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Marathon 1943 - uoa Santiago CHILE

-GLUTAMIL TRANSPEPTIDASA
Reactivo para la determinacin cuantitativa de GT en suero.
Para uso en el diagnstico in Vitro. SIGNIFICANCIA CLINICA La enzima -GT forma parte del grupo de las llamadas peptidasas. Su funcin es catalizar la transferencia del grupo glutamil desde un pptido a otro. A pesar de que la mayor concentracin de GT se encuentra localizada en el rin, la mayor fuente de la enzima presente en el suero es el hgado. Niveles elevados de GT se encuentran asociados a enfermedades hepatobiliares y pancreticas; alcohlicos, en enfermedades al miocardio y en los diabticos. FUNDAMENTOS DEL METODO El mtodo VALTEK se basa en la proposicin de Szasz y la modificacin efectuada por Rosalki, utilizando un sustrato sinttico, glutamil-p-nitroanilida (GGPNA) y glicilglicina como activador. GGPNA + glicilglicina
GT

TECNICA Reconstituir el frasco de reactivo con el volumen de agua desionizada indicado en la etiqueta. Llevar el reactivo a la temperatura de reaccin (30 37C). Reactivo reconstituido (ml) 1.00 Muestra (ml) 0.05 Mezclar y transferir a la cubeta del equipo. Incubar por 30 segundos. Leer la absorbancia inicial, y repetir la lectura a intervalos de 60 segundos por los prximos 3 minutos. Adaptaciones para la aplicacin de este reactivo en autoanalizadores estn disponibles a solicitud. Es responsabilidad del laboratorio validar esta aplicacin. CALCULOS Determine el cambio de absorbancia por minuto ( Abs/min). Actividad GT (UI/l)= Abs/min x 2121 FACTOR= Vt x 1000 = 2121 p-NA 405 x P x Vm

p-NA + G-glicilglicina

La GT cataliza la transferencia del grupo glutamil desde el sustrato GGPNA a la glicilglicina. La velocidad de liberacin de la p-nitroanilida es directamente proporcional a la actividad de la GT en la muestra, y se cuantifica midiendo el aumento de la absorbancia a 405 nm. REACTIVOS Conservado entre 2 y 8C, estable hasta la fecha de caducidad consignada en la etiqueta. Estabilidad del reactivo reconstituido: 14 das entre 2 y 8C. Descartar el reactivo si su absorbancia contra blanco de agua a 405 nm. es mayor que 0,850. Buffer-sustrato: (Concentraciones al reconstituir) Glutamil-p-nitroanilida Glicilglicina Buffer TRIS (pH 8,20,1) Estabilizantes y preservantes MUESTRAS Utilizar suero fresco. Los anticoagulantes, particularmente el fluoruro, citrato y oxalato, inhiben la actividad de la GT. La GT es estable por 8 horas a temperatura ambiente, 3 das entre 2 y 8C y una semana a -20C. EQUIPO REQUERIDO Espectrofotmetro o fotocolormetro de filtros capaz de medir absorbancia a 405 nm., bao termorregulado, cronometro y pipetas. 4,00 mM 100 mM 180 mM c.s.

Vt= Volumen total de reaccin p-NA 405= Coef. de extincin molar de la p-NA a 405 nm P= Espesor del paso de luz en la cubeta Vm= Volumen de muestra ADVERTENCIA: Es conveniente analizar junto con las muestras sueros controles valorados. VALTROL-N (cdigo 210-100) y VALTROL-P (cdigo 210-110). El factor podra variar en autoanalizadores por diferencia en el espesor de paso de luz. En este caso utilizar un calibrador srico VALTROL-C (cdigo 210-130) para obtener el factor. Los volmenes de reaccin pueden ser modificados proporcionalmente sin alteracin en los resultados obtenidos Las drogas anticonvulsivas pueden elevar falsamente los valores de la GT. Los rangos normales deben informarse de acuerdo a la temperatura a la cual se realiza el ensayo. Este reactivo contiene Azida de Sodio como preservante. No ingerir. Puede reaccionar con tuberas de cobre o plomo, elimine los residuos con gran cantidad de agua.

E-mail: info@valtek.cl WEB site: http://www.valtekdiagnostics.com. REV. N2

ESPECIFICACIONES DE DESEMPEO: -Linealidad: hasta 400 U/l. Para valores superiores 400 U/l, diluir la muestra con suero fisiolgico y el resultado obtenido se multiplica por el factor de dilucin. -Lmite de deteccin: 2 U/l. -Interferencias: Hemoglobina sobre 0,5 gr/dl, bilirrubina sobre 10 mg/dl y la lipemia (triglicridos sobre 400 mg/dl) podran interferir en la tcnica. Otros medicamentos y sustancias podran interferir (6). -Exactitud: Los reactivos VALTEK no muestran diferencias sistemticas significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales. Los detalles del estudio comparativo estn disponibles bajo solicitud. -Repetibilidad intraserie: n=20 Nivel Normal Patolgico Media (U/l) 34 197 C.V. 1,26% 0,5%

-Reproducibilidad interserie: n=20 Nivel Normal Patolgico Media (U/l) 39,35 160,85 C.V. 2,6 % 1,66%

Estos datos han sido obtenidos utilizando un autoanalizador. Los resultados pueden variar al cambiar de instrumento o al realizar el procedimiento manualmente. RANGOS DE REFERENCIA Temperatura medicin Hombres (UI/l) Mujeres (UI/l) BIBLIOGRAFIA 1. 2. 3. 4. 5. 6. Tietz, N.W., Fundamentals of Clinical Chemistry, 2nd Ed., W.B.Saunders, Philadelphia, PA., 1976. Szasz, G., Clin. Chem. 15 (24), 1969. Rosalki, S.B., et al., Ann. Clin. Biochem. 7(143), 1970. Young, D.S., et al., Clin. Chem. 20(10), 1975. Rosalki, S.B., et al., Clin. Chem. 20(1121), 1974. Young D.S., effects of drugs on clinical laboratory tests, th 4 ed. AACC Press,1995. 25C 5 a 25 4 a 16 30C 7 a 34 6 a 22 37C 10 a 45 7 a 32

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