You are on page 1of 61

Projekt wspfinansowany ze rodkw Unii Europejskiej w ramach Europejskiego Funduszu Spoecznego

V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk


Farmaceutycznych

Otwarte Seminarium Uczestnikw Interdyscyplinarnych
Studiw Doktoranckich


pod honorowym patronatem
Jego Magnificencji Rektora Uniwersytetu Medycznego w Lublinie
prof. dr hab. Andrzeja Dropa
Dziekana Wydzi au Farmaceutycznego z Oddziaem Analityki Medycznej
Uniwersytetu Medycznego w Lublinie
prof. dr hab. Ryszarda Kocjana
oraz Rady Doktorantw Uniwersytetu Medycznego w Lublinie



Ksika abstraktw

Lublin, 12 czerwca 2014

































































V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
3

Komitet naukowy
prof. dr hab. Grayna Biaa
dr hab. Anna Bogucka-Kocka
dr Sawomir Dresler
prof. dr hab. Tadeusz Dzido
prof. dr hab. Sylwia Fidecka
prof. dr hab. Grayna Ginalska
prof. dr hab. Wiesaw Gruszecki
prof. dr hab. Krzysztof Jwiak
dr hab. n. med. Janusz Kocki
prof. dr hab. Dariusz Matosiuk
dr hab. Ireneusz Sowa
dr Grayna Szymczak
dr hab. Katarzyna Tyszczuk-Rotko
prof. dr hab. Monika Waksmundzka-Hajnos
dr hab. Magdalena Wjciak-Kosior

Komitet organizacyjny

Kamila Rokicka

Marcin Czop Ewelina Rutkowska
Lidia Kotua Wojciech Szwerc
Tomasz Kubrak Jolanta Tylus
Marta Marszaek Artur Wnorowski
Agnieszka Michalak Karolina Zapaa
Natalia Nowacka

Seminarium realizowane w ramach projektu "Specjalizacja i Kompetencje - Program
rozwojowy Uniwersytetu Medycznego w Lublinie"







Projekt wspfinansowany ze rodkw Unii Europejskiej w ramach Europejskiego Funduszu Spoecznego


V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
4

Program sympozjum
9:00 9:05 Otwarcie sympozjum
9:05 9:45 Synergy, a new way of fund raising Willem Wolters
9:45 10.15 Przerwa kawowa (rozwieszanie posterw)
10:15 11:30 Funkcje, cele i zadania wspczesnych ogrodw botanicznych.
dr Grayna Szymczak,
Czy roliny misoerne mog by przydatne w medycynie?
dr hab. Bartosz Pachno
11:30 13:00 Sesja posterowa oraz zwiedzanie ogrodu botanicznego
13:00 13:30 Przerwa obiadowa
13:30 14:35 Prezentacje doktorantw Sesja Analityczna
14:35 14:45 Przerwa kawowa
14:45 15:50 Prezentacje doktorantw Sesja Nauk Medycznych
15:50 16:00 Przerwa kawowa
16:00 17:05 Prezentacje doktorantw Sesja Genetyczna
17:05 Zakoczenie konferencji











V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
5

Prezentacje ustne Sesja Analityczna 13:30 14:35
13:30 13:37 Tomasz Kubrak
Analiza kumaryn prostych w rolinach metod elektroforezy kapilarnej (CE)
_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ _______
13:38 13:45 Piotr Pawowski
Otrzymywanie i standaryzacja nowoczesnych przetworw rolinnych o wysokiej aktywnoci
biologicznej z ziela tarczycy alpejskiej S. alpina L. spp. alpina
_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
13:46 13:53 Kamila Rokicka
Czynniki wpywajce na zawarto kwasu betulinowego i oleanolowego w Viscum album
_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
13:54 14:01 Karolina Sobtka-Polska
Synteza, analiza spektroskopowa i modelowanie molekularne kwasu acetylosalicylowego -
propozycja wiczenia dla studentw
_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
14:02 14:09 Wojciech Szwerc
Rne sposoby mineralizacji jako jedna z metod przygotowania prbek biologicznych do analizy
skadu pierwiastkowego
_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
14:10 14:17 Jolanta Tylus
Wykorzystanie polianiliny jako warstwy ochronnej dla elu krzemionkowego
_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
14:18 14:25 Magdalena Walasek
Zastosowanie wysokosprawnej chromatografii przeciwprdowej (HPCCC) do izolacji
terpenoidw z olejku eterycznego Mentha piperita L.
_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
14:26 14:33 Karolina Zapaa
Okrelenie zawartoci izoflawonw w zalenoci od fazy kiekowania w wybranych odmianach
soi (Glycine sp.)
____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ `















V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
6

Analiza kumaryn prostych w rolinach
metod elektroforezy kapilarnej (CE)

Tomasz Kubrak
1
, Sawomir Dresler
2
, Grayna Szymczak
3
, Anna Bogucka-Kocka
1


1
Katedra i Zakad Botaniki Farmaceutycznej, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska
2
Zakad Fizjologii Rolin, Instytut Biologii i Biochemii,
Uniwersytet Marii Curie-Skodowskiej, Lublin, Polska
3
Ogrd Botaniczny UMCS, Uniwersytet Marii Curie-Skodowskiej, Lublin, Polska

Jedn z najbardziej interesujcych metod separacyjnych, ktre pojawiy si
w ostatnich latach w chemii analitycznej jest metoda elektroforezy kapilarnej. Metoda ta
charakteryzuje si wysok rozdzielczoci, krtkim czasem analizy oraz niskimi kosztami
zwizanymi z niewielkim zuyciem odczynnikw i prbki. Systemy do elektroforezy
kapilarnej s atwe do automatyzacji, mog by czone z rnymi detektorami
(spektrofotometrycznymi, spektrometrii mas, fluorescencyjnymi, konduktometrycznymi)
i znajduj bardzo szerokie zastosowanie (od analizy nieorganicznych jonw po analiz DNA).
Rozdzia skadnikw prbki oparty jest na zjawisku elektroforezy i elektroosmozy
zachodzcych w cienkich kapilarach (wew. red. 25 - 100 m) po przyoeniu wysokiego
napicia (do 30 kV).
Celem bada bya optymalizacja rozdziau kumaryn prostych (eskuliny, eskuletyny,
umbeliferonu oraz dihydrokumaryny) z uyciem elektroforezy kapilarnej.
Opracowana metoda zostaa wykorzystana w analizie rolin Cichorium intybus
(rodzina Asteraceae), Aesculus hippocastanum (rodzina Sapindaceae), Herba melliloti
(rodzina Fabaceae) oraz Juniperus communis pendula (rodzina Cupressaceae).

















V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
7

Otrzymywanie i standaryzacja nowoczesnych przetworw rolinnych
o wysokiej aktywnoci biologicznej z ziela tarczycy alpejskiej
S. alpina L. spp. alpina

Piotr Pawowski, Grayna Zgrka

Katedra i Zakad Farmakognozji z Pracowni Rolin Leczniczych,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Niektrzy przedstawiciele rodzaju Scutelaria L. (Tarczyca) np. S. baicalensis,
charakteryzuj si obecnoci rnych skadnikw biologicznie czynnych, gwnie polifenoli,
ktre odpowiadaj za wielokierunkow aktywno biologiczn (przeciwzapaln, hepato-,
neuro- i kardioprotekcyjn, przeciwnowotworow) tych taksonw. Z tego powodu, podjto
prb uzyskania nowoczesnych form przetworw rolinnych, bdcych skoncentrowanymi
wycigami, otrzymanymi z ziela mniej znanego podgatunku tarczycy alpejskiej (S. alpina L.
ssp. alpina). W tym celu, wysuszone i rozdrobnione ziele tarczycy poddano ekstrakcji
wspomaganej ultradwikami (UAE), stosujc dwa alkoholowe ekstrahenty: 25% i 50% (v/v)
EtOH. Ekstrakcj prowadzono w podwyszonej temperaturze (75
o
C) pod chodnic zwrotn.
Wycigi odparowano, rozpuszczono w wodzie destylowanej i zamroono w temp. -50
o
C
przez 12 h. Po tym czasie przeprowadzono suszenie sublimacyjne pod zmniejszonym
cinieniem. Otrzymane w ten sposb liofilizaty (SA25 i SA50 ekstrakcja odpowiednio 25%
i 50% EtOH), po rozpuszczeniu w 75% (v/v) MeOH, oczyszczano, stosujc metod ekstrakcji
do fazy staej (SPE), a nastpnie poddano analizie jakociowej i ilociowej opartej na
wysokosprawnej chromatografii cieczowej w ukadzie faz odwrconych z detekcj
fotodiodow (RP-HPLC/PDA). Jako faz ruchom zastosowano gradient acetonitrylu
w 1 mM H3PO4.
W wyniku przeprowadzonej standaryzacji fitochemicznej ustalono redni zawarto
7 bioaktywnych zwizkw flawonowych (skutelaryny, skutelareiny, bajkaliny, bajkaleiny,
wogonozydu, apigeniny i chryzyny) w otrzymanych liofilizatach. Okrelono rwnie
cakowit redni zawarto flawonoidw w ww. przetworach: SA25 137,7 mg/g, SA50
147,2 mg/g. Gwnym skadnikiem flawonowym obu liofilizatw by glikozyd skutelaryna
(SA25 93,5 mg/g i SA50 129,1 mg/g). Zaobserwowano wysz zawarto aglikonowych
form flawonw w liofilizatach otrzymanych w wyniku ekstrakcji 25% EtOH (SA25), podczas
gdy wysz koncentracj glikozydw flawonowych odznacza si liofilizat SA50.


Badania przeprowadzono z wykorzystaniem rodkw przyznanych w ramach programu: Specjalizacja i
kompetencje program rozwojowy Uniwersytetu Medycznego w Lublinie.





V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
8

Czynniki wpywajce na zawarto kwasu betulinowego i oleanolowego
w Viscum album

Kamila Rokicka
1
, Magdalena Wjciak-Kosior
1
, Ryszard Sawicki
2
,
Krzysztof Kowalczyk
3
, Dariusz Pucek
4


1
Zakad Chemii Analitycznej, Katedra Chemii, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska
2
Ogrd Botaniczny Uniwersytetu Marii Curie-Skodowskiej w Lublinie, Lublin, Polska
3
Wydzia Rolnictwa, Lenictwa i rodowiska, Starostwo Powiatowe w Opolu Lubelskim,
Opole Lubelskie, Polska.
4
Lenictwo Drzonowo, Nadlenictwo Tychowo, Tychowo, Polska

Jemioa jest ppasoytem wykorzystywanym w przemyle farmaceutycznym do
produkcji lekw rolinnych o dziaaniu hipotensyjnym. Wycigi, nalewki i ekstrakty
sporzdzane wedug rnych receptur zielarskich determinuj jej okrelone dziaanie
lecznicze.
Pasoyt ten wystpuje na rnych gatunkach drzew w trzech odmianach w Polsce:
typowa (Viscum album L. ssp. album), rozpierzcha (V. album ssp. austriaticum), jodowa
(V. album ssp. abietis). Zrnicowanie ywiciela na jakim wystpuje moe wpywa na
istotne zmiany w skadzie chemicznym surowca, a co za tym idzie rwnie na jej aktywno
lecznicz. Gwnymi skadnikami jemioy s fizjologicznie aktywne peptydy tzw.
viscotoxyny, ale rwnie lektyny, aminy biogenne i triterpeny tj. kwas betulinowy
i oleanolowy. Wystpujce w Viscum album triterpeny pentacylkiczne nale do grupy
wtrnych metabolitw rolinnych i charakteryzuj je silne waciwoci przeciwzapalne,
wykazuj m.in. dziaanie przeciwnowotworowe, przeciwbakteryjne, przeciwwirusowe,
przeciwgrzybicze.
W celu znalezienia surowca o najwikszej zawartoci triterpenw przebadaam prbki
jemioy zebranej z rnych gatunkw drzew, m.in. topoli czarnej, lipy drobnolistnej, brzozy
brodawkowatej, jarzbu pospolitego, sosny zwyczajnej, robinii akacjowej oraz jaboni.
Wstpne badania ilociowe dotyczce zawartoci badanych kwasw wskazuj na due
zrnicowanie w zalenoci od pochodzenia surowca, z czego najbardziej obiecujcym
okazaa si jemioa zbierana z jaboni (Malus Jonathan) i sosny zwyczajnej (Pinus sylvestris)
do pozyskiwania kwasu betulinowego oraz lipy drobnolistnej (Tilia cordata) i brzozy
brodawkowatej (Betula pendula) dla kwasu oleanolowego.








V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
9

Synteza, analiza spektroskopowa i modelowanie molekularne kwasu
acetylosalicylowego - propozycja wiczenia dla studentw

Karolina Sobtka-Polska
1
, Agnieszka A. Kaczor
2
, Andrzej Polski
3
, Maciej Wo
1
,
Monika Pitucha
1


1
Katedra i Zakad Chemii Organicznej, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska
2
Katedra i Zakad Syntezy i Technologii Chemicznej rodkw Leczniczych,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska
3
Katedra i Zakad Farmacji Stosowanej, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Kwas acetylosalicylowy jest niesteroidowym lekiem przeciwzapalnym (NLPZ)
powszechnie uywanym w leczeniu blu o maym i rednim nasileniu. Profilaktycznie
stosowany jest take przez pacjentw u ktrych wystpuje ryzyko udaru, zawau serca,
dusznicy bolesnej [1]. W literaturze opisano wiele syntez kwasu acetylosalicylowego,
jednake ich wydajno oraz stopie trudnoci czsto pozostawiay wiele do yczenia.
Pandita i Goyal [2] zaproponowali syntez aspiryny z kwasu salicylowego i chlorku acetylu
z dodatkiem pirydyny jako katalizator. Niestety reakcja okazaa si mao wydajna (33%).
Naszym celem byo opracowanie dowiadczenia, ktre miao zapozna studentw
z prost, bezpieczn, szybk i wydajn syntez kwasu acetylosalicylowego. W reakcji
zastosowalimy kwas salicylowy, bezwodnik kwasu octowego oraz dodatek kwasu
siarkowego (VI). Majc na uwadze waciwoci fizykochemiczne kwasu acetylosalicylowego
zaproponowalimy krystalizacj, ktra zapewnia nam uzyskanie wydajnoci na poziomie
85%. Czysto i jednorodno otrzymanego produktu ocenilimy za pomoc chromatografii
cienkowarstwowej (TLC), uywajc mieszaniny chloroform i metanol (10:2) z dodatkiem
kwasu octowego. Studenci potwierdz rwnie struktur kwasu acetylooctowego przy
pomocy widm 1H, 13C NMR oraz IR. Kluczowym elementem wiczenia jest pokazanie
studentom, jak zbudowa model czsteczki kwasu acetylosalicylowego i wyjani mechanizm
jego dziaania na poziomie molekularnym.
Przedstawione procedury stanowi unikatow kombinacj syntezy organicznej,
chromatografii TLC, analizy spektroskopowej i modelowania czsteczkowego w nauczaniu
chemii medycznej.

1. Mackowiak P. A.; Clin. Infect. Dis. 2000, 31, 154156.
2. Pandita, S.; Goyal, S. J. Chem.. Educ. 1990, 75(6), 770.








V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
10

Rne sposoby mineralizacji jako jedna z metod przygotowania prbek
biologicznych do analizy skadu pierwiastkowego

Wojciech Szwerc, Ireneusz Sowa, Magdalena Wjciak-Kosior, Ryszard Kocjan

Zakad Chemii Analitycznej, Katedry Chemii, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Rozwj rnorodnych technik analitycznych oraz postp technologiczny pozwalajcy
osign coraz mniejsze granice oznaczalnoci jest bardzo wany. Daje moliwo poznania
skadu pierwiastkowego analizowanej prbki, co jest szczeglnie istotne w przypadku
pierwiastkw toksycznych atwo kumulujcych si w organizmach ywych. W okrelaniu
zawartoci pierwiastkw przeszkadza w znaczny sposb matryca zwizkw organicznych.
Zanim analityk przystpi do badania prbki naley j odpowiednio przygotowa. Jednym ze
sposobw pozbycia si matrycy zwizkw organicznych jest mineralizacja. Mineralizacja
definiowana jest jako cakowity rozkad matrycy organicznej do prostych zwizkw
nieorganicznych. Wyrniamy kilka jej typw m.in. mineralizacj na mokro w kwasach
utleniajcych, ktra moe by prowadzona w systemie otwartym i zamknitym, oraz
mineralizacj na sucho - spopielenie. Najbardziej rekomendowan technik jest mineralizacja
przy uyciu energii mikrofalowej w tzw. bombie teflonowej.
Celem naszych bada byo zoptymalizowanie warunkw mineralizacji rnych prbek
pochodzenia biologicznego (wosy, paznokcie) w 12 stanowiskowym mineralizatorze
mikrofalowym NovaWave (SCP Science) poprzez znalezienie odpowiednich mieszanin
substancji utleniajcych i porwnanie wydajnoci procesu przy pomocy oznaczania
pierwiastkw metod AAS z uyciem aparatu ContrAA700 z cigym rdem
promieniowania w technice elektrotermicznej.

1. Butler O.T.a, Cairns W.R.L.b, Cook J.M.c, Davidson C.M.d. Atomic spectrometry update A review of
advances in environmental analysis. J Atomic Spektrometry 2014; 29(1): 17-50















V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
11

Wykorzystanie polianiliny jako warstwy ochronnej dla elu
krzemionkowego

J olanta Tylus
1
, Piotr Drczkowski
2
, Magdalena Wjciak-Kosior
1
, I reneusz Sowa
1

1
Katedra Chemii, Zakad Chemii Analitycznej, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska
2
Samodzielna Pracownia Chemii i Neuroinynierii Medycznej,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Najwaniejszym elementem kadego ukadu chromatograficznego jest faza
stacjonarna i to od niej gwnie zaley prawidowe rozdzielenie skadnikw badanej prbki.
Obecnie zoono problemw analitycznych wymaga opracowywania i rozwijania nowych,
bardziej selektywnych faz. Fazy stacjonarne oparte na elu krzemionkowym
s najpowszechniej wykorzystywanymi adsorbentami w metodach rozdzielczych. Jednak
czynnikiem ograniczajcym jego zastosowanie jest np. niska stabilno na roztwory o skrajnej
wartoci pH. Modyfikacje powierzchniowe zwikszaj jego odporno na rne czynniki [1].
Polianilina (PANI) jest najlepiej przebadanym polimerem przewodzcym o ciekawych
waciwociach fizyko-chemicznych [2], aczkolwiek jest mao doniesie odnonie
zastosowania jej w technikach rozdzielczych. Postanowilimy wykorzysta j w celu
zmodyfikowania powierzchni ziaren elu krzemionkowego [3]. W ten sposb otrzymana faza
stacjonarna bya wykorzystana w analizie chromatograficznej [4].
Celem moich bada byo okrelenie wpywu warstwy polianiliny na stabilno elu
krzemionkowego w rnych wartociach pH. Sprawdziam rwnie wpyw temperatury oraz
kwasowego, obojtnego i zasadowego rodowiska na form polimeru, a take okreliam jego
dystrybucji w ziarnie elu krzemionkowego. Dziki przeprowadzonym badaniom
zweryfikowaam rwnie jako pokrycia elu krzemionkowego warstw polianiliny.

1. J. Weiss, D. Jensen, Anal. Bioanal. Chem. 375, 2003, 98
2. J. Stejskal, I.Sapurina, Pure Appl. Chem. 77, 2005, 815-826,
3. I. Sowa, R. Kocjan M. Wjciak-Kosior, R. wieboda, D. Zajdel, M. Hajnos, Talanta 115, 2013, 451-456
4. I. Sowa, M. Wjciak-Kosior, P. Drczkowski, M. Strzemski, R. Kocjan, Anal. Chim. Acta 787, 2013, 260-266.













V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
12

Zastosowanie wysokosprawnej chromatografii przeciwprdowej (HPCCC)
do izolacji terpenoidw z olejku eterycznego Mentha piperita L.

Magdalena Walasek, Krystyna Skalicka-Woniak, Kazimierz Gowniak

*Katedra i Zakad Farmakognozji z Pracowni Rolin Leczniczych,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Mentha piperita L. (Labiateae) czyli mita pieprzowa, jest to rolina bardzo popularnie
wystpujca w rodowisku naturalnym. Ze wzgldu na bogactwo zwizkw czynnych jest
ona powszechnie uprawiana niemale w caej Europie. Gwnym skadnikiem jest olejek
eteryczny o szerokich waciwociach farmakologicznych. Wykazuje on dziaanie
spasmolityczne na minie gadkie przewodu pokarmowego, dlatego jest stosowany
w stanach spastycznych, we wzdciach oraz w schorzeniach przebiegajcych z zaburzeniem
trawienia. Ponadto, dziki zawartoci mentolu, olejek mitowy jest stosowany zewntrznie na
skr wywoujc efekt chodzenia.
W ramach bada zostay opracowane odpowiednie warunki separacji 6 czystych
zwizkw terpenoidowych z wykorzystaniem nowoczesnej metody wysokosprawnej
chromatografii przeciwprdowej (high-performance counter-current chromatography - HP-
CCC). W celu waciwej izolacji przetestowano szereg ukadw dwufazowych, bdcych
mieszanin n-heksanu, octanu etylu, metanolu i wody. Kierujc si wynikami
wspczynnikw podziau ostatecznie wybrano mieszanin o skadzie 4:1:4:1 (v/v/v/v).
Izolacje prowadzono w ukadzie faz odwrconych. Otrzymane frakcje poddawano analizie
metod GC-MS. Wyizolowano 6 czystych zwizkw: mentol, isomentol, menthon,
neomenthon, terpinen-4-ol oraz pulegon. HP-CCC to nowoczesna metoda, ktra pozwala
przeprowadzi proces separacji w sposb szybki, selektywny i powtarzalny. Zalet rwnie
jest szybki sposb przeniesienia warunkw skali analitycznej do skali ppreparatywnej
przemysowej, co wykazano take w prezentowanej pracy.














V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
13

Okrelenie zawartoci izoflawonw w zalenoci od fazy kiekowania
w wybranych odmianach soi (Glycine sp.)

Karolina Zapaa
1
, Magdalena Wjciak-Kosior
1
, I reneusz Sowa
1
, Grayna Szymczak
2



1
Zakad Chemii Analitycznej, Katedra Chemii, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska
2
Ogrd Botaniczny Uniwersytetu im. Marii Curie-Skodowskiej, Lublin, Polska

Soja zwyczajna (Glycine max (L.) Merr.) jest pospolit rolin uprawn nalec do
rodziny Fabaceae (Bobowate). Rolina ta znana jest gwnie ze swojej aktywnoci
estrogennej zalenej od wystpowania fitoestrogenw. Nalece do tej grupy izoflawony s
uywane w leczeniu objaww menopauzy, szczeglnie nagych zaczerwie twarzy, uderze
gorca, zimnych potw, rozdranienia oraz draliwoci i hutawek nastroju. S rwnie
pomocne w zapobieganiu i agodzeniu objaww osteoporozy. Przemys wykorzystuje
izoflawony sojowe do sporzdzania lekw oraz suplementw diety, ktre stosowane s przez
kobiety w okresie postmenopauzalnym [1, 2].
Do wytworzenia preparatu o okrelonej zawartoci zwizkw czynnych naley podda
procesowi przetwrczemu odpowiedni mas rolinn, dlatego wane jest, aby materia zosta
zebrany w fazie wzrostu, w ktrej produkcja izoflawonw jest najwiksza.
Celem naszej pracy byo okrelenie zmian zawartoci izoflawonw w zalenoci od
fazy kiekowania nasion. W tym celu zbadano soj zwyczajn oraz jej trzy odmiany (Glycine
max (L.) Merr. cv. Labrador, Glycine max (L.) Merr. cv. Caloria, Glycine max (L.) Merr.
convar. max var. nigricans lutescens (Skvortz.) Lehm.) podczas pierwszych faz wzrostu.
Okrelono zawarto izoflawonw w suchych, spczniaych (po 24 h badania) oraz
skiekowanych nasionach (po 72 h). Do wyizolowania badanych zwizkw czynnych
zastosowano ekstrakcj wspomagan ultradwikami przy uyciu metanolu jako
rozpuszczalnika. Do oznacze ilociowych oraz jakociowych zastosowano metod
wysokosprawnej chromatografii cieczowej z detekcj spektrofotometryczn (HPLC-DAD).

1. Lee S. J., Ahn J. K., Khanh T. D., Chun S. C., et al.: Comparison of isoflavone concentrations in soybean
(Glycine max (L.) Merill) sprouts grown under two different light conditions. J. Agric. Food Chem. (2007)
94159421.
2. Cassidy A.: Potential risk and benefits of phytoestrogen-rich diets. Int. J. Vitam. Nutr. Res, (2003) 120.











V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
14

Prezentacje ustne Sesja Nauk Medycznych 14:45 15:50
14:45 14:52 Aleksandra Kozowska
Atypowy guz teratoido/rabdoidalny (Atypical Teratoid/Rhabdoid Tumor AT/RT) -
epidemiologia, profil cytogenetyczny, diagnostyka i leczenie
_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
14:53 15:00 Sylwia Katarzyna Krl
Acetylenowe pochodne betuliny jako potencjalne substancje przeciwnowotworowe
brak prezentacji, uczestnik nie zgosi si na konferencji
_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
15:01 15:08 Katarzyna Lubelska
Badanie wpywu sulforafanu na system detoksykacyjny w prawidowych i nowotworowych
komrkach ukadu pokarmowego in vitro

_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
15:09 15:16 Marta Marszaek
Wpyw pozytywnego allosterycznego modulatora (PAM) metabotropowych receptorw
glutaminianergicznych 5 (mGLuR5), Vu-29, na procesy uczenia i pamici zaburzone
przewlekle podawanym etanolem u szczurw

_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
15:17 15:24 Emilia Reszczyska
Wbudowywanie biaek oraz kompleksw biakowo barwnikowych do modelowych bon
lipidowych

_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
15:25 15:32 Joanna Starzyk
Mechanizm toksycznoci antybiotyku Amfoterycyny B w wietle bada spektroskopowych

_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
15:33 15:40 Agnieszka Wojcieszek
Wykorzystanie cytometrii tkankowej w monitorowaniu ekspresji genw

_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
15:41 15:48 Agnieszka Wronka
Asymetrycznie podstawione pochodne tiomocznika oraz ich kompleksy lipofilowo
zwizku kompleksowego a aktywno jego gwnego ligandu

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ `












V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
15

Atypowy guz teratoido/rabdoidalny (Atypical Teratoid/Rhabdoid Tumor
AT/RT) - epidemiologia, profil cytogenetyczny, diagnostyka i leczenie

Aleksandra Kozowska
1,3
, Jarosaw Kozowski
1,2
,
J anusz Kocki
1


1
Zakad Genetyki Klinicznej, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska
2
Zakad Radioterapii, Centrum Onkologii Ziemi Lubelskiej im. w. Jana z Dukli, Lublin, Polska
3
Oddzia Chirurgii Onkologicznej,
Centrum Onkologii Ziemi Lubelskiej im. w. Jana z Dukli, Lublin, Polska

Streszczenie: Atypowy guz teratoido/rabdoidalny (ang. Atypical Teratoid /Rhabdoid Tumor-
AT/RT) jest bardzo rzadkim, szybko rosncym nowotworem, lokalizujcym si najczciej
w obrbie centralnego ukadu nerwowego u dzieci. Odnotowano rwnie nieliczne przypadki
zachorowa u dorosych. Ten wyjtkowo agresywny guz o wybitnie niepomylnym
rokowaniu, cechujcy si unikalnym profilem cytogenetycznym, pozostaje wyzwaniem dla
neuroonkologii i wymaga dalszych bada oraz opracowania nowego podejcia
terapeutycznego w celu podjcia skuteczniejszej walki z t chorob.
Sowa kluczowe: AT/RT, atypowy guz teratoidalno/rabdoidalny, pediatryczne guzy mzgu,
gen INI1, komrki rabdoidalne.

Abstract: Atypical teratoid/rhabdoid tumor is an extremely rare, dynamically developing neo-
plasm, which ocurrs mainly in the central nervous system of children. Several cases of AT/RT
have been also noted among the adult patients. The incidence of this excep-tionally aggressive
tumor, characterized by a unique cytogenetic profile, is associated with dismal prognosis.
That is why, the malignancy remains the challenge for neuro-oncology and requires further
investigations and new therapeutic approach to im-prove the outcomes of treatment.
Key words: AT/RT, atypical teratoid/rabdoid tumor, paediatric brain tumors, INI1 gene,
rhabdoid cells.

1. Ginn K.F., Gajjar A., Atypical teratoid rhabdoid tumor: current therapy and future directions, Front Oncol
2012,2:114.
2. Rorke LB, Packer R., Central nervous system atypical teratoid/rhabdoid tumors of infancy and childhood, J.
Neurooncol. 1995;24(1):21-8.
3. BuscarilloD, Park H., Roberts K., Yu J.B. , Survival outcomes in atypical teratoid rhabdoid tumor for patients
undergoing radiotherapy in a SEER analysis. Cancer 2011; 217: 831-841.
4. Hilden JM, Meerbaum S, Burger P. et al., Central nervous system atypical teratoid/rhabdoid tumor: results of
therapy in children enrolled in a registry, J. Clin. Oncol. 2004 Jul 15; 22(14), 2877-84.
5. Shonka N., Armstrong T. et al, Atypical teratoid rhabdoid tumors in adults: a case report and treatment-
focused review, J. Clin Ned Res. 2011, April 3(2), 85-92.




V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
16

Acetylenowe pochodne betuliny jako potencjalne substancje
przeciwnowotworowe

Sylwia Katarzyna Krl

Katedra i Zakad Biochemii i Biologii Molekularnej,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Problem chorb nowotworowych pozostaje cigle nierozwizany, pomimo
dynamicznego rozwoju nauk medycznych i farmaceutycznych w ostatnich latach.
Jedn z metod pozyskiwania nowych, potencjalnie przydatnych w onkologii substancji
jest chemiczna modyfikacja zwizkw naturalnych o dowiedzionej w warunkach in vitro oraz
in vivo aktywnoci przeciwnowotworowej. Przykadem takiej substancji jest betulina,
wystpujca obficie w krlestwie rolin, szczeglnie w korze drzew z rodzaju Betula
(brzoza). Syntetyzowane s rwnie jej liczne pochodne, posiadajce wikszy potencja
przeciwnowotworowy ni sama betulina [1, 2].
Acetylenowe pochodne betuliny stanowi grup substancji o interesujcych
waciwociach biologicznych. Dowiedziono, e wykazuj istotn aktywno
przeciwnowotworow wobec komrek ludzkiego czerniaka [3], biaaczki limfocytarnej, raka
piersi, jelita grubego oraz mysiej biaaczki w warunkach in vitro [4]. Stwierdzono rwnie
znaczc ich aktywno wzgldem komrek dziecicych nowotworw pochodzenia
nerwowego, takich jak neuroblastoma czy medulloblastoma.


1. Laszczyk M.N.: Pentacyclic triterpenes of the lupane, oleanane and ursane group as tools in cancer therapy.
Planta Medica, 2009, 75, s.1549
2. Yin J., Ren C.L., Zhan Y.G. et al.: Distribution and expression characteristics of triterpenoids and OSC genes
in white birch (Betula platyphylla suk.). Mol Biol Rep, 2012, 39, 3, s. 2321.
3. Orchel A., Kulczycka A., Chodurek E., Bbenek E., Borkowska P., Boryczka S., Kowalski J., Dzierewicz Z.:
Wpyw betuliny i 28-0 propynoilobetuliny na proliferacj i apoptoz ludzkich komrek czerniaka linii G-361.
Postepy Hig Med Dosw, (online), 2014, 68, s.191
4. Boryczka S., Bebenek E., Wietrzyk J., Kempinska K., Jastrzebska M., Kusz J., Nowak M.: Synthesis,
structure and cytotoxic activity of new acetylenic derivatives of betulin. Molecules, 2013, 18, 4, s. 4526




V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
17

Badanie wpywu sulforafanu na system detoksykacyjny w prawidowych
i nowotworowych komrkach ukadu pokarmowego in vitro

Katarzyna Lubelska
1,3
, Katarzyna Wiktorska
1
, Magorzata Milczarek
1,2
,
Lidia liwka
1,3
, Zdzisaw Chilmonczyk
1


1
Pracownia Mikroskopii Konfokalnej, Zakad Biologii Komrki,
Narodowy Instytut Lekw, Warszawa, Polska
2
Katedra i Zakad Syntezy i Technologii Chemicznej rodkw Leczniczych,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska
3
Zakad Bioanalizy i Analizy Lekw, Warszawski Uniwersytet Medyczny, Warszawa, Polska

W zwizku z rosncym zainteresowaniem medycyn prewentywn obserwuje si
wzrost spoycia suplementw diety. Znaczcy jest fakt, e czsto stosowane s one
rwnoczenie z lekami przepisanymi na recept. Moliwo niemonitorowanego spoycia
suplementw diety, ktre oddziaywaj na system detoksykacyjny komrek odpowiedzialny
za metabolizowanie i transport endogennych i egzogennych metabolitw, w tym lekw
stwarza potrzeb zbadania ich selektywnoci dziaania i odpowiedzenia na pytanie czy
zwizki dostpne jako suplementy diety mog selektywnie oddziaywa na komrki
prawidowe i nowotworowe.
Wedug danych epidemiologicznych dieta zawierajca izotiocyjaniany zmniejsza
ryzyko wystpienia nowotworu jelita grubego. Zwizki te bdc skadnikiem diety maj duy
wpyw na komrki ukadu pokarmowego. Najszerszej badany zwizek z tej grupy sulforafan
(SFN) jest ju dostpny na rynku w postaci suplementu diety. Nie do koca znany jest wpyw
izotiocyjanianw na komponenty systemu detoksykacji, do ktrych zalicza si enzymy
detoksykacyjne nalece do 2 fazy metabolizmu ksenobiotykw m.in oksydoreduktaz
NAD(P)H :chinonow1 (NQO1) oraz biaka transportowe MRP, zaliczane do 3 fazy
metabolizmu ksenobiotykw. Zbadano wpyw sulforafanu na aktywno NQO1 oraz biaek
transportowych MRP, oznaczono ekspresj i poziom biaka NQO1 i MRP w prawidowych
komrkach ukadu pokarmowego CRL1790 oraz nowotworowych komrkach ukadu
pokarmowego Caco2 i HT29. Stwierdzono e SFN dziaa w odmienny sposb na obydwie
fazy metabolizmu ksenobiotykw w prawidowych i nowotworowych komrkach ukadu
pokarmowego. Zwizek ten nie wykazywa specyficznoci wobec wpywu na NQO1, a
nawet silniej oddziaywa na ten enzym w komrkach nowotworowych. Natomiast
stwierdzono, e SFN silniej indukowa biaka transportowe MRP w komrkach
prawidowych. Badania wykazay, e konieczne s dalsze badania w celu okrelania
bezpieczestwa stosowania suplementw diety, gdy mog one w znaczcy sposb
modulowa odpowied komrkow na inne stosowane w lecznictwie leki.

Badania zostay wspfinansowane przez Uni Europejsk w ramach rdkw Europejskiego Funduszu
Spoecznego.

V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
18

Wpyw pozytywnego allosterycznego modulatora (PAM) metabotropowych
receptorw glutaminianergicznych 5 (mGLuR5), Vu-29, na procesy uczenia
i pamici zaburzone przewlekle podawanym etanolem u szczurw

Marta Marszaek, Jolanta H. Kotliska

Katedra i Zakad Farmakologii z Farmakodynamik,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Alkohol etylowy (etanol) jest jedn z najczciej naduywanych substancji.
Przewleke stosowanie etanolu prowadzi do uzalenienia. Jego odstawienie ma zoony
wpyw na procesy pamici i koncentracji. Etanol oddziauje na wiele typw receptorw
i ukadw neuroprzekanikowych, midzy innymi na ukad glutaminianergiczny, ktry
wczony jest w procesy nabywania, magazynowania i przywoywania informacji.
Celem pracy byo przebadanie wpywu pozytywnego allosterycznego modulatora
(PAM) metabotropowych receptorw glutaminianergicznych (mGluR5), zwizku Vu-29 na
procesy uczenia i pamici zaburzone przewlekle podawanym etanolem u szczurw.
Zaburzenia pamici mierzono za pomoc testu rozpoznawania nowego obiektu (novel object
recognition test - NOR). Ocenianym parametrem by indeks preferencji, ktry suy do
pomiaru zainteresowania zwierzt nowym obiektem.
Badania przeprowadzono na szczurach samcach szczepu Wistar (200-250 g). Etanol w
dawce 2 g/kg (20 % w/v) podawano zwierztom raz dziennie doodkowo (i.g.) przez 7 dni.
Test NOR przeprowadzono 24 i 48 h od ostatniego podania etanolu (8 i 9 dzie
eksperymentu). W 8 dniu zwierzta otrzymay Vu-29 w dawce 30 mg/kg, dootrzewnowo
(i.p.), jednorazowo, 1,5 h przed II sesj testu NOR. Aby wykaza, czy dziaanie Vu-29 ma
dugotrway wpyw na pami, w 9 dniu eksperymentu ponownie wykonano test NOR.
W tym dniu zwierzta nie otrzymay adnych iniekcji.
Przeprowadzone dowiadczenia wykazay, e PAM mGluR5, zwizek Vu-29
wyranie poprawia pami zaburzon odstawieniem przewlekle podawanego etanolu.
wiadczy o tym wysoka warto indeksu preferencji w grupie zwierzt otrzymujcej ten
zwizek wzgldem grupy etanolowej (p<0.01). Vu-29 podany sam grupie kontrolnej (solnej)
usprawnia jej pami (p<0.05). Otrzymane wyniki sugeruj, e zaburzenia pamici
wywoane przewlekle podawanym etanolem mog wynika ze zmniejszonej aktywnoci
ukadu glutaminianergicznego w strukturach mzgu zwizanych z pamici. Vu-29
prawdopodobnie poprawia pami tych zwierzt przez aktywacj receptorw mGluR5.
V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
19

Wbudowywanie biaek oraz kompleksw biakowo - barwnikowych
do modelowych bon lipidowych

Emilia Reszczyska
1,2
, Wiesaw I. Gruszecki
2

1
Zakad Biofizyki, Instytut Biologii i Biochemii,
Uniwersytet Marii Curie-Skodowskiej, Lublin, Polska
2
Zakad Biofizyki, Instytut Fizyki, Uniwersytet Marii Curie-Skodowskiej, Lublin, Polska

Barwniki ksantofilowe, gwnie zeaksantyna i luteina s niezbdne do poprawnego
widzenia. W obecnych czasach, barwniki te przeywaj renesans zainteresowania ze wzgldu
na ich obecno oraz ochronne funkcje w siatkwce oka, gwnie w zapobieganiu AMD (ang.
age-related macular degeneration). AMD, czyli zwyrodnienie plamki tej zwizane
z wiekiem dotyczy osb gwnie po 55 roku ycia. Obecnie jest to do istotny problem,
poniewa w przypadku tzw. postaci "suchej" nie ma leczenia, natomiast posta "mokra" tej
choroby prowadzi do utraty wzroku a leczenie jest dugotrwae i kosztowne.
Ksantofile s nierozpuszczalne w wodzie oraz s skadnikami pochodzcymi gwnie
z poywienia, rozpowszechnione i syntetyzowane gwnie przez roliny, dlatego te
prowadzone s nieustanne badania dotyczce procesu transportu barwnikw do siatkwki
oka. Naturalnym miejscem wystpowania karotenoidw w organizmach ywych s bony
lipidowe oraz biaka.
W pracy podjto badania modelowe oddziaywa zeaksantyny i luteiny z biakami
GSTP1 (transferaza glutationowa) i BSA (ang. Bovine Serum Albumin).
Badania spektroskopowe FTIR oraz badania z wykorzystaniem metod Langmuir -
Blodgett, pozwoliy zaobserwowa wbudowywanie si biaek oraz kompleksw biakowo-
barwnikowych do modelowych bon lipidowych.


Autor jest stypendyst w projekcie realizowanym w programie Team Fundacji na rzecz Nauki Polskiej,
wspfinansowany przez Uni Europejsk w ramach Europejskiego Funduszu Rozwoju Regionalnego.










V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
20

Mechanizm toksycznoci antybiotyku Amfoterycyny B w wietle bada
spektroskopowych

Joanna Starzyk, Krzysztof Tutaj, Rafa Luchowski, Radosaw Szlzak,
Wojciech Grudziski, Wiesaw I. Gruszecki

Zakad Biofizyki, Instytut Fizyki, Uniwersytet Marii Curie-Skodowskiej, Lublin, Polska

Amfoterycyna B (AmB) jest antybiotykiem z grupy polienw stosowanym w leczeniu
grzybic ukadowych. Lek ten stanowi produkt metabolizmu bakterii Streptomyces nodosus.
Wykorzystywany jest powszechnie w praktyce lekarskiej od ponad p wieku mimo, e
charakteryzuje go bardzo wysoka toksyczno zwizana z nisk selektywnoci dziaania.
Badania wskazuj, e jego aktywno farmakologiczna oraz dziaanie toksyczne
zaley od jego organizacji molekularnej, w zwizku z czym kluczowe jest zrozumienie
i wyjanienie mechanizmw j regulujcych. W celu zrozumienia i wyjanienia aktywnoci
biologicznej oraz toksycznoci tego leku zastosowano szereg metod spektroskopowych.
Na podstawie wynikw bada moemy powiedzie, e efekt toksyczny AmB
zwizany jest z tworzeniem kanaw w bonach lipidowych, ktre zaburzaj transport jonw
transbonowych w konsekwencji prowadzc do mierci zdrowych komrek. Kanay te maj
struktur tetrameryczn, a ostatnie badania pokazuj, e do ich utworzenia konieczna jest
obecno specyficznych dimerw antybiotyku.


Autor jest stypendyst w projekcie realizowanym w programie Team Fundacji na rzecz Nauki Polskiej,
wspfinansowany przez Uni Europejsk w ramach Europejskiego Funduszu Rozwoju Regionalnego.


V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
21

Wykorzystanie cytometrii tkankowej w monitorowaniu ekspresji genw

Agnieszka Wojcieszek
1
, Micha Dudziski
1
, Mateusz Wiliski
1
, Magorzata Filas
1
,
Piotr Chomik
1
, Karolina Knap-Czop
2
, Marcin Czop
1
, J anusz Kocki
1


1
Zakad Genetyki Klinicznej, Katedra Genetyki Medycznej,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska
2
Katedra i Zakad Anatomii Prawidowej Czowieka,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Przeprowadzone badania maj na celu porwnanie zmian i ustalenie stopnia
zrnicowania i zoliwoci u pacjentw z rakiem paskonabonkowym krtani oraz ocen
ekspresji genw.
W badaniu wykorzystano system TissueFaxs, ktry pozwoli na dokadniejsz
diagnostyk mikroskopow preparatw histopatologicznych oraz ocen poziomu ekspresji
genw. Analiza preparatw jest moliwa w wietle widzialnym i we fluorescencji. System
skada si z dwch moduw: TissueFaxs i HistoQuest, zintegrowanych z mikroskopem
odwrconym. TissueFaxs wykonuje wysokiej jakoci zdjcia, co pozwala dokadniej
zaobserwowa zmiany w badanej tkance. Aparat zlicza komrki w wyznaczonym regionie
(ROI) badanej tkanki. Dziki zastosowaniu rnych technik barwienia, takich jak:
hematoksylin i eozyn oraz immunohistochemiczne, istnieje moliwo lepszego
rozpoznania zmian w histologii a w konsekwencji postawienia diagnozy. Zautomatyzowany
system wykrywa komrki i ustala pooenie wzgldem tkanki. Zalet systemu jest program
HistoQuest, w ktrym opatentowane algorytmy wykrywaj natenie antygenw jdra
i cytoplazmy. Atutem systemu jest moliwo zlokalizowania konkretnej komrki na
wykresie.
Nowotwory gowy i szyi nale do najczciej wystpujcych chorb onkologicznych.
Przykadem jest rak krtani, ktry obecnie stanowi duym problem i dotyczy szczeglnie
mczyzn. Przyczyn raka krtani s spontaniczne mutacje, ktre wywouj nadmierny rozrost
tkanki. Cytometria tkankowa stanowi pomocne narzdzie w ustaleniu czynnikw
rokowniczych nowotworw.
Badania su wczesnemu rozpoznaniu i podjciu leczenia zdiagnozowanych
pacjentw.


V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
22

Asymetrycznie podstawione pochodne tiomocznika oraz ich kompleksy
lipofilowo zwizku kompleksowego a aktywno jego gwnego ligandu

Agnieszka Wronka
1
, I rena Malinowska
1
, Barbara Mirosaw
1
, Anna Bielenica
2
,
Marta Struga
3


1
Faculty of Chemistry, Maria Curie-Sklodowska University, Lublin, Poland
2
Chair and Department of Biochemistry, Medical University of Warsaw, Warsaw, Poland
3
Department of Pharmacogenomics, Faculty of Pharmacy,
Medical University of Warsaw, Warsaw, Poland

Lipofilowo jest miar hydrofobowoci molekuy i koreluje z jej zdolnoci do
przenikania przez bony biologiczne. Wyznaczajc lipofilowo, jestemy wic w stanie
przewidzie pierwszy etap dziaania leku - jego transport do miejsca dziaania. Ilociow
miar tej cechy jest parametr logP.
Przy uyciu metod chromatograficznych (HPLC RP-8e, IAM, HPTLC RP-18)
wyznaczono lipofilowo 18 pochodnych 4H-1,2,4-triazoli oraz ich kompleksw, korzystajc
z rwnania Soczewiskiego Wachtmaistera. Opierajc si na powyszej zalenoci
wyznaczono logk0 (RM0), czyli teoretyczn warto logk (RM) ekstrapolowan do zerowej
zawartoci organicznego modyfikatora w fazie ruchomej, przyjmowan za najbardziej
dokadn miar lipofilowoci uzyskan przy zastosowaniu chromatografii wykorzystywan
w badaniach QSAR. Otrzymane wartoci skorelowano z parametrami lipofilowoci
otrzymanymi metodami obliczeniowymi.
Czci wspln wszystkich badanych ligandw jest fragment tiomocznika
podstawionego z jednej strony piercieniem 1,2,4-triazolowym i rnych grup (R) z drugiej
strony. Grupa ta obejmuje liniowe, cykliczne i aromatyczne fragmenty o rnych rozmiarach
i rnych podstawnikach, zarwno aktywujcych jak i dezaktywujcych piercie.
Przedstawiony zbir zrnicowanych substancji oraz ich badania przesiewowe dotyczce
lipofilowoci zostay rwnie uyte do badania zalenoci struktura aktywno.
Porwnano rwnie lipofilowo zwizku kompleksowego oraz jego ligandu. Wielu
autorw przypisuje rnice w zachowaniu ligandu i jego kompleksw metali procesowi
chelatowania. Redukuje on polarno jonu centralnego poprzez podzia adunku dodatniego
pomidzy grupy donorowe czsteczki, co zwiksza charakter lipofilowy jonu centralnego
i sprzyja przenikaniu przez warstw lipidow bony.







V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
23

Prezentacje ustne Sesja Genetyczna 16:00 17:05
16:00 16:07 Piotr Chomik
Wykorzystanie systemu xcellence rt do obrazowania mezenchymalnych komrek
macierzystych w czasie rzeczywistym
_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
16:08 16:15 Marcin Czop
Talidomid leads to dose dependent apoptosis in leukemia cell line (CEM/C1)
_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
16:16 16:23 Marcin Czop
Apoptoza w ludzkich komrkach szpiczaka mnogiego eksponowanego na dziaanie
talidomidu, kwasu walproinowego i simwastatyny
_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
16:24 16:31 Magorzata Filas
Wykorzystanie cytometrii przepywowej do izolacji komrek macierzystych oraz frakcji
leukocytw przy uyciu sortera MoFlo XDP
prezentacja nie zostaa wygoszona z powodu wystpienia problemw technicznych
_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
16:32 16:39 Magorzata Milczarek
Potgowanie cytotoksycznoci 5-fluorouracylu przez sulforafan w komrkach
nowotworowych
_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
16:40 16:47 Karol Tudrej
Preparaty genowe opracowanie skadu, uzyskiwanie i ocena waciwoci
fizykochemicznych
_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
16:48 16:55 Mateusz Wiliski
Technika digital PCR - nowoczesna metoda badawcza o wysokim potencjale diagnostycznym
_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
16:56 17:03 Artur Wnorowski
Targeting 2-adrenergic receptor to inhibit proliferation and motility of human melanoma
cell lines
_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________














V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
24

Wykorzystanie systemu xcellence rt do obrazowania mezenchymalnych
komrek macierzystych w czasie rzeczywistym

Piotr Chomik, Magorzata Filas, Agnieszka Wojcieszek, Mateusz Wiliski,
Paulina Gil-Kulik, Alicja Niedojado, Janusz Kocki

Zakad Genetyki Klinicznej, Katedra Genetyki Medycznej,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Mezenchymalne komrki macierzyste (MSC) s niewyspecjalizowanymi komrkami
zdolnymi do nieograniczonych podziaw. Pod wpywem dziaania rnych czynnikw mog
przeksztaca si w rne typy dojrzaych komrek. Szpik kostny, ma stawowa, bona
maziowa, tkanka chrzstna oraz tkanka tuszczowa s bogatym rdem komrek
macierzystych. W ostatnich latach due zainteresowanie wzbudzaj multipotencjalne
mezenchymalne komrki macierzyste pozyskiwane z krwi ppowinowej i ppowiny. MSC
okrelane s jako niehematopoetyczne, niezrnicowane komrki i w warunkach In vitro
tworz kolonie komrek adherentnych o budowie zblionej do fibroblastw. Ustalenie metod
izolacji, hodowli, a take ich kontrolowanego rnicowania moe mie due zastosowanie
kliniczne w terapi wielu chorb czowieka.
Celem pracy bya optymalizacja i obrazowanie cigej hodowli mezenchymalnych
komrek macierzystych z fragmentw ppowiny za pomoc systemu xcellence rt sprzonego
z automatycznym mikroskopem fluorescencyjnym Olympus IX 80. System xcellence czy
wysoka jako optyczna z jednoczesn du prdkoci sterowania w czasie rzeczywistym
w mikroskopie Olympus IX 80. System zapewnia rwnie archiwizacj obrazw. Mikro -
sekundowy kontroler umoliwia wiele procesw, ktre mog by prowadzone rwnolegle.
Kontroler komunikuje si z wszystkimi elementami systemu owietlenia MT20 i innymi
urzdzeniami peryferyjnymi, zapewniajc bezproblemowe ustawienie eksperymentu oraz
otrzymywanie wiarygodnych danych i znakomitych obrazw, ktre s prezentowane w pracy.

V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
25

Talidomid leads to dose dependent apoptosis in leukemia cell line
(CEM/C1)

Marcin Czop
1
, Anna Winiewska
2
, J oanna Przemyski
2
, Rafa ukowski
2
,
Mateusz Gwizdaa
2
, Krzysztof Paczwa
2
, Natalia Trtowicz
2
, Ruby Maini
2
,
Karolina Knap-Czop
3
, Anna Bogucka-Kocka
4
, J anusz Kocki
1

1
Clinical Genetics Department, Medical University of Lublin, Lublin, Poland
2
SKN Genesis, Medical University of Lublin, Lublin, Poland
3
Chair and Department of Human Anatomy, Medical University of Lublin, Lublin, Poland
4
Chair and Department of Pharmaceutical Botany,
Medical University of Lublin, Lublin, Poland

Thalidomide was introduced in second half of XX century and used as an anti-nausea
in pregnant women. Thalidomide has been withdrawn from treatment after less than 10 years
because of its teratogen activity.
Thalidomide has shown significant activity in multiple myeloma treatment used alone
and in combination with dexamethasone or cyklofosfamid. Thalidomide derivatives were
synthetized (pomalidomide and lenalidomide). They show better activity against myeloma
cells and lower side effects than thalidomide.
The aim of this work was to verify the effect of different doses of thalidomide on
leukemia cell line CEM/C1. Cell line were cultures in RPMI 1640 medium (PAA)
supplemented with L-glutamine (2mM), HEPES, antibiotics (penicillin (100U/mL)
streptomycin (100M), amphotericin 2.5g/mL(Sigma)) and 10% fetal bovine serum heat
inactivated (Gibco). Cell lines were modulated with thalidomide (10g/mL) in various
concentrations. The substance effect on cells were observed by flow cytometry.
The thalidomide influence on cells vitality was demonstrated. Inhibitory doses (IC10,
IC50, IC90) were determined.


This work was made by using the equipment purchased within the Project ""The equipment of innovative
laboratories doing research on new medicines used in the therapy of civilization and neoplastic diseases"" within
the Operational Program Development of Eastern Poland 2007 - 2013, Priority Axis I Modern Economy,
Operations I.3 Innovation Promotion.
V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
26

Apoptoza w ludzkich komrkach szpiczaka mnogiego eksponowanego
na dziaanie talidomidu, kwasu walproinowego i simwastatyny

Marcin Czop
1
, Tomasz Kubrak
2
, Karolina Knap-Czop
3
, Dariusz J awniak
4
,
J anusz Kocki
1
, Anna Bogucka-Kocka
2

1
Zakad Genetyki Klinicznej, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska
2
Katedra i Zakad Botaniki Farmaceutycznej,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska
3
Katedra i Zakad Anatomii Prawidowej Czowieka,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska
4
Katedra i Klinika Hematologii i Transplantacji Szpiku,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Szpiczak mnogi to zoliwy, rozsiany nowotwr hematologiczny, w ktrym dochodzi
do monoklonalnego rozrostu komrek plazmatycznych. Szpiczak mnogi to okoo 1-2%
wszystkich nowotworw. Etiologia choroby jest do tej pory niewyjaniona i najczciej
dotyka osb w podeszym wieku. Patologicznie zmienione komrki plazmatyczne produkuj
due iloci specyficznej immunoglobuliny, ktrej wykrycie jest jednym z krokw diagnostyki
choroby. Od wielu lat z powodzeniem w Polsce i na wiecie w terapii szpiczaka mnogiego
jest stosowany talidomid. Pocztkowo bya to monoterapia, natomiast wprowadzenie
skojarzonego leczenia znacznie podnioso jego efektywno. Obecnie najczciej stosuje si
talidomid w poczeniu z deksametazonem lub cyklofosfamidem.
Celem pracy byo zbadanie wpywu talidomidu, kwasu walproinowego i simwastatyny
na ywotno ludzkich komrek szpiczaka mnogiego. Komrki szpiczakowe eksponowane
byy na dziaanie w/w zwizkw wprost po izolacji ze szpiku pacjentw. Hodowle
komrkowe prowadzone byy w medium o skadzie: 20% surowicy podowej bydlcej (FBS
Gold), 100U/ml penicyliny, 100M/ml streptomycyny, 2.5g/ml amfoterycyny B oraz RPMI
1640. Komrki posiewano i eksponowano na dziaanie badanych zwizkw, po kolejnych 24h
przeprowadzano analiz cytometryczna. Badanie wykonano metod cytometrii przepywowej
z wykorzystaniem cytometru przepywowego FlowSight (Amnis) z mikroskopow analiz
obrazu w czasie rzeczywistym.
Wykazano indukcj apoptozy w prbkach, gdzie jednoczenie zastosowano talidomid
w poczeniu z kwasem walproinowym oraz talidomid z poczeniu z kwasem walproinowym
oraz simwastatyn. Zwizki uyte w badaniu powodoway apoptoz komrek w niewielkim
stopniu wpywajc na nekroz.


Praca powstaa z wykorzystaniem sprztu zakupionego w ramach Projektu: Wyposaenie innowacyjnych
laboratoriw prowadzcych badania nad nowymi lekami stosowanymi w terapii chorb cywilizacyjnych
i nowotworowych w ramach Programu Operacyjnego Rozwj Polski Wschodniej 2007-2013, Osi priorytetowej
I Nowoczesna Gospodarka, Dziaania I.3 Wspieranie Innowacji.
V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
27

Wykorzystanie cytometrii przepywowej do izolacji komrek macierzystych
oraz frakcji leukocytw przy uyciu sortera MoFlo XDP

Magorzata Filas
1
, Piotr Chomik
1
, Agnieszka Wojcieszek
1
, Mateusz Wiliski
1
,
Paulina Gil- Kulik
1
, Karolina Knap-Czop
2
, J anusz Kocki
1


1
Zakad Genetyki Klinicznej, Katedra Genetyki Medycznej,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska
2
Katedra i Zakad Anatomii Prawidowej Czowieka,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Komrki wszystkich linii rozwojowych krwi rnicujcych si w kierunku m. in.
erytrocytw, leukocytw oraz trombocytw wywodz si z hematopoetycznych komrek
macierzystych posiadajcych na swojej powierzchni antygen CD 34. Powstajca linia
leukocytarna wykazuje ekspresj antygenu CD45, ktry jest wsplny dla monocytw,
limfocytw i granulocytw. Wystpujce na powierzchni i wewntrz komrek antygeny
umoliwiaj analiz ilociow, jakociow i czynnociow za pomoc cytometrii
przepywowej. Identyfikacja poszczeglnych komrek oparta jest za reakcji antygen-
przeciwciao, a wizuzalizacja moliwa jest poprzez przetworzenie impulsw wietlnych,
powstaych w wyniku emisji wiata poprzez wzbudzone wiatem lasera skoniugowane
z przeciwciaami fluorochromy, na elektryczne. Detekcja fluorescencji umoliwia dalszy etap
sortowanie. Sorter MoFlo pozwala na jednoczesn analiz cytometryczn badanych
komrek oraz ich selekcj na wybrane populacje komrkowe. Sortowanie zachodzi w polu
elektrycznym wytwarzanym przez elektrody, pomidzy ktrymi przepywa strumie cieczy
ulegajcy podziaowi na krople w wyniku drga krysztau piezoelektrycznego.
Celem pracy bya ocena wydajnoci sortowania komrek macierzystych oraz frakcji
leukocytw z krwi obwodowej. Materia do bada stanowia krew obwodowa pobrana na
wersenian dwupotasowy od ochotnikw. Badania uzyskay zgod komisji bioetycznej. Krew
nastpnie zostaa poddana inkubacji z przeciwciaami wyznakowanymi fluorochromem oraz
zlizowana wg procedury. Analiz cytometryczn oraz selekcje poszczeglnych typw
komrek przeprowadzono za pomoc sortera MoFlo. W uzyskanych wynikach wydajno
sortowania sigaa ok. 99%. Otrzymano czyste populacje komrkowe. Sorter MoFlo stanowi
narzdzie do wydajnej izolacji komrek macierzystych i frakcji leukocytw.
V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
28

Potgowanie cytotoksycznoci 5-fluorouracylu przez sulforafan
w komrkach nowotworowych

Magorzata Milczarek
1,2
, Katarzyna Wiktorska
2
, Katarzyna Lubelska
2
,
Lidia liwka
1,3
, Dariusz Matosiuk
1
, Zdzisaw Chilmonczyk
1

1
Katedra i Zakad Syntezy i Technologii Chemicznej rodkw Leczniczych,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska
2
Zakad Biologii Komrki, Narodowy Instytut Lekw, Warszawa, Polska
3
Zakad Bioanalizy i Analizy Lekw,
Uniwersytet Medyczny w Warszawie, Warszawa, Polska

Od kilku lat w literaturze obserwowana jest nowa idea sugerujca podawanie lekw
onkologicznych w kombinacji z naturalnymi zwizkami chemoprewentywnymi.
Oczekiwanym efektem stosowania takich kombinacji jest wzrost skutecznoci leczenia
i zmniejszenie toksycznoci lekw w stosunku do komrek prawidowych. Sulforafan to
naturalny zwizek chemoprewentywny. W badaniach na komrkach nowotworowych
wykazano, e potguje aktywno lekw przeciwnowotworowych. Wyniki naszych
wczeniejszych bada wskazuj, e w komrkach prawidowych 5-fluorouracyl i sulforafan
dziaaj antagonistycznie.
Celem bada byo okrelenie typu interakcji pomidzy 5-fluorouracylem
i sulforafanem w liniach komrek raka sutka: MCF-7 i MDA-231, liniach raka jelita grubego:
HT-29 i Caco-2 oraz liniach raka gruczou krokowego: PC-3 i LNCaP. Efekt cytotoksyczny
kombinacji i poda osobnych zwizkw zbadano przy pomocy testu MTT. Dla przypadkw
gdzie cytotoksyczno kombinacji bya wysza ni 50 % okrelono rodzaj interakcji metod
Chou i Talalya.
W liniach komrek raka sutka obserwowano, e cytotoksyczno kombinacji bya
wysza ni podania osobnego zwizkw (synergizm oraz addytywizm). Stenie efektywne
leku byo 23 krotnie nisze po podaniu w kombinacji w porwnaniu do podania osobnego.
W linii raka jelita grubego Caco-2, w zakresie cytotoksycznoci od 50% do 80% wykazano,
e kombinacja dziaaa silniej ni podania osobne (synergizm i addytywizm). Dla wikszej
cytotoksycznoci efekt kombinacji by podobny do obserwowanego po podaniu sulforafanu
(antagonizm). W linii raka jelita grubego HT-29 obserwowano rwnie antagonizm. W linii
PC-3, dla cytotoksycznoci mniejszej ni 70% obserwowano potgowanie aktywnoci 5-
fluorouracylu (synergizm). Dla cytotoksycznoci wikszej od 70% jak dla podania leku
(antagonizm). W drugiej linii raka gruczou krokowego - LNCaP kombinacja cechowaa si
porwnywaln cytotoksycznoci jak podanie sulforafanu (antagonizm). Sulforafan najlepiej
potguje aktywno przeciwnowotworow 5-fluorouracylu w komrkach raka sutka.


Badania finansowane przez NCN. Grant badawczy nr. 2012/05/N/NZ5/02634
V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
29

Preparaty genowe opracowanie skadu, uzyskiwanie i ocena waciwoci
fizykochemicznych

Karol Tudrej, Maciej Maecki

Katedra Farmacji Stosowanej i Bioinynierii, Warszawski Uniwersytet Medyczny, Warszawa, Polska

Terapia genowa stanowi obecnie obiecujc metod leczenia wielu schorze
o podou genetycznym. Jednak z uwagi na stosunkowo niedugi czas, jaki upyn od
pojawienia si genw w lecznictwie, niezbdne s dalsze prace tak nad nowymi postaciami
farmaceutycznymi jak i znalezieniem atrakcyjnych terapeutycznie celw molekularnych dla
genoterapii. W niniejszej pracy, podjto si prby opracowania staych postaci leku dla
preparatw genowych nioscych plazmidowe siRNA, ktre nastpnie bd przetestowane,
jako preparaty antynowotworowe, na komrkach czerniak.

Cel: celem niniejszej pracy jest opracowanie staych postaci leku dla preparatw
genowych nioscych siRNA, ktre bd wykazyway dziaanie antynowotworowe na komrki
czerniaka linii B16-F10.
Metody: hodowle bakteryjne Escherichia coli, izolacja plazmidw na skal mini i giga,
analiza restrykcyjna plazmidu, elektroforeza w elu agarozowym, PCR.
Rezultaty: wyhodowano 50 l pynnej hodowli bakterii E. coli nioscej odpowiedni
plazmid psiRNA, a nastpnie izolowano plazmid. Oznaczenie wyizolowanych plazmidw
wykonano w sposb ilociowy przy pomocy spektroskopii UV-Vis oraz w sposb jakociowy
przy pomocy analizy restrykcyjnej.
Wnioski: Rezultaty izolacji przeprowadzonych przy pomocy zestawu EndoFree
Plasmid Giga Kit (Qiagen) pokazay, i moliwym jest wydajne namnoenie plazmidw
psiRNA w transformowanych bakteriach E. coli. Jako uzyskanych plazmidw pozwala na
dalsze prace badawcze w kierunku opracowania preparatw genowych do bada klinicznych
na tych wektorach.

V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
30

Technika digital PCR - nowoczesna metoda badawcza o wysokim
potencjale diagnostycznym

Mateusz Wiliski
1
, Agnieszka Wojcieszek
1
, Magorzata Filas
1
, Piotr Chomik
1
,
Karolina Knap-Czop
2
, Marcin Czop
1
, J anusz Kocki
1

1
Zakad Genetyki Klinicznej, Katedra Genetyki Medycznej,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska
2
Katedra i Zakad Anatomii Prawidowej Czowieka,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

acuchowa reakcja polimerazy (ang. polymerase chain reaction PCR) zostaa
opracowana ponad trzy dekady temu przez amerykaskiego biochemika dra Kary'ego
Mullisa. Okazaa si przeomowym odkryciem biologii molekularnej i zotym standardem
diagnostycznym. Obecnie istnieje wiele typw techniki PCR, bdcych modyfikacjami
metody standardowej. Jedn z nich jest Digital PCR (dPCR) nazywany rwnie emulsyjnym
PCR. Digital PCR jest swoist ewolucj metody real-time PCR (qPCR) oferujc odmienny
sposb oceny ilociowej i detekcji rzadkich alleli w stosunku do metody konwencjonalnej.
Digital PCR zapewnia wysok czuo i dokadno w stosunku do klasycznej metody
real-time PCR. Zwikszona automatyzacja procesu pozwala skrci czas analizy, a take
ogranicza ryzyko popenienia bdu. Dziki wysokiej czuoci i dokadnoci, dPCR oferuje
wiksze moliwoci diagnostyczne, a co szczeglnie wane - skraca czas diagnozy.
W pracy przedstawiono moliwoci klinicznego zastosowania techniki dPCR
w diagnostyce chorb czowieka. Cech charakterystyczn digital PCR jest kropelkowo-
emulsyjna technologia procesu, polegajca na frakcjonowaniu prbki na tysice fragmentw,
ktre indywidualnie podlegaj amplifikacji i analizie. Zabieg ten wyranie zwiksza
specyficzno reakcji i umoliwia dokadniejsz analiz danych.
V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
31

Targeting 2-adrenergic receptor to inhibit proliferation and motility of
human melanoma cell lines

Artur Wnorowski
1,2
, Mariola Sadowska
3
, Rajib K. Paul
2
, Anna Boguszewska-
Czubara
4
, Lucita J imenez
5
, Abdelmohsen Kotb
6
, Lawrence Toll
7
, Michel Bernier
8
,
Krzysztof Jwiak
1
, I rving W. Wainer
2

1
Laboratory of Medicinal Chemistry and Neuroengineering, Medical University of Lublin, Poland
2
National Institute on Aging, Laboratory of Clinical Investigation, MD, USA
3
University of Maryland, Marlene & Stewart Greenebaum Cancer Center, MD, USA
4
Department of Medicinal Chemistry, Medical University of Lublin, Poland
5
SRI International, CA, USA
6
National Institute on Aging, Laboratory of Genetics, USA
7
Torrey Pines Institute for Molecular Studies, FL, USA
8
National Institute on Aging, Translational Gerontology Branch, MD, USA

(R,R)-4-methoxy-1-naphtylfenoterol (MNF) inhibits proliferation of 1321N1
astrocytoma cell line in a 2-adrenergic receptor (2AR)-dependent manner (1), while
reducing rat C6 glioma growth in a xenograft mouse model (2). MNF interferes also with
proto-oncogenic signaling induced by the GPR55 receptor, in human HepG2 hepatocarcinoma
and PANC-1 pancreatic carcinoma cells (3).
Here, we utilized a number of cellular and biochemical techniques to investigate the
anti-tumorigenic potential of MNF in a panel of 2AR-expressing human melanoma cell
lines. Scratch wound healing assays and real-time analysis using xCELLigence system
demonstrated the ability of MNF to dose-dependently reduce the motility and invasiveness of
three different melanoma cell lines, namely UACC-647, M93-047 and UACC-903. Inhibition
of cell invasion was accompanied by drop in MMP-9 activity. Pharmacological inhibition of
2AR and protein kinase A (PKA) protected against the actions of MNF. Forskolin, activator
of adenylyl cyclase, and Ro 20-1724, inhibitor of phosphodiesterase 4, mimicked the MNF
activity. U-shaped dose-response curves, with a nadir at 1 nM, were observed when the levels
of phosphorylated MEK and ERK were determined in MNF-treated cells. Cell pretreatment
with ICI 118,551, selective 2AR antagonist, abolished MNF-evoked drop in
phospho ERK levels. However, MNF markedly increased inhibitory phosphorylation of
eukaryotic elongation factor 2 (eEF2) on Thr56, which was accompanied by global defect in
protein biosynthesis as revealed by pulse-labeling experiments with [35S]-methionine. We
concluded that the anti tumorigenic functions of MNF in melanoma cells rely on 2AR-
dependent accumulation of cyclic AMP and subsequent activation of PKA.
This work was supported by funds from the Intramural Research Program of the
National Institute on Aging (N01 AG 3 1009) and the Foundation for Polish Science
(TEAM 2009-4/5 programme).

1. L. Toll et al., J Pharmacol Exp Ther 336, 524 (Feb, 2011).
2. M. Bernier et al., Pharmacology Research & Perspectives 1, 1 (2013).
3. R. K. Paul et al., Biochem Pharmacol 87, 547 (Feb 15, 2014).

V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
32

Sesja posterowa 11:30 13:00
P1. Bczkowska Ilona
P2. Bczkowska Ilona
P3. Frant Maciej
P4. Frant Maciej
P5. Gaza Justyna
P6. Gadysz Agata
P7. Iwaniak Karol
P8. Jesionek Wioleta
P9. Kapro Barbara
P10. Knap Czop Karolina
P11. Koodziej Przemysaw
P12. Naleniak Magdalena
P13. Niemiec Magorzata A.
P14. Nowacka Natalia
P15. Palusiska Magorzata
P16. Pawlikowski Andrzej
P17. Polski Andrzej
P18. Puzio Micha
P19. Rejczak Tomasz
P20. Smyrska Natalia
P21. Stanisawski Grzegorz
P22. Strzemski Maciej
P23. liwka Lidia
P24. Wojtunik Karolina
P25. Wronka Agnieszka
P26. Wrblewski Karol
P27. urek Aleksandra
P28. urek Aleksandra
V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
33

Przykadowe zastosowania adsorpcyjnej woltamperometrii stripingowej
w analizie zwizkw biologicznie aktywnych

Ilona Bczkowska, Katarzyna Tyszczuk-Rotko

Zakad Chemii Analitycznej i Analizy Instrumentalnej,
Uniwersytet Marii Curie-Skodowskiej, Lublin, Polska

Woltamperometria stripingowa (SV) (zwana rwnie woltamperometri z zataniem
lub woltamperometri inwersyjn) jest szybko rozwijajc si metod z wieloma
moliwociami zastosowania ze wzgldu na jej wysok czuo, dokadno, precyzj i niski
koszt aparatury. Granice wykrywalnoci wikszoci procedur opracowanych
z wykorzystaniem tej metody s rzdu 10-10 lub 10-9 mol L-1, a w sprzyjajcych warunkach
wynosz one nawet poniej 10-13 mol L-1. Wrd technik woltamperometrii inwersyjnej,
adsorpcyjna woltamperometria stripingowa (AdSV) znajduje szerokie zastosowanie
w analizie zwizkw biologicznie aktywnych. W AdSV zatanie substancji oznaczanej
odbywa si na drodze adsorpcji na powierzchni elektrody pracujcej. Dobr waciwej
elektrody pracujcej odgrywa kluczow rol w oznaczeniach prowadzonych t metod.
Dlatego te woltamperometria inwersyjna korzysta z caej gamy rnych elektrod
pracujcych, wrd ktrych moemy wyrni: elektrody rtciowe, elektrody stae,
mikroelektrody oraz elektrody z modyfikowan powierzchni. Elektrody rtciowe (wiszca
kroplowa elektroda rtciowa (HMDE) i bonkowa elektroda rtciowa (MFE)) do 2000 roku
byy szeroko stosowane w oznaczeniach prowadzonych t metod. Jednake ze wzgldu na
toksyczno rtci i jej zwizkw dy si do cakowitego wyeliminowania elektrod
rtciowych ze rodowiska laboratoryjnego i opracowania nowych materiaw, pozwalajcych
na uzyskanie elektrod, ktre posiadayby ich zalety i rwnoczenie byyby mniej toksyczne.
W 2005 roku wprowadzono do oznacze metod adsorpcyjnej woltamperometrii
stripingowej bonkow elektrod oowiow (PbFE), ktra wykazuje mniejsz toksyczno
w porwnaniu z elektrodami rtciowymi. Elektroda ta posuya do opracowania procedur
oznaczania szerokiej gamy jonw metali (np. Co(II), Ni(II), Mo(II), W(VI), U(VI)) oraz
zwizkw biologicznie aktywnych (np. kwasu foliowego, testosteronu, kwasu kawowego,
kwasu betulinowego). W niniejszym komunikacie przedstawiono przykady zastosowania
adsorpcyjnej woltamperometrii stripingowej w analizie wybranych zwizkw biologicznie
aktywnych.









V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
34

Woltamperometryczna procedura jednoczesnego oznaczania paracetamolu
i kwasu askorbinowego na elektrodzie diamentowej domieszkowanej borem
modyfikowanej bonk Nafionu i oowiem

Ilona Bczkowska
1
, Katarzyna Tyszczuk-Rotko
1
, Magdalena Wjciak-Kosior
2
,
I reneusz Sowa
2


1
Zakad Chemii Analitycznej i Analizy Instrumentalnej,
Uniwersytet Marii Curie-Skodowskiej, Lublin, Polska
2
Katedra Chemii, Zakad Chemii Analitycznej, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Paracetamol (N-acylo-p-amino-fenol, acetamionfen) jest lekiem o dziaaniu
przeciwblowym i przeciwzapalnym. Znajduje szerokie zastosowanie przy agodzeniu blu
mini, staww, koci, zbw i innych czci ciaa. Przedawkowanie paracetamolem moe
prowadzi do akumulacji toksycznych metabolitw, a w niektrych wypadkach nawet do
mierci pacjenta.
Kwas askorbinowy (witamina C, 2(-1,2-dihydroksyetyl)-4,5-dihydroksyfuran-3-on)
odgrywa istotn rol w funkcjonowaniu ludzkiego organizmu m.in.: bierze udzia w
przemianach tyrozyny, w syntezie steroidw nadnerczy, wzmacnia i chroni ukad
odpornociowy, poprawia dostpno biologiczn elaza oraz prawdopodobnie zmniejsza
poziom cholesterolu. Ponadto, witamina C jest popularnym antyoksydantem stosowanym jako
dodatek do ywnoci.
Niektre preparaty farmaceutyczne zawieraj zarwno kwas askorbinowy jak
i paracetamol ze wzgldu na fakt, e kwas askorbinowy wzmacnia dziaanie farmakologiczne
paracetamolu oraz wykazuje dziaanie ochronne przeciw jego hepatoksycznoci. Dlatego te
jednoczesne wyznaczenie zawartoci obu zwizkw stanowi istotny element kontroli jakoci
preparatw farmaceutycznych. Badanie te z powodzeniem mona przeprowadzi za pomoc
chromatografii cieczowej i metod spektrofotometrycznych, jednake metody te s zwykle
czasochonne i kosztowne. Metody elektrochemiczne, w szczeglnoci woltamperometria ze
wzgldu na wysok czuo, selektywno i prostot pomiarw stanowi dobr alternatyw dla
tych metod. W niniejszym komunikacie przedstawiono now procedur jednoczesnego
oznaczania paracetamolu i kwasu askorbinowego na elektrodzie diamentowej
domieszkowanej borem (BDD) modyfikowanej bonk Nafionu i oowiem metod
woltamperometrii pulsowo-rnicowej. Otrzymane krzywe kalibracyjne s liniowe w zakresie
ste od 5 10-7 do 2 10-4 mol L-1 dla paracetamolu i od 1 10-6 do 5 10-4 mol L-1
dla kwasu askorbinowego. Zaproponowana procedura zostaa z powodzeniem zastosowana do
jednoczesnego oznaczania paracetamolu i kwasu askorbinowego w wybranych preparatach
farmaceutycznych.





V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
35

Efekt wybranych porfiryn na rozwj zarodka kurzego

Maciej Frant
1
, Arkadiusz Czerwonka
1
, Anna Kasprzyk
2
, Monika Dwierzyska
3
,
Mariusz Trytek
4
, Roman Paduch
1


1
Zakad Wirusologii i Immunologii, Uniwersytet Marii Curie-Skodowskiej, Lublin, Polska
2
Zakad Anatomii i Cytologii Rolin, Uniwersytet Marii Curie-Skodowskiej, Lublin, Polska
3
Zakad Biologii Molekularnej, Uniwersytet Marii Curie-Skodowskiej, Lublin, Polska
4
Zakad Mikrobiologii Przemysowej, Uniwersytet Marii Curie-Skodowskiej, Lublin, Polska

Porfiryny s heterocyklicznymi zwizkami zbudowanymi z czterech piercieni
pirolowych, poczonych za pomoc mostkw metinowych w makroukad zwany porfin.
Czsto tworz one kompleksy z jonami metali umiejscowionymi w centrum ich struktury.
Porfiryny pochaniaj wiato, dziki czemu posiadaj charakterystyczne widma absorpcyjne
zarwno w czci widzialnej, jak i nadfioletowej [1]. Najpopularniejszymi przedstawicielami
porfiryn s hemy oraz chlorofile [2]. Porfiryny z uwagi na swoj aktywno biologiczn,
znajduj zastosowanie m.in. w terapii przeciwnowotworowej, wykorzystujcej ich
waciwoci fotodynamiczne [3].

Cel pracy:
Celem pracy bya ocena potencjalnego wpywu wybranych porfiryn na rozwj zarodka
kurzego.
Materiay:
Zarodki kurze 13 dniowe, dostarczone z firmy IndykPol
Analizowane porfiryny:
kobalamina, chlorofilina, porfiryna elazowa i manganowa
Metody:
Zakaanie zarodkw kurzych do jamy omoczniowej:
Jaja przeznaczone do zakaania przewietlano, zaznaczano granic komory powietrznej oraz
pooenie zarodka. Po dezynfekcji i przewierceniu skorupki, przebijano bon skorupkow
nad komor powietrzn i wprowadzono badane porfiryny. Rozpuszczono je w pynie
fizjologicznym PBS zawierajcym jony wapnia i magnezu (stenia porfiryn 20 M) w iloci
okoo 200 l/jajo. Jaja umieszczono w inkubatorze na 48 h (37OC). Po tym czasie,
obserwowano efekt zakaenia badanymi zwizkami.
Wyniki:
Wszystkie stosowane porfiryny spowodoway zwikszenie rozmiaru zarodkw wpywajc w
odmienny sposb na stopie ich upierzenia i rozwoju (kobalamina bya pod tym wzgldem
najaktywniejsza). Poziom przekrwienia bon by rny w zalenoci od stosowanych porfiryn,
najwikszy w przypadku porfiryny elazowej.

1. ak I., Porfiryny i pochodne, Chemia medyczna, Katowice, 2001, 297-306
2. Zhang Li, The Secret Life of Heme in Regulating Diverse Biological Processes, Heme Biology, The
University of Texas at Dallas, USA, 2011. 1-6
3. Lukien ., Photodynamic therapy: mechanism of action and ways to improve the efficiency of treatment,
Medicina, 2003, 39(12): 1137-1150"
V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
36

Chlorofilina, a chemoprewencja

Maciej Frant, Aleksandra urek, Adrianna Dudek

Zakad Wirusologii i Immunologii, Uniwersytet Marii Curie-Skodowskiej, Lublin, Polska

Chlorofilina jest psyntetyczn pochodn chlorofilu. Od chlorofilu rni si
centralnym jonem metalu, ktrym jest jon miedzi zamiast magnezu. Chlorofilina
wykorzystywana jest midzy innymi jako dodatek do ywnoci (znana jako naturalny zielony
barwnik E141), w medycynie (przyspiesza gojenie ran), czy te w przemyle (wewntrzne
dezodorant wpywajcy na aktywno enzymw degradujcych biaka, hamujcy
powstawanie nieprzyjemnych zapachw) (1, 2).
Chlorofil i chlorofilina s zdolne do tworzenia mocnych kompleksw molekularnych z
niektrymi toksycznymi substancjami chemicznymi. Chlorofilina w odrnieniu od
chlorofilu, dobrze rozpuszcza si w wodzie. W zwizku z tym moe wiza si z naturalnymi
czynnikami mutagennymi takimi jak policykliczne wglowodory, benzopiren, dibenzopiren,
dziaajc, a tym samym dziaa chemoprewencyjnie. Chlorofilina wie czynniki kancerogenne
dwadziecia razy lepiej ni resweratol i tysice razy lepiej ni ksantyny (1, 2, 3).
W badaniach przesiewowych w grupie osb obarczonych wysokim ryzykiem
zachorowania na raka wtroby w populacji chiskiej (naraenie na aflatoksyny ze
spleniaych ziaren i rolin strczkowych), stwierdzono, e suplementacja chlorofiliny przed
posikami, prowadzi do istotnego obnizenia poziomu biomarkera (AFB1-N7-guanine)
uszkodzenia DNA wywoanego przez aflatoksyny w moczu. W zwizku z tym naukowcy
maj nadziej, e suplementacja ywnoci chlorofilin bdzie pomocna w zmniejszeniu
ryzyka zachorowania na raka wtroby w populacjach zagroonych spoyciem aflatoksyn (2).


1. Herring P., Cancer and Chlorophyllin, Oregons Agricultural Progress, 2002, Winter/Spring
2. Higton J., Chlorophyll and Chlorophyllin, The Linus Pauling Institute Micronutrient Information Center,
http://lpi.oregonstate.edu/infocenter/phytochemicals/chlorophylls/#
3. Keshava C., Divi R., Einem T., Richardson D., Leonard S., Keshava N., Poirier M., Weston A., Chlorophyllin
significantly reduces benzo[a]pyrene-DNA adduct formation and alters cytochrome P450 1A1 and 1B1
expression and EROD activity in normal human mammary epithelial cells, Enviromental and Molecular
Mutagenesis, 2009, 50(2): 134144







V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
37

Badanie trwaoci hydrochlorotiazydu w roztworach

Justyna Gaza, Anna Gumieniczek, Rafa Pietra, Kamil Larwa

Katedra i Zakad Chemii Lekw, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Celem podjtych bada bya ocena trwaoci hydrochlorotiazydu w roztworach
o rnym pH, w podwyszonej temperaturze oraz podczas ekspozycji na wiato UV-Vis.
Stresowane roztwory hydrochlorotiazydu oceniano ilociowo metod wysokosprawnej
chromatografii cieczowej HPLC, ktra umoliwia ocen zmian stenia badanego zwizku
obok powstajcych produktw rozkadu.

Zastosowano nastpujce parametry metody HPLC:
faza stacjonarna: kolumna LiChrospher z wypenieniem RP18 (125 x 4 mm, 5m)
faza ruchoma: bufor fosforanowy o pH 7,0-acetonitryl-0.05 mmol/l wodorosiarczan
cetylotrimetyloamoniowy (70:20:10, v/v/v)
szybko przepywu fazy ruchomej: 1,4 ml/min
detekcja UV przy dugoci fali: =265 nm
wzorzec wewntrzny: paracetamol.

Przeprowadzona walidacja wykazaa, e metoda jest:
selektywna dla badanego leku wobec produktw rozkadu oraz wzorca wewntrznego
liniowa w zakresie ste od 20 do 120 g/ml
precyzyjna
dokadna.

Badania kinetyczne przeprowadzono w roztworach o pH 4, 7 i 10, w dwch
temperaturach 40C i 80C. Badania te wykazay, e reakcje rozkadu hydrochlorotiazydu
w temperaturze 80C s reakcjami I-go rzdu. Najwiksz sta szybkoci oraz najmniejsz
trwao uzyskano w buforze fosforanowym o pH 7, gdzie wystpi ok. 40% rozkad leku
(w buforze boranowym ok. 30%, a w buforze octanowym ok. 15%).

Hydrochlorotiazyd w roztworach o rnym pH poddano take dziaaniu
promieniowania UV-Vis w 2 cyklach nawietlania: 3 dawki oraz 9 dawek wg ICH.
Stresowane prby oceniono ilociowo podan metod HPLC. Najmniejsz trwao uzyskano
po 9 dawkach ICH, gdzie wystpi ok. 60% rozkad leku."






V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
38

Modyfikacje powierzchni cewnikw doylnych z wykorzystaniem
substancji o waciwociach przeciwbakteryjnych ocena immobilizacji
z zastosowaniem metody ATR-FTIR i mikrobiologicznej aktywnoci

Agata Gadysz
1
, Dorota Kowalczuk
1
, Magorzata Miazga-Karska
2

1
Katedra i Zakad Chemii Lekw, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska
2
Katedra i Zakad Biochemii i Biotechnologii, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Tematyka prowadzonych bada dotyczy modyfikacji dostpnych na rynku cewnikw
wykonanych z poliuretanu celem immobilizacji na ich powierzchni substancji o dziaaniu
przeciwbakteryjnym. Z racji swoich waciwoci zwizkiem nanoszonym na powierzchni
wenflonu by mleczan etakrydyny (rodek przeciwbakteryjny, stosowany take w zakaeniach
pierwotniakowych i pasoytniczych). Modyfikacji powierzchni dokonywano poprzez wstpn
aktywacj cewnika (do modyfikacji uywano kwasu, bromu lub jodu) umoliwiajc
inkorporacj substancji aktywnej. Lek nanoszono drog inkubacji cewnika w roztworze
etakrydyny, bd poprzez jego odparowanie. Ocena wizania etakrydyny do powierzchni
cewnika zostaa dokonana z wykorzystaniem spektrometrii w podczerwieni FTIR. Aktywno
mikrobiologiczn otrzymanego cewnika ze zmodyfikowan matryc badano testem
zahamowania stref wzrostu zarwno dla bakterii Gram-ujemnych jak i Gram-dodatnich.
Wynikiem prowadzonych bada jest otrzymanie cewnika powleczonego etakrydyn, ktra
nadaje mu waciwoci przeciwbakteryjne wobec obu grup bakterii. Otrzymane wyniki
dowodz, i moliwe jest modyfikowanie prostymi metodami produktw powszechnie
uywanych w lecznictwie szpitalnym, w wyniku czego s one chronione przed
drobnoustrojami. Daje to szans na zmniejszenie odsetka zachorowa na zakaenia krwi
pochodzenia odcewnikowego u osb dugotrwale przyjmujcych terapi doyln.











V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
39

Wzmocnienie aktywnoci przeciwdepresyjnej pocze imipraminy
z cynkiem lub magnezem po podaniu doustnym w tecie wymuszonego
pywania u myszy

Karol Iwaniak, Magdalena Naleniak, Ewa Poleszak


Katedra i Zakad Farmacji Stosowanej, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Depresja jest jednym z najczciej wystpujcych zaburze afektywnych
wpywajcym na znaczne pogorszenie jakoci ycia. Leczenie zaburze depresyjnych jest
obecnie procesem dugotrwaym, nie zawsze skutecznym i obcionym ryzykiem powanych
dziaa niepodanych, dlatego tak wane jest cige poszukiwanie nowych lekw
przeciwdepresyjnych. W cigu ostatnich lat ukazao si wiele publikacji naukowych
wskazujcych na rol cynku i magnezu w powstawaniu zaburze depresyjnych oraz ich
leczeniu [1,2]. Przeprowadzone badania behawioralne wykazay przeciwdepresyjne dziaanie
obydwu biometali podanych dootrzewnowo w testach przeciwdepresyjnych, np. w tecie
wymuszonego pywania (Porsolta, FST). Test ten jest jednym z powszechnie stosowanych
testw behawioralnych przydatnym do przedklinicznej oceny substancji o potencjalnym
dziaaniu przeciwdepresyjnym [3].
Celem przeprowadzonego badania bya ocena wpywu jednoczesnego podawania
cynku (Zn) lub magnezu (Mg) z imipramin na aktywno przeciwdepresyjn w tecie
wymuszonego pywania po podaniu doustnym u myszy.
Dowiadczenia przeprowadzono na dorosych samcach myszy rasy Albino Swiss.
Wykazano, e zarwno cynk jak i magnez podane w dawkach niedziaajcych (odpowiednio
40 i 60 mg/kg m.c. przeliczonych na czyste jony) cznie z imipramin (take w niedziaajcej
dawce 60 mg/kg m.c.) skracaj czas bezruchu myszy, a uzyskane wyniki nie byy zwizane
ze wzrostem aktywnoci lokomotorycznej zwierzt. Analiz statystyczn wynikw wykonano
przy uyciu dwuczynnikowej analizy wariancji (two-way ANOVA) oraz testu Tukeya (post-
hoc). Wyniki uznano za istotne statystycznie dla p<0,05.
Na podstawie zebranych wynikw stwierdzono, e obydwa biometale nasilaj
dziaanie imipraminy w tecie Porsolta, po podaniu doustnym u myszy.

1. Siwek M. i wsp.., J. Affect. Disorders, 126, 447, 2010.
2. Poleszak E. i wsp., Pharmacol. Biochem. Behav., 81(3), 524, 2005.
3. Porsolt R.D., Bertin A., Jalfre M., Arch. Int. Pharmacodyn. Ther., 229, 327, 1977.









V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
40

Zioa chiskie - naturalne preparaty o silnych waciwociach biologicznych

Wioleta J esionek
1
, I rena Choma
1
, Barbara Majer-Dziedzic
2


1
Zakad Metod Chromatograficznych, Uniwersytet Marii Curie-Skodowskiej, Lublin, Polska
2
Zakad Mikrobiologii Weterynaryjnej, Uniwersytet Przyrodniczy, Lublin, Polska

Medycyna chiska od wiekw stosuje roliny w celach leczniczych. Wiele z nich
uywanych jest jako przyprawy do potraw bd spoywczych w postaci herbat czy naparw.
Chiskie zioa i roliny od wiekw s stosowane na wszelakie dolegliwoci i choroby:
przezibienia, choroby skrne, alergie, niepodno, ble reumatyczne, choroby organw
wewntrznych, ukadu oddechowego, krwiononego czy te nerwowego.
Szybko postpujca komercjalizacja wszystkiego co modne spowodowaa masowe
wprowadzenie na rynek europejski preparatw na bazie chiskich rolin leczniczych. Obecnie
mona je kupi przez Internet lub w najbliszym supermarkecie i rozpocz leczenie. Tylko
czy one faktycznie s skuteczne?
Testy aktywnoci biologicznej (bioassays) to przesiewowe lub pilociowe metody
oparte na pomiarze efektu pojawiajcego si w danym systemie biologicznym na skutek
dziaania badanych substancji. Testy biologiczne wykonywane s czsto w poszukiwaniu
substancji wywoujcej/wywoujcych dany efekt w skomplikowanej mieszaninie.
Biologiczne testy przesiewowe wykorzystuj przeciwbakteryjne, przeciwutleniajce,
przeciwgrzybicze czy te enzymatyczne waciwoci badanych substancji.
Wybrane zioa chiskie zostay przebadane pod ktem ich waciwoci
przeciwutleniajcych stosujc metod TLC-DB (Thin-Layer Chromatography Direct
Bioautography). Zastosowano test z uyciem stabilnego wolnego rodnika DPPH (2,2-diphenyl-1-
picrylhydrazyl). W tym celu pytk TLC z rozseparowanymi prbkami spryskano 0,2 %
roztworem DPPH w metanolu a nastpnie obserwowano reakcj barwn zwizan
z wychwytywaniem rodnika przez substancje wykazujce waciwoci przeciwutleniajce.
Zwizki bdce przeciwutleniaczami widoczne byy w postaci tych plamek na fioletowym tle.
W celu detekcji przeciwbakteryjnych waciwoci badanych zi zastosowano
mikrobiologiczn metod krkow. Badania zostay wykonane wobec nastpujcych
patogennych szczepw bakterii: S. aureus, K. pneumoniae, E. coli, L. monocytogenes,
S. typhimurium.
Uzyskane wyniki dowodz i przebadane ekstrakty s bogatym rdem naturalnych
zwizkw biologicznie czynnych.






V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
41

Przechytrzy bakterie

Barbara Kapro
1
, Tomasz Plech
1
, Monika Wujec
1
,
Urszula Kosikowska
2
, Anna Malm
2


1
Katedra i Zakad Chemii Organicznej, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska
2
Katedra i Zakad Mikrobiologii Farmaceutycznej z Pracowni Diagnostyki Mikrobiologicznej,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Niewaciwe stosowanie, jak rwnie naduywanie preparatw przeciwbakteryjnych
w rnych gaziach medycyny, w rolnictwie oraz przemyle przyczynio si do pojawienia
i rozprzestrzenienia opornych drobnoustrojw dysponujcych rnymi mechanizmami
lekoopornoci. W Programie Unii Europejskiej w dziedzinie zdrowia publicznego na lata
2003 - 2008 lekooporno znalaza si wrd czterech zagadnie priorytetowych (obok grypy,
zakae wirusem HIV oraz grulicy). Rwnie wiatowa Organizacja Zdrowia (WHO)
uznaa lekooporno drobnoustrojw jako jedno z gwnych obcie i jednoczenie
globalnych zagroe dla zdrowia publicznego. W odpowiedzi na zagroenie narastajc
lekoopornoci, jednym z kierunkw dziaa prowadzcych do jej ograniczenia jest
poszukiwanie nowych substancji chemicznych o duym potencjale przeciwbakteryjnym,
dziaajcych na znane cele molekularne. czc w jednej czsteczce fragment
cyprofloksacyny oraz dipodstawionego 1,2,4-triazolo-3-tionu uzyskalimy szereg nowych
pochodnych, ktrych aktywno w stosunku do szczepw bakterii Gram-dodatnich oraz
Gram-ujemnych znaczco przewyszaa aktywno macierzystego fluorochinolonu.
Jednoczenie fakt, i zsyntetyzowane pochodne nie wykazyway silniejszego od
cyprofloksacyny powinowactwa do bakteryjnych topoizomeraz (enzymw stanowicych cel
molekularny fluorochinolonw) nasuwa przypuszczenie, e zwikszona aktywno
bakteriobjcza jest wynikiem:
aktywacji dodatkowego, poza inhibicj topoizomeraz, mechanizmu molekularnego,
silniejszego przenikania do wntrza komrki bakteryjnej,
zdolnoci do unikania bakteryjnych mechanizmw warunkujcych lekooporno.









V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
42

Komrki macierzyste przyszo i nadzieja

Karolina Knap-Czop
1
, Marcin Czop
2
, Agnieszka Wojcieszek
2
, Mateusz Wiliski
2
,
Alicja Niedojado
2
, Piotr Chomik
2
, Magorzata Filas
2
, J anusz Kocki
2
,
Barbara Madej-Czerwonka
1

1
Katedra i Zakad Anatomii Prawidowej Czowieka,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska
2
Zakad Genetyki Klinicznej, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Komrki macierzyste, czy tez komrki pnia, s samoodnawialne i niemiertelne. Maj
zdolno regenerowania uszkodzonych narzdw i organw. Mog przeksztaca si w inne
komrki i tkanki organizmu w odpowiednim mikrorodowisku.
Komrki macierzyste mona zakwalifikowa do trzech grup: embrionalne komrki
wewntrznej masy blastocysty; podowe oyskowe, pynu owodniowego, krwi
ppowinowej, tkankowo specyficzne (krwi podowej, szpiku kostnego, wtroby); dorose
szpiku kostnego, tkanki tuszczowej, tkankowo specyficzne (nerwowe, miniowe).
Najwikszy potencja i moliwoci zastosowania maj komrki embrionalne. Komrki
dorosego czowieka s rwnie obiecujcym narzdziem terapii komrkowej, dodatkowo nie
dostarczaj problemw etycznych czy te tworzenia potworniakw.
Moliwoci zastosowania klinicznego komrek macierzystych s rnorodne,
szczeglnie w medycynie regenaracyjnej. Transplantacja komrek macierzystych staje si
now form terapii komrkowej. Komrki macierzyste mona w hodowli In vitro stymulowa
do rnicowania w tkanki, np. chrzestn, kostn, nerwow i in. Komrki transformowane w
kardiomiocyty wpywaj regeneracyjnie na misie sercowy. Komrki macierzyste podane do
uszkodzonej tkanki wspomagaj procesy naprawcze koci i chrzstki. Transplantacja
komrek macierzystych wykorzystywana jest rwnie w okulistyce w odtwarzaniu
uszkodzonego nabonka rogwki. Ma to due znaczenie w terapii chorb chronicznych,
degeneracyjnych, produkcji sztucznych narzdw czy rekonstrukcji organw po wypadkach.
Pokada si du nadziej w wykorzystaniu komrek macierzystych w leczeniu chorb
dotd nieuleczalnych: chorb wtroby, choroby Parkinsona, choroby Alzheimera,
zwyrodnienia siatkwki, cukrzycy, stwardnienia rozsianego, cikiego uszkodzenia rdzenia
krgowego i innych.







V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
43

Ocena zmian cytomorfologicznych zachodzcych w komrkach
prawidowych i nowotworowych po dziaaniu pynu celomatycznego
pobranego od ddownic Dendrobaena veneta

Przemysaw Koodziej
1
, Marta Fioka
2
, J olanta Rzymowska
1
,
Monika Huas-Stasiak
3
, Sylwia Bilska
4
, Ewa Hordyjewska
4
, Beata Kliszcz
4
,
J erzy Wydrych
3

1
Katedra i Zakad Biologii z Genetyk, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska
2
Zakad Immunologii, Instytut Biologii i Biochemii,
Uniwersytet Marii Curie-Skodowskiej, Lublin, Polska
3
Zakad Anatomii Porwnawczej i Antropologii, Instytut Biologii i Biochemii,
Uniwersytet Marii Curie-Skodowskiej, Lublin, Polska
4
Studenckie Koo Naukowe Biotechnologw Mikron, Instytut Biologii i Biochemii, Uniwersytet
Marii Curie-Skodowskiej, Lublin, Polska

Choroby nowotworowe stanowi powany problem zdrowotny, dlatego istnieje
potrzeba wykrywania i opracowania nowych substancji w celu skutecznego leczenia tych
chorb. Ju od wiekw w medycynie Chiskiej i Japoskiej ddownice wykorzystywane
s do leczenia wielu chorb. Obecnie bezkrgowce te stosowane s m.in. w postaci proszkw,
wywarw i koncentratw pynw z jamy ciaa. Badania nad wpywem substancji biologicznie
czynnych zawartych w pynie celomatycznym, biorcych udzia w procesie mierci komrek
mog mie bardzo istotne znaczenie w zwalczaniu nowotworw.
Celem naszego dowiadczenia bya ocena zmian cytomorfologicznych zachodzcych
w komrkach prawidowych i nowotworowych po dziaaniu pynu celomatycznego
pobranego od ddownic D. veneta. Pyn celomatyczny pozyskano przez agodne pobudzanie
elektryczne (4,5V) ddownic. Dodatkowo przy pomocy odpowiednich filtrw, z pynu
celomatycznego wyodrbniono trzy frakcje < 30 kDa, 30-50 kDa, >50 kD. Do bada
wykorzystano cig lini komrek prawidowych L929 i komrek nowotworowych HeLa.
Komrki hodowano w standardowych warunkach - 37C, 5% CO2 i 90% wilgotno. Zmiany
cytomorfologiczne zachodzce w komrkach po dziaaniu pynu celomatycznego i jego
frakcji identyfikowano przy pomocy mikroskopu fluorescyjnego Zeiss LSM5 Pascal oraz
skaningowego Vega Tescan. Apoptoz i nekroz komrek badano przy uyciu mieszaniny
barwnikw fluorescencyjnych Hoechst 33342 i jodku propidyny (Sigma). Jdra komrek
ulegajcych apoptozie wykazyway niebiesk fluorescencj, natomiast nekrotycznych
czerwon fluorescencj. W inkubowanych z pynem celomatycznym hodowlach
zaobserwowano komrki apoptotyczne i nekrotyczne. Po dodaniu trzech badanych frakcji do
linii komrkowych stwierdzono zwikszajc si liczb komrek apoptotycznych
i nekrotycznych wraz ze wzrostem masy czsteczkowej tych zwizkw. Inkubacja hodowli
z frakcj >50 kDa spowodowaa mier wszystkich komrek na drodze nekrozy. Wyniki
naszych bada mog przyczyni si do zastosowania substancji bioaktywnych pynu
celomatycznego w niszczeniu komrek nowotworowych. Konieczne s jednak dalsze badania
w celu wyjanienia dokadnych mechanizmw poprzez ktre dziaa badana substancja.

V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
44

Dziaania profilaktyczne i lecznicze podejmowane w dolegliwociach
blowych staww kolanowych przez osoby uprawiajce turystyk grsk

Magdalena Naleniak
1
, Karol I waniak
1
, Andrzej Polski
1
,
Karolina Sobtka-Polska
2
, Ewa Poleszak
1

1
Katedra i Zakad Farmacji Stosowanej, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska
2
Katedra i Zakad Chemii Organicznej, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Powszechnie znany jest pozytywny wpyw aktywnoci ruchowej na zdrowie
czowieka. Z badania przeprowadzonego w 2013 r. przez CBOS wynika, e turystyka piesza
jest jedn z czciej wybieranych aktywnoci ruchowych [1]. Najczciej wskazywan
motywacj do uprawiania pieszej turystyki bya przyjemno, ktra jednak moe zosta
znacznie zmniejszona przez dolegliwoci blowe staww.
Celem badania byo okrelenie powszechnoci wystpowania dolegliwoci blowych
staww kolanowych u osb uprawiajcych turystyk grsk oraz przedstawienie dziaa
profilaktycznych i leczniczych podejmowanych przez t grup.
Przeprowadzono anonimowe badanie ankietowe na grupie 109 osb uprawiajcych
turystyk grsk. Wrd badanych osb a 84% respondentw deklaruje wystpowanie blu
kolan, ktry u wikszoci pojawia si w trakcie pobytu w grach. Uywanie kijw
trekkingowych wydaje si by istotnym czynnikiem odciajcym stawy kolanowe [2].
Poowa osb z dolegliwociami blowymi kolan korzysta z ich pomocy w trakcie grskiej
wdrwki. Jedynie 11% badanych kiedykolwiek stosowao doustne rodki przeciwblowe.
Zdecydowanie wicej osb (32%) stosowao preparaty wzmacniajce stawy, w wikszoci na
bazie glukozaminy i kolagenu. Natomiast najczciej stosowanym rodkiem byy rnego
rodzaju maci (57%). Wikszo badanych wybierajc preparaty na dolegliwoci staww
sugeruje si porad lekarza lub farmaceuty oraz opiera si na opinii znajomych lub rodziny.
Jedynie 21% osb z dolegliwociami blowymi kolan szuka pomocy w gabinetach
specjalistw. Wikszo badanych zwraca uwag na odcianie kolan w trakcie grskiej
wdrwki oraz na stosowanie preparatw wspomagajcych funkcjonowanie staww.
W przypadku pojawienia si blu kolan najchtniej wybierane s rnego rodzaju maci,
a zdecydowanie najrzadziej stosowane s doustne leki przeciwblowe. Znaczna cz
respondentw w wyborze lekw korzysta z porad fachowca, jednak stosunkowo niewielu
odwiedza lekarzy specjalistw.

1. Aktywno fizyczna Polakw. Komunikat nr 4887. CBOS. 2013.
2. Uywanie kijkw trekkingowych w grach. Stanowisko komisji medycznej federacji zwizkw
alpinistycznych. Cz 11. UIAA MEDICAL. 2008.




V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
45

Zastosowanie mikro 2D-TLC do okrelenia tosamoci (fingerprint)
rnych gatunkw Mentha sp.

Magorzata A. Niemiec, Mirosaw A. Hawry, Monika Waksmundzka-Hajnos

Zakad Chemii Nieorganicznej, Katedra Chemii, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Dwukierunkowa mikrochromatografia cienkowarstwowa (2D-mTLC)
z wykorzystaniem cyjanopropylowej fazy stacjonarnej zostaa przeprowadzona do okrelenia
tosamoci (fingerprints) jedenastu gatunkw z rodzaju Mentha sp. i dwch gotowych
zioowych preparatw farmaceutycznych.
Mieszaniny niewodnych rozpuszczalnikw zostay zastosowane w ukadach faz
normalnych natomiast mieszaniny acetonitrylu z wod oraz metanolu z wod wykorzystano
w ukadach faz odwrconych.
Optymalizacj systemw jednokierunkowych przeprowadzono przez okrelenie
zalenoci RF vs skad fazy ruchomej dla wzorcowych substancji wystpujcych w rnych
gatunkach Mentha sp. Najbardziej selektywne rozpuszczalniki zostay wybrane w celu
optymalizacji ortogonalnych ukadw dwukierunkowych poprzez wykrelenie zalenoci RF
w systemach NP vs RF w ukadach RP przez ich korelacj.
Zoptymalizowane systemy zostay zastosowane w celu rozdzielenia zwizkw
fenolowych i okrelenia tosamoci badanych surowcw rolinnych.
Proces chromatograficzny przeprowadzono w skali mikro z zastosowaniem pytek
o wymiarach 5 cm 5 cm oraz niewielkich objtoci eluentw. Na kad pytk dozowano 5
l ekstraktw rolinnych.
Pytki rozwijane byy w komorach poziomych typu DS-II, suszone na powietrzu,
a nastpnie obserwowane pod lamp UV przy dugociach fali 254 nm i 366 nm.
Dokumentacj przeprowadzono przez ich fotografowanie. Nastpnie przeprowadzono ich
derywatyzacj przy pomocy odczynnika Naturstoffa (5% glikol polietylenowy 4000 + 1%
metanolowy roztwr 2,2-(difenyloboroksy)-etyloaminy) w celu wizualizacji zwizkw
fenolowych.
Dowiadczenia daj moliwo okrelenia tzw. fingerprintw badanych ekstraktw
Mentha sp. Wyniki mog by wykorzystane do kontroli jakoci materiau rolinnego.







V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
46

Optymalizacja metody ekstrakcji polisacharydw z Armillaria mellea

Natalia Nowacka, Ewelina Grzesiuk, Renata Nowak

Katedra i Zakad Botaniki Farmaceutycznej,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Polisacharydy s strukturalnymi skadnikami ciany komrkowej grzybw. Wyrnia
si dwa gwne typy polisacharydw: wkienkowe polimery chitynowe lub celulozowe,
a take wypeniajce wolne przestrzenie - i -glukany oraz glikoproteiny. Polisacharydy
grzybowe charakteryzuj si licznymi waciwociami prozdrowotnymi, do ktrych mona
zaliczy dziaanie przeciwnowotworowe, cytotoksyczne, immunoregulacyjne,
antyoksydacyjne, hipolipidemiczne [1]. Dlatego te celem pracy bya optymalizacja ekstrakcji
zwizkw polisacharydowych z opieki miodowej, ktra jest powszechnie wystpujcym
w Polsce grzybem jadalnym.
W celu dobrania optymalnej metody pozyskiwania polisacharydw przeprowadzono
szereg ekstrakcji wodnych sprawdzajc stosunek iloci ekstrahenta do surowca (1:25, 1:50,
1:100, 1:200), temperatur (30, 50, 80, 100C) oraz znaczenie czasu ekstrakcji. Zbadano
rwnie wpyw ekstrakcji wstpnej za pomoc rnych ekstahentw (etanol, metanol, heksan,
chloroform) na ilo otrzymanych polisacharydw oraz ich czysto po strceniu z roztworu.
Zawarto cukrw w poszczeglnych ekstraktach analizowano spektrofotometrycznie wedug
metody Dubois [2].
Przeprowadzone badania pozwoliy na ustalenie optymalnej metody pozyskiwania
zwizkw polisacharydowych, ktre zostan nastpnie oczyszczone i rozdzielone z pomoc
technik chromatograficznych.

1. Zhang M. i wsp. Trends Food Sci Technol, 18, 2007, 4-19.
2. Dubois M. i wsp. Anal Chem, 28, 1956, 350-356.










V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
47

Histochemiczna lokalizacja Cd, Zn oraz Pb w rolinach Echium vulgare (L.)

Magorzata Palusiska, Sylwia Nicpo, Sawomir Dresler, Magorzata Wjcik,
Agnieszka Hanaka, Anna Tukiendrof

Zakad Fizjologii Rolin, Instytut Biologii i Biochemii,
Uniwersytet Marii Curie-Skodowskiej, Lublin, Polska

Rolinno spontanicznie zasiedlajca tereny zanieczyszczone metalami cikimi,
czsto charakteryzuje si wyjtkowymi cechami przystosowujcymi j do skrajnych
warunkw rodowiska, takich jak: wysoka zawarto metali cikich w podou, susza, due
nasonecznienie. Do mechanizmw, ograniczajcych toksyczno metali cikich w rolinach,
zalicza si, m.in. ich sekwestracj w organellach czy organach o niskiej aktywnoci
metabolicznej, takich jak wakuola, ciana komrkowa czy trichomy.

Celem prezentowanych bada jest okrelenie rozmieszczenia metali cikich (Cd, Zn,
Pb) w trzech populacjach mijowca zwyczajnego (Echium vulgare L.) dwch z obszarw
skadowisk metalononych oraz jednej z obszaru niezanieczyszczonego metalami cikimi
(Dresler et al. 2014). Roliny uprawiane byy w kontrolowanych warunkach temperatury
i fotoperiodu, w kulturach hydroponicznych z dodatkiem Cd (50 M), Zn (500 M), Pb (30
M) lub bez dodatku metali. Lokalizacj metali w komrkach lici mijowca okrelano
histochemicznie z uyciem ditizonu (difenylotiokarbazyd) zwizku chelatowego,
tworzcego barwne kompleksy z wieloma pierwiastkami ladowymi. Stwierdzono, e
gwnym miejscem lokalizacji Pb oraz Cd byy licznie wyksztacone przez komrki skrki
trichomy. Dodatkowo, due nagromadzenie oowiu obserwowano w komrkach
przylegajcych do trichomw. Natomiast du zawarto Zn wykrywano w wewntrznych,
zgrubiaych cianach komrkowych aparatw szparkowych.

Dresler S. Bednarek W. Wjcik M. 2014. Effect of cadmium on selected physiological and morphological
parameters in metallicolous and non-metallicolous populations of Echium vulgare L. Ecotox. Environ. Safe. 104:
332-338.








V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
48

Zastosowanie analizy Ramana do oceny jakoci pokrycia polimerami
elu krzemionkowego

Andrzej Pawlikowski
1
, Piotr Drczkowski
2
, I reneusz Sowa
1
, J olanta Tylus
1
,
Magdalena Wjciak-Kosior
1


1
Katedra i Zakad Chemii Analitycznej, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska
2
Katedra i Zakad Syntezy i Technologii Chemicznej rodkw Leczniczych,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Spektroskopia Ramana jest szeroko stosowan metod w jakociowej i ilociowej
analizie cia staych, cieczy i gazw. Do gwnych zalet spektroskopii Ramana nale:
dokadno wynikw, dua liczba otrzymywanych informacji przy stosunkowo niskich
kosztach oraz moliwo zbadania prbki bez wczeniejszego przygotowania. Ponadto jest to
metoda niedestrukcyjna i pozwala na wykorzystanie badanej prbki w kolejnych analizach.
Opiera si ona na pomiarze nieelastycznego rozpraszania fotonw przez analizowany materia
tzw. rozproszenia Ramana. Poczenie spektroskopii ramanowskiej z technikami mikroskopii
konfokalnej umoliwia rejestracj widma bardzo niewielkiego, precyzyjnie wybranego
fragmentu powierzchni prbki. Mikroskopia ta doskonale sprawdza si jako nieinwazyjna
metoda analityczna, stosowana powszechnie w archeologii, analizie dzie sztuki czy
diagnostyce medycznej. W niniejszej pracy przedstawiono aplikacje tej techniki jako metody
oceny jakoci polimerowego pokrycia ziaren zoa chromatograficznego. Nowo wytwarzane
fazy stacjonarne bazujce na polimerach takich jak np. polianilina z sukcesem stosowane s
jako adsorbenty w chemii analitycznej. Fazy takie charakteryzuj si du stabilnoci - s
bardziej odporne na dziaanie roztworw o wysokich i niskich wartociach pH. Modyfikacja
faz stacjonarnych polimerami oraz ich charakterystyka wymaga stosowania rnych metod
badawczych. W mojej pracy spektrometria Ramana zostaa wykorzystana do oceny jakoci
pokrycia elu krzemionkowego polianilin- polimerem o bardzo ciekawych waciwociach.
Now faz stacjonarn otrzymano w wyniku zainicjowania polimeryzacji chlorowodorku
aniliny poczonego z jednoczesnym osadzaniem jej na powierzchni elu krzemionkowego.
Po odpowiednim oczyszczeniu i przygotowaniu fazy stacjonarnej wykonano analiz widma
Ramana elu krzemionkowego niemodyfikowanego oraz pokrytego filmem z polianiliny.

[1] Sowa I, Wjciak-Kosior M, Drczkowski P, Strzemski M, Kocjan R. Anal Chim Acta 2013;787:260-66.






V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
49

Gry wideo, a aktywno fizyczna wrd studentw lubelskich uczelni

Andrzej Polski
1
, Karol I waniak
1
, Magdalena Naleniak
1
,
Karolina Sobtka-Polska
2
, Ewa Poleszak
1

1
Katedra i Zakad Farmacji Stosowanej, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska
2
Katedra i Zakad Chemii Organicznej,

Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Niemale mieszkacw Unii Europejskiej w modym wieku jest aktywna fizycznie
[1]. Jednake coraz czciej zamiast aktywnej formy wypoczynku, szczeglnie na wieym
powietrzu, modzi ludzie wybieraj gry wideo. Badania pokazuj, e dusze uytkowanie
komputera moe powodowa m.in. dolegliwoci szkieletowo-miniowe, problemy ze
wzrokiem [2, 3].
Celem pracy byo zbadanie zalenoci pomidzy aktywnoci fizyczn, a grami video.
Zbadano rwnie korelacj pomidzy wyej wymienionymi a pci, mas (za pomoc
wspczynnika BMI) oraz dolegliwociami charakterystycznymi dla graczy. Przeprowadzono
ankiet na grupie badawczej 138 studentw lubelskich uczelni.
Stwierdzono wysoki poziom aktywnoci fizycznej. Spord tych osb mniej aktywne
s kobiety, jednak, jeeli ju wicz, to robi to czciej ni mczyni. Kobiety preferuj
aerobik/fitness, jazd na rowerze oraz spacery, mczyni natomiast na pierwszym miejscu
stawiaj gry zespoowe, zajcia na siowni, i podobnie jak pe przeciwna jazd na rowerze.
Co ciekawe, wikszo osb uprawia sport w celu poprawy sylwetki oraz dla relaksu, a nie
dla zdrowia. Najprawdopodobniej wie si to z tym, e modym ludziom rzadziej dokuczaj
dolegliwoci wynikajce z braku ruchu. Zauwaono wyran korelacj pomidzy pci
ankietowanych a graniem w gry. Wrd respondentw obu pci 34% osb gra w gry video,
wrd kobiet jest tylko 16% graczy, a wrd mczyzn a 70%. Jednoczenie ponad poowa
graczy preferuje gry ruchowe na konsolach. Nie stwierdzono natomiast zalenoci pomidzy
graniem w gry, a aktywnoci fizyczn. Potwierdzia si hipoteza, e wrd graczy wikszo
stanowi mczyni. Przewaajca liczba osb grajcych w gry to osoby aktywne fizycznie.
Pomimo tego osoby te czciej maj nadwag lub otyo w porwnaniu do osb
niegrajcych. Co ciekawe bl plecw czy problemy ze wzrokiem wystpuj rzadziej u graczy
ni w pozostaej grupie osb.

1. Sport i aktywno fizyczna. Badanie specjalne Eurobarometru nr 3.334 /Seria badawcza 72.3 TNS Opinion &
Social 2010.
2. Lorusso A. i wsp. Med. Lav. 100(1), 29, 2009.
3. Kanitkar K. i wsp. Review of Ophthalmology E-Newsletter. 12, 4, 2005.







V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
50

Wbudowywanie kompleksw biakowych do supercienkich
jednoczsteczkowych warstw lipidowych

Michal Puzio, Rafal Luchowski, Wojciech Grudzinski, Wieslaw I . Gruszecki

Zakad Biofizyki, Instytut Fizyki, Uniwersytet Marii Curie Skodowskiej, Lublin, Polska

Metoda Langmuira-Blodgett umoliwia uzyskanie uporzdkowanych ultracienkich
warstw o gruboci ok. 10-20. Dziki niej istnieje moliwo kontroli gruboci warstwy oraz
precyzyjnego okrelenia skadu zbudowanego filmu. Technika ta znalaza zastosowanie
w badaniach wielu zwizkw m. in. : substancji aktywnych biologicznie oraz lekw.
Przebadano monomolekularne filmy zbudowane z galaktolipidw domieszkowane
kompleksami barwnikowo-biakowymi. Uyto kompleksu barwnikowo-biakowego LHCII,
ktry jest gwnym kompleksem odpowiedzialnym za gromadzenie energii wietlnej
i regulacj procesu fotosyntezy u rolin wyszych.
Do teflonowej wanienki wypenionej ultra czyst wod naniesiono si na granic faz
woda-powietrze substancj amfifilow (lipidy) znajdujc si w lotnym rozpuszczalniku
(heksan). Po odparowaniu rozpuszczalnika, na powierzchni wody pozostaje monowarstwa
skadajce si wycznie z wkraplanej substancji. Nastpnie dziki przesuwaniu teflonowych
barierek monowarstw komresuj si. Zmiany cinienia powierzchniowego spronych
czsteczek rejestrowane s przez komputer w postaci izotermy sprania przedstawiajcej
zaleno cinienia powierzchniowego w funkcji powierzchni przypadajcej na jedn
czsteczk w budowanej monowarstwie. Pojedyncze warstwy zawierajce wbudowane
LHCII osadzono na podoach staych.
Podoe wsuwane jest w kierunku prostopadym do powierzchni wody przy odpowiednio
ustalonym cinieniu powierzchniowym. Tak przygotowany materia zosta przebadany
za pomoc mikroskopu si atomowych (AFM) oraz spektroskopii czasw ycia (FLIM).











V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
51

Oznaczanie pozostaoci pestycydw w oliwie z oliwek i innych olejach
jadalnych metod wysokosprawnej chromatografii cieczowej poczonej
z detektorem z matryc fotodiodow (HPLC-DAD)

Tomasz Rejczak, Tomasz Tuzimski

Zakad Chemii Fizycznej Katedry Chemii, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Oliwa z oliwek jest wartociowym skadnikiem diety. Ze wzgldu na zawarty w niej
kwas oleinowy i inne monoenowe kwasy tuszczowe moe peni rol ochronn
w profilaktyce miadycy, chorb serca, cukrzycy i nadcinienia ttniczego. Dlatego te
oliwa z oliwek stanowi doskona alternatyw dla tuszczw zwierzcych. Szybki wzrost
produkcji rolnej, jaki nastpi w ostatnich dekadach w wyniku wdroenia nowych technologii
i stosowania chemicznych rodkw ochrony rolin moe stwarza istotne zagroenia dla
zdrowia konsumentw. Pozostaoci stosowanych w agronomii pestycydw mog kumulowa
si w podach rolnych oraz przetworzonych produktach spoywczych pochodzenia
rolinnego, rwnie w oliwie z oliwek i innych olejach. Analiza pozostaoci pestycydw
w prbach naturalnych o wysokiej zawartoci tuszczw stanowi w dalszym cigu wyzwanie
dla analitykw. Zoono tuszczowych matryc w duym stopniu utrudnia prawidow
identyfikacj i analiz ilociow pozostaoci pestycydw. Dodatkowo, prbki zawierajce
tuszczowe interferenty mog mie niekorzystny wpyw na detekcj waciwych analitw.
Celem pracy byo opracowanie nowatorskiej metodyki pozwalajcej identyfikowa
i oznacza ilociowo pestycydy w prbkach oliwy z oliwek i innych olejw jadalnych.
Proponowana metodyka SPE/QuEChERS do ekstrakcji analitw z matryc o wysokiej
zawartoci tuszczw czy w sobie zalety stosunkowo nowej i cigle rozwijajcej si techniki
QuEChERS oraz tradycyjnej metody SPE i moe by stosowana do przygotowania prbek
i ich analizy metod chromatografii cieczowej z detekcj z matryc fotodiodow (HPLC-
DAD). Jako jedni z pierwszych proponujemy zastosowanie sorbentu na bazie tlenku cyrkonu
(Z-Sep) do usuwania interferentw matrycy z prbek oliwy z oliwek i oleju z pestek
winogron. Zoptymalizowana i walidowana procedura RP-HPLC-DAD posuya do oceny
opracowanej metodyki do ekstrakcji pestycydw. Uzyskano zadowalajce, w przedziale 60-
130%, odzyski badanych analitw z prbek fortyfikowanych w zakresie od 75 do 1000 ng/g
surowca. Przeprowadzono rwnie analiz produktw spoywczych (oliwy z oliwek i oleju
z pestek winogron) pochodzcych z Woch i Hiszpanii.






V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
52

Optymalizacja ukadu rozpuszczalnikw w wysokosprawnej
chromatografii przeciwprdowej alkaloidw gatunku
Narcissus jonquilla var. baby moon

Natalia Smyrska, Tomasz Mroczek

Katedra i Zakad Farmakognozji z Pracowni Rolin Leczniczych,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Analizie poddano najtrudniejszy etap izolacji alkaloidw Amaryllidaceae
wystpujcych w bulwach gatunku Narcissus var Baby Moon metod wysokosprawnej
chromatografii przeciwprdowej (HPCCC). Przeprowadzone badania pokazuj jak wany jest
etap doboru odpowiedniego ukadu rozpuszczalnikw w metodzie HPCCC i w jaki sposb
wpywa on na uzyskane wyniki analizy. W badaniu sprawdzono 21 ukadw
rozpuszczalnikw pod ktem ich przydatnoci w izolacji alkaloidw Amaryllidaceae technik
HPCCC. Za najtrafniejszy przyjto ukad, ktrego warto wspczynnika podziau mieci
si w granicy 0.5- 2.0 a jego warto optymalna jest rwna 1. Do wyznaczenia wartoci
wspczynnikw podziau wykorzystano analiz metod wysokosprawnej chromatografii
cieczowej ze spektrometri mas (HPLC/DAD/ESI-TOF-MS). Po analizie uzyskanych
wynikw najbardziej uniwersalnym okaza si ukad: butanol-woda- 99.5% kwas octowy
(4:5:1) odpowiedni do izolacji alkaloidw typu: likoryny, krininy, hemantaminy,
angustaminy, galantaminy, likoraminy i bikoloryny. Do izolacji poszczeglnych alkaloidw
optymalne s ukady: heptan-octan etylu-metanol-woda (0.4:1.6:0.4:1.6) oraz butanol-woda-
99.5% kwas octowy (4:5:1) dla hemantaminy, heptan-octan etylu-metanol-woda (1:1:1:1) dla
tazetyny. Dla galantaminy, krininy i bikoloryny ukad: butanol-n-heksan-acetonitryl-
woda+0.3% kwas solny (8:2:5:13). Ukady optymalne do separacji likoreniny: heptan-octan
etylu-metanol-woda (3 ukady), a dla galantaminy ukad octan etylu-butanol-woda (0.4:1.6:2)
oraz ukad heptan-octan etylu-metanol-woda (0.4:1.6:0.4:1.6). Do selektywnej izolacji
galantaminy najlepszy okaza si ukad faz: chloroform-metanol-woda+0.03M kwas solny
(4:1.5:2) oraz ukad eter diizopropylowy +trietyloamina (20mM)- woda + kwas solny (1mM)
(2:2). Sprawdzane ukady nie nadaj si do izolacji alkaloidw typu: trisferydyny. Wyniki
potwierdzaj uniwersalno i skuteczno techniki HPCCC jako narzdzia do izolacji
zwizkw aktywnych pochodzenia rolinnego. Metody dajcej moliwo wpywania na
wynik separacji pod ktem jednego lub grupy zwizkw i uzyskania jak najwikszej
wydajnoci analizy nawet wtedy gdy nie mona zastosowa tradycyjnych metod
chromatograficznych.





V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
53

Ocena poziomu tolerancji rolin Daucus carota z had galmanowych
na wybrane metale cikie

Grzegorz Stanisawski, Magorzata Wjcik, Sawomir Dresler

Zakad Fizjologii Rolin, Instytut Biologii i Biochemii,
Uniwersytet Marii Curie-Skodowskej, Lublin, Polska

Wysoka zawarto metali cikich w podoach skadowisk odpadw metalononych,
jest czynnikiem ograniczajcym wzrost rolin. Mimo niekorzystnych warunkw
siedliskowych, hady oowiowo-cynkowe w poudniowej Polsce zasiedlane s spontanicznie
przez gatunki charakterystyczne dla zbiorowisk rolinnoci galmanowej. Jednym z gatunkw,
licznie wystpujcych na hadach w regionie lsko-krakowskim, jest marchew zwyczajna
(Daucus carota L.).
Celem bada bya ocena tolerancji na Pb, Cd i Zn populacji rolin Daucus carota
z had galmanowych w Piekarach lskich (odpady pohutnicze), Brzezinach lskich
i Bolesawiu k. Olkusza (odpady z wydobycia rud Zn-Pb). Populacje referencyjne stanowiy
roliny D. carota z gleb niezanieczyszczonych w okolicach Kazimierza Dolnego nad Wis
i Skowa na Pojezierzu czysko-Wodawskim. Badania parametrw wzrostu i wybranych
wskanikw fizjologicznych przeprowadzano na rolinach uzyskanych z nasion populacji
hadowych i referencyjnych, uprawianych hydroponicznie w obecnoci wybranych ste
metali w poywce.
W wyniku bada stwierdzono, e korzenie rolin populacji referencyjnych wykazuj
wiksz wraliwo na Pb, Cd i Zn, w porwnaniu do korzeni rolin populacji hadowych.
Najwikszy wpyw na wzrost i ywotno korzeni wszystkich badanych populacji,
obserwowano w obecnoci zastosowanych ste oowiu i cynku. Najwiksz tolerancj na
badane metale wykazyway korzenie rolin populacji z hady w Bolesawiu. Natomiast ocena
tolerancji rolin na podstawie wskanika EC100 wykazaa najwiksz tolerancj na wysokie
stenia kadmu i cynku u rolin odpowiednio z hady w Brzezinach lskich i Piekarach
lskich. Zawarto barwnikw fotosyntetycznych, jako fizjologicznych wskanikw stresu,
w liciach rolin referencyjnych i hadowych, nie rnia si istotnie. Najwikszy spadek
zawartoci chlorofilu i karotenoidw wykazano w rolinach uprawianych w obecnoci cynku.
Cechy morfologiczne i biometryczne nasion zebranych z naturalnych siedlisk rolin byy
zrnicowane i zaleay od warunkw rodowiskowych panujcych w sezonach
wegetacyjnych zbioru nasion.









V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
54

Historia stosowania w lecznictwie dziewisiu bezodygowego
Carlina acaulis L

Maciej Strzemski
1
, Karolina Zapaa
1
, Maciej Bilek
2
, J oanna Typek
2


1
Zakad Chemii Analitycznej, Katedra Chemii, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

2
Wydziaowe Laboratorium Analiz Zdrowotnoci rodowiska i Materiaw Pochodzenia Rolniczego
Uniwersytetu Rzeszowskiego, Rzeszw, Polska

Dziewisi bezodygowy Carlina acaulis L., jest bylin z rodziny astrowatych
Asteraceae, wystpujc w Europie rodkowej i Azji. W Polsce ronie gwnie w grach
i pogrzu. Na niu spotykany jest rzadko. Wystpuje na suchych zboczach oraz na glebach
bogatych w zwizki wapnia. Dziewisi bezodygowy jest w Polsce rolin chronion [1].
Dziewisi jest rolin opisan ju przez Dioskoridesa pod nazw Chameleon niger.
Jednak zgodnie z legend najbardziej spektakularne zdarzenie w historii dotyczce
waciwoci leczniczych tej roliny miao miejsce w redniowieczu. Jak podaje Marcin
z Urzdowa [2] ziele ukaza Any Krlowi wielkiemu Carolusowi francuskiemu, ktry gdy
woysko byo zaraone morowe powietrze, tym samym zachowa wszystek lud od powietrza,
dajc ie iako Anio nauczy. Przekaz ten, przypisuje dziewisiowi niezwyk moc, ktra
znajduje swe odbicie w etymologii polskiej nazwy rodzajowej tej roliny. Dziewisi
uwaany by od dawna za rolin posiadajc dziewi tajemnych mocy, dziewi si, ktre
byy dziewiciokrotnie skuteczniejsze ni wszystkie inne roliny lecznicze.
Dziewisiy znalazy swoje miejsce w polskich zielnikach renesansowych,
w Dykcyonarzu Rolinnym ks. Kluka (1786-88), oraz w oficjalnych lekospisach, takich jak
Pharmacopoea Borussica (1799) i Pharmacopoeia Regni Poloniae (1817). Farmakopea
Krlestwa Polskiego bya pierwszym i ostatnim lekospisem polskim, w ktrym znalaza si
monografia korzenia dziewisiu. Rolina ta, niezwykle rzadka i objta ochron gatunkow,
nie dostarcza obecnie surowca leczniczego. Rwnie skad fitochemiczny surowca jest
przedmiotem nielicznych prac, ktre nie wyczerpuj tematu.
W niniejszej pracy autorzy przedstawiaj histori zastosowania leczniczego
dziewisiu, jako roliny o potencjalnym znaczeniu leczniczym, wymagajcej
przeprowadzenia szczegowych bada fitochemicznych.

1. Strzelecka H., Kowalski J.: Encyklopedia Zielarstwa i Zioolecznictwa. Warszawa 2000. S.123-124.
2. Marcin z Urzdowa: Herbarz Polski, to jest o przyrodzeniu zi i drzew rozmaitych i innych rzeczy do
lekarstw nalecych. Krakw 1595. S. 74.





V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
55

Selektywne potgowanie dziaania antyproliferacyjnego Selolu przez
Sulforafan wobec linii komrkowej nowotworu jelita grubego Caco-2

Lidia liwka
1,2
, Szymon Mielczarek
3
, Magorzata Milczarek
2,4
,
Katarzyna Lubelska
2
, Magorzata Danielak
1
, Piotr Suchocki
1
,
Katarzyna Wiktorska
2

1
Zakad Bioanalizy i Analizy Lekw Warszawski Uniwersytet Medyczny, Warszawa, Polska
2
Zakad Biologii Komrki, Narodowy Instytut Lekw, Warszawa, Polska
3
I Wydzia Lekarski, Warszawski Uniwersytet Medyczny, Warszawa, Polska
4
Katedra i Zakad Syntezy i Technologii Chemicznej rodkw Leczniczych,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Selol stanowi oryginalne polskie odkrycie chronione patentem. Jest to organiczny
zwizek selenu, w ktrym ten pierwiastek wystpuje na +4 stopniu utlenienia. Obecnie Selol
jest poddawany intensywnym badaniom, ktre wskazuj na moliwo jego zastosowania
w terapii chorb nowotworowych. Dotychczasowe wyniki bada in vitro oraz in vivo
wskazuj, e zwizek ten selektywnie niszczy komrki nowotworowe nie uszkadzajc
komrek prawidowych. Z kolei sulforafan (SFN) jest to szeroko badany pod ktem
m.in. waciwoci chemoprewencyjnych przedstawiciel Izotiocyjanianw (ITC). Zwizki
te naturalnie w znacznej iloci wystpuje w warzywach z rodziny Brassicaceae. W licznych
badaniach wykazano, e SFN nasila dziaanie cytotoksyczne zwizkw wykorzystywanych
w terapii przeciwnowotworowej. Z tego wzgldu celem naszych bada byo porwnanie
dziaania kombinacji Selolu z SFN wobec linii komrkowych jelita grubego: nowotworowych
Caco-2 oraz prawidowych CRL 1790.
Ocen wasnoci antyproliferacyjnych Selolu oraz sulforafanu przeprowadzilimy
z zastosowaniem testu cytotoksycznoci CVDE (fiolet krystaliczny, (4-[(4-
dimetylaminofenyl)-fenyl-metyl]-N,N-dimetylo-anilina). Test wykorzystuje zdolno
interkalacji barwnika z jdrowym DNA. Po wybarwieniu CVDE, komrki byy lizowane 1%
SDS, a powstay produkt analizowany spektrofotometrycznie. Ilo powstaego produktu jest
wprost proporcjonalna do odsetka ywych komrek w populacji.
Na podstawie wynikw cytotoksycznoci wyznaczono wartoci IC50 (stenie
zwizku, przy ktrym ywotno komrek wynosi 50%), ktre posuyy w badaniach
interakcji Selolu i sulforafanu z wykorzystaniem metody Chou-Talalaya.
Badania kombinacji wykazay, i SFN wzmacnia antyproliferacyjne dziaanie Selolu
wobec komrek nowotworowych, przy jednoczesnym braku niekorzystnego efektu
na komrki prawidowe jelita grubego.




V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
56

Wpyw oddziaywa synergistycznych i antagonistycznych na waciwoci
antyoksydacyjne monoterpenw

Karolina Wojtunik, ukasz Ciela, Monika Waksmundzka-Hajnos

Zakad Chemii Nieorganicznej, Katedra Chemii, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Monoterpeny s gwnymi skadnikami olejkw eterycznych rolin z rodziny
Lamiaceae. Dotychczas przeprowadzone badania nad aktywnoci antyoksydacyjn tych
zwizkw pozwoliy na okrelenie zalenoci struktura aktywno. Wyniki bada wskazay,
i najlepsze waciwoci przeciwutleniajce wykazuj monoterpeny posiadajce sprzone
wizania podwjne.
Szczegln uwag przywizuje si do olejkw eterycznych rolin z rodziny Lamiaceae
wykazujcych dobre waciwoci antyoksydacyjne cile zwizane z obecnoci
monoterpenw. Ponadto wstpne badania tych zwizkw w kierunku aktywnoci hamujcej
dziaanie acetylocholinoesterazy wykazay, e zwizki te mog by w przyszoci
wykorzystywane w walce z chorob Alzheimera. Waciwoci antyoksydacyjne
wspomnianych olejkw s take w duym stopniu przypisywane moliwym wzajemnym
oddziaywaniom ich skadnikw. Odpowiednie poczenia substancji mog znaczco zmieni
ich waciwoci biologiczne. W dotychczasowych doniesieniach naukowych nie zostay
jednak jednoznacznie wskazane substancje, ktrych wzajemne oddziaywania mog mie
znaczcy wpyw na aktywno antyoksydacyjn olejkw eterycznych. Tematem
przedstawionych bada jest okrelenie istnienia oddziaywa synergistycznych
i antagonistycznych tych substancji celem wskazania ich wpywu na waciwoci
antyoksydacyjne olejkw eterycznych.
Otrzymane wyniki bada umoliwiaj wskazanie kombinacji monoterpenw, ktrych
oddziaywania skutkuj zwikszeniem aktywnoci antyoksydacyjnej oraz przeciwnie, ktrych
pocze naley unika. Wstpne wyniki bada wskazuj na antagonizm w dziaaniu
antyoksydacyjnym eukaliptolu na m.in. mentol, p-cymen oraz linalool. W przypadku
pocze monoterpenw o silnych waciwociach antyoksydacyjnych (m.in. -felandren,
-terpinen) ze zwizkami o sabych waciwociach przeciwutleniajcych (m.in. mentol,
eukaliptol), widoczny jest silny wpyw zwizkw aktywnych, czego wynikiem jest
zachowanie bardzo dobrej aktywnoci otrzymanych mieszanin.







V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
57

Wykorzystanie technik chromatograficznych do bada nad aktywnoci
biologiczn pochodnych 1,2,4-triazoli

Agnieszka Wronka, I rena Malinowska

Zakad Chromatografii Planarnej, Uniwersytet Marii Curie-Skodowskiej, Lublin, Polska

Badaniu poddano grup pochodnych 1,2,4-triazoli, ktrym powica si w ostatnich
dziesicioleciach duo uwagi ze wzgldu na ich zrnicowan aktywno terapeutyczn.
Wiele z nich znalazo ju swoje zastosowanie jako skadniki lekw (Triazolam, Aprazolam,
Etizolam, Furacylin), dlatego wci pojawiaj si setki pochodnych tego typu zwizkw
o potencjalnej aktywnoci biologicznej. Dziki zastosowaniu technik chromatograficznych
mona ju we wstpnych etapach bada wyeliminowa znaczn cz substancji
nieaktywnych oraz zanieczyszczonych, a wyselekcjonowane zwizki podda dalszej analizie.
Dziki takiemu rozwizaniu badania staj si bardziej efektywne.
Lipofilowo wyznaczano metodami ekstrapolacyjnymi, korzystajc z rwnania
Soczewiskiego-Wachtmaistera. Opierajc si na powyszej zalenoci wyznaczono logk0,
czyli teoretyczn warto logk ekstrapolowan do zerowej zawartoci organicznego
modyfikatora w fazie ruchomej, przyjmowan za najbardziej dokadn miar lipofilowoci
uzyskan przy zastosowaniu chromatografii RP-TLC wykorzystywan w badaniach QSAR.
Otrzymane wartoci parametru logk0 skorelowano z parametrami lipofilowoci otrzymanymi
metodami obliczeniowymi.














V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
58

Zastosowanie chloromrwczanu 9-fluorenylometylu jako odczynnika
derywatyzujcego do oznaczania lekw technik wysokosprawnej
chromatografii cieczowej

Karol Wrblewski, Anna Petruczynik, Monika Waksmundzka-Hajnos

Zakad Chemii Nieorganicznej, Katedra Chemii,
Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Wiele lekw w swojej budowie chemicznej nie posiada chromoforw
umoliwiajcych ich chromatograficzne oznaczanie z uyciem powszechnie stosowanych
detektorw UV-Vis czy te detektorw fluorescencyjnych. W takiej sytuacji rozwizaniem
staje si zastosowanie odpowiedniego odczynnika derywatyzujcego. Jednym z nich jest
chloromrwczn 9-fluorenylometylu. Jest on wykorzystywany gwnie do oznacze lekw
posiadajcych pierwszo- lub drugorzdow grup aminow. Przykadem takiego
zastosowanie moe by min. oznaczanie topiramatu. Odczynnik ten take reaguje z grup
karboksylow w rodowisku zasadowym. Zostao to po raz pierwszy wykorzystane do
oznacze kwasu walproinowego w surowicy krwi. Proces derywatyzacji wymaga cile
okrelonych warunkw reakcji (temperatura, czas reakcji, pH, dobr rozpuszczalnika).
Zastosowanie chloromrwczanu 9- fluorenylometylu pozwala jednak uproci procedur
derywatyzacji w porwnaniu do wielu innych stosowanych odczynnikw.
W niniejszej pracy omwiony zostanie proces derywatyzacji z uyciem
chloromrwczanu 9-fluorenylometylu zarwno substancji z grup aminow jak
i karboksylow na podstawie dostpnych danych literaturowych. Zostan take pokazane
przykady wasnych bada nad zastosowaniem odczynnika do oznacze wybranych substancji
leczniczych np kwasu walproinowego oraz topiramatu w prbkach biologicznych.











V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
59

Aktywno kwasu oleanolowego wobec osteoblastw in vitro

Aleksandra urek
1
, Katarzyna Klimek
2
, Magdalena Mizerska-Dudka
1
,
Barbara Zdzisiska
1


1
Zakad Wirusologii i Immunologii, Uniwersytet Marii Curie-Skodowskiej, Lublin, Polska
2
Katedra i Zakad Biochemii i Biotechnologii, Uniwersytet Medyczny w Lublinie, Lublin, Polska

Wstp: Kwas oleanolowy (OA) jest naturalnym, pentacyklicznym triterpenoidem. OA
wykazuje szerokie spektrum aktywnoci biologicznej, m.in. dziaanie przeciwzapalne,
hepatoochronne czy przeciwnowotworowe. W badaniach in vivo zaobserwowano
osteoprotekcyjne dziaanie OA u szczurw z indukowan osteoporoz. Wykazano rwnie, e
stymuluje on rnicowanie szczurzych, mezenchymalnych komrek macierzystych do
osteoblastw [1].

Cel pracy: Okrelenie aktywnoci OA wobec mysich i ludzkich osteoblastw in vitro.

Materiay i metody: W badaniach wykorzystano 2 linie komrkowe osteoblastw: MC3T3-
E1 prawidowe, mysie pre-osteoblasty oraz Saos-2 ludzkie komrki osteosarkomy,
szeroko wykorzystywane w badaniach osteogenezy in vitro. Badano wpyw OA (0,1 100
M) na ywotno osteoblastw (test MTT oraz LDH), a take na proliferacj tych komrek
(MTT). Okrelono take wpyw niskich (osigalnych in vivo) ste OA (0,1 i 1 M) na
aktywno alkalicznej fosfatazy (ALP, marker rnicowania osteoblastw) po 6 dniach
inkubacji w podou mineralizacyjnym. Aktywno ALP okrelano kolorymetrycznie
w lizatach komrkowych z zastosowaniem buforu zawierajcego substrat dla tego enzymu
(pNPP). Poziom biaka w lizatach okrelano testem z zastosowaniem kwasu
bicynchoninowego (BCA protein assay).

Wyniki: OA nie wykazywa dziaania cytotoksycznego zarwno w stosunku do mysich, jak
i ludzkich osteoblastw. Jedynie w wysokich steniach (50 i 100 M wobec MC3T3-E1 oraz
100 M wobec Saos-2) znaczco obnia ywotno tych komrek. Nie zaobserwowano
znaczcego wpywu OA na proliferacj osteoblastw. Jedynie toksyczne stenia
triterpenoidu hamoway proliferacj komrek obu linii. Zaobserwowano nieznaczne
zwikszenie proliferacji osteoblastw ludzkich w obecnoci OA w steniach 10 i 25 M.
W badanych steniach OA zwiksza aktywno ALP w komrkach obu linii po 6 dniach
inkubacji.

Wnioski: Uzyskane wyniki sugeruj, e OA moe pobudza kociotworzenie poprzez
stymulacj rnicowania osteoblastw. Ze wzgldu na brak toksycznoci i waciwoci
osteogenne OA moe znale zastosowanie w leczeniu chorb z zaburzeniami
kociotworzenia.

[1] Bian Q., et al (2012): Menopause, 19: 225-233.

V Lubelskie Sympozjum Doktorantw Nauk Farmaceutycznych
Lublin, 12 czerwca 2014
60

Charakterystyka, skad i waciwoci lecznicze olejkw eterycznych

Aleksandra urek
1
, Maciej Frant
1
, Arkadiusz Czerwonka
1
, Monika Dwierzyska
2


1
Zakad Wirusologii i Immunologii, Uniwersytet Marii Curie-Skodowskiej, Lublin, Polska
2
Zakad Biologii Molekularnej, Uniwersytet Marii Curie-Skodowskiej, Lublin, Polska

Olejki eteryczne - naturalne, lotne, wysoko skoncentrowane mieszaniny zwizkw
chemicznych, charakteryzujce si silnym zapachem, s produktami metabolizmu wtrnego
rolin. Chroni one wytwarzajce je roliny przed infekcjami bakteryjnymi, grzybiczymi
i wirusowymi oraz dziki charakterystycznemu zapachowi dziaaj przycigajco na owady je
zapylajce, jednoczenie odstraszajc gatunki niepodane [1].
Olejki eteryczne mona otrzymywa z rolin na skal przemysow za pomoc
ekstrakcji rozpuszczalnikiem organicznym, mechanicznego wyciskania oraz destylacji
parowej [1,2]. W skad olejkw eterycznych wchodzi ogromna ilo substancji aktywnych.
Znaczc ich wikszo stanowi zwizki terpenowe (gwnie monoterpeny i seskwiterpeny)
takie jak geraniol, linalol, limonen, tymol, czy mentol, ale rwnie inne zwizki, np.:
aldehydy, alkohole, fenole i inne [3]. Terpeny, ktre s gwn grup zwizkw wchodzcych
w skad olejkw, wykazuj dziaanie przeciwnowotworowe, przeciwzapalne, owadobjcze,
pierwotniakobjcze, bakterio- i grzybobjcze, a take antywirusowe [2,3].
Dziki swojemu wszechstronnemu dziaaniu olejki eteryczne mog znale
zastosowanie w leczeniu wielu chorb. Wykazano dowiadczalnie, e olejki pozyskiwane
z rolin takich jak drzewo sandaowe, czy melisa lekarska wykazuj silne dziaanie toksyczne
w stosunku do wirusw z rodziny Herpesviridae, a olejek tymiankowy i godzikowy
efektywnie zwalczaj bakterie takie jak: Salmonella typhimurium, Listeria monocytogenes
i Staphylococcus aureus. Ze wzgldu na szerok gam substancji aktywnych oraz
wielokierunkowe dziaanie, olejki eteryczne mog by stosowane w przemyle
farmaceutycznym jako skadniki lekw. Naley jednak pamita, e w wysokich steniach
mog one by toksyczne dla zdrowych komrek, za ogromna liczba zwizkw wchodzcych
w ich skad nie pozwala do koca przewidzie efektw ich dziaania.

[1] Bakkali F. et al, 2008: Food and Chemical Toxicology, 46: 446-475
[2] Burt S. et al, 2004: International Journal of Food Microbiology, 94: 223-253
[3] Svoboda K. et al, 1999: International Journal of Aromatherapy, 9, 3: 124-131









































Projekt wspfinansowany ze rodkw Unii Europejskiej w ramach Europejskiego Funduszu Spoecznego

You might also like