Auspicia:

Las encimas
( Publicado en Revista Creces, Mayo 1989 )
Verdaderas llaves maestras del metabolismo celular, constituyen los catalizadores orgnicos ms
eficientes de la naturaleza.
En los organismos vivos, se producen una gran cantidad de reacciones qumicas que les permiten
obtener, a partir de los nutrientes recibidos desde el exterior, la energa y las materias primas
necesarias tanto para construir y mantener sus propios componentes, como para crecer,
reproducirse y realizar una serie de otras acciones, muchas veces especficas de cada clula.
Estas reacciones deben ocurrir de una forma muy ordenada y a una velocidad adecuada, de forma
tal que el organismo pueda disponer de los compuestos en el momento y cantidad que l los
requiera.Todo esto es posible por la existencia de un tipo especial de protenas cuya funcin es
catalizar de un modo especfico y eficaz un amplio espectro de reacciones qumicas. A las
protenas que tienen esta actividad cataltica se les denomina Enzimas.
Las enzimas son catalizadores excepcionales en varios aspectos. En primer lugar, son
extraordinariamente eficientes. Las reacciones enzimticas proceden a velocidades muchsimo
mayores (10/8 - 10/ 11 veces ms rpido) que las correspondientes reacciones no catalizadas por
enzimas.
Reacciones que en el laboratorio slo ocurren en condiciones extremas de temperatura o de
concentracin de cido o lcali, en presencia de una enzima adecuada se producen con gran
rapidez, bajo condiciones de neutralidad y a temperatura ambiente.
Especificidad
Otra caracterstica especial de estos catalizadores, es su especificidad. Las enzimas son
especficas tanto respecto a la naturaleza de las reacciones que catalizan, como en lo que
respecta a la estructura del sustrato utilizado y a los productos generados a partir de l.
A diferencia de los catalizadores qumicos, las enzimas pueden ser reguladas. As, la velocidad de
su sntesis se encuentra bajo control gentico, su actividad est influida por sus sustratos, por los
productos de la reaccin que ellas catalizan o por otros metabolitos.
En la mayor parte de las reacciones enzimticas, los sustratos son de un tamao molecular
mucho menor que la enzima. (Fig. 1). As, slo un pequeo nmero de los aminocidos, que
forman la enzima, participan ya sea en unin del sustrato -formando el complejo enzima-
sustrato-, como en la transformacin de ste en producto y su posterior liberacin (Ec. 1). Tanto
los aminocidos que a travs de sus cadenas laterales estn en contacto directo con el sustrato,
como aquellos que sin estarlo participan activamente en el proceso cataltico, conforman el sitio
activo de la enzima. El resto de la protena cumple la funcin de mantener la estructura
tridimensional del sitio activo necesaria para la catlisis. No se sabe si la conformacin
tridimensional del sitio activo, en ausencia del sustrato, es la catalticamente activa. Al respecto
se han propuesto dos teoras: Una de ellas explica la especificidad de las enzimas, en trminos
tales que el sitio activo se dispondr de una manera relativamente rgida donde podra fijarse el
sustrato de la forma como encaja una llave en una cerradura. De esta manera, cualquier
molcula estructuralmente diferente al sustrato, no podra unirse a dicho sitio. La segunda teora
que explica la unin del sustrato a la enzima es la llamada de encaje inducido. Esta teora postula
que la unin del sustrato al sitio activo de la enzima altera considerablemente la conformacin de
sta. De esta manera, los grupos que participan en la catlisis se orientan a la posicin requerida
por la accin enzimtica. Esta teora se apoya en observaciones que indican la existencia de
cambios en la conformacin de la enzima luego de la unin del sustrato.
El cambio de la velocidad de una reaccin enzimtica respecto a la variacin de la concentracin
CRECES Educacin - www.creces.cl http://www.creces.cl/new/printart.asp?tc=3&nc=5&tit=&art=177
1 de 3 23/04/2012 19:50
de su sustrato, queda descrita en un gran nmero de reacciones, por la ecuacin de Michaelis-
Menten y la forma que adopta la curva de velocidad en funcin de la concentracin de sustrato es
una hiprbola rectangular definida por dos parmetros cinticos: Vmax y Km. Vmax corresponde
a la velocidad mxima de la reaccin que se obtiene cuando la concentracin de sustrato tiende a
infinito. Km por su parte, es la constante de Michaelis, que operacionalmente se define como la
concentracin de sustrato necesaria para obtener la mitad de la velocidad mxima (Fig. 2). Para
poder determinar con exactitud Vmax y Km, la representacin hiperblica no es de mucha
utilidad, puesto que requiere la determinacin de una asntota cuando la concentracin de
sustrato tiende a infinito. Sin embargo existen mtodos que permiten dar a la ecuacin de
velocidad formas lineales y que transforman por lo tanto, la hiprbola en lnea recta (Fig. 3).
Inhibidores
Una sustancia que disminuye la velocidad de una reaccin enzimtica es un inhibidor. La
inhibicin de reacciones claves de una va metablica ya sea por producto de la misma va o por
producto de alguna otra va metablica relacionada, constituyen mecanismos de regulacin muy
sensibles y que permiten mantener relativamente constante el ambiente celular o bien para
responder a modificaciones en el ambiente extracelular. La inhibicin de reacciones especficas,
por sustancias naturales o sintticas, pueden ser de gran utilidad para una quimioterapia efectiva.
Inhibidores estructuralmente semejantes al sustrato, son capaces de unirse al sitio activo de la
enzima, formando el complejo enzima-inhibidor, incapaz de transformarse en producto, en lugar
del complejo enzima-sustrato (Bc. 2).
Este tipo de inhibidores se denominan competitivos, ya que se produce una competencia entre el
sustrato el inhibidor por la unin al sitio activo. Cinticamente, este tipo de inhibicin se
caracteriza por que aumenta la Km y se mantiene constante Vmax..
Un inhibidor no competitivo se une a un sitio diferente al sitio activo, por lo que es posible la
formacin de los complejos inhibidor-enzima e inhibidor-enzima-sustrato (Ec. 3). Al revs de lo
que ocurre en la inhibicin competitiva, la presencia del inhibidor puede afectar la afinidad del
sustrato por el sitio activo de la enzima. La velocidad de formacin de producto a partir del
complejo inhibidor-enzima-sustrato es menor que la velocidad en ausencia del inhibidor. Es por
esto que el anlisis cintico revela que en una inhibicin del tipo no competitiva varan tanto la
Vmax como la Km.
Casi todas reacciones enzimticas son muy sensibles a variaciones de pH. Se supone que las
cadenas laterales de los aminocidos que forman parte del sitio activo, son catalticamente
activos cuando se encuentran en un cierto estado de protonacin. El pH al cual se obtiene dicha
protonacin y por lo tanto la mxima actividad, se denomina pH ptimo. Si el pH disminuye
(aumentando la protonacin de los grupos de las cadenas laterales) o aumenta (disminuyendo la
protonacin de los grupos) la velocidad disminuye, puesto que, en ambos casos, disminuye la
forma enzimtica catalticamente activa (Ec. 4).
La temperatura es otro factor que tiene influencia en la velocidad de una reaccin enzimtica. La
temperatura tiene dos efectos distintos: uno relacionado con la estabilidad enzimtica debido a la
interconversin entre una forma activa de la enzima y otra denaturada (que ha perdido su
estructura tridimensional), con una actividad disminuida o totalmente ausente: el otro, est
relacionado con la actividad enzimtica, es decir con el efecto cintico de la temperatura sobre la
velocidad de la reaccin, que es similar al que tiene sobre cualquier reaccin qumica. Por esto
resulta evidente que cualquier tiempo de exposicin a una temperatura determinada se
manifiesta, al principio, por un aumento de la velocidad de la reaccin que pasa luego por un
mximo, para declinar posteriormente.
Efectos cooperativos
Existen enzimas que presentan una conducta cintica diferente a la ya mencionada. Es as que la
representacin de la velocidad de la reaccin en funcin de la concentracin de sustrato resulta
en una curva sigmoidea en lugar de una hiprbola rectangular. Este tipo de enzimas -llamada
alostricas- se caracteriza por poseer estructura cuaternaria, es decir estar compuesta por ms
CRECES Educacin - www.creces.cl http://www.creces.cl/new/printart.asp?tc=3&nc=5&tit=&art=177
2 de 3 23/04/2012 19:50
de una cadena polipepttida (subunidad), cada una de las cuales posee un sitio activo. La unin de
una molcula de sustrato al sitio activo de una de las subunidades de la enzima provoca un
cambio conformacional en las subunidades vecinas, lo que hace que la unin de las siguientes
molculas de sustrato ocurra ms fcilmente (Fig. 4). Este fenmeno se conoce como
cooperatividad en la unin de sustrato y explica la forma sigmoidea de la curva de velocidad.
Adems, del sitio activo, estas enzimas presentan otro sitio -llamado sitio regulatorio- al que
pueden unirse molculas pequeas que frecuentemente actan como moduladores de la velocidad
de la reaccin de modo que la unin de estos ligados al sitio regulatorio pueden tener efectos de
activacin o inhibicin.
Induccin enzimtica
Adems de la capacidad de regular la velocidad de una reaccin enzimtica, la clula puede
responder a variaciones del medio externo modificando la velocidad de sntesis y/o degradacin
de una o varias enzimas metablicamente relacionadas. De esta manera es posible regular la
cantidad de molculas de enzima necesarias para hacer frente a una nueva situacin metablica.
Existen mltiples evidencias de aumento de los niveles de enzimas por induccin de su sntesis
debido a cambios de dieta, cambios hormonales, etc.
La regulacin de la sntesis de enzima se ha estudiado profusamente en sistemas bacterianos,
desde donde han surgido algunos modelos que la explican.
El cromosoma bacteriano est organizado en operones, que consisten en agregados de genes
cuya expresin est regulada conjuntamente y que conducen a la sntesis de protenas
relacionadas funcionalmente. La expresin de estos genes est controlada por una regin
localizada al extremo del opern que se denomina operador. El gen regulador por su parte -que
no necesariamente tiene una ubicacin contigua al opern- produce una protena represora que
se une a una secuencia especfica del operador. De esta manera, se impide la transcripcin del
mensaje gentico, y por lo tanto, tambin la sntesis de la protena codificada en dicho mensaje.
As, en presencia de la protena represora el sistema est bloqueado y el nivel de la enzima cuya
sntesis queremos controlar es bajo.
La inclusin del sustrato de la enzima (inductor) en el sistema, provoca la inactivacin de la
protena represora la que -con el sustrato unido- abandona el sitio operador, permitiendo de este
modo que la RNA polimerasa, se una al sitio operador y de esta manera inicie la transcripcin del
gen que codifica para la enzima inducible.
Juan Pablo Rodrguez V.
Unidad de Biologa Celular
INTA. Universidad de Chile.
Imprimir Subir

Fuente: CRECES EDUCACION - www.creces.cl
CRECES Educacin - www.creces.cl http://www.creces.cl/new/printart.asp?tc=3&nc=5&tit=&art=177
3 de 3 23/04/2012 19:50