ASO LTEX DIRETO L/B

1. FINALIDADE Teste de aglutinao para determinao qualitativa e quantitativa da Antiestreptolisina-O (ASO) no soro sem diluio. 2. INTRODUO Uma das toxinas produzidas pelo estreptococo beta-hemoltico a Estreptolisina-O, descrita por Todd em 1932, que possui ao antignica induzindo o organismo a produzir a Antiestreptolisina-O (ASO). O teste em lmina usando partculas de ltex uma alternativa ao uso das tcnicas de hemlise, fornecendo resultados em 3 minutos. 3. IMPORTNCIA CLNICA Vrios processos infecciosos so associados aos estreptococos beta-hemolticos, entre os quais amigdalite, erisipela, febre puerperal e outras, sendo que existem seqelas de tais doenas que podem levar at incapacitao, como o caso da febre reumtica. Assim, com os dados fornecidos pela pesquisa da ASO em conjunto com o exame clnico e outros exames laboratoriais como hemograma e VHS, pode-se diagnosticar corretamente uma infeco estreptoccica. 4. AMOSTRA a- Preparo do paciente Apesar do jejum prvio no ser necessrio, recomenda-se que o paciente seja instrudo para manter o jejum prvio de 8-12h, para evitar uma possvel ocorrncia de fenmenos interferentes tais como a lipemia. b- Tipos de amostra A amostra para a prova o soro (no usar plasma) recm-obtido, separado o mais rapidamente possvel aps a coleta, isento de hemlise ou lipemia. c- Armazenamento e estabilidade Entre a coleta e a execuo da anlise, a amostra deve ser armazenada em geladeira (28 oC) , mantendo-se estvel por at 2 dias (ou 24h na temperatura ambiente), desde que no haja contaminao microbiana. Para manter por perodos maiores, recomendase congelar a amostra abaixo de -10 oC. d- Critrios para rejeio As amostras que se apresentarem hemolisadas, lipmicas, ou com indcios de contaminao microbiana devero ser rejeitadas. e- Precaues e cuidados especiais - Evitar repetidos congelamentos e descongelamentos da amostra; - Todas as amostras devem ser manipuladas com extrema cautela, pois podem veicular diversas doenas infecto-contagiosas (hepatite, SIDA etc.). Seu descarte deve ser feito preferencialmente aps sua autoclavao devendo-se evitar sua eliminao diretamente no meio ambiente. Igual cuidado se recomenda no descarte de outros materiais como ponteiras plsticas, agulhas e seringas. 5. INFORMAES GERAIS SOBRE O PRODUTO a- Princpio de tcnica O soro em anlise colocado em contato com um reagente que contm partculas de ltex revestidas com Estreptolisina-O. A ASO se presente na amostra, provoca a aglutinao visvel a olho nu das partculas do ltex. A reao pode ser tanto qualitativa como quantitativa (atravs da tcnica de diluio da amostra). b- Reagentes - Reagente do Ltex: contm partculas de poliestireno ltex a 0,1%, revestidas com Estreptolisina-O de modo a dar sensibilidade de 200 UI/mL, suspensas em tampo glicina pH 8,2, contendo ainda azida sdica a 0,1% como preservativo. Frascos de 2 ou 4 mL; - Controle ASO Positivo: Soro humano contendo ASO acima de 200 UI/mL e azida sdica a 0,1% como preservativo, pronto para uso. Frascos de 1 mL; - Controle ASO Negativo: Soro humano normal contendo menos de 200 UI/mL de ASO e azida sdica a 0,1% como preservativo, pronto para uso. Frascos de 1 mL. - Tampo glicina concentrado 20 vezes: soluo salina-glicina tamponada (contm cloreto de sdio a 0,9% e glicina 1%), que depois de diluda a 1:20 apresenta um pH final 8,2 e contendo 0,1% de azida sdica como preservativo. Frasco de 10 mL. OBS: Os controles positivo, negativo e tampo glicina acompanham apenas os produtos de cdigo 550108 e 551020. c- Armazenamento e estabilidade Para fins de transporte o conjunto pode ser mantido em temperatura ambiente por at 3 dias. No laboratrio deve ser armazenado em geladeira (2-8 C) aonde permanece estvel at a data de validade impressa em rtulo desde que isento de contaminao qumica ou microbiana. No congelar nenhum dos componentes do conjunto. d- Precaues e cuidados especiais - Os reagentes destinam-se exclusivamente ao uso diagnstico in vitro, no devendo ser ingeridos ou entrar em contato com a pele e mucosas; - Deve-se manipular os reagentes com cautela no sentido de se evitar sua contaminao qumica ou biolgica; - Os controles foram testados para a presena de anticorpos anti-HIV e HbsAg, porm, recomenda-se sua manipulao com a maior cautela possvel; - Os reagentes por conterem azida sdica em sua composio, no podem entrar em contato com metais (como existente em alguns tipos de tubulao), pois h risco de exploso (formao de azidas metlicas); quando de seu descarte, usar gua em abundncia. 6. MATERIAIS E EQUIPAMENTOS NECESSRIOS (porm no includos) - Pipetas graduadas; - Tubos de ensaio 12x75 mm; - gua destilada ou deionizada com condutividade inferior a 0,5 S/cm; - Fonte de luz branca incidente; - Lmina de vidro com fundo preto com 6 delimitaes (551017). 7. PROCEDIMENTO TCNICO 7.1 Prova qualitativa (triagem) a- Deixar que os reagentes e amostras adquiram a temperatura ambiente; b- Adicionar uma gota (0,05 mL) da amostra e uma gota dos controles positivo e negativo (0,04 mL) nas delimitaes da lmina de vidro; c- Agitar vigorosamente o reagente Ltex (em vrtex ou batendo contra a palma da mo 10-15 vezes), e adicionar uma gota (0,04 mL) deste a amostra e controles, homogeneizando a seguir com os bastes prprios; d- Agitar em movimentos circulares vagarosos (cerca de 1 rotao a cada 5 segundos) manualmente (no usar agitador mecnico tipo Kline ou similar) durante 3 minutos ; e- Resultados: observar a lmina sob uma fonte de luz branca incidente, a olho nu, procurando uma aglutinao das partculas do ltex, caracterizando assim a amostra como contendo ASO em concentrao superior a 200 UI/mL, do contrrio, no ocorrendo aglutinao das partculas de ltex, considera-se a concentrao de ASO na amostra como inferior a 200 UI/mL. 7.2 Prova quantitativa a- Em um tubo de ensaio, misturar 0,5 mL de soro e 0,5 mL de tampo glicina diludo (esta ser a diluio 1:2 que corresponder a 400 UI/mL de ASO); b- Identificar 3 tubos de ensaio e proceder conforme abaixo: Diluio 1/2 0,1 mL Tampo Glicina 0,05 mL 0,10 mL 0,15 mL Diluio obtida 1:3 1:4 1:5 UI/mL 600 800 1000

c- Testar as diluies (1:2 a 1:5) conforme o disposto na tcnica qualitativa, substituindo as amostras pelas diluies; d- Resultado: o ttulo considerado como a recproca da maior diluio que apresentar reao positiva (aglutinao visvel a olho nu). Se por exemplo houve aglutinao nos 2 primeiros tubos (1:2 e 1:3) o ttulo ser 1:3, e o soro conter 600 UI/mL de ASO. ATENO: Os conta-gotas do reagente ltex e dos controles dispensam 0,04 mL (40L) por gota, mas o usurio pode a seu critrio, visando aumentar o rendimento do material, utilizar gota de 0,020 mL (20L) dos controles e do reagente ltex para realizar as reaes, medida atravs de pipetadores apropriados. Recomendamos que para tal finalidade sejam usadas apenas ponteiras descartveis a fim de se evitar a contaminao dos reagentes e controles. 7.3 - Precaues e cuidados especiais - Homogeneizar corretamente o ltex antes de executar a prova; - A rotao da lmina muito rpida pode ocasionar a ruptura das ligaes entre a ASO da amostra e as partculas de ltex do reagente causando resultados falso negativos; - Para diluio de amostras usar apenas o tampo glicina; - Manter a lmina de reao sempre limpa, seca e desengordurada antes do uso; - O uso de reagentes com partculas ressecadas pode ocasionar resultados falso positivos, para se evitar, guardar os frascos com os conta-gotas preenchidos; - A intensidade da aglutinao com o soro no diludo no indicativo da concentrao de ASO na amostra analisada ( necessria a execuo da tcnica quantitativa para todas as amostras reativas). 8. RESULTADOS Indicar resultados frente a concentrao de ASO na amostra: - Negativo Reportar como Amostra analisada com concentrao de Antiestreptolisina-O inferior a 200 UI/mL ou - Positivo Reportar como Amostra analisada com concentrao de Antiestreptolisina-O de (Indicar concentrao) UI/mL. Observao: em soros normais, sempre existe ASO em concentrao inferior a 200UI/mL, e por esta razo no se deve expressar um resultado como negativo. Valores inferiores a 200 UI/mL no so significativos para a infeco estreptoccica.

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9. CONTROLE DA QUALIDADE - Materiais necessrios Controles positivo e negativo includos no conjunto, ou amostras de referncia certificadas. - Periodicidade Ao receber o conjunto e preferentemente a cada bateria de amostras, efetuar testes usando os controles que acompanham o conjunto ou amostras de referncia. - Interpretao e avaliao Uma vez que a funo do controle de qualidade garantir que o material usado esteja fornecendo resultados compatveis com os esperados e dentro de um padro de desempenho, espera-se que o controle positivo apresente aglutinao e que o controle negativo no apresente aglutinao. Dispondo-se de amostras de referncia com ttulo conhecido, pode-se avaliar a sensibilidade do material, em periodicidade a ser estabelecida pelo prprio laboratrio conforme seus procedimentos adotados. 10. CARACTERSTICAS DE DESEMPENHO A sensibilidade diagnstica 98% e a especificidade diagnstica 97%. 11. GARANTIA DA QUALIDADE A Laborclin obedece ao disposto na Lei 8.078/90 - Cdigo de Defesa do Consumidor. Para que o produto apresente seu melhor desempenho, necessrio: - que o usurio conhea e siga rigorosamente o presente procedimento tcnico; - que os materiais estejam sendo armazenados em condies adequadas; - que os equipamentos e demais acessrios necessrios estejam em boas condies de uso, manuteno e limpeza. Antes de ser liberado para venda, cada lote do produto submetido a testes especficos, que so repetidos periodicamente at a data de vencimento expressa em rtulo. Os certificados de anlise de cada lote podem ser obtidos junto ao site www.laborclin.com.br. Em caso de dvidas ou outras informaes, contatar o SAC - Servio de Assessoria ao Cliente atravs do telefone 0800410027 ou pelo e-mail sac@laborclin.com.br. Quaisquer problemas que inviabilizem uma boa resposta do produto, que tenham ocorrido comprovadamente por falha da Laborclin sero resolvidos sem nus ao cliente, conforme o disposto em lei. 12. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS 1.Bach, G.L.; Wiatr, R.A.; Anderson, T.O. & Cheatie, E. The latex ASO test: A rapid screening procedure for detection of elevated Antiestreptolisin titers. Am. J. Clin. Path., Vol. 52, n.1, p. 126-128, 1969. 2. Hodge, B.E. & Swit, H.F. Varying hemolytic and constant combining capacity of streptolysins, J. Exp. Med., 58, p. 277-287, 1933. 3.Ingram, G.B.P.& Hughes, J.E.P. A modified rapid slide test for antiestreptolysin-O. Am. J. Clin. Ath., V.25, p. 543-544, 1972. 4. Kelin, G.C.; Baker, C.N. & Moody, M.D. Comparision of antiestreptolysin-O latex screening test with the antiestreptolysin-O hemolytic test, App. Mic., V. 19, . 60-61, 1970. 5. Kalbak, K. The antiestretolysin reaction. The State Serum Institute Denmark, 1947. 6. Palieri, S. Validit del test al lattice nella degli anticorpi antiestreptolisinici e proposta per lutilizzazione del test nella titoloazone. Quad Sclavo diagn. V5, n2, p. 236-241, 1969. 7. Rantz, L.A. and Randal, E. A modification of the technic for determination of the antiestreptolysin titer. Proc. Soc. Exper. Biol. and Med n59, p. 22-25, 1945. 8. Todd, E.W. Antigenic streptococal hemolysin, J. Med. N 55, p.267-280, 1932. 9. Todd, E.W. A comparative sorological study of streptolysins derived from human and from animal infections, with notes on pneumococal hemolysin, tetanolysin and Staphylococcus toxin. J. Path. And Bact., N 39, p. 299-320, 1934. 10. Robins, S. et al.: Patologia estrutural e funcional, 4a ed., G. Koogan, 1991. 11. Henry, J.B. et al.: Diagnsticos clnicos e conduta teraputica por exames laboratoriais, 16a. ed., Ed. Manole, 1983. 13. REGISTRO NA ANVISA: 100.970.10119 14. APRESENTAO 551018 ASO Ltex 2mL- 50 testes c/ controle 551020 ASO Ltex 4mL- 100 testes c/ controle 551021 ASO Ltex 4mL- 100 testes s/ controle

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