UNIVERSIDAD DE CRDOBA

LABORATORIO DE BIOQUIMICA
PRACTICA N 2
PROPIEDADES FISICAS Y QUIMICAS DE LOS AMINOACIDOS
OBJETIVOS:

Observar algunas propiedades fsicas de los aminocidos.

Reconocer la presencia de aminocidos por la reaccin de estos con la Ninhidrina
Identificar algunos grupos funcionales presentes en aminocidos especficos mediante la
formacin de productos coloreados.

TEORIA RELACIONADA
Las clulas vivas producen macromolculas que son biopolmeros constituidos por unidades
monomricas o bases estructurales. Para las protenas, estas unidades son los L aminocidos.
Las propiedades biolgicas de estas macromolculas estn determinadas en gran parte por las clases
de aminocidos presentes, el orden en el que estn dispuestos en una cadena de polipptidos y por
lo tanto la relacin espacial de un aminocido con otro. Los aminocidos contienen grupos
funcionales amino y carboxilo. En un aminocido, ambos estn unidos al mismo tomo () de
carbono. De los aminocidos presentes en la naturaleza, slo 20 de ellos aparecen en las protenas
de todas las formas de vida, vegetal, animal o microbiana. Los aminocidos intervienen en la
transmisin de impulsos en el sistema nervioso (Glicina y acido glutmico). Los aminocidos
esenciales deben ser suministrados en la alimentacin, ya que nuestros cuerpos no pueden
sintetizarlos en cantidades adecuadas para respaldar el crecimiento (nios) o para conservar la salud
(adultos).
Reaccin de la Ninhidrina: Es un agente oxidante poderoso, reacciona con todos los aminocidos
a un pH entre 4 y 8 para dar un compuesto de color prpura. Esta reaccin se efecta tambin con
los aminocidos prolina e hidroxiprolina, pero en este caso se obtiene un color amarillo en vez de
prpura
Reaccin Xantoproteica: Los aminocidos que contienen un ncleo aromtico forman
nitroderivados de color amarillo cuando se calientan con cido ntrico concentrado. Las sales de
estos derivados son de color rojo naranja.
Reaccin de Millon: Los compuestos que contienen el radical hidroxibenceno reaccionan con
reactivo de milln formando compuestos rojos. Los nicos aminocidos fenlicos son la Tirosina y
sus derivados y solamente ellos dan una reaccin positiva. El reactivo original de Millon es una
solucin de nitrato mercrico en cido ntrico 50% v/v.
Reaccin del Acido Glioxlico para Triptfano: Grupo indlico del triptfano reacciona con cido
glioxlico en presencia del cido sulfrico concentrado dando un color prpura.
Reaccin de Sakaguchi: El nico aminocido que contiene grupos guanidinos es la Arginina; esta
reacciona con naftol y un agente oxidante tal como agua de bromo o hipoclorito en un medio
alcalino, dando un color rojo.

MATERIALES Y REACTIVOS
10 Tubos de ensayo
1 Gradilla
1 Pinza para tubos de ensayo.
3 Pipetas de 1, 5 y 10 mls
1 Gotero.
1 Estufa
1 Beaker de 500mls
Papel indicador.
Soluciones al 0.5% de aminocidos: Glicina, Tirosina, Triptfano, Fenilalanina, Arginina.
Ninhidrina: Disolucin al 0.2% en alcohol o acetona.
HNO3 al 10%
NaOH al 20% o amoniaco.
Fenol, disolucin al 0.1%
Reactivo de Milln.
Agua de bromo
- Naftol: 0.2%
Nitrito de sodio.
Acido glioxlico
Acido sulfrico.

PROCEDIMIENTO:
1. Examen Fsico: Anote el estado fsico de la sustancia (Aminocidos): Slido, lquido, polvo,
solucin, cristal. Si es homognea.
Color: Ver si es uniforme o si cambia durante el proceso.
Olor: Percibir si se trata de olor caracterstico o relacionado con un grupo qumico.
2. Reaccin de la Ninhidrina: Coloque 1 ml de solucin de aminocido (glicina, tirosina y
triptfano) en un tubo de ensayo y ajuste el p.H cerca de la neutralidad ( ya esta ajustado);
agregue 5 gotas de solucin de ninhidrina, deje hervir por 3 minutos y anote sus resultados.
3. Reaccin Xantoproteica: Adicione 1 ml de solucin de cido ntrico a aproximadamente 1
ml de solucin de aminocido (glicina, tirosina, Triptfano, y fenilalanina), calentar por
3min, deje enfriar y observe el cambio de color. Agregue suficiente NaOH al 20% hasta que
la solucin sea fuertemente alcalina. El cambio de coloracin de amarillo en solucin cida
a naranja brillante en solucin lcali constituye un resultado positivo.
4. Reaccin de Millon: A 0.5 ml de la muestra (Glicina, tirosina, y fenilalanina) adicione 3
gotas del reactivo de millon y caliente en un bao de agua hirviendo por 10 minutos. Deje
enfriar a temperatura ambiente agregue 5 gotas de solucin de nitrito de sodio, la aparicin
de un color rojo ladrillo indica un resultado positivo.
5. Reaccin del cido Glioxlico para el Triptfano: A 1 ml de la muestra (glicina, tirosina y
Triptfano agregue 1 ml de cido glioxlico,. Observe bien el color inicial en cada caso.

Agregue 1 ml de acido sulfrico por las paredes del tubo, la formacin de un anillo color
prpura indica que la reaccin es positiva.

6. Reaccin de Sakaguchi: Mezcle 0.5 ml de lcali fuerte con 1.5 ml de solucin de

aminocido (glicina y arginina) y agregue dos gotas de naftol. Mezcle fuertemente y
agregue cuatro a cinco gotas de agua de bromo. Note el color formado.
PREGUNTAS:
1- Escriba la reaccin para cada prueba realizada.
2- De acuerdo con las pruebas realizadas en esta prctica proponga una clasificacin para los
aminocidos.
3- Identifique los grupos qumicos que caracterizan a los aminocidos.
4- Explique como se encuentran estructuralmente los aminocidos en el plasma sanguneo o
lquido intracelular cuyo pH es de 7.4 y 7.1 respectivamente.
5- Cuales son las explicaciones prcticas de las pruebas realizadas.

BIBLIOGRAFIA:
PLUMER, D.T. Introduccin a la bioqumica prctica. Mxico. MaGrawS.A.

Hill Latinoamericana,

CONN, E y Stumpf, P.K. Bioqumica F.

LOPEZ, E y ANZOLA, C. Guas de laboratorio de Bioqumica. Facultad de ciencias. Universidad
Nacional de Colombia sede Bogota.