UNIVERSIDAD DE CRDOBA

FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS E INGENIERIAS DEPARTAMENTO DE QUMICA

LABORATORIO DE BIOQUIMICA
PRACTICA DENTIFICACIN DE CUERPOS CETNICOS EN ORINA
OBJETIVOS
1. Determinar la presencia de cuerpos cetnicos en orina, mediante pruebas cualitativas para
cada uno de ellos.
2. Familiarizarse con algunos protocolos empleados en laboratorios clnicos para el
reconocimiento de cuerpos cetnicos
TEORA RELACIONADA.
Los cuerpos cetnicos son los cidos acetoactico, la acetona y el cido - hidrxibutirico. En la
cetsis, hallamos un aumento de estas sustancias en la sangre y en la orina. Bajo buenas
condiciones de salud, los cuerpos cetnicos se forman en el hgado y son completamente
metabolizados, de tal manera que solo cantidades insignificantes aparecen en la orina. Por el
contrario, en casos de diabetes, inanicin, vmitos con deshidratacin y despus de la
exposicin al fro y/o ejercicio vigoroso, los cuerpos cetnicos pueden encontrarse en
cantidades apreciables en la orina, lo cual permite su determinacin cualitativa. La
determinacin de acetona (Mtodo de Imbert), se fundamenta en la formacin de un
ferropentacianuro con el derivado isonitrado de la acetona, la determinacin de acido
acetoactico (Mtodo de Gerhrdt), se basa en la aparicin de una coloracin rojo-vinosa con el
cloruro frrico y en el Mtodo de Hart, el acido - hidrxibutirico es transformado en acetona, la
cual se identifica mediante el reactivo de Imbert.
MATERIALES Y REACTIVOS
2 tubos de ensayo Amoniaco
1 pinza para crisol
Cloruro frrico al 10%
1 gradilla
Agua destilada
2 pipetas
Perxido de hidrogeno al 10%
1pinza para tubos de ensayo
Nitroprusiato de sodio al 5% en CH3COOH al 50%
1 beacker de 250ml
Orina de diabtico (traer)
1 capsula de porcelana
Acido actico glacial.
PROCEDIMIENTO DETERMINACIN DE ACETONA: A 5 ml de orina, agregue 0.5ml de
nitroprusiato de sodio disuelto al 5% en acido actico al 50%, adicione 0.5ml de amoniaco por
las paredes del tubo, la aparicin de un anillo rojo violceo en l contacto de los lquidos, es
indicativo de la presencia de acetona.
DETERMINACION DE ACIDO ACETOACTICO. A 5 ml de orina de adicionan unas gotas de
cloruro frrico, en presencia de acido acetoactico se produce una coloracin rojo-vinosa.
DETERMINACION DE ACIDO -HIDROXIBUTIRICO : En una capsula de porcelana se
mezclan 10ml de agua y 10 ml de orina, se acidifica con unas 5 gotas de acido actico y se
calienta en una estufa hasta reducir el volumen a la mitad. Con este calentamiento se eliminan
la acetona y el acido acetoactico, al contenido de la capsula se le agregan 10ml de agua y se
transfiere en partes iguales a dos tubos de ensayo, uno de estos tubos servir como control, al
otro se le adiciona 1ml de perxido de hidrogeno al 10% y se calienta en bao de Mara por 5
min, se deja enfriar y finalmente se practica la prueba de Imbert a ambos.