LABORATORIO DE BIOQUIMICA PRCTICA 1. CURVAS DE TITULACIN Y DETERMINACIN DE LA Pk. CURVES AND DETERMINATION OF THE DEGREE Pk * Julin Mauricio.

Abril cuevas * Alexis Garca Santos

FUNDACIN UNIVERSITARIA INTERNACIONAL DEL TRPICO AMERICANO. RESUMEN El objetivo de este estudio es investigar el equilibrio cido-base al realizarla practica Cuando se disuelven en agua cidos dbiles, aportan H+ por ionizacin; las bases consumen H+ al protonarse. El pH de la solucin es la concentracin total de in hidrgeno y se puede medir experimentalmente. Para determinar el estado de ionizacin de los solutos en agua se debe determinar la constante de equilibrio. Aunque el producto de disociacin del agua es normalmente conocido como H+, los protones libres no existen en disolucin, stos iones hidrgenos son hidratados rpidamente a iones hidronio (H3O+). La unidad de concentracin que se utiliza en el clculo del Keq es la molaridad. La constante de equilibrio es fija para cada reaccin qumica a una temperatura dada, define la composicin de la mezcla final, independiente de las cantidades iniciales de reactivos y productos. Por lo tanto Keq se puede calcular si se conocen las concentraciones en el equilibrio de todos los reactivos y productos. Palabras Clave: equilibrio, cido, base, Keq ABSTRACT The objective of this study is to investigate the acid -base balance during it practiced When dissolved in water acids weak, contributing H + ionization ; bases to consume H + protonated . The pH of the solution is the total hydrogen ion concentration and can be measured experimentally. To determine the ionization state of the solutes in water should determine the equilibrium constant. Although the product of dissociation of water is typically known as H + , free protons in solution does not exist , these hydrogen ions are quickly hydrated hydronium ions ( H3O + ) . The concentration unit is used in the calculation is the molarity Keq . The equilibrium constant is fixed for every chemical reaction at a given temperature, defines the composition of the final mixture independent of the initial amounts of reactants and products. Therefore Keq can be calculated if the equilibrium concentrations of all reactants and products are known. KEY WORDS: balance, acid, base, Keq

INTRODUCCIN

Esta prctica se ha desarrollado con el propsito de esta investigar y Determinar experimentalmente la concentracin y pK de una sustancia mediante la tcnica de titulacin directa con estndar primario. La experiencia fue desarrollada en el laboratorio de bioqumica de UNITROPICO. Los bioqumicos estn frecuentemente ms interesados en el comportamiento de los cidos y bases dbiles, que son los que estn parcialmente ionizados al disolverse en el agua. Un dador protnico y su correspondiente aceptor forman un par cido-base conjugados. Cada cido tiene una tendencia caracterstica a perder su protn en solucin acuosa. Cuanto ms fuerte sea el cido mayor ser la tendencia a perder el protn. La titulacin se utiliza para determinar la cantidad de un cido en una solucin, se titula un volumen determinado de cido con una solucin de una base fuerte, normalmente NaOH, de concentracin conocida. El NaOH se aade en pequeas porciones hasta que se ha consumido (neutralizado) el cido segn se determina mediante un colorante indicador o un pH metro. Al graficar el pH frente a la cantidad de NaOH aadido, obtenemos la curva de titulacin. En el punto medio de la titulacin las concentraciones del dador de protones y del aceptor de protones son iguales, en este punto el pH es numricamente igual al pK

OBJETIVO GENERAL Determinar experimentalmente la concentracin y pK de una sustancia mediante la tcnica de titulacin directa con estndar primario. OBJETIVO ESPECIFICO Determinar su experimentalmente su concentracin

Determinar, a partir de datos experimentales, el punto de equivalencia de la valoracin y el pKa del cido valorado.

MARCO TERICO Titulacin: Proceso de determinacin del volumen de una solucin de concentracin conocida necesaria para reaccionar con una cantidad determinada de sustancia. La titulacin cido-base: Es un procedimiento analtico cuyo objetivo es determinar la Concentracin de un analito con propiedades cidas o bsicas, utilizando una disolucin valorada de una base o cido, mediante una reaccin de neutralizacin para formar una sal y agua. Asimismo, mediante una titulacin tambin es posible deducir el pK del analito. Las curvas de titulacin son las representaciones grficas de la variacin del pH durante el transcurso de la valoracin. Dichas curvas nos permiten: Estudiar los diferentes casos de valoracin (cido fuerte vs. base fuerte; base fuerte vs. cido fuerte; cido dbil vs. Base fuerte; base dbil vs. cido fuerte). Determinar el intervalo de viraje y el punto de equivalencia. Seleccionar el indicador cido-base ms adecuado. El intervalo de viraje: Es el tramo de la curva en el cual pequeas adiciones del cido titulante producen grandes variaciones del pH de la disolucin y es la zona de mxima pendiente de la curva de titulacin. CLASES DE TITULACIONES CIDO-BASE

Se pueden clasificar en dos grandes grupos: Alcalimetras: Determinacin de la concentracin de una base empleando un cido fuerte de concentracin conocida como sustancia valor ante. Se emplea casi siempre cido clorhdrico, HCl; a veces cido sulfrico, H2SO4; y casi nunca los cidos ntrico (HNO3) y perclrico, (HClO4). Acidimetras. Determinacin de la concentracin de un cido empleando una base fuerte de concentracin conocida como sustancia valor ante, como el NaOH. Normalidad: N=(# EQUIVALENTES DE SOLUTO )/(# DE LITROS DE DISOLUCION ) Normalidad Acido-Base: Es la normalidad de una solucin cuando se utiliza para una reaccin como acido o basa, por esto suelen titularse utilizando indicadores de pH. PUNTOS DE EQUIVALENCIA Y PUNTOS FINALES El punto de equivalencia de una titulacin es el punto terico que no puede determinarse experimentalmente. Lo nico que podemos estimar es su posicin observando un cambio fsico asociado a la condicin de equivalencia, A este cambio se le conoce como punto final de la titulacin. Un punto final en una titulacin es un cambio fsico observable que ocurre cerca del punto de equivalencia. Los dos puntos finales ms empleados consisten en: *Un cambio de color debido al reactivo, al analito o al indicador. *Un cambio en el potencial de un electrodo que responde a la concentracin del reactivo o del analito.

Para poder comprender las bases tericas de los puntos finales as como el origen de los errores de titulacin, se desarrolla una curva de titulacin para el sistema. Esta curva de titulacin consiste en una grfica en la que el volumen de reactivo se indica en el eje horizontal, y alguna funcin del analito o concentracin del reactivo en el eje vertical.

MATERIALES 1 Pipeta de 10 mL 4 Matraz aforado de 250 mL Agua hervida y fra 1 vidrio de reloj 1 esptula 3 vasos de precipitados de 250 mL 1 probeta de 50 mL 1 bureta graduada de 50 mL 1 pHmetro Pinzas para bureta Papel milimtrico METODOLOGA 1. PREPARACIN DE CIDO ACTICO 0.1 M aforado 250ml gr = 60.05moles * 0.25L * 0.1M =1.50125gr 1.50125 = 1.42976 1.05

Y luego se coloc en un bolo de fondo plano de 250 ml y se aforo

2. PREPARACIN DE NaOH 0.1 N aforado 250ml

= 39,997moles naoh 0.1n 0.25L= 0.995gr Y luego se coloc en un bolo de fondo plano de 250 ml y se aforo

3. PREPARACIN DE LAS MUESTRAS SE TOMO UNA NARANJA Y SE OBTUVO 50 ML MUESTRA SE TOMO UN LIMONY SE OBTUVO 50 ML MUESTRA. SE TOMO UN TOMATE Y SE OBTUVO 50 ML MUESTRA. SE TOMO UNA MUESTRA DE SUELO SE MESCLO 50 ML AGUA PARA OBTENER UNA MUESTRA. SE TOMO CARNE MOLIDA SE AGREGO 50 ML AGUA Y SE MESCLO PARA OBTENER LA MUESTRA

4. DETERMINACIN DE PH: Utilizando pH metro o papel indicador universal, determine el pH de cada filtrado. El pH de stos filtrados corresponden al pH del tejido o muestra utilizada, puesto que su concentracin De Hidrgeno pasa al agua destilada, pudindose as determinar. Escriba los pH obtenidos Naranja obtuvo pH de 3.92 Limn obtuvo pH de 2.03 Suelo obtuvo pH de 7.58 Tomate obtuvo pH de 4.21 Carne obtuvo pH de 5.80

Todos los organismos presentan el mismo pH? Rta: se observaron que algunos son ms cidos que otros por ejemplo el limn, la naranja, la carne y el tomate y otros fueron ms bsicos por ejemplo el suelo Qu concluye de sus resultados?

Rta: se observ la alcalinidad de algunas muestras y la acidez de otras. Se observ

que el limn era el ms cido Y el suelo era el ms alcalino

5. DETERMINACIN DE LA ACIDEZ: Tome por separado, en vasos de precipitado, 10 ml de cada extracto, adicione a cada uno 3 gotas de fenolftalena, agite y titule con NaOH 0.1N, hasta obtener un color ligeramente rosa. Apunte el volumen de NaOH utilizado en cada caso. Clculos: Naranja % Acidez: 15ml*0.1 * 64 eq-g / 10ml = 9.6 % Limn % Acidez: 150ml*0.1 * 64 eq-g / 10ml = 96% Suelo % Acidez: 0.3*0.1 * 64 eq-g / 10ml = 0.192% Tomate % Acidez: 14*0.1 * 64 eq-g / 10ml =8.96% Carne % Acidez: 10*0.1 * 64 eq-g / 10ml = 6.4% 6. DETERMINACIN DE PK: En el laboratorio, experimentalmente, se debe determinar el pK, titulando el cido o la base con pequeos volmenes de una base o acido fuerte de concentracin conocida. Midiendo los cambios de pH despus de cada adicin de base o de cido, y haciendo con stos valores y las concentraciones de base o acido adicionado, una curva de titulacin se puede calcular el pK con bastante exactitud. El pK corresponde a la parte media de la zona de resistencia a los cambios de pH (ver clculos). Tome en un vaso de precipitado, 30 ml de actico 0.1N. Determine su pH inicial y empiece a titular con NaOH 0.1N. Adicione 1 ml de NaOH cada vez agite y determine su pH, hasta tanto la adicin de 1 ml ms de NaOH produzca un cambio brusco de pH, de ms de una unidad, ejemplo de 6.5 a 7.8 o ms. Una vez obtenido este cambio brusco, deje de titular. Escriba sus datos.

PH inicial 2.26 -------------------- PH donde cambiara de incoloro a rosa. Los siguientes resultados corresponden a los valores de PH obtenidos, as como a los mililitros gastados de NaOH al adicionarlos a una solucin preparada con 30 ml de cido actico + 2 gotas de fenolftalena. Obteniendo en base a estos resultados la curva de titulacin que corresponde al adicionamiento de una base fuerte a un cido dbil.

VOLUMEN (ml) PH 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 2,26 2,44 2,72 2,94 3,11 3,23 3,33 3,43 3,52 3,61 3,69 3,76 3,82 3,89 3,95 4,02 4,09 4,15 4,22 4,3 4,39 4,48

VOLUMEN (ml) 23 24 25 26 27

PH 4,68 4,82 5 5,2 5,67

27,5 cambio de color 6,77- 7.05

22

4,58

6. CLCULOS: Construya una tabla con los siguientes dato pH ml NaOH Eq NaOH AcH remanente AcNa AcH/AcNa Con los datos anteriores de pH y de concentraciones de base adicionada, haga una curva de titulacin, as: En Papel milimetrado, coloque los valores de pH en las ordenadas y los mili equivalentes (meq) gramo de NaOH en las abscisas y dibuje una lnea continua a travs de los puntos. En la curva de titulacin usted observar una zona ms recta, que corresponde al rango de pH dentro del cual dicho cido resiste a los cambios de pH. El punto medio de sta zona corresponde al pK. Determine con la mayor exactitud los puntos extremos de dicha zona de resistencia y trace con ayuda de una regla, una recta de extremo a extremo, de manera que pase por el mayor nmero de puntos. Determine el punto medio de dicha recta; el valor de pH de ste punto, es el pK del cido titulado.

CUESTIONARIO

: Cul es el pK obtenido? Se dice que el Pk obtenido en el punto de equivalencia que fue 6.77

A qu pH corresponde? Rta : En esta curva se observa que a PH de 5.67 se gastaron 27 ml de NaOH se comenz a manifestar un ligero cambio de color en la solucin contenida en el vaso de precipitado y posteriormente a los 27.5 ml de NaOH gastados + 1 gota y a PH de 7.05 se manifest completamente el cambio de color de incoloro rosa por lo que observamos que la solucin se neutralizo en el rango normal de neutralizacin es decir a PH neutro = 7 y al seguirle agregando ms base a la solucin llegamos a un PH alcalino

A qu pH se puede utilizar ste cido como buffer?

Rta: se puede utilizar como solucin buffer en un pH de 6.77

Qu razn explica que ste cido a pH=pK resista a los cambios de pH? Rta Se dice que el PH obtenido en el punto de equivalencia que fue 6.77 es igual al valor del PKa de este mismo acido dbil ya que la concentracin del cido es igual a la concentracin de su base conjugada. En qu estado qumico sta ste cido cuando se mantiene a un pH igual a su pK?. Represntelo estructuralmente.

{HA} = {A-} PH = PKa + log {A-} {HA} PH =PKa

De manera que el PH = 6.77 = PKa

CONCLUSIN

De acuerdo a los resultados obtenidos podemos concluir que efectivamente se lograron observar las diferencias que se presentaron tanto en la curva de titulacin de una acido fuerte con una base fuerte como en la curva de titulacin de un cido dbil con una base fuerte adems de que pudimos concluir que de acuerdo a los valores obtenidos de PH en funcin del volumen gastado de NaOH el punto de neutralizacin de las soluciones se alcanz ms fcilmente en la curva de titulacin de una acido dbil con una base fuerte ya que el cido dbil que en este caso fue el cido actico no posee propiedades amortiguadoras que se opongan a los cambio de PH de manera que logramos alcanzar la neutralizacin de la solucin de cido actico con fenolftalena aun PH de 7.05

BIBLIOGRAFIA

1: Skoog Douglas A., West Donald M. y Holler F. James; QUIMICA ANALITICA; Editorial McGRAW-HILL/INTERAMERICANA DE MEXICO, S.A de C.V.; Segunda edicin; Mxico; 1995.

2: Day Jr.R.A. y Underwood A.L.; QUIMICA ANALITICA CUANTITTATIVA; Editorial Prentice Hall Hispanoamericana, S.A.; Quinta edicin; Mxico; 1989.) 3: (Skoog Douglas A., West Donald M. y Holler F. James; QUIMICA ANALITICA; Editorial McGRAW-HILL/INTERAMERICANA DE MEXICO, S.A de C.V.; Segunda edicin; Mxico; 1995.)