CROMATOGRAFA DE CAPA FINA

Procedimiento
Antes de iniciar el experimento se dibujaron dos lneas en las placas, una a 1 cm de su extremo
(con el fin de referenciar el punto de siembra), y la otra a 0,5 cm del extremo contrario (para
referenciar el limite al cual el solvente llegara por capilaridad).
Se tomaron 2 placas cromatografas, se sembr sobre la lnea de referencia -1 cm- una
muestra de una mezcla de cido glico, resorcinol, y -naftol. Al lado la muestra anterior se
sembr otra muestra desconocida que contenan algunos de los solutos ya mencionados.
Se introdujeron estas placas dos cmaras cromatografcas (una para cada placa), en cada una
haba una mezcla de solventes hexano y acetato de etilo, En una de ellas la relacin de 6-4
respectivamente y en la otra 8-2 respectivamente.
Justo antes del que eluente alcanzara la marca -0.5 cm- se retiraron de las cmaras
cromatograficas y fueron llevadas a cmaras de yodo; donde fueron reveladas.
Por ltimo, despus de su revelado las placas cromatograficas fueron envueltas en cinta
transparente para conservar su estado y evitar su deterioro.
Resultados
En ambas placas se pudieron observar la formacin de manchas, las cuales pertenecen a los
solutos (cido glico, resorcinol, -naftol) la muestra conocida, se vieron tres manchas como
era de esperarse, mientras que en la muestra desconocida solo dos. Esta tendencia se
mantuvo tanto en la muestra 6-4 como la 8-2.
A continuacin se muestran las placas cromatograficas.







FECHA: 23/05/2014
TITULO: Cromatografa por capa fina y por columna
INTEGRANTES: Daniela Garca Marn Andrs Felipe Maldonado Velsquez

Clculos
Soluto Nombre Distancia recorrida 6-4 Distancia recorrida 8-2
A Acido glico 0,2 cm 0.0 cm
B Resorcinol 1,5 cm 0,3 cm
C -naftol 2,3 cm 1,2 cm
D* Componente muestra problema 0,2 cm 0,0 cm
E* Componente muestra problema 1,5 cm 0,3 cm

Distancia recorrida por el disolvente = 3,4 cm
En el solvente hexano-acetato de etilo 6-4

-Se repiten estos clculos para las dems muestras B, C, D*, E*.-
En solvente de hexano-acetato de etilo 8-2

-Se repiten estos clculos para las dems muestras B, C, D*, E*.-

Tabla de resultados De R
f


Soluto R
f
en solvente 6-4 R
f
en solvente 8-2
A 0,058 0,000
B 0,441 0,091
C 0,676 0,368
D* 0,058 0,000
E* 0,441 0,091







Anlisis de resultado

La muestra #52 est compuesta por cido glico y resorcinol, esto se debe a que el factor de
retardo de la muestra conocida correspondientes al acido glico y el resorcinol, concuerda con
el factor de retardo de las dos manchas en la muestra #52; tanto para la muestra 6-4 y 8-2
se observ el mismo resultado.
Los compuestos de las muestras, poseen una afinidad mayor hacia el acetato de etilo, debido a
que el acetato de etilo es un solvente polar aprotico; es decir solvatar a los solutos sin formar
puentes de hidrogeno. Esta afinidad se da a que l cido glico, el resorcinol y el -naftol,
poseen grupos funcionales polares. En la muestras 6-4 y 8-2 se not que exista una clara
diferencia, ya que la distancia recorrida de los solutos en la muestra 6-4 era mayor que en la
muestra 8-2, lo cual se debe a la mayor cantidad del solvente polar en la muestra 6-4; por el
contrario la muestra 8-2 presentaba ms del compuesto hexano, lo cual disminua el factor de
retardo de los solutos por su baja afinidad con los compuestos polares.
El cido glico al ser un compuesto altamente polar, presenta una gran afinidad hacia la slica
gel, esto se puede observar en las placas cromatograficas, la mancha que se mantiene muy
cerca del punto de siembra, esto debido a que el cido glico posee muchos grupos polares, lo
cual reduce en gran medida su desplazamiento. Seguido por el resorcinol que tiene una
polaridad media, por ende tiene un mayor desplazamiento en la placa la razn de esto es que
presenta una menor cantidad de grupos polares, lo cual reduce su afinidad con solventes
altamente polares, por ultimo encontramos al -naftol que es un compuesto apolar, esto
quiere decir que tiene una afinidad muy baja con la slica gel.

Conclusiones
- La cromatografa por capa fina es un mtodo muy eficaz para el reconocimiento de
sustancias en muestras heterogneas, sustancias las cuales se desplazan a lo largo de
una placa cromatografica, permitiendo identificarlas y diferenciarlas de otras
sustancias presentes en la mezcla, este proceso de desplazamiento se da gracias a la
polaridad de los compuesto con respecto a la fase mvil y la fase estacionaria.
- Si la disolucin tiene presenta una cantidad equilibrada entre la parte polar y apolar,
mejor ser la separacin de los solutos a lo larga de placa cromatografica, esto debido
a que las sustancias mediamente polar podrn ser fcilmente identificados de los muy
polares.
- Las sustancias en la muestra #52 estaba compuesta por cido glico y Resorcinol, esto
lo concluimos al comparar ambas muestras, donde su Factor de retardo coincidan casi
perfectamente.



Preguntas
Consulta de la profesora
Tipos de cromatografa
Cromatografa de papel: Se caracteriza por no ser una prueba muy eficiente, pero debido a
que no requiere mucha preparacin es muy til, en este se emplea la celulosa (papel) como
fase estacionaria; un ejemplo claro de esto en nuestra vida cotidiana es cuando mojamos una
hoja de papel que tenga escritos en tinta, la tinta se va distribuyendo segn su afinidad a la
fase liquida.

Cromatografa de capa fina: Es la que en la prctica ya presentada empleamos, se caracteriza
por el empleo de slica gel o almina, y se emplea muchas veces para determinar su viabilidad
en otro tipo de cromatografas.

Cromatografa de gases: Esta emplea la volatilizacin de los gases para ser llevados a una
columna cromatografica por medio de un gas inerte, la diferencia con otras cromatografas es
que en este la fase mvil no interacta de ninguna forma con las molculas de la muestra
problema. La columna cromatografica contiene slice fundido, la cual retiene las molculas de
los gases ms afines a l. Este tipo de cromatografa no presenta resultados visible, solo por
medio de detectores electrnicos podemos observar su distribucin.




Cromatografa liquida: En esta se aprovecha el principio de seleccin selectiva de los que
constituyen la mezcla, que se adhieren a la fase estacionaria por afinidad electroesttica, en su
fase estacionaria se emplean siloxano de octilo. En esta se emplean detectores electrnicos
para representar grficamente la cromatografa.
Cromatografa de fluidos crticos: es una combinacin entre la cromatografa de gases y la
cromatografa liquida, su importancia reside en que puede reconocer sustancias que por s
solas ninguna de la cromatografa liquida y gaseosa podran detectar.

1. Segn su fase estacionaria tenemos:
- Cromatografa plana: En ella la fase estacionaria es una placa o un papel
- Cromatografa de columna: La fase estacionaria se sita sobre una columna.

2. La electroforesis emplea cargas elctricas para la separacin de las molculas,
mientras que la cromatografa emplea las propiedades fsicas de sus molculas para su
separacin; otra clara diferencia es, que en la electroforesis se emplea una sola fase,
mientras que en la cromatografa se emplean dos, una estacionaria y otra mvil.

3. Es muy til en la deteccin de aminocidos, siempre y cuando estos contengan un
poco de colorante para su fcil identificacin en el papel, ya que no todos los
aminocidos brindan un color fcilmente identificable en el pape.






4. Algunos solventes tiles para la cromatografa de capa fina:

- Agua
- Etanol
- Diclorometano
- Benceno
- Cloroformo

Son buenos solventes en vista de que todos cumplen los siguientes criterios para la
seleccin de un buen solvente
- Precio
- Fcilmente purificable
- Poco voltiles
- No poseen trazas de metales

5. Si, por su carcter polar, su bajo precio, su alta pureza al ser destilado, por ser poco
voltil, lo hace un buen solvente para ser empleado en fase mvil, su naturaleza polar
le permite desplazar a solutos polares, esto debido a la formacin dipolo-dipolo al
solvatar.

6. Se debe aumentar el ter, ya que este tiene un mayor carcter polar, lo cual generara
ms afinidad de la disolucin frente a los solutos polares en la cromatografa.

8. La absorcin, se da cuando una sustancia se introduce en la estructura de otra, como
cuando trapeas, que el agua queda contenida entre los filamentos de la trapera;
mientras que la adsorcin es un proceso que se da por diferencias electro estticas
(fuerzas intermoleculares), y solo se da en la superficie de una estructura, en la vida
cotidiana lo vemos como la laca con la que recubren la pintura de los autos para su
proteccin de factores externos.











CROMATOGRAFA DE COLUMNA -DEMOSTRATIVA-
Procedimiento
Se realiz el debido montaje previamente con el soporte universal, la pinza y las nueces.
En la base de una bureta se coloc un poco de algodn, se le aadi una mezcla entre slica gel
y etanol, hasta que se cubri 2/3 partes de la bureta, se aadi una mezcla de solutos (azul de
metileno y naranja de metilo), posteriormente con un pipeteador, se procedi a inyectar
presin dentro de la bureta, para forzar el desplazamiento de la fase mvil.


Resultados
Al momento de inyectar presin por medio del pipeteador se not de forma instantnea el
desplazamiento de los solutos dentro de la mezcla inicial de color verde, formndose dos
claras marcas de color, una amarilla y otra azul.










Anlisis de resultados
La parte que conservo el color azul en la bureta corresponde al azul de metileno, que debido a
su baja afinidad permanece en la parte superior de la bureta.

Las zonas sealadas en verde y verdes, representan funciones polares, la parte roja es parte
ms polar de la molcula, los 17 carbonos del compuesto y sus dobles enlaces, hacen que su
apolaridad sea lo suficientemente fuerte para vencer sus grupos funcionales polares, lo cual
impide que se disuelva en la slica gel que es un compuesto polar.
Caso contrario el naranja de metilo presenta una mayor afinidad con la slica gel, por ello
vemos como se desplaza atreves de toda la fase estacionaria.

El rectngulo verde muestra una funcin polar, al igual que la morada, pero al pasar por sus
momentos dipolares se anulan al ser simtricos e ir en sentidos contrarios; el recuadro rojo
muestra una funcin muy polar. Con tan solo 14 carbonos, los grupos funcionales polares son
capaces de vencer su apolaridad y permitir a naranja de metilo disolverse en la fase
estacionaria.
Conclusiones
La cromatografa por columna es un buen mtodo para la purificacin y separacin de
mezclas, en la cual retiene en su fase estacionaria los compuestos de una determinada mezcla
gracias a la adsorcin de los compuestos en la fase eluyente.
La cromatografa por columna permite reconocer de forma cuantitativa la relacin o
proporcin entre los componentes del eluyente.



Preguntas
1. Ninguna, solo es de relevancia en funcin de la cantidad del eluyente a emplear, ya
que si se desea cromatografar una gran cantidad de eluyente, ser menos prctico en
una bureta pequea.
3. porqu se necesita que la slica gel este perfectamente compactadas, ya las burbujas
pueden alterar el tiempo en que el eluyente baja a travs de la columna, adems las
burbujas generara canales que permitiran el paso del eluyente atreves de toda la
columna, arrojando una mala segregacin de los compuestos