Tipo de antibiticos

Los antibiticos se pueden dividir en: Bactericidas (capaces de eliminar las bacterias), y Bacteriostticos (bloquean el crecimiento y multiplicacin celular). Los frmacos bacteriostticos resultan eficaces debido a que las bacterias inhibidas en su crecimiento morirn con el tiempo o sern atacadas por los mecanismos de defensa del husped. Las tetraciclinas y las sulfonamidas son antibiticos bacteriostticos. Los antibiticos que lesionan la membrana celular producen una liberacin de los metabolitos celulares al exterior, y por tanto su muerte. Tales compuestos, como las penicilinas o cefalosporinas, son por tanto bactericidas. Penicilinas Las penicilinas son el grupo ms antiguo y seguro de antibiticos. Son antibiticos bactericidas que inhiben la formacin de la pared celular. Se pueden distinguir varios grupos de penicilinas: Las naturales (penicilinas G y V) de espectro reducido. Las resistentes a microorganismos productores de penicilinasas. Las antipseudomonas. Las aminopenicilinas (amoxicilina y ampicilina). Las asociaciones de penicilinas con inhibidores de las betalactamasas. Cefalosporinas Las cefalosporinas tienen, como las penicilinas, un anillo betalactmico que interfiere con la sntesis de la pared celular bacteriana y son tambin antibiticos bactericidas. Se pueden dividir en: Cefalosporinas de primera, segunda, tercera y cuarta generacin. Aminoglucsidos La estreptomicina es el ms antiguo de los aminoglucsidos y, despus de la penicilina, el antibitico que ha sido ms empleado. Los aminoglucsidos son antibiticos de espectro restringido que inhiben la sntesis de protenas bacterianas en bacilos Gram negativos y estafilococos. En ocasiones se utilizan en combinacin con la penicilina. Todos los miembros de esta familia en especial la neomicina tienen mayor toxicidad que la mayor parte del resto de los antibiticos. Tetraciclinas Macrlidos Los macrlidos como la eritromicina y la azitromicina, son bacteriostticos. Sulfonamidas Las sulfonamidas son antibiticos bacteriostticos sintticos de amplio espectro, eficaces contra la mayora de las bacterias Gram positivas y muchas bacterias Gram negativas. . Quinolonas Se pueden distinguir dos grupos: Las quinolonas de primera generacin (cido nalidxico). Las de segunda generacin (fluorquinolonas). Ejemplos de este grupo son la ciprofloxacina, la norfloxacina y la

ofloxacina. Lincosamidas La clindamicina est relacionada con los macrlidos en cuanto a su mecanismo de accin y presentacin de resistencias cruzadas. Otros antimicrobianos El metronidazol es un antimicrobiano bactericida con actividad exclusiva frente a bacterias anaerobias y protozoos flagelados. La nitrofurantona es til en el tratamiento de infecciones urinarias no complicadas. Tiene numerosos efectos secundarios, lo que limita su uso. La fosfomicina se usa para el tratamiento de infecciones urinarias de las vas bajas. El cloranfenicol es un antibitico de amplio espectro de actividad, pero con facilidad para producir efectos txicos. La rifampicina se utiliza en el tratamiento de la tuberculosis y la brucelosis. Tambin hay que considerarlo el frmaco de eleccin en la quimioprofilaxis de infecciones meningoccicas y de aquellas causadas por el Haemophilus influenzae tipo b.

Produccin de antibiticos
El anillo -lactmico-tiazolidnico de la penicilina se produce a partir de L-cistena y L-valina. La biosntesis se produce por medio de un dipptido compuesto de cido L-a-aminoadpico (L-a-AAA) y L-cistena. Subsecuentemente se conecta la L-valina mediante una reaccin de epimerizacin, dando lugar a la formacin del tripptido d-(L-a-aminoadipil)-Lcisteinil-D-valina. El primer producto de la ciclacin del tripptido que puede ser aislado es la isopenicilina N, pero no se conocen las reacciones bioqumicas que conducen a este intermediario. La bencilpenicilina se produce en el intercambio de L-a-AAA (L-a-aminoadpico) con cido fenilactico activado. El 6-APA, que no es un producto intermediario de biosntesis, se excreta en ausencia de un precursor de la cadena lateral. Se conocen varios mecanismos reguladores en la biosntesis de la penicilina. El aminocido lisina es sintetizado a partir de la va que origina el cido L-a-aminoadpico de forma que la penicilina y la lisina comparten una ruta biosinttica ramificada comn. La lisina inhibe la sntesis de penicilina debido a que inhibe por retroalimentacin a la homocitrato sintasa, un enzima implicado en la sntesis de L-a-AAA. Si el L-a-AAA es deficiente, no puede sintetizarse penicilina. Sin embargo, la retrorregulacin por lisinano parece ser una etapa limitante en la biosntesis de penicilina. La biosntesis de penicilina se ve afectada por la concentracin de fosfato y tambin muestra una clararepresin catablica, particularmente por glucosa. 3.- Desarrollo de cepas La produccin de penicilina por la cepa aislada por Fleming era de aproximadamente 2 u.i./ml; los procesos actuales producen un ttulo de penicilina de aproximadamente 85.000 u.i./ml. Este es un aumento desde 0,0012 g/l hasta 50 g/l e ilustra bien el valor y el poder de un programa de seleccin de cepas. La mejora del cultivo inicial se produjo en 1943 con el aislamiento de la cepa Penicillium chrysogenum NRRL1951. Este microorganismo era ms adecuado para la produccin en cultivo sumergido que la cepa original, Penicillium notatum. Mediante posterior mutagnesis fu aislada la cepa WisQ176, la cepa original de la lnea de cultivos Wisconsin. WisQ176 fu adoptada por la mayor parte de los fabricantes de penicilina y fu utilizada como cepa original en los distintos programas comerciales de mejora de cepas, acerca de los que se ha publicado poco (secreto industrial). Si bien los aumentos de rendimiento han sido el objetivo principal del desarrollo de las cepas, tambin han sido optimizados otros factores que tienen un efecto sobre la fermentacin y la eficiencia de recuperacin del producto.

Los principales avances en el procesamiento han sido obtenidos a travs del screening emprico de mutantes. Hasta mitad de los aos 60 los mutgenos utilizados ms frecuentemente eran los rayos X, mostaza nitrogenada y radiaciones de longitud de onda corta. Ms recientemente han sido utilizados como mutgenos la nitrosoguanidina, los agentes

alquilantes y los nitritos. A principios de los 70 la mejora de cepas por el mero uso de la mutacin haba alcanzado su lmite. El descubrimiento de un ciclo parasexual en Penicillium chrysogenum proporcion una forma de utilizar la recombinacin gentica para el desarrollo de cepas. Se describieron diploides heterozigticos que tenan ttulos de penicilina superiores a los de las cepas haploides parentales. Sin embargo, el mayor porcentaje de cepas con produccin superior de penicilina se produjo a partir de los haploides segregantes de los cruces entre mutantes de diferentes lneas. La tcnica de fusin de protoplastos abri un nuevo enfoque en el desarrollo de cepas de alta produccin obtenindose rendimientos del 8% superiores a los obtenidos por mutacin y seleccin. Adems, algunas de las cepas resultantes han tenido mejores caractersticas de crecimiento, como esporulacin ms estable y mejor crecimiento para la produccin del inculo. El uso de la ingeniera gentica para aumentar la sntesis de enzimas que catalizan pasos limitantes, mediante la amplificacin gnica o mejora de la transcripcin, no ha sido todava posible en Penicillium chrysogenumdebido a la ausencia de datos biosintticos precisos y a la ausencia de buenos sistemas vector-hospedador. Sin embargo, se ha construido un banco de genes paraPenicillium chrysogenum y se ha desarrollado un sistema de transformacin. 4.- Mtodos de produccin La penicilina G y la penicilina V son producidas utilizando procesos sumergidos en fermentadores de 40.000-200.000 litros. Debido a las dificultades en el suministro de oxgeno no pueden ser empleados tanques mayores. La fermentacin de penicilina es un proceso aerbico con una velocidad de absorcin volumtrica de oxgeno de 0,4-0,8 mM/l min. La velocidad de aireacin requerida est entre 0,5-1,0 vvm dependiendo de la cepa, del biorreactor y del tipo de impulsor. Para el mezclado se suelen utilizar varios impulsores de tipo turbina (120-150 rpm). El rango de temperatura ptima es de 25-27C. Un esquema tpico de produccin de penicilina se muestra en la figura. El inculo se inicia utilizando esporas liofilizadas. Debido a la gran variabilidad de las cepas de alta produccin, es necesario el mantenimiento cuidadoso de las cepas. La concentracin de esporas (ptima 5x103/ ml) y la formacin de agregados son cruciales para el rendimiento subsecuente. Si se quiere conseguir una velocidad ptima de formacin de penicilina, los agregados (pellets) no deben crecer como bolas compactas sino de una forma suelta. Despus de varias etapas de crecimiento est preparado el cultivo de produccin. En la fermentacin tpica de penicilina existe una fase de crecimiento de c.a. 40h con un tiempo de duplicacin de 6h, durante la cual se forma la mayor parte de la masa celular. El suministro de oxgeno es crtico en el cultivo en crecimiento ya que el aumento de la viscosidad dificulta la transferencia de oxgeno. Despus de la fase de crecimiento, el cultivo llega a la fase real de produccin de penicilina. Debido al aporte de distintos componentes al medio, la fase de produccin puede extenderse hasta 120-160h. El medio de un cultivo tpico alimentado puede variar dependiendo de la cepa, y generalmente consiste en: Lquido de maceracin de maiz (4-5% peso seco). Una fuente de Nitrgeno adicional, harina de soja, extracto de levadura o suero. Una fuente de carbono, lactosa. Varios tampones El pH se mantiene constante a 6,5. El cido fenilactico o el fenoxiactico se alimentan continuamente como precursores (0,5-0,8% del total). Los procesos con alimentacin de glucosa o melazas tambin tienen xito. En estos casos las velocidades de alimentacin son de 1.0-2.5 kg*m-3*h-1, con una concentracin de glucosa de 500 kg*m-3. Aproximadamente el 65% de la fuente de carbono metabolizada se utiliza para el mantenimiento energtico, el 25% para el crecimiento y slo el 10% para la produccin de penicilina. Se ha intentado la produccin de penicilina por fermentacin continua, pero ha sido difcil debido a la inestabilidad de las cepas de produccin. Como alternativa se ha sugerido un sistema de "tanque de llenar y sacar". En este procedimiento el 20-40% del contenido de la fermentacin se saca y se reemplaza con solucin fresca de nutrientes; este proceso puede ser repetido hasta diez veces sin reduccin del rendimiento. Se est llevando a cabo una intensa investigacin para producir penicilina con clulas inmovilizadas. En un estudio a escala de laboratorio se demostr la ventaja de este enfoque sobre el uso de sistemas discontinuos alimentados, pero esta tcnica no ha sido introducida todava a nivel comercial. La penicilina es excretada al medio y menos del 1% permanece unida al micelio. Despus de la separacin del micelio, la recuperacin del producto se lleva a cabo por medio de dos etapas de extraccin continua en contracorriente del caldo de fermentacin con acetato de amilo o de butilo a 0-3C y pH: 2,5-3,0. El rendimiento es de alrededor del 90%.