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De acuerdo a la temtica de la Unidad 1, desarrolle las siguientes actividades:

1. Algunos pptidos presentes en alimentos de origen animal, poseen


actividad antihipertensivos. Estos alimentos de origen animal estn
relacionados con los pescados tipo Azules (atn, sardina y salmn). Entre
los pptidos con este tipo de actividad farmacutica est el conformado por:


Leu-Lys-His-Asn-Met-Trp-Tyr


Dentro de su caracterizacin bioqumica, los estudiantes de este curso deben
determinar:

1. a) Pruebas cualitativas para su caracterizacin en el laboratorio.



ABREVIATURA PRUEBAS CUALITATIVAS
PARTE DEL
AMINOACIDO QUE
REACCIONA
Leucina Leu
Ninhidrina
La ninhidrina (hidrato de
triceohidrindeno), un agente
oxidante poderoso, reacciona
con todos los aminocidos a un
pH entre 4- 8 para dar un
compuesto de color prpura.
Esta reaccin se efecta con
aminas primarias y amoniaco
pero sin desprendimiento de
CO 2. La reaccin es muy
sensible y es ideal para la
deteccin de aminocidos en
cromatografas y su
determinacin cuantitativa en
fracciones de columnas
Reacciona el grupo
amino alfa y el grupo
carboxilo alfa libres.
Lisina Lys
Prueba de Pauly
El cido sulfanilico diazotizado
se une con las aminas de la
arginina y la lisina, fenoles
como el de la tirosina e
imidazoles como la Histidina
para dar compuestos
fuertemente coloreados.
Reacciona la cadena
R de la lisina.
Especficamente el
grupo amino
cargado
positivamente y sus
grupos carboxilo y
amino alfa libres
Histidina His
Prueba de Pauly
El cido sulfanilico diazotizado
se une con las aminas de la
arginina y la lisina, fenoles
como el de la tirosina e
imidazoles como la Histidina
para dar compuestos
fuertemente coloreados.
Reacciona la cadena
R. Especficamente
al grupo imidazol y
sus grupos carboxilo
y amino alfa libres
Aspagarina Asn
Ninhidrina
La ninhidrina (hidrato de
triceohidrindeno), un agente
oxidante poderoso, reacciona
con todos los aminocidos a un
pH entre 4- 8 para dar un
compuesto de color prpura.
Esta reaccin se efecta con
aminas primarias y amoniaco
pero sin desprendimiento de
CO 2. La reaccin es muy
sensible y es ideal para la
deteccin de aminocidos en
cromatografas y su
determinacin cuantitativa en
fracciones de columnas
Reacciona el grupo
amino alfa y el grupo
carboxilo alfa libres
Metionina Met
Prueba de nitroprusiato
Los grupos tioles reaccionan
con nitroprusiato de sodio (Na
2Fe (CN) 5NO) en presencia
de un exceso de amoniaco
para dar un color rojo.
Reacciona el grupo
amino alfa y el grupo
carboxilo alfa libres

Triptfano

Trp
Reaccin del cido glioxlico
para triptfano y Reaccin
Xantoproteica
Los aminocidos que contienen
un ncleo aromtico (triptfano
y Fenilalanina), forman
nitroderivados de color amarillo
cuando se calientan con cido
ntrico concentrado. Las sales
de estos derivados son de color
naranja.
Reacciona el grupo
amino alfa y el grupo
carboxilo alfa libres
Tirosina Tyr
Millon
Los compuestos que contienen
el radical hidroxibenceno (la
tirosina) reaccionan con el
reactivo de milln formado
Reacciona la cadena
R de la tirosina.
Especficamente el
radical fenol o
hidroxibenceno
compuestos rojos. Los nicos
aminocidos fenlicos son la
tirosina y sus derivados y
solamente ellos dan una
reaccin positiva.




2. El siguiente ejercicio requiere de la observacin del objeto virtual de
aprendizaje que se encuentra en la pgina principal del curso y en la
introduccin al foro del trabajo llamado: Objeto de aprendizaje: Cintica
enzimtica y de las temticas del mdulo leccin 12.

En un experimento de laboratorio Usted completo un estudio de cintica
enzimtica, obteniendo los siguientes datos:

[s] (A molar/L) V0 (A molar/min)
50 10
100 19
150 31
200 38
300 55
400 62
800 68
1000 70

Utilizando la metodologa de Lineweaver- Burk determinar:

El valor de Km y su debida interpretacin.
El valor de V mx. y V max/2 y su debida interpretacin

1/[s] (A molar/L) 1/V0 (A molar/min)
X Y
0,02 0,1
0,01 0,052
0.006 0,032
0,005 0,026
0,0033 0,018
0,0025 0,016
0,00125 0,0147
o 0,001 0,0142




Y=mx+b

Y= 4,6391x + 0,0055

V.max=1/b 1/0.0055 = 181.82

Interpretacin: la enzima transforma 181,82 moles de sustrato en producto por
minuto, cuando toda la enzima se encuentra unida al sustrato.

Vm 181,82 90,91 (A molar/min)
2 2
Interpretacin: la enzima transforma 90,91 moles de sustrato en producto por
minuto, con el 50% de centros activos de la enzima unidos al sustrato.

x=0.0055/4.6411=0.001185064

Km=-1/x= -843.836282

Pendiente (m)=km/v. max 843.836282/ 181.818182 =4.6411

Km = Vm * 4,6391

Km = 181,82 * 4,6391 = 843,48 (A molar/L)

Interpretacin: se necesitan 843,48 moles de sustrato para alcanzar la mitad de
la velocidad mxima de la reaccin.