CARBONOORGNICO(MtododeWALKLEY&BLACK) Ing.Agr.

DanielCarreiraINTACastelar INTRODUCCIN Desde que Ames y Gaither (1916) demostraron que el carbono orgnico del suelo poda cuantificarse por oxidacin con mezcla sulfocrmica, los mtodos basados en la combustin hmeda se generalizaronrpidamente. Sobreestabase,Shollenberger,en1926,desarrollaunatcnicarpidaadaptadaalanlisisrutinario donde aplica calefaccin externa a los tubos de reaccin, a una temperatura de 175C, e incorpora al mtodo la valoracin del C a travs de la titulacin del exceso de Cr6+ con una sal ferrosa. En 1930, Degtjareff, utiliza perxido de hidrgeno previo al agregado de la mezcla sulfocrmica, afirmando que se produceunamejoraenelniveldeoxidacindelCO.CuatroaosmstardeAllanWalkleyyAmstrongBlack demuestran el error de esa conclusin y desestiman el procedimiento. Sin embargo rescatan el hecho de queladisolucindelcidosulfrico,enlasolucindeperxido,generabasuficientecalorcomoparalograr un nivel de oxidacin aceptable del CO. Sobre esta observacin presentan una simple pero novedosa modificacin a los mtodos utilizados hasta ese momento, reemplazando la calefaccin externa de la mezcla sulfocrmica por el calor de disolucin del cido sulfrico. Un ao despus este mtodo recibi fuertes crticas por parte de la Internacional Society of Soil Science debido a que arrojaba resultados sensiblemente menores de oxidacin del carbono orgnico, y variables segn el tipo de suelo, en comparacinconaquellosqueutilizabancalefaccinexterna. En 1947, Walkley, publica un anlisis crtico del mtodo, basado en la amplia aceptacin que haba tenido, defendiendo la estabilidad del ensayo cuando se respetan las condiciones del procedimiento y reconociendolanecesidaddeusarunfactorderecuperacinparaestimarelCO. Este mtodo, adoptado masivamente por su simplicidad, ha sufrido a lo largo del tiempo innumerables modificaciones. Las principales variaciones se orientaron a reducir el consumo de reactivos y a mejorar el punto final en la titulacin, respetndose la proporcin dicromato/sulfrico y el tiempo de reaccin. En cuanto a las modificaciones introducidas para mejorar el nivel de recuperacin del CO se propusieronnuevamenteelusodefuentesexternasdecalor,ariesgodeperderlasimplicidaddelmtodo. A ello tambin se sumaron las modificaciones operativas propias de cada laboratorio, que contribuyeron a aumentarlavariabilidadobservadaenlosresultados. Con el objetivo de abordar la normalizacin del mtodo en el ao 1991, a travs de PROMAR AACS, se publicaron dos variantes del mtodo original, una respetando la escala macro y otra a nivel reducidooescalamicro,lasquemstardefueronreeditadasporelSAMLA(2004). Enlaactualidadlaescalamacrosedesestimporelexcesivoconsumodereactivosygeneracinde residuos, principalmente Cr IV, adoptndose las escalas reducidas, entre la que se encuentra prxima a publicarse como norma IRAMSAGPyA una variante del mtodo propuesto por Grewelin y Peech en 1960. (Norma295712determinacindecarbonooxidablepormezclaoxidantefuerte,aescalasemimicro). ALGUNOSPUNTOSCRTICOSDELPROCEDIMIENTO Las mayores variaciones observadas en el porcentaje de recuperacin del carbono orgnico, cuando se aplica este mtodo, se deben a las caractersticas del suelo y a calidad de la materia orgnica analizada. Sin embargo hay aspectos metodolgicos que tambin inciden en la en la dispersin de los resultados analticos. Para el primer caso es necesario definir un factor de recuperacin especfico para cada tipo de suelo, utilizndose para ello un mtodo referencial tal como el de la combustin seca. En cuanto a lo metodolgico es necesario comprender los factores crticos que estn involucrados en el procesodedeterminacinyaplicarunatcnicanormalizadaentodosloslaboratorios. EstadodeoxidacininicialdelC TantoelC,queseencuentraendistintosnivelesdeoxidacindentrodelaMOdelsuelo,comoelO e H constitutivos de la misma, pueden reaccionar con el dicromato en diferente sentido y proporciones. Pero experimentalmente se determin una relacin proporcional entre la cantidad de CO2 desprendido en la oxidacin por va hmeda y la cantidad de cido crmico reducido, sugirindose una compensacin de las reacciones del H y O orgnicos. Por ello se asume que, cada tomo de carbono es oxidado desde un

estado de oxidacin 0 a un nivel +4, reflejando de esta manera todo el intercambio de electrones en la reaccin. 2Cr2O7=+3C+16H+4Cr3++3CO2+8H2O En resumen la aceptacin de que el C se encuentra en la materia orgnica del suelo en un estado deoxidacin0esbsicamenteemprica,conpocosustentoestequiomtrico. Potencialredox El potencial redox del sistema est fuertemente asociado a la concentracin de H2SO4 y a la temperatura de reaccin, por lo que un aumento en la concentracin del cido incrementara la fuerza oxidante del sistema pero reducira la temperatura alcanzada en la disolucin. Por otra parte la concentracindedicromato,empleadaenlamezcla,debeasegurarunaintensidadoxidativaconstante,por loquelamuestranodeberaconsumirmsdel80%deldicromatoaadido(Walkley,1947). Temperaturadereaccin Larelacin2:1decido:dicromato,indicadaoriginalmenteporWalkleyyBlack(1934)resultaserla ptima para alcanzar temperaturas cercanas a los 120140 C, y para ello es conveniente una rpida disolucindelcido,logradaatravsdelaagitacinorbitaldelrecipiente dereaccin (tubooerlenmeyer), evitandoquequedenpartculasdesueloadheridasalasparedesdelmismoyfueradelalcancedelamezcla oxidante El nivel de oxidacin depender no slo de la temperatura mxima alcanzada, sino tambin de la persistencia del calor generado. Por ello tanto el recipiente utilizado en la reaccin como el grado de aislamiento del medio son factores determinantes que regulan el control de la temperatura y que necesariamentedebensernormalizados. El empleo de calefaccin externa permite lograr valores ms altos de recuperacin del C, para una gran gama de suelos. As, temperaturas entre los 125 a 150 C mejoran el nivel de oxidacin del C, pero debe tenerse presente que con temperaturas cercanas o superiores a los 150C se produce una rpida descomposicin trmica del dicromato, catalizada por el propio Cr3+, dando en algunos casos valores superioresal100%derecuperacin. Interferenciasqumicas Estos tipos de mtodos estn sujetos a interferencias provocadas por algunos constituyentes del suelosiempreycuandoseencuentrenencantidadeselevadas.Lapresenciasignificativadeionescloruroso iones ferrosos sobreestimaran el CO mientras que los nitratos provocaran el efecto inverso dando valores bajosdeCO. Lainterferenciadelcloruroessignificativasloensuelossalinos,dadoqueconsumedicromatocon una relacin estequiomtrica de 4:1 (Cl:C). Esta puede impedirse por lavado del suelo antes del anlisis o porprecipitacincomoAgClagregandoAg2SO4enelcidosulfrico.Sinembargo,enelprimercasopuede producirse prdida de compuestos orgnicos solubles y precipitacin de cromato de plata o descomposicindeldicromatocuandoseagregasulfatodeplata. En cuanto al nitrato slo interfieren cuando la concentracin excede el 5 % del contenido de carbono. Conrespectoalinferroso,stepuedeeliminarsefcilmenteconelsecadodelsueloalaire. Por otro lado, la presencia de calcreo en los suelos podra neutralizar la acidez del medio pero algunos ensayos con contenidos de carbonatos de hasta el 50% p/p no afectaron la determinacin (Kalra y Maynard,1991) Gradodemoliendadelsuelo. Es muy probable que el contenido de materiales finos, principalmente arcillas silicatadas, como vermiculita y montmorillonita, y materiales alofnicos afecten el nivel de oxidacin del C debido a la formacin de microagregados estables que protegen la MO. La mayora de los autores recomiendan un grado de molienda del suelo tal que pase por un tamiz de 0.5 mm para asegurar una mayor recuperacin delCOyevitarerroresdesubmuestreo. Reactivos Sulfato amnico ferroso (sal de Mohr): este compuesto reduce notablemente su potencial reductor en presencia del oxigeno atmosfrico, por lo que es imprescindible valorar la solucin inmediatamente antesdesuuso.

Dicromato de potasio: Se emplea como patrn primario y sus soluciones son muy estables pudindoseconservarindefinidamente. cidoSulfrico:Suconcentracinnodebesermenorde96%p/pyaquedentrodelrangodel90al 99% existe un incremento casi lineal de recuperacin del CO del 1% por cada % de incremento en la concentracindelcido(Walkley,1947). Indicadoresredox: Actualmenteseutilizandistintosindicadores. La disolucin de difenilamina en cido sulfrico concentrado fue el primer indicador utilizado para las titulaciones del exceso de dicromato con una sal ferrosa. El agregado de H3PO4, NaF o HF antes de la titulacinmejoranotablementeladefinicindelpuntofinalaleliminarlosionesfrricosdelsistema. En cuanto a la sal brica del cido difenilaminosulfnico, en combinacin con H3PO4, result ser msefectivaymsestablequeladifenilamina. LaOfenantrolina,conunmayorpotencialdeoxidacinquelossulfonatosdedifenilamina,permite mejorar la nitidez del punto final, pudindose utilizar sin el agregado de H3PO4, siempre y cuando se asegure una concentracin de sulfrico 12 N durante la titulacin. Sin embargo, tiene el inconveniente de seradsorbidoporcoloidesdelsuelo,porloqueserecomiendaagregarlajustoantesdelatitulacin. FactordeconversindeCoxidableaCorgnico En su trabajo publicado en 1934, Walkley y Black, encuentran que, para los veinte suelos ensayados,elporcentajedeCrecuperadopromediabael77%,proponiendoelusodeunfactorde1.3para expresar los resultados en porcentaje de carbono orgnico. Trabajos posteriores confirman en general ese valormedioperoponenderelievelagranvariabilidadparalosdiferentestiposdesuelos. NITRGENO(MtodoKJELDAHL) INTRODUCCIN Para cuantificar el nitrgeno en muestras de suelo se utilizan actualmente dos mtodos muy antiguos, pero que han tenido una amplia aceptacin: el propuesto por Dumas en el ao 1831 y el desarrollado por Kjeldahl 50 aos ms tarde. El primero se basa en una combustin de la muestra en una corrientedeoxigenoconposteriorcuantificacindelnitrgenoquesedesprende.EnelmtododeKjeldahl la reaccin ocurre en medio cido (sulfrico concentrado) a temperaturas elevadas (400C), donde el nitrgeno orgnico es transformado a ion amonio, el cual es cuantificado a travs de una destilacin alcalinaysuposteriortitulacin. EnelmtododeKjeldahlsecuantificanlasformasorgnicayamnica,yconciertasmodificaciones se pueden incluir los nitratos. stos deberan incluirse cuando se los encuentra en cantidades apreciables, dadoqueunaconcentracinenelsuelode500ppmdenitratosslorepresentaun0.01%delNtotal. Losprincipalescambiosintroducidosalmtodooriginal,consistieronenreducirlaescaladelensayo ylograrlaautomatizacindelmismo. PUNTOSCRTICOSDELMTODOKJELDAHL EtapaI:Digestindelamuestra Caractersticadelamuestra. No hay evidencias de un efecto significativo de la finura del material sobre el porcentaje de recuperacin de N. Algunos autores recomiendan un grado de molienda acorde a la escala del mtodo, siendo adecuado un tamao de 0.5 para las escalas macro y semimicro, y algo menor para el nivel micro, especialmenteparaobtenerunasubmuestrahomognea. La abundancia de materiales finos, principalmente arcillas, podran retener entre sus lminas una apreciablecantidaddeamonio.EnestoscasoslahidratacinpreviaoeltratamientoconHFaumentaranel nivelderecuperacindeN,peroslodemanerasignificativacuandolacantidaddeamoniorepresentams del30%delNtotal. Por otra parte la digestin de muestras con niveles elevados de materia orgnica u xidos de Fe o Alconsumenunmayorvolumendecidosulfrico.

Temperaturadedigestin Varios estudios demostraron que la temperatura de digestin es el factor que ms incide en la determinacin del N por el mtodo Kjeldahl, dado que si sta es demasiado baja, inferior a 360 C, la digestineslentaoincompletaysiessuperiora410C,puedenproducirseprdidasdeamonio. El control de la temperatura se realiza con un bloque calefactor y mediante el agregado de sulfato desodioodepotasio,quepermiteaumentarelpuntodeebullicindelsulfrico.Generalmenteseprefiere lasaldepotasioaladesodio,yaqueestaltimaincrementalasproyeccionesdeldigestosobrelasparedes deltuboobaln,dondelatemperaturaessustancialmentemselevada. Otro aspecto importante a considerar es la concentracin de estas sales en el cido sulfrico, ya que con niveles bajos (menores o iguales a 0.3 g/ml) se requiere de un tiempo de digestin prolongado, y, por el contrario, una alta concentracin (1 g/ml o ms) reduce significativamente el tiempo de digestin y podra prescindirse del uso de catalizadores (Bremner, 1960). Sin embargo la alta concentracin de sulfato de sodio o de potasio (por encima de 0.8g/ml) presenta el inconveniente de la solidificacin del digesto cuandosteseenfra,debindosedestilarlamuestraantesdequeestoocurraobiencalentarlaprevioasu destilacin. Tambin se corre el riesgo de aumentar demasiado la temperatura durante la digestin, con posibles prdidas de amonio y tambin de sulfrico, lo cual consecuentemente llevara a un nuevo aumentodelaconcentracinsalina. Catalizadores Los de mayor eficiencia son aquellos que contienen selenio o mercurio, siguiendo los compuestos detitanioycobre,perodadoqueenelmismoordendecrecesutoxicidadserecomiendanestosltimos. EtapaII:Destilacin Enestaetapadebeprestarseatencinalacorrectaconexindeltuboobalneneldestiladorpara evitarfugasenelsistema. El amonio que se desprende al alcalinizar el medio se recoge sobre una solucin de cido brico, cuyo volumen o concentracin no es necesario conocer con exactitud, ya que el borato de amonio que se forma se vuelve a transformar en cido en el transcurso de la valoracin con solucin de sulfrico. Sin embargo,esimprescindibleajustarelpHdelasolucindecidobricoavaloresde4.55.0. Finalmente, como en cualquier titulacin, debe prestarse especial atencin al ttulo de la solucin decidosulfricoutilizadaparavalorarelamonioprovenientedeladestilacin.