CARACTERSTICAS DE LAS SIGUIENTES PCR:

PCR Nested o Anidado:

Se utiliza para acotar un resultado y comprende de 2 reacciones de PCR, la primera
amplificacin da 2 fragmentos resultantes; la segunda reaccin trabaja sobre los
fragmentos obtenidos en la 1ra.
Este modo es mas especifico, ya que cuando la Taq trabaja con grandes cantidades de
DNA, su fidelidad disminuye, en cambio con este mtodo, se trabaja con fragmentos
cortos desde la segunda reaccin, lo que hace ms efectivo el proceso.
PCR Multiplex:
Se lleva a cabo la reaccin de PCR tradicional, pero con ms de 2 primers, para
amplificar varias regiones al mismo tiempo. Se puede utilizar para identificar especies.
PCR Transcripcin Reversa:
En este caso, la nica diferencia es que los primers, en vez de converger, divergen
desde un punto. Es decir que en caso de ser DNA lineal de doble hebra, los productos
sern 2 hebras que no necesariamente se complementaran. En cambio si se lleva a
cabo en un plsmido, si se podra llegar a un producto DNA de doble hebra.
PCR Tiempo real o cuantitativa:
Reaccin de PCR cuya principal caracterstica es que permite cuantificar la cantidad de
ADN o ARN presentes en la muestra original, o para identificar con una muy alta
probabilidad, muestras de ADN especficas a partir de su temperatura de fusin
PCR RAPD (Random Amplification of Polimorphic DNA)
Aqu se utilizan varios primers, y se espera que amplifiquen varios segmentos del DNA
en estudio, mediante este mtodo, se puede obtener un patrn semi-nico, que podra
ser caracterstico para cada especie. Los primers utilizados tienen un largo de 6 a 12
nucletidos.
PCR RFLP.
Este mtodo se caracteriza por realizar copias de la cadena de ADN para luego cortar
fragmentos especficos de la cadena ya amplificada.
PCR AFLP.
Este mtodo de amplificacin, hace lo contrario que...
Tema: Tipos de PCR Vie Abr 10, 2009 8:18 pm

PCR Anidado - Nested PCR

Se utiliza para acotar un resultado. Comprende de 2 reacciones de PCR.
La primera amplificacion da 2 fragmentos resultantes.
La segunda reaccion trabaja sobre los fragmentos obtenidos en la 1ra reaccion.
Este modo es mas especifico, ya que cuando la Taq trabaja con grandes cantidades de DNA, su
fidelidad disminuye.
En cambio con este metodo, se trabaja con fragmentos cortos desde la segunda reaccin, lo que
hace mas efectivo el proceso.



PCR Multiple

Se lleva a cabo la reaccion de PCR tradicional, pero con mas de 2 primers, para amplificar varias
regiones al mismo tiempo.
Se puede utilizar para identificar especies.

PCR Invertido

En este caso, la unica diferencia es que los primers, en vez de converger, divergen desde un
punto. Es decir que en caso de ser DNA lineal de doble hebra, los productos seran 2 hebras que
no necesariamente se complementaran.
En cambio si se lleva a cabo en un plasmido, si se podria llegar a un producto DNA de doble
hebra.

Random Amplification of Polimorphic DNA (RAPD)

Aqui se utilizan varios primers, y se espera que amplifiquen varios segmentos del DNA en
estudio.
Mediante este metodo, se puede obtener un patron semi-unico, que podria ser caracteristico
para cada especie.
Los primers aca utilizados, tiene un largo de 6-12 nucleotidos.

Real Time PCR (r t PCR)

Es una version mejorada del tradicional PCR.

TaqMan: En este real time PCR,se aade una sonda que puede alinear con el termino de la
amplificacion de una hebra. Esta sonda contiene un fluoroforo complejado a un extremo del
fragmento que alinea, y en el otro extremo hay un compuesto quencher, que por ende absorbe
la luz emitida por el fluoroforo.
Cuando le DNA polimerasa llega hasta la ubicacion de la sonda unida al fragmento de DNA, la
actividad exonucleasa de la enzima, rompe el DNA sonda, y el quencher se aleja del fluoroforo,
esto se refleja como un aumento de luminiscencia en la muestra. La cual se puede cuantificar
para estimar la cantidad de DNA amplificado.