REMEDIACIN DE SUELOS CONTAMINADOS CON HIDROCARBUROS POR LOS POZOS PETROLFEROS ABANDONADOS EN PIRIN PUSE-HUANCANE

RESUMEN
El presente Proyecto de Investigacin REMEDIACIN DE SUELOS CONTAMINADOS CON HIDROCARBUROS POR LOS POZOS PETROLFEROS ABANDONADOS EN PIRIN PUSI-HUANCANE, se realizar en base a que los pozos petrolferos de la zona de Pirn que han sido abandonados por mucho tiempo y con ninguna alternativa de mitigacin hasta ahora Por lo cual estos derrames de los hidrocarburos han contaminado la zona de Pirin y !hualani el suelo, aire y aguas durante la e"ploracin y e"plotacin de recursos naturales #a t$cnica de la biorremediacin es ampliamente aplicada en suelos, aguas subterrneas y superficies contaminadas con Petrleo crudo, hidrocarburos, combustibles y entre otras ms El costo es mucho menor en comparacin con tecnologas ms convencionales %iorremediacin es una tecnologa de tratamiento com&nmente utilizada para limpiar suelos contaminados accidentalmente con hidrocarburos de petrleo #a t$cnica est basada en la degradacin de compuestos orgnicos hasta bi"ido de carbono, mediante la actividad de microorganismos vivos que son utilizados como fuente de carbono y energa 'unciona &nicamente en suelos y cuerpos de agua donde los contaminantes son biodegradables o biotrasformables El ob(etivo principal es determinar e"perimentalmente las condiciones de operacin ms favorables para efectuar la remediacin de un suelo contaminado con hidrocarburos, mediante el proceso biorremediacin por composteo)biopilas

#a metodologa consiste en tomar muestras de suelo de lugares contaminadas con hidrocarburos, que han sido de(ados varios a*os #a muestra obtenida ser transportada a un lugar y luego a los #aboratorios de la +,!-P #uego se seguir un control de monitoreo y seguimiento del e"perimento durante dos a*os, el control se basar en determinar la te"tura del suelo, contenido de humedad, temperatura, p. y otros ms PALABRA CLAVE: /uelo contaminado, %iorremediacin, composteo, .idrocarburos y Pirin

PERFIL DEL PROYECTO DE INVESTIGACIN

TITULO: 0E12I!3I4, 2E /+E#5/ 35,6!1I,!25/ 35, .I2053!0%+05/ P50

#5/ P575/ PE605#8'E05/ !%!,25,!25/ E, PI0I, P+/I-.+!,3!,E9

EJCUTOR ASESOR I 1.1 : :

PROBLEMA PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El problema de la contaminacin de suelos y aguas ms habitual en nuestro pas y en el mundo lo constituye, sin duda alguna, las fugas de combustibles desde depsitos de almacenamiento subterrneo, combustibles fsiles, fugas por los orificios de revestimientos de pozos petrolferos y fugas de los pozos petrolferos abandonados y mal sellados 2e un tiempo a esta parte, la contaminacin se ha convertido en uno de los principales impactos negativos de la naturaleza y el medio !mbiente !s mismo la contaminacin del #ago 6iticaca es producto de la e"ploracin y e"plotacin de los recursos minerales, residuos slidos y muchos otros productos desechables de las ciudades ubicados en su periferia: adems producto de las labores de e"ploracin y e"plotacin de petroleo ;en la cabecera del #ago 6iticaca< desde el siglo I=, >arios pozos quedaron mal sellados y que no han sido superados hasta ahora, por donde emanan lquidos con sustancia t"icas y aguas salitrosas hacia la superficie que afectan a la 'lora y 'auna en el sector de Pir?n, (urisdiccin del distrito de Pusi de la Provincia de .uancan$

! parte de la contaminacin, adems e"iste un riesgo de incendios por la combustin a que se e"ponen las personas que acuden a e"traer peque*as cantidad de hidrocarburo para uso dom$stico: los pozos sin sellar o deteriorados representan un grave peligro, sobre todo para llos ni*os que pueden sufrir mortales cadas en esos espacios abiertos y profundos El suelo y subsuelo constituyen un recurso natural difcilmente renovable, que desempe*a muchas funciones en el hbitat del ser humano Por lo cual es necesario remediar empleando las tecnologas e"istentes en nuestro medio 1.2 FORMULACION DEL PROBLEMA El gran problema est centrado en el abandono y sellado deficiente de los pozos petrolferos, que han originado una contaminacin del suelo y tierras agrcolas como consecuencia de los derrames ocurridos a trav$s de los a*os, considerados como pasivos ambientales /e debe mencionar que las operaciones petroleras en el Per& antes de @ABC, se realizaban siguiendo los lineamientos establecidos a nivel mundial, los que se caracterizaban por no prestar demasiada atencin a los problemas ambientales y sociales Pregunta enera! D3ual es la 6ecnologa apropiada para realizar la biorremediacin del suelo contaminado con .idrocarburos por los pozos petrolferos abandonados en la zona de Pirin del distrito de Pusi E .uancan$ Pregunta" e"#e$%&'$a" D3ul es el nivel de contaminacin del suelo por hidrocarburos en la zona de Pirin del distrito de Pusi.uancan$F D2e qu$ manera influyen los derrames de los .idrocarburos en la contaminacin de los suelos en la zona de PirinF 1.( JUSTIFICACI)N DE LA INVESTI ACI)N

El presente proyecto plantea determinar los principales elementos contaminantes por las emanaciones de los pozos abandonados en Pirn y buscar la alternativa de remediar y restaurar los suelos contaminados mediante el proceso de biorremediacin !ctualmente, la biorremediacin es aplicada ampliamente en suelos, aguas subterrneas, tratamientos de aguas y superficies contaminadas con qumicos como el petrleo crudo, hidrocarburos, combustibles, solventes industriales, entre otros #os tratamientos de suelo por t$cnicas biolgicas se encuentran entre el grupo de menor costo en comparacin con tecnologas ms convencionales como la incineracin o confinamiento de residuos #a tecnologa de biorremediacin puede ser el sistema de tratamiento ms atractivo en cuestin a costos y eficiencia para la remediacin de suelos contaminados #os resultados obtenidos en la investigacin permitirn iniciar con un plan de remediacin y restaurar los suelos contaminados por las sustancias t"icas a causa de los pozos petrolferos abandonados y recuperar la 'lora y 'auna para su posterior proteccin y conservacin

II
2.1

REVISI)N DE LITERATURA
MARCO LE AL

El dise*o de los Estudios de Impacto !mbiental sigue regulaciones bsicas para el cumplimiento de normas de proteccin ambiental y se ci*e a los procesos referidos a la competencia administrativa Para ello, el anlisis y estudio debe realizarse en forma armoniosa con los aspectos t$cnicos La normat !a na" ona# mat$r a %$ m$% o am& $nt$ $' (ro#)* "a + "on'ta %$ norma' %$ % 't nto n !$# ,$r-r./ "o0 ta#$' "omo1 1. 2. (. *. +. ,. -. .. /. 10. 3onstitucin Poltica de @AAG #ey 5rgnica de .idrocarburos, #ey ,H IJII@ #ey 5rgnica para el !provechamiento /ostenible de los 0ecursos, #ey ,H IJKI@ #ey Leneral del !mbiente, #ey ,H IKJ@@ #ey del Procedimiento !dministrativo Leneral, #ey ,H IBMMM #ey del /istema ,acional de Evaluacin !mbiental, #ey ,H IBMMJ #ey de Plazos para Procedimientos !dministrativos ante el 1E1, #ey ,H IBBAK #ey del /istema ,acional de Lestin !mbiental, #ey ,H IKIMN #ey del 3onse(o ,acional del !mbiente, #ey ,H IJM@C #ey de 5/I,E0L, #ey ,H IJBGM

11. 12. 1(. 1*. 1+. 1,. 1-. 1.. 1/. 20. 21. 22. 2(. 2*. 2+. 2,. 2-. 2.. 2/. (0. (1. (2. ((. (*. (+. (,. (-. (.. (/.

#ey de 6ierras, #ey ,H IJNCN #ey Leneral de 0esiduos, #ey ,H IBG@M #ey Leneral de /alud, #ey ,H IJKMI #ey Leneral de !guas, 2ecreto #ey ,H @BBNI #ey 'orestal y de 'auna /ilvestre, #ey ,H IBGCK #ey de Oreas ,aturales Protegidas, #ey ,H IJKGM #ey Leneral de 3omunidades 3ampesinas, #ey ,H IMJNJ 3onvenio sobre 2iversidad %iolgica y 6ratado de 3ooperacin !maznica 2 / ,H C@N-ICCJ-E1 0eglamento para la proteccin !mbiental en las !ctividades de .idrocarburos 2 / ,H CIN-ICCI-E1 6+P! del 1inisterio de Energa y 1inas 2 / ,H CII-ICC@-P31 0eglamento 5rganizacin y 'unciones de la 35,!1 2 / ,H CI-ICCG-!L 0eglamento de 5rganizacin y 'unciones del I,0E,! 2 / ,H CIN-ICCG-E1 0eglamento de 5rganizacin y 'unciones del 1E1 2 / ,H CNG-AA-E1 6emas de !suntos !mbientales y 3ompetencias 2 / ,H CGI-ICCM-E1 0eglamento de las !ctividades de E"ploracin y E"plotacin de .idrocarburos 2 / ,H CNB-ICCM-P31 0eglamento de la #ey Leneral de 0esiduos /lidos 2 / ,H C@M-ICC@-!L 0eglamento de la #ey 'orestal y de 'auna /ilvestre 2 / ,H CNM-ICC@-P31 0eglamento Leneral de 5/I,E0L 2 / ,H CCK-ICCN-P31 0eglamento de la #ey 1arco del /istema ,acional de Lestin !mbiental 2 / ,H CGK-ICC@-!L 0eglamento de la #ey de reas ,aturales Protegidas 2 / ,H CMI-ICCN-E1 6+5 de la #ey 5rgnica de .idrocarburos 2 / ,H CGI-ICCI-E1 !prueban Llosario, /iglas y !breviaturas del /ubsector .idrocarburos 2 / ,H CBM-ICC@-P31 !prueban el 0eglamento de Estndares ,acionales de 3alidad !mbiental del !ire 2 / ,H CCA-ICCN-60 0eglamento de /eguridad y /alud en el 6raba(o 0 1 NGN-ICCM-1E1-21 0eglamento de Participacin 3iudadana para la 0ealizacin de !ctividades Energ$ticas dentro de los Procedimientos !dministrativos de Evaluacin de los Estudios !mbientales en el sector Energa y 1inas 0esolucin 3onse(o 2irectivo ,H C@G-ICCM-5/)32 0eglamento de /upervisin de !ctividades Energ$ticas 0esolucin 2irectoral ,H CGC-AJ-E1)2L!!, #1P ,iveles 1"imo Permisibles de Emisin de Efluentes #quidos para las actividades de .idrocarburos 2eclaracin de 0o sobre 1edio !mbiente y el 2esarrollo /ostenible de @AAI 2eclaracin de P5.!,,E/%+0L5 sobre 2esarrollo /ostenible ICCI

En el siguiente organigrama se muestra el reglamento de proteccin ambiental para hidrocarburos

NORMATIVIDAD AM5IENTAL
Con0tit/.in Pol'ti.& del Pe%6
CONAM Le& N' ()*+, Cdigo del M. Ambiente
D.Leg. N !"#

D. Leg. N 727

Le$ Gene%&l de Mine%'&

Co#petenci% A#$ient%!

D.S.N (")*+,*EM Aspectos Aspectos Aspectos A#$ient%!es A#$ient%!es A#$ient%!es Regl&mento Regl&mento de Regl&mento de P%ote..in P%ote..in Aspectos De P%ote..in Ambient&l 4&%& Ambient&l 4&%& Ambient&l Mine os -id%o.&%b/%o0 Ele.t%i.id&d 4&%& Mine%'&
Aspectos Pet o!e os Aspectos E!"ct icos

Le$ O%g. de Le$ de Con.e0. -id%o.&%b/%o0 El1.t%i.&0 Le$ N ,!,," D.Le$ N ,23))

MINISTERIO DE ENERGIA Y MINAS

2.2 2.2.1

MARCO TEORICO CONCEPTUAL BIORREMEDIACI)N

%iorremediacin es una tecnologa de tratamiento com&nmente utilizada para limpiar suelos contaminados accidentalmente con hidrocarburos de petrleo /e refiere a un proceso de ingeniera en donde la biodegradacin natural de los hidrocarburos se efect&a por medio de bacterias, hongos o protozoarios #as condiciones del suelo son controladas para promover la actividad microbiana ;!usma / , EdQards L , ICCIR >olatile hydrocarbon Emissions from a 2iesel 'uel Pournal of !ir and Saste 1anagment !ssociation, NI, BT BJA-BKC p < El empleo de la biorremediacin en el tratamiento de suelos contaminados supone un concepto relativamente nuevo, aunque se ha convertido en una tendencia de rpido crecimiento dentro de la gestin medio ambiental ,ormalmente, los compuestos orgnicos fcilmente biodegradables y que no son t"icos ;para los microorganismos< son o"idados muy rpidamente por los organismos del suelo #a t$cnica de biorremediacin est basada en la degradacin de compuestos orgnicos hasta bi"ido de carbono, mediante la actividad de microorganismos vivos que son utilizados como fuente de carbono y energa 'unciona &nicamente en suelos y cuerpos de agua donde los contaminantes son 4

biodegradables o biotransformables, o bien, cuando se trata de compuestos inorgnicos bioacumulables o biotransformables que estn presentes en cuerpos de agua en movimiento ,o funciona para compuestos orgnicos recalcitrantes, porque no son biodegradables El ob(etivo de la biorremediacin activa del suelo, es utilizar efectivamente sistemas microbiolgicos para remediar sitios contaminados En todos los casos, el punto final deseado es la completa degradacin de las sustancias t"icas en di"ido de carbono, agua y biomasa ; !l 2ar$ 0 !l E !Qadhi, ICC@R 3ompost /oil piles for 6reatment od 5il-3ontaminated /oil: soil and /ediment 3ontamination9 @C, IT @AB-ICA < #os mecanismos de p$rdida a los cuales estn su(etos los hidrocarburos durante la biorremediacin incluyen procesos fsicos como volatilizacin y li"iviacin, as como procesos qumicos y biolgicos de remocin !dicionalmente se tiene la adsorcin de hidrocarburos en la matriz del suelo, que puede limitar la disponibilidad del contaminante a los microorganismos para biodegradacin o volatilizacin y li"iviacin Estos procesos contribuyen tanto en la reduccin de la concentracin total de hidrocarburos, como en cambios generales de su composicin ;!usma et al, ICCI< #os microorganismos deben estar activos y saludables para que puedan desempe*ar su tarea correctiva #as medidas de biodegradacin facilitan el crecimiento de los microorganismos y aumentan la poblacin microbiana creando condiciones ambientales ptimas para que puedan desto"ificar la mayor cantidad posible de contaminantes #a medida biocorrectiva que se use depender de varios factores, entre ellos el tipo de microorganismos presentes, las condiciones del lugar y la cantidad y to"icidad de los productos qumicos contaminantes .ay diversos microorganismos que degradan distintos tipos de compuestos y sobreviven en condiciones diferentes 2.2.2 FACTORES 1UE AFECTAN LA BIODE RADACI)N

E"isten factores que afectan la actividad microbiana, los factores medioambientales son aquellos necesarios a la hora de proporcionar las condiciones ptimas para el crecimiento de los microorganismos que llevan a cabo la biorremediacin #os microorganismos son muy sensibles a los cambios de temperatura, p., disponibilidad de nutrientes, o"geno y humedad #os microorganismos tienen regiones de temperaturas ptimas y temperaturas por encima de las cuales la actividad microbiana se detiene #as bacterias de un terreno act&an habitualmente en el intervalo de N a MC H3, aunque la temperatura ptima dentro de dicho rango depende de cada especie 3on frecuencia, los

mohos y levaduras realizan me(or su cometido a valores de p. ba(os que a p. neutros o bsicos #a mayora de los microorganismos se desarrollan me(or dentro del rango de p. de J a A, encontrndose las condiciones ptimas de crecimiento entre los p. B y K +no de los factores, sin duda ms importantes, es la te"tura del suelo, que es una e"presin cualitativa y cuantitativa del tama*o de las partculas 3ualitativa ya que se refiere al comportamiento que resulta del tama*o y de la naturaleza de los constituyentes del suelo, y cuantitativa por ser una e"presin porcentual /e refiere a la proporcin relativa en peso de los diferentes tama*os de partculas e"istentes en $l, e"presada como porcenta(e de la fraccin mineral /e distinguen bsicamente tres tipos de te"tura o tama*o de partculasT arcilla, limo y arena #a te"tura es la propiedad fsica ms importante del suelo, estable en el tiempo y se relaciona esencialmente a las otras propiedades fsico-qumicas y biolgicas #a te"tura del suelo tiene influencia sobreT porosidad, aireacin, retencin y movimiento de agua, fertilidad y contenido de materia orgnica, permeabilidad, infiltracin, etc #a descomposicin de algunos compuestos presentes en el suelo da origen a la formacin de cidos intermediarios, lo que ocasiona una disminucin en el valor del p. con respecto al inicial 5tro factor que se ve afectado por el cambio del p. en el suelo es la biodisponibilidad del fsforo, ya que en ambientes cidos $ste se liga fuertemente a las partculas de arcilla del suelo y forma compuestos insolubles con hierro y aluminio, en ambientes alcalinos los compuestos insolubles que se forman son a partir de mol$culas de calcio ;0icUlefs 0 , ICC@R Invitacin a la ecologa, la economa de la naturaleza, MV ed , 1$dica Panamericana / !, Espa*a, pp @MA-@JC< #a temperatura influye en la tasa de todas las actividades y procesos bioqumicos y afecta directa e indirectamente la biodegradacin de hidrocarburos #as variaciones estacinales influyen en la composicin de las comunidades microbianas y esto se refle(a en las tasas del metabolismo de hidrocarburos a una temperatura dada !dems, ba(as temperaturas retardan la volatilizacin de los hidrocarburos de ba(o peso molecular, algunos de los cuales son t"icos para los microorganismos lo que tiene una influencia directa en el metabolismo y reproduccin de la comunidad microbiana #os microorganismos pueden metabolizar hidrocarburos en un amplio rango de temperatura, desde

menores a C H3 hasta mayores a JC H3 ! IN H3 la degradacin de hidrocarburos por cultivos es mayor que a N H3 Es deseable que la temperatura fluct&e entre @K-GB H3 ;1inisterio de Energa y 1inas de Per&, @AABR 6$cnicas para el tratamiento de desechos9, Per& P IN< #a temperatura del suelo es un factor que se debe considerar cuando se eval&a el potencial de biorremediacin y volatilizacin #a m"ima biodegradacin tpicamente ocurre entre GC y MC H3 %a(o condiciones de menor temperatura, el combustible diesel se vuelve ms viscoso, resultando en menor volatilizacin, decrece la actividad enzimtica y decrece la biodegradacin #os nutrientes requeridos con mayor frecuencia son el nitrgeno y el fsforo, cuyas cantidades son normalmente insuficientes en las localizaciones de regeneracin El o"geno es el aceptor final de electrones generalmente empleado en procesos biolgicos y tambi$n es necesario en determinados tipos de reacciones de o"idacin-reduccin catalizadas por enzimas 3iertos nutrientes adems del carbono, como el nitrgeno y el fsforo, son un factor que limita la tasa y el grado de biodegradacin de hidrocarburos !parentemente se requieren altas concentraciones de estos 5tros elementos importantes, cuya concentracin requerida es menor, son el hierro, azufre, magnesio y sodio, e"iste adems controversia en cuanto a que el potasio no tiene una influencia importante en la biorremediacin de hidrocarburos del petrleo ;SallQorth P # y 0eynolds 3 1 , @AANR %ioremediation of Petroleum 3ontaminated 3ryic /oilT Efects of Phosphorus, ,itrogen and 6emperatura9, Porunal of /oil 3ontamination M;G<T IIA-G@C< #a adicin de fertilizantes inorgnicos de lenta liberacin ha sido desarrollada principalmente para el uso en la agricultura y son lentamente disueltos o degradados por el contacto continuo o intermitente con el agua para proveer una liberacin sostenida de nutrientes por mayores periodos de tiempo, presentando me(ores resultados para mantener un nivel alto en la actividad microbiana del suelo En un e"perimento conducido con arena de mar contaminada con petrleo, se determin que el nivel alto de la actividad de los microorganismos indgenas coincida con una mayor disminucin en los hidrocarburos totales del petrleo debido a biodegradacin ;0an =u y 5bbard P , ICCGR Effect of nutrient amendments on indigenous hudrocrbon biodegradation in 5il-3ontaminated beach sediments9, Pornal of Enverironmental Wuality: GI,MTp IGM<

#a humedad constituye un factor importante en la biorremediacin debido a que los microorganismos obtienen todos los nutrientes necesarios para su crecimiento de soluciones !unque son pocos autores los que han traba(ado a nivel laboratorio con diferentes relaciones suelo-agua, se ha podido determinar que un aumento en el contenido de humedad del suelo por arriba de su capacidad de retencin acelera el proceso de degradacin en forma significativa, ya que se favorece la difusin del contaminante y de los nutrientes en los sistemas, adems de facilitar la movilidad de los microorganismos El t$rmino que es frecuentemente relacionado con el contenido de humedad es la capacidad de retencin de agua ;30!<, que establece la capacidad del suelo de retener agua una vez que se ha detenido el drena(e interno, es muy utilizado, ya que depende de cada suelo y de la te"tura del mismo, generalmente se asocia una 30! alta en aquellos suelos en los que el contenido de arcillas es predominante, presentndose el efecto inverso en suelos arenosos 6ambi$n se ha determinado que este parmetro ;30!< es un factor limitante en el proceso de biodegradacin, especialmente cuando se dan simultneamente un alto contenido de humedad y un ba(o contenido de o"geno, ya que se pueden alcanzar condiciones anaerobias en los sistemas ;#iu % %ancUs 1, ICC@R Effects of /oil Qater content on biodegradation of phenanthrene in a mi"ture of organic contaminats9, /oil and /idment 3ontamination, @C;J<TJGG-JNK< #os compuestos simples de hidrocarburos, fenoles e .idrocarburos !romticos Polinucleares ;.!Ps< ligeros, son degradados rpidamente ba(o condiciones aerbicas 1ientras que compuestos molecularmente ms pesados de cinco o ms anillos son ms resistentes a la degradacin bacteriana #a conducta recalcitrante de tales compuestos puede ser atribuida a su limitada biodisponibilidad y fuerte adsorcin a las partculas del suelo y materia orgnica El ataque microbiano depende de la solubilidad de los hidrocarburos y de la capacidad de adsorcin a las partculas del suelo ;!l 2ar$ 0 !l E !Qadhi, ICC@R 3ompost /oil piles for 6reatment od 5il-3ontaminated /oil: soil and /ediment 3ontamination< El o"geno disponible en el ambiente es otro factor importante, a pesar de la controversia en cuanto a si el o"geno es absolutamente requerido para la biodegradacin de hidrocarburos #a importancia del o"geno es evidente debido a que las principales rutas metablicas utilizadas por los microorganismos para la degradacin de compuestos aromticos y saturados requieren de la particin de enzimas

89

o"igenasas, y la biodegradacin anaerobia de hidrocarburos procede a tasas despreciables de desaparicin de los mismos, para fines prcticos se puede afirmar que la degradacin completa de hidrocarburos requiere la presencia de o"geno en forma molecular ;%aro P ! 6esis, @AAAR Evaluacin del proceso de biorremediacin de un suelo con aceites lubricantes gastados y 2iesel9, Instituto 6ecnolgico y de Estudios /uperiores de 1onterrey, 1e"ico< /e ha demostrado que la agitacin y aireacin favorecen el proceso de degradacin en sistemas semislidos ;lodos<, adems de que la agitacin favorece la desintegracin del suelo en la fase acuosa y la disponibilidad del contaminante ;Lray 1 0 l 2Qi(en X % , ICCCR Protocols to enhance biodegradation of hydrocarbon contaminants in /oil9, %ioremediation Pournal, pp IMA-INB< En algunos sitios contaminados la poblacin microbiana que se encuentra presente en el suelo no tiene la capacidad de utilizar el contaminante como fuente de carbono, adems de que en ocasiones esta poblacin puede perder su biodiversidad al no tolerar las condiciones ambientales y de contaminacin en que se encuentran Por lo anterior algunos autores recomiendan la introduccin de microorganismos e"genos preadaptados a las condiciones ambientales del sitio y a la concentracin y el tipo de contaminante E"isten diversas opiniones en relacin a si los microorganismos tienen lmites en sus capacidades de degradar cualquier compuesto que el hombre pueda producir Indudablemente, la verdad se sit&a entre estos dos puntos de vista e"tremos ,o obstante, los microbios pueden degradar multitud de compuestos ba(o condiciones distintas 1uchos compuestos sint$ticos pueden tambi$n modificarse o transformarse mediante el uso de una bacteria, hongo o alg&n tipo de poblacin microbiolgica traba(ando en asociacin Estos procesos varan desde la putrefaccin de comida hasta la limpieza de derrames de petrleo en las playas costeras ;#evin 1 y Lealt !, @AAAR %iotratamiento de residuos t"icos y peligrosos9 1cLraQ .ill, p M@-JI, 1$"ico< 2.2.( BIOAUMENTACI)N

%iorremediacin puede consistir simplemente en a(ustar las condiciones ambientales en el suelo asumiendo que los organismos estn presentes En el otro e"tremo, los esfuerzos pueden ser conducidos para preparar soluciones lquidas con altas densidades de cultivos para la continua

88

aplicacin al suelo o bioaumentacin ! pesar del gran n&mero de proyectos de biorremediacin conducidos con $"ito, se cuenta con poca informacin confiable ;2evinny y 3hang, ICCIR %ioaumentation for /oil %ioremediation9 +niversity of /outhern 3alifornia, #os !ngeles, pp MJN-MBK +/!< Incluso si un dise*o e"perimental se lleva a cabo de forma cuidadosa, los consultores mantienen los resultados en secreto como los propietarios de informacin valiosa El uso de bioaumentacin se ha visto entorpecido por la falta de una definicin clara del propsito del esfuerzo y los mecanismos por los cuales se espera que sea e"itoso %ioaumentacin para proveer especies microbianas ausentes, se conducir de forma distinta de bioaumentacin que intente incrementar la abundancia de las especies que estn presentes pero escasas #os gastos y dificultades asociadas con la preparacin y aislamiento de culturas locales enriquecidas puede ser evitada comprando productos comerciales #os proveedores de ellas han obtenido microorganismos conocidos que degradan los contaminantes y los han cultivado en laboratorio Pueden ser compradas como un material granular para la aplicacin en sitios contaminados 3ualquier uso comercial de microorganismos conduce pronto a ciertas especulaciones sobre la posibilidad de que determinadas modificaciones gen$ticas posiblemente me(oraran las actividades desarrolladas por los mismos #os cientficos han realizado apro"imaciones gen$ticas que pretende me(orar las cepas de microorganismos degradadores ;#evin 1 y Lealt !, @AAAR %iotratamiento de residuos t"icos y peligrosos9 1cLraQ .ill, p M@-JI, 1$"ico< 3uando el organismo apropiado es introducido, rpidamente crecer produciendo un gran n&mero de c$lulas necesarias para degradar el contaminante Este enfoque requiere un organismo que se va a reproducir vigorosamente ba(o las condiciones ambientales e"istentes 5tro acercamiento es la inoculacin en masa, utilizando grandes y densos cultivos de microorganismos creados fuera del suelo que ser remediado El propsito es proveer organismos en suficiente cantidad ,o es necesario asumir que el microorganismo bioaumentado se encuentra ausente en el suelo, slo que no se encuentra en la cantidad necesaria ;2evinny y 3hang, ICCI< %ioaumentacin representa un intento humano para ingeniar una invasin e"itosa dentro del diverso ecosistema microbiolgico del suelo >an Elsas y .ei(nen ;@AAC< se*alaron #as bacterias introducidas

82

pueden tener despu$s grandes dificultades en encontrar en el suelo nichos en los cuales sobrevivir y es e"tremadamente difcil de predecir los efectos finales9 2.2.* COMPOSICI)N DEL PETR)LEO

El petrleo es una mezcla e"tremadamente comple(a de hidrocarburos 2e los cientos de componentes individuales, pueden ser reconocidas diversas clases basadas en la afinidad de estructuras #a mezcla de petrleo puede ser fraccionada por cromatografa en slica gel /e reconocen cuatro clasesT una fraccin saturada o aliftica, una fraccin aromtica, una fraccin asfltica o polar ;fenoles, cidos grasos, cetonas, $steres y parafinas< y una fraccin resinosa ;piridinas, quinolinas, carbazoles, sulf"idos y amidas< ;#eahy P L y 3olQell 0 @AACR 1icrobial 2egradation of .ydrocarbons in the Environment9, 1icrobiological 0evieQs, >o NM, ,o G, pp GCN-G@N< 5tros autores como .uesamann ;@AAM< separan al petrleo en dos componentes principalesT una fraccin hidrocarbonada y una fraccin polar #a fraccin polar o ,/5 consiste en compuestos que contienen en su estructura molecular nitrgeno, azufre u o"geno en adicin al carbono e hidrgeno #os compuestos polares son clasificados en grandes categoras como asfaltenos, resinas, etc , dependiendo de los procedimientos analticos utilizados para su separacin #a fraccin hidrocarbonada ;.3< consiste de compuestos saturados y aromticos #os compuestos aromticos contienen uno o ms anillos en su estructura y pueden ser clasificados como monoaromticos y aromticos polinucleares ;.!PYs< o poliaromticos: ver figura @ ;>on-2inh, @AKA R 3hemical !nlisis of Polycyclic !romatic9 pp @-@M, ,eQ ZorU< #os componentes saturados consisten de alcanos ;parafinas< o estructuras cclicas saturadas ;naftenos< con variacin en el n&mero de los anillos saturados y cadenas laterales que poseen #os alcanos pueden poseer cadenas lineales de cadenas ramificadas #as mol$culas de aromticos con frecuencia contienen subestructuras parafnicas o naft$nicas y estos productos refinados tambi$n pueden contener mol$culas insaturadas ;alquenos< #a tabla muestra la composicin fraccionada del petrleo

83

Figura .1 Compuestos constituyentes del petrleo. 2.2.+ V2AS METAB)LICAS DE DE RADACI)N DE LOS 3IDROCARBUROS DEL PETR)LEO compuestos

#os hidrocarburos difieren en su susceptibilidad al ataque microbiano y en el pasado, han sido ordenados por su decreciente susceptibilidadT n-alcanos [ alcanos ramificados [ aromticos de ba(o peso molecular [ ciclo alcanos #as velocidades de degradacin han mostrado ser mayores para los saturados, seguidas de los aromticos ligeros, aromticos de alto peso molecular y por &ltimo los compuestos polares que e"hiben velocidades de degradacin e"tremadamente ba(as ;#eahy P L y 3olQell 0 @AACR 1icrobial 2egradation of .ydrocarbons in the Environment9, 1icrobiological 0EvieQs, >o NM, ,o G, pp GCN-G@N< 2ebido a que la energa liberada de la respiracin aerbica es mayor que la respiracin anaerbica la cual utiliza sulfatos, nitratos, etc como aceptor de electrones para el proceso o"idativo y mayor que la fermentacin anaerbica que utiliza compuestos orgnicos como aceptor de electrones, en el proceso de respiracin aerbico se observa la mayor velocidad de degradacin de los hidrocarburos de petrleo #a respiracin aerbica utiliza o"geno molecular para o"idar finalmente el carbono orgnico, que es degradado aerbicamente por un mecanismo o"idativo que se sucede de la siguiente maneraT la o"idacin es mediada por enzimas, que son catalizadores biolgicos que facilitan las reacciones de o"idacin, al disminuir la energa de activacin requerida para la reaccin qumica, provocando con ello 82

un incremento en la velocidad de reaccin #a o"idacin de estos compuestos puede ocurrir espontneamente en la ausencia de enzimas /in embargo, sin su presencia, la reaccin puede tomar meses o a*os para realizarse ;!tlas 0 1 , @AA@R 1icrobial hidrocarbon 2egradation-%iorremediation of 5il /pills9, Pornal 3hem 6ech %iotechonl , ,o NI, pp @MA-@NJ< El proceso o"idativo es provechoso para las bacterias aerbicas desde dos puntos de vistaT utilizacin del carbono y obtencin de energa El carbono derivado de la o"idacin puede ser usado para el anabolismo o catabolismo El anabolismo se refiere al proceso mediante el cual el carbono orgnico es usado para propsitos biosint$ticos ;como 3 estructural< El catabolismo se refiere a la posterior o"idacin del carbono orgnico a 35 I y agua, durante lo cual se genera energa 2ebe resaltarse que este es un proceso dinmico ms que esttico y ambos estn operando en cualquier tiempo dado #a fraccin relativa de carbono que se emplea en cada proceso depender de los requerimientos de energa en el momento, pero generalmente el NC\ del carbn metabolizado es convertido en biomasa ;3 estructural< mientras que el otro NC\ es convertido a 35 I #a suma de todos los procesos celulares o"idativos para el carbn orgnico son referidos como respiracin celular #a energa derivada de la respiracin es usada para digerir el anabolismo y para el mantenimiento de energa #a gran cantidad de energa ;como !6P< derivada de la respiracin aerbica impulsa la reaccin, manipulando las concentraciones de compuestos intermediarios ;manteni$ndolos en concentraciones e"tremadamente ba(as< y de esta forma facilita la degradacin rpida del carbono orgnico ;%artha 0 y !tlas 0 1, @AKBR 6ransport and transportaron of Petroleum9 %iological Processes, Elservier !pplied /cience, pp IKB-GM@, ,eQ ZorU< #os hidrocarburos dentro de la fraccin saturada incluyen los n-alcanos, alcanos ramificados y ciclo alcanos, y debido que los n-alcanos estn considerados como los compuestos ms fcilmente degradables en una mezcla de petrleo, su biodegradacin normalmente procede como una o"idacin por una enzima o"igenasa, la cual inserta un o"geno molecular en la cadena carbonada Esto es considerado como una o"idacin monoterminal e involucra la o"idacin del alcano para formar un alcohol primario Este alcohol primario es entonces o"idado formando un aldehdo por una alcoholdeshidrogenasa y este aldehdo es posteriormente o"idado a un cido carbo"lico ;graso< por una enzima aldehidodeshidrogenasa El cido graso formado puede as incorporarse como biomasa celular o ser degradado posteriormente a trav$s de una ]-o"idacin con la subsiguiente formacin de

83

cidos grasos de unidades cortas de dos carbonos y acetil coenzima !, con la eventual liberacin de 35I ;%artha y !tlas, @AKB< #os cidos grasos, los que algunos son t"icos, se ha encontrado que se acumulan durante la degradacin de estos hidrocarburos #a o"idacin subterminal ocurre con frecuencia con la formacin de un alcohol secundario y una cetona subsiguiente, pero esto no parece ser la va metablica primaria utilizada por los microorganismos que utilizan n-alcanos ;!tlas 0 1 , @AK@R 1icrobial 2egradation of Petroleum .idrocarbons9 1icrobiologial 0evieQs, >ol MN, pp @KCICA< #os cicloalcanos son particularmente resistentes al ataque microbiano #os compuestos alicclicos comple(os, tales como los hofanos ;compuestos tripentacclicos<, estn entre los componentes ms persistentes de los derrames de petrleo en el ambiente E"isten diversos reportes de o"idacin directa y degradacin co-o"idativa de cicloalcanos sustituidos y no sustituidos /e ha reportado que varios cicloalcanos no sustituidos, incluyendo cicloalcanos condensados, son sustratos para la co-o"idacin con formacin de una cetona o un alcohol +na vez o"igenados, la degradacin de estos compuestos puede proseguir con la divisin de anillos #e degradacin de cicloalcanos sustituidos al parecer ocurre con ms facilidad que la degradacin de las formas no sustituidas, particularmente si e"iste un sustituyente n-alcano con longitud de cadena adecuada En tales casos, el ataque microbiano normalmente ocurre primero en la posicin sustituida, liberando un producto intermedio de cido carbo"lico ciclohe"ano, que es un compuesto relacionado +na va novedosa para la degradacin de cidos carbo"licos ciclohe"anos involucra la formacin de un compuesto aromtico intermediario, seguido del rompimiento del anillo de la estructura aromtica ;!tlas, @AK@< #a degradacin bacteriana de compuestos aromticos normalmente involucra la formacin de un diol seguido por rompimiento y formacin de una dicido como el cido cis, cis-1ucnico Estos compuestos aromticos pueden ser divididos en dos clases para los propsitos de degradacinT aquellos que son degradados a catecol como intermediario metablico clave y aquellos que son degradados a protocatecuato como intermediario clave #os compuestos aromticos altamente sustituidos pertenecen a $sta &ltima categora El catecol es eventualmente metabolizado a acetaldehdo y piruvato va meta, o a succinato y !cetil 3o! por va orto El protocatecuato es metabolizado a piruvato y succinato)!cetil

84

3o! por las vas metablicas meta y orto respectivamente En cualquier caso, todos estos compuestos son intermediarios metablicos celulares y son rpidamente convertidos a biomasa celular y 35I ;%artha y !tlas, @AKB< 2ebe hacerse notar que estas vas de degradacin de los hidrocarburos aromticos, al igual que aquellas para hidrocarburos alifticos, se realizan con una rpida velocidad 'recuentemente, en sistemas slidos los &nicos compuestos presentes en cantidades suficientes para poder ser medidas son los productos iniciales y finales #os compuestos intermediarios son metabolizados demasiado rpido para ser medidos ;%artha y !tlas, @AKBR 6ransport and transformation of Petroleum9, %iological Processes, Elservier !pplied /cience, ,eQ ZorU< #os hidrocarburos aromticos ligeros estn su(etos a volatilizacin y al ataque microbiano en el estado disuelto El ataque enzimtico inicial puede ser en el sustituyente alquilo o alternativamente, directamente en el anillo #as estructuras aromticas condensadas estn su(etas a la degradacin microbiana por una va metablica similar a las estructuras monocclicas: pero los hidrocarburos de anillos aromticos condensados, sin embargo, son relativamente resistentes al ataque enzimtico #as estructuras con cuatro o ms anillos condensados han mostrado ser atacadas en algunos casos, por la co-o"idacin o como resultado de comensalismo ;!tlas, @AK@< #as vas metablicas para la degradacin de compuestos asfalt$nicos del petrleo son probablemente las menos comprendidas, debido a que los asfaltenos tienen estructuras comple(as difciles de analizar con metodologa qumica corriente #a degradacin de varios componentes que contienen sulfuros ha sido e"aminada, pero no ha logrado establecerse ninguna va degradativa, comparable a las vas metablicas establecidas para hidrocarburos aromticos y alifticos #os avances en la determinacin de estas vas degradativas es dependiente de la innovacin de la metodologa analtica #a elucidacin del destino bioqumico de los componentes asflticos del petrleo es uno de los principales retos para la futura investigacin de la biodegradacin del petrleo ;!tlas, @AK@< 2.2., BIODISPONIBILIDAD DE LOS 3IDROCARBUROS

#os contaminantes usualmente slo son degradados cuando estn disueltos en una solucin acuosa o por lo menos en contacto directo con el agua #a accesibilidad es de particular inter$s al referirse a los

85

hidrocarburos del petrleo, que tienen ba(as soluciones acuosas 2ebido al medio fsico del suelo, $stos tienden a adsorberse o fraccionarse en la matriz de suelo para formar fases orgnicas separadas en los espacios de los poros 2ebido a la presencia y adsorcin de muchos aromticos y del hecho de que los compuestos no adsorbidos son con frecuencia fcilmente biodegradados, es plausible que la adsorcin resulte en una proteccin de aquellos qumicos al ataque microbiano ;!ronstein % , , 3alvillo Z 1 , @AA@R Effects of /urfactants at #oQ 3oncentrations on the 2esorption an %iodegradation of /orbed !romatic 3ompounds in /oil9 Enviroment /ci 6echnol ,o IN, pp @BIG-@BG@< Por lo tanto, para incrementar la biodegradacin de estos compuestos, es necesario acelerar su velocidad de desorcin y)o solubilizacin /e ha encontrado que, la desorcin o solubilizacin puede ser acelerada con la adicin de surfactantes, haci$ndose notar el potencial para incrementar la solubilizacin de un compuesto escasamente soluble a trav$s de la adicin de un surfactante, al observar que la adicin de $ste aumenta la velocidad de degradacin de hidrocarburos del petrleo /e han realizado e"perimentos de biodegradacin usando un aparato para medir 2emanda %ioqumica de 5"geno ;2%5< y se encontr un incremento en la utilizacin de o"geno as como un incremento de la velocidad de degradacin de los hidrocarburos del petrleo al adicionar el surfactante ;6ai y 1aier, @AAI< 3omo la solubilizacin es una funcin del rea de superficie disponible y del coeficiente de transferencia de masa, la adicin de un surfactante resulta en el incremento de ambos factores ;/undaram , / ,/arQar 1 , @AAM R %iodegradation of !ninoc /urfactants in th(e Presence of Petroleum 3ontaminats9 3hemosphrere >ol IA, ,o J, pp @ING-@IJ@< El uso de surfactantes en los esfuerzos para me(orar la biorremediacin de ambientes contaminados ha logrado un considerable inter$s en a*os recientes #as investigaciones actuales han reportado me(oramientos al igual que inhibiciones en la biodegradacin de compuestos orgnicos en presencia de surfactantes 1uchas bacterias ba(o condiciones adecuadas, pueden producir biosurfactantes y bioestimulantes para ayudarse en su ataque a compuestos especficos #os surfactantes comerciales pueden tambi$n servir para incrementar el transporte de hidrocarburos inmiscibles dentro de una solucin, pero en ciertas ocasiones provocan efectos inhibitorios para los microorganismos #os mecanismos que provocan un aumento de la degradacin debida a surfactantes y al mismo tiempo una inhibicin microbiana, no son bien comprendidos todava

86

El efecto de un surfactante en la disponibilidad de compuestos orgnicos puede ser e"plicado por tres mecanismosT ;i< dispersin de los hidrocarburos lquidos en la fase no acuosa, logrando un incremento en el rea de contacto, causada por una reduccin de la tensin interfacial entre la fase acuosa y la fase no acuosa: ;ii< incrementando la solubilidad, causado por la presencia de micelas que pueden contener altas concentraciones de compuestos orgnicos hidrofbicos: y ;iii< facilitando el transporte del compuesto orgnico desde la fase slida a la fase acuosa, lo cual puede ser causado por diversos fenmenos, tales como la disminucin de la tensin superficial de los poros de agua en las partculas de suelo, la interaccin del surfactante con la fase slida y la interaccin del contaminante con las micelas del surfactante ;Satts 0 y 2illy / E , @AAJ R Evaluation of Iron 3atalysts for the 'enton-liUe 0emediation of 2iesel 3ontaminated /oil9, Pournal of hasrdous 1aterials, >ol N@, pp ICA-IIM<

III
(.1

3IP)TESIS
3IP)TESIS ENERAL

El uso de la adicin de nutrientes orgnicos e inorgnicos incrementa la tasa de degradacin en suelos contaminados con hidrocarburos, obteni$ndose me(or respuesta de la cin$tica de degradacin (.2 3IP)TESIS ESPEC2FICAS #a 6$cnica del composteo en la %iorremediacin de suelos contaminados por hidrocarburos es una alternativa me(or para mitigar El nivel de la contaminacin de los suelos por hidrocarburosen la zona de pirn aumenta como consecuencia de los derrames ocurridos a trav$s de los a*os por los pozos abandonados sin sellar y mal sellados

IV
*.1

OBJETIVOS DEL ESTUDIO

OBJETIVO ENERAL

3ontribuir con la determinacin de forma e"perimental la remediacin de un suelo contaminado con hidrocarburos en la zona de Pirn del distrito de Pusi, Provincia de .uancan$ Puno, mediante el proceso de biorremediacin por composteo *.2 OBJETIVOS ESPEC2FICOS 87

2ise*ar y proponer la implementacin de un equipo e"perimental a nivel piloto para efectuar la biorremediacin de suelos contaminados con hidrocarburos en un esquema de tratamiento por composteo

5btener las condiciones de operacin ms favorables ;humedad, te"tura, temperatura, nutrientes< para la biorremediacin de un suelo contaminado con hidrocarburos por biopilas)composteo !portar con conocimientos t$cnicos para la remediacin de suelos contaminados con hidrocarburos, para recuperar con fines de usos para agricultura, (ardines, reforestacin, etc

VARIABLES
I,2I3!250E/ @ 6ipo de contaminantes I,2I3E/ @ 3oncentracin de hidrocarburos totales de Petrleo ;6P.Ys< I 6e"tura p. 6emperatura 3ontenido de humedad ,iveles Permisibles p. 3onductividad %a(o o nada Permisible Intenso >!#50!3I4, ppm 1alla 6yler p. H3 \ /eg&n niveles permisibles %a(o ,ormal !lto ,atural ^ que permisible [ que permisible

5peracionalizacin de variablesT
>!0I!%#E/ Var'a4!e In5e#en5'enteT .idrocarburos contaminantes por los pozos petrolferos abandonados

I Propiedades 'sico - Wumicos Var'a4!e 5e#en5'enteT /uelos contaminados en Pirn E Pusi- .uancan$

,ivel de contaminacin @ #quidos I /lidos

VI
,.1

DISE6O METODOLO ICO DE LA INVESTI ACI)N

AMBITO DE ESTUDIO 351+,I2!2 2I/60I65 T !.+!##!,I T P+/I 29

P7!%t'$a.8 Polticamente se encuentra ubicado enT

P05>I,3I! 2EP!06!1E,65

T .+!,3!,E T P+,5

e7gr9&'$a - #a zona de estudio se encuentra en las siguientes coordenadas +61 >er cuadro 3502E,!2!/ +61 ,506E E/6E KIAINIB GAAKMA KIAINAC MCCIA@ KIABKMN GAJAMN KIAKCIM GAJAB@

3oordenadas +61 2ise*ado porT

>E06I3E @ I G M

ALTIMETRIA.8 El lugar estudio se encuentra a una altura apro"imadamente GAMN m s n m

,.2 JI@

TIPO : DISE6O DE INVESTI ACI)N 6ipo de Investigacin

En nuestro caso es solucionar la contaminacin detectada, es decir, el inter$s es superar la dificultad aplicando una alternativa de solucin para ver, los resultados obtenidos: entonces, el tipo de investigacin es E"perimental ,.( POBLACI)N : MUESTRA

#a muestra de suelo su(eta al proceso de biorremediacin, proceder de las zonas afectadas por los pozos abandonados en Pirn y !huallani del distrito de Pusi .uancan$, el cual hace algunos a*os se de( de e"plotar El suelo contiene una mezcla de hidrocarburos, principalmente compuesta de diesel, aguas salitrosas y otros elementos t"icos que emanan en ese lugar #a muestra se tomar aleatoriamente de las zonas ms contaminadas seg&n observacin insitu /e estima que se tomarn en promedio @C muestras desde las calicatas o pozos preparados para este caso !simismo de cada pozo de tomarn I o G muestras en base a la profundidad 2ebido a que el suelo proviene de un sitio que ha presentado contaminacin desde hace algunos a*os ;siglo I=<, los microorganismos nativos ya se encuentran adaptados a tales condiciones #a muestra de suelo obtenida ser trasladada al laboratorio de Ingeniera Wumica o 'acultad de %iologa de la universidad ,acional del !ltiplano 28

,.*

METODOS; TECNICAS E INSTRUMENTOS DE RECOLECCI)N DE DATOS

/e utilizar la t$cnica e"perimental y anlisis de laboratorio y pruebas en el campo, para la determinacin del suelo contaminado 3omo materiales e instrumentos se utilizarT ,.+ ,.* #aboratorio de Ingeniera Wumica de la +,! -P #aboratorio de %iologa de la +,! -P #aboratorio de la +niversidad de 5ruro >ehiculo LP/, 3mara digita, Picota, bolsas %alanza !naltica 2igital 6ermmetro Potencimetro 3onductiv$metro 3harolas de !cero Ino"idable de diferentes medidas p. metro .orno 2iversos recipientes de vidrio ;vasos, matraces, fiolas, lunas de relo(, probetas< /uelos 3ontaminados con hidrocarburos de la zona en estudio 1allas metlicas para anlisis granulom$trico ;tamices< ,utrientes ;Esti$rcol de vaca, urea y Zeso< %iopilas, celdas 1aterial de escritorioT #aptop, Impresora, papales, etc PLAN DE RECOLECCI)N DE DATOS 0econocimiento de la zona en evaluacin Identificacin de pozos abandonados #evantamiento topogrfico de la zona en estudio Preparacin de calicatas o pozos 6oma de 1uestras DISE6O DE ANALISIS E INTERPRETACI)N DE DATOS

El plan de recoleccin de datos se proceder de la siguiente maneraT

22

,.*.1

DISE6O E<PERIMENTAL

Para el desarrollo del e"perimento se propone considerar dos aspectos como los de mayor importancia para realizar la biorremediacin, siendo estosT contenido de humedad y adicin de nutrientes ;orgnicos e inorgnicos< 2ebido a que el contenido de humedad en el suelo es un factor crtico en los procesos de biorremediacin, se debe mantener un valor constante y hacer una combinacin de los otros componentes restantes 3ada uno de los e"perimentos debe consistir por lo menos de N Ug de la muestra de material contaminado colocado en un recipiente apropiado o una charola de acero ino"idable de apro"imadamente MI " IK " G cm: donde se llevara a cabo la remediacin, simulando las condiciones de una biopila a escala 3ada uno de los e"perimentos se mantendr a condiciones ambientes de humedad y temperatura En el cuado siguiente se muestra la configuracin del dise*o e"perimental que se realizar 6abla ,o G @ 1odelo e"perimental E=PE0I1E,65 @;3< I;5< G;I< M ; 5 _ I +< N ; 5 ` I3< 3T 3ontrol 5T !gregado 5rgnico IT !gregado Inorgnico 0especto a la adicin de nutrientes, realizar de dos distintas maneras, utilizando esti$rcol de vaca o de llama como agregado orgnico =O>, como inorgnico se emplearn la urea comercial como y el Zeso =I> #a razn es proporcionar una fuente de nitrgeno y fsforo para los microorganismos El agregado orgnico se adicionar en una proporcin apro"imada de N\ en peso base seca, mientras que la urea y el yeso a una razn de C G\ en peso apro"imadamente ;Sellman et al , ICC@< #a adicin !gregado 5rgnico ;5< !gregado Inorgnico +ria Zeso

23

de los nutrientes se realizar al inicio del proceso de remediacin &nicamente: esto seg&n referencias de algunos estudios similares ,.*.2 M7n't7re7 ? "egu'@'ent7 eA#er'@enta!

2urante la realizacin de la investigacin se seguir un proceso de monitoreo y seguimiento e"perimental 3onsistente enT 2eterminacin de la te"tura del suelo 2eterminacin del contenido de humedad 1edicin de la temperatura 1edicin del p. 1edicin de 6asa de respiracin en suelo

,.*.(

TeAtura

#a te"tura del suelo se determinar siguiendo el procedimiento descrito por el laboratorio de suelos de ingeniera agrcola de la ;+,!-P+,5<: el cual hace referencia al anlisis granulom$trico para la determinacin de la distribucin del tama*o de partcula y por consiguiente el tipo de suelo al cul pertenece ,.*.* C7nten'57 5e 3u@e5a5

#a determinacin de la humedad en el suelo, se realizar por medio de medicin gravim$trica de agua, que se refiere a la relacin de la masa de agua contenida en los poros del suelo o rocas, respecto de la masa slida de las partculas en ese material e"presada como un porcenta(e, de acuerdo al procedimiento descrito en el m$todo !/61 2II @J ;@AAK< ,.*.+ Te@#eratura

Peridicamente se tomar lectura de la temperatura del sitio donde se desarroll el proceso de biorremediacin, con el fin de llevar un seguimiento de las condiciones ambientales del lugar Es importante se*alar que la biorremediacin se realizar dentro del laboratorio

22

,.*.,

#3

!l inicio de la biorremediacin y al mes se efectuar la medicin del p., &nicamente con el fin de confirmar estar dentro del rango ptimo para la actividad microbiana #a medicin se realizar con un potencimetro y siguiendo la metodologa descrita por el m$todo EP! ACMN3 ;@AAN< ,.*.- Ta"a 5e re"#'ra$'Bn en "ue!7 El monitoreo de la actividad microbiolgica se realizar por medio de la tasa de respiracin del suelo en (arras cerradas ;Xassem ! y ,annipieri P , @AAN< 2onde se determina la cantidad de 35 I emitido por unidad de masa de suelo en un periodo de tiempo especfico El principio del m$todo se basa en la estimacin del bi"ido de carbono ;35I< emitido durante la incubacin del suelo en un sistema cerrado El bi"ido de carbono es atrapado en una solucin de .idr"ido de /odio ;,a5.<, la cual se titula con cido clorhdrico ;.3I< Peridicamente se determinar la tasa de respiracin en el suelo para as darle seguimiento al comportamiento de la actividad microbiana, medida como emisin de 35I, que presentar durante el proceso de biorremediacin ,.*.. C'nCt'$a 5e 5egra5a$'Bn 5e !7" D'5r7$ar4ur7" #a determinacin de la cin$tica de biodegradacin se realizar a nivel del recipiente o charola ;simulacin de una biopila a escala< /e compararn los procesos de bioestimulacin y bioaumentancin a trav$s de la serie de e"perimentos realizados simultneamente, adicionando al suelo las condiciones propicias para la degradacin de los hidrocarburos, seg&n el dise*o e"perimental descrito con anterioridad /e determinar la concentracin de hidrocarburos al inicio del proceso y a diferentes puntos en el tiempo, en cada una de las muestras #a concentracin de los hidrocarburos esta medida como .idrocarburos 6otales del Petrleo ;6P.Ys< en ppm utilizando el m$todo de absorbancia: adems de la medicin de la tasa de respiracin del suelo como emisin %i"ido de 3arbono ;3CI)g-da<

23

,.*./

Deter@'na$'Bn 5e TP3E" #7r e! @Ct757 EPA .01+B

!dicionalmente al m$todo de medicin de la concentracin los hidrocarburos empleado, se realizar la determinacin por el m$todo EP! KC@N% rango diesel, m$todo estandarizado y aprobado, que emplea cromatografa de gases -.1 ASPECTOS ADMINISTRATIVOS Cr7n7gra@a 5e A$t'F'5a5e"

El presente estudio est proyectado con una duracin @K meses apro"imadamente, cuyo inicio es el mes de !bril del ICCK

3uadro ,o 3ronograma de actividades por meses ACTIVIDAD I 0ecopilacin Informaciones >ia(es al lugar y toma de muestras Estimacin de los t"icos contaminantes en laboratorio Preparacin de composteo y anlisis de muestras Elaboracin %orrador Primera 0evisin 3lculos, anlisis e interpretacin de datos !nlisis de los contaminates de los composteos tratados /egunda 0evisin 3orreccin 'inal Impresin Presentacin y E"posicin 200. TRIMESTRES II === = = III = = == == === === = = == === === = == == = = = IV I 200/ TRIMESTRES II III IV

===

===

24

-.2 Mater'a!e" ? Pre"u#ue"t7 a#r7A'@a57 A$t'F'5a5e" 0ecopilacin Informaciones >ia(es al lugar y toma de muestras Equipos de #aboratorio Equipo de 3omputo y 1ateriales de escritorio Estimacin de los t"icos contaminantes en laboratorio 3lculos, anlisis e interpretacin de datos !nlisis de los contaminates de los composteos tratados Elaboracin del borrador Presentacin del informe 'inal Pre"u#ue"t7 SG. ICCC CC ICCC CC GCCC CC MCCC CC ICCC CC GCCC CC ICCC CC @CCC CC NCC CC @ANCC CC

-.(

F'nan$'a@'ent7

Autofinanciamiento 3. 5I5LIOGRAFIA Y F8ENTES DE INFORMACION !le"ander, 1 , Introduction to Soil Microbiology, Wiley, ,eQ ZorU, @AA@ !le"ander, 1 , Biodegradation and Bioremediation , !cademic Press, /an 2iego, @AAM, GCI pp !tlas 0 1 , Microbial Degradation of Petroleum ydrocarbons! an "n#ironmental Perspecti#e$ 1icrobiological revieQs, 1arch @AK@, vol MN, pp @KC-ICA !usma / , EdQards L 3 , 'ritzgerald 3 0 y 1itchell # . , %olatile ydrocarbon "missions from a Diesel Fuel&Contaminated Soil Bioremediation Facility , Pournal of !ir and Saste 1anagement !ssosiation, Pul ICCI: NI, BT BJA-BKC p %artha 0 y !tlas 0 1 , 'ransport and transformation of Petroleum! Biological Processes. In (ong& term "n#ironmental "ffects of )ffs*ore )il and +as De#elopment$ %oesch a , , 0abalais, Elsevier !pplied /cience, ,eQ ZorU, @AKB, pp IKB-GM@ %ouQer E P , y 7ehnder ! P % , Bioremediation of organic compounds , putting microbial metabolism to -or. 6rends %iotechnol, @AAG$ @@T GJC-GJB %b3./, S5#'!,L ICCGa %ioindicators for biodiversity and sustainable agriculture E introduction and bacUground !gric Ecosyst Environ AKT@-@J 3entro ,acional de Prevencin de 2esastres, ;3E,!P0E2<, Diagnstico de peligros e identificacin de riesgos de desastres en M/0ico! 1tlas 2acional de 3iesgos de la 3ep4blica Me0icana, /ecretara de Lobernacin, Primera impresin, 1$"ico, ICC@ Lray 1 0 , 2Qi(en X % , 2udas 1 P y PicUard 1 ! , Protocols to en*ance biodegradation of *ydrocarbon contaminants in soil$ %ioremediation Pournal, ICCC, pp IMA-INB .ueseman 1 . , +uidelines for (and&'reating Petroleum ydrocarbon Contaminated Soils$ Pournal of /oil 3ontamination, ,o G, >ol G, @AAM, pp IAA-G@K Xlein Pcrgen, Biological soil 'reatment$ Biotec*nology for t*e en#ironment! Soil 3emediation >ol G% ,etherlandsT XluQer !cademic Publishers, ICCI, p B-I@

25

#eahy P L y 3olQell 0 0 , Microbial Degradation of ydrocarbons in t*e "n#ironment$ 1icrobiological 0evieQs, /eptember @AAC, >ol NM, ,o G, pp GCN-G@N #evin 1 , Lealt ! , Biotratamiento de residuos t0icos y peligrosos , 1cLraQ .ill, 1$"ico, @AAA, p M@-JI 1ac#eod 3 6 y 2augulis ! P.$ Biodegradation of polycyclic aromatic *ydrocarbons in t-o p*ase partitioning bioreactor in t*e presence of a bioa#ailable sol#ent , !pply 1icrobiol %iotechnol, ;ICCG< JITIA@-IAJ 1inisterio de Energa y 1inas, '/cnica para el tratamiento de desec*os! Proceso Biolgico , Per&, @AAB, p IN PeramaUi 1 , International In /itu and 5n-/ite %ioremediation /ymposium, In situ bioremediation of petroleum *ydrocarbon and ot*er organic compounds , %atelle Press, 3olumbus 5hio, +/!, @AAA, NKK p Procuradura 'ederal de Proteccin al !mbiente, Informe 'rianual 1556&1557, Profepa, /emarnap 1$"ico, @AAK Wuadri, 6 L , Industria y Poltica !mbiental, El ,acional /bado @K de Punio 1$"ico, @AAM 0an =u y 5bbard P P , "ffect of nutrient amendments on indigenous *ydrocarbon biodegradation in )il&Contaminated beac* sediments, Pournal of Environmental Wuality: Pul)!gu ICCG: GI,MT p IGM 0yan, P 0,T 5ler, 0 3 y 0ucUer, E, Biorremediation of )rganic Contaminated Soils , Pournal of .azardous 1aterial, vol IK, @AA@, p @NA-@JA /edat Xivanc, Xahraman bnlc , )ptimal design and operation of land treatment systems for petroleum *ydrocarbons. Bioreactor and e0 situ biological treatment tec*nologies , Proceedings /emple, X 6 : 0eid, % P y 'ermor, 6 0 , Impact of composting strategies on t*e treatment of soils contaminated -it* organic pollutants , Environ Pollution, ICC@, @@IT IJA-IKG /undaram , / , /arQar 1 , %ang / / e Islam 1 0 , Biodegradation of 1nionic Surfactants in t*e Presence of Petroleum Contaminants$ 3hemosphere, @AAM, >ol IA, ,o J, pp @ING-@IJ@ + / Environmental Protection !gency ;EP!<, 1n analysis of composting as an en#ironmental remediation tec*nology 8, 5ffice of /olid Saste and Emergency 0esponse, @AAK + / Environmental Protection !gency ;EP!<, 1ethod ACMN3 Determination of p in Soil and Waste samples$ Panuary @AAN + / Environmental Protection !gency ;EP!<, 'reatment 'ec*nologies for Site Cleanup! 1nnual Status 3eport, @Cth Edition, 5ffice of /olid Saste and Emergency 0esponse, ICC@ P*osp*orus$ 2itrogen and 'emperature$ Pournal of /oil 3ontamination, @AAN, M;G<TIIA-G@C Satts 0 P y 2illy / E , "#aluation of Iron Catalysts for t*e Fenton&li.e 3emediation of Diesel Contaminated Soils$ Pournal of .azardous 1aterials, >ol N@, @AAJ, pp ICA-IIM Sellman 2 , +lery ! , %arcellona 1 , 2uer / , 1nimal -aste&en*anced degradation of *ydrocarbon& contaminated soil, /oil a /ediment 3ontamination, ICC@, @C;N<T N@@- NIG Sise 2 , Bioremediation of Contaminated Soils, 1arcel 2eUUer, ,eQ ZorU, @AAA, ACG p

26

27