Facultad de Ciencia y Tecnologa de los Alimentos Universidad Nacional del Comahue Villa Regina CIDOS NUCLEICOS Problema 1.

Dibuje detalladamente la estructura de los nucletidos. A qu corresponde la denominacin prima en los carbonos del azcar? Problema 2.Detalle al reaccin de formacin del enlace fosfodister el la polimerizacin de nucletidos. Qu molculas biolgicas estn compuestas por nucletidos? Problema 3.Determine las principales diferencias entre los cromosomas de eucariotas y procariotas. Problema 4. Qu efectos tienen los siguientes reactivos sobre el valor de la Tm de un dsDNA (ADN doble hebra)? a) Urea 7M b) Formamida 90% c) Altas concentraciones de NaCl d) Agua pura e) La protena 32 del fago T4 que cataliza el desenrollamiento del ADN Problema 5. Cul es el comportamiento de un ADN de doble hebra ante un proceso de calentamiento gradual? Por qu? Se le ocurre alguna manera sencilla de poner en evidencia lo que sucede? Disee un mtodo mediante el cual los cambios en el ADN inducidos por la temperatura puedan ser expresados en forma cuantitativa y monitoreados en forma continua. Problema 6. Qu sucede con la estructura del ADN si una solucin calentada a 80C es posteriormente enfriada? El resultado es el mismo si el enfriamiento es gradual respecto a un enfriamiento rpido? Por qu? Problema 7. Una muestra de cido nucleico de origen desconocido se centrifuga en un gradiente de cloruro de cesio (densidad: 1,25-1,8 g/ml) y se obtiene una banda. Si se centrifuga en un gradiente igual una muestra del mismo cido nucleico que fue calentada por encima de su Tm y enfriada rpidamente se obtiene una banda de menor densidad que la original, con la mitad del material. Al recuperarse el material del tubo se determin que la cantidad del mismo fue aproximadamente 100 g de cido nucleico por ml (5 veces ms diluido que las muestras originales). En otro anlisis, una muestra del cido nucleico problema se hidroliz y se analiz su composicin: 26%G, 12%U, 24%A, 12%T y 26%C. En base a estos datos. a) Cules son las posibles estructuras de los componentes de la muestra? b) Si la muestra calentada y enfriada rpidamente se somete a una electoforesis en agarosa, cul sera el resultado? c) Describir el mtodo utilizado para la secuenciacin de bases nucleotdicas (Sanger) Problema 8. En el experimento de Meselson Stahl una muestra de ADN obtenida de bacterias luego de una marcacin in vivo con 15N, seguida por una generacin cultivada en un medio con 14N, fue desnaturalizada por calor antes de centrifugar en un gradiente de densidad de CsCl. Qu resultados vieron luego de llegar al equilibrio? Para qu sirven esos resultados?