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2. Con el factor calculado se precede a calcular la absorbancia con la
siguiente ecuacin.
(
)
Como se tiene que el valor mximo para conservar la linealidad de la
funcin es 20 mg/dL, despejaremos la absorbancia de la muestra la cual
ser la absorbancia mxima.
3. Con la ecuacin anterior reemplazamos valores de concentracin de cido
rico (20mg/dL) y el factor de la prueba (23,15), con esto obtenemos el
valor de la absorbancia mximo para la muestra.
Ahora bien si se tiene que una de las muestras tena una absorbancia de 0,011
esto nos da como resultado una concentracin de 0,25 mg/dL de cido rico, una
concentracin muy por debajo del rango normal lo que generara un
cuestionamiento y bajo un criterio se hara la sugerencia de volver a repetir la
prueba, si esta vuelve a dar igual, el paciente debera consultar con un mdico.
A partir de este momento se dar un enfoque general del producto utilizado en
esta prctica.
El cido rico es producto del metabolismo de las purinas (componentes de ciertas
protenas) y se produce de forma natural en el organismo. Al existir ms purinas
en el cuerpo, aumentan las concentraciones de cido rico en sangre. Esto se
conoce como hiperuricemia. Las concentraciones normales del cido rico en
sangre son de 2,5 hasta 6,5 mg/dL para hombres y para las mujeres de 2,5 hasta
7 mg/dL. Entre ms tiempo se mantenga la hiperuricemia, mayor es la posibilidad
de llegar a desarrollar gota.
Uno de los mtodos para reducir los niveles de cido rico en la sangre es utiliza
vitamina c que es una vitamina hidrosoluble, tambin conocida como cido
ascrbico. A diferencia de la mayora de los mamferos y otros animales, los seres
humanos no poseen la habilidad para sintetizar su propia vitamina C. Por lo tanto,
deben obtener la vitamina C a travs de su dieta.
La ingesta diaria total de vitamina C se asocia inversamente con el riesgo de gota,
asociando las ingestas ms altas con mayores reducciones del riesgo. Los
resultados de este estudio tambin sugieren que la vitamina C suplementaria
podra ser beneficiosa en la prevencin de la gota. Curiosamente, un ensayo
clnico aleatorizado, de doble ciego y controlado con placebo en 184 adultos no
fumadores, inform que la suplementacin con vitamina C (500 mg/da) por dos
meses disminuy las concentraciones sricas de cido rico en comparacin al
placebo.
En otros aspectos en este laboratorio se trabaj con la enzima Uricasa que se us
oxidar el cido rico a alantona y perxido de hidrgeno.
cido rico + O
2
+ H
2
O 5-hidroxiisourato + H
2
O
2
alantona + CO
2
La urato oxidasa es una enzima homotetramrica que
contiene cuatro sitios activos idnticos situados en la
superficie de contacto existente entre sus cuatro subunidades.
Se compone de un nmero variable de aminocidos (segn la
especie) siendo alrededor de 300 residuos de los mismos,
con un peso molecular de unos 33 kDa.
Es nico entre las oxidasas en que no requiere un tomo de
metal o un co-factor orgnico para la catlisis. Anlisis de
secuencias de varios organismos ha determinado que hay 24
aminocidos que se conservan, y de stos, 15 estn
involucrados con el sitio activo.
Imagen 1. Estructura de la enzima
Urato Oxidasa.
Por otra parte, En el genoma humano est presente un gen que codifica la urato
oxidasa, pero no es funcional a causa de una mutacin. Dada la ausencia de la
urato oxidasa, el cido rico es el producto final del catabolismo de la purina en el
hombre. Existe una hiptesis que propone que la prdida de la enzima ha sido
ventajosa para los primates superiores, dado que el cido rico es un antioxidante,
prolongando la vida de los mismos y disminuyendo la incidencia de tumores.
Hasta antes de 1980 el ensayo para medir cido rico se basaba en la reduccin
del cido fosfotngstico por el cido rico formando un complejo de fosfotungstato
azul. Esta reaccin ha sido reemplazada por el ensayo enzimtico usado en esta
prctica. Porque este mtodo de laboratorio logra confiabilidad diagnostica una
vez realizados los protocolos de validacin clnica, a travs de emplear grupo de
pacientes en quienes se conoce la presencia o ausencia de niveles normales de
lo que cuantifica el mtodo.
Adems, permite conocer los valores de referencia para cido rico en suero
sanguneo de forma especfica, no es un mtodo que requiera muchas
condiciones, las condiciones utilizadas en este laboratorio no requirieron gastos
econmicos elevados, y el mtodo utilizado es cuantitativo; es decir, especifico da
resultados que permite reflexionar si el paciente est en los niveles apropiados o
no.
En talantes mdicos, se dar un nfasis en la enfermedad de la gota. La gota es
una de las formas de artritis ms dolorosas. Ocurre cuando se acumula
demasiado cido rico en el cuerpo. Esta acumulacin puede provocar:
Depsitos de cristales de cido rico en las articulaciones o coyunturas, y
frecuentemente se acumulan en el dedo gordo del pie.
Depsitos de cido rico (llamados tofos gotosos) que parecen como bultos
debajo de la piel y Piedras (clculos) renales debido a los cristales de cido rico
en los riones.
La gota puede causar:
Dolor.
Hinchazn.
Enrojecimiento.
Calor.
Rigidez en la articulacin.
Existen diferentes tratamientos para tratar esta enfermedad por ejemplo:
ALIVIO SINTOMTICO:
Las terapias que existen actualmente para el alivio del dolor son:
Medidas fsicas: Aplicacin de hielo local por aproximadamente 20 minutos:
un ensayo clnico randomizado (ECR) mostr una reduccin significativa del
dolor cercana al 48%, con la utilizacin de ice pack en la zona afectada.
Frmacos
1. AINES.
2. Colchicina.
3. Corticoides.
PREVENCIN DE RECURRENCIAS
1. Medidas Generales: Estas se basan principalmente en recomendaciones y/o en
estudios observacionales ya que no existen ECR que avalen dichas
recomendaciones.
La indicacin de estas medidas debe hacerse a todos los pacientes con gota. Las
recomendaciones son:
Baja de Peso: en general se recomienda limitar el aumento de peso en normopeso
y baja de peso en sobrepeso y obesidad.
Reduccin de la ingesta de OH: se recomienda su reduccin drstica,
especialmente aquellos de alta gradacin. Hay un estudio de cohortes prospectivo
que sigui a 49150 hombres sanos profesionales de la salud, por 12 aos, y
mostr que la ingesta de licores o cerveza aumentaba la incidencia de gota.
Reduccin ingesta alimentos ricos en purinas: Otro estudio realizado con esta
misma poblacin mostr que la dieta rica en carnes o mariscos ricos en purinas,
aumentaba la incidencia de gota, y no as la ingesta de verduras ricas en purina.
Evitar medicamentos que pudiesen elevar la uricemia: Se asocian a hiperuricemia:
diurticos, salicilatos en dosis bajas, etambutol, etanol, pirazinamida y levodopa.
CONCLUSIONES
Se comprendi de forma terica que el cido rico es el producto final del
metabolismo de las purinas y es eliminado principalmente por va renal. Y su
fuente principal son las nucleoprotenas de la dieta. En esta prctica se realiz el
experimento con el plasma sanguneo de una persona que tiene los niveles
apropiados de cido rico.
Este mtodo enzimtico no es costoso y a partir de l se obtiene resultados
cuantitativos de forma especfica aunque no exista unas normas a seguir acerca
de las condiciones de trabajo, ya que slo necesitbamos del tiempo y de la
temperatura corporal que es de 37C.