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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA

PRINCIPALES CONSTITUYENTES QUMICOS DE LA MATERIA VIVA

INTEGRANTES:

GRUPO: 2401

EQUIPO: 7

NMERO DE PRACTICA: 3

OBJETIVOS -Analizar la importancia del agua como el constituyente ms abundante de la materia viva -Identificar algunos componentes de la materia viva -Comparar el contenido de componentes de diferentes tipos de muestras -Manejo de la rata como animal de experimentacin Mtodo Para la cuantificacin de porcentaje de humedad se realiz lo siguiente: 1. Se llev a cabo la diseccin de la rata Wistar.

2. El rgano que se disecto fue el corazn.

Se pesaron dos muestras de 0.5g del corazn. Se colocaron en unas charolas de aluminio las cuales se encontraban a peso constante.

3. A ambas muestras se les colocaron 2 mL de etanol

4. Las muestras se metieron a la estufa a una temperatura entre 100 y 110C por una hora y treinta minutos. 5. Despus de que transcurri la hora y media se espero a que se enfriaran las charolas dentro del desecador y posteriormente se las peso y se calculo el % de humedad con la frmula

Para la cuantificacin de lpidos y protenas se realiz lo siguiente: 1. Se pesaron 1.0249g de corazn. 2. A esta muestra de corazn se le agrego un poco de una mezcla 2:1 de cloroformo-metanol mientras se machacaba la muestra, se verti hacia

un tubo de ensayo y se agregaron 10 mL de la mezcla 2:1 de cloroformo-metanol. 3. La mezcla obtenida se le dividi en dos partes y se centrifugo; antes de centrifugar las mezclas se equilibraron para llevar a cabo un buen uso de la centrifuga. 4. Se junto el sobrenadante de los 2 tubos ya centrifugados y a este se le agregaron 10 mL de agua destilada. 5. Se presento una disolucin de 2 fases una clorofrmica y una acuosa (metanol-agua).

Fase cloroformica-Lipidos
A la porcion clorofrmica se le agregaron 15 gotas de anhidrido acetico; y 5 de acido sulfurico, mtodo de Lieberman

Fase acuosa-Proteinas
Se llevo a cabo el mtodo de Lowry tomando 2 mL de fase acuosa mas 1 mL del reactivo 3 y 0.1m L del reactivo 4

La reaccin de Lieberman-Buchard Es una reaccin especfica para los esteroides, como el colesterol, el colesterol reacciona con anhdrido actico en presencia de cido sulfrico, la presencia de color se debe a la deshidratacin que ocurre y a que se generan

dienos y se protonan los esteroles formados, generando un intenso color verde azulado. El H2SO4 Es un cido muy fuerte y cuando entra en contacto con la materia orgnica la corroe, la importancia de este en las reacciones es que ayuda a eliminar compuestos orgnicos que no sean glucolpidos o colesterol, es de gran importancia tener en cuenta que la reaccin debe ser gradual para no afectar a los lpidos que son de inters, porque si la reaccin es rpida tambin los destruye y no se podran cuantificar, es por esta razn que al adicionarse el H2SO4 se hace de manera cuidadosa para evitar daar los lpidos de inters (colesterol, glucolpidos).

REACTIVO 3 solucin cupro-alcalina Los iones de cobre 2+ en medio alcalino se unen a las protenas formando complejos con los tomos de nitrgeno de los enlaces peptdicos; provocando un complejo de color azul y se provoca tambin el desdoblamiento de la protena exponindose as residuos de tirosina.

REACTIVO 4 reactivo de Folin-Ciocalteu La reduccin tambin en medio bsico del reactivo de Folin-Ciocalteu por los grupos fenlicos de tirosina y triptfano presentes en la mayora de las protenas, el principal componente del reactivo de Folin-Ciocalteu es el cido fosfomolibdotngstico de color amarillo que al ser reducido por los grupos fenlicos da lugar a un intenso color azul.

Resultados Equipo 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 rgano Bazo Hgado Pulmn Rin Hgado Rin Corazn Cerebro Pulmn Cerebro Lpidos ++ +++ ++ + +++ +++ + +++ ++ +++ Protenas ++ +++ + ++ + ++ ++ ++ + ++ % de humedad 72.38 73.81 78.35 26.32 70.34 68.25 73.03 16.27 41.55 25.63

Anlisis de resultados Se obtuvieron resultados satisfactorios en la mayora de los porcentajes de humedad, puesto que en algunos se observaron anormalidades en los datos recabados, con respecto al pulmn hubo una gran diferencia en los 2 resultados que se obtuvieron, 78.35% y 41.55% de humedad, al parecer el dato errneo seria el menor, ya que es demasiado bajo y casi todos los rganos tienen un porcentaje de humedad entre 60 y 80%, por este motivo sera preferible descartarlo, otra anormalidad se puede apreciar en los resultados obtenidos en la muestra de rin, 68.25% y 26.32% de humedad, tambin se presenta un valor demasiado bajo, el cual tambin podra ser descartado, finalmente en las muestras de cerebro los 2 resultados obtenidos son demasiado bajos, 16.27% y 25.63%, el resto de rganos esta en el rango esperado de humedad. Con respecto a las pruebas de lpidos y protenas no hay mucho que discutir puesto que solo fueron pruebas cualitativas, con percepcin de la intensidad de colores (la percepcin vara de un observador a otro) que se generaron por las pruebas con el mtodo de Lieberman y Lowry, para lpidos y protenas respectivamente. Con estos resultados cualitativos se podra indicar que los

rganos con mayor contenido de lpidos serian cerebro e hgado, as mismo se podra indicar que el rgano con mayor cantidad de protenas tambin sera el hgado. Conclusiones Se completaron todos los objetivos propuestos para esta prctica, se realizaron con xito la todas las pruebas cualitativas de lpidos y protenas, hubo algunos problemas con unos datos obtenidos en el porcentaje de humedad pero en general, la prctica se desarrollo de manera adecuada. Referencias Biologa 1, Patricia Campos, Editorial Limusa, 2002, pag. 29 Fundamentos de Bioqumica Estructural, Jos Mara Jeijon, Editorial Teban, 2006, pag. 19-20

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