UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA DIVISION DE CIENCIAS DE LA SALUD CENTRO UNIVERSITARIO DE OCCIDENTE LABORATORIO DE BIOQUIMICA 2do. Ao de Medicina.

PRACTICA No.4 RECONOCIMIENTO DE PROTEINAS Muchas de las propiedades fisicoqumicas y biolgicas caractersticas de las protenas son reflejo de los aminocidos que las constituyen y las reacciones de tipo cualitativo se utilizan para su detectar la presencia de un aminocidos especficos. 1. Coagulacin de Protenas

Las protenas debido al gran tamao de sus molculas, forman con el agua soluciones coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formacin de cogulos al ser calentadas a temperaturas superiores a los 70 C al ser tratadas con soluciones cidas y alcohol, etc. La coagulacin de las protenas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalizacin por los agentes indicados anteriormente, que al actuar sobre la protena la desordenan por la destruccin de su estructura terciaria y cuaternaria.

Tcnica: Para ver la coagulacin de las protenas se utilizara Albmina y Casena. 1. Colocar en un tubo de ensayo una pequea cantidad de Albmina. 2. Colocar en un tubo de ensayo una pequea cantidad de Casena. 3. Aadir 5 gotas de acido actico (CH 3COOH) y calentar el tubo a la llama del mechero. 4. Anotar Resultados Obtenidos

UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA DIVISION DE CIENCIAS DE LA SALUD CENTRO UNIVERSITARIO DE OCCIDENTE LABORATORIO DE BIOQUIMICA 2do. Ao de Medicina. Reaccin Xantoproteica Es debida a la formacin de un compuesto aromtico nitrado de color amarillo, cuando las protenas son tratadas con Acido Ntrico concentrado (HNO 3). La prueba es positiva en aquellas protenas con aminocido portadores de grupos bencnicos, especialmente en presencia de Tirosina. Si una vez realizada la prueba se neutraliza con una Base (Hidrxido de Sodio al 40% NaOH) vira a un color anaranjado oscuro. Tcnicas: 1. Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de solucin problema (Albmina Casena). 2. Aadir 1 cc. de HNO3 concentrado. 3. Calentar al bao mara a 100 C 4. Anotar Cambios de tipo Cualitativo 5. Enfriar en agua fra. 6. Aadir gota a gota una solucin de NaOH 40% 7. Anotar Cambios de tipo Cualitativo.

Reaccin de Biuret La producen los pptidos y las protenas, pero no los aminocidos, ya que se debe a la presencia del enlace peptdico (-CO-NH-) que se destruye al liberarse los aminocidos. Cuando una protena se pone en contacto con una Base (Hidrxido de Sodio al 40% NaOH), se forma una sustancia compleja denominada Biuret, de frmula:

UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA DIVISION DE CIENCIAS DE LA SALUD CENTRO UNIVERSITARIO DE OCCIDENTE LABORATORIO DE BIOQUIMICA 2do. Ao de Medicina. La sustancia Biuret entra en contacto con una solucin de sulfato cprico pentahidratado (CuSO4.5H2O) diluida, da una coloracin violeta caracterstica. Tcnica: 1. Tomar un tubo de ensayo y poner 3 cc. de la solucin problema (Albmina o Casena). 2. Aadir 2cc. de solucin de NaOH 40%. 3. A continuacin 4 o 5 gotas de solucin CuSO 4.5H2O 4. Debe aparecer una coloracin violeta-roscea caracterstica. 2. Materiales: Soporte Universal Anillo de Metal Rejilla de Asbesto o Tela Metlica Mechero de alcohol etlico al 95% Beacker o Vasos de precipitado de 500 mL Tubos de Ensayo Gradilla 3. Reactivos: Albmina. Casena. CH3COOH HNO3 NaOH 40% CuSO4.5H2O

4. Bibliografa: Gua de laboratorio de Bioqumica Pginas en Internet www.ellaboratorio.co.cc/bioquimica.htm