UNIVERSIDAD AUTNOMA DE YUCATN

FACULTAD DE INGENIERA QUMICA

BIOQUMICA GENERAL

DR. DAVID BETANCUR

PRCTICA NO.1 PROPIEDADES DE LOS CARBOHIDRATOS INTEGRANTES DEL EQUIPO: Bardales Echeverra Nelly Julie Crdenas Bates Ilse Garca Loria Jess Manuel Flores Mix Felipe Mex Adolfo

5 DE SEPTIEMBRE DEL 2013

PRCTICA NO. 1 PROPIEDADES DE LOS CARBOHIDRATOS. INTRODUCCIN: Los hidratos de carbono, sacridos o glcidos se definen sencillamente, como polihidroxialdehidos o polihidroxicetonas y sus derivados. Los monosacridos tambin llamados azucares sencillos, estn constituidos por una sola unidad de polidroxialdehido o polihidroxicetonas, el monosacridos mas abundante es la D-glucosa. La glucosa es un combustible esencial para el sistema nervioso central, se supone que los carbohidratos juegan un papel importante en la funcin memorstica y cognoscitiva. Aunque parece ser que existe una relacin entre los niveles de glucosa y el proceso de la memoria, el significado clnico de esta relacin todava no ha podido dilucidarse. Los carbohidratos son los elementos ms abundantes de la dieta, es fcil entender que los caminos metablicos en que intervienen estos compuestos son los de mayor trnsito en las clulas en general. Aunque los carbohidratos constituyen molculas importantes en numerosas funciones de los seres vivos, puede considerarse que su funcin primordial es la energtica. Son los intermediariosms directos y abundantes que existen entre la energa solar y las funcio1nes celulares. La energa solar mueve a las clulas de todos los organismos, debido a que existen sistemas para convertir en la energa qumica de los enlaces de los carbohidratos. Estos pueden ser aprovechados luego por otros numerosos sistemas, capaces de transformar la misma energa en la de enlaces de otras molculas como el ATP. Las fuentes de los carbohidratos son numerosas, pero en general son casi todas de origen vegetal. Excepto algunos casos, el contenido de carbohidratos en los alimentos de origen animal es relativamente pequeo. La forma de mayor abundancia est representada por los almidones, presentes en numerosos vegetales que son empleados para la elaboracin de alimentos. Los alimentos con elevado contenido en carbohidratos proporcionan saciedad a corto plazo. Como la grasa se almacenams eficiente que el exceso de carbohidratos, la utilizacin de alimentos de alto contenido en carbohidratos tiende a reducir el riesgo de obesidad a largo plazo. Existe una gran controversia con respecto a hasta qu grado el azcar y el almidn favorecen la obesidad. No existe evidencia directa, basada en los datos obtenidos de estudios en sociedades de alto nivel de vida, que implique a ninguno de estos grupos de carbohidratos en la etiologa de la obesidad. La fraccin digestible de los hidratos de carbono se componen de los azucares simples (monosacridos y disacridos) de rpida absorcin de los cuales destacan glucosa, fructosa, sacarosa, y los polisacridos (almidones, dextrinas y fculas) de absorcin lenta en

el intestino, formados por molculas de glucosa unidas por enlaces , capaces de ser hidrolizadas por las enzimas digestivas humanos. una tcnica muy usada para la determinacin de estos azucares es el uso de diferentes tipos de test los cuales estn Benedig, Molisch, Seliwanoff, Lugol.

OBJETIVO Identificar las diferentes reacciones de los carbohidratos, de acuerdo a su estructura. MATERIALES Y REACTIVOS

Materiales 20 tubos de ensaye 16 x 150 mm 2 pipetas graduadas de 2mL 4 pipetas graduadas de 5 mL 3 pipetas graduadsa de 1 mL 1 vaso de ppt. De 250 mL Piseta Gradillas 5 vasos de ppt. 50 mL Placa de calentamiento Pinza para tubo de ensaye Perilla de seguridad Esptula Varilla de vidrio 2 vidrio de reloj 2 matraces volumtricos de 100 mL Probeta de 100 mL Guantes de asbesto

Reactivos Solucin de glucosa al 1% Solucin de fructosa al 1% Acido clorhdrico Reactivo de Molish Solucin de sacarosa al 1% Solucin de almidn al 1% Reactivo de Baerfoed Reactivo de seliwanoff Acido sulfrico Reactivo de Lugol

PROCEDIMIENTO: Prueba de molisch: determinacin de carbohidratos. 1. En un tubo de ensaye se verti 2 mL de la solucin problema. 2. Se agregaron 0.5 mL de reactivo de Molisch. 3. Se aadieron 2 mL de cido sulfrico Q.P., agregndolo cuidadosamente de tal manera que se form una capa debajo de la solucin acuosa. Prueba de Barfoed: determinacin de monosacridos (glucosa) 1. En un tubo de ensayo se viertieron 5 mL de la solucin problema. 2. Se aadieron 5 mL del reactivo de Barfoed 3. Se introdujo el tubo de ensaye en un bao de agua hirviendo durante 4 minutos. Prueba de Seliwanoff: determinacin de fructosa. 1. Se coloc 1 mL de la solucin problema en un tubo de ensaye. 2. Se aadieron 5 mL del reactivo de Seliwanoff. 3. Se calient la mezcla en un bao de agua hirviendo durante 10 minutos. Prueba de Lugol: determinacin de almidn. 1. Se acidific la solucin problema (2 mL) con HCl Q.P.; se comprob con papel indicador de pH. 2. Se viertieron 5 gotas de Lugol en un tubo de ensaye que contuvo la solucin problema acidificada. OBSERVACIONES: Al poner a calentar a bao mara para hacer el test Barfoed no se puso el reactivo correcto, por lo tanto no se vea la coloracin azul, se tuvo que repetir de nuevo. En el test de Seliwanoff , todas las pruebas a excepcin de la prueba con almidn nos dieron positivo cuando no debera ser de ese modo; Se supone por algn error al verter la solucin problema y/o por contaminacin de los reactivos. Los reactivos estaban previamente preparados al llegar al laboratorio.

RESULTADOS Y DISCUSIONES. Se hizo la identificacin de carbohidratos a partir de 4 soluciones problema por medio de una reaccin colorimtrica como base, los principales test son: Molisch, Barfoed, Seliwanoff, Lugol (ver imagen 5, 6, 7 y 8), ya que estos son principalmente para la deteccin de hexosas y pentosas contenidas en las muestras, los test son para determinacin cualitativa mas no cuantitativa. Las soluciones problemas estaban

compuestas por diferentes carbohidratos preparados al 1% (ver anexos) como se pueden ver en la Tabla 1 que se ve a continuacin.

Tabla 1: Resultados de los test aplicados a las soluciones de carbohidratos.

Solucin Sacarosa Test Molisch Barfoed Seliwanoff Lugol x Glucosa x Fructosa X x Almidn X X

Al hacer el test de Molisch se agreg el reactivo para su preparacin (ver anexos) donde dieron positivos todos, este nos indica la presencia de carbohidratos en la solucin, el -naftol reacciona con furfural e hidroximetilfurfural, se detecta una respuesta positiva por la formacin de un anillo de color violeta(ver imagen 5) en la superficie del tubo de ensaye en uni de los lquidos. Para el test de Barfoed se determina glucosa, por lo tanto dieron como positivos la glucosa y la sacarosa, ya que la sacarosa esta conformado por glucosa y fructosa haciendo que este reaccionaria positivo con el reactivo, formando un precipitado de color rojo el cual est indicando la presencia de la glucosa ( ver imagen 5). Posteriormente se realizo el test de Seliwanoff donde se utiliza para determinar la fructosa reaccionando como positivos la fructosa, glucosa y sacarosa, este ltimo es un disacrido formado por glucosa y fructosa de tal forma que muestra una coloracin al test (ver imagen 7).Por ltimo se realiz el test de Lugol donde se determina almidn mostrndonos una coloracin azul (ver figura 6) en este el nico que dio positivo fue el almidn ya que los dems carbohidratos no contenan a este.

Reaccin de Seliwanoff. En la prueba de Seliwanoff, se utiliza el cido clorhdrico en la reaccin de deshidratacin (del monosacrido) y el resorcinol (1,3-dihidroxibencino) en la reaccin de condensacin del derivado del furfural. Esta es una prueba cualitativa para las cetohexosas y aldohexosas. El hidroximetilfurfural se forma rpidamente a partir de cetohexosas, y ms lentamente a partir de aldohexosas. El tratamiento prolongado, provoca la isomerizacin de la glucosa en fructosa, por lo que tambin la glucosa puede dar la prueba positiva. Las pruebas involucradas en la reaccin de Seliwanoff son:

Prueba de Lugol. La prueba de Lugol no es precisamente una reaccin qumica, los polisacridos forman complejos coloreados con el yodo, lo cual se debe a la adsorcin del yodo en sus cadenas. Los polisacridos lineales, como la amilosa del almidn, generan complejos de un color azul intenso; los que tienen ramificaciones, como la amilo pectina del almidn y el glucgeno, forman complejos yodados de color menos intenso.

Prueba de Molisch.

En la prueba de Molisch, se utiliza el acido sulfurico en la reaccion de deshidratacion y el alfa-naftol en la reaccion de condensacion del furfural. Al aplicar esta prueba cualitativa, todos los carbohidratos o glcidos producen un complejo de color morado; por eso se dice que es una prueba general: por medio de ella, puede determinarse si una sutancia es un carbohidrato de cinco o mas carbonos. Las reacciones que involucra esta prueba son las siguientes:

Prueba de Barfoed Es una reaccin para identificar monosacridos, aunque algunos disacridos ( los reductores) dan positiva la reaccin, pero con ms tiempo de calentamiento, ya que as se hidroliza el disacrido. El fundamento radica en la reduccin del acetato cprico a o x i d o cuproso, el cual forma un precipitado color rojo ladrillo

Imagen 5: Test de Barfoed: reaccionando positivo la fructosa y sacarosa.

Imagen 6: Test de Lugol: dando positivo nicamente el almidn.

Imagen 7: Test de Seliwanoff: dando como positivo la aparicin del color en fructosa y glucosa y sacarosa.

Imagen 8: Test de Molisch: Dando positivo a carbohidratos la aparicin de la coloracin.

CONCLUSIONES: Se hizo la determinacin de diferentes soluciones de carbohidratos al 1 % (glucosa, sacarosa, fructosa, almidn), por medio de una reaccin colorimtrica usando los test: Molisch, Barfoed, Seliwanoff, Lugol. Ya que por medio de la estructura nos darn una coloracin atribuyendo como positivo al test, al hacer el test de Molisch no dieron como positivos todas las soluciones ya que este test identifica los carbohidratos en las soluciones, dando la aparicin de un color azul intenso (ver imagen 8), para el test de Barfoed el determina la glucosa en este dieron positivos la glucosa y sacarosa, este ltimo ya que su estructura est conformada por glucosa y fructosa ( ver imagen 1) por lo tanto dio positivo al test. Para el test de Seliwanoff en este dan como positivos los que contengan Fructosa, por consiguiente nos dan como positivo la Fructosa y sacarosa, este ltimo ya que en su estructura tiene fructosa (ver imagen 1) y por ltimo se realizo el test de Lugol el cual identifica almidn por lo consiguiente la nica solucin que dio positiva es la que contena almidn.

BIBLIOGRAFA:

Pea Arroyo. Bioqumica. Segunda edicin. Editorial Limusa, S.A. de C.V., 1988. Pg. 255- 258. FAO, OMS. Los carbohidratos en la nutricin humana. Primera edicin.1997. Pg. 19-23. Albert L. Lehninger.Bioqumica las bases moleculares de la estructura y funcin celular. Segunda edicin. Ediciones omega, S.A. Barcelona, 1995. Pg. 255-257. Quesada Mora Silvia. Manual de experimentos de laboratorio para bioqumica. Editorial universal estatal a distancia. San Jos Costa Rica, 2007.

ANEXOS: Preparacin de reactivos: Reactivo de Molisch Disolver 0.1g de -naftol en 10 mL de etanol. Reactivo de Barfoed: Disolver 6.5g de acetato de cobre en 100 mL de solucin de acido actico al 1 %. Reactivo de Seliwanoff. Disolver 0.05g de resorcinol en 100 mL de HCl 5 N.

Preparacin de solucin de carbohidratos. Glucosa al 1%. Pesar un gramo de glucosa y aforar a 100 mL de agua destilada. Sacarosa al 1%. Pesar un gramo de sacarosa y aforar a 100 mL de agua destilada. Fructosa al 1% Pesar un gramo de fructosa y aforar a 100 mL de agua destilada Almidn al 1%. Pesar un gramo de almidn y aforar a 100 mL de agua destilada.