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1. Reloj o cronmetro
Nmero de Catlogo R0060C

Diagnostico In Vitro
INTENCION DE USO
La prueba rpida en sitio de Dengue IgG/IgM es un inmunuensayo de flujo lateral para la
deteccin simultanea y diferenciada de virus anti-dengue IgG e IgM (DEN 1, DEN2, DEN3, y
DEN4) en suero o plasma humano. Su idea de uso primordial es para monitorear y ayudar a
diagnosticar la infeccin el virus del Dengue. Cualquier muestra positiva debe de ser
confirmada con un mtodo alternativo
2. Un diligente (1 vial, 5 mL)
3. Un Inserto (Instrucciones de Uso)
1 Control Positivo (1 vial, tapa roja, 1 mL, Cat # R0060-P)
2 Control Negativo (1 vial, tapa verde, 1 mL, Cat # R0060-N)
MATERIALES REQUERIDOS PERO NO SUMINISTRADOS
Para uso de Diagnostico y In Vitro
1. Este inserto deber ser ledo por completo antes de desempear el examen.
No leer las instrucciones puede llevar a tomar resultados imprecisos.
2. No abra el sobre laminado, hasta estar listo para llevar a cabo la prueba.
3. No utilice dispositivos caducos.
4. Introduzca todos los reactivos a temperatura de interior (15 - 30C) antes de
usar.
5. No utilice componentes de cualquier otra prueba como substituto a los
componentes de este kit.
6. No utilice sangre hemolizada.
7. Utilice ropa protectiva y guantes deshechables mientras utilice los reactivos del
kit y los especmenes clnicos. Lavese las manos con cuidado despus de
desempear la prueba.
8. Usuarios de esta prueba debern seguir las precauciones universales US CDC
para la prevencin de transmisin de HIV, HBV y otros patgenos.
9. No fume, beba, o coma en reas en las que los especmenes estn siendo
manejados.
10. Deseche todos los especimenes y materiales como desechos biolgicos.
11. Maneje los controles de la misma forma que los especmenes de pacientes.
12. Los resultados del examen debern leerse dentro de 10 minutos despus de
que el espcimen es aplicado a la ranura de muestra o a la almohadilla del
dispositivo. Leer despus de 10 minutos puede dar resultados errneos.
13. No realice la prueba en un cuarto con mucho flujo de aire, por ejemplo, con
ventiladores elctricos o un fuerte aire acondicionado



PREPARACION DE LOS REACTIVOS E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO
Todos los reactivos estn listos para utilizar como fueron provistos. Almacene los dispositivos
sin utilizar a temperaturas de 2 - 30 C. Los controles positivos y negativos deben guardarse a
2C - 8C, asegrese que el dispositivo de prueba se encuentra en temperatura de interior antes
de abrir. El dispositivo de prueba es estable hasta la fecha de expiracin impresa en el sobre
laminado. No congele el kit ni lo exponga a temperaturas mayores a 30C.
COLECCIN DEL ESPECMEN Y MANEJO
Considere cualquier material de origen humano como infeccioso y manjelo utilizando
procedimientos de bio-seguridad estndar.
Plasma
1 Colleccione el espcimen de sangre en un tubo de coleccin de tapa lila, azul o
verde (conteniendo EDTA, citrato o heparina, respectivamente en Vacutainer)
por puncin.
2 Separe el plasma por centrfuga.
3 Cuidadosamente retire el suero en un nuevo tubo previamente etiquetado.
Suero
1 Coleccione el espcimen de sangre en un tubo de coleccin de tapa roja
(conteniendo ningn anticoagulante en Vacutainer) por puncin.
2 Permita que la sangre se coagule.
3 Separe el suero mediante centrfuga.
4 Cuidadosamente retire el suero en un tubo nuevo previamente etiquetado.

Los especmenes de prueba tan pronto y sea posible despus de colectarse. En caso de no
hacer la prueba inmediatamente, almacene los especmenes entre 2 y 8C.
Almacene los especmenes entre 2 y 8C por hasta 5 das. Los especimenes debern
congelarse a -20C para un mayor almacenaje.

Evite ciclos mltiples de congelamiento-descongelamiento. Antes de realizar la prueba, lleve los
especmenes a temperatura de interior lentamente y mezcle gentilmente. Los especimenes que
contengan materia de partculas visibles debern ser aclarados por centrfuga antes de realizar
la prueba. No utilice muestras que contengan lipemia gruesa, hemlisis gruesa o turbiedad con
el propsito de evitar interferencia en la interpretacin de resultados.
PROCEDIMIENTO DE ENSAYO
Paso 1: Lleve el espcimen y los componentes de prueba a temperatura de interior si se
encuentran refrigerados o congelados. Mezcle el espcimen bien una vez
descongelado antes de llevar a cabo el ensayo.
Paso 2: Estando listo para llevar la prueba, abra el sobre y retire el dispositivo. Coloque la
prueba en una superficie limpia y plana.
Paso 3: Asegrese de etiquetar el dispositivo con el nmero de identificacin del
espcimen.
Paso 4: Llene el gotero plstico con el espcimen. Mantenga el gotero verticalmente y
dispense 1 gotas (alrededor de 35 45 !l) de espcimen en la ranura de
muestra, asegurando que no hay burbujas de aire. Despus aada (alrededor de
35 50 !l) de diluyente inmediatamente.






Paso 5: Inicie el Cronmetro
Paso 6: Los resultados pueden leerse en 10 minutos. Resultados positivos pueden ser
visibles tan pronto como en un minuto.
No lea los resultados despus de 15 minutos. Para evitar confusin, deseche el
dispositivo luego de interpretar el resultado.



Los Virus del Dengue, una familia de 4 distintos estereotipos de virus (Den 1, 2, 3, 4), son de
virus ARN de cadena sencilla. Estos virus son transmitidos por mosquitos diurnos de la familia
Stegomyia, principalmente Aedes aegypri, y Aedes albopictus. Hoy, mas de 2.5 mil millones de
personas viviendo en las reas tropicales de Asia, Africa, Australia y las Amricas estan en
riezgo de infeccin de dengue. Un estimado de 100 millones de casos de fiebre de dengue y
250,000 casos de fiebre hemorrgica con peligro de muerte ocurren anualmente en una base
mundial.

La deteccin serolgica es un mtodo comn para el diagnstico de la infeccin del virus del
dengue. El virus igM anti-dengue empieza a aparecer a los 3 das despus de la exposicin
inicial y permanece en circulacin por alrededor de 30-60 das. El virus anti-dengue IgG
incrementa luego de 7 das, topa a los 2-3 semanas, y persiste por vida.

La prueba Rpida Onsite Dengue IgG/IgM detecta virus anti-dengue IgG e IgM dentro de 15
minutos. La prueba es amigable al usuario, sin la necesidad de utilizar equipo sofisticado de
laboratorio.

PRINCIPIO DE LA PRUEBA

RESUMEN Y EXPLICACION DE LA PRUEBA
La Prueba rpida en sitio IgG/IgM de Dengue es un inmunoensayo cromatogrfico de flujo
lateral. Esta prueba de cassette consiste de: 1) una almohadilla con conjugado de colorante
tinto que contiene antigenos recombinantes conjugados con oro coloidal (conjugados de
dengue) y conjugados de conejo IgG-oro, 2) una tira de membrana nitrocelulosa que contiene
las 2 bandas de prueba (banda T1 y T2) y una banda de control (banda C). La banda T1 esta
previamente rociada con anticuerpo para la deteccin del virus anti-dengue IgM, y la banda C
esta previamente rociada con cabra anti-conejo igG.

Cuando un volumen adecuado de espcimen de prueba se dispensa en la ranura de muestra
del cassette de prueba, el espcimen migra por accin capilar a lo largo del cassette. Si el virus
igG anti-dengue esta presente en el espcimen va a empatar a los conjugados de dengue. El
inmuno-complejo es entonces capturado por el reactivo rociado en la banda T1, formando una
banda T1 color vino tino, indicando un resultado positivo y sugiriendo una infeccin reciente o
repetida.
El virus anti-dengue IgM, si se presenta en espcimen, va a empatar a los conjugados de
dengue. El inmuno-complejo es entonces capturado por el reactivo previamente rociado en la
banda T2, formando una banda T2 color vino tinto, indicando un resultado de prueba positivo al
virus IgM y sugiriendo una infeccin prxima.
La ausencia de ambas bandas T (T1 y T2) sugiere un resultado negativo.
La prueba contiene un control interno (banda C) el cual debe exhibir una banda color vino tinto
del inmuno-complejo de cabra anti ratn IgG/conejo IgG-oro conjgado independientemente del
desarrollo de las lneas T. De lo contrario, el resultado de prueba es invlido el espcimen debe
ser examinado con otra prueba.














REACTIVOS Y MATERIALES PROVISTOS
1. Cada kit incluye 30 dispositivos de prueba, cada uno sellado en un sobre laminado y con
tres artculos en su interior:
a. Un dispositivo de prueba
b. Una pipeta o gotero
c. un desecante
MATERIALES REQUERIDOS NO SUMINISTRADOS
ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES
Prueba Rpida - OnSite de Dengue IgG/IgM en Cassette (Suero / Plasma)
G
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A
M
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El uso de los cassettes individuales de prueba de Dengue IgG/IgM se describe en el
procedimiento de ensayo, haga un control positivo y un control negativo (provistos bajo
requerimiento si los controles de calidad no estn disponibles en laboratorio) bajo las siguientes
circunstancias para monitorear el desempeo del cassette.



Los resultados esperados son los siguientes

Control Negativo Solo aparece banda C, la au-
Sencia de cualquier color tinto en tanto la lnea
T1 y T2 indica que no se detectaron anticuerpos
de virus anti-dengue. El resultado es negativo.

Control Positivo La banda C y las lneas (T1 y T2)
muestran lneas coloreadas.


La aparicin de cualquier color vino tinto en las lneas T1 y T2, independientemente de su
intensidad deben considerarse como la presencia de la lnea.
INTERPRETACIN DEL RESULTADO DE PRUEBA
1 RESULTADO NEGATIVO: Si solo la lnea C esta presente, la ausencia de
cualquier color tino en ambas lneas T (T1 y T2) indica que no hay deteccin de anticuerpos
anti-dengue. El resultado es negativo



2 RESULTADO POSITIVO:
2.1 Adems de la presencia de la lnea C, si solo la lnea T1 aparece, se indica la
presencia del virus anti-dengue IgG; el resultado es positivo.


2.2 Adems de la presencia de la lnea C, si solo la lnea T2 aparece, la prueba indica la
presencia del virus anti-dengue IgM. El resultado es positivo.


2.3 Adems de la lnea C, aparece tanto las lneas T1 y T2, se indica la presencia del
virus anti-dengue IgG e IgM. El resultado tambin es positivo.
Muestras con resultados positivos han de confirmarse con metodos alternativos y
averiguaciones clnicas antes de una determinacin positiva.
independientemente de la presencia de cualquier lnea como se indica. Repita el examen.





.

Desempeo clnico al IgG
Un total de 226 muestras de pacientes susceptibles fueron probadas con la prueba IgG/IgM
OnSite y con un EIA comercial. La comparativa para todos los sujetos es mostrada en la tabla a
continuacin.
OnSite Dengue IgG/IgM Prueba Rpida
IgGEIA Test Positivo Negativo Total
Positivo 25 1 26
Negativo 7 193 200
Total 32 194 226
Sensibilidad Relativa: 96.1%, Especificidad Relativa: 96.5%, Concordancia General: 96.4%
CONTROL DE CALIDAD

European Authorized
Representative:
The Netherlands. Tel.: +31 (0)6.516.536.26
Index of CE Symbol
In Vitro
Diagnostics


1 Un operador usa el kit por primera vez, antes de probar con especmenes.
2 Un nuevo kit se va a utilizar.
3 Un nuevo embarque se kits de va a utilizar.
4 La temperatura utilizada durante el almacenaje esta fuera de 2 30 C.
5 La temperatura del cuarto de pruebas esta fuera de 15 30 C.
Un total de 224 muestras de sujetos susceptibles se probaron con el dispositivo y con un
EIA comercial. La comparacin para todos los sujetos se muestra en la siguiente tabla:
OnSite Dengue IgG/IgM Prueba Rpida
IGM EIA Test Positivo Negativo Total
Positivo 22 2 24
Negativo 5 195 200
Total 27 197 224

Desempeo Clnico de la prueba IgM
CARACTERSTICAS DE DESEMPEO
Sensitividad Relativa 91.6% , Especificidad Relativa: 97.5%, Concordancia General: 96.9%

1. Gubler DJ, Clark GG. Dengue/dengue hemorrhagic fever. The emergence of a
global health problem. Emerg Infect Dis 1995;1(2):5557.
2 Gubler DJ, Trent DW. Emergence of epidemic dengue/dengue hemorrhagic fever
as a public health problem in the Americas. Infect Agents Dis 1994;2:383393
3 Monath TP. Dengue: The risk to developed and developing countries. Proc Natl
Acad Sci U S A 1994;91:23952400.
4 Price DD, Wilson SR, Dengue Fever, e-medicine,
http://www.emedicine.com/EMERG/topic124.htm, Jan, 2002.
5 Innis BL, and Nisalak A, et al: An enzyme-linked immunosorbent assay to
characterize dengue infections where denude and Japanese encephalitis co-circulate. Am. J.
Trap. Med. Hygiene. 1989: 40: 418-427.
6 Anonymous. Dengue hemorrhagic fever: diagnosis, treatment, prevention and
control. 2nd ed. Geneva: World Health Organization, 1997

REFERENCIAS
1 El procedimiento de ensayo y la interpretacin de los resultados del ensayo deben
seguirse de cerca al realizar pruebas de anticuerpo al virus del dengue en suero o
plasma de individuos.
2 La prueba Onsite de Dengue IgG / IgM esta limitada a la deteccin cualitativa del
anticuerpo de dengue en suero humano o plasma. La intensidad de la lnea de
prueba no tiene una correlacin con la cantidad de anticuerpo presente en el
espcimen.
3 La prueba OnSite de Dengue IgG/IgM no puede utilizarse para diferenciar si la
infeccin es primaria o secundaria. No puede proveerse informacin de serotipos de
dengue con esta prueba.
4 Reactividad cruzada serolgica con otros flavivirus es comn (por ejemplo,
encefalitis japons, fiebre amarilla, etc), por lo que, es posible que los pacientes
infectados con estos virus pueden generar cierta reaccin con esta prueba.
5 Un resultado negativo para un individuo indica la ausencia de anticuerpo anti-dengue
detectable. Sin embargo, un resultado negativo no excluye la posibilidad de
exposicin o la infeccin con virus de dengue.
6 Un resultado negativo puede ocurrir si la cantidad de anticuerpo anti-dengue
presente en el espcimen esta por debajo de los lmites de deteccin del ensayo, o
los anticuerpos que se detectan no estan presentes durante la etapa de la
enfermedad en la que se colecto la muestra.Por lo tanto, un seguimento de
exmenes o pruebas alternativas tales como de anticuerpo o mtodo PCR deben
recomendarse si las averiguaciones clnicas sugieren una infeccin o cuando existe
una epidemia.
7 Algunos especimenes que contienen inusualmente altas concentraciones de
anticuerpos heterofilos o factor reumatoide pueden afectar los resultados esperados.
8 Los resultados obtenidos con esta prueba deben solo ser interpetados con otros
procedimientos de diagnstico y averiguaciones clnicas.

LIMITACIONES DE LA PRUEBA
Lea las
instrucciones.
CEpartner4U , Esdoornlaan 13, 3951DB Maarn.
Prueba Rpida - OnSite de Dengue IgG/IgM en Cassette (Suero / Plasma)