran oriundos de Haiti, sufrfan de insom
nio y se encontraban infectados por un virus desconocido en el
momenta de realizada esta investigaci6n. Si bien resulta esencial
la correcta caracterizaci6n de este virus antes de aventurarse al
postulado de hip6tesis que den cuenta de su relaci6n con el in
somnio y la zombificaci6n, pensamos que, por no haber sido des
cubierto previamente, es probable que afecte a un rnimero redu
cido de personas y que sus efectos pasen inadvertidos 0 no sean
los esperados para un agente pat6geno viral. Podemos afirmar sin
equivocarnos que los trastornos del suefio han sido suficientemen
te investigados como para descartar la eventual participaci6n de
un virus en ellos. Por otra parte, los resultados son claros al mos
trar que la infecci6n por IZV, aunque siempre presente, no es su
ficiente para la zombificaci6n. Esto nos lIeva a plantear la posibi
lidad de que IZV no sea la causa del insomnio en estos individuos,
como 10prueban los controles infectados, sino que este grupo par
ticular de insomnes sean los receptores naturales de IZV y que
ambas caracterfsticas se encuentren ligadas 0 influenciando a la
que los vuelve susceptibles de convertirse en zombis 0 que sean
en conjunto la causa de esta. El particular resultado obtenido en
los tres casos de controles haitianos infectados que se volvieron
zombis no contradice las ideas recien formuladas, ya que desco
nocemos la via de transmisi6n de IZV: asf, al inocularlo en LCR
bien pudimos franquear el acceso natural alcanzando infecciones
exitosas en todos los casos. Creemos que estas tres personas no
eran inmunes al IZV: si no se encontraban infectadas es simple
mente porque no estuvieron en contacto con el virus, y el hecho
de que no tuvieran insomnio se debe al corto perfodo transcurri
do desde la infecci6n. Si bien esta no es mas que una posible in
terpretaci6n, pensamos que serfa un error desestimar la impor
tancia del virus y del insomnio en esta patologfa. Queda por
responder por que los insomnes, que eran IZV (+', se negativiza
ron al convertirse; deberemos comprobar que el virus realmente
se encuentra ausente en zombis, ya que s61010buscamos en LCR,
DEMOLIENDO PAPERS 87
86 DEMOLIENOO PAPERS
y analizar c6mo los cambios producidos en el organismo 10afec
tan. Aunque con nuestro trabajo logramos refutar la hip6tesis que
sefialaba a la tetradoxina y la Datura extramonium como dispa
radores de la transformacion zombi y demostramos que 10 que sea
que la provoque se encuentra en el cerebro de los afectados, aiin
debemos descifrar la naturaleza de este componente. Los interro
gantes sobre la zombificaci6n se han multiplicado a partir de
nuestra investigaci6n; sin embargo, consideramos haber avanza
do como nunca antes en este misterio, probando de forma feha
ciente la predisposici6n en un grupo caracterfstico de personas a
ser convertidos en zombis, proceso que nada tiene que ver con la
magia 0 la brujerfa.
Agradecimientos
Este trabajo fue financiado con donaciones de la Liga Inter
continental de exfetiches en rehabilitaci6n y de la Asociaci6n de
Insomnes Republicanos Abatidos (IRA).
Agradecemos sinceramente la colaboraci6n brindada por los
gobiemos de Haiti y Marruecos y las autoridades de la PPPP.
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10. Coursey, W. et al., "Schlafloser Einflufs", Cronotest, 9, 1975,
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11. Zuckerman, K.; Bixler, B. y Baxin, Y., "Prove with evoked au
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16. Asimov et al., "Manifestaciones psicopatas y medios de comu
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Estudio comparativo de las
variaciones de rendimiento
en biorr:-asa S. cerevisiae y E. coli
con distintos tipos de nutrientes y
en diferentes condiciones de humor
MATIAS NOBILE*
Area Bioprocesos, Departamento de Ciencia y Tecnologfa,
Universidad Nacional de Quilmes,
y Centro de Investigaci6n y Rehabilitaci6n,
Universidad de Maradonia
Resumen
Existen amplios conocimientos acerca de c6mo varian los resul
tados al cultivar S. cerevisiae y E. coli utilizando medios de cultivo
tanto simples y definidos, como complejos e indefinidos. Se formu
laron tres medios de cultivo complejos que difieren en un solo com
ponente entre sf. AI mismo tiempo, se proporcionan dos condicio
nes de estres: una condici6n blanco y otra de chistes a repetici6n.
Los resultados buscados incluyen un aumento en la producci6n de
biomasa, dependiente tanto de los nutrientes empleados, como el
desenfado con que crecen los microorganismos empleados, ademas
de la combinaci6n de ambos factores. Se utilizan para este estudio
un modelo procari6tico y uno eucari6tico en cultivo "Batch".
Introducci6n
Se conocen desde hace muchos afios diversos factores que in
fluyen sobre el crecimiento de los microorganismos cuando son cul
tivados en ellaboratorio, tales como la fuente de carbona y ener
* Matias Nobile es Iicenciado en biotecnologfa y trabaja en quimica de oll
qonucleotidos.
90
91
DEMOLIENOO PAPERS
gfa, la fuente de nitr6geno, diversos aminoacidos, vitaminas y sales
inorganicas, A su vez, se sabe que la temperatura del cultivo es un
elemento que puede ser crucial a la hora de favorecer la produe
ci6n de metabolitos secundarios. Ademas se sabe que diversas con
diciones de estres pueden conducir a las mas variadas fluctuacio
nes en los parametres especfficos de crecimiento y de formaci6n de
biomasa. En este sentido intentamos percibir variaciones de rendi
miento de masa microbiana en los cultivos, al utilizar alternativa
mente los tres medios de cultivo nutritivos diferentes. Es conocido
tambien el dogma de que "todo resulta mejor con buen humor".
Orientando nuestros esfuerzos a ello, intentaremos que una segui
dilla interminable de chistes de los temas mas variados mantenga
con animos renovados a los microorganismos empleados en este
estudio, empleando como control negativo un cultivo similar en
una habitaci6n vacfa en la que las expectativas de crecimiento son
las normales, halladas en la literatura que abarca el tema.
Materiales y metodos
Medios de cultivo: Se emplearon tres medios de cultivo, for
mulados con 50 gil de glucosa, 5 gil de sulfato de amonio, 15 gil
de peptona de carne y 2 gil de lisado de levaduras. A los caldos
n 2 y n 3 se les adiciona vino (Talacasto, TetraPack) en una con
centraci6n final de IX y 5X, respectivamente.
Fermentador: para todos los ensayos se utilizaron dos biorreac
tores similares (LabSystem SK 29-9b de 1,71 de capacidad, rodete
tipo Rushton de palas planas, K1a= 960), situados en habitaciones
adyacentes, completamente aisladas aciisticamente, mediante una
alternancia de paneles de cart6n prensado, lana de vidrio y telgopor.
Cepas empleadas: Para los ensayos con modelo procari6tico,
se emple6 una cepa de Escherichia coli (pbR 322). Para los ensa
yos con modelo eucari6tico se emple6 una cepa de Saccharomy
ces cerevisiae wt (Pbf 1).
DEMOLIENOO PAPERS
Vfveres para contadores de chistes: conociendo la dificultad
que representa contar chistes durante 6 a 10 horas (que es 10que
dura una fermentaci6n de este tipo) se provey6 de alimentos a los
contadores de chistes: salamin picado grueso (214 S.R.L.), quesi
110 de campo (ruta Nac. n 2, KM 98,800 preguntar por lito), Chi
zitos (200 g, Kellog's), Cream n' Onion Potato Crisps (Pringles),
aceitunas en salmuera (Nucete, peso seco escurrido 475 g), vino
tinto (L6pez, Burdeos Saenz, Uvita y Bordolino, en ese orden).
Procedimiento de cultivo: se inocularon en sincronfa 0,50 gil de
microorganismos en cada biorreactor (para ambas condiciones de
estres), se activ61a aireaci6n y se comenz6 con la agitaci6n, repitien
do este procedimiento para cada caldo y para cada microorganismo.
Toma de muestras: se tomaron muestras del cultivo al mo
mento de la inoculaci6n (to)' cada dos horas subsiguientes (t
11
a
t
3
) y otra al momento de que la fuente de Carbono y Energfa al
canz6 la concentraci6n de 0 gil (t
4
) .
Medida de peso seco: se estim6 la cantidad de biomasa forma
da llevando a peso seco una alfcuota del caldo de fermentaci6n.
Resultados
RESULTADOS OBTENIDOS PARA EL
MODELO PROCARIOTICO E. COLI
MI CI MI C2 M2CI M2C2 M3 CI M3 C2
to
0,50 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50
t
l
2,04 1,95 1,98 2,11 2,01 2,06
1:2
9,16 8,65 8,91 9,07 8,93 8,96
t
3
26,65 25,76 26,03 25,64 25,70 26,01
t
4
59,74 57,92 60,22 58,50 59,24 60,75
M indica medio de cultivo (1: sin vino, 2: con vino IX, 3: con vi
no 5X); C indica condici6n de estres (1: sin chascarrillos, 2: con chas
93 92
DEMOLIENOO PAPERS DEMOLIENOO PAPERS
carrillos). Los resultados se expresan en gramos de biomasa formada Figura 2
por litro de cu1tivo y se pueden apreciar graficamente en la Figura 1.
Figura 1
70 " --------------------------
rol ~
,.,
.
~ so I
:;
v
_ -40
~
E ]0
o
:.0
t>O 20
10
2 4 6 8
Tiempo (hs)
RESULTADOS OBTENIDOS PARA
EL MODELO EUCARIOTICO S. CEREVISIAE
+ -.,,_...--""'-----------
I "
I A?
I
80
70
o 60
. ~
~ 50
v
_ " 40
-
l:l 30
..
E 20
-tt-M1 C2
I
I
:.0 10
--+-HIOl
t>O
........ H2C1
0
. ~ -
o I
--tC_ H2 C2
--&-MI CI
~ M I C 2
--fs- M2 CI
-*" M2C2
-I- M3 CI
-+- M3 C2
_ ..... _ H3 CI o 2 4 6 10
_.o-.H3C2
Tiempo (hs)
Discusi6n
En el presente estudio hemos introducido un nuevo concep
to en materia de Bioprocesos en el cual no se ha reparado nunca,
que engloba el concepto de c6mo cambiar la predisponibilidad al
crecimiento con chistes y vino. Como puede observarse para el
modelo eucari6tico, el rendimiento en biomasa aumenta con al
MI CI MI C2 M2CI M2C2 M3 CI M3C2
tas concentraciones de vino y chistes a repetici6n. Esto esta de
acuerdo con los estudios previos similares realizados en modelos
0,50 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50
to
t
l
1,26 1,22 1,35 2,16 1,31 2,98
de eucariotas superiores (tal como el hombre) en los cuales suce
8,70 8,45 8,06 10,52 7,72 16,50 de que acrecienta la tasa reproductiva al consumir vino asidua
S
t
3
24,10 25,98 25,29 30,79 24,26 42,22 mente, mezclandolo con altas dosis de humor berreta. Esto pue
t
4
56,05 55,81 58,50 66,17 58,81 74,27
de comprobarse al ver los subclones formados en las colonias de
los suburbios de los cultivos de humanos de la zona.
M indica medio de cultivo (1: sin vino, 2: con vino IX, 3: con En contrapartida, al modelo procari6tico no parece concernir
vino 5X); C indica condici6n de estres (1: sin chascarrillos, 2: con Ieni la condici6n de estres propuesta, ni el agregado del reactivo "vi
chascarrillos). Los resultados se expresan en gramos de biomasa no" al medio de cultivo. Esto podrfa deberse a diversas causas que
formada por litro de cultivo. La representacion grafica de estos van mas alla de las pretensiones de este estudio. Quedaran para pos
resultados puede apreciarse en la Figura 2. teriores investigaciones cuestiones tales como: lE. coliposee un gen
94
DEMOLIENDO PAPERS
de resistencia al vino? lLos procariotas no entienden nada? lEs el
humor una facultad eucari6tica?
Agradecimientos
El mas profundo agradecimiento es para la empresa que nos
acept6 Bonos de Cancelaci6n de Deuda (PATACON) para pagarle
los fermentadores, a Tito por los reactivos prestados (Quesillo de
campo), a la Universidad de Maradonia por ceder el espacio vital
ffsico donde se realizaron los ensayos, a M.M.C.R. por sus inteli
gentes, mordaces y sagaces crfticas a este y otros trabajos.
Bibliografia
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Vinardo Receptor and the Transmembrane Protein-tyrosine
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White, M. F. YKahn, C. R, How the humour changes all, 269, 1994,
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Zhou, G.; Cummings, R; u, Y.; Mitra, S.; Wilkinson, H. A; Elbrecht,
A; Hermes, J. D.; Schaeffer, J. M.; Smith, R G. y Moller, D. E.,
Mol. Endocrinology of winning wine, 12, 1998, pp. 1594-1604.
EI ADN se autorreplica, gracias aDios
PABLO PELLEGRINI*
Instituto de Patagenetica, Paris, Francia;
Laboratorio de Teologfa Crocante,
Universidad Nacional de Quilmes, Argentina
Resumen
Hemos investigado las insondables profundidades del ADN,
y nos hemos encontrado con Dios. Sometiendo fragmentos de
ADN a numerosos ensayos de replicaci6n, en medios donde no
habfa ningiin factor conocido que permitiera este proceso, com
probamos que el ADN mantiene su capacidad autorreplicativa,
siempre y cuando Dios 10 faculte para la narcisista (y onanista)
tarea de autorreplicarse. Ponemos fin asf al pemicioso canto de
los agitadores que pregonan la ausencia e inutilidad de Dios y en
cuentran por doquier reproducciones de una supuesta ideologfa
dominante, incluso en la ciencia. Estos resultados demuestran que
el ADN tiene la capacidad de autorreplicarse, capacidad que es
adquirida cuando Dios se hace presente.
Introducci6n
Las tecnicas de manipulaci6n del ADN (digesti6n, inserci6n de
fragrnentos, replicaci6n, amplificaci6n) involucran ademas del aci
do nucleico a diversas enzimas, soluciones, mon6meros, tempera
turas, cofactores y otros elementos que buscan proporcionar un en
* Pablo Pellegrini es licenciado en biotecnologia y trabaja en analisis de aci
do Iinoleico conjugado. Tarnbien se dessmpena como c6mplice de la Editorial
Argonauta.
96
97
DEMOLIENOO PAPERS
torno adecuado para el proceso. Pero al mismo tiempo se identifi
ca al ADN como la molecula rectora de todos los fen6menos bio
16gicos, independizandola del organismo y hasta adjudicandole ser
el germen que contiene al organismo. Esto quiere decir que hay una
metodologfa que indica c6mo tratar al ADN, al mismo tiempo que
hay una concepci6n predominante sobre el papel del ADN, y la me
todologfa y la concepci6n marchan en direcciones distintas.
En la interpretaci6n del ADN como molecula principal de los
procesos biol6gicos, su omnipotencia e independencia del entor
no puede explicarse por el estrecho vfnculo existente entre el
ADN y Dios. Pero ha habido varias voces que se alzaron no s610
para rechazar la existencia de Dios, sino que no contentos con
eso intentan explicar el origen de la creencia en 1 (Lafargue,
1945; Feuerbach, 1948). Esa tendencia se continua hasta nues
tros dfas, en que prestigiosos biologos han cafdo bajo la peligro
sa idea de considerar que incluso los postulados cientfficos esta
dan influidos por la estructura de la sociedad (Bernal, 1979;
Gould, 2001), y aun mas, llegan a considerar el determinismo bio
16gico que proviene de la primacfa del ADN como parte de la
ideologfa dominante (Lewontin, 1992; 2001; 2003).
En cambio, hay mentes brillantes del mundo cientffico que
han manifestado su acuerdo con la superioridad del ADN y con
el determinismo biol6gico que de ella se deriva (Fukuyama, 1994;
2002a; 2002b).
Si bien a su vez hay quienes cuestionan la rigidez de la noci6n
del determinismo y las habilidades innatas, proponiendo en cam
bio la existencia de posiciones mas dinamicas (De Niro, 1998),
toda esta serie de controversias se deben a la falta de claridad con
que han sido demostradas hasta hoy las propiedades del ADN.
El objetivo de este trabajo es demostrar empfricamente la ca
pacidad autorreplicativa del ADN, buscando poner fm asf a tan
perniciosas diatribas ateas que dafian la moral y las buenas cos
tumbres de nuestros nifios.
DEMOLIENOO PAPERS
Materiales y merodoa
PREPARACION DE MUESTRAS
El plasmido pZERO fue digerido con EcoRI. Los fragmentos
se separaron por tamafio en un gel de agarosa, y se les afiadi6 un
extremo conteniendo la secuencia de reconocimiento de la DNA
polimerasa.
REPLICACION DEL ADN
Los fragmentos de ADN fueron colocados en tubos distintos.
A un grupo de tubos se Ie agreg6 DNApolimerasa, nucle6tidos,
buffer, Mg2+ y primers, a modo de control positivo. A otro grupo
identico no se Ie agreg6 nada, conservando cada tuba el ADN pu
roo A un tercer grupo de muestras se Ie agreg6 Foscarnet, un in
hibidor de la DNApolimerasa.
CLONADO DE Dios
Se aisl6 y elon6 aDios segiin tecnicas previamente descriptas
(Iesucristo & Espiritu-Santo, 1455). Estos procedimientos se lle
varon adelante respetando las normas para uso en laboratorio de
hamsters, ratones, ballenas y criaturas celestiales: Dios no fue mal
tratado innecesariamente.
ENSAYO DE AUTORREPLICACION
Se prepar6 un grupo de tubos eppendorf con fragmentos de
ADN del plasmido pZERO puro. A otro grupo conteniendo tam
bien fragmentos de ADN, se Ie afiadieron las enzimas SadE y
MarX, utilizadas para digerir aDios. Se emple6 otro grupo de tu
bos conteniendo ADN, DNApolimerasa, nucle6tidos, buffer, Mg2+
y primers, y se Ie agreg6 tambien las enzimas digestivas. Se utili
z6 un tuba con agua como control negativo.
En todos los casos se verific6 la replicaci6n por medio de
Southern Blot, peR cuantitativa y secuenciando los fragmentos
obtenidos.
99
98 DEM OllENDO PA PERS
Resultados
EI ADN tiene la capacidad de replicarse a sf mismo , segun los
resultados obtenidos. En la Figura 1 puede apreci arse que el ADN
se replica sin necesidad de la presencia de factores tales como la
DNApolimerasa y nucle6tidos.
Junto a estos resultados se observ6 la presencia de una lIama
tiva banda, que pudo localizarse en todas las muestras donde ha
bfa fragmentos de ADN. Este elemento, potencial agente causan
te de la replicaci6n del ADN, no serfa otro que Dios .
I 'I ll '.
Figura 1
Sout hern Blot de fragment os de ADN.
La banda A corresponde al fragmento de
menor peso molecular de pZERO digerido,
en tant o que ta banda B correspond e al
fragment o mayor. Los tubos 1 y 2 trenen,
adernas de los fragmentos de pZERO,
DNApolimera sa, dNTPs, buffer, Mg " y pri
mer s.
Los tubas 3 y 4 s610 tienen fragmentos de
pZERO Los tubas 5 y 6 nenen fragmentos
de pZERO y Foscarnet .
EI tuba 7 s610 tiene Fosearnet. EI tuba 8 ne
l\
,
ne Hp La banda de alto peso molecular.
cornun a los tubas 1 a 6. seria Dios.
Con el objetivo de comprobar que la presencia de este agen
te Ie otorga al ADN su capacidad autorreplicativa, se procedi6 a
clonar a Dios con el fin de garantizar su presencia en los ensayos
posteriores (Motorhead, 1991; Twain, 1997) . La pres encia 0 au
sencia de estos clones se utiliz6 para testear la autorr eplicaci6n
del ADN. Se emple6 asimismo una mezcla con iguales proporcio
nes de las enzimas digestivas SadE y MarX, dada la eficaci a de es
ta mezcla para degradar a Dios (Tabla 1).
DEMOllENDO PAP ER S
Enzima ut ilizada Actividad de Modi ficaci6n del Modificaci 6n del tamario de
----
D ios
- -
tarnario de Di os
-
de
600 NO NO
SadE 32 si NO
MarX 19 si NO
- - - -
SadE + MarX 0,07 si NO
Tabla 1
Efeeto de las enzrrnas que digieren a Dios La aetividad de Dios se midi6 en nurnero de
replieaeiones de fragmentos de pZERO por rrunuto. En todos los casos se emp learon
fragmentos de pZERO digeridos eon EeoRI. a los euales se les anadio SadE. MarX, una
mezela en igual proporeiones de ambas, 0 ninguna.
Donde Dios fue digerido (Figura 2, Tabla 1), el ADN no se re
plic6. Por el contrario, si Dios se encuentra intacto, la replicaci6n
del ADN se lIeva a cabo, haya 0 no otros factores de replicaci6n .
Luego de haber facultado al ADN para que se replique a sf mismo,
Dios se maquill 6 con un color magenta intenso y record6, no sin
cierto dejo de satisfacci6n : "i]a! iNietzsche ha muerto!", palabras tras
las cuales hizo tronar una formidable flatulencia para escarmiento
de los incredulos -que nunca faltan- y luego de tan magnanima la
bor se retir6 a repos ar merecidamente en los turgentes senos de una
monja que por allf pasaba, y que para algo habfan de servir (data not
sho wn) . Esto implica que Dios es el agente necesario para que el
ADN adquiera su capacidad autorreplicativa, sin que tomen ningun
rol en este proceso elementos del entomo celular, tales como pro
tefnas, cofactores, nucle6tidos 0 pH.
11 10.\
Figura 2
Southern Blot de fragme ntos de ADN.
Los tubos 1 a 6 eont ienen los fragmentos
de pZERO dl geridos con EeoRI y a Dios
Los tubo s 3 y 4 tienen tarnbien a las enzi
mas SadE y MarX. Los tubos 5 y 6 tienen
SadE y MarX y tarnbien DNApolimerasa.
dNTPs. Mg " y primers. EI tubo 7 conuene
Hp .
l\
.\
101 DEMOLIENDO PAPERS
100 DEMOLIENDO PAPERS
Discusi6n
El hecho de que en los tubos eppendorf se encontrara de Dios
solo su ADN, podrfa deberse a que el Susodicho al pasar por el
tuba y hacer las replicaciones, dejara fragmentos de Sf, quiza de
bido a un desprendimiento de tipo mucoso 0 porque Dios sufrie
ra de lepra. Lo cierto es que 10iinico que se encontro de El fue
ron moleculas de ADN, y si 10anterior hubiera ocurrido deberfan
haberse encontrado celulas 0 fragmentos celulares divinos. Esta
ausencia de fragmentos celulares, sumado al hecho de que al clo
narse las moleculas de ADN de Dios y utilizarse en los posterio
res ensayos permitieron una perfecta autorreplicacion del ADN
empleado, prueba que en realidad Dios es ADN.
La sola presencia de Dios proveerfa a las moleculas de ADN
de su capacidad para autorreplicarse. A su vez, esta facultad que
demostramos posee el ADN prueba el error en el que incurrieron
quienes sosteniendo una perspectiva materialista insistfan en que
"nada surge de la nada" (Lavoisier, 1789; Faure, 1999).
Estos resultados sugieren que el milagro de la Inmaculada
Concepcion habrfa sido perfectamente posible, al autorreplicarse
Dios dentro del utero de la Virgen Marfa. Esto fortalece y da sus
tento cientffico al bellfsimo mito que se ha convertido en uno de
los pilares de la civilizacion occidental: el mito de la Sagrada Fa
milia; vale decir, la idea de una virgen fecundada por un violador
anonirno y fugitivo que es, ademas, su propio hijo.
Pero fundamentalmente debe hacerse hincapie en ellugar que
ocupa el ADN a partir de este estudio. En efecto, la propiedad que
tiene el ADN de replicarse a sf mismo 10independiza de las ne
cesidades y particularidades del entomo, propiedad que por en
de hace sobresalir a esta molecula sobre el resto del organismo en
importancia. Dicha independencia del entomo faculta al ADN
para concentrar en sf mismo todas las peculiaridades del organis
mo, el que debe entenderse como un simple producto de la infor
macion genetica.
Si bien la importancia del ADN, su independencia del entor
no y su capacidad para determinar al organismo, eran principios
ampliamente diseminados y aceptados, la falta de una contunden
te confirmacion empfrica de estas propiedades las dejaba a mer
ced de ser consideradas tan solo el reflejo de una vision que tien
de a adjudicar a factores ajenos al control del organismo el rol
decisivo en su propia determinacion; una vision que insiste en
considerar 10molecular -como la conciencia individual- el ele
mento precursor del ser social; una vision que construye teorfas
y principios para impregnar el imaginario colectivo con nociones
que legitimen las diferencias establecidas. Una vision que ahora
deberfa ser tomada como una realidad palpable.
Finalmente, estos resultados contribuyen a demostrar que la
ciencia es inmune a todo tipo de penetracion ideologica, siendo que
est! dotada, en cambio, de una gran pureza intelectual, Posteriores
experimentos deberfan realizarse con el fin de comprobar que el
ADN tambien crea moleculas de ARN y protJfnas. Dada la impor
tancia que estos resultados tendrfan para el conjunto de los proce
sos biologicos, este flujo de informacion que va desde el ADN repli
candose a sf mismo hasta la creacion de protefnas, deberfa ser
considerado, a todos los efectos, el dogma central de la biologia.
Agradecimientos
A Dios, a la Patria y al Rey, pero sobre todo quisierarnos agra
decer al cristianismo y a los apostoles del capitalismo, ya que, co
mo dijera Hebbel, "10 mejor que tienen las religiones es que pro
vocan herejes".
Bibliograffa
Bernal, J. D., La ciencia en la historia, Nueva Imagen, 1979.
De Niro, R., Se es parte del problema, parte de la solucion 0 parte del
paisaje, Ronin, 1998.
102
DEMDLlENDD PAPERS
Faure, S., Doce pruebas que demuestran la no existencia de Dios,
Oceano Grupo Editorial, 1999.
Feuerbach, L. A, Esencia de La religion, Rosario, 1948.
Fukuyama, E, El fin de la historia y el ultimo hombre, Planeta, 1994.
Fukuyama, E, El fin del hombre, Ediciones B, 2002.
Fukuyama, E, "Desconfiemos de la biotecnologfa", Clarfn, 29/07,
2002.
Gould, S. ]., "La postura hizo al hombre", Raz6n y Revoluci6n, 2,
2001.
Jesucristo & Espfritu-Santo, Tecnicas para el clonado de Dios (con y
sin el uso de la Virgen Marfa), Biblia, 1455.
Lafargue, P., Por que cree en Dios La burguesfa, Leviatan, 1985.
Lavoisier, A, Traite Elementaire de Chimie, 1789.
Lewontin, R. C., Biology as Ideology, Harper Perennial, 1992.
Lewontin, R. C., The triple helix, Harvard University Press, 2001.
Lewontin, R. c., "The DNA Era': GeneWatch, 4, 2003.
Motorhead, L., "No voices in the sky': Journal of Bad Religion, 1916.
Twain, M., Rejlexiones sobre la religion, Muchnik, 1997.
Nuevos tratamientos
para reducir el estres celular
NATALIA PERIOLO*
Laboratorio de Cuidado Celular
Resumen
Todo organismo vivo se compone de celulas y lleva a cabo mi
Hones de reacciones metab6licas como tambien responde ante si
tuaciones de estres de diversas maneras.
Si el estres se produce por el hombre y este se construye a par
tir de celulas, lpor que no reducir esta causa tan frecuente que
nos perjudica en nuestros estudios experimentales de cultivos que
llevamos a-cabo en nuestro laboratorio?
Estudiamos el comportamiento celular in vitro cuando a las
celulas X28, que se caracterizan por ser celulas neoplasicas de
un linfoma de linfocitos T, se las expone a los tratamientos fre
cuentes de laboratorio. Hemos demostrado que con los trata
mientos que pusimos a punto, como un microambiente de mu
sicoterapia, la utilizaci6n de distintos productos humectantes
para las membranas celulares (cremas, aceites y jaleas) 0 los dis
tintos nutrientes utilizados han contribuido a disminuir el estres.
Los resultados obtenidos en comparaci6n a los tratamientos ha
bituales son altamente favorables.
* Natalia Periolo es licenciada en biotecnologfa y actualmente trabaja en el
Servicio de lnrnunoqenetica del Hospital de Clinicas en la fdentificaci6n de mar
cadores moleculares que puedan contribuir al pronostico, diagn6stico y trata
miento de la enfermedad celiaca.
105
104 DEMOllENOO PAPERS
Introducci6n
Se sabe que todas las manipulaciones que se les realizan a los
cultivos celulares para efectuar los distintos experimentos, que re
quieren tratamientos como descongelamiento, centrifugaci6n, agi
taciones, resuspensiones, congelamientos, tripsinizaciones, etc.,
pueden alterar sus ciclos vitales destruyendo sus membranas 0 sus
uniones y adhesiones intra e inter celulares. Debido a ella tienen
que entregar mucha energfa para remediar esos efectos y, por en
de, no tendran un alto rendimiento, dato que se demuestra en los
resultados experimentales.
Muchos otros factores son alterados, incluyendo su micro am
biente, 10 que produce severos perfodos de adaptaci6n que las
puede perjudicar. Las centrifugaciones y agitaciones perturban de
gran manera el comportamiento celular, aumentando considera
blemente el estres, 10 que se demuestra por el aumento en la en
zima 2-3-4-5-oxi-dol-fosfi-estresasa.
En este trabajo demostramos c6mo todos estos factores se re
ducen con la utilizaci6n de nuevas tecnicas antiestres.
Materiales y metodos
liNEA CELULAR
X24, un linfoma de celulas T murino fue usado como mode
10 para nuestro estudio.
AMBIENTACICN CELULAR
Se utilizaron las siguientes rnelodfas:
Tchaikovsky: "El Vals de las Celulas", utilizada los fmes de se
mana cuando permanecfan en la estufa.
Vivaldi: "Las cuatro estaciones" (lunes-miercoles-viernes)
acorde con la estaci6n del afio.
Mozart: Concierto para tuba n 2 (martes-jueves).
DEMOllENOO PAPERS
Miisica Heavy-Metal: Pantera.
Luminosidad: A media luz.
MEDIO DE CULTIVO
Se utiliz6 el medio RPMI con 10% de suero, al que se agreg6
antibi6ticos (Ampicilina y Estreptomicina), ajustando el pH con
NaHC0 en estufa gaseada. AI medio se le suministr6 antioxidan
3
tes (1 pastilla cada dos dfas disuelta en PBS,S mg/ml) y un com
plejo vitamfnico (disuelto 0,79 mg/ml en PBS).
BELLEZA CELULAR
Se utilizaron 3 veces por semana cremas revitalizadoras para
membranas celulares, colocadas en el medio de cultivo (10 ul de
una concentraci6n 5 mg/ml, con agitaci6n suave realizada ma
nualmente). Las cremas utilizadas fueron Lancomlfpidos (Lanco
me), Mosaico Fluido (Nivealip) y Dermafosfolfpidos (Dermag16s).
EOUIPAMIENTOS PARA LAS CELULAS .
Se utilizaron tubos de centrffuga recubiertos de silicona para
evitar rupturas violent as en las membranas celulares, asf como pla
cas y frascos de cultivo provistos de aceites energizantes (CeltOil
Johnson).
ENSAYO DE PROLIFERACICN CELULAR
Se descongel6 una suspensi6n celular y se cultivaron en pla
cas de 24 y 6 wells conteniendo 50.000 celulas, 5 ul del comple
jo vitamfnico y una pastilla de antioxidante en un volumen final
de 200 ul completado con medio.
ENSAYO DE PROLIFERACICN ACORDE
CON EL MICROAMBIENTE
Se cultivaron las celulas por 24 a 48 horas en estufa gaseada
a 37C. Esto se hizo acompafiado de las melodfas descriptas de
acuerdo con los dfas que correspondan.
106 DEMOLIEUDD PAPER S
EFECTO DE LAS MEMBRANAS EXPUESTAS A CENTRiFUGA
Para precipitar las celulas por centrifugacion se utilizaron los
tubos de centrffuga que vienen provistos de siliconas para proteger
las celulas y no producirles dafios que podrfan ser irreparables.
ENSAYO DE FLUIDEZ DE LAS MEMBRANAS PLASMATICAS
Se introdujeran dentro de los frascos de cultivo distintas ere
mas revitalizadoras, aplicadas en diferentes horarios del dfa. Por
la man ana, luego de ser repicadas, se les proporciono Lancome y
Dermafosfolfpidos. Por la noche se les suministro la crema Mo
saico Fluido, dejandola toda la noche hasta el proximo repique.
AISLAMIENTO DE PROTEINAS CELULARES
Se realize un extracto proteico, ensayo realizado previarnen
te (Periolo et al., 1995).
DETERMINACI6N DE LA FLUIDEZ
DE LA M EM BRA NA PLASMATI CA
Se determine la fluidez y porosidad de la membrana a traves
de un aparato que mide el diarnetro de los poras, como tarnbien
da idea de la movilidad que posee.
Resultados
Para deterrninar el grado de estres celular, las celulas fueron
cultivadas en paralelo utilizando los procedimientos estandar y
los nuestros, que se describieron en Materiales y metodos.
Se observe que las celulas estaban mas relajadas cuando se
cultivaban bajo nuestras condiciones, ya que la enzima no se ex
pres o 2-3-4-5 -oxi -dol-fosfi-estresasa (deterrninado mediante wes
tern blot, datos no mostrados).
DEMOLIEUDO PAPER S 107
PROLIFERACI6N CELULAR
Se determine la proliferacion celular utilizando los medios in
dicados en Materiales y rnetodos junto con el complejo vitamfni
co. Se observe un fuerte aumento en el mimero de celulas en com
paracion con la metodologfa clasica. El crecimiento se confirmo
por la medida de la absorbancia a 595 nm (Figura 1). Las celulas
se observaban frescas, alegres y radiantes, mientras que las creci
das con los tratamientos habituales estaban bastante maltratadas.
24 hs 48 hs 72 hs 96 hs
tiempo
Figura 1
Aqui se observa que a medida que pasan los dias la proliferaci6n aumenta mucho
mas en aquellos cultivos que fueron tratados can los rnet odos propuestos.
EFECTO DE LA MUSICOTERAPIA
SOBRE EL CULTIVO CELULAR
Se compare el grado de estres de acuerdo con los diferentes
tipos de miisica utilizados para el crecimiento celular. Se utiliza
crecimiento celular
('j 0,8
'u
~ 0,6
..0
(; 0,4
VI
o metodos
habituales
..0
<: 0,2
rnerodos
recientes
109
108 OEMOllENOO PAPERS
ron dos variedades de rmisica totalmente opuestas y se compa
raron los resultados con el control, es decir, sin rmisica,
Se pudo visualizar que las celulas crecidas con musica clasi
ca estaban distribuidas espaciadamente en los frascos y placas,
adernas el nivel de estres era mfnimo, caso contrario de 10 que se
podfa observar utilizando otros tipos de rmisica (Figura 2) .
Musicoterapia
I
to 0,8
'o
~ 0.6
.0
I_ music, I
'
o 0.4
.0 '"
-c 0.2
Met31 sinmusica
Estilos musicales
clasica
Figura 2
En esta fi gura se muestra c6mo repercute la musics en el crecimient o celular Se pue
de observar que can rnusi ca heavy IPantera sp.), las celulas no crecen bien. ya que se
encuent ran muy estre sadas, mientras que can rnusice clasica la situaci6n cambia am
pliament e. Par ultimo si las celulas crecen sin musica se observa crecimi ento Iimitado.
EFECTO DE LA CENTRIFUGACION
Se realizaron centrifugaciones a distintas velocidades para de
tenninar el efecto que sufrfa la membrana celular.
Observamos que las celulas que habfan sido pretratadas con
las cremas descriptas y Metodos, y puestas a centrifugar utilizan
do los tubos recubiertos de silicona, mantuvieron intactas sus
membranas plasmaticas (dato no mostrado).
OEMOllENOO PAPER S
Por el contrario, cuando se utilizaron los tubos clasicos, se ob
servo que las membranas comenzaban a quebrarse perdiendo la
fluidez indispensable para l1evar a cabo sus funciones.
Discusi6n
En este trabajo reportamos las nuevas tecnicas que dispone
mos para que los tratamientos que se les aplican a las celulas sean
menos dafiinos, teniendo en cuenta como primer objetivo el me
jor trato para el1as.
Se demostro que el ambiente en el cual se esta produciendo
el experimento es fundamental para que las celulas puedan ere
cer de una manera totalmente organizada.
EI acompafiamiento musical es un motivo importante para
que las celulas no se estresen, ya que la rmisica clasica armoniza
e induce un estado de relax en el1as. Otro factor importante es el
cuidado de lafluidez de la membrana plasmatica, ya que esta es
fundamental para llevar a cabo las funciones indispensables co
mo la regulacion en el intercambio de iones y moleculas entre la
celula y el medio extracelular.
Todos estos factores deben tenerse en cuenta para obtener
el mejor cultivo posible y lograr resultados altamente exitosos
debido a que las condiciones del cultivo tendran la mayor opti
mizacion, cuidando todos los componentes celulares que se re
quieren para que funcione adecuadamente. Teniendo en cuenta
todo esto uno puede obtener mejores trabajos experimentales ya
que el cultivo celular esta acondicionado de forma tal que su ere
cimiento y estabilidad corporal y espiritual se yen asegurados .
Por 10 tanto, se deberfa tener muy en cuenta la utilizacion y
puesta a punto de cada una de estas tecnicas para darles el ma
ximo confort posible.
110
DEMOLIENOO PAPERS
Bibliograffa
Dotto, P. YPifiiero, Cuerpo celular, Edici6n Models, 2001.
Estresoso, A. y Probeta, P., Expresion de la proteina 2-3-4-50xi-dol
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Giordano, R. y Harf, M., Productos de belleza celular, 2000.
Margollo, M. y Celulosoide, C. Acondicionamiento de membranas ce
lulares, 1995.
Periolo, N. y Tripsina, T., Microambiente celular propicio para proli
ieracion celular, 1991.
Capacidad de acci6n
de la ojota
o el insecticida en aerosol
a la hora de matar cucarachas
SANTIAGO PLANO*
Resumen
En el siguiente trabajo se intentara poner fin a una antiqufsi
rna discusi6n que surge en el momento de hacer frente a las cu
carachas. Estudiaremos la eficiencia de dos de los metodos mas
difundidos de erradicaci6n de estos insectos: el insecticida en ae
rosol y la ojota. Demostraremos la eficacia superior de la ojota a
tiempo 0 versus una acci6n mas prolongada en el tiempo por par
te del insecticida en aerosol.
Introducci6n
Durante siglos el hombre ha luchado encamizadamente con
tra las cucarachas (insectos de la familia de los bldtidosi que mo
ran en sus hogares comiendose su comida y poniendo en peligro la
salud e higiene de sus hijos. Estos insectos pertenecen a la fauna
criptozoica habitual de nuestros hogares, pueden alimentarse prac
ticamente de cualquier cosa y anidar en los lugares mas inh6spitos.
Ademas de los aspectos higienicos es tambien importante destacar
el componente sociocultural que trae aparejado el habitar en un
" Santiago Plano es estudiante de la licenciatura en biotecnologia de la Uni
versidad Nacional de Quilmes e investiga las bases neuroquimicas de los ritmos
circadianos.
112
DEMOLIENOO PAPERS
hogar morado por estos asquerosos insectos (Noer & Catrineu,
1935), que nos rebaja a la ignominia y al aislamiento. Surge de allf
la necesidad imperiosa de eliminar a las cucarachas, y para ese fin
se ha desarrollado una gran variedad de ingeniosos pero inservi
bles artefactos que van desde triangulos con pegamento, discos
que sirven como snack bar para las cucarachas, hasta el mas efi
caz de todos: el insecticida en aerosol. Pero como probaremos en
este trabajo el unico metoda que logra una erradicaci6n total de
estos bichos es la poco apreciada ojota.
Anteriormente se han realizado estudios comparativos sobre
metodos para eliminacion de otras plagas, como el armadillo dien
te de tigre y el rat6n hocicudo (Holliday & Onaice, 1995; Berns
& Smithers, 1989; Buffy, 1999; Mongo & Aurelio, 1998), pero
nunca habfan sido extendidos a cucarachas.
En este trabajo centramos nuestra atenci6n en los dos meto
dos principales de matanza de cucarachas: el insecticida en aero
sol y la ojota, comparando su poder para el exterminio de estos
insectos a corto y largo plaza.
Materiales y rnetodos
Se emplearon 3.687 xlO
15
cucarachas de la especie Reina Afri
cana (Bogart & Hepburn, 1952) a las que se dividi6 en dos gru
pos que fueron empleados para las pruebas de eficiencia de los
metodos de erradicaci6n.
Las cucarachas empleadas para el estudio de los metodos de
erradicaci6n fueron anestesiadas con una dosis de 2 rng/k de
Rompum forte (Parada & Manzini, 1978), por 10que podemos
asegurar que los insectos no sufrieron dolor alguno en el mo
mento de realizarse los ensayos pertinentes. Cabe aclarar que el
hecho de que los especfmenes estuvieran sedados no afect6 en
nada el estudio (datos no mostrados), dos de los especfmenes fa
llecieron luego de haberseles aplicado el anestesico, pero la au
topsia posterior demostr6 que su muerte fue producida por una
DEMOLIENDO PAPERS 113
complicaci6n cerebro-vascular, con posible vinculaci6n genetica,
ya que eran padre e hijo.
Para el estudio de eficacia del insecticida en aerosol se em
ple6 un compartimiento del tipo Hassenthall-King, de 1,2543 m
de alto, 2,21823 m de largo, y 1,0000001 m de ancho, cerrado en
forma hermetica, con una sola entrada de aire a 9935/1193 m del
borde superior, y a 3 x 2-
2
m de margen derecho, por donde se in
yectaba el aerosol, y una iinica puerta de 3 em de alto por 2 em
de largo, conectada a un tuba de esas mismas dimensiones que
derivaba en un embudo (Figura 1) en el cual se depositaron todas
las cucarachas para hacerlas ingresar al habitaculo,
Una vez que los insectos se hallaron en el interior se cerr6 la
puerta, se administr6 el insecticida Raid ultra eficacia (500 g) Yse
realiz6 un conteo de muertos al minuto 0, y luego cada 15 minutos.
Para el estudio de eficacia de la ojota se emple6 una modifi
caci6n de la maquina para cazar correcaminos modelo XB 1320
de ACME, adaptada para insectos. Para que las cucarachas ingre
saran en la maquina se las conducfa por una pasarela. Se cont6
aquf tambien el grado de eficacia al minuto 0 y cada 15 minutos.
Se realiz6 tambien un estudio de eficacia a largo plazo, para
comprobar la acci6n residual, que consisti6 en aplicar el metoda
y luego hacer pasar cucarachas, en grupos de 3,3 x 10, cada 20
minutos. Es decir, llenamos la caja de Hassenthall-King con el ae
ingreso de
cucarachas
Figura 1
Esquema del compartimiento
del tipo Hassenthall-Kmq
empleado en el ensayo.
----- - - - --
114 DEMOLIENOO PAPER S
DEMOllENOO PA PERS 115
rosol, y luego se hizo ingresar a las cucarachas. Para el estudio de
la acci6n residual de la ojota, la maquina daba un ojotazo y lue
go se hacfan pasar las cucarachas por la banda. Recordamos que
el metoda se aplica s610 una vez y luego se hacen pasar los gru
pos de cucarachas en lapsos de 20 minutos.
Resultados
EI estudio comparativo de los metodos de erradicaci6n arro
j6 los siguientes resultados:
Para el caso de la ojota, luego de hacer pasar todas las cuca
rachas, golpeandolas con la ojota a cada una, comprobamos que
el numero de muertes era del 100% al minuto 0, por 10que a 15,
30 Y45 minutos el porcentaje de muertes segufa siendo 100.
EI insecticida en aerosol, en cambio, mostr6 ser poco 0 nada
efectivo al minuto 0, ya que no se apreciaba ningiin deceso, pero
el mimero de muertes crecfa con el tiempo alcanzando un maxi
mo de 85% a los 45 minutos, como 10muestra la Figura 2.
Porcentaje de muertes en el tiempo
'" 120
Q)
~
Q) 100
::J
80
E
Q) o Ojota
"C 60
Q)
Insecticida
s
40
c
Q) 20
u
l..
0 0
0..
tiempo
Figura 2
Tiempo Ojota Insecticida
Estudio de efi cacia de ambos metod os.
Se muest ra porcentaje de muertes a
1= 0 min 100% 0%
diferentes tiempos. N6tese c6mo el
2 =15 min 100% 30%
rneto do de la ojota alcanza el 100% de
muertes inmediatament e. mient ras
3 = 30 min 100% 53%
- - - que con el aerosol recien
4 = 45 min 100% 85%
a los 45 minutos se alcanza el 85% .
La Figura 2 corresponde al porcentaje de muertes luego de ha
ber ejecutado el metodo a todos los ejemplares, para cada caso.
Es notoria la efectividad inmediata de la ojota frente al aerosol ,
que s610 consigue un porcentaje maximo de 85 a los 45 minutos .
En 10que concieme al estudio de acci6n residual, se compro
b6 que la ojota es mucho mas efectiva al corto plazo de ser apli
cada, es decir, luego de aplicar el ojotazo, el rnirnero de muertes
era del1000f0, pero si se hacfan pasar cucarachas luego de ser apli
cado el ojotazo las mismas no morfan (el porcentaje de muertes
pasaba a ser del 0%) 10 que muestra una total inutilidad a largo
plazo. En el caso del insecticida, el porcentaje inicial era cercano
al 85%, y a largo plaza iba descendiendo gradualmente (Figura 3).
Estudio a largo plazo
'" 90 ~ r - - - - - - - - - - - - - - - - " ' "
~ 80
~ 70
E 60
~ 50 I - - - ~ - - -
'" 40
"j3' 30
~ 20
~ I ~ r- ==-1
o 50 100 150
t iempo
116 DEMOLIENOO PAPERS
Tiempo Porcentaje
o 85
Figura 3
20 70
Eficacia a largo plaza del insecticida.
40 55
5e muestra el porcentaje de decesos
60--
42 correspondiente a cada tiempo.
En este caso se destaca
80 38,3
la eficacia del aerosol,
100 20
ya que la ojota
120 14
no produjo ninqun deceso.
En este estudio los individuos permanecieron en la eaja 45 min
utos, que es el tiempo que Ie toma al inseeticida Uegar a su maximo
efeeto, es decir, se aplieaba aerosol, se aguardaba el tiempo neeesa
rio y luego se ingresaban los animales que permaneeerfan alli por 45
minutos, finalmente se realizaba un conteo de muertes.
Discusi6n
En oposici6n a 10 postulado por Burns, quien afirma que la
tinica manera de matar insectos es eombatirlos con la mayor ean
tidad de inseeticida posible (Burns & Smithers, 1998), eompro
bamos que la ojota es el metoda de erradicaci6n de euearaehas
mas efeetivo a eorto plaza, con un poreentaje de 100, 10 que 10
haee imbatible a la hora de eliminar estos inseetos, pero no posee
10que dimos en Hamar efeeto residual, es deeir, no es efeetivo, una
vez aplieado, a largo plazo, a diferencia del inseeticida.
Esto genera una duda: eonfiar en la aeci6n de la ojota, 0 ir
mas alla y tratar de haeer frente a las posibles futuras invasoras.
Desde nuestro punto de vista ese problema se solucionarfa
atacandolo desde dos frentes, es decir, matando a las eucarachas
con la ojota y luego aplieando inseeticida, asegurandonos asf un
100% de efeetividad a tiempo 0 y hasta un 14% a las 2 horas de
aplieado.
DEMOLIENOO PAPERS
117
Del estudio de la efieacia a largo plaza surge que la aeci6n re
sidual del inseeticida cae muy abruptamente. Este presenta una
vida media (tiempo en el que mata hasta el 50% de las cueara
ehas) de aproximadamente 52 minutos. Para lograr una aeci6n
prolongada deberfan apliearse dosis de inseeticida eada hora.
Bibliograffa
Bogart, H. & Hepburn, K, "Characterization of Cockroaches", Cells,
364, 1952, pp. 115-121.
Buffy, "How to kill vampires", Fox 2000, 1999, pp. 1587-1591.
Burns, M. y Smithers, W., "Por una erradicaci6n total", Buros Publi
cations, 215, 1989, pp. 125-490.
Holliday, W. & Onaice, R, "Security at Home", Nune, 201, 1995,
pp. 122-123.
Mongo, H. & Aurelio, J., "Arafias eliminadas por insecticida", Cell,
1500, 1998, pp. 860-865.
Noer, J. P. & Catarineu, R, "Physiology of the Invasion", EMBO, 254,
1935, pp. 11496-15021.
Nobleza, F. X. & Picardo, N. Y, "Breve descripci6n de la fauna crip
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Nuto, K & Nete, K, "Ranges de efectividad en los insecticidas en ae
rosol", Eco, 2002, 1995, pp. 165-170.
Parada, P. P. & Manzini, R, "Manejos sin dolor para los insectos",Re
vista del Comite por la Unijormidad, 1978.
Las tendencias suicidas en caracoles
advierten sobre patologias
psiquiatricas en el hombre
MAXIMILIANO PORTAL*
Departamento de Neurobiologfa Canina,
Buenos Aires, Argentina.
Introducci6n
AI realizar estudios etologicos hemos observado un compor
tamiento anomalo en los caracoles citadinos (Carakolium citadi
nium), razon por la cual hemos dedicado nuestra vida a desentra
fiar las bases moleculares de este comportamiento. Para ella
presentaremos aquf herramientas nuevas, tanto de biologia mole
cular comoffsico-qufrnicas, que le permitiran al mundo cientffico
atravesar las front eras del estudio del comportamiento de los ani
males y extrapolar esos resultados al hombre en un futuro proxi
mo. Estamos convencidos de que el estudio del comportamiento
urbano de los caracoles bajo estfrnulos que los inducen al suici
dio colectivo nos permitira dilucidar una faceta tan oscura del
comportamiento humano como las tendencias suicidas.
Materiales y metodos
PREPARACION Y CONSERVACION DE INDIVIDUOS
Las muestras de caracoles Carakolium citadinium singenicos
fueron cedidas amablemente por laboratorios Carakolium Co. Inc.,
* Maximiliano Portal es Iicenciado en biotecnologia y actualmente trabaja
en investigaciones neuroquimicas en el CIQUIBIC, Facultad de Ciencias Qufmicas,
Universidad Nacional de Cordoba.
120
121
DfMOLlfNOO PAPERS
y mantenidas en soluci6n salina NaCI 8 gr/I a -70C en freezer
hasta el momento en que se realiz6 la experiencia. Las muestras
fueron descongeladas 24 horas antes del experimento siguiendo el
protocolo de Gilead et al. [1] y fueron mantenidas en habitaculos
especiales provistos de luz artificial, aireaci6n y alimento contro
lados por computadora. Los voluntarios humanos fueron propor
cionados por el departamento de alumnos de nuestra universidad
y mantenidos en aislamiento siete dfas antes de la experiencia en
instalaciones especiales provistas de televisi6n satelital.
ESTUDIO CUANTITATIVO DE LAS TENDENCIAS SUICIDAS
Para realizar este estudio de las tendencias suicidas se realiza
ron curvas de muerte. Para ella se tomaron 20 caracoles, provistos
de cascos de fiitbol americana especialmente disefiados, que fue
ron inducidos a desplazarse en condiciones 6ptimas con agua de
lluvia (como fue reportado anteriormente por Gilead et al. [2]), a
traves de una vereda transitada especialmente disefiada para elli
bre desplazamiento de transeiintes humanos previamente privados
de visi6n por laceraci6n directa de los 6rganos visuales con cuchi
110 sierrita a 500C. Se consider6 "deceso de caracol" como aquel
caracol que present6 una motilidad de 0 crn/h luego de ser aplas
tado por los transeiintes en las condiciones descriptas del ensayo.
Para una posterior comprobaci6n se realiz6 el mismo ensayo in
corporando un sistema de vallado a traves de la vereda de manera
que impidiera el libre desplazamiento de los caracoles hacia la
muerte. Para observar el efecto de distintos agentes que podrfan lle
gar a influir en el comportamiento del caracol se los indujo a des
plazarse con previa incubaci6n en dicho agente. Las soluciones se
leccionadas para la incubaci6n fueron: agua de lluvia 2 M, agua
bidestilada (como control negativo), soluci6n de alcohol 32 % v/v
sabor menta, soluci6n Li2C03 1M, soluci6n Prozac 0,5 My Reser
pina 0,1 M como control positivo. Los animales fueron incubados
durante 30 minutos en cada soluci6n y luego fueron depositados
en un patio provisto de vereda y enredaderas en los cuales se colo-
DEMOLIENOO PAPERS
caron sensores de movimiento con el fin de realizar un analisis
computacional del desplazamiento. A los caracoles que en este en
sayo se mostraron potencialmente suicidas se les proporcion6 una
sesi6n de electroshock de 110 volts (10 pulsos, 20 seg) con los elec
trodos fijados en las antenas. Posteriormente los caracoles fueron
inducidos a desplazarse y se registr6 dicho movimiento.
CAMBIOS EN EL PATR6N DE EXPRESI6N HORMONAL
EN CARACOLES SUICIDAS
Como fue previamente reportado por Heinitz et al. [3], se ob
serv6 un incremento en la velocidad de desplazamiento de los ca
racoles luego de la estimulaci6n, 10 cual indica un cambio en la
concentraci6n hormonal en sangre. Se extrajeron las cabezas me
diante decapitaci6n de los caracoles recientemente aplastados uti
lizando guillotina y se extrajeron celulas de tejido del sistema ner
vioso central. Se realiz6 posteriormente una extracci6n de RNA
total y se realize RT-PCR de los mensajeros [4]. Finalmente, se
c1onaron, secuenciaron y analizaron las secuencias de interes, in
c1uyendo el gen de la suicidina.
ANALISIS UTILIZANDO CARACOLES KNOCK-OUT PARA EL
GEN DE LA SUICIDINA
A partir de la secuencia de la Suicidina 1 obtenida anterior
mente se procedi6 a la creaci6n de organismos knoc-kout para
dicha secuencia. A los mismos se los someti6 a los ensayos des
criptos anteriormente en la secci6n estudio cuantitativo de las ten
dencias suicidas.
Resultados
Los resultados muestran c1aramente la progresi6n en la rnor
talidad de los caracoles inducidos con agua de lluvia, pudiendo
establecerse un modelo ballenfstico en el tiempo de 4 fases cla
122
DEMOLIENOO PAPERS
ramente diferenciables. En la primera fase luego de un pulso de
agua de lluvia se observa un perfodo de latencia en el cual los
caracoles parecen no percatarse del estfmulo. Luego sobreviene
una segunda fase en la cual la proporci6n de caracoles muertos
se incrementa exponencialmente, una tercera en la cualla pro
porci6n disminuye lentamente a medida que pasan los minu
tos, y final mente una cuarta fase en la cual una menor propor
ci6n de caracoles alcanza su objetivo. En el ensayo con vallado
se obtuvieron resultados similares; sin embargo, se produjo un
corrimiento de la curva de muerte hacia la derecha debido al
retraso producido por este obstaculo. Se pudo determinar las
trayectorias de los caracoles en respuesta a distintos agentes que
influyen sobre su comportamiento. Los caracoles tratados con
Reserpina (farmaco que induce depresi6n profunda en huma
nos) se desplazaron rapidamente al suicidio, obteniendose simi
lar resultado con los tratados con agua de lluvia. EI caracol con
trol (tratado con agua) permaneci6 indeciso en sus movimientos,
y su desplazamiento fue practicamente nulo. En el grupo de ca
racoles tratados con licor de menta y antidepresivo (Prozac) no
se observ6 comportamiento suicida. Estos caracoles permane
cieron la mayor parte del tiempo desplazandose sobre la super
ficie del patio sin un patr6n determinado. Los caracoles trata
dos con litio manifestaron conductas an6malas como saIto y
elevado consumo de nicotina. En los caracoles suicidas someti
dos a electroshock se observ6 una reversi6n en el comporta
miento suicida, como era esperado.
Los experimentos de biologfa molecular comprobaron la exis
tencia de un mensajero diferencial en las muestras que fueron in
ducidas con agua de lluvia. A partir del clon para dicha secuen
cia se pudo aislar una protefna a la que se denomin6 suicidina 1.
Los caracoles knock-out para la suicidina 1 no presentaron res
puesta alguna ante inducciones sucesivas 0 con concentraciones
crecientes de agua de lluvia. Sin embargo, datos preliminares in
dican que las drogas antidepresivas presentan actividad a pesar
DEMOLIENOO PAPERS 123
de la depleci6n del gen que codifica para la suicidina 1, sugirien
do que las vfas fisiol6gicas los que los estimulan no se encuentran
ligadas de ninguna manera con esta protefna.
Discusi6n
Los experimentos presentados en el marco de este trabajo nos
han llevado a dilucidar un mecanismo aparentemente similar al
que ocurre en seres humanos que padecen de patologfas como de
presi6n aguda severa y trastornos asociados a esta mediante la de
terminaci6n de la causa intrfnseca que subyace a los suicidios co
lectivos de caracoles citadinos luego de una lluvia. Los detalles
moleculares finos todavfa estan por develarse y nuestro labora
torio ha encontrado una profunda motivaci6n para continuar
con las investigaciones pertinentes. La cafda brusca en las con
centracionesplasmaticas de serotonina y de noradrenalina in
dica un posible cuadro depresivo en los caracoles inducidos con
agua de lluvia. Dicha depresi6n puede ser revertida mediante
agentes antidepresivos que presentaban actividad, hasta este mo
mento, solamente en humanos, dandole a la sociedad protectora
de caracoles un arma fundamental para detener los suicidios en
masa. La determinaci6n de que existe un factor (que denomina
mos suicidina 1) en caracoles, y que presenta alta homologfa con
humanos, nos permite hipotetizar sobre un antepasado cormin en
la cadena evolutiva.
Cabe destacar que, a pesar de la sangre derramada, se logr6
alcanzar una front era mas, antes inexplorada por el hombre.
Referencias
1. Gilead et al., "Ontogenia y conservaci6n de caracoles citadinos",
Caracol Biotechnology, 23, 1995, pp. 23-1745.
124
DEMOLIENOO PAPERS
2. --, "EI agua de lluvia mueve la casa", Caracol life science, 2,
1992, pp. 56-59.
3. Heinitz et al., "Cambiosen el patr6n hormonal de caracoles sui
cidas", Cell, 3, 1995, pp. 25-65.
6. Sambrook et al., "Novel empleo de polimerasa 8 para PCRrear
con gusto", Life sciences, 5, 2000, pp. 324-327.
Detecci6n temprana del sindrome
Homo sapiens sapiens bo/sum
MARIA CANDELARIA ROGERT* y MARTIN FABANI**
Introducci6n
Luego del descubrimiento y la caracterizaci6n del primer
ejemplar de la subespecie Homo sapiens sapiens bolsum (Hssb),
vulgarmente conocido como "viejo de la bolsa" [1], la ciencia en
tera se ha abocado a tratar de encontrar un metodo que permita
detectar en forma temprana potenciales miembros de esta subes
pecie entre una poblacion heterogenea de Homo sapiens sapiens
(Hss). Como bien explica Alderete [1], una serie de mutaciones
en el fragmento pJ13.3 del cromosoma 9 de celulas neuronales
produce un cambio genotfpico en Hss convirtiendolo en Hssb, in
dividuo infantfvoro, de comportamiento deambulatorio, con un
pico maximo de actividad entre el solsticio vernal y el equinoccio
otofial, particularmente entre la I pm y las 4 pm.
Si se lograra encontrar en forma temprana un marcador mo
lecular 0 a los agentes mutagenicos responsables se podrfa preve
nir la aparicion de nuevos Hssb y la consiguiente disminucion de
infantes durante la tarde. Hasta la fecha no se conocfan los mo
tivos por los cuales esta subespeciaci6n ocurre solamente en ge
rontes caucasicos de sexo masculino; la informacion aportada por
* Maria Candelaria Rogert es licenciada en biotecnologia y trabaja en fluo
rescencia y quimica de oligonucle6tidos en Solexa Inc. (Reino Unido) desarro
lIando una nueva plataforma de secuenciaci6n y anallsls genetico basada en
micro-arrays.
** Martin Fabani es licenciado en biotecnologia y doctor en farmacia (Uni
versidad de Manchester). Aetualmente trabaja en el Laboratorio de Bioloqta Mo
lecular (MRC) de la Universidad de Cambridge en qulrnica de oligonucle6tidos.
126 DEMOLIENOO PAPERS
este trabajo arroja un manto de luz sobre este misterio. Tambien
se presenta evidencia experimental que permite la detecci6n tern
prana de individuos mutantes y ambientes exacerbantes de las
mutaciones.
Materiales y matodos
Animales: 200 gerontes de aspecto saludable Hss machos y
hembras fueron adquiridos en PAMI (Argentina). Los 10 Hssb
fueron gentileza de Alderete et al. Ratones BALB/c endocriados,
fueron gentileza de Gatoconbotas (Wonderland).
Caracterizacion in situ: Se utilize un detector de postizos "L
Kinch" modelo 19321-CSM (Tonycuozzo, Arg.), siguiendo las ins
trucciones del fabricante. La deteccion de pr6tesis dentales se rea
liz6 siguiendo el protocolo LVLT (La Vauqufta linked teeth, Arg.).
Para el resto de los metodos utilizados en la caracterizaci6n ver [2).
Western Blot: Los geles SOS-PAGE de protefnas fueron rea
lizados de acuerdo con el metoda de Lamelli, transferidos a una
membrana de nitrocelulosa e incubados con los anticuerpos mo
noclonales de conejo anti PelO (adquiridos por gentileza de Tu
sam). El metodo de deteccion del ensayo consisti6 en un conju
gado Anticuerpo anticonejo quimioluminiscente.
PCR-RFLP: Se utilizaron los primers ITS-R380 (gentileza de
The Balding Lab. Inc. USA), con un perfil de ciclado frente y la
teral derecho; las enzimas de restricci6n utilizadas fueron Tcor Tl
yTkgue 2.
lnrnunodeteccion: Se realiz6 un ELISA de captura siguien
do protocolos previamente publicados [3) y se us6 el anticuer
po primario (Monoclonal conejo anti PelO) y como secundario
se utilize un anticuerpo biotinilidado, luego se incub6 con un
conjugado avidina peroxidasa usandose un reactivo colorimetri
co (ONPG) para cuantificar. El punto de corte entre negativo y
positivo se determine por calculos estadfsticos,
DEMOLIENOO PAPERS 127
Analisis bioinforrnatica: la secuencia publicada [1) fue con
trastada con la base de datos nr del BLASTn y BLASTp para bus
queda de homologfas. Se utilize adernas el soft Dot Plot (WinOot)
como interfase grafica. Para una com pleta revisi6n ver [4).
Analisis ambiental: se utilizaron ensayos microbio16gicos y
bioqufmicos comunes. Las muestras gaseosas fueron sometidas a
cromatograffa gaseosa (CG) y a resonancia magnetica nuclear
(RMN) utilizandose los protocolos de [5].
Resultados
Caracterizacion in situ. Se estudi6 una poblaci6n de gerontes
de entre 70 y 75 afios, saludables, 70 kg de peso promedio, para
encontrar el 0 los factores caracterfsticos propios de la subespe
cie Hssb (Tabla 1).
El analisis detallado de las fibras componentes de los som
breros nos permiti6 detectar la presencia de acidos grasos y ce
ras normales de origen capilar junto a un compuesto derivado
de la esterificaci6n de un acido graso y un compuesto de origen
desconocido (Figura 1). Este compuesto se hall6 solamente en
los sombreros, cuero cabelludo y epidermis de los especfmenes
mutantes estudiados (n = 10); en los sombreros de animales de
genotipo normal s610 se hallaron los acidos grasos y ceras na
turales.
Analisis ambiental. Debido ala falta de datos sobre el origen
de la sustancia desconocida se procedi6 a analizar mediante en
sayos bioqufrnicos y microbio16gicos muestras obtenidas a partir
de los individuos en cuesti6n. Los ensayos por CG indicaron la
presencia de un compuesto organico (C) volatil, que podrfa ser
un precursor del agente mutagenico.
129
128 DEMOLIENOO PAPERS
DEMOLIENOO PAPERS
El modelo propuesto resulta coherente ya que:
37C, 1 atm
A+B c
fibras de lana
siendo B una molecula de acido graso de 16 carbonos.
Tabla 1
Caraeterizaei6n in situ
Hss Hssb
Hembras Machos Machos Hembras
Caracterlsticas N 97 105 10 0*
Dieta
alimentaria
Alto nivel HC 83,2% 75,4% 80% -
Alto nivel GR 1,4% 4,5% 00/0 -
Alto nivel PR 15,4% 20,1 % 20%
Otras
caracteristicas
Postizo 20,1% 12,3% 0% -
Pr6tesis dental 93,5% 97,3% 90% -
Sombrero 5,2% 20,3% 100% -
Bast6n 43,5% 68,3% 50%
Franja horaria de
actividad
6 am-12 pm 83,5% 80,1% 30%
1 pm-5 pm 32,1% 15,3% 100%
~ p m - 7 p m 70,5% 72,3% 100%
9 pm-12 am 2,3% 3,1% 100%
*No se encuentran hembras con esas caracterfsticas.
Losvalores en negrit8corresponden a lascaracteristicas diferenciales
entre ambas poblaciones estudiadas en detalle.
HO
A
o ~
o
OH
B
Figura 1
Compuestos orqanicos. A: eompuesto organieo deseonocido.
B: acido grasode 16carbonos.
Capacidad mutaqsnica de C. Se froto la cabeza de ratones
BALB/c con distintas concentraciones del compuesto C y se com
prob6 que a los 35 elias e11000J0 de los ratones presentaba compor
tamiento canfbal (Figura 2). Se busco posteriormente la relacion en
tre este comportamiento y los cambios moleculares tanto en
protefnas como en DNA (ELISA, Tabla 2 y RFLP, datos mostrados).
100 - ---..-- ----. . - - ~
i
BO
i
j
I
60 -l
I
I
!
'10
Figura 2
Canibalismo
20 ~
en ratones
en funei6n
del
tratamiento
o +-
con el
o 4
10 eompuesto
Semanas de tratamiento purifieado.
131
130 DEMOLIENOO PAPERS
Anallsis biolntorrnatico. Los resultados del BLASTp a partir
de la secuencia de la protefna Pecuatr040 codificada en celulas
neuronales (mutante y no mutante), arrojan una alta homologfa
con respecto a la protefna PelO de Tarantula (datos no mostra
dos); la regi6n de homologfa estarfa centrada en la porci6n C ter
minal de Pecuatr040.
Analisis proteico. A partir de los datos hallados por Tusam et
al. [6] se sabe sobre la existencia de una protefna conocida como
PelO, sintetizada en gran cantidad momentos despues del coito
en tarantulas del Amazonas. Segun estudios recientes [7], esta
protefna actuarfa como una sefial hormonal que dispararfa el
comportamiento canfbal en este tipo de aracnidos, A partir de es
ta informaci6n se busc6 un analogo de PelO en los animales ba
jo estudio por ELISAy Western Blot (ver Tabla 2).
Tabla 2
Efecto de extractos de Hssb, tarantula y rat6n
sobre el cornportarmento canibal
Des cripci6n Resultado
HSS Macho Negativo
Hembra Negativo
HSSB Macho Positivo
Precoito Macho
N e ~ ~
Extracto Hembra Negativo
Tarantula Postcoito Macho Negativo
Hembra Positivo
Extracto Rat6n + Compo Positivo
BALBlc
----.
Rat6n control Negativo
DEMOLIENOO PAPERS
Discusi6n
Como se puede ver en este estudio hemos encontrado un nue
vo compuesto que se encuentra s6lo en el aire circundante de
Hssb. Mediante RMN hemos podido identificar a este compues
to como 2,3 dimetilaminoformil-5-trien-2-F-9,15-amido-8triben
ceno; ademas se verifie6 la estructura del producto de esterifiea
ci6n y del acido graso precursor. Si bien no pudimos determinar
si el compuesto es un precursor de un agente mutagenico 0 es mu
tagenico por sf mismo, pudimos asociar su presencia con la mu
taci6n estudiada previamente. En el ensayo de RFLP se pueden
ver las bandas diferenciales asociadas a la aparici6n de una mu
taci6n en la regi6n gen6miea estudiada. Esta mutaci6n provoca
un cambio genotfpieo en las celulas de la glia de la corteza cere
bral particularmente en la protefna pecuatro40 [1], protefna es
tructural, susceptible de clivaje en dos protefnas nuevas. Una de
ellas, pelO, es la causante de la actividad infantfvora en los Hssb,
por 10 que fue bautizada como infantivorina. Esta propiedad del
analogo de Infantivorina ya fue descripta por Tusam en su traba
jo sobre obtenci6n de sueros policlonales anti pelO en conejos
[7]. Como se pueden ver en los ensayos de ELISA (Tabla 2) y
Western Blot realizados, la aparici6n de pelO esta asociada exclu
sivamente al proceso de subespeciaci6n, y se encuentra en forma
de protefna plasmatica, posiblemente cumpla una funci6n de ti
po hormonal, pero eso todavfa no fue estudiado.
Del Western Blot podemos extraer varias conclusiones. Ve
mos que la expresi6n de pecuatr040 esta ampliamente difundida
en todos los 6rganos de los Hss como asf tarnbien de los Hssb,
pero que en el cerebro de Hssb se encuentra otra protefna de pe
so molecular mucho menor (igual peso molecular que el produc
to proteieo hallado en tarantulas hembra luego de la c6pula).
Tambien observamos que la protefna pecuatr040 en su estado na
tivo nunca es secretada en plasma, s6lo es secretado el producto
de clivaje de la misma (lnfantivorina). Asimismo, en ensayos rea
132 DEMOLIENOO PAPERS
lizados con ratones pudimos comprobar que la inyecci6n de Pe
10 provoca comportamiento canfbal.
Los resultados claros y contundentes del ELISA permitieron
desarrollar el test de diagn6stico temprano (con el iinico incon
veniente de que para que sea temprana uno debe comenzar a ex
perimentar muy temprano en la mafiana).
Referencias
1. Alderete, v., "Viejo de la bolsa, lun mito?", Anales del PAMl, 1,
1995, pp. 1-15.
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5. Flateu, P.,"Lamour P.: Espectroscopfa e identificaci6n de olores",
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7. , "L'tarantule et Ie conejfn se Ie morfe", Journal of Chan
tologism, 32, 1999, pp. 22-29.
Eldesesperadointento
de Culex pipiens
por mantenernos despiertos
ROSANA ROTA *
Instituto de Investigaciones Mosquiteras
Resumen
El zumbido de los mosquitos hembra es una de las principa
les razones por las que un Homo sapiens sapiens se mantiene des
pierto aun estando muy cansado, ya que aumenta su intensidad
ni bien este apoya la cabeza sobre la almohada dispuesto a con
ciliar el suefio.
En este trabajo se analiz6 la intensidad del zumbido segun
los diferentes Estados de Ensofiaci6n [5] para una poblaci6n he
terogenea de Homo sapiens sapiens de 20 a 65 afios de edad.
Para ella se capt6 el zumbido mediante micr6fonos conectados
a un microprocesador y se determinaron los diferentes Estados
de Ensofiaci6n a partir de las vibraciones sensoriales captadas
por los sensores Sensatuti conectados al mismo microprocesa
dor. Es sumamente importante el analisis de los resultados pa
ra las empresas ya que las lleva a evaluar la posibilidad de pro
veer a sus empleados de buenos repelentes y asf aumentar sus
ingresos.
* Rosana Rota es licenciada en biotecnologfa y trabaja en ellaboratorio de
Inmunologfa y Virologia de la Universidad Nacional de Quilmes, don de desarro
lIa su trabajo doctoral sobre rotavirus en la Argentina.
134 DEMOLIENOO PAPERS
Introducci6n
"Mosquito" es un nombre cormin para casi dos mil especies
de insectos que se agrupan bajo tal categorfa. Tienen alas largas y
delgadas, con unas escamas de pequefio tamafio, 10 que los dife
rencia del resto de las moscas. El zumbido familiar que nosotros
ofrnos se produce por las alas, que vibran rapidamente y dan 500
600 golpes por segundo [1]. Los que nos atafien en este trabajo
pertenecen al grupo de mosquitos Culex pipiens, ya que son los
iinicos del area que pican de noche y los mas ampliamente distri
buidos en el mundo. Culex pipiens posee un cuerpo estrecho, de
aproximadamente 5,5 mm de longitud, marr6n con marcas blan
cas en las patas y parte de la boca. Su cabeza esta cubierta prin
cipalmente por dos ojos compuestos gran des que Ie dan una ex
celente visi6n y tiene dos antenas largas que son sensibles al olor,
tacto y humedad del aire. Las hembras poseen un aparato bucal
largo adaptado para perforar y succionar la sangre, la cual pare
ce ser necesaria para el desarrollo de los huevos. El aparato bu
cal de los machos, que se alimentan de nectar y agua, es rudimen
tario. Las hembras de este grupo atacan principalmente a los
animales de sangre caliente. Cuando muerden inyectan en la he
rida un poco de su fluido salivar, causando hinchaz6n e irritaci6n
[2]. Ultimamente se han realizado numerosos estudios en diferen
tes empresas acerca de la disminuci6n en el rendimiento laboral
de los trabajadores. Se ha determinado que los mismos sufren de
un cansancio excesivo cuyo origen podrfa radicar en las pocas ho
ras dedicadas al suefio. Una de las excusas planteadas por los tra
bajadores al ser consultados fue la molestia causada por el zum
bido de los mosquitos cuando se disponfan a conciliar el suefio
[3]. En este trabajo se trata de resolver esta cuesti6n mediante el
estudio de la intensidad del zumbido mosquitero con los diferen
tes Estados de Ensofiaci6n en una poblaci6n trabajadora.
DEMOLIENOO PAPERS 135
Materiales y metodos
Voluntarios. Se seleccionaron 120 voluntarios Homo sapiens
sapiens de 20-65 afios de edad. Se realiz6 un control negativo uti
lizando cinco voluntarios, tres femeninos y dos masculinos, de
aproximadamente 45 afios de edad, que fingen los diferentes Es
tados de Ensofiaci6n. Como control positivo se utilizaron los da
tos obtenidos a partir de un grupo de practicantes de yoga (10 per
sonas). Se mantuvo a los voluntarios despiertos y realizando sus
actividades normales durante las 14 horas previas a la experien
cia. Luego se les colocaron los sensores Sensatuti segun manual
adjunto y se les permiti6 entrar a una de las habitaciones poste
riormente descriptas. Se los mantuvo allf durante 10 horas, al ca
bo de las euales se finaliz6 la medici6n.
Mosquitos. Se seleccionaron 67.500 larvas de mosquito hem
bra de la especie Culex pipiens en perfecto estado de desarrollo
[4]. Se dejaron crecer por 15 dfas en su ambiente ideal [5]. En for
ma previa a la experiencia se dividieron de a 500 especfmenes y
se introdujeron en las diferentes habitaciones por el metoda de
Flynts [6].
Construcci6n de la habitaci6n. Se construyeron 45 habita
ciones de 6 m', con una cama equip ada con colch6n y almohada.
En estas se coloc6 un expendedor de agua y un minima sanitario.
Se distribuyeron en paredes, techo y cama 20 micr6fonos inalam
bricos de amplio alcance, cuya sefial es captada por un micropro
cesador.
Captaci6n de setisles vibratorias sensoriales. Las sefiales vi
bratorias sensoriales a partir de las euales se pudieron determinar
los diferentes Estados de Ensofiaci6n se captaron con los senso
res Sensatuti. Estos fueron utilizados como se indica en el manual
adjunto.
136 DEMOLIENDD PAPERS
Anslisis de los datos. Para este fin se utilize un programa ca
paz de captar tanto la sefial de los sensores colocados a los vo
luntarios para medir el estado de ensofiaci6n como la emitida por
los micr6fonos y graficarlas.
Ensayo de medici6n de zumbidos. En la habitaci6n anterlor
mente descrlpta se colocaron 500 mosquitos hembra de la espe
cie Culex pipiens de 5 was de edad. Luego se permiti6 el ingreso
de un voluntario con 14horas de insomnio, provisto de los sen
sores Sensatuti. En la habitaci6n se coloco una cama con colch6n
y almohada a gusto del voluntarlo. Este se recost6 en la cama dis
puesto a conciliar el suefio. A traves de los sensores se midi6 el
Estado de Ensofiaci6n del voluntario.
Estados de Ensoiiaci6n. Se consideraron 5 diferentes Esta
dos de Ensofiaci6n: 1: Despierto completamente; 2: Estado de
somnolencia 1 (aumento del parpadeo); 3: Estado de somnolen
cia 2 (cabeceo); 4: Estado de somnolencia 3 (dormitar); 5: Suefio
profundo [7].
Resultados
Los datos obtenidos fueron extremadamente concordantes en
tre los 120 voluntarios, por 10 que se promediaron y se utilizaron
para realizar un tinico grafico representativo. En este se observa
que mientras el individuo esta completamente despierto (Estado de
Ensofiaci6n 1) el zumbido se mantiene en un nivel basal de apro
ximadamente 8 a 10 dB. A medida que el voluntarlo entra en los
diferentes Estados de somnolencia (Estados de Ensofiaci6n 2, 3 Y
4), el zumbido aumenta su intensidad hasta alcanzar un maximo
de aproximadamente 34 dB cuando se dormita. Finalmente, pasa
do este estado, la intensidad del zumbido disminuye levemente
(-33-33,5 dB) y se mantiene constante. EI grafico se muestra en la
DEMOLIENDD PAPERS 137
Figura 1 (Serle 1). Cuando se realize el control negativo, es decir,
con los voluntarios fingiendo encontrarse en los diferentes Estados
de Ensofiaci6n, se observ6 que la intensidad del zumbido se man
tenia en su estado basal. En cuanto al control positivo, se observa
el mismo patron obtenido para los trabajadores, s610que no se pue
de analizar el estado de Ensofiaci6n 5 debido a que los practican
tes de yoga permanecen en el Estado 4 (Figura 1, Serle 2). Con el
paso del tiempo, la intensidad del zumbido se mantuvo constante
en el maximo (-34 dB) (resultados no mostrados).
Suefio versus zumbido
4
0
3,5
":0
3
E 2,5
::J
2
N
Qj
"
1,5
"
I
'" 0,5
"
.;;;
c:
0
s
-=
0 2 3 4 5
Estados de Ensofiacion
--- Serie I
__ Serie2
_Serie3
Figura 1
Estados de Ensoiiaci6n vs. Intensidad del zumbido (dfi). Cada punto de abcsisa co
rresponde al Estado de Ensoiiaci6n correspondiente. Una intensidad de 1 represen
ta 20 dB, de 2 representa 25 dB, de 3 representa 30 dB y de 4,35 dB.La Serie 1 re
presenta los datos de los voluntarios trabajadores, la Serie 2 los datos del control
positive y la Serie 3 los datos del control negativo.
6
138 DEMOllENOO PAPERS DEMOLIENOO PAPERS
139
Conclusion
A partir de los resultados obtenidos podemos afirmar que el
mosquito aumenta los decibeles de su zumbido ni bien un Homo
sapiens sapiens entra en Estado de Ensofiaci6n 2. El aumento de
pende del estado alcanzado, obteniendose un maximo cuando se
ingresa en el Estado de Ensofiaci6n 4 [7], es decir justa antes del
suefio profundo. Este resultado es independiente de la edad, el se
xo 0 la situaci6n econ6mica del trabajador. Una vez dormido, el
nivel del zumbido se mantiene alto y aproximadamente constan
te, dado que el insecta no cesara en su intento por despertar a su
objetivo. La posible raz6n de este comportamiento seria el deseo
del insecto de mantener a su presa despierta para alimentarse de
ella (es conocido el efecto de la vigilia sobre el gusto de la sangre)
0, al menos, molestarla. La forma por la cual el mosquito detecta
el Estado de Ensofiaci6n del damnificado es aiin desconocida, pu
diendo deberse a las hormonas liberadas [8] 0 a las variaciones
en la temperatura corporal [9]. Estas conclusiones son corrobo
radas por los resultados observados en los controles, ya que los
voluntarios fingidores no entran en Estados de Ensofiaci6n y la
intensidad del zumbido no varia. Por su parte, los practicantes de
yoga se mantienen en el Estado de Ensofiaci6n 4 y la intensidad
del zumbido sigue el patr6n observado hasta el mismo, mante
niendose luego constante en el tiempo.
Referencias
1. Enciclopedia Encarta, 4
ta
edici6n, 2002.
2. Rota, R; Bossio E. y Pellegrini M., "Mosquito Culex Pipiens:
Caracterfsticas Generales", Revista Insectos Hoy, 137, 2001,
pp. 593-734.
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83,2002,pp.123-159.
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ta Insectos, 13, 1957, pp. 45-83.
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6. Flynts, D., "Captura de insectos indeseables", Reuista Insectos,
86, 1978, pp. 103-298.
7. Onfricus, X., "11 sonno e i sui sttati", Revista Soiiadores, 2, 1975,
pp.3-67.
8. Feldman, F. y Georges, 8., "Onirihormonas Durmientes", Revis
ta Soiiadores, 22,1995, pp. 88-111.
9. Richter, L.; Mocciola, R; Perez, E. y Pagnutti, L., "Fluctuaciones
y des6rdenes de la temperatura corporal", Revista Los Calores,
45,1993, pp. 894-1001.
Analisis de la divinidad del botori
LucIA SPERONI*
Resumen
Para cuantificar la divinidad contenida en botones, se desa
rro1l6 una tecnica que penniti6 el seguimiento de la reacci6n de
estos en agua bendita. Se obtuvieron datos cuantitativos del des
prendimiento de gases maleficos y cambios de temperatura infer
nales, que pennitieron calcular el aH experimental de la reacci6n.
Se defini6la unidad de grado de divinidad (GRADIV). Los resulta
dos obtenidos del analisis de grado de divinidad comparados con
los de inversion del grado de divinidad sugieren que esta caracte
rfstica es endogene del bot6n y que podrfa detenninar la tenden
cia del individuo portante a irse al mismfsimo infiemo.
Introducci6n
Evidencias experimentales, como las obtenidas por K. Lum
nia [1] alrededor del afio 1400, impulsaron la investigaci6n cien
tffica en el ambito de la teologfa. Desde aquel entonces, el estu
dio del aura [2], las imageries lloronas [3] y las apariciones
milagrosas [4] han sido sometidas al analisis ffsico termodinami
co, qufrnico, biol6gico y neuralgico. En 1654, la iglesia cat6lica in
tent6 ganar feligreses y concedi6 un subsidio a Marfa de Todos los
Angeles para que finalizara el manuscrito en el que afirmaba que
mediante la alquimia habfa logrado introducir el alma de un di
* Lucia Speroni es licenciada en biotecnologia y actual mente trabaja en su
tests doctoral sobre liposomas en la Universidad Nacional de Quilmes.
142
DEMOLIENOO PAPER S
funto sacerdote en un jarr6n. Pero, por cuestiones polfticas [5J,
afios mas tarde el trabajo fue quemado en la hoguera junto con
su autora, pionera en lIevar la religi6n allaboratorio.
En las tiltimas decadas se han realizado numerosos esfuerzos
por validar cientfficamente la presencia divina en ciertos objetos
inanimados.
EI estudio de imagenes de santos mediante radiaci6n gamma,
equis y nabla [6] permiti6 confeccionar patrones de difracci6n re
lacionados con la presencia de caracter divino.
EI objetivo de este trabajo fue cuantificar la divinidad conte
nida en el bot6n y estudiar termodinamicamente [7J la reacci6n
de este en agua bendita. Adernas se intent6 dilucidar el efecto que
tiene la divinidad del bot6n sobre el individuo portador.
Materiales y metoclos
OBTENCI6N Y PREPARACI6N DE LAS MUESTRAS
Botones de plastico fueron donados por individuos de sexo
masculino, de 33 afios, agrupados en las siguientes categorfas : (A)
sacerdote, (B) hombre muy honrado y casto, (C) hombre corrien
te, (D) hombre mentiroso e infiel, (E) ladr6n de gallinas y (F) ase
sino serial condenado a cadena perpetua. Los donantes cumplen
las siguientes condiciones: mismo peso (kg) con variaci6n de 5
kg, duermen aproximadamente la misma cantidad de horas (pro
medio anual), acatan y/o aceptan igual cantidad (promedio anual)
de 6rdenes y rep roches de sus esposas (0 individuo de mayor je
rarqufa en el caso del sacerdote y el asesino serial) , ocupan el mis
mo lugar en el ranking de vanidad formulado por jurado femeni
no, mantienen igual cantidad de relaciones sexuales (promedio
anual) (excepto sacerdote y asesino serial), profieren igual canti
dad de quejidos I gritos (promedio anual) - similares en decibe
les- (incluyendo sacerdote y asesino serial). Estas condiciones se
establecieron para la normalizaci6n en cuanto a pecados capita-
DEMOLIENOO PAPERS 143
les cometidos hasta el comienzo de los experimentos. Se tomaron
3 botones de la prenda mas uti lizada de 10 individuos de cada ca
tegorfa, obteniendo un mimero total de 60 botones. Se consider6
una muestra al conjunto de 3 bot ones.
Se lavaron las muestras tres veces con PBS mas 1% Mugre
cleaner.
TECNICA EXPERIMENTAL PARA LA CUANTIFICACI6N DE LA
DI VINIDAD
La reacci6n de los botones en agua bendita se llev6 a cabo en
un calorfmetro (Lumilagro) a presi6n constante. Siendo que la
reacci6n es exotermica [8], se midi6 la temperatura que alcanz6
el sistema durante el transcurso de la reacci6n. Se coloc6 un tu
bo de evacuaci6n de gases para la medici6n de volumen despren
dido. Un esquema del equipo se muestra en Figura 1.
En el calorfrnetro se coloc6 1 litro de agua bendita, certificada
por el obispo del condado autorizado por el Papa, y la muestra. Se
repiti6 el experimento para todas las muestras de cada categorfa.
En el experimento control se reemplaz6 el agua bendita por
agua destilada.
B
A
o uo
o 0 c
s,
E o C
Figura 1
Esquema del equipo utilizado. La reacci6n se realize en un calorimetro (0) esoejado. de
doble pared evacuada. En este se instalo una ter mocupla (Calontik) (6) conec t ada a un
mili voltimetro (Eveready) (AI que registro datos de temp eratura (cada 1 mini dur ante el
transcur so de la reacci6n (10 mi n) uti lizando como ref erencia un bario a 0 C (e ). EI vo
lumen (ml) de gases rnalefi cos despreno. dos se registr 6 mediante caudalimetro IGa
seosito. Inc.) IE) y se tomaron muestras de estes.
144 DEMOLIENOO PAPERS
CALCULO DEL AH
R
Con los datos registrados por la termocupla, convertidos a
grados Celsius mediante curva de calibracion, se calculo el T ex
perimental para cada reaccion (datos no incluidos).
La constante K del calorfmetro se obtuvo experimentalmen
te mediante procedimiento estandar [9], y se incluyo en la ecua
cion para el calculo de H, Esta constante representa el calor em
pleado para elevar la temperatura de las paredes del calorfmetro
mas la perdida de calor por conduccion.
AH
r
para cada reaccion se calculo mediante [10]:
AH
r
= (miagua,CPagua+ mfagua,CPagua).AT + K.AT
donde miagua es la masa (g) inicial de agua y mf
agua
la final y
CPagua (cal. Cl.g-
1
) es la capacidad calorffica del agua bendita [12].
Se calculo el AH
r
promedio para cada categorfa.
Para el calculo de AH
r
control se reemplazo Cp de agua ben
dita por Cp agua destilada [12].
Analisls del grado de divinidad
Para facilitar la comparacion de los datos obtenidos, definimos:
1 grado de divinidad (GRADIV) equivale a la cantidad (g) de boton
que, en 11itro de agua, produce un desprendimiento de 5 ml de gas
en 10 minutos a condiciones normales de presion y temperatura.
ANAuSIS DE INVERSI6N DEL GRADO DE DIVINIDAD
Se tomaron 3 botones de la prenda de cada individuo y se co
sieron a la prenda de otro de distinta categorfa segiin el esquema:
(A) por (F), (B) por (E), (C) por (D). Transcurrido un ana, se des
cosieron los botones y se sometieron las muestras (referidas mas
adelante como muestras invertidas) al experimento para el calcu
10de GRADIVS, T YAH
r
promedio por categorfa.
DEMOLIENOO PAPERS
145
Resultados
CALCULO DEL AH
R
EI valor experimental de K fue de 48,3 cal. C-
1
Los AH para cada reaccion fueron calculados (datos no in
r
cluidos) y con elias se calculo AH
r
promedio para cada categorfa
(Tabla 1).
En todos los casos, como era esperado, el AT de experimen
to control fue igual a cero resultando en AH
r
= O.
Tabla 1
Valores ~ H, por categorfa
Categorfa -8 H,
(cal.rnol'!
A e
B
@
C
D
ii)
E e
F
ANAuSIS DEL GRADO DE DIVINIDAD
Se calcularon los GRADIVS por categoria utilizando el prome
dio de volumen de gas desprendido (Tabla 2).
EI volumen de gas desprendido en las reacciones control fue
despreciable (datos no incluidos).
Tabla 2
Analisis del grade de divinidad
Categoria Vol. gas (ml) GRADIVs
A 10,1 %
B 11,3 #!!
C 15,0 i.?l?
D 15,5
:)
E 17,1
;)
F 32,5
;(
146 DEMOLIENDO PAPERS
ANALISIS DE INVERSI6N DEL GRADO DE DIVINIDAD
El volumen de gas desprendido y el aT de las reacciones de
las muestras invertidas fueron aproximadamente iguales, con va
riaciones no significativas. Esto result6 en valores de GRADIVS, aT
y aH
r
para cada categorfa (datos no incluidos) similares a los cal
culados para el experimento anterior.
Discusi6n
En este trabajo se logr6 cuantificar el caracter divino de los
botones. Los datos obtenidos de la reacci6n de los botones en
agua bendita concuerdan con 10 esperado: la malignidad del in
dividuo es directamente proporcional al volumen de gas despren
dido.
Hasta el momento, la reacci6n s610 puede ser estudiada apli
cando el modelo de caja negra [11], ya que aiin no se han identi
ficado los compuestos qufrnicos reaccionantes ni los productos.
Como consecuencia, no existen valores de aH
r
te6ricos contra los
cuales comparar los aH
r
experimentales calculados en este traba
jo. Los iiltimos seran de utili dad para futuras investigaciones en
esta area de la teologfa.
Las muestras recolectadas de gases maleficos desprendidos
seran sometidas en el futuro a un analisis exhaustivo con el fin de
identificar sus componentes.
. Los resultados obtenidos del analisis de inversi6n del grado de
divinidad demuestran que serfa factible que el grado de divinidad
fuera end6geno de cada bot6n, ejerciendo su poder divino sobre el
individuo portador. Sin embargo, para validar esta hip6tesis se de
bera analizar con el transcurso del tiempo el comportamiento de
los individuos cuyos botones han sido invertidos.
DEMDlIENDD PAPERS 147
Referencias
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