Presencia de poligodial y drimenol en Drimys poblaciones de Chile abstracto Drimys winteri (Winteraceae) es un rbol con propiedades medicinales nativas

de Chile. Su corteza contiene poligodial y drimenol en incgnitas, con actividad antimicrobiana y antinociceptivo. El objetivo del presente estudio fue cuantificar poligodial y las concentraciones drimenol en hojas de cinco poblaciones de D. winteri y una de Drimys andina de diferentes regiones de Chile, por El anlisis GC del extracto de hexano. La concentracin de estos compuestos tambin se determin en la corteza de una de las D. winteri poblaciones. En hojas secas concentraciones medias de 0,99% para poligodial y 0,011% para drimenol pudo observar, tanto diferentes significativamente entre las poblaciones estudiadas. Se concluye que poligodial y drimenol estn presentes en las hojas y los corteza de D. winteri y D. andina va, siendo este el primer reporte de la presencia de estos compuestos en esta ltima especie. 1. introduccin El insaturado dialdehdico sesquiterpene poligodial (Fig. 1) es conocida por su actividad antimicrobiana y pungencia (Jonassohn, 1996; Anke y Sterner, 1991). Se describe como un elemento disuasorio de alimentacin para algunos insectos (Van Beek y De Groot, 1986), muestra efectos alelopticos (Malheiros, 2001; Fujita y Kubo, 2003), la actividad antinociceptiva en algunos mamferos (Cechinel et al, 1998;.. Mendes et al, 1998), y un efecto protector gstrico (Matsuda et al, 2002;. Pongpiriyadacha et al., 2003). Poligodial se encuentra en varias especies de plantas (Jonassohn, 1996) y tambin en algunos animales marinos (Cimino et al., 1983). Fue aislado por primera vez de Polygonum hydropiper (Barnes y Loder, 1962; Lunde y Kubo,

2000), pero varios autores informaron de su presencia en las diferentes especies de la familia theWinteraceae (Malheiros, 2001; Dragar

et al, 1998;. McCallion y cols, 1982;. Mun ~ oz et al, 2001).. Actos poligodial contra una variedad de bacterias y hongos, notablemente en Candida albicans (McCallion y cols., 1982), Saccharomyces cerevisiae (Anke y Sterner, 1991; Lunde y Kubo, 2000;. Kubo et al, 2001) y Salmonella (Kubo y Fujita, 2001). Su actividad se debe a mltiples funciones, principalmente en el sentido de interrumpir la membrana (Kubo et al., 2001) y la inhibicin de la enzima ATP sintasa mitocondrial (Lunde y Kubo, 2000). Poligodial es uno de los principales compuestos bioactivos presentes en algunas plantas que se utilizan como especias alimentos y en la medicina tradicional, tales como P. hydropiper en Japn y China, Warburgia spp. en frica (Jonassohn, 1996) y Drimys angustifolia en Brasil (Fromm y Santos, 1997). En Chile continental, plantas Winteraceous estn representados por dos especies de Drimys winteri JR: D. Forster y G. Forster y D. andina (Reiche) R.A. Rodr. Y Quezada (Rodr'guez y Quezada, 1991). D. winteri es un rbol con propiedades medicinales sagrados para los mapuches (Mun ~ oz et al, 2001;. Mo sbach, 1992). El objetivo de este estudio es cuantificar los terpenos poligodial y drimenol en las hojas de cinco chileno poblaciones de D. winteri y una de D. andina. En una de las poblaciones de D. winteri el contenido de poligodial y drimenol en las hojas y la corteza se comparan. 2. Materiales y mtodos 2.1. El material biolgico Completamente expandido y hojas senescentes no se obtuvieron de las poblaciones descritas en la Tabla 1 durante el verano de 2002. Las poblaciones de D. winteri en la Regin VII se posicionaron en el Valle Central, el Cordillera de la Costa y de la Precordillera Andina, respectivamente. La poblacin de D. winteri de Tolhuaca y D. andina poblacin de Conguill'o estaban geogrficamente cerca, ambos ubicados en la Cordillera de los Andes. D. winteri poblacin Huillinco era de la isla de Chilo, que se caracteriza por su clima martimo. Un bono ejemplar de cada especie fue

depositados en el Herbario del Museo Nacional de Historia Natural, Chile (SGO), herbario nmero 150.629 para D. winteri y 150.630 de D. andina. A partir de cada poblacin de 200 g hojas fueron tomadas de cada rbol (Tabla 1) y cada uno muestra analizada por separado. Muestras de corteza de D. winteri de aproximadamente 100 g de peso fresco se obtuvieron durante el invierno de 2002. 2.2. Extraccin y cuantificacin Las hojas recolectadas se extendieron y se secaron a temperatura ambiente. Material de corteza se cort y se sec en un airforced horno a 40 C durante 48 h. El material seco fue de humedad y polvo residual determinado a 105 C durante 1 h. Muestras de 6 g se extrajeron por Soxhlet con hexano durante 3 h, y el hexano se evapor en rotavapor. Poligodial presencia en el extracto seco se determin por TLC y HPLC en comparacin con el compuesto estndar. Poligodial y el contenido drimenol en el extracto se determin por GC disolviendo una muestra pesada de extracto seco en cloroformo.Tiempo de retencin para poligodial vari entre 9,4 y 11,0 min y drimenol entre 5,7 y 6,9 min.2.3. Procedimientos experimentales generales ATLC en Al2O3 placa se lleva a cabo utilizando como fase mvil hexano / acetato de etilo (85:15, v / v). Las bandas se detectaron bajo la lmpara Mineralight UVGL-25. El anlisis por HPLC se realiz utilizando un cromatgrafo lquido MerckeHitachi equipada con una bomba de L6200 y un detector de UV L4000. Las separaciones se lograron en un LiChrospher 60 RP-select Columna B (244 mm 4.0;? 5 mm de tamao de partcula). La fase mvil fue metanol / agua (60:40, v / v) y la velocidad de flujo fue de 1 ml / min, como se ha indicado por Haraguchi et al. (1993). Anlisis de GC se realizaron utilizando un Shimadzu CGS-14A, FID. Separaciones se realiz en una columna CBP5 (25 m? 0,22 mm) y fase mvil era H2. La tasa de flujo fue de 37,1 ml / s y el volumen de inyeccin de 1 ml. La temperatura del inyector fue de 280? C y la de detector de 320? C. El calentador inicial temperatura era de 180 C durante 1 min, el aumento de 4 C / min hasta 265? C, 15? C / min hasta 280? C como

temperatura final durante 2 min. Normas poligodial y drimenol fueron proporcionados por uno de los autores (RY). 2.4. El anlisis estadstico Un diseo completamente al azar, se aplic el anlisis de los datos de la prueba KruskaleWallis. Para corteza y las hojas comparacin, se utiliz la prueba ManneWhitney. Las medias se compararon como se indica por Siegel y Castellan (1988). 3. Resultados y discusin La presencia de poligodial en hojas de Drimys spp. de Chile se confirm por TLC y HPLC comparando Rf y los tiempos de retencin con los estndares. El valor medio ms bajo se observ en el D. winteri poblacin con Huillinco 0,01%, junto con la poblacin de D. andina Conguill'o, y la ms alta en la poblacin septentrional de D. winteri de Pangal con 2.76% (Tabla 1). En hojas, drimenol se encontr en concentraciones ms bajas que van desde cantidades no detectables a casi 0,1%. En cuanto a la concentracin poligodial, se observaron los contenidos drimenol ms bajos en la poblacin Huillinco (D. winteri) y Conguill'o (D. andina). Los valores ms altos en las hojas de D. winteri se encuentran en la poblacin de Tolhuaca. Concentracin Drimenol es mucho ms alto en la corteza que en las hojas, mientras que las diferencias en el contenido de poligodial eran no significativo (Tabla 2).

Media de contenido de drimenol y poligodial variaron considerablemente entre las poblaciones (Tabla 1). Mayor concentracin encontrado en la poblacin ms septentrional podra indicar una relacin entre la latitud y el contenido poligodial, una tendencia no se observ en el caso de drimenol. Tambin se han observado grandes diferencias para el contenido poligodial entre las plantas de diferentes poblaciones en otra Winteraceae tales como Tasmannia lanceolata (Dragar et al., 1998) y Pseudowintera colorata con valores que van desde

1,0 a 4,4% (Perry et al., 1996). Para P. variacin colorata se atribuy a diferentes edades y pocas. Varios investigadores han informado de la presencia de poligodial en la corteza de D. winteri recogido en las poblaciones de Brasil (Cechinel et al, 1998;. Mendes et al, 1998;. El Sayah et al, 1998;.. Malheiros et al, 2001), pero las especies estudiadas en estos documentos corresponde a D. angustifolia como D. winteri no est presente en Brasil (Fromm y Santos, 1997). En el presente estudio, el contenido poligodial en hojas de muestra valores similares a los de la corteza, mientras que Malheiros (2001) no encontr ninguna poligodial en las hojas de D. angustifolia o Drimys brasiliensis. Este compuesto se produce en la planta por los sucesivos oxidaciones de drimenol (Brown, 1994). El presente estudio muestra que los rboles de Pangal podran representar un recurso gentico valioso por su alto poligodial contenido, pero su existencia est en peligro debido a la expansin de la agricultura. Si Drimys chilenas se convierten en una fuente de poligodial o drimenol, la presencia de estos compuestos en las hojas es importante, ya que la cosecha de las hojas es ms sostenible que el lanzamiento de la corteza. Llegamos a la conclusin de que poligodial y drimenol estn presentes en poblaciones chilenas D. winteri y que tambin se producen en D.andina. Agradecimientos Los autores desean agradecer a Sergio Reyes para assistance.we tcnica til agradecemos a Fundacio'n Para La Innovacio'n Agraria (Ministerio de Agricultura de Chile) y Universidad de Talca para el financiamiento del Proyecto FIA N? V-99-0-S-032 de la que este trabajo forma parte. DM agradece a la Universidad Cato'lica del Maule para apoyar su Estudios M.Sc, este trabajo forma parte de su tesis.