Teores reduzidos de cido rico ( abaixo de 2mg/dL) so encontrados na xantinria, aps administrao de alopurinol.

CARACTERSTICAS DO DESEMPENHO Foram realizados 40 testes em amostras cujo teor de cido rico situava-se no intervalo de 2,34 a 11,43mg/dL. Estes ensaios foram realisados em paralelo com uma metodologia de referncia. A comparao do kit de Urato Lquido Doles (Y) com um produto de referncia (X), deu origem seguinte equao de regresso linear: Y= 0,98X, sendo o coeficiente de correlao 0,99. Testes mostram uma recuperao mdia entre 99 e 100,7% Repetitividade: foram realizadas 20 dosagens sucessivas, com 3 amostras tendo-se os seguintes resultados:
Amostra 1 Amostra 2 Amostra 3

Diluio da matriz: estudos sucessivos de diluio da matriz mostraram que no h interferncia na sensibilidade diagnstica da presente metodologia de Uricase. Substncias interferentes: cido Ascrbico em concentraes superiores a 5mmol/L aumentam, artificialmente, os nveis sricos de cido rico. A presena de surfactante na formulao impede _ 1000mg/dL) que soros lipmicos (triglicrides > produzam resultados artificialmente elevados. BIBLIOGRAFIA CONSULTADA Barham, D., Trinder, P., Analyst 97, 142, 1972. Fossati, P.,Prencipe, L., Berti, G., Clin. Chem. 26.227. Pagana K.D., Mosbys Diagnostic and Laboratory Test Reference, 754 -758, 1992. Bishop M.L; duben-Engelkirk J.L; Fody E.P.; Clinical Chemistry, 444 - 446, 1992. Tibrcio, H.M., Controle Interno da Qualidade Analtica, 1aed. maro/1995. Doles: dados de arquivo TERMOS E CONDIES DE GARANTIA DA QUALIDADE DO PRODUTO As garantias do fabricante ao consumidor seguem estritamente as relacionadas na Lei no 8.078, de 11 de setembro de 1.990 - Cdigo de Defesa do Consumidor. Os reagentes que compem este sistema para diagnstico so garantidos na sua performance, reprodutibilidade e qualidade at a data de vencimento. Os produtos que apresentarem problemas tcnicos comprovados sero substitudos, sem nus para o consumidor. Doles Reag. Equip. para Laboratrios Ltda. CNPJ: 01.085.513/0001-05 Rodovia BR 153, Km 493, Conjunto Palmares CEP: 74775-027 Goinia - GO Brasil e-mail: doles@doles.com.br M.S.: Reviso: no 10231810083 15 (03/2010)

URATO ENZIMTICO LQUIDO

FINALIDADE Sistema enzimtico para dosagem do cido rico no soro, plasma ou urina. Somente para uso diagnstico in vitro. PRINCPIO O cido rico no soro quantificado atravs das seguintes reaes enzimticas: 1- cido rico + O2 + 2H2O CO2 + H2O2 uricase Alantona +

BIOQUMICA CLNICA

EQUIPAMENTOS NECESSRIOS NO FORNECIDOS Espectrofotmetro ou fotocolormetro capaz de medir a absorvncia em 510nm ou filtro verde. Tubos de Ensaio. Pipetas graduadas. Pipeta semiautomtica de 25L. Ponteiras descartveis. Banho maria (37oC). Cronmetro. ARMAZENAMENTO E ESTABILIDADE DOS REAGENTES Reagente de Cor: armazenar temperatura de 2-8oC, at a data de vencimento indicada no rtulo. Ao longo do tempo, a soluo pode adquirir tonalidade rsea escura, no interferindo nos resultados. Soluo padro 7mg/dL: armazenar temperatura de 2-8oC. Estvel at a data de vencimento indicada no rtulo. CUIDADOS E PRECAUES COM O USO DOS REAGENTES Todos os reagentes so somente para uso diagnstico in vitro. Seu manuseio deve ser cuidadoso, evitando-se o contato com a pele e mucosas. Havendo contaminao acidental, lavar a rea afetada em gua corrente. O descarte do material utilizado dever ser feito obedecendo-se os critrios de biossegurana estabelecidos pelo Laboratrio, de acordo com as normas locais, estaduais ou federais. O Reagente de Cor deve ser manipulado com cuidado, evitando a introduo de pipetas no mesmo. Pipetas contaminadas com detergentes podem levar deteriorao do mesmo.
Observar a simbologia constante nos rtulos do produto:

2- 2H2O2 + 4 aminoantipirina + cido 2,4 diclorofe nolsulfonato peroxidase N (4-antipiril)-2, Cloro - 4 Sulfonato-p-benzoquinonamonoimina + 2H2O O produto formado pela oxidao da 4-aminoantipirina na reao 2 de colorao avermelhada e a intensidade da cor, diretamente proporcional concentrao de cido rico no soro. A cor vermelha formada medida em espectrofotmetro ou fotocolormetro com absoro mxima em 510nm ou filtro verde. METODOLOGIA Uricase REAGENTES Reagente de Cor : Tampo de fosfatos 100mmol/L, pH 7,8, contendo Diclorofenolsulfonato 4mmol/L, 4-aminoantipirina 0,5mmol/L Uricase > = 120U, > Ascorbato Oxidase > 4.980U, Peroxidase = = 1.080U. Soluo padro 7mg/dL: soluo padro de cido rico 7mg/dL. APRESENTAO Reagente de Cor Soluo Padro 7mg/dL

Concentrao
(mg/dL) Desvio padro Coeficiente de variao (%)

2,87 0,06 2,09

6,23 0,13 2,09

10,50 0,18 1,71

Reprodutibilidade: foram realizadas 20 dosagens durante 20 dias consecutivos tendo-se os seguintes resultados:
Concentrao (mg/dL) Desvio padro Coeficiente de variao (%) Amostra 1 Amostra 2 Amostra 3

2,50 0,07 2,80

6,87 0,13 1,89

10,94 0,21 1,92

Especificidade : a presente metodologia especfica para determinao de cido rico. No h reaes inespecficas com outras substncias. S en s ib ilidad e : a a b s o r v n c i a d e 0 , 0 3 5 corresponde a 1mg/dL de concentrao de cido rico, quando a reao corada quantificada em espectrofotmetro com banda espectral inferior a 7nm, passagem de luz de 10mm e comprimento de onda de 510nm. A sensibilidade do sistema est diretamente relacionada sensibilidade do aparelho utilizado pelo laboratrio.

2 x 80mL 1 x 3mL

NMERO DE TESTES Manual 160 testes (25L amostra/1mL Reag. de cor) Automtico (*) 600 testes (*) A quantidade de testes na automao varivel de acordo com o equipamento. Protocolos de automao encontram-se disponveis no site Doles ou atravs do Servio de Atendimento ao Consumidor.

Irritante

AMOSTRA Soro, plasma ou urina. A amostra permanece estvel 7 dias, entre 2-8oC, ou 6 meses, a 20oC negativos. Evitar amostras com traos de hemlise. A amostra de urina (24hs) dever ser colhida com conservantes (sugere-se NaHCO3 - 5gramas). Todas as amostras biolgicas devero ser consideradas como potencialmente infectantes.

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SAC: (62) 3269 0000 (Grande Goinia) SAC: 0800 644 6433 (Demais localidades)

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PROCEDIMENTO TCNICO O Reagente de cor est pronto para uso, e deve estar temperatura ambiente no momento do uso. Soro/Plasma Identificar 03 tubos com B(branco), P(padro) e T(teste). Proceder como segue:

Branco Reagente de Cor Padro Amostra 1mL - -

Padro 1mL 25L -

Teste 1mL 25L

calibrao (F) segundo a Lei de Beer. A reao linear at 14mg/dL ( ver curva acima). Para valores acima, diluir a amostra com soluo fisiolgica, realizando nova dosagem. Multiplicar o valor encontrado pelo fator de diluio. O kit de Urato Lquido Doles, possui padro no intervalo de linearidade da metodologia. O Laboratrio deve realizar o ensaio com o padro que acompanha o kit e calcular seu fator de calibrao (F) de acordo com o exemplo abaixo. O fator deve ser refeito periodicamente e a cada lote do produto. Os padres utilizados no preparo da curva de calibrao foram ajustados tendo como referncia: Human Serum 909b (NIST). CLCULOS SORO/PLASMA cido rico (mg/dL) = x7 Absorvncia Padro Exemplo: Leituras: Padro : 0,247 Teste : 0,150 0,150 cido rico (mg/dL) = x 7 = 4,3 0,247 Como a reao corada segue estritamente a lei de Beer, basta a determinao de um fator(F) para clculo dos resultados. 7 Fator = Absorvncia cido rico (mg/dL) = absorvncia Teste x F Absorvncia Teste

URINA Volume urinrio de 24 horas = 1.400mL cido rico (mg/dL) = 0,245 Exemplo: Leitura: Absorvncia teste Fator

= 0,160 = 28,57

cido rico (mg/dL) = Absorvncia teste x fator (F) x 10 cido rico (mg/dL) = 0,160 x 28,57 x 10 = 45,7 Clculo para excreo de cido rico em urina de 24h. cido rico / urina de 24h =
cido rico / urina de 24h = 100
cido rico mg/dL x vol. urina 24h (mL)

4- As pipetagens devem ser precisas. 5- O nvel da gua do banho maria deve ser supe rior ao nvel dos reagentes nos tubos de ensaio. A temperatura (37 o C) deve ser rigorosamente observada. 6- O uso de soro controle de referncia deve ser uma prtica rotineira do laboratrio. Recomendase utilizar um soro controle com valor na faixa de normalidade (soro controle N - Doles) e outro soro controle de valor elevado (soro controle P - Doles). VALORES DE REFERNCIA recomendado que cada laboratrio estabelea, na populao atendida, sua prpria faixa de valores de referncia. Como orientao, sugerimos os seguintes valores: Soro Homens adultos Mulheres adultas: Crianas Recm-nascidos Valores crticos

Misturar por agitao e incubar 5 minutos em banho maria a 37oC ou 10 minutos temperatura ambiente (20 30C). Proceder leitura das absorvncias em espectrofotmetro ou fotocolormetro em 510nm (510 530nm), zerando o aparelho com o branco. A cor desenvolvida estvel durante 30 minutos temperatura ambiente (20-30oC). Urina Diluir a amostra (urina) 1:10 (1mL de urina + 9mL de gua destilada ou deionizada). Efetuar o procedimento tcnico e multiplicar o valor encontrado por 10 para se ter a concentrao final em mg/dL. CURVA DE CALIBRAO
0,600 0,500 0,400

100
x 1400 = 639,9mg/urina de 24hs

45,7

EXPRESSO DOS RESULTADOS EM UNIDADES S.I. cido rico mmol/L = cido rico mg/dL x 0,0595 LIMITAES DO SISTEMA Para se obter timo desempenho do sistema, necessrio que o procedimento tcnico seja rigorosamente seguido conforme instruo de uso. Qualquer alterao no procedimento tcnico, poder levar a resultados errneos. Uso recente de contraste para raio x pode levar a valores baixos de cido rico. Algumas drogas como: lcool, cido ascrbico, aspirina (baixas doses), cafena, diurticos, epinefrina, levodopa, metildopa (aldomet) e teofilina, podem elevar os nveis sricos de cido rico. Drogas como: alopurinol, corticoesteroides, estrgenos, infuso de glicose e manitol, podem diminuir os valores sricos de cido rico. CONTROLE DA QUALIDADE DO SISTEMA 1- A limpeza e a secagem adequada do material a ser utilizado so de fundamental importncia para a estabilidade dos reagentes e obteno de resultados corretos. 2- A gua utilizada na limpeza do material deve ser de boa qualidade. 3- Colunas deionizadoras saturadas liberam ons diversos, aminas e agentes oxidantes que deterioram os reagentes.

: : : :

2,5 - 7,0mg/dL 1,6 - 6,0mg/dL 2,5 - 5,5mg/dL 2,0 - 6,2mg/dL > 10mg/dL

Urina Adultos/Idosos/Crianas : 24 horas

250 - 750mg/urina

Padro Absorvncia

Conc. (mg/dL)

0,300 0,200 0,100 0,000 0 5 10 15 20

Concentrao (mg/dL)

1 2 3 4 5 6 7 8

0 0.088 0.176 0.274 0.352 0.423 0.494 0.510

0 2,5 5 7 10 12 14 16

Para a determinao do fator, recomenda-se a dosar em triplicata o padro, ler as absorvncias e tirar a mdia aritmtica das mesmas. Exemplo: Leituras: Padro : 0,247 / 0,246 / 0,245 Mdia = Fator = 0,247 + 0,246 + 0,245 3 7 0,245 = 0,245

Obs.: No utilizar esta curva para determinar o resultado de seu ensaio. A curva de calibrao constituda pela relao grfica dos valores das absorvncias com os valores das concentraes, de um conjunto de solues padro. A curva de calibrao demonstra a linearidade da reao at uma determinada concentrao, na qual pode ser determinado um fator de

Fator = 28,57 Leitura do teste = 0,150 cido rico (mg/dL) = 0,150 x 28,57 = 4,3

SIGNIFICADO CLNICO O cido rico um metablito das purinas. Vrias patologias apresentam cido rico elevado, sendo trs as principais: gota, aumento na renovao de cido Nuclico e problemas renais. A gota primria uma doena encontrada principalmente em homens, sendo feito o diagnstico usualmente entre os 30 e 50 anos. Nesses casos, os teores de cido rico se encontram acima de 10mg/dL, favorecendo a formao de clculos renais. Outras causas de hiperuricemia so as enfermidades que aumentam a renovao de cido Nuclico como leucemia, linfoma, mieloma mltiplo ou policitemia. A hiperuricemia comum na toxemia da gravidez. Nveis elevados podem ser achados tambm aps a ingesto de dieta rica em purinas ( fgado, rins, mariscos, etc.). A enfermidade renal crnica promove elevaes nos nveis de cido rico.

Absorvncia

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