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Caractersticas & Monitoreo de Hongos & Bacterias en la Calidad del Aire en Interiores
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Asimismo, es posible expresar la composicin de una determinada especie de
hongos o bacterias respecto al total, esta expresin es tpica del mtodo de la
sedimentacin.
Para efectuar el conteo, se puede realizar el conteo directo; as como usar
contadores electrnicos que calculan las UFC de forma inmediata, como es el
mtodo de Coutler.
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6. ANLISIS DE CASOS
6.1. Estudio de contaminantes biolgicos (hongos y bacterias) en aire interior
de oficinas administrativas de una empresa petroqumica, estado Anzotegui-
Venezuela (Parra et al. 2008)
6.1.1. Descripcin General
Este caso de estudio se centra en la sede administrativa de la empresa, donde
se tiene antecedentes de malestar diagnosticadas por mdicos, especialmente
estornudos, alergias, gripe, olores extraos entre otros. Adems, la presencia de
moho en los bordes de los techos y paredes, as como la falta de aplicacin de
un sistema de ventilacin. Por otra parte, el nivel de humedad es alto,
aprecindose la condensacin en las ventanas por lo cual se est provocando
ambientes propicios para el crecimiento y contaminacin biolgica. El estudio
tuvo varias fases, donde se analiza la percepcin de los trabajadores por
encuestas y talleres, sin embargo, el presente informe se centrar en el anlisis
microbiolgico.
6.1.2. Materiales & Mtodos
La estrategia de muestreo fue la siguiente:
Da de muestreo: Se realiz por das consecutivos; lunes 21/07/08 y
martes 22/07/08. En el horario comprendido desde las 7:00am a
12:00pm y en la tarde de 1:00pm a 5:00pm
Tiempo de muestreo: El tiempo para cada muestra se determin en
cinco minutos (5minutos/muestra). Es decir, tomar un punto de
muestreo llev un tiempo de diez minutos. Cinco minutos para hongos y
cinco minutos para bacterias. En segundo piso se realiz el muestreo
bajo la aplicacin de 2 mtodos (Acuosos y de Impactacin) el tiempo de
muestreo se prolong en veinte minutos pues se us diez minutos para
cada mtodo de muestreo.
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Mtodos de captacin:
o Biosampler (Medio acuoso): Colecta partculas bioaerosoles que
se encuentran suspendidas en el aire dentro de trampas de
lquido.
o HiAir Sampler System (Medio solido-Impactacin): En este equipo
el volumen de aire es impulsado por una hlice sobre una cinta
de plstico portadora de cultivo slido.
Tcnica de estimacin de la densidad microbiana:
Para estimar las UFC, se utiliz el mtodo directo de recuento en placa,
para ello se tomaron alcuotas de 1ml de las muestras y se colocaron en
9 ml de solucin salina. Seguidamente, se realizaron diluciones seriadas
en solucin salina peptonada (SSP) hasta 1:1000000 para bacterias y
1:10000 para hongos. Cada una de las diluciones se sembraron por
superficie en placas con Agar Tripicasa de Soya (ATS) con fungicida para
el aislamiento de bacterias y en placas de Agar Extracto Malta (AEM)
con antibitico para el aislamiento de hongos.
Luego de la incubacin, 24horas para bacterias y 7 das para hongos, se
procedi al conteo de UFC.
6.1.3. Resultados & Discusin
Los promedios de UFC de Bacterias (UFC/m
3
):
Segn el cuadro anterior se evidencia la mayor concentracin de bacterias
en el piso 2, especficamente en lado este, cabe resaltar que en esa zona se
advirti ms moho en las ventanas, humedad y quejas de los trabajadores
por enfermedades respiratorias. Adems, se verific que las bacterias gram
(+) de tipo cocos son las predominantes.
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Los promedios de UFC de Hongos (UFC/m
3
):
*Promedio de Hongos UFC/m3
Respecto a los hongos se encontr ms en la planta baja a ambos lados del
edificio, pero siendo mayor en el este. Se advierte que se supera el lmite de
referencia exterior, sin embargo, para el caso de hongos, se suele
establecer el lmite de 500 UFC/m
3
. Pero si analizamos los puntos de
muestreos individualmente se advierte:
Se verifica que para dos casos en la planta baja se supera el valor de 1000
UFC/m
3
, por lo cual se necesita atencin inmediata.
Por lo tanto se concluye que la concentracin de estos microorganismos
est por encima de los lmites estudiados, causando afecciones
respiratorias.
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6.2. Calidad Microbiolgica del Aire en Interiores de Habitaciones
Universitarias (Luksamijarulkul et al. 2012)
6.2.1. Descripcin General
Debido a la gran poblacin que recurre a estas zonas, se evalu la calidad
de aire de estos edificios, ya que existieron quejas de una inadecuada
ventilacin vinculndolo con alergias y gripe, es por eso que este trabajo se
centr en la observacin a largo plazo; evaluacin en dos aos, de la calidad
microbiolgica de aire en los edificios Universitarios ubicados en el centro
de Poznan, Polonia.
6.2.2. Materiales & Mtodos
Mtodo:
Sedimentacin de Koch; Este mtodo se basa en la deposicin
gravitatoria de los microorganismos sobre las placas Petri con medios
nutritivos y expuesto para un periodo de tiempo. El nmero de
microorganismos se estim a travs de la siguiente ecuacin:
Toma de muestra:
Las placas Petri fueron expuestas por 15 minutos, adems todas las
muestras fueron tomadas en septiembre (antes del inicio del ciclo
acadmico) y octubre (en curso), en dos aos de funcionamiento; 2002
y 2003. Adems hubo dos periodos de toma de muestra en la maana
(7:30 a 8:00am) y en la tarde (2:30 a 3:00pm).
Medios de cultivo empleado
o Agar-Extracto de levadura (Merck); para la cuantificacin de
Hongos.
o Medio de Agar Sabouraud con 2% de glucosa (Merck) para la
cuantificacin de hongos.
o Czapek-Doxa Agar (BTL) para la identificacin de hongos
filamentosos.
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Diagnstico
Las bacterias se identificaron por tres matrices. La valoracin
macroscpica (Descripcin de Colonia). Segundo; estimacin
microscpica (teido por el mtodo de Gram y Schaeffer-Fulton). La
tercera parte; pruebas bioqumicas segn la clasificacin de bacterias
segn Bergey.
Diagnstico de hongos filamentosos se bas en la estimacin de las
caractersticas morfolgicas de crecimiento en medio de Czapek, as
como en la observacin microscpica segn Gua de estimacin de
hongos filamentosos.
6.2.3. Resultados & Discusin
Se obtuvo que en las maanas se mantiene una tendencia donde la
contaminacin fngica y bacteriana es menor que en la tarde, pero hubo
una excepcin, un aula ventilada, para el caso de los hongos; adems en
cuanto al crecimiento anual se determin que el crecimiento ms alto de
contaminacin fngica durante las tardes fue en el laboratorio qumico (en
2003; 5,8 veces mayor en las tardes que en las maanas), as como en la
biblioteca.
*Variacion UFC/m3 de Bacterias para el ao 2002-2003
A (sala ventilada), B(sala no ventilada), C(laboratorio), D(Biblioteca), E(sala
de lectura), F(Oficina decano), G (comedor) H(Baos), I(Corredor)
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.
*Variacin de UFC/m3 de hongos para el ao 2002-2003
Por otra parte el crecimiento bacteriano ms intenso ocurri en las tardes
principalmente en el corredor, laboratorio qumico y en el comedor.
Ante la falta de una normativa, si se compara con el ndice de Grny y
Dutkiewicz, 5000UFC/m
3
, se advierte que no pasa dicho valor, sin embargo, en
Polonia se suele comparar con el lmite propuesto por la Asociacin Americana
Higiene Industrial, el cual nos indica un lmite de 250UFC/m3para Hongos, el
cual se supera en casi todos los casos.
Por otra parte, es importante resaltar el aumento de bacterias y hongos en la
apertura del ao, por lo cual est conectado a una fuente de contaminacin
biolgica, que sera en este caso el hombre, o la muchedumbre, ya que el
cuerpo humano, la ropa es lugar para crecimiento de microorganismos. Este
hecho se acenta con la comprobacin de que el mayor crecimiento de
microorganismos en el da ocurre en el corredor, comedor, biblioteca, los cuales
son lugares llenos de gente constantemente.
Para un mejor anlisis, los autores compararon los niveles de UFC/m
3
con los
del aire exterior, con la relacin: concentracin interior/exterior, donde se
concluy, que la relacin es mayor a 1 en casi todos los casos, razn por la cual
respalda que esta zona carece de una adecuada ventilacin de edificios.
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6.3. Contaminacin biolgica intradomiciliaria y su relacin con sntomas
respiratorios indicativos de asma bronquial en preescolares de Bucaramanga,
Colombia (Herrera et al. 2011)
6.3.1. Descripcin General
Investigacin realizada por Astrid B. Herrera, Laura A. Rodrguez y Jrg
Niederbacher; de la Universidad Industrial de Santander, en Bucaramanga,
Colombia. El objetivo de la investigacin fue evaluar la asociacin entre la
presencia de contaminantes biolgicos intradomiciliarios y sntomas
indicativos de asma, en prescolares de Bucaramanga (Herrera et al. 2011).
El estudio consisti en evaluar la relacin entre la manifestacin de
sintomatologa de asma bronquial de nios con menos de 7 aos de edad
(pre-escolares); con la presencia de hongos y caros en el interior de sus
hogares, prematuridad de nacimiento, antecedentes familiares, etc.
El estudio requiri el monitoreo de hongos y caro, el reconocimiento de
especies, el levantamiento de informacin epidemiolgica y demogrfica;
as como el tratamiento estadstico, para encontrar las relaciones.
6.3.2. Materiales & Mtodos
El espacio muestral consisti de 678 nios (Edad media: 42 meses).
La informacin sobre el estado nutricional y las variables demogrficas se
obtuvo a travs de encuestas y mediciones en los hogares.
Para la evaluacin de caros (arcnidos), se tomaron muestras de polvo con
una aspiradora, se identificaron las especies al microscopio.
El monitoreo de hongos se realiz exponiendo por 15 minutos, dos placas
Petri con agar rosa de bengala cloranfenicol; que podan ser ubicadas
en la cama y el espacio de juego, o el corral y el coche, dependiendo de la
edad. Ntese que, como se ha explicado en el punto 4. MONITOREO DE
HONGOS & BACTERIAS: MUESTREO, se tratara de un mtodo de
muestreo por sedimentacin (de hongos); y el medio de cultivo, usa
cloranfenicol para inhibir el crecimiento bacteriano.
El trabajo en el laboratorio consisti en incubar las muestras e identificar
las especies fngicas.
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6.3.3. Resultados & Discusin
El anlisis microbiolgico, result en la identificacin de las especies ms
frecuentes de hongos y caros; asi, los gneros fungales en orden de frecuencia,
son: Cladosporium sp. (98%), Fusarium sp. (82%), Aspergillus sp. (54%),
Penicillium sp. (49%) y Acremonium sp. (7.82 %). Y las especies de caros, en
orden de predominancia: Dermatophagoides sp. (16,4 %), Cheyletus sp. (3,5 %),
Lepidoglyphus destructor (2,5 %) y Blomia tropicales (2,1 %)
Posteriormente, se realiz el anlisis bivariado entre la prevalencia de sntomas
de asma bronquial y todas las variables de estudio (prematuridad, mascotas,
antecedentes, otras enfermedades respiratorias, especies de hongos y caros).
Las variables con mayor relacin a la manifestacin frecuente de sntomas de
asma, se muestran en el siguiente cuadro; donde se caracteriza por el valor del
estadstico p, teniendo en cuenta que a menor valor de p, mayor
significancia.
El trabajo concluye que los principales factores que influyen en que los nios
menores a 7 aos en Bucaramanga, presenten sntomas de asma (p=0); son: la
presencia del hongo Acremonium sp., el hecho de ser prematuros y el padecer
de neumona.
Por tanto, el trabajo encuentra una relacin entre el Acremonium sp. y el
padecimiento de asma.
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IV. CONCLUSIONES
La atmsfera, particularmente la zona ms baja, contiene una gran variedad de
microorganismos y estructuras de origen biolgico (bioaerosoles) en suspensin;
de tal forma que es un medio para la dispersin, de dichos contaminantes
biolgicos. A este propsito, se tienen campos relativamente nuevos como la
Aerobiologa, microbiologa del aire y la contaminacin microbiolgica.
El aire en espacios interiores, al estar especialmente cargado de hongos y bacterias
como: Aspergillus, Penicillium, Cladosporium, Staphylococcus, Mycobacterium y
Bacillus; constituye un factor que contribuye a la incidencia de alergias y
enfermedades respiratorias, as como a la disminucin en el rendimiento en
distintos ambientes (oficinas, colegios, hospitales, etc.). De tal forma afecta, la
habitabilidad y sanidad de los espacios interiores; de ah su relacin con la calidad
del aire en interiores.
La primera etapa del monitoreo la constituye el muestreo, las tcnicas que existen
para obtener los hongos y bacterias del aire, se clasifican de acuerdo al principio:
sedimentacin, filtracin, impregnacin en lquidos e Impactacin. La diferencia
radica en el uso de fuentes de energa, el medio de coleccin y el uso de equipos
automatizados.
Dado que al aplicar una tcnica de muestreo microbiolgico en el aire, no se
discrimina el tipo de microorganismos que se colecta; para salvar este
inconveniente los muestreadores incluyen un medio de cultivo que debe ser
modificado a selectivo. De tal forma, se usan el agar Sabouraud y el agar tripticasa
soya; que inhiben el crecimiento bacteriano y fngico, respectivamente. As se
obtienen muestras solo con hongos o solo con bacterias del aire en anlisis.
Para distinguir las distintas especies de hongos y bacterias, se deben aplicar
tcnicas de aislamiento sobre los agares selectivos mencionados, como: extensin
en superficie, diluciones y estras. De tal forma se puede obtener las variedades de
hongos y bacterias en el aire. Adems, los hongos y bacterias de las muestras
pueden cuantificarse como el nmero de unidades formadoras de colonias (UFC)
por volumen de aire muestreado o como la frecuencia porcentual de una
determinada especie, respecto al total.
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El anlisis de casos, evidencia que el monitoreo de hongos y bacterias en el aire de
espacios interiores viene siendo empleado como una herramienta que permite
evaluar el grado de contaminacin fngica y bacteriana de dicho ambiente;
sirviendo de apoyo a estudios epidemiolgicos y de salud ocupacional.
De los tres casos de estudio, se concluye que la proliferacin de hongos y bacterias
est ligada a una mala ventilacin de los edificios, adems es comn usar como
referencia la calidad de aire exterior para obtener una nocin del grado de
contaminacin en interiores, ya que no existe una normativa reconocida
globalmente, ya que los efectos nocivos de los hongos y bacterias, vara de
acuerdo a la susceptibilidad de las personas. Tambin, se advierte que los ms
altos grados de contaminacin ocurrieron en zonas concurridas, como son los
colegios, donde los nios que son ms susceptibles a enfermedades respiratorias
corren ms peligro de desarrollar asma.
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V. REFERENCIAS
Atlas, Ronald M.; Bartha, Richard. 2002. Ecologa Microbiana & Microbiologa
Ambiental. Addison Wesley. Espaa.
Castro Vicente, Clara Aurora. 2009. Evaluacin Aeromicolgica en la Calidad del
Aire de la zona aledaa al relleno sanitario portillo grande en el otoo del 2009.
Tesis para optar el grado de Magister Scientiae. Universidad Nacional Agraria La
Molina. Per.
Department of Health and Mental Hygiene. 2008. Guidelines on Assessment and
Remediation of Fungi in Indoor Environments. New York City Department of
Health and Mental Hygiene. Estados Unidos.
De La Rosa, M. C. 2002. El aire: hbitat y medio de transmisin de
microorganismos. Departamento de Microbiologa II. Facultad de Farmacia. UCM.
Espaa.
Di Conza, F. S.; Papa, M.; Itria, R. F. 2007. Muestreo y cuantificacin de
contaminantes biolgicos en aire. Instituto Nacional de Tecnologa Industrial.
Argentina.
European Collaborative Action. 1993. Indoor air quality its impact on man. Report
N. 12 Biological particles in indoor environment. Official Publications of the
European Communities. Unin Europea.
Guardino Sol, Xavier. 2009. Calidad de aire interior. Instituto Nacional de
Seguridad e Higiene en el trabajo. Espaa.
Herrera, Astrid B.; Rodrguez, Laura A.; Niederbacher, Jrg. 2011. Contaminacin
biolgica intradomiciliaria y su relacin con sntomas respiratorios indicativos de
asma bronquial en preescolares de Bucaramanga, Colombia. Biomdica. Colombia
Instituto de Salud Pblica de Chile. 2011. Procedimiento Muestreo Microbiolgico
del Aire. Instituto de Salud Pblica. Chile. Consulta: 10/04/2013.
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Contaminacin Atmosfrica Trabajo de Investigacin
Instituto Nacional de Seguridad e Higiene en el Trabajo (INSHT). S.f. Nota Tcnica
de Prevencin 299: Mtodo para el recuento de hongos y bacterias en aire. INSHT
Ministerio de Empleo y Seguridad Social. Espaa.
Instituto Nacional de Seguridad e Higiene en el Trabajo (INSHT). S.f. Nota Tcnica
de Prevencin 203: Contaminantes Biolgicos: Evaluacin en Ambientes
Laborales. INSHT Ministerio de Empleo y Seguridad Social. Espaa.
Luksamijarulkul, Pipat; Ratthanakhot, Yuwadee; Vatanasomboon, Pisit. 2012.
Microbial Counts and Particulate Matter Levels in Indoor Air Samples Collected
from a Child Home-Care Center in Bangkok, Thailand. Journal of the Medical
Association of Thailand. Tailandia.
Mandal, Jyotshna; Brandl, Helmut. 2011. Bioaerosols in Indoor Environment - A
Review with Special Reference to Residential and Occupational Locations.
University of Zurich. Suiza.
Martn Sanchez, Ins. S.f. Diversidad Microbiana & Taxonoma Ecologa
Universidad de Granada. Espaa. Consulta: 20/04/2013.
<http://www.diversidadmicrobiana.com/index.php?option=com_content&view=ar
ticle&id=177&Itemid=224>
Meza Contreras, Victor. 2011. Aerobiologa [Diapositivas]. Universidad Nacional
Agraria La Molina. Per.
Morales, Isabel Martha. 2010. Calidad del Aire Interior en Edificios de Uso
Pblico. Espaa.
Moreno, P.; Ramos, R.; Villena, G.; Gutierrez, M. 2000. Microbiologa: Gua de
Laboratorio. Universidad Nacional Agraria La Molina. Per.
Parra M., Carlos A. 2008. Estudio de contaminantes biolgicos (hongos y
bacterias) en aire interior de oficinas administrativas de una empresa
petroqumica, estado Anzotegui-Venezuela.Trabajo Especial de Grado para optar
al ttulo de Especialista enHigiene Ocupacional. Universidad Bolivariana de
Venezuela. Venezuela.